CN112574888B - 一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分:NaNO3、二水磷酸二氢钠、EDTA二钠、六水氯化铁,所述B营养液包括以下组分:柠檬酸、柠檬酸铁铵、二水氯化钙、硼酸、氯化锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、硝酸钴、维生素B1、维生素B12、生物素。本发明提供了一种卵囊藻藻种生长迅速、生长活力强、死亡率低的用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基。

Description

一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基
技术领域
本发明涉及水产养殖微生物培育技术领域,具体说是一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基。
背景技术
卵囊藻是在中国各水域中存在的一种常见的浮游绿藻,属于绿藻门,绿藻纲,绿球藻目,卵囊藻科,在淡海水中能够均有分布。植物体为球形或者是椭圆形的球形群体,群体通常是由2、4或8个细胞组成,在群体外面有一层果胶质构成的胶质包被。藻细胞为椭圆形或者是卵圆形,细胞的长度为10μm-19μm,宽度为9.0μm-13μm,一般情况下可产生2、4、8或16个似亲孢子营孢子生殖。
现有技术中针对卵囊藻藻种的培养基中仅为常规卵囊藻所需的营养物质,卵囊藻生产活力并不足,并且生长速度不够快,并且藻类生长的死亡率仍然较高。
因此,需要设计一种卵囊藻藻种生长迅速、生长活力强、死亡率低的用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基。
发明内容
本发明的目的是提供了一种卵囊藻藻种生长迅速、生长活力强、死亡率低的用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分:NaNO3、二水磷酸二氢钠、EDTA二钠、六水氯化铁,所述B营养液包括以下组分:柠檬酸、柠檬酸铁铵、二水氯化钙、硼酸、氯化锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、硝酸钴、维生素B1、维生素B12、生物素。
作为本发明的进一步设置,A营养液中组分的浓度为:NaNO350-180g/L、二水磷酸二氢钠2-6g/L、六水氯化铁2-3g/L。
作为本发明的进一步设置,B营养液中组分的浓度为:柠檬酸3-8g/L、柠檬酸铁铵3-8g/L、二水氯化钙20-50g/L、硼酸2-3g/L、氯化锰0.5-3g/L、硫酸锌0.2-0.6g/L、钼酸钠0.3-0.8g/L、硫酸铜0.5-0.8g/L、硝酸钴0.3-0.6g/L、维生素B10.1-0.3g/L、维生素B120.005-0.001g/L、生物素0.003-0.005g/L。
作为本发明的进一步设置,A营养液中还包括CH4ON220-50g/L。
作为本发明的进一步设置,A营养液中还包括环糊精葡萄糖苷转移酶2-6g/L。
作为本发明的进一步设置,B营养液中还包括四氢糠醇3-5g/L。
作为本发明的进一步设置,B营养液中还包括α-紫罗兰醇1-5g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3-4:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3-4瓶A营养液和1瓶B营养液。
作为本发明的进一步设置,氯化锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、硝酸钴均为水合盐。
本方案的有益效果是:
1、本发明的用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中采用A营养液和B营养液两种组分按照比例混合而成,采用两种营养液能充分满足藻种生长发育所需的营养物质,并且采用两种成分按照藻种的需求进行及时调配,灵活性高,操作性好。
2、本发明的A营养液中的环糊精葡萄糖苷转移酶能刺激卵囊藻藻种诱导特殊的代谢途径产生更多的多糖,卵囊藻产生的多糖结构丰富复杂,能为自身及其他藻种的生长发育过程中的蛋白质合成提供营养物质,提高卵囊藻的生长活性,有效提高藻种的生长速度,增强藻种的活力,降低藻种死亡率。
3、本发明的B营养液中的四氢糠醇能降低柠檬酸对卵囊藻生成的多糖中糖苷键的破坏作用,有效提高生成多糖的含量,提高后期多糖转化为生长蛋白质的量,提高藻种的活性,并且四氢糠醇能提高环糊精葡萄糖苷转移酶的活性,提高环糊精葡萄糖苷转移酶对卵囊藻的刺激促进作用,进一步协同提高卵囊藻的产多糖量,进而提高卵囊藻的生长速度和免疫力。降低藻种死亡率。
4、本发明的B营养液中的α-紫罗兰醇能在卵囊藻生产出一级多糖的基础上,促进卵囊藻二级、三级或者高级结构的多糖,能在一级多糖结构的基础上,促进卵囊藻形成分子量更大、糖苷键构型多元化多,并一定程度地接枝上具有抗菌、生长活性更强的官能团,有效提高生产的多糖的稳定性,提高多糖对藻种生长活力的促进多用。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO350g/L、CH4ON220g/L、二水磷酸二氢钠2g/L、六水氯化铁2g/L,环糊精葡萄糖苷转移酶2g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸3g/L、柠檬酸铁铵3g/L、二水氯化钙20g/L、四氢糠醇3g/L、α-紫罗兰醇1g/L、硼酸2g/L、MnCl2·4H2O0.5g/L、ZnSO4·7H2O 0.2g/L、Na2MoO4·2H2O 0.3g/L、CuSO4·5H2O 0.5g/L、Co(NO3)2·6H2O0.3g/L、维生素B10.1g/L、维生素B120.005g/L、生物素0.003g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例2:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3180g/L、CH4ON220-50g/L、二水磷酸二氢钠6g/L、六水氯化铁3g/L,环糊精葡萄糖苷转移酶6g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸8g/L、柠檬酸铁铵8g/L、二水氯化钙50g/L、四氢糠醇5g/L、α-紫罗兰醇5g/L、硼酸3g/L、MnCl2·4H2O3g/L、ZnSO4·7H2O 0.6g/L、Na2MoO4·2H2O 0.8g/L、CuSO4·5H2O 0.8g/L、Co(NO3)2·6H2O0.6g/L、维生素B10.3g/L、维生素B120.001g/L、生物素0.005g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为4:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加4瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例3:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3100g/L、CH4ON235g/L、二水磷酸二氢钠4g/L、六水氯化铁2.5g/L,环糊精葡萄糖苷转移酶4g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸5g/L、柠檬酸铁铵5g/L、二水氯化钙35g/L、四氢糠醇4g/L、α-紫罗兰醇3g/L、硼酸2.5g/L、MnCl2·4H2O2g/L、ZnSO4·7H2O 0.4g/L、Na2MoO4·2H2O 0.5g/L、CuSO4·5H2O 0.6g/L、Co(NO3)2·6H2O0.4g/L、维生素B10.2g/L、维生素B120.003g/L、生物素0.004g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3.5:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3.5瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例4:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3100g/L、CH4ON235g/L、二水磷酸二氢钠4g/L、六水氯化铁2.5g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸5g/L、柠檬酸铁铵5g/L、二水氯化钙35g/L、四氢糠醇4g/L、α-紫罗兰醇3g/L、硼酸2.5g/L、MnCl2·4H2O 2g/L、ZnSO4·7H2O0.4g/L、Na2MoO4·2H2O 0.5g/L、CuSO4·5H2O 0.6g/L、Co(NO3)2·6H2O 0.4g/L、维生素B10.2g/L、维生素B120.003g/L、生物素0.004g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3.5:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3.5瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例5:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3100g/L、CH4ON235g/L、二水磷酸二氢钠4g/L、六水氯化铁2.5g/L,环糊精葡萄糖苷转移酶4g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸5g/L、柠檬酸铁铵5g/L、二水氯化钙35g/L、α-紫罗兰醇3g/L、硼酸2.5g/L、MnCl2·4H2O 2g/L、ZnSO4·7H2O 0.4g/L、Na2MoO4·2H2O 0.5g/L、CuSO4·5H2O 0.6g/L、Co(NO3)2·6H2O 0.4g/L、维生素B10.2g/L、维生素B120.003g/L、生物素0.004g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3.5:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3.5瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例6:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3100g/L、CH4ON235g/L、二水磷酸二氢钠4g/L、六水氯化铁2.5g/L,环糊精葡萄糖苷转移酶4g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸5g/L、柠檬酸铁铵5g/L、二水氯化钙35g/L、四氢糠醇4g/L、硼酸2.5g/L、MnCl2·4H2O 2g/L、ZnSO4·7H2O0.4g/L、Na2MoO4·2H2O 0.5g/L、CuSO4·5H2O 0.6g/L、Co(NO3)2·6H2O 0.4g/L、维生素B10.2g/L、维生素B120.003g/L、生物素0.004g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3.5:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3.5瓶A营养液和1瓶B营养液。
实施例7:
本发明提供一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分和浓度:NaNO3100g/L、CH4ON235g/L、二水磷酸二氢钠4g/L、六水氯化铁2.5g/L,所述B营养液包括以下组分和浓度:柠檬酸5g/L、柠檬酸铁铵5g/L、二水氯化钙35g/L、硼酸2.5g/L、MnCl2·4H2O 2g/L、ZnSO4·7H2O 0.4g/L、Na2MoO4·2H2O 0.5g/L、CuSO4·5H2O0.6g/L、Co(NO3)2·6H2O 0.4g/L、维生素B10.2g/L、维生素B120.003g/L、生物素0.004g/L。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3.5:1。
作为本发明的进一步设置,用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3.5瓶A营养液和1瓶B营养液。
将实施例1-7的试样每2天测定一次卵囊藻生物量和死亡率,卵囊藻的生物量采用干重法测定,卵囊藻死亡率通过台酚蓝染色法染色后,用血球记数板在显微镜下计算死亡的卵囊藻的占定,起初0天的卵囊藻的生物量为50mg/L,测试结果如下表1:
表1:各个实施例的生长活性和死亡率的测试数据
以上对本发明所提供的一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基进行了详细介绍。本文中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (2)

1.一种用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,其特征在于,包括A营养液和B营养液,所述A营养液包括以下组分:NaNO3 50-180g/L、二水磷酸二氢钠2-6g/L、EDTA二钠、六水氯化铁2-3g/L、CH4ON2 20-50g/L,所述B营养液包括以下组分:柠檬酸3-8g/L、柠檬酸铁铵3-8g/L、二水氯化钙20-50g/L、硼酸2-3g/L、MnCl2·4H2O 0.5-3g/L、ZnSO4·7H2O 0.2-0.6g/L、Na2MoO4·2H2O 0.3-0.8g/L、CuSO4·5H2O 0.5-0.8g/L、Co(NO3)2·6H2O 0.3-0.6g/L、维生素B1 0.1-0.3g/L、维生素B12 0.005-0.001g/L、生物素0.003-0.005g/L,所述A营养液中还包括环糊精葡萄糖苷转移酶2-6g/L,所述B营养液中还包括四氢糠醇3-5g/L,所述B营养液中还包括α-紫罗兰醇1-5g/L,所述用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基中A营养液和B营养液的重量比为3-4:1。
2.根据权利要求1所述的用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基,其特征在于,所述用于扩培浓缩卵囊藻藻种的培养基由以下步骤制备而成:将A营养液和B营养液按各组分浓度依次溶解水中,并用500mL瓶分装,使用时每扩培200L藻液添加3-4瓶A营养液和1瓶B营养液。
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