CN112662580B

CN112662580B - 一种嗜氧类芽孢杆菌及其应用

Info

Publication number: CN112662580B
Application number: CN202011322992.1A
Authority: CN
Inventors: 张维; 林敏�; 柯秀彬; 李江; 陈明; 陆伟; 周正富; 王劲
Original assignee: Biotechnology Research Institute of CAAS
Current assignee: Biotechnology Research Institute of CAAS
Priority date: 2019-11-27
Filing date: 2020-11-23
Publication date: 2021-12-24
Anticipated expiration: 2040-11-23
Also published as: CN112662580A

Abstract

本发明提供了一种嗜氧类芽孢杆菌，该嗜氧类芽孢杆菌的分类命名为Paenibacillus aerobic，并且，该类芽孢杆菌的保藏编号为GDMCC NO：60620；该嗜氧类芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。该嗜氧类芽孢杆菌R14具有良好的氧化抗性，可以作为抗氧化功能菌株；也可以参与构建具有抗氧化功能的转基因生物；并且在诱变育种和改良植物的抗氧化功能性状方面具有潜在价值；同时该菌株具有良好的抗渗透能力，可以参与构建具有耐渗透功能工程菌株。

Description

一种嗜氧类芽孢杆菌及其应用

技术领域

本申请涉及微生物技术领域，具体地，涉及一种嗜氧类芽孢杆菌及其应用。

背景技术

适宜的环境条件是植物良好生长的前提，植物受到非生物胁迫(氧化、高渗透等)时，其生长会受到抑制，在氧化胁迫条件下会造成体内自由基浓度大大增加。其中，氧化胁迫产生活性氧(ROS)对基因组DNA和细胞内的生物大分子(尤其是蛋白质)均会造成严重损伤，而细菌通过增加解毒酶和修复蛋白的表达来适应活性氧(ROS)水平的升高。筛选具有抗氧化性能的菌株，鉴定其相关功能基因，进而转化入植物中，有助于培育具有抗逆性能的植物，以适应外界不断变化的气候环境，具有重要的现实意义。

渗透压是影响细菌生长重要因素之一。在发酵工程中，细菌的耐渗透能力，影响着发酵产物最后的产量和质量。微生物细胞为了生存和生长，胞质内的渗透压保持在280-320mosM，平均为300mosM左右，当培养基溶液的渗透压高于320mosM，细胞会发生收缩产生质壁分离现象。细胞生长减慢，在低生长速率情况下，大部分的基因会停止表达，不适合用于发酵工程。目前，发酵工程中最常用的是地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，但是随着发酵时间的延长，其生产效率也会有所降低。因此，寻找耐渗透能力强的菌株至关重要。

此外，类芽孢杆菌属菌株在酶学上有很大的潜在应用潜力，比如可以使用类芽孢杆菌Paenibacillus pasadenensis CS0611，开发、生产脂肪酶，所以分离鉴定新的内芽孢杆菌对农业生产具有重要意义。

发明内容

本公开的目的是提供一种具有抗氧化和耐渗透能力的微生物。

为了实现上述目的，本公开提供了一种嗜氧类芽孢杆菌，该嗜氧类芽孢杆菌的分类命名为Paenibacillus aerobic，并且，该类芽孢杆菌的保藏编号为 GDMCC NO：60620。

该嗜氧类芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

另一方面，本公开提供了如上所述的嗜氧类芽孢杆菌作为抗氧化功能菌株的应用。

再一方面，本公开提供了如上所述的嗜氧类芽孢杆菌在构建具有抗氧化功能的转基因生物方面的应用。

再一方面，本公开提供了如上所述的嗜氧类芽孢杆菌在诱变育种和改良植物的抗氧化功能性状方面的潜在应用。

再一方面，本公开提供了如上所述的嗜氧类芽孢杆菌作为构建具有耐渗透功能工程菌株的潜在应用。

再一方面，本公开提供了一种抗氧化蛋白，该抗氧化蛋白来源于如上所述的嗜氧类芽孢杆菌，并且该抗氧化蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

再一方面，本公开提供了一种抗氧化基因，该抗氧化基因来源于如上所述的嗜氧类芽孢杆菌，该抗氧化基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，并且该抗氧化基因编码上述的抗氧化蛋白。

通过上述技术方案，本公开提供了一种嗜氧类芽孢杆菌R14 (Paenibacillusaerobic)，该嗜氧类芽孢杆菌R14具有良好的氧化抗性，可以作为抗氧化功能菌株；也可以参与构建具有抗氧化功能的转基因生物；并且在诱变育种和改良植物的抗氧化功能性状方面具有潜在价值；同时该菌株具有良好的抗渗透能力。

本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

生物材料保藏信息

嗜氧类芽孢杆菌R14，分类命名Paenibacillus aerobic，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2019年3月29日，保藏编号为GDMCC NO：60620。

序列信息

SEQ ID NO:1：嗜氧类芽孢杆菌R14(Paenibacillus aerobic)的16S rDNA；

SEQ ID NO:2：抗氧化蛋白的氨基酸序列；

SEQ ID NO:3：抗氧化基因的核苷酸序列。

附图说明

图1为嗜氧类芽孢杆菌R14的透射电镜图片；

图2为嗜氧类芽孢杆菌R14的菌落形态；

图3为嗜氧类芽孢杆菌R14与其它类芽孢杆菌属成员之间的进化分析 (基于16SrDNA序列分析)；

图4为嗜氧类芽孢杆菌R14与大肠杆菌(E.coli BL21)、耐辐射异常球菌 R1(D.radiodurans R1)的抗氧化能力对比；

图5为嗜氧类芽孢杆菌R14与大肠杆菌(E.coli BL21)，耐辐射异常球菌 R1(D.radiodurans R1)的耐渗透能力比对；

图6为转基因菌株(pET28a-mrgA)与空载菌株抗氧化能力比对。

具体实施方式

以下结合附图对本公开的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本公开，并不用于限制本公开。

本公开提供了一种嗜氧类芽孢杆菌，该嗜氧类芽孢杆菌是发明人从吉林省延吉市长期种植水稻的稻田根际土壤中分离培养出一种新的菌种，该嗜氧类芽孢杆菌的分类命名为Paenibacillus aerobic，该嗜氧类芽孢杆菌于2019 年3月29日在广东省微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为GDMCC No.60620，下述称为嗜氧类芽孢杆菌R14。所述嗜氧类芽孢杆菌R14的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

再一方面，本公开提供了如上所述的嗜氧类芽孢杆菌作为构建具有耐渗透功能工程菌株的应用。

再一方面，本公开提供了一种抗氧化基因，该抗氧化基因来源于如上所述的嗜氧类芽孢杆菌，并且该抗氧化基因编码上述的抗氧化蛋白。

以下通过实施例进一步详细说明本公开。

实施例中所用到的R₂A琼脂培养基成分为：酪蛋白水解物0.5g/L；酵母提取物0.5g/L；胰蛋白胨0.5g/L；葡萄糖0.5g/L；可溶性淀粉0.5g/L；磷酸氢二钾0.3g/L；无水硫酸镁0.024g/L；丙酮酸钠0.3g/L；氯化钠10g/L；固体加琼脂15g/L。该培养基的pH7.2±0.2。

实施例中所用到的R₂A液体培养基成分为：酪蛋白水解物0.5g/L；酵母提取物0.5g/L；胰蛋白胨0.5g/L；葡萄糖0.5g/L；可溶性淀粉0.5g/L；磷酸氢二钾0.3g/L；无水硫酸镁0.024g/L；丙酮酸钠0.3g/L；氯化钠10g/L。该培养基的pH7.2±0.2。

实施例中所用到的LB培养基的成分为：胰蛋白胨10g/L,酵母提取物 5g/L,NaCl10g/L。

实施例中所用到的TGY培养基的成分为：胰蛋白胨10g/L,酵母提取物 5g/L,葡萄糖1g/L。

实施例中所用到的TSB液体培养基的成分为：胰酪蛋白胨17g/L，大豆蛋白胨3g/L，D-葡萄糖2.5g/L，NaCl 5.0g/L，K₂HPO₄ 2.5g/L。该培养基的pH7.3±0.2。

实施例1

本实施例所使用的土壤为从吉林省延吉市长期种植水稻的稻田中采集水稻根际土壤。

采集土壤样品，称取0.2g土样，于20mL R₂A液体培养基中在30℃、 220rpm下富集培养3d，取第一富集培养物200μL，加入到20mL新鲜的 R₂A液体培养基中培养3d，反复上述操作两次，得到吸取最终富集培养物100uL，按照10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5和10^-6依次梯度稀释，分别取200μL 涂布于R₂A琼脂培养基平板上，倒置于30℃培养箱中培养3d，得到分离菌株。

该分离菌株在透射电镜下可见，为杆状细菌，不产生鞭毛(如图1所示)；该菌株在R₂A琼脂培养基上菌落呈现淡黄色、凸起状，表面湿润，边缘整齐，无胞外分泌物(如图2所示)。

该分离菌株的生理生化特征为：好氧生长，革兰氏阳性，酯酶(C4)阳性，类脂酯酶(C8)阳性，白氨酸芳胺酶阳性，萘酚-AS-Bl-磷酸水解酶阳性，碱性磷酸盐酶阴性，类脂酶(C14)阴性，胱氨酸芳胺酶阴性，胰蛋白酶阴性。嗜氧类芽孢杆菌R14能够以邻硝基苯-半乳糖苷、柠檬酸钠为碳源，但不能以葡萄糖、甘露醇、肌醇、山梨醇、鼠李糖等为碳源，其细胞壁脂肪酸含有C_15:0anteiso,Summed Feature 8(C_18:1w7c and/or C_18:1w6c)和C_16:0iso，其中以C_15:0anteiso为主。

经广东省微生物菌种保藏中心鉴定，该菌株属于类芽孢杆菌属，被命名为嗜氧类芽孢杆菌R14(Paenibacillus aerobic)。

实施例2

将实施例分离得到的嗜氧类芽孢杆菌R14基因组使用

公司的细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱形)进行提取。嗜氧类芽孢杆菌R14 的16S rDNA的PCR扩增所用的通用引物序列的设计参照William G.Weisburg(1991)的文章，引物由北京六合华大基因科技有限公司合成。扩增所用的试剂盒购买于南京诺唯赞生物科技有限公司。

正向引物

27F(5’-AGAGTTTGATCATGGCTCAG-3’，SEQ ID NO.4)，

反向引物

1492R(5’-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3’，SEQ ID NO.5)。

表1为PCR扩增体系：

成分	体积/uL
		2×Phanta PCR mix Buffer	25
27F	2
		1492R	2
R14基因组	2
		灭菌ddH<sub>2</sub>O	定容至50uL

表2为PCR反应程序：

将扩增得到的16S rDNA序列，连接于

公司的pJET 1.2/blunt载体上，委托北京六合华大基因科技有限公司对插入序列进行测序。测序结果包括：16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

实施例3

将实施例1分离得到的嗜氧类芽孢杆菌R14于LB平板划线活化，30℃ 倒置培养。挑取平板上的菌落，接种到1/3TSB液体培养基中，30℃，220rpm，过夜摇菌。测定OD₆₀₀，当OD₆₀₀＝0.1，添加到新鲜LB液体培养基中，30℃， 220rpm，培养至OD₆₀₀为0.4～0.5，取100μL菌液加到900μL PBS于2mL EP管中作为样品菌液待用。

实施例4

对实施例1中分离得到的嗜氧类芽孢杆菌R14中的mrgA基因进行扩增。所用引物为F(cagcaaatgggtcgcggatccATGACGGCAATTAAACTGCAATC， SEQ ID NO.6)，R(ctcgagtgcggccgcaagcttTTTGCCGTTGAATGCTTTAAGC， SEQ ID NO.7)，以R14基因组为模板，扩增mrgA片段，并切胶回收得到 mrgA片段。

将pET28a质粒用BamH I和Hind III进行37℃双酶切消化，回收得到线性化pET28a载体片段(5344bp)。

将线性化pET28a载体片段和mrgA片段用诺唯赞公司2×Clonexpress Mix连接酶50℃连接15min，得到pET28a-mrgA重组载体，并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞，得到转基因菌株(pET28a-mrgA)，并将制得的转基因菌株(pET28a-mrgA)在含50μg/mL卡那霉素抗性的LB平板上涂板，于37℃恒温培养12-16h，挑取单菌落进行PCR验证，选取构建成功的转基因菌株。

对比例1

本对比例使用的大肠杆菌(E.coli BL21)购自于北京全式金公司。

将大肠杆菌(E.coli BL21)培养至OD₆₀₀＝0.6(对数中期)，取100μL菌液加到900μL PBS于2mL EP管中作为样品菌液待用。

对比例2

本对比例所用到的极端耐受微生物耐辐射异常球菌Deinococcus radioduransRl野生型菌株(CGMCC 1.633)由中国普通微生物菌种保藏中心提供。

将耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)菌株接种于TGY液体培养基中，在30℃下，以220rpm的振荡频率摇床培养至OD₆₀₀＝2.0(对数中期)，取 100μL菌液加到900μL PBS于2mL EP管中作为样品菌液待用。

对比例3

含有空载pET28a的大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。

测试例1

将实施例2测得的嗜氧类芽孢杆菌R14(Paenibacillus aerobic)的16S rDNA与同属的其它种进行比较，差异显著(相似度<98％)，其中：

与Paenibacillus sacheonensis SY01的相似度为97.43％；

与Paenibacillus taihuensis THMBG22(T)的相似度为96.52％；

与Paenibacillus baekrokdamisoli Back-11(T)的相似度为96.37％；

与Paenibacillus panaciterrae DCY95(T)的相似度为96.29％；

与Paenibacillus rhizoryzae 1ZS3-5(T)的相似度为96.02％；

与Paenibacillus montanisoli RA17(T)的相似度为95.73％

构建的系统发育树如图3所示。

此外，与类芽孢杆菌属标准菌株Paenibacillus polymyxa ATCC 8422042 以及近缘菌株Paenibacillus sacheonensis SY01的对比实验显示，本发明发现的嗜氧类芽孢杆菌R14与以上两菌株的微生物学特性有显著差异。表3为嗜氧类芽孢杆菌R14与Paenibacillus polymyxa ATCC、Paenibacillus sacheonensis SY01及Paenibacilluspanaciterrae DCY95的微生物学特性比较。

表3

注：“+”表示阳性，“-”表示阴性，“w”表示弱阳性

测试例2

分别取1mL实施例3、对比例1和对比例2制得的样品菌液于EP管中，避光条件下，在各样品菌液中加入H₂O₂，分别制备H₂O₂终浓度为0mM、 10mM、20mM、30mM和50mM的待测液，避光条件下处理30min；30min 后迅速稀释各待测液至10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，取8μL各个样品的每个浓度梯度菌液点在琼脂培养基，其中大肠杆菌点在LB琼脂培养基，37℃培养；嗜氧类芽孢杆菌R14点在R₂A琼脂培养基，耐辐射异常球菌点在TGY琼脂培养基上，30℃培养，观察结果(图4)。

实验结果表明，对比例1中的大肠杆菌(阴性对照)在20mM双氧水处理下完全不生长，对比例2的耐辐射异常球菌(阳性对照)生长基本无变化；实施例3生物嗜氧类芽孢杆菌R14经20mM的H₂O₂处理30min后，菌株生长基本无变化，表明本公开的嗜氧类芽孢杆菌R14与极端耐受微生物耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)抵抗H₂O₂冲击效果相当，这充分说明了本公开的嗜氧类芽孢杆菌R14具有较好的氧化抗性。

测试例3

分别取1mL实施例3、对比例1和对比例2制得的样品菌液，于5000×g 离心5min收集菌体，将收集到的菌体分别重悬于1mL的1M、2M和3M 山梨糖醇悬液中；大肠杆菌(E.coilBL21)在37℃，耐辐射异常球菌 (D.radiodurans R1)在30℃，220rpm条件下培养4h后，用PBS缓冲液等比稀释至10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，每个稀释度各取8μL，大肠杆菌(E.coil BL21)点在LB固体培养基表面，37℃过夜培养；耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)点在TGY培养基表面，经30℃培养3d，观察不同菌株在培养基上的生长情况(图5)。

结果表明，在2M和3M山梨醇(D-Sorbitol)冲击4h后，对比例1 中的大肠杆菌(阴性对照)在2M山梨醇冲击下仅有1个数量级生长，在3 M山梨醇冲击下基本没有生长，对比例2的耐辐射异常球菌(阳性对照)生长基本无变化；本公开的嗜氧类芽孢杆菌R14的生长也没有明显变化，这表明了本公开的嗜氧类芽孢杆菌R14与极端耐受微生物耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)抗渗透的效果相当，也说明了嗜氧类芽孢杆菌R14具有良好的抗渗透能力。

测试例4

将实施例4中得到的转基因菌株(pET28a-mrgA)和对比例3中的含有空载pET28a的大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行抗氧化能力测试实验。具体操作步骤为：分别取1mL实施例4、对比例3制得的样品菌液，分别加入 0.5uL，1uL，1.5uL，2uL 30％的过氧化氢溶液，37℃22 0rpm黑暗处理 10min；用PBS缓冲液等比稀释至10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，每个稀释度各取8 μL，点在LB固体培养基表面，37℃过夜培养，观察不同菌株在培养基上的生长情况(图6)。

结果表明，嗜氧类芽孢杆菌R14的相关基因(gene4680，mrgA)转化大肠杆菌(E.coli BL21)后，转基因菌株表现出良好的抗氧化能力，转基因菌株在15mM H₂O₂处理30min后仍有两个数量级的生长，而对比例3中的含有空载pET28a的大肠杆菌E.coli BL21(DE3)则完全无生长，这说明mrgA基因能够增强重组大肠杆菌对H₂O₂的耐受能力，具有构建强抗氧化能力菌株的能力。

以上结合附图详细描述了本公开的优选实施方式，但是，本公开并不限于上述实施方式中的具体细节，在本公开的技术构思范围内，可以对本公开的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本公开的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本公开对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本公开的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本公开的思想，其同样应当视为本公开所公开的内容。

序列表

<110> 中国农业科学院生物技术研究所

<120> 一种嗜氧类芽孢杆菌及其应用

<130> 15125CAAS-B-ZW-R

<150> 201911185317.6

<151> 2019-11-27

<160> 7

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1407

<212> DNA

<213> 嗜氧类芽孢杆菌(Paenibacillus aerobic)

<400> 1

cggctggctc ccttgcgggt taccccaccg acttcgggtg ttgtaaactc tcgtggtgtg 60

acgggcggtg tgtacaagac ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat ccgcgattac 120

tagcaattcc gacttcatgc aggcgagttg cagcctgcaa tccgaactga gaccggcttt 180

gataggattc gctccacctc gcggtttcgc ttcccgttgt accggccatt gtagtacgtg 240

tgtagcccag ctcataaggg gcatgatgat ttgacgtcat ccccaccttc ctccggtttg 300

tcaccggcag tcaccttaga gtgcccaccc gaagtgctgg caactaagat caagggttgc 360

gctcgttgcg ggacttaacc caacatctca cgacacgagc tgacgacaac catgcaccac 420

ctgtctccaa tgctccgaag aggggcacta tctctaatgc tttcattggg atgtcaagag 480

ctggtaaggt tcttcgcgtt gcttcgaatt aaaccacata ctccactgct tgtgcgggtc 540

cccgtcaatt cctttgagtt tcactcttgc gagcgtactc cccaggcgga atgcttaatg 600

tgttaacttc ggcaccaagg gtatcgaaac ccctaacacc tagcattcat cgtttacggc 660

gtggactacc agggtatcta atcctgtttg ctccccacgc tttcgcgcct cagcgtcagt 720

tacagcccag aaagtcgcct tcgccactgg tgttcctcca catctctacg catttcaccg 780

ctacacgtgg aattccactt tcctcttctg tactcaagcc ttgcagtttt cgatgcgaat 840

cagagttgag ctctgagatt aaacaccaaa cttacaaagc cgcctgcgcg cgctttacgc 900

ccaataattc cggacaacgc ttgcccccta cgtattaccg cggctgctgg cacgtagtta 960

gccggggctt tcttctcagg taccgtcatt ccaagcgcag ttactcgcct ggctgttctt 1020

ccctggcaac agagctttac gatccgagaa ccttcatcac tcacgcggcg ttgctccgtc 1080

agactttcgt ccattgcgga agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt ctgggccgtg 1140

tctcagtccc agtgtggccg atcaccctct caggtcggct acgcatcgtc gccttggtga 1200

gccgttaccc caccaactag ctaatgcgcc gcaggcccat ctgcaagtga cagcttgcgc 1260

cgcctttccc aattccctca tgcgagaaaa ttgtgtatcc ggtattagca ttcgtttccg 1320

aatgttatcc cagtcttgca ggcaggttgc ctacgtgtta ctcacccgtc cgccgctaac 1380

cttccccgaa ggaaagatcc gctcgac 1407

<210> 2

<211> 147

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Met Thr Ala Ile Lys Leu Gln Ser Ile Leu Asn Lys Gln Ile Ser Thr

1 5 10 15

Trp Ser Val Leu Tyr Ile Lys Leu His Asn Tyr His Trp Tyr Val Lys

20 25 30

Gly Asn Gln Phe Phe Thr Leu His Val Lys Phe Gln Glu Leu Tyr Glu

35 40 45

Glu Ala Thr Leu His Val Asp Asp Ile Ala Glu Arg Leu Leu Thr Ile

50 55 60

Gly Gly Ser Pro Tyr Ala Thr Met Ala Glu Tyr Leu Glu Tyr Ser Ser

65 70 75 80

Val Lys Glu Ala Thr Gly Lys Glu Thr Ala Pro Glu Met Val Asn Thr

85 90 95

Leu Ile Arg Asp Phe Thr Asn Val Ala Ala Glu Leu Lys Glu Gly Met

100 105 110

Glu Ala Ala Gln Glu Ser Gly Asp Glu Thr Thr Gly Asp Leu Leu Leu

115 120 125

Ala Ile His Lys Ser Leu Glu Lys His Thr Trp Met Leu Lys Ala Phe

130 135 140

Asn Gly Lys

145

<210> 3

<211> 444

<212> DNA

<213> 嗜氧类芽孢杆菌(Paenibacillus aerobic)

<400> 3

atgacggcaa ttaaactgca atcgatcctg aacaaacaaa tctcgacgtg gagcgtgctc 60

tacattaagc tgcataacta ccattggtat gtaaagggga accagttctt cacgctgcat 120

gtgaaattcc aggagctcta cgaggaagcg acgctgcatg tcgatgacat cgcagagcgg 180

ctgctaacga tcggcggctc tccgtatgcc accatggcgg agtacctcga atactccagc 240

gtgaaagaag caacgggcaa ggaaaccgcc ccagagatgg tcaatacgct cattcgagac 300

ttcacgaacg tggccgccga gctgaaggaa ggcatggaag cggcacagga aagcggcgac 360

gaaacgaccg gggatctgct gcttgccatc cacaaatcgc tcgagaagca cacttggatg 420

cttaaagcat tcaacggcaa ataa 444

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 未知(Unknown)

<400> 4

agagtttgat catggctcag 20

<210> 5

<211> 22

<212> DNA

<213> 未知(Unknown)

<400> 5

tacggttacc ttgttacgac tt 22

<210> 6

<211> 44

<212> DNA

<213> 未知(Unknown)

<400> 6

cagcaaatgg gtcgcggatc catgacggca attaaactgc aatc 44

<210> 7

<211> 43

<212> DNA

<213> 未知(Unknown)

<400> 7

ctcgagtgcg gccgcaagct ttttgccgtt gaatgcttta agc 43

Claims

1.一种嗜氧类芽孢杆菌，其特征在于，该嗜氧类芽孢杆菌的分类命名为Paenibacillus aerobic，并且，该类芽孢杆菌的保藏编号为GDMCC NO：60620。

2.根据权利要求1所述的嗜氧类芽孢杆菌，其中，该嗜氧类芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

3.权利要求1或2所述的嗜氧类芽孢杆菌作为抗氧化功能菌株的应用。

4.权利要求1或2所述的嗜氧类芽孢杆菌在构建具有抗氧化功能的转基因生物方面的应用。

5.权利要求1或2所述的嗜氧类芽孢杆菌作为构建具有耐渗透功能工程菌株的应用。

6.一种抗氧化蛋白，其特征在于，该抗氧化蛋白来源于权利要求1或2所述的嗜氧类芽孢杆菌，并且该抗氧化蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示。

7.一种抗氧化基因，其特征在于，该抗氧化基因来源于权利要求1或2所述的嗜氧类芽孢杆菌，该抗氧化基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 3所示，并且该抗氧化基因编码权利要求6所述的抗氧化蛋白。