CN112522386A - 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒 - Google Patents

一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒 Download PDF

Info

Publication number
CN112522386A
CN112522386A CN202011453523.3A CN202011453523A CN112522386A CN 112522386 A CN112522386 A CN 112522386A CN 202011453523 A CN202011453523 A CN 202011453523A CN 112522386 A CN112522386 A CN 112522386A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mecp2
copy number
gene
kit
primer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011453523.3A
Other languages
English (en)
Inventor
代冰
周梅华
余艳
龚强
陈鹏
唐春燕
谭兵健
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Kingmed Medical Laboratory Co ltd
Original Assignee
Changsha Jinyu Medical Laboratory Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Changsha Jinyu Medical Laboratory Co Ltd filed Critical Changsha Jinyu Medical Laboratory Co Ltd
Priority to CN202011453523.3A priority Critical patent/CN112522386A/zh
Publication of CN112522386A publication Critical patent/CN112522386A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6858—Allele-specific amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/166—Oligonucleotides used as internal standards, controls or normalisation probes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒。所述试剂盒中含有如下引物对：Q‑MECP2‑LF：CATCACAGCCAATGACGCCC，Q‑MECP2‑LR：accccgcacggccgacgtCG，Q‑MECP2‑MF：CAAAATGTCCCAAATAGCCCACG，Q‑MECP2‑MR：CAAAgcaggaactggtgagAcAg，Q‑MECP2‑RF：CTGCCTCTGCTCACTTGTTGAG，Q‑MECP2‑RR：cctggaggtcctggtcttcAgTc。本发明简单快捷，预实验成本低，适用于小批量检测和验证。

Description

一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒
技术领域
本发明属于生物医学检测技术领域，具体涉及一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒。
背景技术
MECP2重复综合症是一种严重的神经发育障碍疾病，其主要特征为早发性肌张力减退、进食困难、胃食管反流和便秘、精神运动发育迟缓导致严重智力障碍、语言发育不良、进行性痉挛、反复呼吸道感染和癫痫发作等。MECP2重复综合症致病机制为MECP2基因的杂合全基因重复。该病主要以X连锁的方式遗传，多数男性患者遗传自母亲(杂合变异携带者)，少数为新发突变。女性携带者通常无症状，但也有文献报道女性携带者表现出轻度智力障碍以及类似于男性患者的症状。
拷贝数变异(Copy number variation，CNV)一般是指长度为1kb以上的基因组大片段的拷贝数增加或者减少，主要表现为亚显微水平的缺失、重复和倒位。与SNP相比，CNV数量虽然不多，但涉及更多的基因组序列，突变率更高。CNV是人类遗传多样性和个体间遗传差异的一个重要原因，除了一部分会致病以外也可以作为遗传多态性的一种。2004年，两项里程碑式的研究发现这种DNA拷贝数亚微观的变异(<500kb)广泛存在于正常人类基因组中。
CNV是基因组结构变异(Structural variation，SV)的重要组成部分，过去几年中，随着基因组信息的不断挖掘以及检测技术的进步，CNV在遗传病发病中的作用越来越受到重视，其致病机制可能与基因剂量效应、基因断裂、基因融合和位置效应等有关。对CNV的深入研究，可能有助于更好的理解遗传性疾病的发病机制，有利于分子诊断和治疗手段的研究和开发。
基于PCR技术的方法中应用最为广泛的是qPCR，它利用相对定量实时PCR系统，对检测样本的目标基因(具有拷贝数多态)以及参照基因(无拷贝数多态)，利用2^-ΔΔCt相对定量分析法(Livak and Schmittgen，2001)进行拷贝数的分析。该方法简单易于操作，敏感性高，重复性好，速度快和污染少，但是不适合大样本的高通量检测。
发明内容
本发明旨在克服现有技术中的不足，提供一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒。
为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：
所述检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒中含有如下引物对：
Q-MECP2-LF：CATCACAGCCAATGACGCCC(SEQ ID NO.1)
Q-MECP2-LR：ACCCCGCACGGCCGACGTCG(SEQ ID NO.2)
Q-MECP2-MF：CAAAATGTCCCAAATAGCCCACG(SEQ ID NO.3)
Q-MECP2-MR：CAAAGCAGGAACTGGTGAGACAG(SEQ ID NO.4)
Q-MECP2-RF：CTGCCTCTGCTCACTTGTTGAG(SEQ ID NO.5)
Q-MECP2-RR：CCTGGAGGTCCTGGTCTTCAGTC(SEQ ID NO.6)。
优选地，所述试剂盒中还含有内参引物对：
Q-RP-F：GCAGATTTGGACCTGCGACGGG(SEQ ID NO.7)
Q-RP-R：GTGAGCGGCTGTCTCCACAACACC(SEQ ID NO.8)。
使用上述试剂盒中的引物对进行扩增的程序如下：
①：95℃，5min；
②：95℃，10s；58℃，30s；40Cycles；
③：95℃，15s；58℃，60s；95℃，15s。
qPCR所使用的荧光化学可分为TaqMan荧光探针和SYBR Green荧光染料两种。本发明中，利用SYBR Green荧光染料法进行拷贝数检测的具体原理为：目标序列为正常(拷贝数＝2)序列时，目标序列和内参序列的表达量一致，且预试验中已通过引物优化确保二者的扩增效率一致，所以目标序列的C t和内参序列的C t值相等，表现在扩增曲线上则为目标序列的扩增曲线和内参序列的扩增曲线吻合在一起。根据2^-ΔΔCt公式计算出的归一化比值(normalized ratio，NR)为1左右。目标序列存在单拷贝缺失时(拷贝数＝1)时，其表达量相当于内参基因RP的1/2，C t值增加1左右，目标基因的扩增曲线在内参基因RP的扩增曲线后面，经2^-ΔΔCt公式计算的NR值在0.5左右。双拷贝缺失时(拷贝数＝0)，没有目标基因，其扩增曲线和阴性对照的扩增曲线相似，根据2^-ΔΔCt公式计算的NR值在0左右。目标基因拷贝数增加时(拷贝数>2)时，目标基因相对于内参基因RP表达量增加，C t值降低，目标基因的扩增曲线在内参基因RP的扩增曲线前面且目标基因拷贝数增加越多，其扩增曲线和内参基因RP的扩增曲线分开越远。当单拷贝增加时(拷贝数＝3)，经2^-ΔΔCt公式计算的NR值在1.5左右；当双拷贝增加时(拷贝数＝4)，经2^-ΔΔCt公式计算的NR值在2.0左右，其它情况的拷贝数重复以此类推。
引物扩增长度一般在100bp左右，不宜过长或过短；设计好的引物应该避免其退火部位出现发夹结构、单核苷酸多态(SNP)位点；避免引物间形成二聚体，引物扩增效率最好接近100％。本发明中，通过UCSC数据库获得MECP2基因序列外显子(chrX:154,030,367-154,092,209；hg38)，利用UCSC中tools中的Blat确认待测区域存在的同源序列或假基因区域，选择的引物序列避开同源区域，确认其退火温度，是否存在二级结构，在引物偏5’端位置改变一到两个碱基减少二级结构，如Q-MECP2-LR引物，由：ACCCCGCACGGCCGACGT(SEQ IDNO.9)改为ACCCCGCACGGCCGACGTCG(SEQ ID NO.2)。最终设计(L/M/R)3组短片段引物对，另增一对内参引物RP(RPP30)，特异性强，检测精准。
本发明通过QPCR的方法，利用Syber Green荧光染料法检测MECP2基因发生拷贝数变异(染色体绝对位置为：chrX:154,030,367-154,092,209；hg38)。相对于二代测序成本高、拷贝数变化检测结果准确性不足等问题，本发明简单快捷，预实验成本低，适用于小批量检测和验证。
附图说明
图1：Q-MECP2-LF+Q-MECP2-LR优化前扩增效率；
图2：Q-MECP2-MF+Q-MECP2-MR优化前扩增效率；
图3：Q-MECP2-RF+Q-MECP2-RR优化前扩增效率；
图4：Q-RP-F+Q-RP-R优化前扩增效率；
图5：Q-MECP2-LF+Q-MECP2-LR优化后扩增效率；
图6：Q-MECP2-MF+Q-MECP2-MR优化后扩增效率；
图7：Q-MECP2-RF+Q-MECP2-RR优化后扩增效率；
图8：Q-RP-F+Q-RP-R优化后扩增效率；
图9：Q-MECP2-LF+Q-MECP2-LR优化前溶解曲线；
图10：Q-MECP2-MF+Q-MECP2-MR优化前溶解曲线；
图11：Q-MECP2-RF+Q-MECP2-RR优化前溶解曲线；
图12：Q-RP-F+Q-RP-R优化前溶解曲线；
图13：Q-MECP2-LF+Q-MECP2-LR优化后溶解曲线；
图14：Q-MECP2-MF+Q-MECP2-MR优化后溶解曲线；
图15：Q-MECP2-RF+Q-MECP2-RR优化后溶解曲线；
图16：Q-RP-F+Q-RP-R优化后溶解曲线。
具体实施方式
1、引物测试
1)线性DNA准备(表1)：将标准品Human genetic DNA(253ng/ul)梯度稀释，取13ul加入37ul ddH2O，涡旋，微离，浓度即为66ng/uL。
然后10倍梯度稀释，取20ul加入到180ul ddH2O中，每次均需要充分涡旋混匀后才能进行下个梯度稀释。
表1
Figure BDA0002832454540000041
2)实验体系(表2)
表2
Figure BDA0002832454540000042
3)扩增程序(表3)
表3
Figure BDA0002832454540000043
4)结果分析
ABI7500设置：
Experiment Prop选择Quantutation–Relative Standard Curve and SYBRGreen Reagents.
结果如下：
引物MECP2-L：引物扩增效率107.2％，溶解曲线峰单一；
引物MECP2-M：引物扩增效率101.4％，溶解曲线峰单一；
引物MECP2-R：引物扩增效率105.1％，溶解曲线峰单一；
引物RP：引物扩增效率94.5％，溶解曲线峰单一；
引物扩增效率：PCR手册规定，目的基因和内参基因RP这两对引物的PCR扩增效率差异不超过10％的情况下，可进行相似相对定量计算。为此我们规定E值在90—110％之间的引物为合格。引物优化前后的扩增效率，见图1-8，由图可知，引物优化前，扩增效率不在90％-110％范围内，扩增效率差，而优化后，扩增效率接近100％，扩增效率高。
优化前引物如下：
Q-MECP2-LF：CATCACAGCCAATGACGG(SEQ ID NO.9)
Q-MECP2-LR：ACCCCGCACGGCCGACGT(SEQ ID NO.10)
Q-MECP2-MF：CAAAATGTCCCAAATAGCCCTG(SEQ ID NO.11)
Q-MECP2-MR：GCAGGAACTGGTGAGTCTG(SEQ ID NO.12)
Q-MECP2-RF：CTGCCTCTGCTCACTTGTTC(SEQ ID NO.13)
Q-MECP2-RR：CCTGGAGGTCCTGGTCTTCTGAC(SEQ ID NO.14)。
优化前内参引物为：
Q-RP-F：AGATTTGGACCTGCGAGCG(SEQ ID NO.15)
Q-RP-R：GAGCGGCTGTCTCCACAAGT(SEQ ID NO.16)。
优化后的引物及内参引物即为本发明前述SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.8所示的引物。
溶解曲线：因为SYBR Green染料并不能只特异性的结合目的基因，所以必须保证引物的特异性扩增，可以进行熔解曲线分析，出现均一熔解峰为合格。如被淘汰的MECP2.W2R，非特异的扩增会导致拷贝数计算出现较大误差(非单一溶解曲线峰)。引物优化前后的溶解曲线图，见图9-16，由图可知，引物优化前，溶解曲线峰不单一，引物非特异性扩增，效果差，而优化后，溶解曲线峰单一，引物特异性扩增，效果好。
2、临床样本检测
临床检测样本，为二代测序Nextseq 550平台检测样本，结果提示其在chrX:154,030,367-154,092,209区域测序深度低于相邻两个外显子区一半，考虑杂合缺失可能，其IGV结果如下：chrX:154,030,367-154,092,209区域测序深度小于46，chrX:154,029,546-154,030,010区域测序深度约98，chrX:154,092,318-154,092,979区域测序深度约101。
结果验证
1)将2×AceQ SYBR qPCR Master Mix等试剂、稀释成5μM引物在常温解冻，准备EP管、枪头、加样枪。
2)试剂、引物轻微震荡后瞬时离心。根据引物种类标记EP管。
3)按照检测项目配制体系(表4)：
表4
Figure BDA0002832454540000061
4)试剂及样本设置
配制好的试剂加入到96孔光学PCR板中，准备加样(图1)。以12个孔为一组，加入同一样本；其中，一部分为目的基因引物体系，另一部分为内参基因RP引物体系，均为三个复孔。在每个引物检测中必须包含一个正常人样本STD和一个NTC。本次实验中的Sample1、2、3分别对应上述二代测序样本及其父母。
5)测定样品DNA浓度，并且稀释至5ng/ul，吸取2ul稀释后的样本到对应孔中。盖好封膜后短时离心，准备上ABI7500扩增。
6)上机ABI7500，软件设置。
(1)Experiment properties：
实验类型：Quantitation-comparative CT(△△CT)
试剂类型：SYBR@Green Regents
其他参数默认。
(2)Plate setup：
Define target:分别命名目的基因和内参基因RP；
Define sample:对样品进行命名；
Assign target and sample:对命名好的基因、样本进行位置勾选；
Reference sample选择为STD；
Endogenous control选择RP；
Select the dye use for passive refenence选择ROX。
其他参数默认。
(3)Run method:选择实验体系为20ul(表5)；
表5
Figure BDA0002832454540000071
7)结果分析
通过导出原始CT数据(表6)：
表6
SampleP SampleF SampleM STD
MECP2-L 31.08 24.17 24.8 23.35
MECP2-M 30.69 24.42 24.58 23.92
MECP2-R 30.65 24.79 24.42 23.12
RP 23.79 23.52 23.16 23.35
ΔCt＝Ct(目的基因)-Ct(内参基因)
ΔΔCt＝ΔCt(待测样本)-ΔCt(STD)
拷贝数＝2*(2^–ΔΔCt)
根据计算公式计算后各数据的2*(2^–ΔΔCt)值(表7)
表7
Figure BDA0002832454540000072
各样本数据的拷贝数(表8)
表8
SampleP SampleF SampleM
MECP2-L 零拷贝 单拷贝 单拷贝
MECP2-M 零拷贝 单拷贝 单拷贝
MECP2-R 零拷贝 单拷贝 单拷贝
结果表明，3组引物对于同一样本，计算结果相近，符合预期，所得拷贝数结果与二代测序一致，并示其缺失来自于母亲。所涉及引物可用于MECP2基因chrX:154,030,367-154,092,209拷贝数变异检测。
序列表
<110> 长沙金域医学检验实验室有限公司
<120> 一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒
<141> 2020-12-11
<160> 16
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> null
<400> 1
catcacagcc aatgacgccc 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> null
<400> 2
accccgcacg gccgacgtcg 20
<210> 3
<211> 23
<212> DNA
<213> null
<400> 3
caaaatgtcc caaatagccc acg 23
<210> 4
<211> 23
<212> DNA
<213> null
<400> 4
caaagcagga actggtgaga cag 23
<210> 5
<211> 22
<212> DNA
<213> null
<400> 5
ctgcctctgc tcacttgttg ag 22
<210> 6
<211> 23
<212> DNA
<213> null
<400> 6
cctggaggtc ctggtcttca gtc 23
<210> 7
<211> 22
<212> DNA
<213> null
<400> 7
gcagatttgg acctgcgacg gg 22
<210> 8
<211> 24
<212> DNA
<213> null
<400> 8
gtgagcggct gtctccacaa cacc 24
<210> 9
<211> 18
<212> DNA
<213> null
<400> 9
catcacagcc aatgacgg 18
<210> 10
<211> 18
<212> DNA
<213> null
<400> 10
accccgcacg gccgacgt 18
<210> 11
<211> 22
<212> DNA
<213> null
<400> 11
caaaatgtcc caaatagccc tg 22
<210> 12
<211> 19
<212> DNA
<213> null
<400> 12
gcaggaactg gtgagtctg 19
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> null
<400> 13
ctgcctctgc tcacttgttc 20
<210> 14
<211> 23
<212> DNA
<213> null
<400> 14
cctggaggtc ctggtcttct gac 23
<210> 15
<211> 19
<212> DNA
<213> null
<400> 15
agatttggac ctgcgagcg 19
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> null
<400> 16
gagcggctgt ctccacaagt 20

Claims (3)

1.一种检测MECP2基因拷贝数变异的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有如下引物对：
Q-MECP2-LF：CATCACAGCCAATGACGCCC
Q-MECP2-LR：ACCCCGCACGGCCGACGTCG
Q-MECP2-MF：CAAAATGTCCCAAATAGCCCACG
Q-MECP2-MR：CAAAGCAGGAACTGGTGAGACAG
Q-MECP2-RF：CTGCCTCTGCTCACTTGTTGAG
Q-MECP2-RR：CCTGGAGGTCCTGGTCTTCAGTC。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有内参引物对：
Q-RP-F：GCAGATTTGGACCTGCGACGGG
Q-RP-R：GTGAGCGGCTGTCTCCACAACACC。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，使用权利要求1或2所述试剂盒中的引物对进行扩增的程序如下：
①：95℃，5min；
②：95℃，10s；58℃，30s；40Cycles；
③：95℃，15s；58℃，60s；95℃，15s。
CN202011453523.3A 2020-12-11 2020-12-11 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒 Pending CN112522386A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011453523.3A CN112522386A (zh) 2020-12-11 2020-12-11 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011453523.3A CN112522386A (zh) 2020-12-11 2020-12-11 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112522386A true CN112522386A (zh) 2021-03-19

Family

ID=74998841

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011453523.3A Pending CN112522386A (zh) 2020-12-11 2020-12-11 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112522386A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114231610A (zh) * 2021-11-25 2022-03-25 长沙金域医学检验实验室有限公司 一种检测scn1a基因拷贝数变异的试剂盒

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103014142A (zh) * 2011-09-26 2013-04-03 复旦大学 用于诊、查染色体微缺失综合征的分子组合探针
CN103614472A (zh) * 2013-11-27 2014-03-05 扬州创日畜牧科技有限公司 一种检测猪基因组拷贝数变异的pcr试剂盒及检测方法
CN103740827A (zh) * 2014-01-13 2014-04-23 香港中文大学深圳研究院 胎儿dna芯片及其应用
CN104046699A (zh) * 2014-07-08 2014-09-17 上海交通大学医学院附属瑞金医院 F9基因拷贝数变异检测试剂盒
CN110305948A (zh) * 2018-03-20 2019-10-08 中国科学院上海生命科学研究院 一种检测自闭症相关基因ube3a拷贝数的试剂和方法
CN111172248A (zh) * 2020-02-26 2020-05-19 上海晶准生物医药有限公司 一种基于片段分析技术验证拷贝数变异的通用试剂盒

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103014142A (zh) * 2011-09-26 2013-04-03 复旦大学 用于诊、查染色体微缺失综合征的分子组合探针
CN103614472A (zh) * 2013-11-27 2014-03-05 扬州创日畜牧科技有限公司 一种检测猪基因组拷贝数变异的pcr试剂盒及检测方法
CN103740827A (zh) * 2014-01-13 2014-04-23 香港中文大学深圳研究院 胎儿dna芯片及其应用
CN104046699A (zh) * 2014-07-08 2014-09-17 上海交通大学医学院附属瑞金医院 F9基因拷贝数变异检测试剂盒
CN110305948A (zh) * 2018-03-20 2019-10-08 中国科学院上海生命科学研究院 一种检测自闭症相关基因ube3a拷贝数的试剂和方法
CN111172248A (zh) * 2020-02-26 2020-05-19 上海晶准生物医药有限公司 一种基于片段分析技术验证拷贝数变异的通用试剂盒

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
唐丹霞等: "3 例 MECP2 重复综合征临床分析和文献复习", 《中国当代儿科杂志》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114231610A (zh) * 2021-11-25 2022-03-25 长沙金域医学检验实验室有限公司 一种检测scn1a基因拷贝数变异的试剂盒

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2786696C (en) Oligonucleotides and methods for detecting pik3ca mutations
KR20100063050A (ko) 디지털 ｐｃｒ에 의한 다양한 길이의 핵산의 분석
CN101838683B (zh) 一种kras基因和/或braf基因的核苷酸突变位点的检测方法
AU2014203213A1 (en) Diagnostic markers for ankylosing spondylitis and uses thereof
CN107012234B (zh) 检测y染色体微缺失的多重pcr引物组、试剂盒和应用
CN112522386A (zh) 一种检测mecp2基因拷贝数变异的试剂盒
US20120148574A1 (en) Diagnostic Markers for Ankylosing Spondylitis
CN117305437A (zh) 一种人运动神经元存活基因的检测引物探针组合、试剂盒及检测方法
CN116479103B (zh) 一种检测脊髓性肌萎缩症相关基因的试剂盒
CN112481371A (zh) 一种检测plp1基因拷贝数变异的试剂盒
CN112522385A (zh) 一种检测dnm2基因拷贝数变异的试剂盒
CN112322726A (zh) 一种检测otc基因拷贝数变异的试剂盒
CN116004775A (zh) 一种人运动神经元拷贝数定量的引物探针组合物、试剂盒及方法
CN111172248B (zh) 一种基于片段分析技术验证拷贝数变异的通用试剂盒
TWI674320B (zh) 用以預斷吉特曼症候群的方法及套組
KR101728023B1 (ko) Ｐｃｒ―ｌｄｒ을 이용한 ａｔｐ７ｂ 유전자의 돌연변이 검출
CN117737222B (zh) 用于Rh血型系统抗原基因分型的方法及组合物和试剂盒
CN114231610A (zh) 一种检测scn1a基因拷贝数变异的试剂盒
CN118109584A (zh) 用于多囊卵巢综合征风险预测的snp标志物及其应用
EP1601792B1 (en) Method for the identification of colorectal tumors
CN117025733A (zh) 一种探针与引物组合物、检测体系及其在aldh2基因单核苷酸多态性检测中的应用
CN117757921A (zh) 一种基因检测试剂盒及基因检测方法
CN117512085A (zh) 一种用于检测hla-dpb1基因分型的引物组及试剂盒
CN116103417A (zh) 用于幽门螺杆菌vacA基因分型的实时荧光PCR特异性引物和探针组合
CN117343995A (zh) 一种用于定量检测rna融合的组合物及检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20211223

Address after: 530007 fourth floor, building 1, phase II, Fengda Road headquarters base, high tech Zone, Nanning, Guangxi Zhuang Autonomous Region

Applicant after: GUANGXI KINGMED MEDICAL LABORATORY CO.,LTD.

Address before: Room 101-801, floor 1-8, building D1 and D2, jinruilugu science and Technology Park, No.28 Lutian Road, high tech Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Applicant before: Changsha Jinyu medical laboratory Co.,Ltd.

RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20210319