CN111690713A - 一种阴道炎八联检试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，包括反应板，所述反应板具有检测以下指标的反应孔：β‑葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、乙酰氨基‑β‑葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶、pH；(2)稀释液；旨在解决无法同时检测需氧菌性阴道炎、细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的问题，同时，解决试剂盒检测精度欠缺的问题。

Description

一种阴道炎八联检试剂盒
技术领域
本发明属于体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种阴道炎八联检试剂盒。
背景技术
阴道微生态的概念在国内经过了10余年的推广及应用，评价体系日臻完善，检测内容包括形态学和功能学两个方面。形态学检测指标包括阴道菌群密集度、多样性、优势菌、病原微生物(真菌及滴虫)、Nugent评分、白细胞计数等。功能学检测指标包括pH值、机体炎性反应标志物(白细胞酯酶)及生物化学指标，其中包括代谢产物及酶活性的检测。
阴道炎是妇科门诊常见的疾病。常见的阴道炎有细菌性阴道炎(BV)、霉菌性阴道炎(VVC)、滴虫性阴道炎(TV)和需氧菌性阴道炎(AV)四类。细菌预成酶是细菌在生长繁殖过程中合成的一系列与生长代谢有关的酶类，这些酶类能分解多种生化反应的底物，并且在有氧环境中能较长时间地保留其活性。不同种属的细菌，其预成酶的种类不同。需氧菌性阴道炎的主要致病菌金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌均可产生凝固酶，B族链球菌和大肠埃希菌代谢可产生β-葡萄糖醛酸酶；所以凝固酶和β-葡萄糖醛酸酶可用于需氧菌性阴道炎的检测。唾液酸苷酶是某些细菌的毒力因子，在与细菌性阴道炎相关的细菌中，已知加德纳菌、普雷沃菌等可产生唾液酸苷酶，唾液酸苷酶常用于检测细菌性阴道炎。白色念珠菌和滴虫可产生乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶，结合pH值可以将两者区分。
目前市场上阴道炎联合检测试剂盒有四项指标检测、五项指标和六项指标检测，能够检测细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎。但能够同时检测需氧菌性阴道炎、细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的试剂盒少见报道，而临床上存在较多的混合感染，各项指标联合检测利于实现全面、准确的诊断。此外，已报道试剂盒存在检测灵敏度不高、稳定性差的问题，另外不同反应孔需要各自的显色试剂，操作不方便。
发明内容
本发明的目的是提供一种阴道炎八联检试剂盒，旨在解决无法同时检测需氧菌性阴道炎、细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的问题，同时，解决试剂盒检测精度欠缺的问题。
为解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：
一种阴道炎八联检试剂盒，包括反应板，所述反应板具有检测以下指标的反应孔：β-葡萄糖醛酸酶、凝固酶、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶、pH；(2)稀释液；
所述反应板的β-葡萄糖醛酸酶反应孔的底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷、无水乙醇、海藻糖、蒸馏水；
所述反应板的凝固酶反应孔的底物包被有甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐、海藻糖和PBS缓冲液；
所述反应板的过氧化氢反应孔的底物包被有过氧化物酶、4-氨基安替比林、2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸、HRP酶稳定剂、蔗糖和PBS缓冲液；
所述反应板的唾液酸苷酶反应孔的底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐、无水乙醇、蒸馏水、海藻糖；
所述反应板的白细胞酯酶底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐、海藻糖、无水乙醇、蒸馏水；
所述反应板的乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶底物包被有4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、海藻糖、无水乙醇、蒸馏水；
所述述反应板的脯氨酸氨基肽酶反应孔的底物包被有双甘氨肽、L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐、海藻糖和PBS缓冲盐；
所述反应板的pH反应孔包被有溴甲酚绿、氢氧化钠；
一种阴道炎八联检试剂盒制备方法包括以下步骤：
(1)将空白滤纸放置在反应板的八个干化学反应孔中，具体地，干化学反应孔中设置倒角，并设置孔位爪；
(2)向反应板的空白滤纸上分别滴加相应底物反应试剂和稳定剂保护液；
(3)干燥：将完成步骤2的反应板放入37℃培养箱中干燥2h。
所述β-葡萄糖醛酸酶反应孔的底物反应试剂为0.1-5g/L5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖醛酸苷盐的无水乙醇溶液，β-葡萄糖醛酸酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述凝固酶反应孔底物反应试剂为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐0.2-4g/L，溶剂为PBS缓冲液；凝固酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述过氧化氢反应孔的底物反应试剂为：过氧化物酶40-300kU/L、4-氨基安替比林0.5-2g/L，2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸5-25g/L、HRP酶稳定剂0.1-0.5％、溶剂为PBS缓冲液，过氧化氢反应孔的稳定剂保护液为0.2-5g/L蔗糖的水溶液。
所述唾液酸苷酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐0.1-4g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；唾液酸苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述白细胞酯酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐0.5-5g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；白细胞酯酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的底物反应试剂为：4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷1-8g/L、溶剂为PBS缓冲液；乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述脯氨酸氨基肽酶反应孔的底物反应试剂为；双甘氨肽5-20g/L、L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐2-8g/L、溶剂为PBS缓冲液，脯氨酸氨基肽酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述pH反应孔的底物反应试剂为溴甲酚绿0.02-2g/L、0.05mol/LNaOH，溶剂为水，pH反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
检测试剂盒还包括用于唾液酸苷酶和凝固酶反应孔显色的显色剂及用于乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的终止液，所述显色剂为0.5-4g/L固紫B的聚氧乙烯月桂醚溶液，聚氧乙烯月桂醚的使用浓度为1-50g/L；所述终止液为80g/L氢氧化钠的溶液。
本发明的有益效果是：
1、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，通过对β-葡萄糖醛酸酶、凝固酶、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶和pH值的测定，可直接区分细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎和滴虫性阴道炎，并可以进一步鉴定出是样本中的需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌等菌群，该方法操作简单、快速，准确性高，适用于临床常规检测，此外反应板上的反应孔倒角、孔位爪、设置孔位爪固定反应纸，以防反应纸掉落，增大反应板的牢固性。
2、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，β-葡萄糖醛酸酶反应孔的溶剂采用无水乙醇，用乙醇做溶剂，水系组分占比小，解决溶解性问题，相比用乙二醇作溶剂溶液获得更好的稳定性，传统地用乙二醇做溶剂，虽然溶解能力强，但容易代谢氧化，生成草酸，溶液稳定性差。
3、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，过氧化氢反应孔底物包被过氧化物酶、4-氨基安替比林、2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸、HRP酶稳定剂、蔗糖和PBS缓冲液，检测时，阴道分泌物中过氧化氢经过过氧化物酶(HRP)作用，释放出新生态氧，新生态氧在4-氨基安替比林存在下，使2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸氧化呈现红色或紫色，呈色深度与过氧化氢浓度成正比，相对于传统地，3,5-二氯-2-羟基-苯磺酸钠，大大提高了灵敏度。该反应的检测原理是基于Trinder反应，过氧化氢在过氧化物酶作用下，分解产生氧，将无色的还原型4-氨基替比林与酚(或其衍生物)偶联氧化缩合形成红色的醌类化合物。2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸相比常用的3,5-二氯-2-羟基苯甲酸，由于其取代基的电子效应更容易发生反应，具有更高的反应灵敏度。
4、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，辣根过氧化物酶(HRP)应用非常广泛，但其在低浓度下很不稳定，极易失活。HRP酶稳定剂对HRP试剂有强大的保护作用，使稀释的HRP试剂在极低浓度下室温保存稳定12个月以上。通常，HRP酶稳定剂主要用于酶标抗体、酶标抗原等，本发明首次将其用于反应装置效果显著；实验表明，在储存温度2-8℃条件下，过氧化氢反应孔存放有效期是一年，添加HRP酶稳定剂后储存一年半HRP的活力还能能达到60％，加入HRP酶稳定剂可大大延长试剂盒效期。
5、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，唾液酸苷酶孔反应孔所用显色试剂为重氮盐的聚氧乙烯月桂醚溶液，聚氧乙烯月桂醚与重氮盐配合用于唾液酸苷酶孔的显色，显色效果较单纯使用重氮盐提高2倍；聚氧乙烯月桂醚易溶于水，具有乳化、润湿、分散能力，常规用作醚酯类非离子型表面活性剂，用作乳化润湿剂，在橡胶工业中用作分散剂，石油工业和环境保护行业中用作溢油分散剂的组分之一。根据细菌性阴道病阴道分泌物中异常的唾液酸苷酶活性特点，唾液酸苷酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐，释放出溴吲哚基，遇重氮盐和聚氧乙烯月桂醚，两者配合使用显色灵敏度提高，质控检测灵敏度为7U/L，加入聚氧乙烯月桂醚之后唾液酸苷酶孔检测灵敏度可以达到5.5U/L，本发明将其用于溶解显色底物，采用其分散能力和易溶于水的特性，使得唾液酸苷酶孔显色更充分，灵敏度提高20％。
6、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，唾液酸苷酶孔和凝固酶同时适用的一种显色液，唾液酸苷酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐，释放出溴吲哚基；凝固酶水解甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐，产生β-萘胺，溴吲哚基与β-萘胺均为芳胺类物质，固紫B盐属于重氮盐，重氮盐与芳胺发生偶联反应，聚氧乙烯月桂醚为非离子型表面活性剂，该物质的加入可以增加两相的互溶程度进而增加反应速率，本发明的显色剂为唾液酸苷酶和凝固酶两个检测孔同时适用，改变了传统的各反应孔使用各自的专用显色剂，减少了显色剂的种类，操作更加方便。
7、本发明一种阴道炎八联检试剂盒，pH孔反应底物为溴甲酚绿和氢氧化钠组合，使得该孔反应pH值更加接近样本的真实值，本发明首次提出将溴甲酚绿和氢氧化钠组合作为反应底物进行显色。
附图说明
图1是本发明反应板的结构示意图。
图2是反应孔的放大示意图。
图中：
1-反应板、2-反应孔、3-滤纸、4-孔位爪。
具体实施方式
为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，并结合其附图，对本方案进行阐述。
实施例一
如图1-图2所示一种阴道炎八联检试剂盒，包括反应板1，所述反应板具有检测以下指标的反应孔2：β-葡萄糖醛酸酶、凝固酶、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶、pH；(2)稀释液；
所述β-葡萄糖醛酸酶反应孔2的底物反应试剂为0.1-5g/L5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖醛酸苷盐的无水乙醇溶液，β-葡萄糖醛酸酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述凝固酶反应孔底物反应试剂为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐0.2-4g/L，溶剂为PBS缓冲液；凝固酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述过氧化氢反应孔的底物反应试剂为：过氧化物酶40-300kU/L、4-氨基安替比林0.5-2g/L，2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸5-25g/L、HRP酶稳定剂0.1-0.5％、溶剂为PBS缓冲液，过氧化氢反应孔的稳定剂保护液为0.2-5g/L蔗糖的水溶液。
所述唾液酸苷酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐0.1-4g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；唾液酸苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述白细胞酯酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐0.5-5g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；白细胞酯酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的底物反应试剂为：4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷1-8g/L、溶剂为PBS缓冲液；乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述脯氨酸氨基肽酶反应孔的底物反应试剂为；双甘氨肽5-20g/L、L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐2-8g/L、溶剂为PBS缓冲液，脯氨酸氨基肽酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
所述pH反应孔的底物反应试剂为溴甲酚绿0.02-2g/L、0.05mol/LNaOH，溶剂为水，pH反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
检测试剂盒还包括用于唾液酸苷酶和凝固酶反应孔显色的显色剂及用于乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的终止液，所述显色剂为0.5-4g/L固紫B的聚氧乙烯月桂醚溶液,聚氧乙烯月桂醚的使用浓度为1-50g/L；所述终止液为80g/L氢氧化钠的水溶液。
一种阴道炎八联检试剂盒制备方法包括以下步骤：
(1)将空白滤纸3放置在反应板的八个干化学反应孔中，具体地，干化学反应孔中设置倒角，并设置孔位爪4；
(2)向反应板的空白滤纸上分别滴加相应底物反应试剂和稳定剂保护液；
(3)干燥：将完成步骤2的反应板放入37℃培养箱中干燥2h。
实施例二：
β-葡萄糖醛酸酶反应孔的溶剂采用乙二醇，其他同实施例一，测试活性为1U/mL的β-葡萄糖醛酸酶质控品，与实施例一的对比结果见表1。
实施例三：
过氧化氢反应孔的反应试剂中不加HRP酶稳定剂，其他同实施例一，对比结果见表2,表2为不同存放时间下过氧化氢反应孔的活性。
实施例四：
过氧化氢孔反应孔的反应试剂中使用传统地3,5-二氯-2-羟基-苯磺酸钠，其他同实施例一，对比结果见表3和表4，表3为通过观察法得到的对比结果，表4为应用配套仪器结合识别软件进行颜色判读，软件识别反应后各孔内的颜色，显色越深对应数值越高。
实施例五：
唾液酸苷酶反应孔显色液不使用聚氧乙烯月桂醚，其他同实施例一，对比结果见表5。
【检测实验】
【样本要求】
样本为阴道后穹窿或阴道后位的分泌物，可用无菌拭子或无菌棉签采取阴道分泌物，拭子或棉签于阴道后位或后穹窿处旋转10-20秒，以能清晰看到分泌物附着为准，所采样本应尽快使用。
【检验方法】
1)稀释液的制备：制备成含有生理盐水和ProClin300(购自美国Sigma公司)组成的溶液，所述生理盐水在稀释液中的质量百分浓度为0.9％，所述ProClin300(购自美国Sigma公司)在稀释液中的质量百分浓度为0.05％。
2)将实施例1-5制备的试剂盒取出，使其恢复至室温后使用；
3)取样品管一支，加稀释液8-10滴(约400μL)，将棉拭子置于其中，充分涮洗后轻轻捏压试管壁，将拭子吸附的液体尽量挤出，弃拭子，得样品液；
4)在反应板中每孔加20μL样品液，在凝固酶反应孔和唾液酸苷酶反应孔中加10μL显色液，将反应板置于37℃下恒温孵育15min。
5)取出反应板，在Aβ-G反应孔中加10μL乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶终止液，轻轻振摇反应板后，1min内判读结果。
【检验结果】
表1
Figure BDA0002517915070000091
表2
Figure BDA0002517915070000092
表3
Figure BDA0002517915070000101
表4
Figure BDA0002517915070000102
表5
Figure BDA0002517915070000103
综上，β-葡萄糖醛酸酶反应孔的溶剂采用无水乙醇，相对于传统地用乙二醇做溶剂溶液稳定性大大提高；
过氧化氢反应孔的常用包被底物为3,5-二氯-2-羟基-苯磺酸钠，本产品所用底物为2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸，另外加入HRP酶稳定剂大大增大了储存效期，使该反应孔具有更高的灵敏度和稳定性；
唾液酸苷酶反应孔显色液组分中加入聚氧乙烯月桂醚，与重氮盐配合用于唾液酸苷酶孔的显色，提高了显色的灵敏度。
对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和优化，这些改进和优化也被视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，包括反应板，所述反应板具有检测以下指标的反应孔：β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶、过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶、pH；(2)稀释液；
所述反应板的β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔的底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷和无水乙醇；
所述反应板的凝固酶反应孔的底物包被有甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐、海藻糖和PBS缓冲液；
所述反应板的过氧化氢反应孔的底物包被有过氧化物酶、4-氨基安替比林、2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸、HRP酶稳定剂、蔗糖和PBS缓冲液；
所述反应板的唾液酸苷酶反应孔的底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐、无水乙醇、蒸馏水、海藻糖；
所述反应板的白细胞酯酶反应孔的底物包被有5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐、海藻糖、无水乙醇、蒸馏水；
所述反应板的乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的底物包被有4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、海藻糖、无水乙醇、蒸馏水；
所述述反应板的脯氨酸氨基肽酶反应孔的底物包被有双甘氨肽、L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐、海藻糖和PBS缓冲盐；
所述反应板的pH反应孔的底物包被有溴甲酚绿、氢氧化钠；
一种阴道炎八联检试剂盒制备方法包括以下步骤：
(1)将空白滤纸放置在反应板的八个干化学反应孔中，具体地，干化学反应孔中设置倒角，并设置孔位爪；
(2)向反应板的空白滤纸上分别滴加相应底物反应试剂和稳定剂保护液；
(3)干燥：将完成步骤2的反应板放入37℃培养箱中干燥2h。
2.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔的底物反应试剂为0.1-5g/L 5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖醛酸苷盐的无水乙醇溶液，β-葡萄糖醛酸苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
3.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述凝固酶反应孔底物反应试剂为甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐0.2-4g/L，溶剂为PBS缓冲液；凝固酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
4.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述过氧化氢反应孔的底物反应试剂为：过氧化物酶40-300kU/L、4-氨基安替比林0.5-2g/L，2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸5-25g/L、HRP酶稳定剂0.1-0.5％、溶剂为PBS缓冲液，过氧化氢反应孔的稳定剂保护液为0.2-5g/L蔗糖的水溶液。
5.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述唾液酸苷酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐0.1-4g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；唾液酸苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
6.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述白细胞酯酶反应孔的底物反应试剂为：5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐0.5-5g/L、溶剂为无水乙醇和蒸馏水按照体积比1:1混合；白细胞酯酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
7.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的底物反应试剂为：4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷1-8g/L、溶剂为PBS缓冲液；乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
8.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述脯氨酸氨基肽酶反应孔的底物反应试剂为；双甘氨肽5-20g/L、L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐2-8g/L、溶剂为PBS缓冲液，脯氨酸氨基肽酶反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
9.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，所述pH反应孔的底物反应试剂为溴甲酚绿0.02-2g/L、0.05mol/L NaOH，溶剂为水，pH反应孔的稳定剂保护液为20-50g/L海藻糖的水溶液。
10.如权利要求1所述的一种阴道炎八联检试剂盒，其特征在于，还包括用于唾液酸苷酶和凝固酶反应孔显色的显色剂及用于乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶反应孔的终止液，所述显色剂为0.05％-0.4％固紫B的聚氧乙烯月桂醚溶液；所述终止液为80g/L氢氧化钠的溶液。
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