CN112608854A - 一种高耐酸性的酵母菌制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种高耐酸性的酵母菌制备方法，所述制备方法包含以下方法；步骤一：菌种活化；步骤二：菌种筛选；步骤三：菌种培养；步骤四：菌种筛选。所述步骤一中菌种活化为将菌种置于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，在24℃‑28℃条件下进行摇床培养20h‑26h，并且摇床转速为230rpm，所述步骤二中菌种筛选为取适量富集酵母菌群落于麦芽汁培养基中进行稀释，通过显微镜下进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选。该高耐酸性的酵母菌制备方法，能够快速的进行耐酸性酵母菌的制备，保证酵母菌的质量，保证制备存活率，有利于通过共同培养提高酵母菌在酸性环境中的生长性能。

Description

一种高耐酸性的酵母菌制备方法
技术领域
本发明涉及酵母菌制备技术领域，具体为一种高耐酸性的酵母菌制备方法。
背景技术
酵母是一种单细胞真菌，是一种微小的单细胞微生物，也是被人类应用最早的微生物，目前已知的酵母菌多种多样，在进行应用时也是根据使用进行挑选；
随着目前生物技术的不断发展，能够对不同的酵母菌进行改性，提高甚至增加酵母菌的性能，但仍没有一种准确的进行酵母菌耐酸性性能的提高增加制备方式，因此，我们提出一种高耐酸性的酵母菌制备方法，以便于解决上述中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高耐酸性的酵母菌制备方法，以解决上述背景技术提出的目前仍没有一种准确的进行酵母菌耐酸性性能的提高增加制备方式的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高耐酸性的酵母菌制备方法，所述制备方法包含以下方法；
步骤一：菌种活化；
步骤二：菌种筛选；
步骤三：菌种培养；
步骤四：菌种筛选。
优选的，所述步骤一中菌种活化为将菌种置于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，在24℃-28℃条件下进行摇床培养20h-26h，并且摇床转速为230rpm。
优选的，所述步骤二中菌种筛选为取适量富集酵母菌群落于麦芽汁培养基中进行稀释，通过显微镜下进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选。
优选的，所述步骤三中菌种培养是将原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidopHilus）之间混合培养。
优选的，所述嗜酸乳酸杆菌于添加
Figure 869441DEST_PATH_IMAGE001
后pH为6.2-6.4的MRS培养基中37℃条件下静止培养18h－21h。
优选的，所述混合培养的培养条件为原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例为1:3-4，且温度为28℃恒温条件下，120rpm转速条件下摇床培养24h，并且培养后静置4h。
优选的，所述步骤四中是将混合培养后的菌液进行收集后，在8000rpm、4℃-15℃条件下离心分离3min-5min，得到耐酸性酵母菌。
优选的，所述高耐酸酵母菌通过重复步骤二、步骤三和步骤四进行加工，且酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例逐渐提高。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：该高耐酸性的酵母菌制备方法，能够快速的进行耐酸性酵母菌的制备，保证酵母菌的质量，保证制备存活率，有利于通过共同培养提高酵母菌在酸性环境中的生长性能。
附图说明
图1为本发明制备流程示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种高耐酸性的酵母菌制备方法，所述制备方法包含以下方法；
步骤一：菌种活化；
步骤二：菌种筛选；
步骤三：菌种培养；
步骤四：菌种筛选。
本发明进一步的，所述步骤一中菌种活化为将菌种置于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，在24℃-28℃条件下进行摇床培养20h-26h，并且摇床转速为230rpm。
本发明进一步的，所述步骤二中菌种筛选为取适量富集酵母菌群落于麦芽汁培养基中进行稀释，通过显微镜下进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选。
本发明进一步的，所述步骤三中菌种培养是将原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidopHilus）之间混合培养。
本发明进一步的，所述嗜酸乳酸杆菌于添加
Figure 68341DEST_PATH_IMAGE001
后pH为6.2-6.4的MRS培养基中37℃条件下静止培养18h－21h。
本发明进一步的，所述混合培养的培养条件为原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例为1:3-4，且温度为28℃恒温条件下，120rpm转速条件下摇床培养24h，并且培养后静置4h。
本发明进一步的，所述步骤四中是将混合培养后的菌液进行收集后，在8000rpm、4℃-15℃条件下离心分离3min-5min，得到耐酸性酵母菌。
本发明进一步的，所述高耐酸酵母菌通过重复步骤二、步骤三和步骤四进行加工，且酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例逐渐提高。
实施例1：
选取酵母菌，如啤酒酵母，取酵母1.5ML，置于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，在26℃条件下进行摇床培养25h，并且摇床转速为230rpm；
同时选取1ML嗜酸乳酸杆菌于添加
Figure 674903DEST_PATH_IMAGE001
后pH为6.2的MRS培养基中37℃条件下静止培养18h；
通过显微镜对啤酒酵母菌与嗜酸乳酸杆菌进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选；
选取啤酒酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例为1:3.2，在温度为28℃恒温条件下，120rpm转速条件下摇床培养24h，并且培养后静置4h；
将混合培养后的菌液进行收集后，在8000rpm、5℃条件下离心分离5min，得到耐酸性酵母菌；
通过麦芽汁培养基对得到的耐酸性酵母菌进行稀释，通过显微镜下进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选；
而后重复进行共培3次，并且啤酒酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例一次分别为1:3.5、1：3.7、1:4，最终分离得到高耐酸性的酵母菌，而后再进行复培。
本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述制备方法包含以下方法；
步骤一：菌种活化；
步骤二：菌种筛选；
步骤三：菌种培养；
步骤四：菌种筛选。
2.根据权利要求1所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述步骤一中菌种活化为将菌种置于灭菌的YPD液体三角瓶培养基中，在24℃-28℃条件下进行摇床培养20h-26h，并且摇床转速为230rpm。
3.根据权利要求1所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述步骤二中菌种筛选为取适量富集酵母菌群落于麦芽汁培养基中进行稀释，通过显微镜下进行菌种观察，观察菌株生长情况，挑选单菌落，进行划线分离筛选。
4.根据权利要求1所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述步骤三中菌种培养是将原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidopHilus）之间混合培养。
5.根据权利要求4所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述嗜酸乳酸杆菌于添加
Figure 732427DEST_PATH_IMAGE001
后pH为6.2-6.4的MRS培养基中37℃条件下静止培养18h－21h。
6.根据权利要求4所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述混合培养的培养条件为原种酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例为1:3-4，且温度为28℃恒温条件下，120rpm转速条件下摇床培养24h，并且培养后静置4h。
7.根据权利要求6所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述步骤四中是将混合培养后的菌液进行收集后，在8000rpm、4℃-15℃条件下离心分离3min-5min，得到耐酸性酵母菌。
8.根据权利要求1所述的一种高耐酸性的酵母菌制备方法，其特征在于：所述高耐酸酵母菌通过重复步骤二、步骤三和步骤四进行加工，且酵母菌与嗜酸乳酸杆菌之间的比例逐渐提高。
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