CN112813136A - 一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法，包括在反应基板上，设置多个载体，多个载体在保留一个空白块后，剩余载体通过分别浸润β‑葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后经干燥制得。其中PH值、白细胞酯酶、过氧化氢、β‑葡萄糖醛酸苷酶及凝固酶五个项目，可全面检测评估需氧菌性阴道炎；一步法操作，检测无需加显色液或终止液，操作简单，避免误操作，有利于自动化检测；反应只需要孵育5分钟即可进行检测，检测时间短，缩短TAT时间，适合临床试验检测特别是医院门诊检测筛查。

Description

一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法
技术领域
本发明涉及体外诊断试剂领域，尤其涉及一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法。
背景技术
比利时著名妇产科专家Donders等于2011年综述需氧菌性阴道炎(AerobicVaginitis，AV)以菌群失衡、阴道炎症表现为特征。临床上阴道乳杆菌减少或消失，为需氧菌所取代，引起阴道不同程度的炎症。研究发现AV与BV类似，极易造成误诊，两者均可引起妇科、产科等相关疾病，如盆腔炎、早产、新生儿低体重、死胎、胎儿宫内感染和新生儿智力障碍等。
需氧菌性阴道炎是由需氧菌繁殖伴产过氧化氢的乳酸杆菌的缺失或减少，导致阴道黏膜充血、水肿，产生脓性分泌物的阴道炎症。常见病原菌包括B族链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌及肠球菌等需氧菌。AV阴道微生态表现：乳杆菌减少；优势菌多样化，常为需氧菌如革兰阳性链球菌、革兰阳性球菌、革兰阴性球菌或革兰阴性杆菌等；pH值常常大于4.5；过氧化氢(+)；白细胞计数大于10个/HP；Donders评分≥3分；β-葡萄糖醛酸苷酶或凝固酶阳性。
国内外用于AV诊断的方法多为镜检法Donders评分或是微生物培养法，这两种方法费时，受操作人员的主观因素影响比较大，对临床常规或是问诊检验不便。目前市面上有采用干化学分析技术进行检测，如北京中生金域的发明专利《一种检测阴道分泌物中需氧菌的试剂盒及其制备方法》(专利申请号：200910244267)指出β-葡萄糖醛酸苷酶+凝固酶对AV可以有效诊断。但该发明只涉及β-葡萄糖醛酸苷酶及凝固酶两个项目，对白细胞酯酶(白细胞)、过氧化氢(乳酸杆菌)、PH值并没有涉及，检测不全面，且凝固酶法为两步法需要外加显色剂，反应需要孵育15min,操作不简便，检测时间长，有待改善。
发明内容
本发明的目的在于提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法，旨在解决现有检测方法检测不全面，且凝固酶法为两步法需要外加显色剂，反应需要孵育15min使得操作不简便的问题。
为实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种需氧菌性阴道炎检测试纸，包括反应基板和多个载体，多个所述载体在保留一个空白块后，剩余所述载体通过分别浸润β-葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后经干燥制得，多个所述载体固定设置在反应基板上。
其中，所述载体为试纸块或反应孔。
第二方面，本发明提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，包括：制备β-葡萄糖醛酸苷酶载体；制备凝固酶载体；制备白细胞酯酶载体；制备过氧化氢载体；制备pH值载体；将所有载体分别附着到反应基板上，完成制备。
其中，所述制备β-葡萄糖醛酸苷酶载体的具体步骤是：
将底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的缓冲液，并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是多种，所述缓冲液为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸-TRIS缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种，所述反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是多种；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为2-甲氧基-4-吗啉基苯重氮盐、2-乙氧基-4-吗啉基苯重氮盐、4-甲氧基苯重氮盐中的一种；将A液与B液按照1:1进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液；将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液附着于载体上并进行干燥。
其中，所述制备凝固酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，所述底物为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺，所述稳定剂为海藻糖与蔗糖的混合溶液，所述缓冲液为盐酸-TRIS缓冲液；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为固紫B盐、固蓝BB盐、固蓝RR盐、固红B盐中一种；将载体于凝固酶A溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B溶液中浸润后干燥制得。
其中，所述制备白细胞酯酶载体的具体步骤是：将底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为吲哚酚酯类及其衍生物，吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的一种或是一种以上，所述的稳定剂为β-环糊精，甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的一种或是一种以上；将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B液；将A液与B液按照1:1～9:1比例进行混合，形成白细胞酯酶溶液；将载体在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥。
其中，所述制备过氧化氢载体的具体步骤是：将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂制成过氧化氢试溶液，所述显色剂为4-氨基安替比林、TMB、DHBS、1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)；所述反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺(TOOS)，3,5-二氯-2-羟基苯磺酸；缓冲溶液为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液中的一种；将载体在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥。
其中，所述制备pH值载体的具体步骤是：将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于无水乙醇溶剂中形成A液，所述表面活性剂为OP乳化剂，曲拉通X-100，吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，聚乙二醇中的一种或是多种；将稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B液，所述稳定剂为海藻酸钠，海藻糖，羧甲基纤维素钠，聚乙烯吡咯烷酮系列，明胶中的一种或是多种；将A液与B液按照9:1～1:9任何比例进行混合，形成pH值溶液；载体在pH值中溶液中浸润后进行干燥。
本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸及其制备方法，包含PH值、白细胞酯酶、过氧化氢、β-葡萄糖醛酸苷酶及凝固酶五个项目，可全面检测评估需氧菌性阴道炎；一步法操作，检测无需加显色液或终止液，操作简单，避免误操作，有利于自动化检测；反应只需要孵育5分钟即可进行检测，检测时间短，缩短TAT时间，适合临床试验检测特别是医院门诊检测筛查。本发明涉及一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其中β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶项目采用重氮盐偶氮结合显色，反应显色明显，易于观察，适合于目测，应用场景可从专业市场拓展到个人检测监测且无需专业设备。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的结构图；
图2是本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸实施例1的结构图；
图3是本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸实施例2的结构图；
图4是本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法的流程图。
1-反应基板、2-载体、3-试纸块、4-反应孔。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
第一方面，请参阅图1～图3，本发明提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸，包括反应基板1和多个载体2，多个所述载体2通过分别浸润β-葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后，经干燥制得，多个所述载体2固定设置在反应基板1上。
在本实施方式中，含有β-葡萄糖醛酸苷酶的所述载体2包含底物由0.1g/L～4.0g/L 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是一种以上组成。0.1g/L～4.0g/L显色剂，显色剂为重氮盐试剂，所述重氮盐包含2-甲氧基-4-吗啉基苯重氮盐、2-乙氧基-4-吗啉基苯重氮盐、4-甲氧基苯重氮盐中的一种。0.2g/L～6.0g/L反应促进剂。溶剂为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸-TRIS缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种。反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是一种以上组成；
含有凝固酶试纸块的所述载体2包含浓度为1g/L～10g/L反应底物甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺、反应促进剂为重氮盐，其中重氮盐为固紫B盐、固蓝BB盐、固蓝RR盐、固红B盐中的一种。稳定剂为海藻糖与蔗糖混合溶液，溶剂为盐酸-TRIS缓冲液；
含有白细胞酯酶的所述载体2含0.5g/L～1.0g/L反应底物，0.1g/L～1.0g/L重氮盐显色剂，氯化钠1.0g/L～10g/L，0.5g/L～1.0g/L稳定剂，溶剂为缓冲溶液。所述反应底物为吲哚酚酯类及其衍生物，吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的一种或是一种以上，所述的稳定剂为β-环糊精，甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的一种或是一种以上。
含有过氧化氢的所述载体2包含0.5g/L～1.0g/L过氧化物酶或辣根过氧化酶，0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂，溶剂为缓冲溶液。所述显色剂为：4-氨基安替比林、TMB、DHBS、1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)；所述反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺(TOOS)，3,5-二氯-2-羟基苯磺酸；缓冲溶液为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液中的一种。
含有PH值溶液的所述载体2包含0.1g/L～0.6g/L溴甲酚绿，表面活性剂0.1g/L～2g/L，稳定剂0.1g/L～2g/L，乙醇在溶液中的浓度为10％～100％。其中表面活性剂为OP乳化剂，曲拉通X-100，吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，聚乙二醇中的一种或是一种以上。所述稳定剂为海藻酸钠，海藻糖，羧甲基纤维素钠，聚乙烯吡咯烷酮系列，明胶中的一种或是一种以上。
本发明涉及一种需氧菌性阴道炎检测试纸，包含PH值、白细胞酯酶、过氧化氢、β-葡萄糖醛酸苷酶及凝固酶五个项目，可全面检测评估需氧菌性阴道炎；一步法操作，检测无需加显色液或终止液，操作简单，避免误操作，有利于自动化检测；反应只需要孵育5分钟即可进行检测，检测时间短，缩短TAT时间，适合临床试验检测特别是医院门诊检测筛查。本发明涉及一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其中β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶项目采用重氮盐偶氮结合显色，反应显色明显，易于观察，适合于目测，应用场景可从专业市场拓展与个人检测监测且无需专业设备。
进一步的，所述载体2为试纸块3或反应孔4。
第二方面，请参阅4，本发明还提供一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，包括：
S101制备β-葡萄糖醛酸苷酶载体2；
S102制备凝固酶载体2；
S103制备白细胞酯酶载体2；
S104制备过氧化氢载体2；
S105制备pH值载体2；
S106将所有载体2分别附着到反应基板1上，完成制备。
以下将载体2分为试纸块3和反应孔4进行两种制备实施例的描述。
实施例1
将底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的缓冲液，并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液，其中底物由0.1g/L～4.0g/L5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是一种以上组成。0.1g/L～4.0g/L显色剂，显色剂为重氮盐试剂，所述重氮盐包含2-甲氧基-4-吗啉基苯重氮盐、2-乙氧基-4-吗啉基苯重氮盐、4-甲氧基苯重氮盐中的一种。0.2g/L～6.0g/L反应促进剂。溶剂为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸-TRIS缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种。反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是一种以上组成；
将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液，显色剂为重氮盐试剂，所述重氮盐包含2-甲氧基-4-吗啉基苯重氮盐、2-乙氧基-4-吗啉基苯重氮盐、4-甲氧基苯重氮盐中的一种。
将A液与B液按照1:1进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液；
将试纸块3在β-葡萄糖醛酸苷酶溶液中浸润后进行干燥制得。
将底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，此处底物为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺，将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液。将滤纸在凝固酶A溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B溶液中浸润后干燥制得。
将底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液。将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B液。将A液与B液按照1:1～9:1任何比例进行混合，形成白细胞酯酶溶液。将滤纸在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥。所述底物为吲哚酚酯类及其衍生物，吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的一种或是一种以上，所述稳定剂为β-环糊精，甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的一种或是一种以上。
将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂制成过氧化氢试溶液。将滤纸在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥。
将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于无水乙醇溶剂中形成A液。将稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B液。将A液与B液按照9:1～1:9任何比例进行混合，形成pH值溶液。将滤纸在pH值中溶液中浸润后进行干燥。
将所有试纸块3分别附着到反应基板1上，完成制备。
实施例2
将底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的缓冲液并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液。将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液。将A液与B液按照1:1进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液。将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔4中，经过干燥形成β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔4。
将底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液。将凝固酶A溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔4中，经过干燥再滴加凝固酶A溶液5-30ul干燥制得凝固酶反应孔4。
将底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液。将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B液。将A液与B液按照1:1～9:1任何比例进行混合，形成白细胞酯酶溶液。将白细胞酯酶溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔4中，经过干燥形成白细胞酯酶反应孔4。
将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂制成过氧化氢试溶液。将过氧化氢溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔4中，经过干燥形成过氧化氢反应孔4。
将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于无水乙醇溶剂中形成A液。将稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B液。将A液与B液按照9:1～1:9任何比例进行混合，形成pH值溶液。将pH值溶液5-30ul滴加在冲压好滤纸的反应孔4中，经过干燥形成pH值反应孔4。
将所有反应孔4分别附着到反应基板1上，完成制备。
以下是本发明的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的使用方法。
按照技术方案将制备好的5个项目试纸粘贴在基片上分裁成条制成需氧菌阴道炎五联检测试纸，或是由5个反应孔4组合需氧菌阴道炎五联检测试纸卡。
用无菌棉签或无菌拭子于阴道后穹窿处旋转10-20秒，以清晰见到棉签或拭子上有分泌物附着为准。将无菌拭子或是棉签采集样本，放入软试管中，每个样本加1.0ml生理盐水，反复涮洗，使样本充分洗脱，得到样本液；
取出阴道分泌物分析试纸或是试纸卡，在每个项目试纸孔中滴加样本20-30ul，约1滴；
放置在特定的仪器上进行检测，或者试纸条在37±1℃温育5分钟后，在1分钟内与色标卡对比判读结果。检测结果如下：
白细胞酯酶：
不显色(-)或淡紫色(+-)为阴性，提示正常；紫红色(+1～+3)为阳性，颜色深浅表明患者阴道内有不同程度的炎症反应。
过氧化氢：
呈红色或紫红色为阴性(-)，提示可能有大量乳酸杆菌存在，阴道菌群正常；
呈淡红色(+-)，弱阳性，提示可能有中量乳酸杆菌存在，可能阴道菌开始呈现不正常趋势或处于恢复期，需结合临床再判断，通常判阴性；不显色或淡黄色为阳性(+)，指示阴道菌群失调，阴道环境病态或处于亚健康状态。
β-葡萄糖醛酸苷酶：
不显色为阴性(-)，提示正常；红色或淡紫色为弱阳性(+-)，显红色或紫红色为阳性(+)，阳性或是弱阳性均提示阴道受以需氧菌为主的感染，阴道环境病态或处于亚健康状态；
凝固酶：
不显色或淡淡黄色为阴性(-)，提示正常；浅黄色为弱阳性(+-)；显黄色或紫黄色为阳性(+)，阳性或是弱阳性表示受金黄色葡萄球菌、链球菌等需氧性细菌感染；
各个项目检测联检的临床意义如表1：
Figure BDA0002980218250000091
表1
按照《全国临床检验操作规程》，共试验600份阴道分泌物样本，按照微生物学检验方法共筛选出52份需氧菌类的样本，目测比对色标卡进行检测，采用本发明试剂盒的检测阴道分泌物中需氧菌群的结果如下：
阴性预测值为：97.5％；
阳性预测值为：93.2％；
由此可将，采用本发明的检测试纸对阴道分泌物中需氧菌类阴道炎的检出率在90％以上，可满足临床筛查或是辅助诊断的要求，且可用于女性日常阴道健康状况的监测。
以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。

Claims (8)

1.一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，
包括反应基板和多个载体，多个所述载体在保留一个空白块后，剩余所述载体通过分别浸润β-葡萄糖醛酸苷酶溶液、凝固酶溶液、过氧化氢溶液、白细胞酯酶溶液、pH值溶液后经干燥制得，多个所述载体固定设置在反应基板上。
2.如权利要求1所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，
所述载体为试纸块或反应孔。
3.一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，应用于制取如权利要求1-2任意一项所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸，其特征在于，
包括：制备β-葡萄糖醛酸苷酶载体；
制备凝固酶载体；
制备白细胞酯酶载体；
制备过氧化氢载体；
制备pH值载体；
将所有载体分别附着到反应基板上，完成制备。
4.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，
所述制备β-葡萄糖醛酸苷酶载体的具体步骤是：
将底物溶解于PH值为4-9、浓度为0.5mM-10mM的缓冲液，并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷、酚酞葡萄糖醛酸苷中一种或是多种，所述缓冲液为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，柠檬酸-TRIS缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，乙酸钠缓冲液中的一种，所述反应促进剂为氯化镁、氯化锌、氯化钙、乙二醇、海藻酸钠、戊二醛、蔗糖中的一种或是多种；
将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为2-甲氧基-4-吗啉基苯重氮盐、2-乙氧基-4-吗啉基苯重氮盐、4-甲氧基苯重氮盐中的一种；
将A液与B液按照1:1进行混合，形成β-葡萄糖醛酸苷酶溶液；
将β-葡萄糖醛酸苷酶溶液附着于载体上并进行干燥。
5.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，
所述制备凝固酶载体的具体步骤是：
将底物溶解于PH值为3-7浓度为0.1mM-5mM的缓冲液缓冲并加入稳定剂溶解完成后形成A液，所述底物为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘胺，所述稳定剂为海藻糖与蔗糖的混合溶液，所述缓冲液为盐酸-TRIS缓冲液；
将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸溶液中形成B液，所述重氮盐类显色剂为固紫B盐、固蓝BB盐、固蓝RR盐、固红B盐中一种；
将载体于凝固酶A溶液中浸润干燥后再放入凝固酶B溶液中浸润后干燥制得。
6.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，
所述制备白细胞酯酶载体的具体步骤是：
将底物溶解于PH值为6-9、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入1g/L-10g/L稳定剂，0.5g/L-5g/L反应促进剂形成A液，所述底物为吲哚酚酯类及其衍生物，吡咯酯及其吡咯氨基酸酯衍生物中的一种或是一种以上，所述的稳定剂为β-环糊精，甘露醇、乙二醇、甘油、乙二胺四乙酸钠盐、乙二胺四乙酸钾盐中的一种或是一种以上；
将重氮盐类显色剂溶于含有0.5g/L-10g/L有机酸有机溶剂中并加入0.1g/L-5g/L表面活性剂形成B液；
将A液与B液按照1:1～9:1比例进行混合，形成白细胞酯酶溶液；
将载体在白细胞酯酶溶液中浸润后进行干燥。
7.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，
所述制备过氧化氢载体的具体步骤是：
将过氧化物酶或辣根过氧化物酶溶解于PH值为5-8、浓度为0.1mM-2mM的缓冲液并加入0.1g/L～0.6g/L显色剂，0.1g/L～1.0g/L反应促进剂制成过氧化氢试溶液，所述显色剂为4-氨基安替比林、TMB、DHBS、1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮(4-AAP)；所述反应促进剂为N-乙基－N－(2-羟基－3－磺丙基)间甲苯胺(TOOS)，3,5-二氯-2-羟基苯磺酸；缓冲溶液为PBS缓冲液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液中的一种；
将载体在过氧化氢溶液中浸润后进行干燥。
8.如权利要求3所述的一种需氧菌性阴道炎检测试纸的制备方法，其特征在于，
所述制备pH值载体的具体步骤是：
将溴甲酚绿、表面活性剂溶解于无水乙醇溶剂中形成A液，所述表面活性剂为OP乳化剂，曲拉通X-100，吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，聚乙二醇中的一种或是多种；
将稳定剂溶解于纯化水或乙醇中形成B液，所述稳定剂为海藻酸钠，海藻糖，羧甲基纤维素钠，聚乙烯吡咯烷酮系列，明胶中的一种或是多种；
将A液与B液按照9:1～1:9任何比例进行混合，形成pH值溶液；
载体在pH值中溶液中浸润后进行干燥。
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