CN112617015A - 含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物及其制备方法 - Google Patents

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CN112617015A CN202011473275.9A CN202011473275A CN112617015A CN 112617015 A CN112617015 A CN 112617015A CN 202011473275 A CN202011473275 A CN 202011473275A CN 112617015 A CN112617015 A CN 112617015A
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Abstract

本发明属于农业技术领域，具体涉及含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物及其制备方法。所述的饲料添加剂组合物包含以下组分：中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu，et Zeng)]发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。本发明的优点：(1)能提高动物生产性能和产品质量。(2)长期使用不产生毒副作用。(3)能有效地进入胃肠道发挥作用，不影响饲料适口性。(4)不发生或很少发生配伍禁忌，细菌对其不易产生抗药性。

Description

含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于农业技术领域，具体涉及含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组 合物及其制备方法。
背景技术
禽畜养殖生产中疫病较多，为了控制细菌、病毒感染，饲料添加剂中一般 都加有大量抗菌、抗病毒药物；为了促进畜禽产品的生长育肥，饲养户在生产 过程中经常添加激素类药物，违规滥用药物的现象极为普遍，由此引发的一些 列安全事件不胜枚举。
养殖业中抗生素的滥用，加大了动物疾病防治的难度，更直接或间接地危 害了人类的身体健康。例如动物畜产品药物的残留使人类病原菌产生耐药性， 产生“超级病菌”。早期研究表明，畜牧业抗生素滥用是人畜共患病之源。近年 来，世界各国均意识到抗生素滥用产生的问题，在发达国家已开始流行不使用 抗生素的养殖方法，即无抗养殖方法，代表了健康养殖的发展方向。《中华人民 共和国农业农村部公告》指出根据《兽药管理条例》《饲料和饲料添加剂管理条 例》有关规定，按照《遏制细菌耐药国家行动计划(2016～2020年)》和《全国 遏制动物源细菌耐药行动计划(2017～2020年)》部署，为维护我国动物源性食 品安全和公共卫生安全，我部决定停止生产、进口、经营、使用部分药物饲料 添加剂，并对相关管理政策作出调整，其中自2020年7月1日起，饲料生产企 业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。2020年 我国饲料行业进入了全面禁抗的重要时期。
随着抗生素滥用问题的日益严重及畜产品安全意识的不断增强，健康、绿 色养殖将是必然趋势，通过添加功能性饲料添加剂改善畜禽体质和生产性能极 为重要。
另外，工业大规模培养虫草菌多采用液体深层发酵，发酵结束后经固液分 离提取菌丝，属于的发酵液需要灭菌后废弃，不仅浪费资源而且增加成本。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种能提高畜禽生产性能和肉 蛋品质的饲料添加剂组合物及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，所述的饲料添加剂组合物包含 以下组分：中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu，et Zeng)]发酵培养物、 菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
进一步的，所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物: 菊芋浓缩液:玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:0.1～1:1～2。
进一步的，所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸≥20g/L、 虫草多糖≥6.0g/L、海藻糖≥3.0g/L、麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
进一步的，所述的中国被毛孢发酵培养物由以下方法制备：
Sa01菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速 75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组 分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、 蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa02发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发 酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度 达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖 0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、 酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸 二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa03扩大培养，Sa02发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培 养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到8～15％；
Sa04固液分离，经Sa03扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝 体和发酵余液；
Sa05浓缩，发酵余液浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得中国被毛孢发 酵培养物；
所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃， 保温30～60min。
进一步的，所述的菊芋浓缩液由以下方法制备：
Sb01原料处理，挑选新鲜无霉变菊芋或菊苣洗净、除杂备用或菊芋干复水；
Sb02浸提，处理好原料破碎或匀浆后浸提，浸提条件：80±10℃，pH值6.0～7.0，料水比1:10～1:20，30～120min；
Sb03固液分离，浸提后固液分离，料液活性炭脱色后阴阳离子交换脱盐， 收集流出液；
Sb04浓缩，流出液进行膜过滤后浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得菊 芋浓缩液。
进一步的，所述的玉米、蚕蛹水解浓缩液由以下方法制备：
Sc01原料处理，玉米和蚕蛹分别除杂、粉碎，取80目筛粉；
Sc02酶解、液化，玉米和蚕蛹按重量比1:0.2～1混合后，按料液比1:8～1:14 加水，充分混合后，加入中性蛋白酶3.0％±1.0％wt，调节温度至55±5℃，pH7.0±0.5， 保温1.0±0.5h后，加入高温淀粉酶，升温至100±5℃，保温至料液无明显颗粒物 澄清时降温至常温；
Sc03固液分离，酶解、液化后抽取上清液，上清液浓缩至可溶性干物质含 量15％～35％即得玉米、蚕蛹水解浓缩液。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的制备方法。
饲料添加剂组合物由以下方法制备：
S101混合，将中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩 液按重量比1:0.1～1:1～2混合均匀；
S102保温，混合液80±10℃，调节pH值6.5～7.5，保温30min～60min，即 得组合物；
S103干燥，上述组合物干燥后制得可溶性固体粉末组合物。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的使用方法。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的使用方法，所述的饲料添加剂 组合物按1～5％wt和基础日粮混合饲喂。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的用途。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的用途，所述的饲料添加剂组合 物用于提高畜禽生产性能和肉蛋品质。
本发明提供的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物中，富含氨基酸、 虫草多糖、海藻糖、麦角甾醇和γ-氨基丁酸。具有抑菌、抗病毒和抗癌作用； 甾醇类有抗疟疾作用。
多糖可以提高蛋鸡产蛋率、蛋产量、蛋重等指标。海藻糖可以以完整的二 糖形式直接被肉鸡直接吸收进入血液中，日粮添加海藻糖能显著提高肉鸡消化 性能，优化肉鸡肠道微生物体系，并能降低体内脂质过氧化产物丙二醛的含量， 可以促进肉鸡生长，增加日增重，提高肉鸡屠宰性能，降低料肉比、死淘率， 显著提高半净膛率和全净膛率。
麦角甾醇是微生物细胞膜的重要组成部份，对确保细胞活力、膜的流动性、 膜结合酶的活性、膜的完整性以及细胞物质运输等起着重要作用。麦角甾醇可 以增强人体抵抗疾病的能力，是重要的脂溶性维生素D2源，具有明显的抑菌、 抗肿瘤功效。而转化物维生素D2可以作为饲料添加剂添加在饲料中，增加畜禽 的产蛋率和孵化率。
γ-氨基丁酸是一种在动物体内起神经镇定作用的非蛋白质氨基酸，广泛存 在于哺乳动物中枢神经系统、外周神经系统和一些内分泌细胞中，是一种重要 的神经抑制性递质，对提高畜禽采食量、泌乳量、成活率、抗应激、降低呼吸 频率、缩短发情间隔等方面有着显著的效果。
菊粉是一类植物源性的天然果聚糖，主要来源于菊苣和菊芋的块茎，菊粉 在平衡肠道微生物、调节免疫、调控机体脂质代谢、氧化还原系统和促进矿物 质吸收等方面有着重要的作用。随着抗生素滥用问题的日益严重及畜产品安全 意识的不断增强，“无抗”养殖将是必然的趋势，而菊粉因其天然、无毒副作用， 具有改善畜禽肠道健康、提高免疫力及抗氧化等重要作用，作为一种天然的饲 料添加剂，具有良好的应用前景。
蚕蛹经酶解后，粗蛋白含量升高，高分子蛋白质被有效降解，蚕蛹水解复 合物，有效水解蚕蛹蛋白，获得不同水解度的蛋白质和不同分子量的肽及氨基 酸，既可以促进畜禽营养吸收，提高饲料转化率，又可以改善畜禽健康状况， 改善产物风味和饲料添加剂组合物适口性。
本发明提供的技术方案通过回收冬虫夏草发酵废液中的营养物质，有效的 解决了冬虫夏草发酵废液中有效资源浪费的问题，同时降低了发酵废液对环境 的污染。通过在畜禽饲料中添加本发明提供的饲料添加剂组合物，可有效畜禽 生产性能和肉蛋品质。本发明的原料成本低，设备简单，操作方便，易于实现 规模化生产，提高了产业附加值。
与现有技术相比，本发明提供的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的优点：
(1)能提高饲料利用率，促进动物的生长；能增强机体免疫功能，预防动物 疾病；能提高动物生产性能和产品质量。
(2)长期使用不产生毒副作用，动物产品中无药物和有害物质残留，对人类 健康无危害，动物的排泄物对环境不构成潜在污染危害。
(3)理化性质和生物活性稳定，能有效地进入胃肠道发挥作用，不影响饲料 适口性。
(4)与其他饲料添加剂合用，不发生或很少发生配伍禁忌，细菌对其不易产 生抗药性。
具体实施方式
为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，以下实施例对本发 明的作进一步详细描述，以下实施例仅用于说明发明，但不用来限制本发明的 范围。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，所述的饲料添加剂组合物包含 以下组分：中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
进一步的，所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物: 菊芋浓缩液:玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:0.1～1:1～2。
进一步的，所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸≥20g/L、 虫草多糖≥6.0g/L、海藻糖≥3.0g/L、麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
进一步的，所述的中国被毛孢发酵培养物由以下方法制备：
Sa01菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速 75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组 分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、 蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa02发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发 酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度 达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖 0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、 酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸 二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa03扩大培养，Sa02发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培 养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到8～15％；
Sa04固液分离，经Sa03扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝 体和发酵余液；
Sa05浓缩，发酵余液浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得中国被毛孢发 酵培养物；
所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃， 保温30～60min。
进一步的，所述的菊芋浓缩液由以下方法制备：
Sb01原料处理，挑选新鲜无霉变菊芋或菊苣洗净、除杂备用或菊芋干复水；
Sb02浸提，处理好原料破碎或匀浆后浸提，浸提条件：80±10℃，pH值6.0～7.0，料水比1:10～1:20，30～120min；
Sb03固液分离，浸提后固液分离，料液活性炭脱色后阴阳离子交换脱盐， 收集流出液；
Sb04浓缩，流出液进行膜过滤后浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得菊 芋浓缩液。
进一步的，所述的玉米、蚕蛹水解浓缩液由以下方法制备：
Sc01原料处理，玉米和蚕蛹分别除杂、粉碎，取80目筛粉；
Sc02酶解、液化，玉米和蚕蛹按重量比1:0.2～1混合后，按料液比1:8～1:14 加水，充分混合后，加入中性蛋白酶3.0％±1.0％wt，调节温度至55±5℃，pH7.0±0.5， 保温1.0±0.5h后，加入高温淀粉酶，升温至100±5℃，保温至料液无明显颗粒物 澄清时降温至常温；
Sc03固液分离，酶解、液化后抽取上清液，上清液浓缩至可溶性干物质含 量15％～35％即得玉米、蚕蛹水解浓缩液。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的制备方法。
饲料添加剂组合物由以下方法制备：
S101混合，将中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩 液按重量比1:0.1～1:1～2混合均匀；
S102保温，混合液80±10℃，调节pH值6.5～7.5，保温30min～60min，即 得组合物；
S103干燥，上述组合物干燥后制得可溶性固体粉末组合物。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的使用方法。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的使用方法，所述的饲料添加剂 组合物按1～5％wt和基础日粮混合饲喂。
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的用途。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的用途，所述的饲料添加剂组合 物用于提高畜禽生产性能和肉蛋品质。
实施例1
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，所述的饲料添加剂组合物包含 以下组分：中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物:菊芋浓缩液: 玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:0.1:2。
所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸23.4g/L、虫草多糖 6.15g/L、海藻糖3.67g/L、麦角甾醇556.7mg/kg、γ-氨基丁酸315.6mg/kg。
实施例2
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，所述的饲料添加剂组合物包含 以下组分：中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物:菊芋浓缩液: 玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:1:1。
所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸28.64g/L、虫草多糖 6.22g/L、海藻糖3.64g/L、麦角甾醇562.5mg/kg、γ-氨基丁酸334.5mg/kg。
实施例3
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，所述的饲料添加剂组合物包含 以下组分：中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物:菊芋浓缩液: 玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:0.5:1.5。
所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸25.63g/L、虫草多糖 6.24g/L、海藻糖3.72g/L、麦角甾醇584.2mg/kg、γ-氨基丁酸325.4mg/kg。
实施例4
中国被毛孢发酵培养物由以下方法制备：
Sa01菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值7.0、温度18℃，摇床转速85r/min， 培养8天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖2.4％、 玉米粉2.0％、土豆汁2.6％、酵母粉0.8％、蛋白胨2.6％、硫酸镁0.02％、磷酸 二氢钾0.02％和余量的水；
Sa02发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发 酵条件：pH值7.0，温度18℃，通气量1:1v/v，当发酵液菌丝浓度达到6％时， 进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖1.2％、玉米粉1.5％、 土豆汁3.2％、尿素0.5％、蚕蛹粉1.6％、酵母浸粉1％、菊芋3.6％、酵母膏1％、 硫酸镁0.03％、磷酸二氢钾0.02％和余量的水；
Sa03扩大培养，Sa02发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大3级，扩大培养 时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到12％；
Sa04固液分离，经Sa03扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝 体和发酵余液；
Sa05浓缩，发酵余液浓缩至可溶性干物质含量25％即得中国被毛孢发酵培 养物；
所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125℃， 保温60min。
实施例5
所述的菊芋浓缩液由以下方法制备：
Sb01原料处理，挑选新鲜无霉变菊芋或菊苣洗净、除杂备用或菊芋干复水；
Sb02浸提，处理好原料破碎或匀浆后浸提，浸提条件：80℃，pH值7.0， 料水比1:10，90min；
Sb03固液分离，浸提后固液分离，料液活性炭脱色后阴阳离子交换脱盐， 收集流出液；
Sb04浓缩，流出液进行膜过滤后浓缩至可溶性干物质含量25％即得菊芋浓 缩液。
实施例6
所述的玉米、蚕蛹水解浓缩液由以下方法制备：
Sc01原料处理，玉米和蚕蛹分别除杂、粉碎，取80目筛粉；
Sc02酶解、液化，玉米和蚕蛹按重量比1:1混合后，按料液比1:10，充分 混合后，加入中性蛋白酶3.0％wt，调节温度至55℃，pH7.0，保温1.0h后，加 入高温淀粉酶，升温至100℃，保温至料液无明显颗粒物澄清时降温至常温；
Sc03固液分离，酶解、液化后抽取上清液，上清液浓缩至可溶性干物质含 量25％即得玉米、蚕蛹水解浓缩液。
实施例7
本发明还提供含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物的制备方法。
饲料添加剂组合物由以下方法制备：
S101混合，将中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩 液按重量比1:1:1混合均匀；
S102保温，混合液80℃，调节pH值7，保温45min，即得组合物；
实施例8
肉鸡饲喂试验
试验地点：试验在青海省大通县专业禽类养殖合作社进行。
试验动物与分组：试验肉鸡品种选用京黄I号，挑选500只体重相近、不存 在疾病或缺陷以及其他不正常状况的1周龄京黄I号肉鸡，随机分为4组，每组 均为125只。
试验日粮：
基础日粮：试验所需基础饲粮由青海省大通县专业禽类养殖合作社提供， 根据NRC(1994)营养需要配置而成的粉状配合饲料，饲粮组成及营养水平见 表1。
表1基础日粮配方及营养水平
Figure BDA0002836668230000121
Figure BDA0002836668230000131
试验日粮：试验用中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物系青海珠峰药 业公司从青海新鲜冬虫夏草中分离得到的麦角菌科真菌冬虫夏草的无性世代 ——中国被毛孢菌种经液体深层发酵培养制得的菌液，经过固液分离，获得的 发酵液经过提纯、浓缩、喷雾干燥获得所述含中国被毛孢发酵培养物的饲料添 加剂组合物产品。营养成分见表2。
表2营养成分检测数据
序号 检测项目 检测值
1 水分％ 4.27
2 氨基酸％ 28.46
3 虫草多糖％ 6.38
4 海藻糖％ 3.57
5 麦角甾醇mg/kg 559.3
6 γ-氨基丁酸mg/kg 358.2
以中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物添加到基础日粮中制成试验日 粮，以添加量的不同进行分组，具体分组及中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂 组合物添加量如表3所示。
表3试验分组及虫草饲料添加添加量
Figure BDA0002836668230000141
注：中国被毛孢发酵液喷雾干燥粉添加量为每100kg添加量，单位kg。表3在满1周龄 按照肉鸡生产管理的试验中使用。
饲养密度：为方便试验，采用棚养方式，通风条件良好，一般2～3周龄肉 鸡雏鸡25只/m2，4～6周龄生长期20只/m2，7～9周龄育肥期15只/m2。
饲养管理：四组试验肉鸡均采用规模化肉鸡生产线饲养，采用棚养方式。 应控制环境条件不变，避免各种应激因素，以便鸡群能保持稳定的生长率。根 据肉鸡生长周期调整鸡棚室温、湿度，通风应根据生产实际，尽可能保证空气 新鲜和流通。每天保证适当时间的光照，当自然光照不足时需要进行人工补光。
每组试验中除了试验因子(即中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物的 添加量水平)之外，对照组与试验组的其它条件应力求一致，以减少试验误差， 提高试验的精确度。整个试验期内，应尽量保持饲料质量的稳定，添加中国被 毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物的饲料应充分混合均匀。饲养管理方式按照 蛋鸡标准方式进行，自由采食，自由饮水，喂料时间、饮水、消毒、免疫、卫 生条件等应完全一致。以组为单位统计最终饲料消耗量。饲料消耗量由总进料 量减去阶段结束的剩料量计算。试验开始前以及试验阶段结束后对饲料进行称 重，有鸡死亡或淘汰，按实际饲养天数×头均日采食量计算，在总耗料量中扣除。
饲喂试验预试期7d，各处理统一饲喂基础日粮，预试期结束时统计各组生 产性能，经分析无显著差异开始正式试验，正式试验期49天。
记录和样品处理：饲喂试验中，每日观察肉鸡精神状况，记录各组肉鸡的 采食量。试验结束后，各组分别随机选择10只肉鸡禁食12h后屠宰，每只鸡均 采集腿部鸡肉，除去鸡皮，剔骨，用组织捣碎机捣碎匀浆后装于密封袋中，-4℃ 冷藏保存备用。
统计分析：试验数据先用Excel初步处理，再采用SPSS24.0软件进行数据 处理，试验数据采用平均值±标准差表示，P>0.05时表示差异不显著，P<0.05时 表示差异显著，P<0.01时表示差异极显著。
测定指标及方法：
本试验主要分析中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物对肉鸡死淘率、 增重及肌肉营养成分的影响，主要测定指标及方法见下表4所示。
表4肉鸡肌肉中各营养成分测定方法
序号 指标 测定方法 序号 指标 测定方法
1 水分 GB 5009.3-2016 6 磷 GB 5009.87-2016
2 蛋白质 GB 5009.5-2016 7 牛磺酸 GB 5009.169-2016
3 脂肪 GB 5009.6-2016 8 维生素 GB 5009.82-2016
4 胆固醇 GB 5009.128-2016 9 氨基酸 GB 5009.124-2016
5 钙 GB 5009.91-2017 10 脂肪酸 GB 5009.168-2016
试验结果及分析：
中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物对肉鸡死淘率、肉鸡体重增重的 影响：肉鸡死淘率、体重增重的检测结果见表5。
表5肉鸡死淘率、体重增重统计结果
Figure BDA0002836668230000151
由表5经检测结果可知，日粮中添加中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组 合物能显著提高(P<0.05)肉鸡的体重增重，降低料蛋比，降低死淘率，从死淘 率情况来看，试验组004为最佳，比对照组死淘率降低了63.64％，从料肉比情 况来看，试验组004为最佳，比对照组肉料比降低了12.10％，从平均体重增重 情况来看，试验组004为最佳，比对照组平均体重增重提高了10.24％。
中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物对肉鸡鸡肉中各营养成分的影响： 肉鸡鸡肉中各营养成分的检测结果见表6。
表6肉鸡鸡肉营养成分检测结果
鸡蛋营养指标 对照组001 试验组002 试验组003 试验组004
水分含量(wt％) 74.78 74.57 74.49 74.46
脂肪含量(wt％) 1.58 1.46 1.38 1.32
蛋白质含量(wt％) 25.72 27.14 28.51 28.84
胆固醇含量(mg/100g) 81.27 68.14 67.52 62.43
钙含量(mg/kg) 73.15 74.82 75.31 76.13
磷含量(mg/kg) 1.28 1.37 1.39 1.45
硒含量(mg/kg) 26.06 27.68 27.91 28.72
牛磺酸(wt％) 67.28 74.52 76.25 81.18
维生素A(mg/100g) 0.042 0.045 0.044 0.047
由表6经检测结果可知，日粮中添加中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组 合物能显著提高(P<0.05)肉鸡鸡肉中蛋白质、钙、磷、硒、牛磺酸含量，能显 著降低(P<0.05)脂肪、胆固醇含量，但水分、维生素A无显著影响，各组试 验中以试验组004效果最佳。与对照组相比，试验组004肉鸡鸡肉中蛋白质、 钙、磷、硒、牛磺酸含量分别提高12.13％、4.07％、13.28％、10.21％、20.66％， 脂肪、胆固醇含量分别降低16.46％、23.18％。
中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物对肉鸡鸡肉中脂肪酸含量的影响： 肉鸡鸡肉中各脂肪酸含量的检测结果见表7。
表7肉鸡鸡肉脂肪酸含量检测结果
Figure BDA0002836668230000161
Figure BDA0002836668230000171
由表7经检测结果可知，日粮中添加中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组 合物能显著提高(P<0.05)肉鸡鸡肉中棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油 酸含量，各组试验中以试验组004效果最佳。与对照组相比，试验组004肉鸡 鸡肉中棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸含量分别提高62.5％、57.14％、 150.00％、60.00％、221.43％。5种不饱和脂肪酸总含量显著提高，与对照组相 比，试验组004不饱和脂肪酸总含量提高98.51％。
中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物对肉鸡鸡肉中氨基酸含量的影响： 肉鸡鸡肉中各氨基酸含量的检测结果见表8。
表8肉鸡鸡肉氨基酸含量检测结果
Figure BDA0002836668230000172
Figure BDA0002836668230000181
由表8经检测结果可知，日粮中添加中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组 合物能影响肉鸡鸡肉中氨基酸含量。17种氨基酸总量、人体必需氨基酸总量(苏 氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸)、风味氨基酸 总量(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)均显著高于对照组(P<0.05)，各 组试验中以试验组004效果最佳。与对照组相比，试验组004氨基酸总量提高 了6.67％，人体必需氨基酸总量提高了6.93％，风味氨基酸总量提高了3.94％。
实施例9
蛋鸡饲喂试验
试验动物与分组：试验选用800只体重相近、不存在疾病或缺陷以及其他 不正常状况的18周龄海兰褐壳蛋鸡，以中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合 物添加到基础日粮中，以添加量的不同进行分组，随机分为4组，每组均为200 只，为方便试验，采用笼养方式，20只/m2。具体分组及中国被毛孢发酵培养物 饲料添加剂组合物添加量如表9所示。
表9试验分组及虫草饲料添加添加量
Figure BDA0002836668230000182
Figure BDA0002836668230000191
注：中国被毛孢发酵液喷雾干燥粉添加量为每100kg添加量，单位kg。表9在满18周龄按照产蛋期管理的试验中使用。
基础日粮：蛋鸡饲喂试验采用玉米-豆粕-膨化大豆型基础日粮，具体配方详 见表10。
表10基础日粮配方及营养水平
Figure BDA0002836668230000192
饲养管理：四组试验蛋鸡均采用规模化蛋鸡生产线饲养，采用笼养方式， 20只/m2，每组20m2。产蛋期鸡群，应控制环境条件不变，避免各种应激因素， 以便鸡群能保持稳定的产蛋率。鸡室温度维持13～16℃，湿度保持60±5％，通 风应根据生产实际，尽可能保证空气新鲜和流通。每天保证14～17h的光照，最 适宜光照时间为16h，当自然光照不足时需要进行人工补光。
每组试验中除了试验因子(即中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物的 添加量水平)之外，对照组与试验组的其它条件应力求一致，以减少试验误差， 提高试验的精确度。整个试验期内，应尽量保持饲料质量的稳定，添加中国被 毛孢发酵培养物饲料添加剂组合物的饲料应充分混合均匀。饲养管理方式按照 蛋鸡标准方式进行，自由采食，自由饮水，喂料时间、饮水、消毒、免疫、卫 生条件等应完全一致。以组为单位统计最终饲料消耗量。饲料消耗量由总进料 量减去阶段结束的剩料量计算。试验开始前以及试验阶段结束后对饲料进行称 重，有鸡死亡或淘汰，按实际饲养天数×头均日采食量计算，在总耗料量中扣除。
饲喂试验预试期7d，各处理统一饲喂基础日粮，预试期结束时统计各组生 产性能，经分析无显著差异开始正式试验，正式试验期45天。
观察记录：饲喂试验中，每日观察蛋鸡精神状况，记录各组蛋鸡的采食量、 产蛋数、蛋重、软破壳蛋数，检测各组鸡蛋体重。
鸡蛋收集：按计划随机收集正试期各组新鲜鸡蛋，每次每组各30枚，用于 各种检测。
鸡蛋性能：
生产性能指标测定：在试验第9天、第18天、第27天、第36天和第45 天取样，以组为单位记录蛋鸡产蛋数、蛋重，计算产蛋率、平均蛋重、砂皮蛋 数。重量采用电子天平(精确到0.01g)测定。
数据的统计分析：采用SPSS24.0软件进行数据处理，试验数据采用“平均 值±标准差”表示，P>0.05时表示差异不显著，P<0.05时表示差异显著，P<0.01 时表示差异极显著。各组试验蛋鸡生产性能检测统计数据见表11。
表11蛋鸡生产性能检测数据
Figure BDA0002836668230000211
由表11可知，试验组蛋鸡饲喂虫草饲料添加剂组合物后，根据不同的饲喂 天数，日产蛋率、平均蛋重、料蛋比、砂皮蛋比例均有不同程度的变化。喂养 前期，各指标变化不明显，基本无显著差异，喂养后期，尤其45天检测数据显 示，试验组004中虫草饲料添加剂组合物的使用使蛋鸡日产蛋率提高了9.10％、 蛋重增加了11.04％，料蛋比降低了17.47％，砂皮蛋比例降低了12.11％。由各 组变化可知，当虫草饲料添加剂组合物添加量达到5.0％时，各项指标最佳。
鸡蛋品质指标测定：在试验的第45天，每组随机选取30枚鸡蛋，用游标 卡尺测定鸡蛋的短径和长径并计算蛋形指数。采用蛋壳强度测试仪测定蛋壳强 度；采用MA2蛋品质分析仪测定蛋壳厚度，分别测量蛋的钝端、中间和锐端3 个部位，求其平均值；用电子天平测定蛋重、蛋黄重、蛋白重，并计算蛋黄比 例、蛋白比例；采用MA2蛋白高度计测定蛋白高度，并由蛋重按蛋白高度加以 校正后计算出哈夫单位；蛋黄颜色用罗氏比色扇测定。
各组试验蛋鸡蛋品质指标测定结果详见表12。
表12试验蛋鸡产蛋后期的蛋品质测定结果
测定指标 对照组001 试验组002 试验组003 试验组004
蛋型指数％ 1.28±0.01 1.31±0.05 1.34±0.02 1.31±0.03
蛋壳厚度mm 0.36±0.04 0.37±0.02 0.39±0.01 0.38±0.03
蛋壳强度/(kg·cm-<sup>2</sup>) 4.22±0.28 4.31±0.39 4.48±0.32 4.51±0.34
蛋壳重g 5.96±0.37 6.27±0.42 7.51±0.38 7.15±0.32
蛋黄重g 15.52±1.21 15.87±1.24 16.69±1.52 15.43±1.43
蛋黄比例％ 0.30±0.02 0.31±0.04 0.34±0.03 0.33±0.01
蛋白重g 27.57±1.34 28.66±1.42 29.86±1.45 28.06±1.32
蛋白比例％ 57.28±0.03 58.36±0.01 58.72±0.05 57.43±0.04
蛋黄颜色 6.5±0.2 7.3±0.4 8.2±0.1 8.4±0.5
蛋白高度mm 5.37±0.21 5.73±0.25 6.32±0.22 6.18±0.24
哈夫单位 72.32±2.15 74.43±3.21 77.38±3.26 77.02±2.53
由表12经计算可知，与对照组相比，试验组蛋型指数、蛋壳厚度、蛋壳重、 蛋黄重、蛋黄比例、蛋白重、蛋白比例、蛋黄颜色、哈夫单位等均呈现不同程 度的变化，其中试验组003号的试验结果最佳，试验组004号相较于虫草饲料 添加剂组合物添加量所取得的效果开始减弱。试验组003号相比于对照组001 号，蛋型指数增加4.69％，蛋壳厚度增加8.33％，蛋壳重量增加6.16％，蛋黄重 量增加7.54％，蛋黄比例增加13.33％，蛋白重量增加8.31％，蛋白比例增加2.51％， 罗氏卡蛋黄颜色从6级加深至8级，哈夫单位升高7.00％。
鸡蛋营养检测：
样品处理：从收集的各组新鲜鸡蛋中，分别随机选取5枚鸡蛋，每组鸡蛋 全部去壳打碎，取鸡蛋可食部分，搅拌蛋清和蛋黄至充分混合均匀。用于营养 指标检测。
测定方法：鸡蛋中各成分测定方法如下表13所示。
表13鸡蛋中各成分测定方法
Figure BDA0002836668230000231
检测结果：鸡蛋营养检测结果详见表14。
表14鸡蛋营养检测结果
鸡蛋营养指标 对照组001 试验组002 试验组003 试验组004
蛋白质含量(wt％) 12.1 12.7 13.1 13.6
脂肪含量(wt％) 9.6 9.5 9.5 9.4
胆固醇含量(mg/100g) 373 332 278 245
维生素A(mg/100g) 176 189 223 241
维生素E(mg/100g) 1.21 1.35 1.41 1.48
DHA(mg/100g) 27.4 38.5 45.3 50.1
卵磷脂(蛋黄计)(wt％) 6.78 8.12 8.78 9.21
由表14经检测结果可知，与对照组相比，试验组蛋白质、维生素A、维生 素E、卵磷脂以及DHA含量均有不同程度提高，脂肪总含量变化不明显，胆固 醇含量均有不同程度降低，其中试验组004号的试验结果最佳。试验组004号 相比于对照组001号，蛋白质含量增加12.40％，维生素A含量增加36.93％，维 生素E含量增加22.31％，DHA含量增加82.85％，卵磷脂(以蛋黄计)含量增 加35.84％，胆固醇含量降低34.32％。
鸡蛋氨基酸含量检测结果详见表15。
表15鸡蛋氨基酸含量检测结果
Figure BDA0002836668230000241
由表15经检测结果可知，日粮中添加中国被毛孢发酵培养物饲料添加剂组 合物能影响鸡蛋中氨基酸含量。18种氨基酸总量、人体必需氨基酸总量(苏氨 酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸)、风味 氨基酸总量(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)均显著高于对照组(P<0.05)， 与对照组相比，试验组002、试验组003、试验组004氨基酸总量分别较对照组 001提高了5.74％、7.60％、13.43％，试验组002、试验组003、试验组004人体 必需氨基酸总量分别较对照组001提高了9.15％、11.43％、18.09％，试验组002、 试验组003、试验组004风味氨基酸总量分别较对照组001提高了2.91％、3.56％、8.41％。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施 方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进 行多种变换，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征和 步骤，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必 要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不 违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (9)

1.含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的饲料添加剂组合物包含以下组分：中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液。
2.根据权利要求1所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于：所述的添加剂组合物中各组分的比例为中国被毛孢发酵培养物:菊芋浓缩液:玉米、蚕蛹水解浓缩液＝1:0.1～1:1～2。
3.根据权利要求1或2所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的饲料添加剂组合物中有效成分含量为：氨基酸≥20g/L、虫草多糖≥6.0g/L、海藻糖≥3.0g/L、麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的中国被毛孢发酵培养物由以下方法制备：
Sa01菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa02发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
Sa03扩大培养，Sa02发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到8～15％；
Sa04固液分离，经Sa03扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
Sa05浓缩，发酵余液浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得中国被毛孢发酵培养物；
所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃，保温30～60min。
5.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的菊芋浓缩液由以下方法制备：
Sb01原料处理，挑选新鲜无霉变菊芋或菊苣洗净、除杂备用或菊芋干复水；
Sb02浸提，处理好原料破碎或匀浆后浸提，浸提条件：80±10℃，pH值6.0～7.0，料水比1:10～1:20，30～120min；
Sb03固液分离，浸提后固液分离，料液活性炭脱色后阴阳离子交换脱盐，收集流出液；
Sb04浓缩，流出液进行膜过滤后浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得菊芋浓缩液。
6.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的玉米、蚕蛹水解浓缩液由以下方法制备：
Sc01原料处理，玉米和蚕蛹分别除杂、粉碎，取80目筛粉；
Sc02酶解、液化，玉米和蚕蛹按重量比1:0.2～1混合后，按料液比1:8～1:14加水，充分混合后，加入中性蛋白酶3.0％±1.0％wt，调节温度至55±5℃，pH7.0±0.5，保温1.0±0.5h后，加入高温淀粉酶，升温至100±5℃，保温至料液无明显颗粒物澄清时降温至常温；
Sc03固液分离，酶解、液化后抽取上清液，上清液浓缩至可溶性干物质含量15％～35％即得玉米、蚕蛹水解浓缩液。
7.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于，所述的饲料添加剂组合物由以下方法制备：
S101混合，将中国被毛孢发酵培养物、菊芋浓缩液和玉米、蚕蛹水解浓缩液按重量比1:0.1～1:1～2混合均匀；
S102保温，混合液80±10℃，调节pH值6.5～7.5，保温30min～60min，即得组合物；
S103干燥，上述组合物干燥后制得可溶性固体粉末组合物。
8.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于：所述的饲料添加剂组合物按1～5％wt和基础日粮混合饲喂。
9.根据权利要求1～3任意一项所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂组合物，其特征在于：所述的饲料添加剂组合物用于提高畜禽生产性能和肉蛋品质。
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