CN112778260A - 一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 - Google Patents
一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112778260A CN112778260A CN202011636751.4A CN202011636751A CN112778260A CN 112778260 A CN112778260 A CN 112778260A CN 202011636751 A CN202011636751 A CN 202011636751A CN 112778260 A CN112778260 A CN 112778260A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- trifluoroacetic acid
- rich
- anthocyanin
- blueberry
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 89
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 title claims abstract description 58
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 title claims abstract description 55
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 title claims abstract description 55
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 title claims abstract description 54
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 title claims abstract description 54
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 title claims abstract description 54
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 title claims abstract description 54
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 244000077233 Vaccinium uliginosum Species 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 86
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 44
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 19
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 12
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 7
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 240000000851 Vaccinium corymbosum Species 0.000 claims abstract 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 7
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 238000004537 pulping Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 4
- GOFLNFPIFZZLIP-UHFFFAOYSA-N ethanol;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound CCO.OC(=O)C(F)(F)F GOFLNFPIFZZLIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 claims 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 abstract description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 6
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 abstract 1
- 238000009461 vacuum packaging Methods 0.000 abstract 1
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 47
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 4
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 235000021022 fresh fruits Nutrition 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N (2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-methyl-5-[[(1S,4R,5S,6S)-4,5,6-trihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1-cyclohex-2-enyl]amino]-2-oxanyl]oxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-oxanyl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound O([C@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O)N[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1)O)C)[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 206010024642 Listless Diseases 0.000 description 1
- 229960002632 acarbose Drugs 0.000 description 1
- XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N acarviostatin I01 Natural products OC1C(O)C(NC2C(C(O)C(O)C(CO)=C2)O)C(C)OC1OC(C(C1O)O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- -1 berry preparations Natural products 0.000 description 1
- 201000011529 cardiovascular cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000003345 hyperglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 208000017971 listlessness Diseases 0.000 description 1
- 230000006996 mental state Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N nonanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(O)=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000000955 prescription drug Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
- C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B61/00—Dyes of natural origin prepared from natural sources, e.g. vegetable sources
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B67/00—Influencing the physical, e.g. the dyeing or printing properties of dyestuffs without chemical reactions, e.g. by treating with solvents grinding or grinding assistants, coating of pigments or dyes; Process features in the making of dyestuff preparations; Dyestuff preparations of a special physical nature, e.g. tablets, films
- C09B67/0096—Purification; Precipitation; Filtration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及蓝莓富花青素提取技术领域，具体涉及一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法，步骤为：取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没真空抽提；浆液过滤后蒸发浓缩获得浓缩提取物，加入乙酸乙酯混合离心萃取，得水相提取物；将水相提取物用大孔树脂进行纯化，使用三氟乙酸的乙醇溶液洗脱，得富酚提取物；将富酚提取物用Sephadex LH‑20填充柱吸附，用乙醇溶液洗脱，分阶段收集；截取总洗脱液的前20‑30％作为提取物样本，冷冻干燥得到样本；样本溶解于含柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、和羧甲基纤维素钠乳化，均质后真空灌装或二次冻干，封存。得到的蓝莓富花青素提取中总花青素含量是冻干果粉的20倍以上，具有良好的降血糖活性。
Description
技术领域
本发明涉及蓝莓富花青素提取技术领域，具体涉及一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
目前2型糖尿病影响全球很多人的健康，除了依赖胰岛素注射或处方药的传统治疗方法外，天然产品，特别是浆果制剂，已被用作糖尿病的替代药用治疗方法之一。
蓝莓和相关水果特别有营养，已经被证明对多种情况都有益。最值得注意的是，蓝莓含有强大的抗氧化剂，可以中和导致神经退行性疾病、心血管疾病和癌症的自由基。一些研究表明，野生蓝莓(越桔)或越桔(越桔)的叶子提取物在动物模型中有降低血糖的作用。然而，这种制剂在人体中的降糖活性有限。蓝莓根、叶和茎提取物的成分与果实提取物的成分有很大的不同，水果提取物中含有较多花青素。虽然文献证明蓝莓对健康有益，但降血糖活性高的富花青素蓝莓制剂制备方法还很少，因此提供一种具有较高抗血糖活性的蓝莓花青素提取物非常必要。
发明内容
为了解决现有技术中存在的技术问题，本发明采用连续富集的方法从蓝莓果实中提取蓝莓花青素提取物，总花青素含量高，并通过乳化包埋，使得蓝莓花青素提取物的抗血糖活性更高，为此本发明的目的是提供一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法。
具体地，本发明的技术方案如下所述：
在本发明的第一方面，提供一种蓝莓富花青素提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，加热条件下真空抽提，然后冷却至室温；
(2)浆液过滤后蒸发浓缩获得浓缩提取物，向其中加入乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(3)将水相提取物用大孔树脂进行纯化，使用三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物；
(4)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附，使用乙醇溶液进行洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，至无色为止；
(5)截取总洗脱液的前20-30％作为提取物样本，立即冷冻干燥，得到冻干样本；
(6)冻干样本溶解于含柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、和羧甲基纤维素钠乳化，均质后，真空灌装或二次冻干，封存。
在本发明的第二方面，提供一种第一方面所述方法制备的蓝莓富花青素提取物。
在本发明的第三方面，提供一种降糖功能食品配方，所述配方中包括第二方面所述的蓝莓富花青素提取物。
本发明的具体实施方式具有以下有益效果：
采用连续富集法，得到的总花青素含量是冻干果粉的20倍以上，当富酚提取物和总花青素提取物的总酚含量非常接近时，总花青素提取物的花青素含量比富酚提取物高出2倍以上；总花青素提取物中的花色苷和总酚含量比鲜果增加150倍以上，具有良好的降血糖活性；
选用三氟乙酸酸化的乙醇溶液作为浸提液和洗脱液，能够更好地富集蓝莓花青素并且得到的蓝莓花青素提取物的抗血糖活性更高；
通过辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇和羧甲基纤维素钠的乳化包埋，使得降糖效果更好，可降低20-30％的血糖水平。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本申请使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
本发明的一种实施方式中，提供了一种蓝莓富花青素提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，加热条件下真空抽提，然后冷却至室温；
(2)浆液过滤后蒸发浓缩获得浓缩提取物，向其中加入乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(3)将水相提取物用大孔树脂进行纯化，使用三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物；
(4)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附，使用乙醇溶液进行洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，至无色为止；
(5)截取总洗脱液的前20-30％作为提取物样本，立即冷冻干燥，得到冻干样本；
(6)冻干样本溶解于含柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、和羧甲基纤维素钠乳化，均质后，真空灌装或二次冻干，封存。
发明人通过试验研究发现，在蓝莓花青素的提取中浸提液的选取对提取出的花青素的种类含量以及活性具有重要的影响作用，现有技术中使用的浸提液如甲醇，乙醚，石油醚等与盐酸或者乙酸或者三氟乙酸的组合得到的蓝莓花青素提取物的活性均没有三氟乙酸酸化的乙醇作为提取液的高，并且本发明公开了三氟乙酸与乙醇的体积比为1:200-500，该用量比下得到的蓝莓花青素提取物的质量最好；并且在蓝莓花青素提取物的柱吸附和洗脱过程中也采用三氟乙酸酸化的乙醇溶液，能够起到更好的富集蓝莓花青素的作用。
本发明中采用连续富集的方法以冷冻蓝莓为原料制备蓝莓花青素提取物，得到的总花青素提取物含量是蓝莓冻干果粉的20倍以上；并且在本发明中，当富酚提取物和总花青素提取物的总酚含量非常接近时，总花青素提取物的花青素含量比富酚提取物高出2倍以上。总花青素提取物中的花色苷和总酚含量比鲜果增加150倍以上，具有良好的降血糖活性。
在一种具体的实施方式中，步骤(1)中，所述三氟乙酸酸化的乙醇中三氟乙酸与乙醇的体积比为1:200-500；
真空抽提的温度为40℃～60℃，时间为1～3h；
在一种具体的实施方式中，步骤(2)中，蒸发温度低于40℃，蒸发至原体积的1/3～1/5；加入乙酸乙酯的量为浓缩提取物的3-6倍；
在一种具体的实施方式中，步骤(3)中，所述三氟乙酸的乙醇溶液中三氟乙酸的体积含量为0.2-0.5％；所述洗脱为洗脱30～50个柱体积；
在一种具体的实施方式中，步骤(4)中，所述乙醇溶液为体积分数15-35％的乙醇溶液，且其中含有0.2-0.5％的三氟乙酸；
分阶段收集为每200mL收集一次；
在一种具体的实施方式中，步骤(6)中，含柠檬酸的水溶液中含有质量分数0.3-0.8％的柠檬酸；加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠的含量为0.07-0.20 mg/ml。
辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠起到包埋作用，可以稳定花青素的活性。
本发明的一种实施方式中，提供了一种上述方法制备的蓝莓富花青素提取物。
在本发明的第三方面，提供一种降糖功能食品配方，所述配方中包括上述蓝莓富花青素提取物。
实施例1
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，置于50℃下真空抽提 2h，冷却至室温；
(2)浆液过滤后进行旋蒸，蒸发到原体积的1/3，旋蒸温度不超过40℃；
(3)将获得的浓缩提取物与4倍乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(4)将水相提取物用大孔树脂进行纯化：用40个柱体积的含0.3％三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物。
(5)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附；
(6)然后用25％的乙醇溶液(含0.3％三氟乙酸)洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，每200mL收集一次，至无色为止；
(7)截取总洗脱液的前20％作为提取物样本，立即冷冻干燥；
(8)冻干样本溶解于含0.5％柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠乳化，含量为0.1mg/ml，均质后二次冻干，封存，得蓝莓花青素提取物。
实施例2
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，置于40℃℃下真空抽提2h，冷却至室温；
(2)浆液过滤后进行旋蒸，蒸发到原体积的1/4，旋蒸温度不超过40℃；
(3)将获得的浓缩提取物与5倍乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(4)将水相提取物用大孔树脂进行纯化：用50个柱体积的含0.3％三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物。
(5)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附；
(6)然后用30％的乙醇溶液(含0.3％三氟乙酸)洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，每200mL收集一次，至无色为止；
(7)截取总洗脱液的前30％作为提取物样本，立即冷冻干燥；
(8)冻干样本溶解于含0.6％柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠等乳化，含量为0.12mg/ml，均质后二次冻干，封存。
对比例1
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，置于50℃下真空抽提2h，冷却至室温；
(2)浆液过滤后进行旋蒸，蒸发到原体积的1/3，旋蒸温度不超过40℃；
(3)将获得的浓缩提取物与4倍乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(4)将水相提取物用大孔树脂进行纯化：用40个柱体积的含0.3％三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物。
(5)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附；
(6)然后用25％的乙醇溶液(含0.3％三氟乙酸)洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，每200mL收集一次，至无色为止；
(7)截取总洗脱液的前20％作为提取物样本，立即冷冻干燥，封存，得蓝莓花青素提取物。
对比例2
蓝莓冻干果粉的制备：
取冷冻蓝莓，送入冷冻干燥机的干燥仓，-20～-25℃预冻，真空度1～20pa保持恒温2-20 小时；在-20～-25℃，进行粉碎得到粗制蓝莓冻干果粉；将经过杀菌处理后的蓝莓冻干果粉装入密封袋中，进行密封和包装处理。
实验例
使用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病小鼠模型，建模使用体重20g左右的健康雄性昆明小鼠，造模成功的高血糖小鼠的血糖值在11-26mmol/L之间。
实验组有5组：将高血糖小鼠按照体重和血糖浓度平均分为5组，包括实施例1组，对比例1组，对比例2组，模型对照组和阳性对照组，每组10只，采用灌胃的方式给药，
实施例1组、对比例1组和对比例2组分别给予实施例1、对比例1和对比例2制备的蓝莓花青素提取物，给药量均为200mg/kg；模型对照组给予蒸馏水，阳性对照组给予阿卡波糖，100mg/kg；空白对照组设置有1组：给予蒸馏水。
实验组小鼠经过糖尿病建模后出现糖尿病症状，体重变轻，精神萎靡，反应迟钝，毛竖无光泽，饮食增多，饮水量增大，尿量明显增加。五组实验组灌胃4周，每周记录小鼠的血糖值，得到结果如下：
注：**p＜0.01表示与空白组相比极为显著，*p＜0.05表示显著；##p＜0.01表示与模型组相比极为显著，#p＜0.05表示显著。
从表1中可以看出，实施例1组和对比例1组制备的蓝莓花青素提取物，都对小鼠的血糖值有一定的改善作用，但是相比之下实施例1组对小鼠血糖值的改善更加明显，并且可以看出对比例2对小鼠血糖值的改善不明显。
并且五组实验组经过灌胃4周以后，阳性对照组和实施例1组的小鼠糖尿病症状减轻，体重在灌胃后期不再减少并开始上升，精神状态也得到改善；表明实施例1的蓝莓花青素提取物能够改善糖尿病小鼠的症状，具有良好的应用前景。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种蓝莓富花青素提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取冷冻蓝莓与三氟乙酸酸化的乙醇混合浸没，打浆至均匀，加热条件下真空抽提，然后冷却至室温；
(2)浆液过滤后蒸发浓缩获得浓缩提取物，向其中加入乙酸乙酯混合，离心萃取，得水相提取物；
(3)将水相提取物用大孔树脂进行纯化，使用三氟乙酸的乙醇溶液进行洗脱，蒸发掉洗脱液，冷冻得到富酚提取物；
(4)将富酚提取物用Sephadex LH-20填充柱吸附，使用乙醇溶液进行洗脱，当有颜色的物质开始从色谱柱中洗脱时，分阶段收集，至无色为止；
(5)截取总洗脱液的前20-30％作为提取物样本，立即冷冻干燥，得到冻干样本；
(6)冻干样本溶解于含柠檬酸的水溶液中，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、和羧甲基纤维素钠乳化，均质后真空灌装或二次冻干，封存。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述三氟乙酸酸化的乙醇中三氟乙酸与乙醇的体积比为1:200-500。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，真空抽提的温度为40℃～60℃，时间为1～3h。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，蒸发温度低于40℃，蒸发至原体积的1/3～1/5；
或者，加入乙酸乙酯的量为浓缩提取物的3-6倍。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述三氟乙酸的乙醇溶液中三氟乙酸的体积百分含量为0.2-0.5％；
或者，所述洗脱为洗脱30～50个柱体积。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述乙醇溶液为体积分数15-35％的乙醇溶液，且其中含有0.2-0.5％的三氟乙酸；
或者，分阶段收集为每200mL收集一次。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，含柠檬酸的水溶液中含有质量分数0.3-0.8％的柠檬酸。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠的含量为0.07-0.20mg/ml。
9.一种权利要求1-8任一权利要求所述制备方法制备的蓝莓富花青素提取物。
10.一种降糖功能食品配方，其特征在于，所述配方中包括权利要求9所述的蓝莓富花青素提取物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011636751.4A CN112778260A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011636751.4A CN112778260A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112778260A true CN112778260A (zh) | 2021-05-11 |
Family
ID=75754956
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011636751.4A Pending CN112778260A (zh) | 2020-12-31 | 2020-12-31 | 一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112778260A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113826887A (zh) * | 2021-09-22 | 2021-12-24 | 湖州草本连生物科技有限公司 | 降压降脂降血糖营养粉、植物提取物及其应用 |
| CN114601859A (zh) * | 2022-04-27 | 2022-06-10 | 深圳海创生物科技有限公司 | 一种蓝莓提取物及其制备方法与在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020055471A1 (en) * | 2000-08-31 | 2002-05-09 | Bailey David T. | Efficient method for producing compositions enriched in anthocyanins |
| CN101914304A (zh) * | 2010-07-30 | 2010-12-15 | 合肥工业大学 | 一种蓝莓花青素的提取方法 |
| CN102321062A (zh) * | 2011-06-08 | 2012-01-18 | 吉林市新科奇保健食品有限公司 | 蓝莓酒渣中花青素分离、纯化及检验方法 |
| CN106214731A (zh) * | 2016-08-29 | 2016-12-14 | 盛林蓝莓集团股份有限公司 | 蓝莓原花青素生物提取方法 |
| CN109553599A (zh) * | 2019-01-17 | 2019-04-02 | 江苏省农业科学院 | 一种蓝莓花青素及其制备方法和应用 |
| CN111803534A (zh) * | 2020-06-15 | 2020-10-23 | 浙江科技学院 | 一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法 |
-
2020
- 2020-12-31 CN CN202011636751.4A patent/CN112778260A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020055471A1 (en) * | 2000-08-31 | 2002-05-09 | Bailey David T. | Efficient method for producing compositions enriched in anthocyanins |
| CN101914304A (zh) * | 2010-07-30 | 2010-12-15 | 合肥工业大学 | 一种蓝莓花青素的提取方法 |
| CN102321062A (zh) * | 2011-06-08 | 2012-01-18 | 吉林市新科奇保健食品有限公司 | 蓝莓酒渣中花青素分离、纯化及检验方法 |
| CN106214731A (zh) * | 2016-08-29 | 2016-12-14 | 盛林蓝莓集团股份有限公司 | 蓝莓原花青素生物提取方法 |
| CN109553599A (zh) * | 2019-01-17 | 2019-04-02 | 江苏省农业科学院 | 一种蓝莓花青素及其制备方法和应用 |
| CN111803534A (zh) * | 2020-06-15 | 2020-10-23 | 浙江科技学院 | 一种提高生物利用度的蓝莓活性成分包埋物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| ERLEI WANG等: "Isolation of high-purity anthocyanin mixtures and monomers fromblueberries using combined chromatographic techniques", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 * |
| 刘政: "《143种食物健康指南》", 31 January 2012, 四川人民出版社 * |
| 吴正红: "《药剂学》", 30 April 2020, 中国医药科技出版社 * |
| 矫馨瑶等: "蓝莓花青素的研究进展", 《中国果蔬》 * |
| 童彤: "冷冻蓝莓抗氧化物含量高", 《中国果业信息》 * |
| 赵慧芳等: "基于抗氧化活性分析的蓝莓多酚提取工艺", 《食品工业科技》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113826887A (zh) * | 2021-09-22 | 2021-12-24 | 湖州草本连生物科技有限公司 | 降压降脂降血糖营养粉、植物提取物及其应用 |
| CN114601859A (zh) * | 2022-04-27 | 2022-06-10 | 深圳海创生物科技有限公司 | 一种蓝莓提取物及其制备方法与在制备具有降血脂和/或减肥作用的药物或食品中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103230473B (zh) | 黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用 | |
| JP6053873B2 (ja) | サポニンの生体利用率増進組成物 | |
| CN1473594A (zh) | 玛咖根提取物 | |
| CN103768152B (zh) | 桂花苯乙醇苷提取物及其制备方法和用途 | |
| CN112778260A (zh) | 一种蓝莓富花青素提取物及其制备方法 | |
| CN110559332A (zh) | 一种灵芝灰树花降血糖组合物及其制备方法和用途 | |
| CN106136245A (zh) | 一种枸杞黄酮咀嚼片 | |
| CN112961262A (zh) | 一种西番莲果皮酸性多糖、制备方法及其应用 | |
| CN111700902A (zh) | 一种山楂原花青素-枣多糖组合物及其制备方法 | |
| CN108434191A (zh) | 一种具有减肥降糖降脂作用的组合物及其制备方法 | |
| CN109232757B (zh) | 核桃叶多糖提取物及应用 | |
| CN114507297B (zh) | 一种桦树茸多糖提取物的制备及应用 | |
| CN110179128A (zh) | 一种汉麻籽多肽复方肠溶胶囊及其制备方法 | |
| JP3507115B2 (ja) | バナバ葉抽出物と抗糖尿病剤 | |
| CN113694104B (zh) | 一种对化学性肝损伤有保护作用、促进肝脏再生的中药组合物、制备方法及其用途 | |
| CN115844937A (zh) | 一种解酒护脑功能的苦苣菜提取物的制备方法及应用 | |
| CN108853184B (zh) | 一种青钱柳和多穗柯提取物组合 | |
| CN104435072B (zh) | 一种具有辅助降血糖、降血脂的提取物及其制备方法 | |
| CN105963330A (zh) | 神秘果制剂及其应用 | |
| CN113925948A (zh) | 生姜总提取物或其活性成分的用途、药物组合物和制法 | |
| CN111920799A (zh) | 一种苦乐果有效成分组合物及其制备方法和应用 | |
| CN114292343B (zh) | 一种白蜡多年菌胞外多糖和胞内多糖制备方法及其在调节肠道微生物菌群与降血糖应用 | |
| CN101804128B (zh) | 一种治疗炎症性肠病的药物组合物及该组合物在制备治疗炎症性肠病药物中的用途 | |
| CN108743658B (zh) | 一种青钱柳和核桃叶提取物组合 | |
| CN115212247B (zh) | 一种白刺花花制备物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210511 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |