CN112603868B - 龙胆根提取物的应用、包含其的组合物、化妆品及化妆品制备方法 - Google Patents

龙胆根提取物的应用、包含其的组合物、化妆品及化妆品制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于护肤品技术领域，具体涉及一种龙胆根提取物的应用、包含其的组合物、化妆品及化妆品制备方法。所述具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物，包括四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物，本发明首次将这三种成分联用，成分简洁，三者之间协同作用，具有显著的保护细胞免受蓝光损伤的功效，且均为水溶性成分，单成分之间具有较好的相容性，当其应用于化妆品中时，对化妆品体系的不良干扰较小，可以应用于所有剂型，尤其适用于水剂类化妆品中。

Description

龙胆根提取物的应用、包含其的组合物、化妆品及化妆品制备 方法
技术领域
本发明属于护肤品技术领域，具体涉及一种龙胆根提取物的应用、包含其的组合物、化妆品及化妆品制备方法。
背景技术
日光中的紫外线辐射对皮肤的危害被公众广泛认识，紫外线辐射与多种皮肤疾病相关，包括炎症，光老化和癌症等。
目前，人们往往较为重视紫外线对人体皮肤的损害，但忽视了蓝光，而蓝光同样对皮肤有很大的威胁。蓝光是指波长处于400nm-480nm之间的具有相对高能量的光线，确切地说，蓝光对应光谱的蓝色(400nm-450nm)和紫色(450nm-500nm)部分，太阳辐射是蓝光的主要来源，蓝光强度是到达地球表面紫外线的两到三倍，是可见光谱的一部分。而除了阳光中的蓝光外，人造光源如LED灯，也能产生蓝光，这极大的增加了人们日常生活中暴露在蓝光照射的时间。现有研究表明，蓝光光子的能量虽然没有紫外线强，但能穿透至皮肤真皮层，降低纤维细胞的抗氧化能力，抑制细胞增殖活力，蓝光波长越短、剂量越大对细胞增殖活力的抑制作用越强。也就是说蓝光照射也能对皮肤产生损伤，主要包括：1)增加活性氧，诱导皮肤氧化损伤；2)促进炎症因子分泌，诱导炎症级联反应，加速皮肤衰老；3)延迟表皮屏障修护；4)线粒体DNA损伤；5)消耗真皮层中类胡萝卜素等。
针对蓝光对皮肤的损伤，现有技术中有使用防蓝光膜或滤光装置来过滤蓝光，使得皮肤免受蓝光损伤，但是该物理防护方法防蓝光有一定的地域局限性，不能随时随地防蓝光；针对上述缺陷，研究人员又将能够减轻细胞的氧化损伤、具有抗蓝光作用的物质，如维生素C、维生素E、白藜芦醇、SOD、叶黄素、玉米黄质等加入化妆品中，使得化妆品具有抗蓝光作用，如现有技术中公开了一种化妆品组合物，包括海水、棕榈酰三肽、藻提取物、橙皮苷甲基查尔酮、可可籽提取物、肌肽、咖啡因、抗敏剂和螯合剂，及余量的水。虽然该化妆品组合物可促进皮肤抵御蓝光射线，减少蓝光压力下引起的线粒体活性氧等功效，但是其配方复杂且对抑制蓝光造成的细胞损伤并无功效，且海水这一成分具有较强的离子性，对化妆品体系可能存在降粘等不良干扰，具有一定的应用限制。
发明内容
因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中具有抗蓝光效果的组合物的配方复杂且对抑制蓝光造成的细胞损伤并无功效、而且在化妆品体系存在不良干扰的缺陷，从而提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物。
为此，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了龙胆根提取物在抑制蓝光诱导细胞损伤中的应用。
本发明还提供了一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物，包括如下组分：四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物。
四氢甲嘧啶羧酸：由长盐单胞菌通过生物发酵工艺得到的高纯度白色结晶粉末，长盐单胞菌属于嗜盐菌，在盐湖、海水和盐碱沙漠的极端条件下生存和生长；其极易溶于水中，具有生物惰性，不会影响细胞功能，分子结构如式(I)所示。
Figure BDA0002882268310000031
头状胡枝子(LESPEDEZA CAPITATA)叶/茎提取物：提取自天然野生圆头三叶草，其有效成分为异刺苞菊苷(Carlinoside)和异夏佛塔苷(Isoschaftoside)，其具有细胞修护、改善肤色等功效。
龙胆(GENTIANA SCABRA)根提取物：含有龙胆苦苷、皂苷、黄酮，生物碱等有效成分，具有抗炎、抗刺激等功效；本发明所用龙胆根提取物购买自上海伽誉生物科技有限公司，以西藏林周县野生的藏龙胆根为原料提取得到。
可选地，四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物的质量比为2:(5-7):10。
本发明还提供了一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，包括上述具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物。
可选地，所述化妆品中具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的质量含量为0.17-1.9％。
可选地，所述具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品包括以下质量分数的组分：
四氢甲基嘧啶羧酸 0.02-0.2％；
头状胡枝子叶/茎提取物 0.05-0.7％；
龙胆根提取物 0.1-1.0％；
保湿剂 4.5-7％；
螯合剂 0.05-0.1％；
增稠剂 0.5-1％；
pH调节剂 0.5-1％；
调理剂 3-4％；以及
溶剂 87-90％。
可选地，所述溶剂为水。
可选地，所述保湿剂为丁二醇、透明质酸钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、对羟基苯乙酮和乙基己基甘油中的一种或多种；
所述螯合剂为EDTA二钠；所述增稠剂为丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物；
所述pH调节剂为氨丁三醇；
所述调理剂为甘草酸二钾、尿囊素、库拉索芦荟叶汁粉、母菊花提取物、β-葡聚糖中的一种或多种。
本发明还提供了一种一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品的制备方法，包括以下步骤：
将溶剂、增稠剂、保湿剂、螯合剂混合、搅拌均匀后，加入调理剂、pH调节剂，搅拌均匀后，再将四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物加入，搅拌均匀，即得。
优选地，依次加入调理剂、pH调节剂，且加入调理剂并搅拌均匀后再加入pH调节剂。
本发明技术方案，具有如下优点：
1.本发明首次公开龙胆根提取物在抑制蓝光诱导细胞损伤中的应用，研究过程中发现龙胆根提取物在抑制蓝光诱导细胞损伤方面作用显著。
2.本发明提供的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物，包括四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物，首次将这三种成分联用，成分简洁，三者之间协同作用，具有显著的保护细胞免受蓝光损伤的功效，且均为水溶性成分，单成分之间具有较好的相容性，当其应用于化妆品中时，对化妆品体系的不良干扰较小，可以应用于所有剂型，尤其适用于水剂类化妆品中。
3.本发明提供的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，通过添加含有四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物的组合物，使其具有显著的保护细胞免受蓝光损伤的功效，该组合物对化妆品体系的不良干扰较小。而且使用较低的浓度的四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物组合物就可以发挥优良的抑制蓝光诱导细胞损伤的作用，因此可以降低化妆品的生产成本。
4.现有技术中抗蓝光的护肤品中大多含有VC乙基醚或抗坏血酸葡糖苷等维生素C的衍生物，VC及其衍生物是常用的抗氧化剂，可通过清除蓝光诱导产生的活性氧物质起到抗氧化损伤的作用；但是维生素C的衍生物的添加容易导致其容易出现颜色不稳定等不良干扰，而本发明采用四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物的组合物，该组合物应用到化妆品中，不存在颜色不稳定性等不良干扰。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
本发明中，为了便于比较，下述各实施例和对比例中试剂来源如下：
四氢甲基嘧啶羧酸：购买自默克化工技术(上海)有限公司(Bitop AG)；
头状胡枝子叶/茎提取物：购买自科莱恩化工(中国)有限公司(Clariant)；
龙胆根提取物：又名龙胆抗刺激因子，购买自上海伽誉生物科技有限公司；
去离子水：自产；
透明质酸钠：东营佛思特生物工程有限公司；
EDTA 二钠：阿克苏诺贝尔(宁波)有限公司；
丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物：路博润(特种)化工上海有限公司；
氨丁三醇：美国安格斯化学有限公司；
乙基己基甘油：托尔专用化学品(镇江)有限公司；
1,2-己二醇：托尔专用化学品(镇江)有限公司；
对羟基苯乙酮：德之馨(上海)有限公司；
甘草酸二钾：新疆天山制药工业有限公司；
尿囊素:亚什兰(中国)投资有限公司；
库拉索芦荟叶汁粉：云南万绿生物股份有限公司；
母菊花提取物:禾大化学品(中国)有限公司；
β-葡聚糖:德之馨(上海)有限公司；
丁二醇：欧季亚化学(OXEA chemicals)。
实施例1
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，5g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g 1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内，50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min，1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合、搅拌均匀，即得。
实施例2
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，5g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g 1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入779.27g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85g EDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将17g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例3
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，7g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g 1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.37g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、50rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,35rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1000rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.9g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例4
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，7g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入777.27g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、50rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,35rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1000rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将19g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例5
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，7g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.77g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、50rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,35rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1000rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.5g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例6
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2.2g四氢甲基嘧啶羧酸，7.7g头状胡枝子叶/茎提取物，11g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入775.37g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、50rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,35rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1000rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将20.9g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例7
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，6g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例8
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，5g头状胡枝子叶/茎提取物，5g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例9
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，10g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例10
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将1g四氢甲基嘧啶羧酸，10g头状胡枝子叶/茎提取物，10g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例11
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，7g头状胡枝子叶/茎提取物，7g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
实施例12
本实施例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，10g头状胡枝子叶/茎提取物，7g龙胆根提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合搅拌均匀，即得。
对比例1
本对比例提供一种化妆品，其制备方法如下：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料，即得。
对比例2
本对比例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将2g四氢甲基嘧啶羧酸，10g头状胡枝子叶/茎提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合、搅拌均匀，即得。
对比例3
本对比例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将5g四氢甲基嘧啶羧酸，5g头状胡枝子叶/茎提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合、搅拌均匀，即得。
对比例4
本对比例提供一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其制备方法如下：
具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物的制备：
将10g四氢甲基嘧啶羧酸，10g头状胡枝子叶/茎提取物，混合即得具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
含上述组合物的化妆品的制备：
将1.05g甘草酸二钾，1.32g尿囊素，1.64g库拉索芦荟叶汁粉、20g母菊花提取物、8.53gβ-葡聚糖混合均匀，得混合物A；
将4.92g1,2-己二醇、3.52g对羟基苯乙酮和0.48g乙基己基甘油混合均匀，得混合物B；
将7.83g氨丁三醇溶于100g去离子水中，得混合液C；
在真空乳化锅中加入794.57g去离子水，并将0.76g透明质酸、45g丁二醇、7.83g丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物(卡波姆)、0.85gEDTA二钠(螯合剂)和混合物B投入到真空乳化锅内，在80℃、35rpm条件下搅拌20min；然后降温至50-60℃，将混合物A投入到真空乳化锅内,50rpm条件下搅拌20min；继续降温至45-50℃，将混合液C投入真空乳化锅内，抽真空至-0.06MPa，均质5min,1400rpm搅拌10min，排除真空，出料得混合物；
将1.7g组合物与上述混合物混合、搅拌均匀，即得。
实验例
1.实验材料及样品
人表皮细胞株HaCaT细胞，由美国菌种保藏中心(ATCC)提供；
DMEM完全培养基购买自赛默飞世尔科技(Thermo Fisher)公司；
PBS购买自赛默飞世尔科技(Thermo Fisher)公司；
MTT溶液购买自西格玛奥德里奇(Sigma-Aldrich)公司；
四氢甲基嘧啶羧酸：购买自Bitop AG，商品名：ECTOIN；头状胡枝子叶/茎提取物：购买自Clariant，商品名：B-CIRCADIN；
龙胆根提取物：又名龙胆抗刺激因子，购买自上海伽誉生物科技有限公司；
各实施例及对比例中制备得到的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物以及具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品(对比例1中没有具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物；
不同浓度的四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物、龙胆根提取物、以及各实施例和对比例制备得到的组合物样品均用DMSO(Sigma-Aldrich公司)配制得到母液，然后用DMEM完全培养基稀释到设定浓度；
各实施例和对比例制备得到的化妆品用去离子水稀释至设定浓度(其浓度包括化妆品制备过程中所用的所有原料，包括去离子水)。
2.实验方法
化妆品对细胞毒性的测试方法
在对化妆品进行细胞存活率的测试之前，先检测其对细胞毒性，用MTT法检测细胞存活情况。具体实验方法如下：正常的人表皮细胞HaCaT用DMEM培养基(含10％血清和1％双抗)，放置于37℃和5％CO2细胞培养箱孵育培养及传代。实验开始时，在96孔板中以5×103个/孔的密度将HaCaT细胞接种孵育24小时后，加入对比例和实施例中不同浓度的样品(1％，3％)孵育48h后，弃去培养基，每孔加入5μg/ml的MTT溶液(溶剂为PBS)作用4小时后，于490nm下测定吸光值，计算细胞存活率。具体结果见表1。
细胞存活率的测试方法
将人表皮细胞株HaCaT细胞用DMEM完全培养基(含10％血清和1％双抗)，在37℃和5％CO2细胞培养箱中孵育培养及传代。具体地，首先在96孔板中以5×103个/孔的密度将人表皮细胞株HaCaT细胞接种孵育24h贴壁后，各实验组分别加入不同浓度的四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物、龙胆根提取物、以及各实施例和对比例制备得到的组合物及化妆品，每孔中100μl。与此同时，对照组和模型组平行进行，其中对照组和模型组用等体积的DMEM完全培养基代替不同浓度的实验样品。
培养24h后，弃去DMEM完全培养基(对照组及模型组)或含有实验样品(四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物、龙胆根提取物、以及各实施例和对比例制备得到的组合物)的DMEM完全培养基(实验组)，每孔中用PBS洗两次之后每孔中加入50μl PBS，用波长λ＝450nm的LED-BL(蓝光)，以9000±500LUX的强度对模型组和实验组照射，对照组用锡箔纸包住以避光。照射4h后弃去PBS，每孔中加入100μl DMEM完全培养基，置于5％CO2细胞培养箱中在37℃培养24h后，每孔中加入5μg/ml的MTT溶液作用4h后，于490nm下测定吸光值，从而测定细胞存活数。具体测试结果见表2。
3.统计学分析方法
根据实验结果中细胞存活数(活细胞数)，设定模型组皮肤细胞经过蓝光照射之后的损伤指数为1.0(100％)。将实验组的皮肤细胞存活数与模型组的皮肤细胞存活数相比较进行计算得出影响分数比例(Fraction affected；Fa)或细胞损伤指数，计算公式如下：
Fa＝(对照组存活率-实验组存活率)/(对照组存活率-模型组存活率)；
细胞损伤指数＝(对照组存活率-实验组存活率)/(对照细胞存活率-模型组存活率)×100％；
将实验组中各原料(四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物、龙胆根提取物)的Fa与实验组中各实施例及对比例制备得到的组合物及化妆品的Fa采用等效剂量分析法(Isobologram)进行统计学分析(通过分析软件CompuSyn进行)，得出联合指数(Combination Index；CI)，通过联合指数来判断联合应用是否有协同作用。如果各原料的联用效果CI小于1，则表明和原料联用具有协同增强作用。
各实验组的细胞的Fa之间的差异用ANOVA进行统计学分析，检测各组之间差异的显著性。
4.实验结果
表1细胞毒性测试结果
Figure BDA0002882268310000241
从表中数据可知，皮肤细胞经不同浓度的样品(1.0％，3.0％)处理后细胞存活率均在90％以上，提示样品对皮肤细胞无明显毒性。根据文献细胞存活率在80％以上可以认为受试物无毒性(J.Funct.Biomater.2014,5,43-57；doi:10.3390/jfb5020043)。
表2组合物中各原料对细胞存活率的影响
Figure BDA0002882268310000251
通过上表可以看出，单独使用四氢甲嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物，在较高浓度时对蓝光引起的细胞损伤具有一定的抑制效果。在测试的系列浓度中，四氢甲嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物的浓度分别为50μg/ml、100μg/ml和100μg/ml时，细胞存活率相比其他浓度下最高，即功效最佳(Fa＝0.7012；Fa＝0.6486；Fa＝0.6713)。
表3各实施例及对比例中制得的组合物对细胞存活率的影响
Figure BDA0002882268310000252
Figure BDA0002882268310000261
注：各实施例中制备的比例相同的组合物只选取其中一种进行测试。
通过表3可以看出，当四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物联用，浓度为20:50:100(μg/ml)以及20:70:100(μg/ml)时，具有协同效果(CI＝0.76124；CI＝0.93029)。
表4各实施例及对比例制得的化妆品的细胞损伤指数
Figure BDA0002882268310000271
由上表中的数据可知，与阴性对照组相比，模型组的细胞存活率明显降低，实施例对蓝光照射造成的皮肤细胞存活率降低有保护作用，作用随浓度的增加而增强，3％浓度的作用强于1％。对比例1与实施例1，2，3，4的效果比较，在样品浓度为1.0％和3.0％的情况下均有显著性差异(p<0.001)。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (7)

1.一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的组合物，其特征在于，由质量比为2:(5-7):10的四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物组成。
2.一种具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其特征在于，包括权利要求1所述的组合物。
3.根据权利要求2所述的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其特征在于，所述化妆品中权利要求1所述的组合物的质量含量为0.17-1.9%。
4.根据权利要求2或3所述的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其特征在于，包括以下质量分数的组分：
四氢甲基嘧啶羧酸 0.02-0.2%；
头状胡枝子叶/茎提取物 0.05-0.7%；
龙胆根提取物 0.1-1.0%；
保湿剂 4-6%；
防腐剂 0.5-1%；
螯合剂 0.05-0.1%；
增稠剂 0.5-1%；
pH调节剂 0.5-1%；
调理剂3-4%；以及
溶剂 87-90%。
5.根据权利要求4所述的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其特征在于，所述溶剂为水。
6.根据权利要求4所述的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品，其特征在于，
所述保湿剂为丁二醇、透明质酸钠、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、乙基己基甘油，透明质酸钠，对羟基苯乙酮中的一种或多种；
所述螯合剂为EDTA二钠；
所述增稠剂为丙烯酸（酯）类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物；
所述pH调节剂为氨丁三醇；
所述调理剂为甘草酸二钾、尿囊素、库拉索芦荟叶汁粉、母菊花提取物、β-葡聚糖中的一种或多种。
7.一种权利要求4-6任一项所述的具有抑制蓝光诱导细胞损伤作用的化妆品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将溶剂、增稠剂、保湿剂和螯合剂混合、搅拌均匀后，加入调理剂、pH调节剂，搅拌均匀后，再将四氢甲基嘧啶羧酸、头状胡枝子叶/茎提取物和龙胆根提取物加入，搅拌均匀，即得。
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