CN112494469A - 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 - Google Patents
二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112494469A CN112494469A CN202010749323.6A CN202010749323A CN112494469A CN 112494469 A CN112494469 A CN 112494469A CN 202010749323 A CN202010749323 A CN 202010749323A CN 112494469 A CN112494469 A CN 112494469A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- metformin
- preparation
- scar
- medicament
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 113
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 title claims abstract description 79
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 title claims abstract description 78
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 25
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 230000037387 scars Effects 0.000 claims abstract description 24
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 20
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 16
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 claims description 14
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 claims description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 13
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 claims description 11
- -1 pamoate Chemical compound 0.000 claims description 11
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 11
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 claims description 9
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 claims description 9
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 claims description 9
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 claims description 8
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 6
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 6
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 6
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 206010023330 Keloid scar Diseases 0.000 claims description 4
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000007888 film coating Substances 0.000 claims description 4
- 238000009501 film coating Methods 0.000 claims description 4
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 4
- FBZWYFBNIGSUPS-UHFFFAOYSA-N (2-chlorophenyl) ethaneperoxoate Chemical compound CC(=O)OOC1=CC=CC=C1Cl FBZWYFBNIGSUPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 206010037211 Psychomotor hyperactivity Diseases 0.000 claims description 3
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 230000002390 hyperplastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 3
- 239000000865 liniment Substances 0.000 claims description 3
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims description 3
- 239000011505 plaster Substances 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- HZNQSWJZTWOTKM-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-trimethoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(C(O)=O)C(OC)=C1OC HZNQSWJZTWOTKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JIMXXGFJRDUSRO-UHFFFAOYSA-N adamantane-1-carboxylic acid Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(=O)O)C3 JIMXXGFJRDUSRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- TXCGAZHTZHNUAI-UHFFFAOYSA-N clofibric acid Chemical compound OC(=O)C(C)(C)OC1=CC=C(Cl)C=C1 TXCGAZHTZHNUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-M cyclohexanecarboxylate Chemical compound [O-]C(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229940075933 dithionate Drugs 0.000 claims description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 2
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 claims description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 claims description 2
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-M naphthalene-1-sulfonate Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)[O-])=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 claims description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 5
- 208000002260 Keloid Diseases 0.000 claims 1
- 210000001117 keloid Anatomy 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- OETHQSJEHLVLGH-UHFFFAOYSA-N metformin hydrochloride Chemical compound Cl.CN(C)C(=N)N=C(N)N OETHQSJEHLVLGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 229960004329 metformin hydrochloride Drugs 0.000 description 35
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 21
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 19
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 19
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 10
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 7
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 6
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 5
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 102100036009 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 3
- 101000783681 Homo sapiens 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 3
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- 108700038202 AMP-Activated Protein Kinase Kinases Proteins 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 102100036213 Collagen alpha-2(I) chain Human genes 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 101000875067 Homo sapiens Collagen alpha-2(I) chain Proteins 0.000 description 1
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 1
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 1
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 1
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 240000007711 Peperomia pellucida Species 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 description 1
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000035614 depigmentation Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 230000010030 glucose lowering effect Effects 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 208000006443 lactic acidosis Diseases 0.000 description 1
- 238000013532 laser treatment Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001495 poly(sodium acrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M sodium polyacrylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C=C NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003871 white petrolatum Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
Abstract
本发明涉及医药生物领域，具体是二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在预防和/或治疗瘢痕中的新应用，以及以二甲双胍为主要有效成分的抗瘢痕外用制剂。本发明优点在于：局部应用二甲双胍抗瘢痕安全性高、价格便宜且疗效可靠，可单独使用或与其他药物协同作用，起到更好的抗瘢痕效果。
Description
技术领域
本发明涉及医药生物技术领域，具体地说，是二甲双胍在预防和/或治疗瘢痕中的新应用，以及以二甲双胍为主要有效成分的抗瘢痕外用制剂。
背景技术
瘢痕是由于剖腹产、切割伤、烧伤、皮肤感染等因素导致的正常皮肤组织的外观形态和组织病理学发生改变的统称。瘢痕可分为不同类型，如未成熟、成熟、萎缩性、增生性或瘢痕疙瘩，可根据年龄、创伤原因、解剖部位、愈合时间和遗传等因素而发展。无论何种瘢痕，患者常瘙痒、疼痛、外观改变及瘢痕收缩后影响关节活动，给患者生理及心理造成严重创伤。目前临床常用的抗瘢痕治疗有手术治疗、压力治疗、局部激素注射治疗及激光治疗。然而，无论哪种治疗方式均存在低有效率及高复发率的缺陷，有些治疗方法甚至会导致局部组织萎缩、色素脱失及全身不良反应。至目前为止仍未见理想的抗瘢痕治疗方案，临床多采用两种或多种方法联合治疗，开发疗效好而安全性高的新的治疗方案仍十分必要。
目前瘢痕形成的机制仍未完全阐明。皮肤损伤发生后，伤口会经历凝血期、炎症期、增生期、重塑期四个阶段，各期相互重叠、无严格界限。在增生期，成纤维细胞大量趋化至创面，分泌细胞外基质帮助重构真皮；同时部分成纤维细胞分化为肌成纤维细胞，帮助伤口收缩从而尽快的闭合伤口。在重塑期，肌成纤维细胞逐渐凋亡，细胞外基质分泌减少并通过激活基质金属蛋白酶完成细胞外基质重塑，从而使得伤口处皮肤逐渐恢复至正常皮肤的色泽、软硬度及弹性。肌成纤维细胞逃逸凋亡并持续性大量分泌细胞外基质是瘢痕形成的重要机制，如何调控肌成纤维细胞凋亡并抑制其分泌细胞外基质是抑制瘢痕形成的有效途径。
自1957年二甲双胍问世以来在临床已有50多年的应用历史，是全球应用最广泛的降糖药之一，安全性高且价格便宜。近年来，二甲双胍应用范围逐渐扩大，在体外细胞实验及动物实验中显示出良好的抗衰老、抗肿瘤及免疫调控作用。在抗组织纤维化中也作用明显，可通过激活腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine Monophosphate Activated ProteinKinase，AMPK)增加肺纤维模型中肌成纤维细胞对凋亡的敏感性，并抑制细胞外基质分泌，从而减轻肺纤维化程度(Rangarajan S,Bone NB,Zmijewska AA,et al.Metforminreverses established lung fibrosis in a bleomycin model.Nat Med 2018；24:1121-1127)。
中国专利文献CN1635880A(申请号01811403.2)公开了双胍衍生物在制备具有瘢痕形成作用的医药产品中的应用。该专利公开的双胍衍生物具有很强的结瘢性能，即促进上皮组织、内皮组织和结缔组织等新组织的增生，进而加速创面愈合。而本发明中瘢痕指的是创伤愈合后皮肤结缔组织过度增生所导致的正常皮肤组织的外观形态改变，二甲双胍可抑制瘢痕成纤维细胞细胞增殖并减少其分泌细胞外基质，进而减轻瘢痕形成。两者之间作用目的与作用机理均不同。
目前未见二甲双胍用于瘢痕治疗的报道。此外，二甲双胍常见的口服给药途径会经过消化系统的首过效应，且可能有乳酸酸中毒及血糖降低的副作用。为了提高局部瘢痕部位的有效药物浓度并降低全身副作用，本发明采用瘢痕部位局部各种外用制剂给药。
发明内容
本发明的目的在于提供二甲双胍及其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用。本发明的另一目的是提供以二甲双胍及其药学上可接受的盐为有效成分的抗瘢痕外用制剂。
为了实现上述目的，本发明的第一方面，提供二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用。
进一步的，所述的二甲双胍药学上可接受的盐包括盐酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、双羟萘酸盐、氯苯氧基乙酸盐、羟乙酸盐、门冬氨酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、对氯苯氧基异丁酸盐、甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、环己烷羧酸盐、三甲氧基苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、金刚烷羧酸盐、glycoxylate、谷氨酸盐、吡咯琓酮羧酸盐、萘磺酸盐、1-葡糖磷酸、硝酸盐、亚硫酸盐、连二硫酸盐或磷酸盐。
优选的，所述的二甲双胍药学上可接受的盐是盐酸盐、延胡索酸盐、双羟萘酸盐或氯苯氧基乙酸盐。
进一步的，所述的二甲双胍前药选自山羊豆素，山羊豆碱等。
进一步的，所述的药物为二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药为有效成分的外用制剂。包括溶液剂(酊剂和醑剂)、粉剂、洗剂、搽剂、油剂、乳剂(含霜剂)、软膏(含乳膏)、糊剂、硬膏、凝胶剂、涂膜剂、气雾剂(喷雾剂)、贴膏剂(橡胶膏剂、巴布膏剂、巴布贴以及其他贴剂和膏剂等)、其他(如溶解于二甲基亚砜的剂型等)。
进一步的，所述的二甲双胍外用制剂中二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药可任意浓度，优选质量浓度为1％-20％，更优选为5％。
进一步的，所述的瘢痕是指由剖腹产、切割伤、烧伤、皮肤感染等各种因素导致的正常皮肤组织的外观形态和组织病理学发生改变的统称，包括未成熟、成熟、萎缩性、增生性或瘢痕疙瘩等不同瘢痕类型，以及肌成纤维细胞过度活跃所引起的系统性皮肤硬化。
进一步的，所述的应用为，在制备改善瘢痕胶原的密度和排列的药物中的应用。
进一步的，所述的应用为，在制备降低瘢痕增生、降低瘢痕组织肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原(Collagen I)的表达的药物中的应用。
进一步的，所述的应用为，在制备抑制瘢痕成纤维细胞增殖活性的药物中的应用。
进一步的，所述的应用为，在制备抑制瘢痕成纤维细胞肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原(Collagen I)的表达的药物中的应用。
进一步的，所述的应用为，在制备通过激活AMPK通路增加肌成纤维细胞对凋亡的敏感性并抑制细胞外基质分泌的药物中的应用。
本发明的第二方面，提供一种抗瘢痕外用制剂，所述的外用制剂是以二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药为有效成分的制剂。
进一步的，所述的外用制剂中还包括药学上可接受的载体或辅料。
进一步的，所述的外用制剂，包括溶液剂(酊剂和醑剂)、粉剂、洗剂、搽剂、油剂、乳剂(含霜剂)、软膏(含乳膏)、糊剂、硬膏、凝胶剂、涂膜剂、气雾剂(喷雾剂)、贴膏剂(橡胶膏剂、巴布膏剂、巴布贴以及其他贴剂和膏剂等)、其他(如溶解于二甲基亚砜的剂型等)。
进一步的，所述的外用制剂中二甲双胍可任意浓度，优选质量浓度为1％-20％，更优选为5％。
进一步的，所述的瘢痕是指由剖腹产、切割伤、烧伤、皮肤感染等各种因素导致的正常皮肤组织的外观形态和组织病理学发生改变的统称，包括未成熟、成熟、萎缩性、增生性或瘢痕疙瘩等不同瘢痕类型，以及肌成纤维细胞过度活跃所引起的系统性皮肤硬化。
本发明优点在于：
1、二甲双胍在临床上已有广泛应用，安全性高，对应的药代学、药理学、毒理学研究相对完善，局部应用二甲双胍抗瘢痕安全性高、价格便宜且疗效可靠；
2、以二甲双胍为有效成分的抗瘢痕外用制剂价格会非常便宜，可大幅度降低患者经济负担及国家医保开支；
3、目前已上市的抗瘢痕外用制剂(硅酮贴、硅酮乳膏、糖皮质激素类乳膏)的作用机制主要为降低瘢痕局部氧分压、减轻局部炎症反应。本发明中二甲双胍类外用制剂通过激活AMPK通路增加肌成纤维细胞对凋亡的敏感性并抑制细胞外基质分泌。二甲双胍类外用制剂抗瘢痕机制与已上市药物不同，可以与其他药物协同使用，起到更好的抗瘢痕效果。
附图说明
图1为涂药二甲双胍乳膏后瘢痕大体观。
图2为涂药二甲双胍乳膏后瘢痕MASSON染色。
图3为涂药二甲双胍乳膏后计算瘢痕增生指数(SEI)。
图4为涂药二甲双胍乳膏后瘢痕组织肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原(Collagen I)的表达。
图5为二甲双胍对瘢痕成纤维细胞增殖的影响。
图6为二甲双胍对瘢痕成纤维细胞肌动蛋白及I型胶原表达的影响。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
实施例1：制备二甲双胍抗瘢痕生理盐水溶液
用电子天平称取5g盐酸二甲双胍后在室温条件下充分溶解于100ml无菌生理盐水中，封装保存。以上方法得到的为质量浓度5％的盐酸二甲双胍抗瘢痕生理盐水溶液。
通过改变盐酸二甲双胍与生理盐水的质量配比可得到任意浓度的二甲双胍溶液，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例2：制备盐酸二甲双胍抗瘢痕乳膏
在70℃恒温水浴中将白凡士林10g，液体石蜡40g，单硬脂酸甘油酯10g，甘油25g放入500ml烧杯，加热熔化并搅拌均匀，冷却至室温后作为油相；取蒸馏水380ml加入500ml烧杯中再加入盐酸二甲双胍25g，超声搅拌溶解作为水相；将水相油相在室温下混合并充分搅拌，加入氯酮10g充分搅拌后密封保存于4℃冰箱中。以上方法得到以5％的盐酸二甲双胍为有效成分的抗瘢痕乳膏。
通过改变体系中盐酸二甲双胍的质量配比可得到任意浓度的二甲双胍乳膏，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例3：制备盐酸二甲双胍抗瘢痕凝胶剂
室温条件下，称取67.4g生理盐水溶液，加入5g盐酸二甲双胍超声搅拌充分溶解，再加入3g羧甲基纤维素钠，25℃条件下溶胀过夜。最后加入20ml甘油和0.1g脂肪酸山梨坦。以上方法得到以5％的盐酸二甲双胍为有效成分的抗瘢痕凝胶剂。通过改变体系中盐酸二甲双胍的质量配比可得到任意浓度的二甲双胍凝胶剂，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例4：制备盐酸二甲双胍抗瘢痕气雾剂(喷雾剂)
用电子天平称取5克盐酸二甲双胍后在室温条件下充分溶解于100毫升无菌生理盐水中，充分搅拌均匀，并装入喷雾瓶中封装保存。
通过改变盐酸二甲双胍与生理盐水的质量配比可得到任意浓度的二甲双胍喷雾剂，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例5：制备盐酸二甲双胍抗瘢痕气涂膜剂
称取8g聚乙烯醇(PVA)加入到83ml蒸馏水中，在90℃恒温水浴中充分搅拌至完全溶解，再加入3ml甘油，搅拌至混合均匀。冷却至室温后加入5g盐酸二甲双胍，充分搅拌至完全溶解。封装保存。
通过改变体系中盐酸二甲双胍的质量配比可得到任意浓度的二甲双胍涂膜剂，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例6：制备盐酸二甲双胍抗瘢痕巴布贴
在50℃恒温水浴中，取100ml烧杯，加入26ml蒸馏水，2.5g卡波姆、5g甘油、2.5g明胶、2.5g桃胶、0.1g EDTA-2Na，得到A液；另取4g聚丙烯酸钠，加至4g甘油中，溶解搅拌均匀，得到B液；将A、B液混合并充分搅拌至混合均匀得到C液，冷却至室温。取5g盐酸二甲双胍，溶于50g蒸馏水中超声搅拌均匀，得到D液；最后在室温下将C、D液混合并充分搅拌至混合均匀，冷却至室温。上述药物涂布，覆盖防粘层，切块。以上方法得到以5％盐酸二甲双胍为有效成分的抗瘢痕巴布贴。
通过改变体系中盐酸二甲双胍的质量配比可得到任意浓度的盐酸二甲双胍巴布贴，优选为1％-20％的质量浓度，以针对不同类型瘢痕或取得最佳抗瘢痕效果。
实施例7：盐酸二甲双胍抗瘢痕乳膏抑制瘢痕形成的动物实验研究
1.1实验动物建模
采用兔耳瘢痕模型评价盐酸二甲双胍乳膏抑制瘢痕形成的效果。实验动物为雄性新西兰兔，2-3个月兔龄，体重2.0kg-2.5kg。适应性饲养48小时后，耳缘静脉注射戊巴比妥钠麻醉(剂量30mg/kg)。用75％酒精消毒耳部腹侧及背侧，直径10mm皮钻旋转切取皮肤，在每只兔耳腹侧制备6个直径10mm的圆形全层皮肤创面，以眼科剪仔细分离去除全层皮肤、皮下组织及软骨膜。术后每天观察创面并清除创面分泌物。术后两周，创面均已上皮化。
1.2实验分组
9只新西兰兔随机分为3组，每组3只。A组为5％二甲双胍乳膏组，在术后14天创面完全上皮化后每天涂抹创面，连续涂抹2周；B组为10％二甲双胍乳膏组，在术后14天创面完全上皮化后每天涂抹创面，连续涂抹2周；C组为阴性对照组，在术后14天创面完全上皮化后每天仅涂抹乳膏载体，连续涂抹2周。
1.3实验评估
(1)瘢痕大体观
术后每周拍照观察瘢痕外观，特别注意观察创面的色泽、硬度、柔软度。
(2)组织学检测
术后5周取材，在瘢痕最厚处一分为二，一份行分子生物学检测，一份采用4％多聚甲醛固定完全后石蜡包埋，切片后MASSON染色观察瘢痕胶原堆积和排列情况。计算瘢痕增生指数(Scar Elevation Index,SEI)，计算公式：SEI＝瘢痕中央最厚处厚度/瘢痕周围正常皮肤厚度。
(3)实时荧光定量PCR检测
术后5周取材，瘢痕组织去除表皮、皮下组织和软骨后置于液氮速冻，采用匀浆器匀浆后TRIzol提取RNA。实时荧光定量PCR按SYBR Green试剂盒操作，引物序列包括：
α-SMA：
forward：5′-CAGGGAGTAATGGTTGGAAT-3′(SEQ ID NO.1)；
reverse：5′-TCTCAAACATAATCTGGGTCA-3′(SEQ ID NO.2)；
COL1A2：
forward 5′-CCCAACCAAGGATGCACTA-3′(SEQ ID NO.3)；
reverse 5′-CTTGGCCTTGGAGCTCTTATAC-3′(SEQ ID NO.4)；
β-actin：
forward 5′-GCTATTTGGCGCTGGACTT-3′(SEQ ID NO.5)；
reverse 5′-GCGGCTCGTAGCTCTTCTC-3′(SEQ ID NO.6)。
1.4统计分析
采用SPSS 21.0统计软件进行分析，计数资料的多组数据比较采用ANOVA分析，P<0.05为差异有统计学意义。
1.5实验结果
术后2周大体观察创面基本已完成上皮化。阴性对照组创面逐渐变硬增厚、凸出于周围正常组织、色泽逐渐变红，而二甲双胍乳膏组瘢痕硬度和色泽明显改善而与正常皮肤更为接近。随着二甲双胍浓度的提高，对瘢痕外观改善更为明显(图1)。术后5周组织取材进行MASSON染色发现阴性对照组胶原致密且排列紊乱，而二甲双胍乳膏组胶原排列疏松且更为整齐。MASSON染色发现随着二甲双胍浓度的提高瘢痕胶原的密度和排列的改善更为明显，但高浓度组会引起表皮厚度变薄(图2)。术后5周瘢痕组织取材计算瘢痕增生指数，发现二甲双胍能明显降低瘢痕增生指数数值(图3)。进一步实时荧光定量PCR检测发现甲双胍乳膏能明显降低瘢痕组织肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原(Collagen I)的表达，与阴性对照组比差异具有统计学意义，其抑制作用与二甲双胍浓度成正比(图4)。
实施例8：盐酸二甲双胍抑制瘢痕成纤维细胞生物学活性的体外实验研究
1.1实验方法
(1)细胞分离培养
经患者或家属同意并签署知情同意书后，于术中获取增生性瘢痕组织。抗生素反复清洗后将瘢痕组织经剪刀剪成约0.5-1cm的小块，0.25％的中性蛋白酶(dispase酶)4℃消化过夜。用镊子将表皮去除，真皮置于另一个新的培养皿中用剪刀剪碎(组织块1mm大小左右)，采用0.25％胶原蛋白酶继续消化4-8小时。
加入完全培养基终止消化，组织细胞悬液用200目筛网过滤后离心重悬细胞，接种于培养皿后孵育培养，取第3-5代瘢痕成纤维细胞进行细胞实验。
(2)细胞增殖检测
细胞消化计数后均匀铺至96孔板中，每孔细胞约4×103个，培养箱中培养12小时后加入刺激药物。实验分三组：阴性对照组，10μM浓度盐酸二甲双胍组，20μM盐酸浓度二甲双胍组。继续培养48小时后每孔更换为100μl新完全培养基，并加入10μl CCK-8试剂避光孵育培养。2小时后利用酶标仪检测吸光度450nm下每孔的OD值。
(3)细胞外基质表达检测
细胞消化计数后均匀铺至6孔板中，每孔细胞约5×105个。待细胞融合至70％-80％后加入刺激药物。实验分两组：阴性对照组，10μM浓度盐酸二甲双胍组。24小时后采用PBS清洗细胞，TRIZOL提取细胞RNA后按SYBR Green试剂盒操作进行实时荧光定量PCR。
引物序列包括：
α-SMA：
forward：5'-CCCAGACATCAGGGAGTAATGG-3'(SEQ ID NO.7)；
reverse：5'-TCTATCGGATACTTCAGCGTCA-3'(SEQ ID NO.8)；
Collagen I：
forward：5'-GAGGGCCAAGACGAAGACATC-3'(SEQ ID NO.9)；
reverse：5'-CAGATCACGTCATCGCACAAC-3'(SEQ ID NO.10)；
GAPDH：
forward：5'-AGAACATCATCCCTGCATCC-3'(SEQ ID NO.11)；
reverse：5′-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3'(SEQ ID NO.12)。
1.2统计分析
采用SPSS 21.0统计软件进行分析，计数资料的多组数据比较采用ANOVA分析，两组数据比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
1.3实验结果
CCK-8试验检测细胞增殖，发现10μM浓度盐酸二甲双胍对瘢痕成纤维细胞增殖活性无明显影响，当盐酸二甲双胍浓度至20μM能将瘢痕成纤维细胞增殖活性抑制13％(图5)。实时荧光定量PCR检测发现10μM浓度盐酸二甲双胍虽然对瘢痕成纤维细胞增殖活性无明显影响，但能明显抑制瘢痕成纤维细胞肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原(Collagen I)的表达(图6)。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
序列表
<110> 吴学雷
吴晨凯
<120> 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用
<130> /
<160> 12
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 1
cagggagtaa tggttggaat 20
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 2
tctcaaacat aatctgggtc a 21
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 3
cccaaccaag gatgcacta 19
<210> 4
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 4
cttggccttg gagctcttat ac 22
<210> 5
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 5
gctatttggc gctggactt 19
<210> 6
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 6
gcggctcgta gctcttctc 19
<210> 7
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 7
cccagacatc agggagtaat gg 22
<210> 8
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 8
tctatcggat acttcagcgt ca 22
<210> 9
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 9
gagggccaag acgaagacat c 21
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 10
cagatcacgt catcgcacaa c 21
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 11
agaacatcat ccctgcatcc 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial)
<400> 12
tccaccaccc tgttgctgta 20
Claims (10)
1.二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的二甲双胍药学上可接受的盐为盐酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、双羟萘酸盐、氯苯氧基乙酸盐、羟乙酸盐、门冬氨酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、对氯苯氧基异丁酸盐、甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、环己烷羧酸盐、三甲氧基苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、金刚烷羧酸盐、glycoxylate、谷氨酸盐、吡咯琓酮羧酸盐、萘磺酸盐、1-葡糖磷酸、硝酸盐、亚硫酸盐、连二硫酸盐、或磷酸盐。
3.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的药物为以二甲双胍或其药学上可接受的盐为有效成分的外用制剂；所述的外用制剂中二甲双胍质量浓度为1％-20％。
4.根据权利要求3所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的外用制剂为溶液剂、粉剂、洗剂、搽剂、油剂、乳剂、软膏、糊剂、硬膏、凝胶剂、涂膜剂、气雾剂、贴膏剂。
5.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的瘢痕是指由各种因素导致的正常皮肤组织的外观形态和组织病理学发生改变的统称，包括未成熟、成熟、萎缩性、增生性或瘢痕疙瘩等不同瘢痕类型，以及肌成纤维细胞过度活跃所引起的系统性皮肤硬化。
6.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的应用为，在制备改善瘢痕胶原的密度和排列的药物中的应用。
7.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的应用为，在制备降低瘢痕增生、降低瘢痕组织肌动蛋白及I型胶原的表达的药物中的应用。
8.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的应用为，在制备抑制瘢痕成纤维细胞增殖活性的药物中的应用。
9.根据权利要求1所述的二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用，其特征在于，所述的应用为，在制备抑制瘢痕成纤维细胞肌动蛋白及I型胶原的表达的药物中的应用。
10.一种抗瘢痕外用制剂，其特征在于，所述的外用制剂是以二甲双胍或其药学上可接受的盐或二甲双胍前药为有效成分的制剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010749323.6A CN112494469A (zh) | 2020-07-30 | 2020-07-30 | 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010749323.6A CN112494469A (zh) | 2020-07-30 | 2020-07-30 | 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112494469A true CN112494469A (zh) | 2021-03-16 |
Family
ID=74953530
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010749323.6A Pending CN112494469A (zh) | 2020-07-30 | 2020-07-30 | 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112494469A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1635880A (zh) * | 2000-05-26 | 2005-07-06 | 国家科研中心 | 双胍衍生物在制备具有瘢痕形成作用的医药产品中的应用 |
| AU2015203067A1 (en) * | 2009-07-08 | 2015-06-25 | Janssen Pharmaceutica Nv | Combination therapy for the treatment of diabetes |
| CN106822075A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-06-13 | 浙江萧山医院 | 二甲双胍在促进伤口愈合中的应用 |
| US20170246129A1 (en) * | 2016-02-26 | 2017-08-31 | Peking University Third Hospital | COMPOSITION USING GUANIDINE COMPOUND FOR SUPPRESSING TRANSFORMING GROWTH FACTOR (TGF)-beta |
| CN110023332A (zh) * | 2016-09-22 | 2019-07-16 | Rsem有限合伙公司 | 包含sasp调节剂和衰老衰减剂的组合物及其用于调节细胞衰老的用途 |
-
2020
- 2020-07-30 CN CN202010749323.6A patent/CN112494469A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1635880A (zh) * | 2000-05-26 | 2005-07-06 | 国家科研中心 | 双胍衍生物在制备具有瘢痕形成作用的医药产品中的应用 |
| AU2015203067A1 (en) * | 2009-07-08 | 2015-06-25 | Janssen Pharmaceutica Nv | Combination therapy for the treatment of diabetes |
| US20170246129A1 (en) * | 2016-02-26 | 2017-08-31 | Peking University Third Hospital | COMPOSITION USING GUANIDINE COMPOUND FOR SUPPRESSING TRANSFORMING GROWTH FACTOR (TGF)-beta |
| CN110023332A (zh) * | 2016-09-22 | 2019-07-16 | Rsem有限合伙公司 | 包含sasp调节剂和衰老衰减剂的组合物及其用于调节细胞衰老的用途 |
| CN106822075A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-06-13 | 浙江萧山医院 | 二甲双胍在促进伤口愈合中的应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LEI R,ETC.: "Metformin Inhibits Epithelial-to-Mesenchymal Transition of Keloid Fibroblasts via the HIF-1α/PKM2 Signaling Pathway", 《INT J MED SCI.》 * |
| 孙怡等: "二甲双胍对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成影响", 《中华整形外科杂志》 * |
| 陆信仰: "《外科疾病诊断与手术操作 第2版 下》", 31 March 2019, 吉林科学技术出版社 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2652308C2 (ru) | Способы и продукты для заживления ран тканей | |
| KR20030009454A (ko) | 진세노사이드Ｒｂ1으로 된 피부조직 재생촉진제 | |
| WO2019196420A1 (zh) | 一种多肽及其皮肤修复功能的应用 | |
| US10596224B2 (en) | Method of treating a wound, comprising the step of administering a composition including a substance P | |
| WO2008094061A1 (fr) | Compositions pharmaceutiques et cosmétiques servant à accélérer le processus de cicatrisation de plaies et autres lésions superficielles | |
| JP4008192B2 (ja) | ジンセノサイドＲｂ１からなる皮膚組織再生促進剤 | |
| TWI474831B (zh) | 免疫調節蛋白於促進傷口癒合或組織損傷治療的用途 | |
| CZ258598A3 (cs) | Inhibitor neovaskularizace | |
| KR20010006485A (ko) | 망막 색소상피세포의 과잉증식에 관한 질환의 예방 또는 치료제 | |
| CN1455677A (zh) | 皮肤创伤愈合促进剂 | |
| TW200302108A (en) | New peptides and their pharmaceutical use | |
| CN108324926A (zh) | 干细胞提取物和抗菌肽的组合物及其用途 | |
| EP0974352A1 (en) | Drugs inhibiting progress of pterygium and postoperative recurrence of the same | |
| KR102158969B1 (ko) | 물질 p를 포함하는 난치성 궤양 치료용 조성물 | |
| CN112494469A (zh) | 二甲双胍在制备预防和/或治疗瘢痕的药物中的应用 | |
| JP4096115B2 (ja) | 皮膚創傷治癒促進剤 | |
| WO2007033591A1 (fr) | Substance active pour prothese en cas de blessures | |
| CN115887471A (zh) | 瑞德西韦在制备治疗皮肤纤维化疾病药物中的应用 | |
| KR101820519B1 (ko) | 설글리코타이드의 피부 상처 치유 촉진 용도, 및 이를 포함하는 외용제 조성물 | |
| CN101057823B (zh) | 一种具有抗衰老及美容作用的复合生物制剂 | |
| CN111378125B (zh) | Pebp嵌段聚合物凝胶及其制备和应用 | |
| CN116640188B (zh) | 一种宫内膜干细胞在子宫韧带修复中的应用 | |
| CN1330371C (zh) | 一种重组人表皮生长因子复合生物制剂及其应用 | |
| CN115721638B (zh) | 月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐在制备促伤口愈合药物中的应用 | |
| CN117442610A (zh) | 化合物8519-0065在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210316 |