CN112587533A - 一种和厚朴酚衍生物在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种和厚朴酚衍生物在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途，属于医药技术领域。具体的，本发明提供了式(I)所示的化合物、或其盐在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途；其中，R₁、R₂独立选自H、硫酸酯或其药学上可以接受盐、磷酸酯或其药学上可以接受盐，且R₁、R₂不同时为H。本发明和厚朴酚衍生物对于治疗乳腺炎确实有良好的效果。可以用于制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物。

Description

一种和厚朴酚衍生物在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物 中的用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种和厚朴酚衍生物在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途。

背景技术

奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业最常见的疾病。尽管国家政府相关部门、兽医临床工作者及科研工作者们都在投入大量的人力、物力和财力来预防控制此病，但到目前为止仍然没有有效的疫苗或药物问世。长期使用抗生素导致的细菌耐药以及抗生素残留给国家的社会公共卫生安全和人类健康造成巨大威胁。

和厚朴酚是木兰科植物或中药厚朴中含有的一种活性成分，在传统医药中使用的历史已经很长，味辛、性温，具有行气化湿、温中止痛、降逆平喘的功效。和厚朴酚是优良的天然抑菌剂，对引起奶牛乳房炎的常见菌株杀灭作用显著。但和厚朴酚难溶于水，不容易被生物体吸收和利用，严重影响其发挥药效；而针对奶牛乳房炎的治疗给药方式为局部注射以及灌注。所以，尽管和厚朴酚具有优良的抑菌活性，但其发展为抗奶牛乳房炎药物仍存在瓶颈。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种和厚朴酚衍生物在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途。

本发明提供了式(I)所示的化合物、或其盐在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途：

其中，R₁、R₂独立选自H、硫酸酯或其药学上可以接受盐、磷酸酯或其药学上可以接受盐，且R₁、R₂不同时为H。

进一步地，所述硫酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：

其中，R₃选自H、碱金属或有机胺；

和/或，所述磷酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：

其中，R₃、R₄分别或同时选自H、碱金属或有机胺。

进一步地，所述化合物、或其盐为式(Ia)所示：

其中，R_1a、R_2a、R_3a、R_4a分别或同时选自碱金属或有机胺；

和/或，所述化合物、或其盐为式(Ib)所示：

其中，R_1b、R_2b分别或同时选自碱金属或有机胺。

进一步地，所述碱金属为锂、钠、钾、钙、镁；和/或，所述有机胺为氨、赖氨酸、氨基葡萄糖。

进一步地，所述化合物、或其盐为如下结构之一：

进一步地，所述药物是以前述化合物、或其盐为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。

进一步地，所述制剂为外用制剂、注射制剂或口服制剂。

进一步地，所述外用制剂为乳头浸剂。

进一步地，所述药物治疗牛乳房炎时，化合物、或其盐的投予量为0.3μg/kg至200mg/kg。

关于本发明的使用术语的定义：除非另有说明，本文中基团或者术语提供的初始定义适用于整篇说明书的该基团或者术语；对于本文没有具体定义的术语，应该根据公开内容和上下文，给出本领域技术人员能够给予它们的含义。

“患者”意指动物，优选是哺乳动物，且更优选是乳牛。

本发明和厚朴酚衍生物对于治疗乳腺炎确实有良好的效果。可以用于制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。其中，和厚朴酚购买自广州晶晶生物科技有限公司；三氯氧磷、甲醇钠等化学试剂购至成都市科龙化工试剂厂。

实施例1、和厚朴酚衍生物的制备

参照CN201710100322.7公开的制备方法，并略作优化。具体操作如下：

和厚朴酚双磷酸酯四铵盐的制备：10克和厚朴酚和100毫升二氯甲烷搅拌溶解，加入15克吡啶后，冰盐浴降温至-5摄氏度，加入23克三氯氧磷二氯甲烷稀释溶液，保持-5摄氏度直至TLC检测原料反应完全。250毫升冰水淬灭之后，缓慢恢复至室温并搅拌过夜，倾出上层液体，残余物水洗之后，用50毫升乙醇溶解，冰盐浴降温至0摄氏度，滴入浓氨水直至pH值为8，析出白色固体，过滤并打浆，真空干燥固体，得到和厚朴酚双磷酸酯四铵盐14.1克，结构如下：

400MHz核磁氢谱数据如下：¹HNMR(400MHz,D2O):δ(ppm)7.10-7.11(m,2H),7.13-7.29(m,4H)，5.96-6.05(m,2H),4.99-5.09(m,4H),3.29(d,2H),3.42(d,2H)；ESI-MS m/z:495[M+H]⁺。

和厚朴酚双磷酸酯四钠盐的制备：类似和厚朴酚双磷酸酯四铵盐的制备方法，用氢氧化钠溶液代替浓氨水，制备得到四钠盐，结构如下：

ESI-MS m/z:515[M+H]⁺。

和厚朴酚双磷酸酯四钾盐的制备：类似和厚朴酚双磷酸酯四铵盐的制备方法，用氢氧化钾溶液代替浓氨水，制备得到四钾盐，结构如下：

ESI-MS m/z:579[M+H]+。

和厚朴酚双硫酸酯二钠盐的制备：在50毫升吡啶中加入和厚朴酚10克，吡啶三氧化硫络合物17克(3当量)，室温搅拌过夜，减压浓缩，加入50毫升稀酸水，100毫升乙酸乙酯分三次萃取，乙酸乙酯层干燥后浓缩至干，得到白色固体，该固体在丙酮中分散，加入甲醇钠，过滤得到固体，即为和厚朴酚双硫酸酯二钠盐，结构如下

和厚朴酚双硫酸酯二钠盐：¹HNMR(400MHz,D2O):δ(ppm)7.36-7.39(m,4H),7.21(brs,2H),5.97(brs,2H),5.00-5.06(m,4H),3.33-3.43(m,4H)；ESI-MS m/z:471[M+H]⁺；

与上述类似的方法，还可以得到锂盐、钙盐、镁盐、有机铵盐等。

实施例2、和厚朴酚衍生物对小鼠乳腺炎模型的保护作用

根据CN105726631公开报道的方法建立小鼠乳腺炎模型。选取分娩后7天泌乳母鼠，腹腔注射乌拉坦麻醉，仰卧位固定，充分暴露乳头，用无菌眼科剪剪去乳尖尖端约1mm，露出乳导管。金黄色葡萄球菌菌液经50ml培养基重悬后用PBS洗涤并重悬在1000μl PBS中，浓度达到2x10⁸CFU/μl，使用微量注射器灌注金黄色葡萄球菌菌液，每个乳腺注射100μl。实验分为4组，空白组小鼠做感染处理后不进行药物治疗；和厚朴酚衍生物(和厚朴酚双磷酸酯四钠盐)治疗组，在乳腺感染24小时后，分别于第6、12、18、24小时尾静脉注射10mg/kg的和厚朴酚双磷酸酯四钠盐生理盐水溶液；阳性对照组，在乳腺感染24小时后，分别于6、12、18、24小时腹腔注射10mg/kg和厚朴酚丙二醇溶液；假手术组，小鼠不做手术及感染处理。治疗后通过肉眼观察各组母鼠受试乳区变化及测定乳腺组织中细胞因子，记录实验结果如下表1：

表1.和厚朴酚衍生物对小鼠乳腺炎模型的保护作用

分组	红肿	充血	TNF-α(ng/g)	IL-1β(ng/g)	IL-6(ng/g)
						空白组	严重	严重	16.48±0.36	18.01±0.15	4.84±0.23
治疗组	轻微	轻微	4.69±0.09	6.14±0.11	2.37±0.10
						阳性组	轻微	轻微	8.70±0.13	9.09±0.14	4.17±0.11
假手术组	无	无	2.23±0.11	3.57±0.07	1.61±0.06

结果显示，注入金黄色葡萄球菌菌液后，乳腺组织明显出现红肿和充血，空白组对比假手术组变化明显，和厚朴酚衍生物组和阳性组对于红肿和充血症状均有缓解。注入金黄色葡萄球菌菌液后，空白组对比假手术组，三种细胞因子明显上升；阳性组三种细胞因子相比空白组有下降；和厚朴酚衍生物组中，三种细胞因子下降程度更明显，治疗效果较阳性组更为突出。

实施例3、和厚朴酚衍生物对奶牛乳腺炎的保护作用

根据CN105726631公开报道的评价方法。于奶牛场选取体况相近，患有乳腺炎的奶牛27头(体重600kg左右)，随机分为空白组、治疗组、阳性组，每组各9头。空白组不做处理；治疗组每日两次于牛乳房处局部注射和厚朴酚双磷酸酯四钠盐生理盐水溶液，注射剂量0.33mg/kg；阳性组每日两次于牛乳房处局部注射乳酸环丙沙星溶液，注射剂量0.33mg/kg；连续5天后进行观察评价，评价标准如下：

治愈：奶牛精神食欲恢复正常，乳区红、肿、热、痛等症状消失；泌乳量和乳色恢复正常。停药观察7天以上无复发现象，细菌检测阴性。

有效：奶牛精神食欲恢复正常，乳区红、肿、热、痛等症状明显好转；泌乳量和乳色正常。细菌检测阳性。

无效：奶牛精神食欲未见恢复，乳区红、肿、热、痛等症状未见好转甚至恶化；泌乳量下降甚至停奶，乳汁性状明显异常。细菌检测阳性。

有效率＝(治愈例数+有效例数)/总例数；

治愈率＝(治愈例数)/总例数。

实验结果记录如下表2：

表2.和厚朴酚衍生物对奶牛乳腺炎的保护作用

分组	无效率	有效率	治愈率
				空白组	100％(9/9)	0％(0/9)	0％(0/9)
治疗组	0％(0/9)	100％(9/9)	77.78％(7/9)
				阳性组	22.22％(2/9)	77.78％(7/9)	55.56％(5/9)

结果显示，本发明和厚朴酚衍生能够有效治疗奶牛乳腺炎，治愈率为77.78％，有效率可达100％，治疗效果较阳性对照更为突出。

综上，本发明和厚朴酚衍生物对于治疗乳腺炎确实有良好的效果。可以用于制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物。

Claims (9)

1.式(I)所示的化合物、或其盐在制备预防和/或治疗牛乳房炎的药物中的用途：

其中，R₁、R₂独立选自H、硫酸酯或其药学上可以接受盐、磷酸酯或其药学上可以接受盐，且R₁、R₂不同时为H。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述硫酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：

其中，R₃选自H、碱金属或有机胺；

和/或，所述磷酸酯或其药学上可以接受盐如下所示：

其中，R₃、R₄分别或同时选自H、碱金属或有机胺。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述化合物、或其盐为式(Ia)所示：

其中，R_1a、R_2a、R_3a、R_4a分别或同时选自碱金属或有机胺；

和/或，所述化合物、或其盐为式(Ib)所示：

其中，R_1b、R_2b分别或同时选自碱金属或有机胺。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述碱金属为锂、钠、钾、钙、镁；和/或，所述有机胺为氨、赖氨酸、氨基葡萄糖。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述化合物、或其盐为如下结构之一：

6.根据权利要求1～5所述的用途，其特征在于：所述药物是以权利要求1～5任一项所述化合物、或其盐为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述制剂为外用制剂、注射制剂或口服制剂。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述外用制剂为乳头浸剂。

9.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物治疗牛乳房炎时，化合物、或其盐的投予量为0.3μg/kg至200mg/kg。