CN112602824A - 一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂及其制备方法 Download PDFInfo
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
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- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Abstract
本发明属于农业技术领域，具体涉及一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂及其制备方法。所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。本发明的优点：(1)能提高动物生产性能和产品质量。(2)对人类健康无危害，动物的排泄物对环境不构成潜在污染危害。(3)能有效地进入胃肠道发挥作用，不影响饲料适口性。(4)不发生或很少发生配伍禁忌，细菌对其不易产生抗药性。
Description
技术领域
本发明属于农业技术领域，具体涉及一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
禽畜养殖生产中疫病较多，为了控制细菌、病毒感染，饲料添加剂中一般都加有大量抗菌、抗病毒药物；为了促进畜禽产品的生长育肥，饲养户在生产过程中经常添加激素类药物，违规滥用药物的现象极为普遍，由此引发的一些列安全事件不胜枚举。
养殖业中抗生素的滥用，抗加大了动物疾病防治的难度，更直接或间接地危害了人类的身体健康。例如动物畜产品药物的残留使人类病原菌产生耐药性，产生“超级病菌”。早期研究表明，畜牧业抗生素滥用是人畜共患病之源。近年来，世界各国均意识到抗生素滥用产生的问题，在发达国家已开始流行不使用抗生素的养殖方法，即无抗养殖方法，代表了健康养殖的发展方向。2019年7月，中国中国农业农村部颁布了《中华人民共和国农业农村部公告》(第194号)，公告指出根据《兽药管理条例》《饲料和饲料添加剂管理条例》有关规定，按照《遏制细菌耐药国家行动计划(2016～2020年)》和《全国遏制动物源细菌耐药行动计划(2017～2020年)》部署，为维护我国动物源性食品安全和公共卫生安全，我部决定停止生产、进口、经营、使用部分药物饲料添加剂，并对相关管理政策作出调整，其中自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。2020年我国饲料行业进入了全面禁抗的重要时期。
为了响应国家“健康中国2030”战略建设要求，实现全民健康，同时为了适应国际、国内市场对绿色、有机食品的需求，充分利用我国丰富的植物与微生物资源，开发“绿色”饲料添加剂产业，促进安全动物生产系统的构建十分必要。
另外，工业大规模培养虫草菌多采用液体深层发酵，发酵结束后经固液分离提取菌丝，属于的发酵液需要灭菌后废弃，不仅浪费资源而且增加成本。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种能提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质的饲料添加剂及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
进一步的，所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸≥10.0％、虫草多糖≥6.0％、海藻糖≥3.0％和麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
进一步的，所述的饲料添加剂按0.5～5％wt和基础日粮混合饲喂。
本发明还提供制备上述饲料添加剂的方法。
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到6～15％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
进一步的，所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃，保温30～60min。
进一步的，所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
本发明提供的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂中，富含蛋白质、氨基酸、虫草多糖及其他活性物质，其中虫草酸、核苷类、氨基酸、多肽、多糖类、糖醇、甾醇类维生素及多种微量元素等活性成分，具有抑菌、抗病毒和抗癌作用；甾醇类有抗疟疾作用；另外，药用真菌具有分解纤维素、淀粉、蛋白质、酯类等物质的强大酶系。
本发明提供的技术方案通过回收冬虫夏草发酵废液中的营养物质，使用特定的蛋白酶解之后得到了具有良好效果的饲料添加剂，有效的解决了冬虫夏草发酵废液中有效资源浪费的问题，同时降低了发酵废液对环境的污染。通过在畜禽饲料中添加本发明提供的饲料添加剂，可有效提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质，具有良好的效果。本发明的原料成本低，设备简单，操作方便，易于实现规模化生产，提高了产业附加值。
与现有技术相比，本发明提供的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的优点：
(1)能提高饲料利用率，促进动物的生长；能增强机体免疫功能，预防动物疾病；能提高动物生产性能和产品质量。
(2)长期使用不产生毒副作用，动物产品中无药物和有害物质残留，对人类健康无危害，动物的排泄物对环境不构成潜在污染危害。
(3)理化性质和生物活性稳定，能有效地进入胃肠道发挥作用，不影响饲料适口性。
(4)与其他饲料添加剂合用，不发生或很少发生配伍禁忌，细菌对其不易产生抗药性。
具体实施方式
为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，以下实施例对本发明的作进一步详细描述，以下实施例仅用于说明发明，但不用来限制本发明的范围。
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
进一步的，所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸≥10.0％、虫草多糖≥6.0％、海藻糖≥3.0％和麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
进一步的，所述的饲料添加剂按0.5～5％wt和基础日粮混合饲喂。
本发明还提供制备上述饲料添加剂的方法。
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到6～15％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
进一步的，所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃，保温30～60min。
进一步的，所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
实施例1
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸≥10.0％、虫草多糖≥6.0％、海藻糖≥3.0％和麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
所述的饲料添加剂按0.5％wt和基础日粮混合饲喂。
实施例2
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸11.2％、虫草多糖6.24％、海藻糖3.15％和麦角甾醇548mg/kg、γ-氨基丁酸365mg/kg。
所述的饲料添加剂按5％wt和基础日粮混合饲喂。
实施例3
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸10.8％、虫草多糖6.54％、海藻糖3.88％和麦角甾醇586mg/kg、γ-氨基丁酸319mg/kg。
所述的饲料添加剂按2.6％wt和基础日粮混合饲喂。
实施例4
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0、温度16℃，摇床转速75r/min，培养10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖1.7％、玉米粉1.7％、土豆汁2.7％、酵母粉0.8％、蛋白胨2.7％、硫酸镁0.02％、磷酸二氢钾0.02％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.0，温度16℃，通气量1:0.5v/v，当发酵液菌丝浓度达到4％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖1.3％、玉米粉1.5％、土豆汁3.2％、尿素0.6％、蚕蛹粉1.7％、酵母浸粉1.7％、菊芋3.2％、酵母膏1％、硫酸镁0.02％、磷酸二氢钾0.02％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到6％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125℃，保温60min。
所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
实施例5
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值7.0、温度20℃，摇床转速90r/min，培养10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5％、玉米粉3.0％、土豆汁5.0％、酵母粉0.1％、蛋白胨5.0％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值7.0，温度20℃，通气量1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖2.0％、玉米粉0.5％、土豆汁5.0％、尿素1.0％、蚕蛹粉0.5％、酵母浸粉1.5％、菊芋5.0％、酵母膏0.5％、硫酸镁0.05％、磷酸二氢钾0.05％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大4级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到15％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
进一步的，所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，130℃，保温30min。
进一步的，所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
实施例6
一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.5、温度18℃，摇床转速60r/min，培养7天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖3.0％、玉米粉0.5％、土豆汁0.5％、酵母粉1.5％、蛋白胨0.5％、硫酸镁0.01％、磷酸二氢钾0.01％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.5，温度18℃，通气量1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到6％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖2.0％、玉米粉0.5％、土豆汁1.5％、尿素1.0％、蚕蛹粉0.5％、酵母浸粉0.5％、菊芋1.5％、酵母膏1.5％、硫酸镁0.01％、磷酸二氢钾0.01％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大3级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到12％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
进一步的，所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125℃，保温45min。
进一步的，所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
实施例7
肉鸡饲喂试验
试验地点：试验在青海省大通县专业禽类养殖合作社进行。
试验动物与分组：试验肉鸡品种选用京黄I号，挑选400只体重相近、不存在疾病或缺陷以及其他不正常状况的1周龄京黄I号肉鸡，随机分为4组，每组均为100只。
试验日粮
基础日粮：试验所需基础饲粮由青海省大通县专业禽类养殖合作社提供，根据NRC(1994)营养需要配置而成的粉状配合饲料，饲粮组成及营养水平见表1。
表1基础日粮配方及营养水平
试验日粮：试验用含中国被毛孢培养物的饲料添加剂系青海珠峰药业公司从青海新鲜冬虫夏草中分离得到的麦角菌科真菌冬虫夏草的无性世代——中国被毛孢(Hirsutella sinensis)菌种经液体深层发酵培养制得的菌液，经过固液分离，获得的发酵液经过提纯、浓缩、喷雾干燥获得所述含中国被毛孢发酵培养物的饲料添加剂产品。营养成分见表2。
表2营养成分检测数据
| 序号 | 检测项目 | 检测值 |
| 1 | 水分％ | 3.58 |
| 2 | 氨基酸％ | 13.62 |
| 3 | 虫草多糖％ | 7.38 |
| 4 | 海藻糖％ | 4.57 |
| 5 | 麦角甾醇mg/kg | 859.3 |
| 6 | γ-氨基丁酸mg/kg | 458.2 |
以含中国被毛孢培养物的饲料添加剂添加到基础日粮中制成试验日粮，以添加量的不同进行分组，具体分组及含中国被毛孢培养物的饲料添加剂添加量如表3所示：
表3试验分组及虫草饲料添加添加量
注：中国被毛孢发酵液喷雾干燥粉添加量为每100kg添加量,单位kg。表7在满1周龄按照肉鸡生产管理的试验中使用。
饲养密度：为方便试验，采用棚养方式，通风条件良好，一般2～3周龄肉鸡雏鸡25只/㎡，4～6周龄生长期20只/㎡，7～9周龄育肥期15只/㎡。
饲养管理：四组试验肉鸡均采用规模化肉鸡生产线饲养，采用棚养方式。应控制环境条件不变，避免各种应激因素，以便鸡群能保持稳定的生长率。根据肉鸡生长周期调整鸡棚室温、湿度，通风应根据生产实际，尽可能保证空气新鲜和流通。每天保证适当时间的光照，当自然光照不足时需要进行人工补光。
每组试验中除了试验因子(即含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的添加量水平)之外，对照组与试验组的其它条件应力求一致，以减少试验误差，提高试验的精确度。整个试验期内，应尽量保持饲料质量的稳定，添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的饲料应充分混合均匀。饲养管理方式按照蛋鸡标准方式进行，自由采食，自由饮水，喂料时间、饮水、消毒、免疫、卫生条件等应完全一致。以组为单位统计最终饲料消耗量。饲料消耗量由总进料量减去阶段结束的剩料量计算。试验开始前以及试验阶段结束后对饲料进行称重，有鸡死亡或淘汰，按实际饲养天数×头均日采食量计算，在总耗料量中扣除。
饲喂试验预试期7d，各处理统一饲喂基础日粮，预试期结束时统计各组生产性能，经分析无显著差异开始正式试验，正式试验期49天。
记录和样品处理：饲喂试验中，每日观察肉鸡精神状况，记录各组肉鸡的采食量。试验结束后，各组分别随机选择10只肉鸡禁食12h后屠宰，每只鸡均采集腿部鸡肉，除去鸡皮，剔骨，用组织捣碎机捣碎匀浆后装于密封袋中，-4℃冷藏保存备用。
统计分析：试验数据先用Excel初步处理，再采用SPSS24.0软件进行数据处理，试验数据采用“平均值±标准差”表示，P＞0.05时表示差异不显著，P＜0.05时表示差异显著，P＜0.01时表示差异极显著。
测定指标及方法：本试验主要分析含中国被毛孢培养物的饲料添加剂对肉鸡死淘率、增重及肌肉营养成分的影响，主要测定指标及方法见下表4所示。
表4肉鸡肌肉中各营养成分测定方法
试验结果及分析
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂对肉鸡死淘率、肉鸡体重增重的影响：肉鸡死淘率、体重增重的检测结果见表5。
表5肉鸡死淘率、体重增重统计结果
由表5经检测结果可知，日粮中添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂能显著提高(P＜0.05)肉鸡的体重增重，降低料蛋比，降低死淘率，从死淘率情况来看，试验组003和试验组004为最佳，比对照组死淘率分别降低了57.14％、57.14％，从料肉比情况来看，试验组004为最佳，比对照组料肉比降低了11.73％，从平均体重增重情况来看，试验组003为最佳，比对照组平均体重增重提高了10.24％。综合分析，试验组003的综合收益最高。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂对肉鸡鸡肉中各营养成分的影响：肉鸡鸡肉中各营养成分的检测结果见表6。
表6肉鸡鸡肉营养成分检测结果
由表6经检测结果可知，日粮中添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂能显著提高(P＜0.05)肉鸡鸡肉中蛋白质、钙、磷、硒、牛磺酸含量，能显著降低(P＜0.05)脂肪、胆固醇含量，但水分、维生素A无显著影响，各组试验中以试验组003效果最佳。与对照组相比，试验组003肉鸡鸡肉中蛋白质、钙、磷、硒、牛磺酸含量分别提高12.13％、4.07％、13.28％、10.21％、20.66％，脂肪、胆固醇含量分别降低16.46％、23.18％。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂对肉鸡鸡肉中脂肪酸含量的影响：肉鸡鸡肉中各脂肪酸含量的检测结果见表7。
表7肉鸡鸡肉脂肪酸含量检测结果
| 鸡蛋营养指标 | 对照组001 | 试验组002 | 试验组003 | 试验组004 |
| 棕榈酸含量(wt％) | 0.08 | 0.11 | 0.13 | 0.12 |
| 棕榈油酸含量(wt％) | 0.007 | 0.009 | 0.011 | 0.009 |
| 硬脂酸含量(wt％) | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.04 |
| 油酸含量(mg/100g) | 0.10 | 0.13 | 0.16 | 0.14 |
| 亚油酸含量(mg/kg) | 0.056 | 0.17 | 0.18 | 0.18 |
| 合计(mg/kg) | 0.268 | 0.461 | 0.532 | 0.491 |
由表7经检测结果可知，日粮中添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂能显著提高(P＜0.05)肉鸡鸡肉中棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸含量，各组试验中以试验组003效果最佳。与对照组相比，试验组003肉鸡鸡肉中棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸含量分别提高62.5％、57.14％、150.00％、60.00％、221.43％。5种不饱和脂肪酸总含量显著提高，与对照组相比，试验组003不饱和脂肪酸总含量提高98.51％。
含中国被毛孢培养物的饲料添加剂对肉鸡鸡肉中氨基酸含量的影响：肉鸡鸡肉中各氨基酸含量的检测结果见表8。
表8肉鸡鸡肉氨基酸含量检测结果
由表8经检测结果可知，日粮中添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂能影响肉鸡鸡肉中氨基酸含量。17种氨基酸总量、人体必需氨基酸总量(苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸)、风味氨基酸总量(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)均显著高于对照组(P＜0.05)，各组试验中以试验组003效果最佳。与对照组相比，试验组003氨基酸总量提高了6.67％，人体必需氨基酸总量提高了6.93％，风味氨基酸总量提高了3.94％。
实施例8
蛋鸡饲喂试验
试验动物与分组：试验选用1000只体重相近、不存在疾病或缺陷以及其他不正常状况的18周龄海兰褐壳蛋鸡，以含中国被毛孢培养物的饲料添加剂添加到基础日粮中，以添加量的不同进行分组，随机分为4组，每组均为250只，为方便试验，采用笼养方式，25只/㎡。具体分组及含中国被毛孢培养物的饲料添加剂添加量如下表9所示：
表9试验分组及虫草饲料添加添加量
注：中国被毛孢发酵液喷雾干燥粉添加量为每100kg添加量,单位kg。表13在满18周龄按照产蛋期管理的试验中使用。
基础日粮：蛋鸡饲喂试验采用玉米-豆粕-膨化大豆型基础日粮，具体配方详见表10。
表10基础日粮配方及营养水平
饲养管理：四组试验蛋鸡均采用规模化蛋鸡生产线饲养，采用笼养方式，25只/㎡，每组20㎡。产蛋期鸡群，应控制环境条件不变，避免各种应激因素，以便鸡群能保持稳定的产蛋率。鸡室温度维持13～16℃，湿度保持60±5％，通风应根据生产实际，尽可能保证空气新鲜和流通。每天保证14～17h的光照，最适宜光照时间为16h，当自然光照不足时需要进行人工补光。
每组试验中除了试验因子(即含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的添加量水平)之外，对照组与试验组的其它条件应力求一致，以减少试验误差，提高试验的精确度。整个试验期内，应尽量保持饲料质量的稳定，添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂的饲料应充分混合均匀。饲养管理方式按照蛋鸡标准方式进行，自由采食，自由饮水，喂料时间、饮水、消毒、免疫、卫生条件等应完全一致。以组为单位统计最终饲料消耗量。饲料消耗量由总进料量减去阶段结束的剩料量计算。试验开始前以及试验阶段结束后对饲料进行称重，有鸡死亡或淘汰，按实际饲养天数×头均日采食量计算，在总耗料量中扣除。
饲喂试验预试期7d，各处理统一饲喂基础日粮，预试期结束时统计各组生产性能，经分析无显著差异开始正式试验，正式试验期45天。
观察记录：
饲喂试验中，每日观察蛋鸡精神状况，记录各组蛋鸡的采食量、产蛋数、蛋重、软破壳蛋数，检测各组鸡蛋体重。
鸡蛋收集：按计划随机收集正试期各组新鲜鸡蛋，每次每组各30枚，用于各种检测。
鸡蛋性能
生产性能指标测定：在试验第9天、第18天、第27天、第36天和第45天取样，以组为单位记录蛋鸡产蛋数、蛋重，计算产蛋率、平均蛋重、砂皮蛋数。重量采用电子天平(精确到0.01g)测定。
数据的统计分析：采用SPSS24.0软件进行数据处理，试验数据采用“平均值±标准差”表示。各组试验蛋鸡生产性能检测统计数据见表11。
表11蛋鸡生产性能检测数据
由表11可知，试验组蛋鸡饲喂虫草饲料添加剂后，根据不同的饲喂天数，日产蛋率、平均蛋重、料蛋比、砂皮蛋比例均有不同程度的变化。喂养前期，各指标变化不明显，基本无显著差异，喂养后期，尤其45天检测数据显示，试验组003中虫草饲料添加剂的使用使蛋鸡日产蛋率提高了12.64％、蛋重增加了15.15％，料蛋比降低了11.15％，砂皮蛋比例降低了17.54％。由各组变化可知，虫草饲料添加剂并非添加的越多越好，当虫草饲料添加剂添加量超过5.0％时，影响蛋鸡的适口性，各指标会下降。
鸡蛋品质指标测定：在试验的第45天，每组随机选取选取30枚鸡蛋，用游标卡尺测定鸡蛋的短径和长径并计算蛋形指数。采用蛋壳强度测试仪测定蛋壳强度；采用MA2蛋品质分析仪测定蛋壳厚度，分别测量蛋的钝端、中间和锐端3个部位，求其平均值；用电子天平测定蛋重、蛋黄重、蛋白重，并计算蛋黄比例、蛋白比例；采用MA2蛋白高度计测定蛋白高度，并由蛋重按蛋白高度加以校正后计算出哈夫单位；蛋黄颜色用罗氏比色扇测定。
各组试验蛋鸡蛋品质指标测定结果详见表12。
表12试验蛋鸡产蛋后期的蛋品质测定结果
| 测定指标 | 对照组001 | 试验组002 | 试验组003 | 试验组004 |
| 蛋型指数％ | 1.28±0.01 | 1.31±0.05 | 1.34±0.02 | 1.31±0.03 |
| 蛋壳厚度mm | 0.36±0.04 | 0.37±0.02 | 0.39±0.01 | 0.38±0.03 |
| 蛋壳强度/(kg·cm<sup>-2</sup>) | 4.22±0.28 | 4.31±0.39 | 4.48±0.32 | 4.51±0.34 |
| 蛋壳重g | 5.96±0.37 | 6.27±0.42 | 7.51±0.38 | 7.15±0.32 |
| 蛋黄重g | 15.52±1.21 | 15.87±1.24 | 16.69±1.52 | 15.43±1.43 |
| 蛋黄比例％ | 0.30±0.02 | 0.31±0.04 | 0.34±0.03 | 0.33±0.01 |
| 蛋白重g | 27.57±1.34 | 28.66±1.42 | 29.86±1.45 | 28.06±1.32 |
| 蛋白比例％ | 57.28±0.03 | 58.36±0.01 | 58.72±0.05 | 57.43±0.04 |
| 蛋黄颜色 | 6.5±0.2 | 7.3±0.4 | 8.2±0.1 | 8.4±0.5 |
| 蛋白高度mm | 5.37±0.21 | 5.73±0.25 | 6.32±0.22 | 6.18±0.24 |
| 哈夫单位 | 72.32±2.15 | 74.43±3.21 | 77.38±3.26 | 77.02±2.53 |
由表12经计算可知，与对照组相比，试验组蛋型指数、蛋壳厚度、蛋壳重、蛋黄重、蛋黄比例、蛋白重、蛋白比例、蛋黄颜色、哈夫单位等均呈现不同程度的变化，其中试验组003号的试验结果最佳，试验组004号相较于虫草饲料添加剂添加量所取得的效果开始减弱。试验组003号相比于对照组001号，蛋型指数增加4.69％，蛋壳厚度增加8.33％，蛋壳重量增加6.16％，蛋黄重量增加7.54％，蛋黄比例增加13.33％，蛋白重量增加8.31％，蛋白比例增加2.51％，罗氏卡蛋黄颜色从6级加深至8级，哈夫单位升高7.00％。
鸡蛋营养检测
样品处理：从收集的各组新鲜鸡蛋中，分别随机选取5枚鸡蛋，每组鸡蛋全部去壳打碎，取鸡蛋可食部分，搅拌蛋清和蛋黄至充分混合均匀。用于营养指标检测。
测定方法：鸡蛋中各成分测定方法如下表13所示：
表13鸡蛋中各成分测定方法
检测结果：鸡蛋营养检测结果详见表14。
表14鸡蛋营养检测结果
| 鸡蛋营养指标 | 对照组001 | 试验组002 | 试验组003 | 试验组004 |
| 蛋白质含量(wt％) | 12.1 | 12.6 | 13.5 | 13.1 |
| 脂肪含量(wt％) | 9.6 | 9.5 | 9.5 | 9.6 |
| 胆固醇含量(mg/100g) | 373 | 332 | 245 | 278 |
| 维生素A(mg/100g) | 176 | 189 | 241 | 223 |
| 维生素E(mg/100g) | 1.21 | 1.35 | 1.48 | 1.41 |
| DHA(mg/100g) | 27.4 | 38.5 | 50.1 | 49.3 |
| 卵磷脂(蛋黄计)(wt％) | 6.78 | 8.12 | 9.25 | 9.21 |
由表14经检测结果可知，与对照组相比，试验组蛋白质、维生素A、维生素E、卵磷脂以及DHA含量均有不同程度提高，脂肪总含量变化不明显，胆固醇含量均有不同程度降低，其中试验组003号的试验结果最佳，试验组004号相较于虫草饲料添加剂添加量所取得的效果开始减弱。试验组003号相比于对照组001号，蛋白质含量增加11.57％，维生素A含量增加36.93％，维生素E含量增加22.31％，DHA含量增加82.85％，卵磷脂(以蛋黄计)含量增加36.43％，胆固醇含量降低34.32％。
鸡蛋氨基酸含量检测结果详见表15。
表15鸡蛋氨基酸含量检测结果
由表15经检测结果可知，日粮中添加含中国被毛孢培养物的饲料添加剂能影响鸡蛋中氨基酸含量。18种氨基酸总量、人体必需氨基酸总量(苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸)、风味氨基酸总量(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)均显著高于对照组(P＜0.05)，与对照组相比，试验组002、试验组003、试验组004氨基酸总量分别较对照组001提高了5.74％、13.43％、7.60％，试验组002、试验组003、试验组004人体必需氨基酸总量分别较对照组001提高了9.15％、18.09％、11.43％，试验组002、试验组003、试验组004风味氨基酸总量分别较对照组001提高了2.91％、8.41％、3.56％。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种变换，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征和步骤，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (6)
1.一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于，所述的饲料添加剂是中国被毛孢[Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu,et Zeng)]菌种经液体深层发酵、固液分离后所得的发酵液的干燥物。
2.根据权利要求1所述的一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于，所述的含中国被毛孢培养物的饲料添加剂含有以下重量百分比的组分：氨基酸≥10.0％、虫草多糖≥6.0％、海藻糖≥3.0％和麦角甾醇≥500mg/kg、γ-氨基丁酸≥300mg/kg。
3.根据权利要求1所述的一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于：所述的饲料添加剂按0.5～5％wt和基础日粮混合饲喂。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于：所述的饲料添加剂的制备方法为：
S101菌种培养，中国被毛孢菌种在pH值6.0～7.0、温度16±4℃，摇床转速75±15r/min，培养4～10天后接种至发酵罐；种子培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～3.0％、玉米粉0.5～3.0％、土豆汁0.5～5.0％、酵母粉0.1～1.5％、蛋白胨0.5～5.0％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S102发酵培养，摇床培养好的中国被毛孢菌种接种至发酵培养液发酵，发酵条件：pH值6.0～7.0，温度16±4℃，通气量1:0.5～1:2v/v，当发酵液菌丝浓度达到4～8％时，进行转罐培养；发酵培养基含重量百分比的以下组分：葡萄糖0.5～2.0％、玉米粉0.5～2.5％、土豆汁1.5～5.0％、尿素0.1～1.0％、蚕蛹粉0.5～3.0％、酵母浸粉0.5～1.5％、菊芋1.5～5.0％、酵母膏0.5～1.5％、硫酸镁0～0.05％、磷酸二氢钾0～0.05％和余量的水；
S103扩大培养，S102发酵培养液进行逐级扩大培养，扩大2～4级，扩大培养时，用发酵培养基补料，发酵终点为菌丝浓度达到6～15％；
S104固液分离，经S103扩大培养后的发酵培养液固液分离，分别收集菌丝体和发酵余液；
S105发酵余液干燥，固液分离后的发酵余液浓缩后干燥，即得含中国被毛孢培养物的饲料添加剂。
5.根据权利要求4所述的一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于：所述的种子培养基、发酵培养液和发酵设备都需要灭菌；灭菌条件，125±5℃，保温30～60min。
6.根据权利要求1～3任意一项所述的一种含中国被毛孢培养物的饲料添加剂，其特征在于：所述的饲料添加剂用于提高畜禽体重增加、降低料蛋比和/或料肉比、降低死淘率，提高畜禽的产量和品质。
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2020
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