CN112694622B - 一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（n-异丙基丙烯酰胺）凝胶 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种温敏型木立芦荟‑壳聚糖‑聚(N‑异丙基丙烯酰胺)凝胶及其制备方法，由以下原料组成：水100份，聚(N‑异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖1.2～1.8份，鱼内脏磷脂0.08～0.1份，木立芦荟提取物0.15～0.30份等；本发明以丙烯酸改性壳聚糖，在壳聚糖结构中引入不饱和烯烃，进一步的，与N‑异丙基丙烯酰胺在引发剂和促进剂作用下聚合，制备温度敏感的聚(N‑异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖，该材料中的聚(N‑异丙基丙烯酰胺)为温度敏感部分，在人体36～37℃的环境中能够持续较长的凝胶时间，且N‑异丙基丙烯酰胺与丙烯酸改性壳聚糖中的不饱和烯烃在聚合时，形成交联结构，有利于凝胶时间的增长。
Description
技术领域
本发明涉及药用凝胶技术领域，具体说是一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N- 异丙基丙烯酰胺)凝胶，本发明还包括该凝胶的制备方法。
背景技术
口腔疾病，包括龋齿、口腔溃疡、牙龈炎、牙周炎等，都是由于细菌感染引起。正常情况下人口中含有各种微生物，它们之期间保持动态平衡，异常情况下，特别是近几年抗生素滥用，人口中的微生物菌群易失调，破坏口腔正常的生态平衡，导致个别有害菌过度繁殖，造成口腔疾病。因此，从天然植物或动物中寻找具有抑菌作用的物质，开发用于口腔细菌感染的有效药物，成为当今医药界科学家共同面临的科学问题之一。
木立芦荟原产于南非，进入中国后被广泛栽培。木立芦荟鲜叶含有大量原始的天然生物水，在美容保健方面具有非常好的效果。木立芦荟的叶中还含有大量的活性物质，包括多种维生素、氨基酸和粘多糖，还含芦荟宁、芦荟大黄素、芦荟苦素、芦荟皂甙等活性物质。这些化合物具有较好的抗菌抑菌、抗氧化、抗肿瘤的作用，可用于制备具有抗菌抑菌效果的药物、药用辅料、化妆品等。已有研究者将木立芦荟提取物和多糖类化合物结合，制备芦荟凝胶，用于化妆品。但是这些凝胶产品对温度不具备敏感性，在人体温度下凝胶效果差，特别是口腔中含有大量的水分，凝胶持续时间短，不能对口腔形成较好的保护作用。因此，开发温度敏感的、在口腔内持续时间长的凝胶产品迫在眉睫。
发明内容
为解决上述问题，开发一种温度敏感的木立芦荟凝胶产品，在人体口腔内能够有较长的凝胶时间、且具有较好的抗菌抑菌效果，避免因抗生素滥用导致的口腔生态平衡破坏和各种口腔疾病，本发明的目的是提供一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚 (N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：
一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶，以重量份计，由以下原料组成：水100份，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖1.2～1.8份，鱼内脏磷脂0.08～0.1份，木立芦荟提取物0.15～0.30份，海藻酸钠0.4～0.6份，透明质酸钠0.2～0.6份，尿囊素0.03～0.05份，羟基苯乙酮0.02～0.03份和甘油2～4份；
其中，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖按照如下方法制备：
①将壳聚糖加入到溶剂一中，加入丙烯酸，缩合剂和有机碱，维持温度15～45℃，搅拌反应3～12小时，所得混合液倾入到溶剂二中，搅拌10～30分钟，过滤，滤饼用洗涤剂一洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和N-异丙基丙烯酰胺，加入到水中，在 200转/分的转速下搅拌15～25分钟，向反应液中通氮气30～40分钟，升温至20～40℃，加入引发剂和促进剂，在200转/分的转速下搅拌8～16小时，过滤，滤饼依次用洗涤剂二和洗涤剂三洗涤，干燥，得聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖；
其中壳聚糖、溶剂一、丙烯酸、缩合剂、有机碱、溶剂二、洗涤剂一、N-异丙基丙烯酰胺、水、引发剂、促进剂、洗涤剂二、洗涤剂三的质量比为1：40～120： 0.05～0.2：0.04～0.15：0.005～0.01：300～500：30～60：1.2～1.6：50～60：0.002～0.008： 0.001～0.004：80～100：50～60；
所述的溶剂一是N,N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜；
所述的缩合剂是二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；
所述的有机碱是4-二甲基氨基吡啶或三乙胺或吡啶；
所述的溶剂二是甲醇或乙醇；
所述的洗涤剂一是乙醇和水的混合物，乙醇和水的体积比是1：1～3；
所述的引发剂是过硫酸铵或过硫酸钾或过硫酸钠；
所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺或N,N-双(2-羟丙基)-对甲苯胺；
所述的洗涤剂二是水；
所述的洗涤剂三是乙醇或甲醇。
优选的，所述的壳聚糖平均分子量是3～5万，脱乙酰度大于95％。
进一步优选的，所述的溶剂一是N,N-二甲基甲酰胺。
进一步优选的，所述的缩合剂是二异丙基碳二亚胺。
进一步优选的，所述的有机碱是4-二甲基氨基吡啶。
进一步优选的，所述的溶剂二是乙醇。
进一步优选的，所述的引发剂是过硫酸铵。
进一步优选的，所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺。
进一步优选的，所述的洗涤剂三是乙醇。
本发明还包括一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶的制备方法，包括以下步骤：
以重量份计，将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖1.2～1.8份、鱼内脏磷脂 0.08～0.1份和木立芦荟提取物0.15～0.30份加入到100份水中，超声5～15分钟，升温至30～35℃，搅拌2～4小时，降温至10～20℃，加入海藻酸钠0.4～0.6份和透明质酸钠0.2～0.6份，搅拌2～4小时，升温至22～28℃，加入尿囊素0.03～0.05份、羟基苯乙酮0.02～0.03份和甘油2～4份，搅拌1～3小时，在高压均质机上均质10～20分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
本发明相比现有技术具有以下优点：
本发明以丙烯酸改性壳聚糖，在壳聚糖结构中引入不饱和烯烃，进一步的，与 N-异丙基丙烯酰胺在引发剂和促进剂作用下聚合，制备温度敏感的聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖，该材料中的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为温度敏感部分，在人体36～37℃的环境中能够持续较长的凝胶时间，且N-异丙基丙烯酰胺与丙烯酸改性壳聚糖中的不饱和烯烃在聚合时，形成交联结构，有利于凝胶时间的增长。
本发明向凝胶中添加了鱼内脏磷脂，鱼内脏磷脂从废弃鱼内脏中提取，充分利用了餐饮业中产生的废弃鱼内脏，变废为宝，同时鱼内脏磷脂为两亲性分子结构，亲水部分易于和芦荟提取物中的亲水性化合物结合，而疏水部分易于和芦荟提取物中的疏水性化合物结合，鱼内脏磷脂的加入可使亲水性和疏水性化合物结合形成均一的乳液，使体系稳定性更好；壳聚糖是一种纯天然的高分子多糖，已经被证明具有不错的抗菌效果，壳聚糖和木立芦荟提取物复配，可有效抑制各种细菌的再生和繁殖，保持口腔卫生，也避免了因抗生素滥用导致的口腔生态平衡破坏和各种口腔疾病。
本发明还向凝胶中添加了海藻酸钠和透明质酸钠，海藻酸钠从褐藻类的海带或马尾藻中提取得到，在水溶液具有较高的黏度，其中的羧基负离子易和壳聚糖中未反应的氨基通过静电作用结合，促进凝胶化，同时具有稳定、乳化作用，促进凝胶体系中各种复杂的成分形成均一的凝胶溶液，透明质酸钠中同样具有羧基负离子，除具有与海藻酸钠类似的作用之外，还具有促进伤口愈合、清除氧自由基、提供营养等作用。
本发明在制备一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶时，首先将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖、鱼内脏磷脂和木立芦荟提取物在水中混合，由于聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖为大分子交联结构，其在水中溶胀时，可通过酰胺键的氢键作用有效吸附木立芦荟提取物中的化学成分，使这些化学成分在凝胶的网状交联结构中更加稳定，鱼内脏磷脂也进一步使其中的亲水和疏水化合物更好的结合，形成均一凝胶溶液，进一步的向凝胶中加入剩余组分，通过搅拌和均质形成稳定的、均一的凝胶溶液。
具体实施方式
本发明的目的是提供一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶，通过以下技术方案实现：
一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶，以重量份计，由以下原料组成：水100份，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖1.2～1.8份，鱼内脏磷脂0.08～0.1份，木立芦荟提取物0.15～0.30份，海藻酸钠0.4～0.6份，透明质酸钠0.2～0.6份，尿囊素0.03～0.05份，羟基苯乙酮0.02～0.03份和甘油2～4份；
其中，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖按照如下方法制备：
①将壳聚糖加入到溶剂一中，加入丙烯酸，缩合剂和有机碱，维持温度15～45℃，搅拌反应3～12小时，所得混合液倾入到溶剂二中，搅拌10～30分钟，过滤，滤饼用洗涤剂一洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和N-异丙基丙烯酰胺，加入到水中，在 200转/分的转速下搅拌15～25分钟，向反应液中通氮气30～40分钟，升温至20～40℃，加入引发剂和促进剂，在200转/分的转速下搅拌8～16小时，过滤，滤饼依次用洗涤剂二和洗涤剂三洗涤，干燥，得聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖；
其中壳聚糖、溶剂一、丙烯酸、缩合剂、有机碱、溶剂二、洗涤剂一、N-异丙基丙烯酰胺、水、引发剂、促进剂、洗涤剂二、洗涤剂三的质量比为1：40～120： 0.05～0.2：0.04～0.15：0.005～0.01：300～500：30～60：1.2～1.6：50～60：0.002～0.008： 0.001～0.004：80～100：50～60；
所述的溶剂一是N,N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜；
所述的缩合剂是二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；
所述的有机碱是4-二甲基氨基吡啶或三乙胺或吡啶；
所述的溶剂二是甲醇或乙醇；
所述的洗涤剂一是乙醇和水的混合物，乙醇和水的体积比是1：1～3；
所述的引发剂是过硫酸铵或过硫酸钾或过硫酸钠；
所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺或N,N-双(2-羟丙基)-对甲苯胺；
所述的洗涤剂二是水；
所述的洗涤剂三是乙醇或甲醇。
本发明以丙烯酸改性壳聚糖，在壳聚糖结构中进一步引入不饱和烯烃，进一步的，与N-异丙基丙烯酰胺在引发剂和促进剂作用下聚合，制备温度敏感的聚(N- 异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖，该材料中的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为温度敏感部分，在人体36～37度的环境中能够持续较长的凝胶时间，且N-异丙基丙烯酰胺与丙烯酸改性壳聚糖中的不饱和烯烃在聚合时，形成交联结构，有利于凝胶时间的增长。
优选的，所述的壳聚糖平均分子量是3～5万，脱乙酰度大于95％。
进一步优选的，所述的溶剂一是N,N-二甲基甲酰胺。
进一步优选的，所述的缩合剂是二异丙基碳二亚胺。
进一步优选的，所述的有机碱是4-二甲基氨基吡啶。
进一步优选的，所述的溶剂二是乙醇。
进一步优选的，所述的引发剂是过硫酸铵。
进一步优选的，所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺。
进一步优选的，所述的洗涤剂三是乙醇。
本发明还包括一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶的制备方法，包括以下步骤：
以重量份计，将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖1.2～1.8份、鱼内脏磷脂 0.08～0.1份和木立芦荟提取物0.15～0.30份加入到100份水中，超声5～15分钟，升温至30～35℃，搅拌2～4小时，降温至10～20℃，加入海藻酸钠0.4～0.6份和透明质酸钠0.2～0.6份，搅拌2～4小时，升温至22～28℃，加入尿囊素0.03～0.05份、羟基苯乙酮0.02～0.03份和甘油2～4份，搅拌1～3小时，在高压均质机上均质10～20分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
本发明向凝胶中添加了鱼内脏磷脂，鱼内脏磷脂从废弃鱼内脏中提取，充分利用了餐饮业中产生的废弃鱼内脏，变废为宝，同时鱼内脏磷脂为两亲性分子结构，其中的亲水部分更易于和芦荟提取物中的亲水性化合物结合，而疏水部分易于和芦荟提取物中的疏水性化合物结合，鱼内脏磷脂的加入可使亲水性和疏水性化合物结合形成均一的乳液，是体系具有更好的稳定性；壳聚糖是一种纯天然的高分子多糖，已经被证明具有不错的抗菌效果，壳聚糖和木立芦荟提取物复配，可有效抑制各种细菌的再生和繁殖，保持口腔卫生，也避免了因抗生素滥用导致的口腔生态平衡破坏和各种口腔疾病。
本发明还向凝胶中添加了海藻酸钠和透明质酸钠，海藻酸钠从褐藻类的海带或马尾藻中提取得到，在水溶液具有较高的黏度，其中的羧基负离子易和壳聚糖中未反应的氨基通过静电作用结合，促进凝胶化，同时具有稳定、乳化作用，促进凝胶体系中各种复杂的成分形成均一的凝胶溶液，透明质酸钠中同样具有羧基负离子，除具有与海藻酸钠类似的作用之外，还具有促进伤口愈合、清除氧自由基、提供营养等作用。
本发明在制备一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶时，首先将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖、鱼内脏磷脂和木立芦荟提取物在水中混合，由于聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖为大分子交联结构，其在水中溶胀时，可通过酰胺键的氢键作用有效吸附木立芦荟提取物中的化学成分，使这些化学成分在凝胶的网状交联结构中更加稳定，鱼内脏磷脂也进一步使其中的亲水和疏水化合物更好的结合，形成均一凝胶溶液，进一步的向凝胶中加入剩余组分，通过搅拌和均质形成稳定的、均一的凝胶溶液。
以下结合具体实施例来对本发明作进一步的描述。
实施例1
木立芦荟提取物的制备
按照专利CN112057892A公开的方法制备芦荟提取物：将木立芦荟鲜叶1000g 去皮、洗净、杀菌，然后粉碎、研磨形成芦荟浆，转移至稳定化储罐中，在60℃下恒温1小时，进行真空气流破壁，脱色，过滤，滤液再次转移至稳定化储罐中，采用超声波循环提取法提取10分钟，提取温度20℃，功率100W，投料比1％，超声波循环提取后，混合液在5000转/分的转速下离心15分钟，取上清液，减压浓缩至原体积的1/6，加入5000g乙醇沉淀，然后在8000转/分的转速下离心5分钟，取上清液，减压浓缩出去溶剂，所得固体粉碎得芦荟干粉，将干粉转移至萃取罐中，加入1000g 90℃的热水萃取，萃取压力为6Mpa，萃取时间5分钟，所得萃取液中加入10g氯化钠破乳，搅拌溶解，加入1000g乙醇，搅拌20分钟，静置30分钟，分层后取上层溶液，减压浓缩得芦荟提取物。
实施例2
鱼内脏磷脂的制备
鱼内脏磷脂按照文献(食品研究与开发，2012年，33卷1期，51页：鮟鱇鱼加工下脚料中卵磷脂的提取工艺)报道的方法制备：取鱼内脏洗净，70℃烘干4小时，粉碎机粉碎，得鱼内脏干粉；取50g鱼内脏干粉，加入500mL丙酮，恒温搅拌 3小时，过滤，将滤渣加入到500mL 90％的乙醇水溶液中，维持50℃搅拌1.5小时，过滤，滤液减压浓缩，得鱼内脏磷脂。
实施例3
聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖的制备：
①将10g壳聚糖加入到400g N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.5g丙烯酸，0.4g 二异丙基碳二亚胺和0.05g 4-二甲基氨基吡啶，维持温度15℃，搅拌反应3小时，所得混合液倾入到3000g甲醇中，搅拌10分钟，过滤，滤饼用300g乙醇和水的混合物(乙醇和水的体积比是1：1)洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和12g N-异丙基丙烯酰胺，加入到500g 水中，在200转/分的转速下搅拌15分钟，向反应液中通氮气30分钟，升温至20℃，加入0.02g过硫酸铵和0.01g N,N,N’,N’-四甲基乙二胺，在200转/分的转速下搅拌 8小时，过滤，滤饼依次用800g水和500g乙醇洗涤，干燥，得聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖。
实施例4
聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖的制备：
①将10g壳聚糖加入到1200g二甲亚砜中，加入2g丙烯酸，1.5g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和0.1g三乙胺，维持温度45℃，搅拌反应12小时，所得混合液倾入到5000g乙醇中，搅拌30分钟，过滤，滤饼用600g乙醇和水的混合物(乙醇和水的体积比是1：3)洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和16g N-异丙基丙烯酰胺，加入到600g 水中，在200转/分的转速下搅拌25分钟，向反应液中通氮气40分钟，升温至40℃，加入0.08g过硫酸钾和0.04g N,N-双(2-羟丙基)-对甲苯胺，在200转/分的转速下搅拌16小时，过滤，滤饼依次用1000g水和600g甲醇洗涤，干燥，得聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖。
实施例5
聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖的制备：
①将10g壳聚糖加入到800g N,N-二甲基甲酰胺中，加入1.2g丙烯酸，1.1g 二异丙基碳二亚胺和0.08g 4-二甲基氨基吡啶，维持温度30℃，搅拌反应8小时，所得混合液倾入到4000g乙醇中，搅拌20分钟，过滤，滤饼用450g乙醇和水的混合物(乙醇和水的体积比是1：2)洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和14g N-异丙基丙烯酰胺，加入到550g 水中，在200转/分的转速下搅拌20分钟，向反应液中通氮气35分钟，升温至30℃，加入0.05g过硫酸铵和0.02g N,N,N’,N’-四甲基乙二胺，在200转/分的转速下搅拌 12小时，过滤，滤饼依次用900g水和550g乙醇洗涤，干燥，得聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖。
实施例6
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶由以下原料组成：
水1000g，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖12g，鱼内脏磷脂0.8g，木立芦荟提取物1.5g，海藻酸钠4g，透明质酸钠2g，尿囊素0.3g，羟基苯乙酮0.2g和甘油20g；
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶的制备方法，包括以下步骤：将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖12g、鱼内脏磷脂0.8g和木立芦荟提取物1.5g加入到1000g水中，超声5分钟，升温至30℃，搅拌2小时，降温至10℃，加入海藻酸钠4g和透明质酸钠2g，搅拌2小时，升温至22℃，加入尿囊素0.3g、羟基苯乙酮0.2g和甘油20g，搅拌1小时，在高压均质机上均质10分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
实施例7
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶由以下原料组成：
水1000g，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖18g，鱼内脏磷脂1g，木立芦荟提取物3g，海藻酸钠6g，透明质酸钠6g，尿囊素0.5g，羟基苯乙酮0.3g和甘油 40g；
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶的制备方法，包括以下步骤：：将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖18g、鱼内脏磷脂1g和木立芦荟提取物3g加入到1000g水中，超声15分钟，升温至35℃，搅拌4小时，降温至20℃，加入海藻酸钠6g和透明质酸钠6g，搅拌4小时，升温至28℃，加入尿囊素0.5g、羟基苯乙酮0.3g和甘油40g，搅拌3小时，在高压均质机上均质20分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
实施例8
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶由以下原料组成：
水1000g，聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖15g，鱼内脏磷脂0.9g，木立芦荟提取物2.2g，海藻酸钠5g，透明质酸钠4g，尿囊素0.4g，羟基苯乙酮0.25g和甘油30g；
温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶的制备方法，包括以下步骤：：将聚(N-异丙基丙烯酰胺)改性壳聚糖15g、鱼内脏磷脂0.9g和木立芦荟提取物2.2g加入到1000g水中，超声10分钟，升温至33℃，搅拌3小时，降温至 15℃，加入海藻酸钠5g和透明质酸钠4g，搅拌3小时，升温至25℃，加入尿囊素0.4g、羟基苯乙酮0.25g和甘油30g，搅拌2小时，在高压均质机上均质15分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚(N-异丙基丙烯酰胺)凝胶。
凝胶状态实验
考察本发明实施例6、7、8制备的芦荟凝胶的温度敏感性，观察凝胶在低温、 36.5℃和高温条件下的凝胶状态，对照组温敏型凝胶按照专利CN109568649A的公布方法制备，结果见表1。
表1.凝胶稳定性实验
如表1所示，本发明的凝胶在低温(0℃)和高温(60℃)条件下为粘液状态，而在人体温度36.5℃下呈较好的凝胶状态，这说明本发明的凝胶适合于人体温度，在人体温度下能够维持较好的凝胶状态和较长的凝胶时间，而对照组凝胶在低温下为粘液状态，在36.5℃和高温(60℃)条件下为凝胶状态，说明该凝胶温度敏感性一般。
抗菌试验
考察本发明实施例6、7、8制备的芦荟凝胶对金黄色葡萄球菌ATCC6538和白色念珠菌ATCC10231的抑制活性，具体方法如下：取本发明实施例6、7、8制备的芦荟凝胶1mL，加水稀释至10mL，将金黄色葡萄球菌ATCC6538和白色念珠菌 ATCC10231进行液相培养，测定培养液的OD值，至OD值为1时，取200μL培养液，加入到培养皿中，培养皿中含有琼脂培养基，然后加入100μL本发明实施例6、7、8制备的芦荟凝胶，培养24小时，观察菌落生长状况，取三次测定结果的平均值。对照组凝胶按照专利CN109568649A公开的方法制备，结果见2。
表2.抗菌试验结果
如表2所示，本发明实施例6、7、8制备的芦荟凝胶具有较好的抑菌效果，24 小时后的抑菌范围约在1.5cm左右，而对照组24小时后的抑菌范围均大于3cm。
Claims (6)
1.一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶，其特征在于：以重量份计，由以下原料组成：水100份，聚（N-异丙基丙烯酰胺）改性壳聚糖1.2~1.8份，鱼内脏磷脂0.08~0.1份，木立芦荟提取物0.15~0.30份，海藻酸钠0.4~0.6份，透明质酸钠0.2~0.6份，尿囊素0.03~0.05份，羟基苯乙酮0.02~0.03份和甘油2~4份；
其中，聚（N-异丙基丙烯酰胺）改性壳聚糖按照如下方法制备：
①将壳聚糖加入到溶剂一中，加入丙烯酸，缩合剂和有机碱，维持温度15~45℃，搅拌反应3~12小时，所得混合液倾入到溶剂二中，搅拌10~30分钟，过滤，滤饼用洗涤剂一洗涤，干燥，得丙烯酸改性壳聚糖；
②取步骤①制备的丙烯酸改性壳聚糖和N-异丙基丙烯酰胺，加入到水中，在200转/分的转速下搅拌15~25分钟，向反应液中通氮气30~40分钟，升温至20~40℃，加入引发剂和促进剂，在200转/分的转速下搅拌8~16小时，过滤，滤饼依次用洗涤剂二和洗涤剂三洗涤，干燥，得聚（N-异丙基丙烯酰胺）改性壳聚糖；
其中壳聚糖、溶剂一、丙烯酸、缩合剂、有机碱、溶剂二、洗涤剂一、N-异丙基丙烯酰胺、水、引发剂、促进剂、洗涤剂二、洗涤剂三的质量比为1：40~120：0.05~0.2：0.04~0.15：0.005~0.01：300~500：30~60：1.2~1.6：50~60：0.002~0.008：0.001~0.004：80~100：50~60；
所述的溶剂一是N,N-二甲基甲酰胺；
所述的缩合剂是二异丙基碳二亚胺；
所述的有机碱是4-二甲基氨基吡啶；
所述的溶剂二是乙醇；
所述的洗涤剂一是乙醇和水的混合物，乙醇和水的体积比是1：1~3；
所述的引发剂是过硫酸铵或过硫酸钾或过硫酸钠；
所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺或N,N-双(2-羟丙基)-对甲苯胺；
所述的洗涤剂二是水；
所述的洗涤剂三是乙醇或甲醇。
2.根据权利要求1所述的一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶，所述的壳聚糖平均分子量是3~5万，脱乙酰度大于95%。
3.根据权利要求1所述的一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶，其特征在于：所述的引发剂是过硫酸铵。
4.根据权利要求1所述的一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶，其特征在于：所述的促进剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺。
5.根据权利要求1所述的一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶，其特征在于：所述的洗涤剂三是乙醇。
6.权利要求1所述的一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
以重量份计，将聚（N-异丙基丙烯酰胺）改性壳聚糖1.2~1.8份、鱼内脏磷脂0.08~0.1份和木立芦荟提取物0.15~0.30份加入到100份水中，超声5~15分钟，升温至30~35℃，搅拌2~4小时，降温至10~20℃，加入海藻酸钠0.4~0.6份和透明质酸钠0.2~0.6份，搅拌2~4小时，升温至22~28℃，加入尿囊素0.03~0.05份、羟基苯乙酮0.02~0.03份和甘油2~4份，搅拌1~3小时，在高压均质机上均质10~20分钟，得一种温敏型木立芦荟-壳聚糖-聚（N-异丙基丙烯酰胺）凝胶。
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