CN112639432A - 分析装置、分析方法、微量液体提取装置和微量液体提取方法 - Google Patents
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Abstract
分析装置(1)具有：流路(12c)；抽吸机构，其经由流路(12c)的一端与流路(12c)连接，并且自流路(12c)的另一端向流路(12c)内部导入微量的液体试样(L)，将液体试样(L)保持于流路(12c)的局部；以及测量单元(40)，其构成为，对被保持于流路(12c)的局部的液体试样(L)照射光的光照射部(41)和接收来自液体试样(L)的光的光接收部位于液体试样的周围，在测量单元(40)设有光阑部(46)，该光阑部(46)具有比被保持于流路(12c)的液体试样(L)在流路(12c)中的液体长度(L1)短的开口宽度(L2)，限制自光照射部(41)朝向液体试样(L)去的光。
Description
技术领域
本公开涉及分析装置、分析方法、微量液体提取装置和微量液体提取方法。
背景技术
作为现有的分析装置，在日本特许第4645739号公报(专利文献1)以及日本特许第4853518号公报(专利文献2)中公开了能够测量几μL左右的微量的液体试样的分析装置。
在专利文献1以及专利文献2所公开的分析装置中，在对液体(液体试样)进行分析时，在位于滴下装置的下方的滴下位置配置试样台，将液体试样向该试样台滴下。接着，将所滴下的液体试样夹入按压部与试样台之间，使试样台进行移动，以使液体试样位于测量光的光路上。其后，接收通过了液体试样的测量光，对液体试样进行分析。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特许第4645739号公报
专利文献2：日本特许第4853518号公报
发明内容
发明要解决的问题
然而，在专利文献1以及专利文献2中，由于是将液体试样向试样台滴下的结构，因此，在欲进行分析的微量的液体试样是1nL～100nL左右的极其微量的情况下，对滴下的控制变得困难。另一方面，在为了确保适于滴下的量而对液体试样进行了稀释的情况下，液体试样的浓度变得过低。这样，难以对低于1μL的微量的液体试样进行分析。
本公开是鉴于上述那样的问题而完成的，本公开的目的在于提供能够对微量的液体试样进行分析的分析装置、分析方法、微量液体提取装置和微量液体提取方法。
用于解决问题的方案
基于本公开的分析装置具有：流路；抽吸机构，其经由上述流路的一端与上述流路连接，并且自上述流路的另一端向上述流路内部导入微量的液体试样，将上述液体试样保持于上述流路的局部；以及测量单元，其构成为，对被保持于上述流路的局部的上述液体试样照射光的光照射部和接收来自上述液体试样的光的光接收部位于上述液体试样的周围。在上述测量单元设有光阑部，该光阑部具有比被保持于上述流路的液体试样在上述流路中的液体长度短的开口宽度，限制自上述光照射部朝向上述液体试样去的光。
通过具有上述结构，能够将利用抽吸机构抽吸到流路内的液体试样保持于流路内，并且能够使用测量单元来测量微量的液体试样的光学特性。再者，在测量单元设有光阑部，该光阑部具有比被保持于流路内的液体试样的液体长度短的开口宽度，由此，即使在抽吸的液体试样的量变动了的情况下，也能够向液体试样所存在的部分照射光。由此，能够对微量的液体试样进行分析。
基于本公开的分析装置也可以具有：液体提取器具，其构成为能够提取微量的液体；以及装置主体部，其构成为能够供上述液体提取器具插入。优选的是，上述液体提取器具包括上述抽吸机构和形成有上述流路的流路构件，优选的是，上述装置主体部在内部包括上述测量单元。再者，优选的是，上述测量单元对插入到上述装置主体部的内部的上述流路构件所保持的上述液体试样进行测量。
通过具有上述结构，在流路构件内保持有液体的状态下，将液体提取器具插入装置主体部，由此，能够测量液体试样。
在上述基于本公开的分析装置中，优选的是，上述抽吸机构以在形成于上述流路的两端侧的空气层之间保持上述液体的方式抽吸上述液体。
通过如上述那样构成，能够将液体试样保持于远离流路构件的另一端侧的与外侧的外界空气接触的开口面的位置。由此，能够抑制液体试样自该开口面向外界空气挥发。另外，由于防止了液体试样被配置于流路构件的一端的情况，因此能够缩短流路构件插入装置主体部内的长度。
在上述基于本公开的分析装置中，上述液体试样也可以是混合有含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞、构成细胞的一部分的结构体、染色体、病毒粒子、细菌的试样以及对上述试样进行荧光标记的荧光试剂的混合液，或者是混合有上述试样以及被荧光标记了的具有特异性结合能力的抗体等的分子试剂的混合液，或者是混合有上述试样以及对上述试样进行发光标记的发光试剂的混合液。
如上所述，通过提取预先混合好的混合液并进行测量，能够省略在分析装置侧对试样和试剂进行调制的作业。
在上述基于本公开的分析装置中，也可以是，上述抽吸机构依次抽吸如下两种液体：含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对上述试样进行荧光标记的荧光试剂或者上述试样以及对上述试样进行发光标记的发光试剂，并且将所抽吸到的上述两种液体在上述流路内混合。在该情况下，优选的是，上述测量单元对混合有上述两种液体的混合液进行测量。
在如上述那样构成的情况下，由于能够利用抽吸机构进行试样和荧光试剂或者试样和发光试剂的混合，因此，能够省略在利用液体提取器具进行提取前预先对混合有试样和荧光试剂的混合液进行调制的作业。
上述基于本公开的分析装置也可以具有液体长度测量部件，该液体长度测量部件对被保持于上述流路的上述液体试样的液体长度进行测量，也可以计算上述液体试样的体积。
在如上述那样构成的情况下，由于对被保持于流路的液体试样进行长度测量，因此能够进行更加准确的分析。
在上述基于本公开的分析装置中，也可以基于计算出的上述液体试样的体积，来校正上述抽吸机构对上述液体的抽吸量。
在上述基于本公开的分析装置中，也可以基于计算出的上述液体试样的体积，来校正测量的结果。
在上述基于本公开的分析装置中，也可以是，利用上述抽吸机构，将上述试样以及上述荧光试剂保持于上述流路内并且对上述流路内反复进行加压以及减压，由此，将上述试样以及上述荧光试剂混合。
在如上述那样构成的情况下，能够通过进行对抽吸机构的控制来调制混合液。
在上述基于本公开的分析装置中，也可以在上述装置主体部设有引导件，该引导件沿着上述流路构件的插入方向延伸，用于引导上述流路构件的插入。在该情况下，优选的是，上述光阑部由上述引导件构成。
如上述那样构成，使用于引导流路构件的插入的引导件具有限制功能，由此，能够削减部件的件数。
在上述基于本公开的分析装置中，液体试样的抽吸量也可以是1nL～100nL。根据上述结构，能够适当地分析极其微量的液体试样。
在上述基于本公开的分析装置中，上述流路部的内净空截面也可以是圆形。根据上述结构，能够稳定地将液体试样保持于流路内。
在上述基于本公开的分析装置中，上述流路的内净空内径也可以是2.0mm以下。
根据上述结构，能够将液体试样以具有适度的液体长度的方式保持于流路内。
在基于本公开的分析方法中，经由流路的一端与上述流路连接，自上述流路的另一端向上述流路内部导入微量的液体试样，将上述液体试样保持于上述流路的局部，通过配置为相对于被保持于上述流路的局部的上述液体试样而位于上述液体试样的周围的光照射部对上述液体试样照射光，通过配置为相对于上述液体试样而位于上述液体试样的周围的光接收部接收来自上述液体试样的光，利用具有比被保持于上述流路的上述液体试样在上述流路中的液体长度短的开口宽度的光阑部，对自上述光照射部朝向上述液体试样去的光进行限制，对来自上述液体试样的光进行测量。
根据上述分析方法，能够将利用抽吸机构抽吸到流路内的液体试样保持于流路内，并且能够使用测量单元来测量微量的液体试样的光学特性。再者，利用具有比被保持于流路内的液体试样的液体长度短的开口宽度的光阑部对自光照射部朝向液体试样去的光进行限制，由此，即使在抽吸的液体试样的量变动了的情况下，也能够向液体试样所存在的部分照射光。由此，能够对微量的液体试样进行分析。
在上述基于本公开的分析方法中，优选的是，以在形成于上述流路的两端侧的气体层或者液体层之间保持上述液体试样的方式抽吸上述液体试样。
根据上述分析方法，能够抑制被保持于流路内的液体试样蒸发。
在上述基于本公开的分析方法中，上述液体试样的抽吸量也可以是1nL～100nL。根据上述分析方法，能够适当地分析极其微量的液体试样。
在上述基于本公开的分析方法中，上述液体试样也可以是混合有含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对上述试样进行荧光标记的荧光试剂的混合液，或者是混合有上述试样以及对上述试样进行发光标记的发光试剂的混合液。根据上述分析方法，能够提取预先混合好的混合液并进行测量。
在上述基于本公开的分析方法中，也可以是，利用上述抽吸机构依次抽吸如下两种液体：含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对上述试样进行荧光标记的荧光试剂或者上述试样以及对上述试样进行发光标记的发光试剂，并且将所抽吸到的上述两种液体在上述流路内混合。在该情况下，优选的是，对混合有上述两种液体的混合液进行测量。
根据上述分析方法，由于能够利用抽吸机构进行试样和荧光试剂的混合，因此，能够省略在利用液体提取器具进行提取前预先对混合有试样和荧光试剂的混合液进行调制的作业。
在上述基于本公开的分析方法中，也可以是，对被保持于上述流路的上述液体试样的液体长度进行测量，计算上述液体试样的体积。
根据上述分析方法，由于对被保持于流路的液体试样进行长度测量，因此能够进行更加准确的分析。
在上述基于本公开的分析方法中，也可以基于计算出的上述液体试样的体积，来校正上述液体的抽吸量。
在上述基于本公开的分析方法中，也可以基于计算出的上述液体试样的体积，来校正测量的结果。
在上述基于本公开的分析方法中，也可以将上述试样和上述荧光试剂或者上述试样和发光试剂保持于上述流路内并且对上述流路内反复进行加压以及减压，由此，将上述试样和上述荧光试剂或者上述试样和发光试剂混合。
根据上述分析方法，能够通过进行对抽吸机构的控制来调制混合液。
基于本公开的微量液体提取装置具有：抽吸机构，其经由流路的一端与上述流路连接，并且自流路的另一端向流路内部导入微量的液体试样，将液体试样保持于流路的局部；以及液体长度测量部件，其对被保持于流路的上述液体试样的液体长度进行测量。上述微量液体提取装置包括抽吸控制机构，该抽吸控制机构计算上述液体试样的体积，将计算出的体积向抽吸机构反馈。
根据上述微量液体提取装置，包括将计算出的体积向抽吸机构反馈的抽吸控制机构，由此，能够进行准确的校正。
在上述基于本公开的微量液体提取方法中，经由流路的一端与上述流路连接，自上述流路的另一端向上述流路内部导入微量的液体试样，将上述液体试样保持于上述流路的局部，对被保持于上述流路的上述液体试样的液体长度进行测量，计算上述液体试样的体积，将计算出的体积向抽吸机构反馈。
根据上述微量液体提取方法，通过将计算出的体积向抽吸机构反馈，能够进行准确的校正。
发明的效果
根据本公开，能够提供能够对微量的液体试样进行分析的分析装置、分析方法、微量液体提取装置和微量液体提取方法。通过可靠地提取/分析贵重/微量的试样，不会过度地消耗试样，能够有助于高效的分析作业。
附图说明
图1是表示实施方式1的分析装置的外观的立体图。
图2是表示实施方式1的分析装置的结构的概略结构图。
图3是表示实施方式1的测量单元的概略俯视图。
图4是测量单元的从图3所示的箭头IV方向观察到的概略侧视图。
图5是表示实施方式2的分析装置中的测量单元的周边结构的概略剖视图。
图6是表示实施方式2的分析装置所具备的引导件的概略剖视图。
具体实施方式
以下，参照附图详细地说明本公开的实施方式。此外，在以下所示的实施方式中，对相同的或共通的部分在图中标注相同的附图标记，不重复其说明。
(实施方式1)
图1是表示实施方式1的分析装置的外观的立体图。图2是表示实施方式1的分析装置的结构的概略结构图。参照图1以及图2，对实施方式1的分析装置1进行说明。
分析装置1例如是对参与蛋白质合成的RNA以及DNA等核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞、构成细胞的一部分的结构体、染色体、病毒粒子、细菌的定量和/或浓度等进行分析的装置。
如图1以及图2所示，实施方式1的分析装置1具有液体提取器具10、装置主体部20、以及数据处理装置30。
液体提取器具10构成为能够提取1nL～100nL左右的微量的液体L。由液体提取器具10所提取的液体L例如为混合有含有核酸的试样以及对核酸进行荧光标记的荧光试剂的混合液。通过提取预先混合好的混合液并进行测量，能够省略在分析装置1侧将试样和试剂混合的操作。
根据分析的试样而适当选择荧光试剂。作为荧光试剂，能够使用PicoGreen(注册商标)以及SYBR Green(注册商标)等含有荧光色素的试剂。
液体提取器具10包括主体部11、流路构件12、以及抽吸机构14。主体部11在内部容纳抽吸机构14、以及流路构件12的局部。
流路构件12具有一端12a和另一端12b。在流路构件12形成有能够供液体L流动的流路12c。流路12c自流路构件12的一端12a形成至另一端12b。
流路构件12例如呈直线状地设置。流路构件12由具有透光性的筒状构件构成。筒状构件的内径(流路直径)为2.0mm以下，例如为0.2mm左右。作为流路构件12，例如能够采用玻璃毛细管。由于处理的量为nL级别，因此优选筒状构件的内径较细，以便使保持于流路的液体沿着流路具有用于测量的适度的液体长度。
流路构件12的一端12a安装于主体部11。在主体部11设有贯通孔13，该贯通孔13将流路构件12的流路12c和抽吸机构14连接。
抽吸机构14被设为自流路构件12的一端12a侧与流路12c连接。抽吸机构14是用于自流路构件12的另一端12b侧向流路12c内抽吸液体试样L的机构。抽吸机构14以在流路12c内保持液体试样L的方式抽吸液体试样L。
抽吸机构14具有致动器，该致动器设有压电元件和由该压电元件驱动的振动板。利用该致动器对流路12c内进行加压以及减压，由此，抽吸机构14能够以在流路12c内保持液体L的方式抽吸液体试样L。此外，作为压电元件，例如能够使用压电式元件(日文：ピエゾ素子)。
抽吸机构14以在形成于流路12c的两端侧的空气层之间保持液体试样L的方式抽吸液体试样L。由此，液体试样L配置于比流路构件12的向外部空间开放着的另一端12b靠内侧的位置。由此，能够防止液体试样L的液面与空间开放的外界空气接触。其结果是，能够减少液体试样L的蒸发。除了空气层以外，也可以是不与液体试样L混合的液体。能够抑制抽吸机构14的加压/减压的动作引起的体积变化，能够以适当的量来提取液体试样L。
另外，防止液体试样L被配置于流路构件12的一端12a的情况。因此，如后所述，在测量时，在从插入孔22向装置主体20内部插入流路构件12时，能够缩短流路构件12的插入长度。
在上述的例子中，例示并说明了抽吸机构14对预先混合有试样和荧光试剂的混合液进行提取的情况，但不限于此。也可以是，抽吸机构14依次抽吸试样以及荧光试剂这两种液体，并且将所提取的两种液体在流路内混合。在该情况下，优选的是，利用抽吸机构14，将上述试样以及上述荧光试剂保持于上述流路12c内并且对上述流路12c内反复进行加压以及减压，由此，将上述试样以及上述荧光试剂混合。
在这样的情况下，能够省略在利用抽吸机构14进行抽吸前预先对混合有试样和荧光试剂的混合液进行调制的作业。另外，能够通过对抽吸机构14的动作进行控制来调制混合液。
抽吸机构14的动作例如由设于装置主体部20的内部的抽吸机构控制部23进行控制。抽吸机构14通过配线24而与抽吸机构控制部23连接。此外，抽吸机构控制部23也可以设于液体提取器具10的主体部11内，在该情况下，配线24以及供电部也可以设于主体部11内。
装置主体部20在内部包括测量单元40。测量单元40是用于对由抽吸机构14所抽吸的液体试样L进行测量的单元。此外，对于测量单元40的详细结构，将使用图3以及图4随后叙述。
在装置主体部20设有设置部21，该设置部21用于供液体提取器具10可装卸地设置。如图1中虚线所示，液体提取器具10在提取液体试样L时自装置主体部20取下。液体提取器具10在对所提取的液体试样L进行测量时被设置于装置主体部20。
装置主体部20构成为能够供液体提取器具10插入。具体而言，在装置主体部20设有插入孔22，该插入孔22用于供液体提取器具10的流路构件12向装置主体部20的内部插入。在将液体提取器具10向设置部21设置时，将流路构件12的另一端12b侧向插入孔22插入，将主体部11固定于设置部21。由此，在将液体提取器具10设置于设置部21的设置状态下，流路构件12的另一端12b侧成为插入到装置主体部20的内部的状态，被保持于流路构件12的液体L配置于测量单元40的测量位置。
在数据处理装置30中，搭载有用于执行各种控制/处理的预定的控制程序，数据处理装置30与装置主体部20连接。
数据处理装置30具有显示部31、操作部32、控制部33、以及存储部36。显示部31显示用于操作的信息以及测量结果等。操作部32用于进行与测量相关联的各种参数的设定、各种处理的指示。
控制部33包括测量控制部34和数据处理部35。测量控制部34对测量单元40的动作进行控制。数据处理部35基于自测量单元40接收到的信号，执行用于分析液体试样L的各种运算处理。存储部36对自测量单元40接收到的信号以及数据处理部35的执行结果等进行存储。存储部36所存储的执行结果等也可以构成为自数据处理装置30取出，以便进行在外部的计算机中的处理、数据管理。
图3是实施方式1的测量单元的概略俯视图。图4是测量单元的从图3所示的箭头IV方向观察到的概略侧视图。参照图3以及图4，对实施方式1的测量单元40进行说明。
如图3以及图4所示，测量单元40具有照射部41、光接收部42、光学系统43、第1波长选择元件44、第2波长选择元件45、以及光阑部46。在该测量单元40中，如下所述，利用光接收部42来检测液体试样L的光学特性。此外，光学特性例如为荧光强度。
照射部41朝向被保持于流路构件12的液体试样L照射测量光。照射部41发射出光，该光包含使所分析的液体试样L(混合液)中含有的荧光色素激发的波长范围。照射部41例如发射出主波长为470nm附近的蓝色可见光。作为照射部41，例如能够利用LED。自照射部41照射出的测量光朝向第1波长选择元件44去。
第1波长选择元件44配置于自照射部41朝向流路构件12去的测量光的光路上。第1波长选择元件44选择性地使第1波长范围的光通过。第1波长选择元件44例如为带通滤波器。第1波长范围是使所分析的液体试样L(混合液)中含有的荧光色素激发的波长范围。通过了第1波长选择元件44的测量光被光学系统43引导。
对于光学系统43而言，其至少形成测量光的通过路径，将从照射部41照射的测量光向被保持于流路构件12的液体试样L引导。光学系统43例如包括球透镜等聚光透镜，对通过了第1波长选择元件44的测量光进行聚光并且向上述液体试样L引导。
由光学系统43进行了聚光的测量光在到达被保持于流路构件12的液体试样L之前被光阑部46限制光区域。光阑部46例如具有板状形状，其配置于插入到装置主体部20的内部的流路构件12的附近。
光阑部46具有开口部46a，该开口部46a限定向上述液体试样L照射的测量光的照射区域。使通过了该开口部46a的测量光向液体试样L照射。
被保持于流路构件12(流路12c)的液体试样L沿着流路12c延伸，开口部46a的沿着流路12c的开口宽度L2比被保持于流路构件12的液体试样L的沿着流路12c的长度(液体长度)L1短。此外，将微量的液体试样L保持于流路12c时的液体试样L的沿着流路12c的长度为约2mm～3mm左右。
在像这样限定开口宽度的情况下，即使在提取的液体试样L的量相对于目标值变动了的情况下，也能够仅向液体试样L所存在的部分照射测量光。
如上所述，向液体试样L照射的测量光具有使该液体试样L中含有的荧光色素激发的第1波长范围。因此，自被测量光激发的荧光色素发出荧光。光路因液体试样L以及流路构件12而改变了的测量光的一部分以及所发出的荧光朝向光接收部42去。
光接收部42配置于使照射部41绕流路构件12的中心轴线旋转大致90度的位置。光接收部42接收来自被照射了测量光的液体试样L(混合液)的光。具体而言，光接收部42接收从上述荧光色素发出并且通过了上述第2波长选择元件45的光。
第2波长选择元件45配置于自被照射了测量光的液体试样L朝向光接收部42去的光的光路上。第2波长选择元件45选择性地使与第1波长范围不同的第2波长范围的光通过。第2波长范围是从上述荧光色素发出的荧光所具有的波长区域。通过使自液体试样L朝向光接收部42去的光通过第2波长选择元件45，能够仅将荧光向光接收部42导入。
由此，光接收部42将基于接收到的荧光而检测出的信号向数据处理部35发送。数据处理部35基于接收到的信号而执行运算处理，确定试样中含有的核酸的量等。通过这样，进行液体试样L的分析。
如上所述，在实施方式的分析装置1中，使用如上述那样包括抽吸机构14和形成有流路12c的流路构件12的液体提取器具10，由此，能够驱动抽吸机构14而向流路构件12内抽吸微量的液体L，并且能够将所提取的液体L保持于流路构件12内。另外，在流路构件12内保持有液体L的状态下，将流路构件12的另一端12b侧插入到插入孔22，将液体提取器具10设置于装置主体部20的设置部，由此，能够将该液体L配置于测量位置。其结果是，通过利用测量单元对微量的液体L进行测量，能够对该微量的液体L进行分析。
(实施方式2)
图5是表示实施方式2的装置主体部中的测量单元的周边结构的概略剖视图。此外，图5图示了从正面侧观察照射部41的情况下的测量单元40A，为了方便，省略了测量单元40A中包含的第1波长选择元件以及光学系统。
如图5所示，实施方式2的分析装置在测量单元40A的结构以及具有引导件25和测量单元保持部51这方面与实施方式1的分析装置不同，其他结构与实施方式1的分析装置大致相同。
引导件25设于装置主体部20。具体而言，引导件25设于插入孔22的下方，该插入孔22设于装置主体部20。此外，引导件25的位置不限于插入孔22的下方。引导件25也可以设为其上部自插入孔22向外部突出。
引导件25沿着流路构件12的插入方向延伸，用于引导流路构件12的插入。此外，流路构件12的插入方向是与插入孔22的开口面垂直的方向。引导件25由测量单元保持部51进行保持。引导件25具有第1筒状部26以及第2筒状部27。
测量单元保持部51对测量单元40A进行保持。测量单元保持部51包括在流路构件12的插入方向上彼此分离地配置的第1板部511以及第2板部512。第1板部511以及第2板部512以不对测量单元40A进行的测量产生影响的方式一体地固定。
在第1板部511以及第2板部512设有贯通孔511a以及贯通孔512a。利用该贯通孔511a以及贯通孔512a来保持引导件25。具体而言，将第1筒状部26插入并保持于贯通孔511a，将第2筒状部27插入并保持于贯通孔512a。
图6是表示实施方式2的装置主体部所具备的引导件的概略剖视图。参照图6，对引导件25所包括的第1筒状部26以及第2筒状部27的详细结构进行说明。
第1筒状部26以及第2筒状部27以筒轴线与流路构件12的插入方向平行的方式在插入方向上排列配置。第1筒状部26被配置为先于第2筒状部27地供流路构件12插入。
第1筒状部26具有导入部26a，该导入部26a用于将流路构件12的另一端12b向引导路26b导入。导入部26a形成为内径随着朝向引导路26b去而变小。引导路26b沿着插入方向呈直线状地形成。
第2筒状部27具有引导路27b，该引导路27b与引导路26b相对地配置。引导路27b的直径比引导路26b的直径大。
流路构件12的导入到导入部26a的另一端12b若进一步插入则会穿过引导路26b而进入引导路27b内。
在插入方向上且是在第1筒状部26与第2筒状部27之间形成有间隙GP。间隙GP的插入方向上的大小比被保持于流路构件12的液体试样L的沿着流路12c的长度短。间隙GP相当于实施方式1的开口部46a，由间隙GP来限定向液体试样L照射的照射区域。另外，来自该液体试样L的光自间隙GP朝向光接收部42。这样，由引导件25构成了对向液体试样L照射的测量光的照射区域进行限制的光阑部。
即使在如上述那样构成的情况下，实施方式2的分析装置也能够得到与实施方式1大致相同的效果。此外，通过设置引导件25，从而变得容易将液体试样L配置于测量光的光路上的测量位置。再者，通过利用引导件25来构成光阑，能够削减部件件数。
此外，在上述的实施方式2中，例示并说明了引导件25由彼此分离开的两个筒状部构成的情况，但不限于此，引导件25也可以由1个筒状部构成。在该情况下，优选的是，在筒状部的周壁部设置用于限定测量光的照射区域的开口部以及使来自液体试样L的光通过的窗部。
在上述的实施方式1以及实施方式2中，例示并说明了通过使用荧光试剂并且接收来自荧光色素的荧光来对液体试样进行分析的情况，但不限于此，也可以构成为利用光接收部来接收通过了液体试样的测量光。在该情况下，光接收部也能够接收来自液体试样L的光(透过了液体试样L的测量光)。在该情况下，也可以通过对测量光的透过率进行测量进而对核酸的吸光度进行测量来分析试样。
再次，如图2所示，对于成为测量对象的液体试样的提取量，分析装置1具有液体长度测量机构50，能够将液体长度测量机构50作为校正误差的部件。液体长度测量机构50是对被保持于流路的微量的液体的液体长度进行测量的照相机、传感器，优选根据得到的图像来测量液体长度。
在现有的液体提取装置的校正所使用的重量法中，由于nL级的液体干燥，因此校正变得困难。对于构成本发明的微量液体提取装置的抽吸机构，对被保持于流路的液体试样进行长度测量，因此，干燥的影响变小，能够进行准确的校正。由此，发挥能够得到高精度的抽吸量的效果。在微量液体提取装置中，在作为液体提取前的检查作业，使抽吸机构于既定的设定条件下进行了动作时，根据被保持于流路的液体试样的液体长度而于计算机构中计算出的液量相对于既定的液量产生了差异的情况下，利用抽吸控制机构对成为所期望的液量的条件进行校正计算。从接下来的测量起在进行了校正计算后的条件下实施液体提取。
由于流路内径是已知的，因此，通过对液体试样的液体长度进行测量，能够计算出所保持的液体试样的体积。能够基于计算出的液体试样的体积来校正误差。作为误差的校正，能够进行抽吸机构的抽吸动作量的校正、基于试样和荧光试剂的混合比的最终浓度的校正。
在构成微量液体提取装置的抽吸控制机构中，在所抽吸的液量比预先设定的液量少的情况下，能够指示所述抽吸机构进行追加抽吸。由此，能够得到所期望的液量，因此发挥这样的效果：能够省去因失败而再次试验的工夫，并且能够以最低限度的液体试样量进行试验。
另一方面，在所抽吸的液量比预先设定的液量多的情况下，能够显示警告，以避免进一步的抽吸。由此，发挥防止微量液体提取装置的故障的效果。
微量液体提取装置也可以是向流路抽吸两种液体试样的双液混合型液体提取装置，该情况下的抽吸控制机构也可以能够向所述抽吸机构指示第2液的相对于第1液的抽吸液量而言的抽吸量，以使两种液体试样的混合比率成为所期望的比率。由此，能够得到所期望的混合比，因此发挥这样的效果：能够省去因失败而再次试验的工夫，并且能够以最低限度的液体试样量进行试验。
在该测量中，对测量的环境条件(温度、湿度、气压)进行监视，根据监视到的环境条件设定抽吸机构的设定条件。在液体试样明显较少的情况下，通知抽吸机构的故障或者流路构件的连接不良。
向流路抽吸的液体试样和荧光试剂的混合精度对测量对象的混合液中含有的核酸的浓度(最终浓度)产生影响。在进行预定量的抽吸动作时，若由于抽吸到流路的液体的物理性质(特别是粘性)而导致实际上抽吸到的量产生误差，则该混合液中的核酸的最终浓度产生误差，自该混合液测量到的光的强度不同。在对作为测量对象的液体试样中含有的核酸高精度地定量的情况下，需要校正误差。
关于最终浓度的校正，以将液体试样和荧光试剂等倍混合的情况为例进行说明。在抽吸了混合液体试样后的状态下，对试样液体的液体长度进行测量。对与接着抽吸的荧光试剂混合的混合液的液体长度进行测量。在等倍混合中相同体积的量被抽吸并混合，因此，荧光试剂的液体长度与液体试样的液体长度相同。
使用由已知浓度的标准液制成的标准曲线，根据测量到的光强度计算出最终浓度，针对最终浓度应用基于测量到的液体长度的混合比率，由此，能够计算出核酸浓度。
例如，将核酸浓度为20ng/μL的液体试样和荧光试剂等倍混合(5:5)时的最终浓度为10ng/μL，但在实际上抽吸且混合后的比例以由液体长度测量机构计算出的液体长度的比率计为4:6的情况下，浓度变稀，测量到的光强度也变弱。因此，根据标准曲线得到的浓度为16ng/μL。与此相对，若应用基于测量到的液体长度的混合比率(4:6)并进行换算，则能够计算出准确的浓度。
以上，本次所公开的实施方式在所有方面均为例示而非限制。本发明的范围由权利要求书示出，包括与权利要求书等同的含义以及范围内的所有变更。
附图标记说明
1、分析装置；10、液体提取器具；11、主体部；12、流路构件；12a、一端；12b、另一端；12c、流路；13、贯通孔；14、抽吸机构；20、20A、装置主体部；21、设置部；22、插入孔；23、抽吸机构控制部；24、配线；25、引导件；26、第1筒状部；26a、导入部；26b、引导路；27、第2筒状部；27b、引导路；30、数据处理装置；31、显示部；32、操作部；33、控制部；34、测量控制部；35、数据处理部；36、存储部；40、测量单元；41、照射部；42、光接收部；43、光学系统；44、第1波长选择元件；45、第2波长选择元件；46、光阑部；46a、开口部；50、液体长度测量机构。
Claims (24)
1.一种分析装置，其中，
所述分析装置具有：
流路；
抽吸机构，其经由所述流路的一端与所述流路连接，并且自所述流路的另一端向所述流路内部导入微量的液体试样，将所述液体试样保持于所述流路的局部；以及
测量单元，其构成为，对被保持于所述流路的局部的所述液体试样照射光的光照射部和接收来自所述液体试样的光的光接收部位于所述液体试样的周围，
在所述测量单元设有光阑部，该光阑部具有比被保持于所述流路的所述液体试样在所述流路中的液体长度短的开口宽度，限制自所述光照射部朝向所述液体试样去的光。
2.根据权利要求1所述的分析装置，其中，
所述分析装置具有：
液体提取器具，其构成为能够提取微量的液体；以及
装置主体部，其构成为能够供所述液体提取器具插入，
所述液体提取器具包括所述抽吸机构和形成有所述流路的流路构件，
所述装置主体部在内部包括所述测量单元，
所述测量单元对插入到所述装置主体部的内部的所述流路构件所保持的所述液体试样进行测量。
3.根据权利要求1或2所述的分析装置，其中，
所述抽吸机构以在形成于所述流路的两端侧的气体层或者液体层之间保持所述液体试样的方式抽吸所述液体试样。
4.根据权利要求3所述的分析装置，其中，
所述液体试样是混合有含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞、构成细胞的一部分的结构体、染色体、病毒粒子、细菌的试样以及对所述试样进行荧光标记的荧光试剂的混合液，或者是混合有所述试样以及被荧光标记了的具有特异性结合能力的抗体等的分子试剂的混合液，或者是混合有所述试样以及对所述试样进行发光标记的发光试剂的混合液。
5.根据权利要求3所述的分析装置，其中，
所述抽吸机构依次抽吸如下两种液体：含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对所述试样进行荧光标记的荧光试剂或者所述试样以及对所述试样进行发光标记的发光试剂，并且将所抽吸到的所述两种液体在所述流路内混合，
所述测量单元对混合有所述两种液体的混合液进行测量。
6.根据权利要求5所述的分析装置，其中，
利用所述抽吸机构，将所述试样和所述荧光试剂或者所述试样和所述发光试剂保持于所述流路内并且对所述流路内反复进行加压以及减压，由此，将所述试样和所述荧光试剂混合。
7.根据权利要求1所述的分析装置，其中，
所述分析装置具有对被保持于所述流路的所述液体试样的液体长度进行测量的液体长度测量部件，计算所述液体试样的体积。
8.根据权利要求7所述的分析装置，其中，
所述分析装置基于计算出的所述液体试样的体积，来校正所述抽吸机构对所述液体试样的抽吸量。
9.根据权利要求7所述的分析装置，其中，
所述分析装置基于计算出的所述液体试样的体积，来校正测量的结果。
10.根据权利要求2所述的分析装置，其中，
在所述装置主体部设有引导件，该引导件沿着所述流路构件的插入方向延伸，用于引导所述流路构件的插入，
所述光阑部由所述引导件构成。
11.根据权利要求1所述的分析装置，其中，
所述液体试样的抽吸量为1nL～100nL。
12.根据权利要求1所述的分析装置，其中，
所述流路的内净空截面为圆形。
13.根据权利要求1所述的分析装置，其中，
所述流路的内净空内径为2.0mm以下。
14.一种分析方法，其中，
经由流路的一端与所述流路连接，自所述流路的另一端向所述流路内部导入微量的液体试样，将所述液体试样保持于所述流路的局部，
通过配置为相对于被保持于所述流路的局部的所述液体试样而位于所述液体试样的周围的光照射部对所述液体试样照射光，
通过配置为相对于所述液体试样而位于所述液体试样的周围的光接收部接收来自所述液体试样的光，
利用具有比被保持于所述流路的所述液体试样在所述流路中的液体长度短的开口宽度的光阑部，对自所述光照射部朝向所述液体试样去的光进行限制，对来自所述液体试样的光进行测量。
15.根据权利要求14所述的分析方法，其中，
以在形成于所述流路的两端侧的气体层或者液体层之间保持所述液体试样的方式抽吸所述液体试样。
16.根据权利要求14所述的分析方法，其中，
所述液体试样的抽吸量为1nL～100nL。
17.根据权利要求14所述的分析方法，其中，
所述液体试样是混合有含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对所述试样进行荧光标记的荧光试剂的混合液，或者是混合有所述试样以及对所述试样进行发光标记的发光试剂的混合液。
18.根据权利要求14所述的分析方法，其中，
利用抽吸机构依次抽吸如下两种液体：含有核酸、氨基酸、肽、蛋白质、脂质、代谢物、细胞的试样以及对所述试样进行荧光标记的荧光试剂或者所述试样以及对所述试样进行发光标记的发光试剂，并且将所抽吸到的所述两种液体在所述流路内混合，对混合有所述两种液体的混合液进行测量。
19.根据权利要求18所述的分析方法，其中，
将所述试样和所述荧光试剂或者所述试样和所述发光试剂保持于所述流路内并且对所述流路内反复进行加压以及减压，由此，将所述试样和所述荧光试剂或者所述试样和所述发光试剂混合。
20.根据权利要求14所述的分析方法，其中，
对被保持于所述流路的所述液体试样的液体长度进行测量，计算所述液体试样的体积。
21.根据权利要求20所述的分析方法，其中，
基于计算出的所述液体试样的体积，来校正所述液体试样的抽吸量。
22.根据权利要求20所述的分析方法，其中，
基于计算出的所述液体试样的体积，来校正测量的结果。
23.一种微量液体提取装置，其中，
所述微量液体提取装置具有：
流路；
抽吸机构，其经由所述流路的一端与所述流路连接，并且自所述流路的另一端向所述流路内部导入微量的液体试样，将所述液体试样保持于所述流路的局部；以及
液体长度测量部件，其对被保持于所述流路的所述液体试样的液体长度进行测量，
所述微量液体提取装置包括抽吸控制机构，该抽吸控制机构计算所述液体试样的体积，将计算出的体积向所述抽吸机构反馈。
24.一种微量液体提取方法，其中，
经由流路的一端与所述流路连接，自所述流路的另一端向所述流路内部导入微量的液体试样，
将所述液体试样保持于所述流路的局部，
对被保持于所述流路的所述液体试样的液体长度进行测量，
计算所述液体试样的体积，
将计算出的体积向抽吸机构反馈。
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