CN112972391B - 一种胆红素-jph203纳米颗粒及其制备和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种胆红素‑JPH203纳米颗粒及其制备和应用。本发明先将胆红素和JPH203共溶解于有机溶剂，其次将配置得到的胆红素溶液滴入缓冲水溶液中，搅拌混合后，除去有机溶剂后即得到胆红素纳米颗粒。本发明是由两种小分子自组装形成，成分比例确定，稳定性好，且两种药物可以协同发挥免疫调控作用，具有很好的临床应用前景，提出了一种开发无载体纳米递送药物体系的新方式和途径，能满足临床对自身免疫性疾病治疗高端制剂的迫切需求。

Description

一种胆红素-JPH203纳米颗粒及其制备和应用
技术领域
本发明属于纳米药物技术领域的一种制药纳米颗粒及其制备和应用，具体涉及一种胆红素-JPH203纳米颗粒及其制备和应用。
背景技术
自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应，自身抗体或自身反应性T细胞过度产生，应答正常组织而导致的一类慢性疾病。治疗此类疾病临床常用药物主要有非甾体抗炎药、甾体抗炎药和改善病情抗风湿三大类药物。但这些药物虽然可以有效缓减患者的临床症状，但是治标不治本，只能临时控制疾病的活动及进展，同时伴有严重的药物不良反应。常见的自身免疫性疾病有类风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎等。
胆红素是一种来源于哺乳动物血红素分解代谢的产物。现代研究发现稍高于正常血清浓度的胆红素水平有益于健康。例如，胆红素可降低肥胖患者肝脏中的脂肪水平，并通过抑制脂质代谢中的活性氧而起到细胞保护的作用。此外，有研究表明胆红素具有抗炎、抗氧化等多种生物活性。近年来，研究发现，胆红素具有调控免疫反应的作用，其具体作用机制尚不明确，不过有专家认为有可能与胆红素自身具有类信号分子的性质有关。目前，有多项研究结果表明胆红素可以应用器官移植、细胞移植，改善免疫排斥反应，提高移植成功率。
JPH203是选择性L型氨基酸转运体1(LAT1)抑制剂，常用于抗肿瘤药物研究。有研究表明JPH203在人结直肠腺癌细胞(HT-29)、人肺鳞状细胞癌细胞(YD-38)对亮氨酸吸收的吸收和细胞生长具有显著抑制作用，IC50分别为0.06μM和4.1μM。另有研究者将JPH203应用于白血病的治疗，结果发现其能有效降低白血病细胞的活力和增殖能力，而且对正常周边血液淋巴细胞无明显毒性。
目前尚未有胆红素和JPH203联合应用于自身免疫性疾病治疗的相关报道。
发明内容
为了解决背景技术中存在的问题，本发明提供了一种胆红素和JPH203按照一定比例和特定制备方法自组装形成纳米颗粒及其制备方法，通过无载体纳米制剂优势和药物协同优势，用于自身免疫性疾病药物的制备。
本发明采用的技术方案是：
一、一种胆红素-JPH203纳米颗粒：
所述纳米颗粒主要由胆红素和抑制剂JPH203组成，具体仅由胆红素和抑制剂JPH203组成。
所述抑制剂JPH203的化学结构式如下：
Figure BDA0002969095680000021
所述胆红素和抑制剂JPH203的质量比为1:(0.02～0.8)。
二、胆红素-JPH203纳米颗粒的制备方法，方法如下：
1)将一定量的胆红素和JPH203溶解到适宜的有机溶剂中，作为有机相；
2)配置具有一定pH范围的缓冲水溶液，作为水相；
3)将有机相缓慢滴入水相中，搅拌混合，得到混合液；
4)除去混合液中的有机溶剂，得到纳米颗粒溶液。
5、如权利要求4所述的胆红素-JPH203纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中的有机溶剂为二甲基亚砜。
所述步骤1)中的胆红素和JPH203的质量比为1:(0.02～0.8)。胆红素在有机相中的浓度为0.5mg/mL。
所述步骤2)中的pH范围为7.0～11.0。
所述的缓冲水溶液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、甘氨酸盐缓冲液、Tris缓冲液的一种或几种的混合。
所述步骤3)中的有机相和水相的体积比例在1:1～1:3。
本发明制备方法制成的胆红素-JPH203纳米颗粒在制备治疗和/或预防自身免疫性疾病药物中的应用。
所述的自身免疫性疾病为银屑病、类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等，但不限于此。
本发明还提供了上述胆红素-JPH203纳米颗粒在制备治疗和/或预防自身免疫性疾病药物中的应用。
本发明制备的纳米颗粒由胆红素和JPH203两种小分子自组装形成，成分比例确定，稳定性好，且两种药物可以协同发挥免疫调控作用，具有很好的临床应用前景。
本发明为开发无载体纳米递送药物体系提供新的策略和更多选择，满足临床对自身免疫性疾病治疗高端制剂的迫切需求。
本发明的优点和有益效果包括在于：
1)两小分子药物自组装形成纳米颗粒，成分比例确定；
2)纳米颗粒利用其纳米尺寸，提高其体内半衰期，有利于提高药物的生物利用度；
3)两种药物可以协同发挥免疫调控作用，进一步增强药物治疗效果；
4)纳米颗粒的制备工艺简单，可操作性强，重现性良好，产业化前景好。
附图说明
图1为细胞因子结果图。
图1的(a)表示细胞因子IL-17水平，图1中的(b)表示细胞因子IFN-γ的水平。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的描述。
实施例1胆红素纳米颗粒的制备
根据表1，将一定量的胆红素和JPH203共同溶解于2mL二甲基亚砜中形成有机相，然后将有机相缓慢滴入水相中，持续搅拌12小时；透析出去有机溶剂后即得到样品。制备中的实验观察现象进行记录。
表1胆红素纳米颗粒的制备要点
Figure BDA0002969095680000041
Figure BDA0002969095680000051
本发明制备得到的胆红素-JPH203纳米颗粒为球形或蠕虫状，160～200nm之间，表明在适宜的药物比例及适宜的制备条件下，胆红素和JPH203可成功制备双分子自组装纳米颗粒，实验制备方法合理、简便。
实施例2胆红素-JPH203纳米颗粒对小鼠银屑病的治疗效果
采用连续涂抹咪喹莫特乳膏7天的方式诱导ICR小鼠背部皮肤玄出现银屑病样皮损，建成小鼠银屑病模型。在实验第8天观察到银屑病小鼠出现红肿、鳞屑等症状，分别将不同的药物涂抹于对应组别的小鼠背部皮肤，并敷上纱布，以绷带缠绕来固定。每天2次，连续8天。
各组给药情况如下：
A组：生理盐水组
B组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒1(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量8mg/kg)
C组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒2(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量6mg/kg)
D组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒3(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量4mg/kg)
E组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒4(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量2mg/kg)
F组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒5(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量0.2mg/kg)
G组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒7(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量0.01mg/kg)
H组：实施例1所制备的胆红素纳米颗粒13(胆红素剂量10mg/kg)
I组：胆红素溶液(胆红素剂量10mg/kg)
J组：JPH203溶液组(JPH203剂量8mg/kg)
K组：胆红素和JPH203混合溶液组(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量8mg/kg)
L组：胆红素和JPH203共包载的白蛋白纳米粒(胆红素剂量10mg/kg，JPH203剂量8mg/kg)
实验期间记录PASI评分。在给药期间，肉眼观测小鼠背部皮肤状况，根据小鼠皮肤表面银屑病斑块厚度、红斑、鳞屑3项指标均按0～4共五级记分(0＝无，1＝轻度，2＝中度，3＝重度，4＝极重度)，皮损面积按1～6共六级记分，皮损面积≤10％为1分，＞10％为2分，＞30％为3分，＞50％为4分，＞70％为5分，＞90％为6分。
疗效判断标准：痊愈：丘疹或斑块消退、变平，无新发皮疹，无痒感。银屑病PASI评分下降＞90％。显效：丘疹或斑块变薄或部分消退，痒感明显减轻。银屑病PASI评分下降60％～89％。有效：丘疹或斑块有所变薄，痒感有所减轻。银屑病PASI评分下降30％～59％。无效：皮损无变化，银屑病PASI评分下降＜30％。
细胞因子(IL-17和IFN-γ)水平检测。给药5天后，从小鼠脾脏中收集脾淋巴细胞，培养72h后，采用ELISA法，按照试剂盒说明书进行检测。
PASI评分结果见表2。细胞因子结果分别见图1。
表2胆红素纳米颗粒对银屑病小鼠治疗后的PASI评分结果
Figure BDA0002969095680000061
结果表明，本发明所制备的胆红素纳米颗粒能对银屑病小鼠起到一定的治疗效果，表现为相对于模型组来说，给药组皮肤的红肿情况有所缓解，鳞屑减少，角质化程度减少，炎症细胞浸润减少。治疗后，胆红素纳米颗粒各组细胞因子IL-17和INF-γ水平相对于模型组有一定下降，说明有效地抑制了银屑病的炎症反应。胆红素和JPH203对银屑病具有一定的治疗效果，但是两者协同使用产生了更好地治疗效果。JPH203的比例增大时，这种协同抗银屑病的药物作用更为明显。当JPH203的比例过低时，两种药物无法产生足够的药物协同反应。并且当胆红素和JPH203以纳米形式给药时具有相较于游离药物更好地治疗效果。由此可见，胆红素和JPH203两种治疗药物可自组装形成纳米结构，并协同改善银屑病模型小鼠的病情，具有开发成治疗银屑病药物的前景，具有重要的社会效益和经济效益。
以上所揭露的仅为本发明较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的。

Claims (2)

1.一种胆红素-JPH203纳米颗粒的制备方法，胆红素-JPH203纳米颗粒主要由胆红素和抑制剂JPH203组成，其特征在于，方法如下：
1）将一定量的胆红素和JPH203溶解到有机溶剂中，作为有机相；
2）配置具有一定pH范围的缓冲水溶液，作为水相；
3）将有机相滴入水相中，搅拌混合，得到混合液；
4）除去混合液中的有机溶剂，得到纳米颗粒溶液；
所述步骤1）中的有机溶剂为二甲基亚砜；
所述步骤1）中的胆红素和JPH203的质量比为1:（0.02~0.8）；
所述步骤2）中的pH范围为7.0~11.0；
所述步骤3）中的有机相和水相的体积比例在1:1~1:3。
2.权利要求1所述制备方法制成的胆红素-JPH203纳米颗粒在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用；
所述的自身免疫性疾病为银屑病。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008081537A1 (ja) * 2006-12-28 2008-07-10 Human Cell Systems, Inc. Ｌａｔ１阻害活性を有する芳香族アミノ酸誘導体、それを含有するｌａｔ１阻害活性剤及びその製造方法
US20110150767A1 (en) * 2009-12-17 2011-06-23 Wempe Michael F Alpha-substituted and alpha-unsubstituted aromatic amino acid derivatives and compositions thereof for use to treat, diagnose, or monitor a medical condition
CN105392498A (zh) * 2014-05-15 2016-03-09 J制药股份有限公司 抗恶性肿瘤剂组合物
CN110063945A (zh) * 2019-04-15 2019-07-30 温州医科大学 一种用于急性胰腺炎治疗的胆红素纳米颗粒及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008081537A1 (ja) * 2006-12-28 2008-07-10 Human Cell Systems, Inc. Ｌａｔ１阻害活性を有する芳香族アミノ酸誘導体、それを含有するｌａｔ１阻害活性剤及びその製造方法
US20110150767A1 (en) * 2009-12-17 2011-06-23 Wempe Michael F Alpha-substituted and alpha-unsubstituted aromatic amino acid derivatives and compositions thereof for use to treat, diagnose, or monitor a medical condition
CN105392498A (zh) * 2014-05-15 2016-03-09 J制药股份有限公司 抗恶性肿瘤剂组合物
CN110063945A (zh) * 2019-04-15 2019-07-30 温州医科大学 一种用于急性胰腺炎治疗的胆红素纳米颗粒及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bilirubin nanomedicine alleviates psoriatic skin inflammation by reducing oxidative stress and suppressing pathogenic signaling;Hyeongseop Keum et al.;《Journal of Controlled Release 325 》;20200716;第325卷;第359–369页 *

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