CN112972470A

CN112972470A - 一种用于防治心肾综合征的药物组合物及其应用

Info

Publication number: CN112972470A
Application number: CN202110212370.1A
Authority: CN
Inventors: 时海燕; 徐男
Original assignee: Shandong Qianfoshan Hospital
Current assignee: Shandong Qianfoshan Hospital
Priority date: 2021-02-25
Filing date: 2021-02-25
Publication date: 2021-06-18

Abstract

本发明提供了一种用于防治心肾综合征的药物组合物，由苯甲酰新乌头原碱2.2～8.8份；苯甲酰次乌头原碱2.5～10.0份；茯苓酸A5.2～20.8份；白术内酯III4.4～17.6份、芍药内酯苷3.8～15.2份组成。本发明制备的药物组合物防治心肾综合征效价可达到93.02%。本发明的药品组合物对苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱的含量进行了限制，避免苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱对人体存在的引起毒副作用，可放心使用，且疗效增强；最后为进一步开发出新型活性成分组合物制剂奠定基础。

Description

一种用于防治心肾综合征的药物组合物及其应用

技术领域

本发明属于中药研究开发领域，具体涉及一种用于防治心肾综合征的药物组合物及其应用。

背景技术

随着社会老年化趋势和糖尿病发病率日益增加，心、肾功能障碍并存的现象日益普遍，心脏交集性疾病成为跨学科的重点和难点问题。大量研究已证实，心脏和肾脏同为维持人体循环稳态的重要器官，心肾功能可以相互影响，相比单一疾病，其反映出的心脏和肾脏功能的损害，不是叠加，而是超过了机体单一器官衰竭及其所导致的严重事件的发病率和病死率之和。现代研究发现，心衰与炎症小体之间存在着密切关系，且Caspase-1在介导心衰患者的心脏损害中起着至关重要的作用。在心脏缺血实验中，抑制NLRP3会明显降低心脏中Caspase-1的激活，从而限制左心室增大，改善心脏收缩功能。肾病综合征可由多种病因引起，以肾小球基膜通透性增加，表现为大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿、高脂血症的一组临床症候群。在2型糖尿病肾病综合征患者中，肾小管上皮细胞的NLRP3表达明显增强，使得IL-1β和IL-18的水平也明显升高。血糖浓度过高时，能够激活NLRP3炎症小体，并可通过ATP-P2X4信号介导糖尿病肾病患者的炎症反应，提示靶向炎症小体可以作为心肾综合征的抗炎治疗靶点。

“异病同治”是中医学独具的原创思维，体现了中医学辨证论治的精髓。真武汤是温阳利水的代表方剂，由制附子、茯苓、芍药、白术、生姜组成，在《伤寒论》中有两条方证，太阳篇第82条云：“太阳病发汗，汗出不解，其人仍发热，心下悸，头眩，身瞤动，振振欲擗地者，真武汤主之。”少阴篇第316条云：“少阴病，二三日不已，至四五日，腹痛，小便不利，四肢沉重疼痛，自下利者，此为有水气。其人或咳、或小便利，或下利，或呕者，真武汤主之”。第82条真武汤证是太阳病之变证，是由太阳病转化到少阴病，由肾阳虚水停导致肝风内动和水气凌心，出现“水肝病”、“水心病”等；第316条真武汤证为少阴病，少阴阳虚，水气泛滥，浸渍脾肾，从而导致四肢肿胀甚或疼痛，二便异常。然无论本证是由太阳病转化而来，还是开始即为少阴病，其病机均为阳虚水气内停，属于“异病同治”范畴。现代被广泛应用于治疗内科循环系统（慢性心衰）和泌尿系统疾病（糖尿病肾病）。

网络药理学是近年来在单靶点药物研究的基础上发展起来的一门新兴学科，不仅集成了系统生物学、网络生物学与化学生物学等学科，而且还整合了计算预测与实验验证等研究方法，已逐渐成为现代医药研究中的前沿交叉学科，其所强调的整体性、系统性和中医药理论不谋而合，更加适合中医药的学术特点和实际，能够很好的解释中医药的深刻内涵，包括分析中药作用机制、寻找药效物质、阐释配伍机制等。本专利运用网络药理学数据挖掘真武汤治疗慢性心衰、糖尿病肾病的共同药效物质为苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷。目前，利用苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷进行配伍，用于防治心肾交集性疾病靶向炎症方面的药物，尚未见报道。

发明内容

本发明提供了一种用于防治心肾综合征的药物组合物，该组合物由苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷组成。药效学实验证明，5种成分组合在一起具有协同防治心肾综合征的作用，且增效显著。

一种用于防治心肾综合征的药物组合物，由下述重量配比的组分制成：苯甲酰新乌头原碱2.2～8.8份；苯甲酰次乌头原碱2.5～10.0份；茯苓酸A5.2～20.8份；白术内酯III4.4～17.6份、芍药内酯苷3.8～15.2份。

优选地，所述用于防治心肾综合征的药物组合物，由下述重量配比的组分制成：苯甲酰新乌头原碱4.4份；苯甲酰次乌头原碱2.5份；茯苓酸A10.4份；白术内酯III17.6份、芍药内酯苷15.2份。

一种用于防治心肾综合征的药物组合物的制剂。

上述药物组合物在制备防治心肾心肾综合征药物中的应用。

所述的制剂，经口服或经静脉、肌肉、皮下或以其他的注射方式注射，或经口腔、直肠、阴道、皮肤吸收或者经鼻腔吸入，或以含有活性成分的药物制剂形式，以药学上可接受的制剂形式给予施用。

药效学实验及结果

1.网络药理学分析真武汤“异病同治”治疗心肾交集性疾病的药效物质

利用开源软件Open Babel 2.4.1提取真武汤化学成分分子指纹，通过二维结构（.mol）与美国食品药品监督管理局（FDA）上市药物进行化学指纹特征比对，以Tanimoto系数定义的相似度计量方法进行相似性打分，取打分系数>0.8所得的药物靶标为此次研究所需要的潜在靶标，建立药物候选靶标信息数据库。通过对上述药物候选靶标所参与的功能和通路进行富集分析，挖掘真武汤防治慢性心衰、糖尿病肾病的共同靶标和通路分析。

真武汤药物靶标与慢性心衰、糖尿病肾病疾病共同靶标5个，分别为谷氨酸脱羧酶2（GAD2）、葡萄糖激酶（GCK）、谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶（EPRS）、细胞色素C氧化酶5A抗体（COX5A）、AMPA离子能谷氨酸受体2（GRIA2），见图1、2。共同的通路富集分析结果主要涉及谷氨酸能突触（Glutamatergic synapse）、神经系统（Nervous system）、精氨酸和脯氨酸代谢（Arginine and proline metabolism）、苯丙胺成瘾（Amphetamine addiction）以及血管内皮生长因子信号通路（VEGF signaling pathway）、酪氨酸激酶受体信号通路（ErbBsignaling pathway）、促性腺激素释放激素信号通路（GnRH signaling pathway）等。与上述靶标和信号通路贡献较大的指标成分包括苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷。结果见图3、4。

2活性成分的优化配比

2.1细胞培养

培养小鼠巨噬细胞系（J774A.1细胞）为贴壁型细胞，培养于完全培养基（含10% 胎牛血清、100 kU·L^-1青霉素、100 mg·L^-1链霉素的DMEM）中，置37℃、5%CO₂培养箱中培养，取对数生长期细胞进行实验。

2.2分组及处理

根据L16（4⁵）正交设计，按照表1设定的4个剂量水平，得到5种活性成分16个不同的配伍实验组。另外设正常组、模型组。将小鼠J774A.1细胞接种于24孔板，每组3个复孔。培养过夜后，用0.5mg·L^-1LPS刺激4h，加入加入不同药物成分培养1h，补加4 mmol·L^-1的ATP反应1h。最后收集细胞培养上清液，按照试剂盒说明书定量检测上清中IL-1β、TNF-α含量。综合有效率=（药物处理组A值－空白组A值）/（正常组A值－空白组A值）×100%。试验安排及结果见表2，方差分析见表3。方差分析表明，苯甲酰新乌头原碱对药效的影响有显著性差异（P<0.01或P<0.05）。由直观分析可知，各因素对综合药效的影响顺序为A>B>E>D>C，各因素水平对结果影响的强弱顺序为: A3＞A2＞A4＞A1，B2＞B3＞B4＞B1，C3＞C2＞C1＞C4，D4＞D2＞D3＞D1，E4＞E2＞E3＞E1。综合分析，确定最佳组分配伍为A3B2C3D4E4，即苯甲酰新乌头原碱为4.4uM，苯甲酰次乌头原碱为2.5uM，茯苓酸A为10.4uM，白术内酯III 17.6uM，芍药内酯苷15.2uM。

表1 因素水平设计表

表2 正交试验分析

表3 方差分析

注：F _0.05（3，3）=9.28。

2.3验证实验

筛选出的最佳配比组成的药物组合物的防治心肾交集性疾病效价（E）显著增强；药物组合物药效能达到甚至超过真武汤全方，且用药剂量明显减小，说明苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷是真武汤调节心肾交集性疾病的药效物质；药物组合物药效显著大于各单体成分组，苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷存在配伍增效作用。结果见表4。

表4 验证实验结果（

，n=3）

注：正常组与模型组比较，¹⁾ P<0.01；治疗组与模型组比较，²⁾ P<0.01，³⁾ P<0.05。

附图说明

图1为真武汤治疗慢性心衰形成疾病失衡网络的候选靶标网络；

图2. 真武汤治疗糖尿病肾病疾病失衡网络的候选靶标网络；

图3. 真武汤治疗慢性心衰“中药材-化学成分-核心靶标-关键通路”多维网络关系图；

图4. 真武汤治疗糖尿病肾病“中药材-化学成分-核心靶标-关键通路”多维网络关系图。

有益效果：

1. 治疗心肾综合征效果好

本发明运用网络药理学数据挖掘真武汤“异病同治”治疗心肾综合征的有效成分，通过正交设计优化有效成分配伍组方的研究，优化有效成分的最佳配伍剂量，最大程度的发挥其治疗心肾综合征的药效。采用该药物组合物治疗高血压炎症反应效价可达到93.02%，远高于真武汤的73.41%。

2.控制效-毒成分含量，副作用小

本发明的药物组合物与中药复方真武汤相比，减少服药剂量，同时可以有效控制苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱的用量，避免真武汤原方对人体存在的潜在毒性危害，可放心使用，且疗效增强。

3. 研究意义大

药物组合物药效显著大于各单体成分组，苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、茯苓酸A、白术内酯III、芍药内酯苷存在配伍增效作用；同时本发明为进一步开发出药物成分清晰，作用靶点明确，作用环节及机制清楚，药物间量效关系优化的新型活性成分组合物制剂奠定基础。

具体实施方式

通过实施例进一步阐述本发明所述的药物组合物及其制剂制备方法，但本发明并不限于下列实施例包含的内容。

实施例1

防治心肾综合征胶囊的制备：

取苯甲酰新乌头原碱30g、苯甲酰次乌头原碱100g、茯苓酸A200g、白术内酯III100g、芍药内酯苷40g，加适量淀粉，混匀，装胶囊，制成1000粒，即得。

实施例2

防治心肾综合征滴丸的制备：

取苯甲酰新乌头原碱60g、苯甲酰次乌头原碱50g、茯苓酸A185g、白术内酯III140g、芍药内酯苷110g、聚乙二醇500g，加热使熔融，充分混匀，移至滴丸机贮液器中，保温90℃，滴入冷却的二甲硅油中，制成1000g滴丸，即得。

实施例3

防治心肾综合征注射液的制备：

取苯甲酰新乌头原碱66g、苯甲酰次乌头原碱30g、茯苓酸A170g、白术内酯III140g、芍药内酯苷80g，加1800ml注射用水，搅拌使溶解，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.5，加10g针用活性炭，补加注射用水至2000ml，混匀，煮沸30分钟，冷藏，滤过，加注射用水至5000ml，分别用0.45μm和0.22μm 微孔滤膜滤过，分装，每支5ml，充氮，封口，流通蒸汽灭菌30分钟，即得1000支注射用浓溶液。

实施例4

防治心肾综合征糖浆的制备：

取苯甲酰新乌头原碱44g、苯甲酰次乌头原碱35g、茯苓酸A150g、白术内酯III100g、芍药内酯苷80g，加适量水使溶解，搅拌，静置，滤过，加蔗糖250g、苯甲酸钠5g，加水1000ml，搅匀，灌装，灭菌，即得。

Claims

1. 一种用于防治心肾综合征的药物组合物，其特征在于，由下述重量配比的组分制成：苯甲酰新乌头原碱2.2～8.8份；苯甲酰次乌头原碱2.5～10.0份；茯苓酸A5.2～20.8份；白术内酯III 4.4～17.6份、芍药内酯苷3.8～15.2份。

2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，由下述重量配比的组分制成：苯甲酰新乌头原碱4.4份；苯甲酰次乌头原碱2.5份；茯苓酸A10.4份；白术内酯III 17.6份、芍药内酯苷15.2份。

3.一种包含权利要求1或2所述的药物组合物的制剂。

4.根据权利要求1或2所述的药物组合物在制备防治心肾心肾综合征药物中的应用。