CN112595803A - 一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,包括:(1)取硝酸舍他康唑乳膏样品,加入无水乙醇,水浴中加热溶解,离心,取上清液作为供试品溶液;(2)取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释,作为对照品溶液;(3)采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液混合为展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮混合为展开剂2;(4)各1~2μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于展开剂1和展开剂2中展开,晾干,置于紫外灯254nm下检视,本发明的鉴别方法可缩短硅胶GF254薄层板的活化时间,斑点明显清晰,且分离稳定,不拖尾,Rf值适中,对硝酸舍他康唑乳膏的薄层色谱法鉴别具有良好的重复性和稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,特别涉及一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法。
背景技术
硝酸舍他康唑是一种新型的、广谱、高效的局部抗真菌剂,由西班牙Ferrer公司研制开发,1992年在西班牙首次上市,我国于2003年批注其软膏制剂上市。相比其他临床的咪唑类抗菌剂,其对引起有皮肤和粘膜感染的病原菌、致病性酵母菌、皮肤真菌、机会致病菌、丝状真菌、革兰氏阳性菌和毛滴虫属菌等均具有抗菌活性,因此具有更加广泛的安全范围。
硝酸舍他康唑乳膏为现有常见剂型,其主要通过将主药与乳化剂、保湿剂、稳定剂等多种辅料进行复配,以达到硝酸舍他康唑乳膏良好的稳定性,保证其充分分散乳化作用,减少破乳、分层等现象。而在硝酸舍他康唑及乳膏剂型的制备工艺中,通常延用硝酸舍他康唑药物的鉴定方法来进行硝酸舍他康唑乳膏产品的鉴别,但现有的硝酸舍他康唑的鉴别方法不能有效控制硝酸舍他康唑乳膏剂型的质量,受硝酸舍他康唑乳膏剂型的影响,难以达到对硝酸舍他康唑乳膏产品质量的高效稳定的鉴别,不利于控制硝酸舍他康唑乳膏的生产和质量保证及临床的安全广泛的应用。
发明内容
鉴于此,本发明提出一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法。
本发明的技术方案是这样实现的:
本发明提供一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:取硝酸舍他康唑乳膏样品,加入无水乙醇,置于水浴中加热溶解,冷却,离心,取上清液作为供试品溶液;所述供试品溶液质量浓度为(0.8~1.2)mg/ml;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为1mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为(45~55):(40~60):(15~25):(1~3)混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮(60~70):(20~30):(5~15)混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液和对照品溶液各1~2μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于展开剂1和展开剂2中展开,取出,晾干,置于紫外灯254nm下,检视供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色。
本发明通过以硅胶GF254薄层板为载体,采用上述展开剂1与展开剂2进行展开处理,可缩短硅胶GF254薄层板于展开剂中的活化时间,并且经验视结果显示,斑点明显清晰,显色一致,并且分离稳定,不拖尾,比移值Rf适中,对硝酸舍他康唑乳膏的薄层色谱法鉴别具有良好的重复性和稳定性。
优选地,步骤1中,所述水浴加热温度为65~75℃,离心速度为2000~3000r/min,分离时间为3~5min。
优选地,步骤1中,离心处理后取上清液,再次加入等体积的无水乙醇混合,进行超声处理10~15min,过滤,得到供试品溶液。采用水浴加热联合超声处理进行供试品溶液的配制,有利于提高供试品溶液中有效成分的稳定和充分分离。
优选地,还包括阴性样品对照溶液的配制,取未含有硝酸舍他康唑的乳膏辅料,按照供试品溶液的配制方法,制得阴性样品对照溶液。
优选地,步骤4中,吸取1~2μl阴性样品对照溶液,与供试品溶液和对照品溶液分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于展开剂1和展开剂2中展开,取出,晾干,置于紫外灯254nm下检视,验证其阴性样品干扰作用。本发明还可通过进一步配制阴性样品对照溶液,验证其阴性样品干扰作用,表明本鉴别方法具备专属性,保证硝酸舍他康唑的质量稳定且安全可控。
优选地,所述展开剂1由质量比为50:50:20:2的三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液混合而成;所述展开剂2由质量比为65:25:10的三氯甲烷、正已烷、甲醇混合而成。
优选地,步骤4中,将硅胶GF254薄层置于展开剂1中,展开剂1的温度为100~120℃,将硅胶GF254薄层置于展开剂2中,展开剂2的温度为95~105℃。
优选地,步骤4中,将所述硅胶GF254薄层板于展开剂1中活化15~20min,于展开剂2中活化6~10min。
优选地,步骤4中,将硅胶GF254薄层板取出,用60~80℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.1~0.5%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥,有利于使斑点的显色和边际更加清晰。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明提出的硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其主要通过以硅胶GF254薄层板为载体,采用由三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液复配作为展开剂1与由正辛醇、乙酸乙酯:丙酮混合作为展开剂2进行组合,可大大缩短了硅胶GF254薄层板于展开剂中的活化时间,可在30min以下即可实现斑点明显清晰,显色一致,并且分离稳定,不拖尾,以及有效控制比移值Rf,即原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值,Rf值适中,分离度好,对硝酸舍他康唑乳膏的薄层色谱法鉴别具有良好的重复性和稳定性。
附图说明
图1为本发明实施例1的硝酸舍他康唑乳膏的薄层鉴别图谱;
图中,1为对照品,2为供试品1,3为供试品2,4为供试品3。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容,下面提供具体实施例,对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
本发明采用同批生产的硝酸舍他康唑乳膏作为试验原料,进行如下具体鉴别方法进行硝酸舍他康唑有效成分的鉴别。其中,硝酸舍他康唑乳膏为白色乳膏,其成分组成为:硝酸舍他康唑2%、单硬脂酸甘油酯3.5%、十八醇5.5%、液体石蜡2%、白凡士林6%、吐温-8010%、丙二醇9%、甘油4%、尼泊金乙酯0.1%,余量为水。
实施例1
硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:分别各取10组硝酸舍他康唑乳膏样品各16mg,加入20ml无水乙醇,置于65℃水浴中加热溶解,冷却,以2000r/min离心3min,取上清液作为供试品溶液;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,硝酸舍他康唑的纯度>99.5%,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为0.8mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为45:40:15:1混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮60:20:5混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液和对照品溶液各1μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于100℃展开剂1中15min,于95℃展开剂2中6min,取出,晾干,置于紫外灯254nm下检视;结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同,如图1所示。
实施例2
硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:分别取10组硝酸舍他康唑乳膏样品各30mg,加入25ml无水乙醇,置于75℃水浴中加热溶解,冷却,以3000r/min离心5min,取上清液作为供试品溶液;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为1.2mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为55:60:25:3混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮70:30:15混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液和对照品溶液各2μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于120℃展开剂1中20min,于105℃展开剂2中10min,取出,晾干,置于紫外灯254nm下检视;结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同。
实施例3
硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:分别取10组硝酸舍他康唑乳膏样品各20mg,加入20ml无水乙醇,置于60℃水浴中加热溶解,冷却,以2500r/min离心4min,取上清液作为供试品溶液;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为1.0mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为50:50:20:2混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮65:25:10混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液和对照品溶液各1μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于110℃展开剂1中16min,于60~80℃展开剂2中8min,取出,晾干,置于紫外灯254nm下检视;结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同。
实施例4
本实施例的硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法与实施例3的区别在于:步骤1中,离心处理后取上清液,再次加入等体积的无水乙醇混合,进行超声处理10min,过滤,得到供试品溶液。
于紫外灯254nm下检视,其结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同。
实施例5
硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:分别取10组硝酸舍他康唑乳膏样品各20mg,加入20ml无水乙醇,置于60℃水浴中加热溶解,冷却,以2500r/min离心4min,取上清液,再次加入等体积的无水乙醇混合,进行超声处理15min,过滤,得到供试品溶液;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为1mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制阴性样品对照溶液:取未含有硝酸舍他康唑的乳膏辅料20mg,按照供试品溶液的配制方法,制得阴性样品对照溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为50:50:20:2混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮65:25:10混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液、对照品溶液和性样品对照溶液各1μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于110℃展开剂1中15min,于60~80℃展开剂2中9min,取出,用60℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.1%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥,置于紫外灯254nm下检视;结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同,且阴性样品无干扰。
实施例6
硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:分别取10组硝酸舍他康唑乳膏样品各20mg,加入20ml无水乙醇,置于60℃水浴中加热溶解,冷却,以2500r/min离心4min,取上清液,再次加入等体积的无水乙醇混合,进行超声处理15min,过滤,得到供试品溶液;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为1mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制阴性样品对照溶液:取未含有硝酸舍他康唑的乳膏辅料20mg,按照供试品溶液的配制方法,制得阴性样品对照溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为50:50:20:2混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮65:25:10混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液、对照品溶液和性样品对照溶液各1μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于110℃展开剂1中15min,于60~80℃展开剂2中6min,取出,用80℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.5%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥,置于紫外灯254nm下检视;结果显示:供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同,且阴性样品无干扰。
对比例1
本对比例与实施例6的硝酸舍他康唑乳膏鉴别方法,区别在于:单纯采用展开剂1进行展开。具体为:步骤4中,按照薄层色谱法,吸取供试品溶液、对照品溶液和性样品对照溶液各1μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,置于110℃展开剂1中21min,取出,用80℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.5%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥,置于紫外灯254nm下检视,结果显示的供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色如下表。
对比例2
本对比例与实施例6的硝酸舍他康唑乳膏鉴别方法,区别在于:展开剂2为由质量比为25:75的乙酸乙酯:乙醇混合而成。
于紫外灯254nm下检视,结果显示的供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色如下表。
对比例3
本对比例与实施例6的硝酸舍他康唑乳膏鉴别方法,区别在于:展开剂2为由质量比为70:25:10的正辛醇、乙酸乙酯:丙酮混合而成。
于紫外灯254nm下检视,结果显示的供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色如下表。
实施例7
本实施例与实施例6的硝酸舍他康唑乳膏鉴别方法,区别在于:步骤4中,将硅胶GF254薄层板依次置于110℃展开剂1中10min,于60~80℃展开剂2中6min,取出,用80℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.5%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥至斑点清晰,置于紫外灯254nm下检视,结果显示的供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色如下表。
上述的实施例和对比例的硝酸舍他康唑乳膏鉴别结果显示,统计如下表:
由上表可以看出,由本发明实施例1~6中的硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,经过反复试验表明,其供试品所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液的主斑点相同,且Rf值适中(通常认为Rf值0.5~0.8为适中),分离度好,无拖尾,而且可缩短硅胶GF254薄层板于展开剂中的活化时间至30min以下,具有良好的重复性和稳定性,同时,实施例5~6中,通过增加了阴性样品对照溶液的同步鉴别,其结果显示,阴性样品中未出现主斑点,表明无阴性干扰,本鉴别方法具备专属性,保证硝酸舍他康唑的质量稳定且安全可控。
而实施例7中进一步缩短了硅胶GF254薄层板于展开剂中的活化时间,但出现Rf值过小、分离度下降和部分拖尾的现象。表明控制硅胶GF254薄层板的一定活化时间,有利于保证提高鉴别的稳定性。
由实施例6与对比例1~3相比,对比例1中的Rf值过小,且斑点模糊,表明其在30min内无法达到良好的分离度,表明了本发明采用展开剂1与展开剂2组合,并合理控制其配比关系,相比采用单一的展开剂1,可缩短活化时间,且分离稳定,不拖尾,以及有效控制了比移值Rf。对例2中,Rf值与实施例6相当,但斑点不清晰、分离度差、出现拖尾;对比例3中的Rf值过大,且出现明显的拖尾现象,表明本发明在展开剂中,通过控制添加一定比例的的正辛醇与乙酸乙酯、丙酮复配,有利于保证主斑点的展开效果,控制良好的Rf值,且分离稳定,不拖尾
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)配制供试品溶液:取硝酸舍他康唑乳膏样品,加入无水乙醇,置于水浴中加热溶解,冷却,离心,取上清液作为供试品溶液;所述供试品溶液质量浓度为(0.8~1.2)mg/ml;
(2)配制对照品溶液:取硝酸舍他康唑对照品,加入无水乙醇溶解,稀释制成质量浓度为(0.8~1.2)mg/ml的硝酸舍他康唑溶液,作为对照品溶液;
(3)配制展开剂:采用三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液按照质量比为(45~55):(40~60):(15~25):(1~3)混合,得到展开剂1;采用正辛醇、乙酸乙酯:丙酮(60~70):(20~30):(5~15)混合,得到展开剂2;
(4)色谱条件与操作:按照薄层色谱法,吸取供试品溶液和对照品溶液各1~2μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于展开剂1和展开剂2中展开,取出,晾干,置于紫外灯254nm下,检视供试品溶液与对照品溶液所显主斑点的位置和颜色。
2.根据权利要求1所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:步骤1中,所述水浴加热温度为65~75℃,离心速度为2000~3000r/min,分离时间为3~5min。
3.根据权利要求2所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:步骤1中,离心处理后取上清液,再次加入等体积的无水乙醇混合,进行超声处理10~15min,过滤,得到供试品溶液。
4.根据权利要求3所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:还包括阴性样品对照溶液的配制,取未含有硝酸舍他康唑的乳膏辅料,按照供试品溶液的配制方法,制得阴性样品对照溶液;
步骤4还包括,吸取1~2μl阴性样品对照溶液,与供试品溶液和对照品溶液分别点于同一硅胶GF254薄层板上,依次置于展开剂1和展开剂2中展开,取出,晾干,置于紫外灯254nm下检视,验证其阴性样品干扰作用。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:所述展开剂1由质量比为50:50:20:2的三氯甲烷、正已烷、甲醇和浓氨溶液混合而成;所述展开剂2由质量比为65:25:10的三氯甲烷、正已烷、甲醇混合而成。
6.根据权利要求5所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:步骤4中,将硅胶GF254薄层置于展开剂1中,展开剂1的温度为100~120℃,将硅胶GF254薄层置于展开剂2中,展开剂2的温度为95~105℃。
7.根据权利要求1-4中任一项所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:步骤4中,将所述硅胶GF254薄层板于展开剂1中活化15~20min,于展开剂2中活化6~10min。
8.根据权利要求7所述的一种硝酸舍他康唑乳膏的鉴别方法,其特征在于:步骤4中,将硅胶GF254薄层板取出,用60~80℃热风吹干,并立即在表面喷施质量浓度为0.1~0.5%的氯化铝溶液,继续于100℃下干燥。
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