CN112494375A - 一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112494375A CN112494375A CN202011332468.2A CN202011332468A CN112494375A CN 112494375 A CN112494375 A CN 112494375A CN 202011332468 A CN202011332468 A CN 202011332468A CN 112494375 A CN112494375 A CN 112494375A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- ethanol
- masson pine
- pine bark
- eluent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 235000011609 Pinus massoniana Nutrition 0.000 title claims abstract description 42
- 241000018650 Pinus massoniana Species 0.000 title claims abstract description 42
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title abstract description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 128
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 25
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical class CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 229940106587 pine bark extract Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 8
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000002021 butanolic extract Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 17
- 238000007539 photo-oxidation reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920006122 polyamide resin Polymers 0.000 claims description 4
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 206010051246 Photodermatosis Diseases 0.000 abstract description 43
- 230000008845 photoaging Effects 0.000 abstract description 29
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 49
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 44
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 35
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 14
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 6
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 3
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 3
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004299 exfoliation Methods 0.000 description 2
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- VQVUBYASAICPFU-UHFFFAOYSA-N (6'-acetyloxy-2',7'-dichloro-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3'-yl) acetate Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Cl)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(Cl)C(OC(=O)C)=C1 VQVUBYASAICPFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXEZTIWVRVSYOK-UHFFFAOYSA-N 2-(3,6-diacetyloxy-2,7-dichloro-9h-xanthen-9-yl)benzoic acid Chemical compound C1=2C=C(Cl)C(OC(=O)C)=CC=2OC2=CC(OC(C)=O)=C(Cl)C=C2C1C1=CC=CC=C1C(O)=O PXEZTIWVRVSYOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 description 1
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001282110 Pagrus major Species 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 241000218641 Pinaceae Species 0.000 description 1
- 235000005205 Pinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218602 Pinus <genus> Species 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010040954 Skin wrinkling Diseases 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 239000002031 ethanolic fraction Substances 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 1
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 1
- 150000005692 lignans Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 230000003227 neuromodulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 235000020741 pine bark extract Nutrition 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007665 sagging Methods 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 230000000475 sunscreen effect Effects 0.000 description 1
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9755—Gymnosperms [Coniferophyta]
- A61K8/9767—Pinaceae [Pine family], e.g. pine or cedar
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/35—Ketones, e.g. benzophenone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
- A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明属于植物有效成分的提取领域，具体涉及一种马尾松树皮提取物的制备方法，包括如下步骤：1)将马尾松树皮粉碎后加入纤维素酶进行酶解，得预处理物料；2)向所述预处理物料中添加甲醇或乙醇溶液，并对混合体系进行超声处理，以提取所述预处理物料中有效成分，收集提取液；3)用乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次对所述提取液进行萃取，收集水饱和正丁醇的萃取液；4)用弱极性的大孔吸附树脂对所述水饱和正丁醇萃取液中的有效成分进行分离纯化，纯化的过程中采用乙醇溶液作为洗脱液进行洗脱，收集乙醇的体积分数大于30％的洗脱液，浓缩干燥后得所述马尾松树皮提取物。本发明所述方法提取得到提取物具有抗光老化的作用。
Description
技术领域
本发明属于植物有效成分的提取领域，具体涉及一种马尾松树皮 提取物及其在抗光老化中的应用。
背景技术
皮肤作为人体抵御外界侵害的第一道防线，易受紫外线辐射产生 光老化。紫外线会诱导皮肤细胞产生大量自由基，由于自由基具有高 度的活泼性和极强的氧化反应能力,会导致细胞因子、受体和酶的表达 水平失调，NF-kB和MAPK途径过度激活，DNA损伤等；从而会造成 皮肤出现皱纹、色素沉积、松弛和晒伤等症状，更严重者可能引起基 因突变，诱发皮肤癌。光老化的严重程度主要取决于所接受的紫外线 暴露的累积剂量以及皮肤的色素沉着状态。皮肤的光老化主要是由 UVA和UVB辐射引起的。UVA和UVB可渗透到皮肤中，并与不同深 度的细胞相互作用，从而在表皮和真皮层中引起独特但有害的生物反 应。
光老化的预防和治疗包括多种干预措施，如涂抹防晒霜、局部使 用类维生素A和5-氟尿嘧啶、化学剥离、注射神经调节剂(肉毒杆菌 毒素)等。但是，类维生素A和5-氟尿嘧啶可能引起皮炎等刺激性反 应；化学剥离会引起色素沉着和疤痕形成；注射神经调节剂会引起瘀 伤，并且持续效果短暂。因此，寻求活性强，无毒副作用的抗光老化 天然活性成分，并将其应用于食品和化妆品中具有重大的研究价值和 广泛的应用前景。
马尾松(学名：Pinus massoniana Lamb.)是松科，松属乔木，分 布极广，北自河南及山东南部，南至两广，东自沿海，西至四川中部 及贵州，遍布于华中华南各地。马尾松树皮中富含原花青素、酚酸类、 木脂素类等天然活性成分，其提取物具有抗氧化、抗衰老、抗辐射、 抗肿瘤、抑菌消炎以及抗病毒等多种生理功能。目前，大部分研究是 针对马尾松树皮提取物的抗氧化、抗肿瘤、降血脂等功效，并未见其 提取物具有抗光氧化作用的报道。
发明内容
本发明涉及一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用，本发明 所述的制备方法包括如下步骤：
1)将马尾松树皮粉碎后加入纤维素酶进行酶解，得预处理物料；
2)向所述预处理物料中添加甲醇或乙醇溶液，并对混合体系进 行超声处理，以提取所述预处理物料中有效成分，收集提取液；
3)用乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次对所述提取液进行萃取，收 集水饱和正丁醇的萃取液；
4)用弱极性的大孔吸附树脂对所述水饱和正丁醇萃取液中的有 效成分进行分离纯化，纯化的过程中采用乙醇溶液作为洗脱液进行洗 脱，收集乙醇的体积分数大于30％的洗脱液，浓缩干燥后得所述马尾 松树皮提取物。
优选的，所述步骤2)中加入乙醇溶液后，混合体系中乙醇的浓 度为55～65％。
优选的，用所述乙酸乙酯对所述提取液进行萃取前，对所述提取 液进行浓缩以挥干提取液中的甲醇或乙醇。
优选的，所述弱极性大孔树脂为AB-8、H-60、XDA-1B或D101B 大孔吸附树脂。
优选的，所述步骤4)洗脱的过程中收集乙醇的体积分数40～60％ 的洗脱液。
优选的，将收集得到的乙醇的体积分数40～60％的洗脱液进行干 燥处理后用聚酰胺树脂进行分离纯化，纯化的过程中用乙醇溶液作为 洗脱液进行洗脱，收集乙醇的体积分数为50～70％的洗脱液，再次得 提取物。
优选的，采用中压制备色谱对再次得到的提取物进行分离纯化， 采用C18 Flash色谱柱，粒径为15μm，洗脱剂为甲醇的水溶液，得到 高活性的提取物。
本发明的另一目的是保护本发明所述方法制备得到的马尾松树 皮提取物。
本发明还保护一种马尾巴松树皮提取物，其中含有如下3种有效 成分：
优选的，所述有效成分
有效成分
的质量百分数为25～35％；
有效成分
的质量百分数为 40～50％。
优选的，上述有效成分由本发明所述的方法制备得到。
本发明还保护本发明所述的马尾松树皮提取物在制备具有抗光 氧化作用的产品中的应用。
优选的，具有抗光氧化作用的产品为化妆品或食品。
本发明具有如下有益效果：
1)本发明通过对马尾松中有效成分进行提取，首次发现了马尾 松提取物具有抗光老化的作用。
2)本发明通过对提取物进行进一步的提取和分析，得出其中主 要起抗光氧化作用的活性成分，为后续的研究和应用提供有效地指导。
附图说明
图1为马尾松树皮提取分离纯化流程图；
图2为组分Fr.1～Fr.4对光老化细胞活性的影响；
图3为实施例2所得的20:80、60:40、100:0的洗脱组分中抗光老化 活性的结果示意图；
图4为实施例3所得的Fr.2.1～Fr.2.4抗光老化活性的结果；
图5为Fr.2.3对光老化细胞β-半乳糖苷酶染色结果的影响；
图6为组分Fr.2.3对UVB引起的光老化细胞ROS水平的影响；
图7为不同乙醇提取物光老化L929细胞活性的影响；
图8为不同萃取物光老化L929细胞活性的影响；
图9为组分Fr.2.3总离子流图(ESI负离子模式)
图10为化合物的质谱图。
具体实施方式
下面通过下述附加技术特征对本发明进行进一步的详细说明。
本发明所述的方法包括如下步骤：
1)将马尾松树皮粉碎后加入纤维素酶进行酶解，得预处理物料；
2)向所述预处理物料中添加甲醇或乙醇溶液，并对混合体系进 行超声处理，以提取所述预处理物料中有效成分，收集提取液；
3)用乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次对所述提取液进行萃取，收 集水饱和正丁醇的萃取液；
4)用弱极性的大孔吸附树脂对所述水饱和正丁醇萃取液中的有 效成分进行分离纯化，纯化的过程中采用乙醇溶液作为洗脱液进行洗 脱，收集乙醇的体积分数大于30％的洗脱液，浓缩干燥后得所述马尾 松树皮提取物。
本发明在研究的过程中发现马尾松中的一些成分具有抗光老化 的作用，这在本领域尚属首次。进而，提出了上述的可提取得到具有 抗光老化作用的弱极性成分的方法。其中，用醇对酶解后的物料进行 提取的过程中进行超声波处理有利于有效成分充分地溶出，用正丁醇 对物料进行萃取前先用乙酸乙酯先对物料进行萃取有利于去除物料 中的其他非极性成分，有利于具有抗光老化作用的有效成分的富集， 最后用弱大孔树脂进行分离纯化，并收集乙醇的体积分数大于30％的 洗脱液，可得到具有抗光氧化活性的马尾松树皮提取物。
根据一些优选的实施例，所述步骤1)中将马尾松树皮粉碎后用 酸性条件下活性较高的纤维素酶进行处理。其中，处理过程中调整体 系的pH为4.5～5.5。
根据一些优选的实施例，所述步骤2)中加入乙醇溶液后，混合 体系中乙醇的浓度为55～65％。将乙醇的浓度调整至上述的浓度有利 于马尾松树皮中有效成分的充分溶出。
根据一些优选的实施例，所述步骤2)中超声处理的条件为功率 250～350W，时间40～60min。在上述条件下进行处理，既有利于有效 的成分地充分溶出还不会导致有效成分的结构的破坏。
根据一些优选的实施例，用所述乙酸乙酯对所述提取液进行萃取 前，对所述提取液进行浓缩以挥干提取液中的甲醇或乙醇。
根据一些优选的实施例，浓缩后物料的体积为提取液体积的 1/10～1/15。
根据一些优选的实施例，用所述乙酸乙酯对所述提取液进行萃取 的过程中，所述提取液与所述乙酸乙酯的体积比为1：0.8～1.5。采用 上述体积的乙酸乙酯对物料进行处理，有利于将其中的杂质成分充分 地提取还不会导致乙酸乙酯的用量过多造成浪费。
根据一些优选的实施例，用所述乙酸乙酯和水饱和正丁醇对物料 进行萃取的过程中，萃取的条件为用等体积乙酸乙酯萃取3-5次，直 至萃取液无明显颜色；再采用等体积水饱和正丁醇对剩余水相萃取 3-5次，直至萃取液无明显颜色。
根据一些优选的实施例，所述弱极性大孔树脂为AB-8、H-60、 XDA-1B或D101B大孔吸附树脂。
根据一些优选的实施例，针对于采用所述弱极性大孔树脂为 AB-8大孔树脂的纯化，洗脱的过程中收集乙醇的体积分数40～60％的 洗脱液。上述洗脱液中有效成分的含量最高，抗光氧化活性较强，因 此选择上述洗脱液。
根据一些优选的实施例，针对于采用所述弱极性大孔树脂为 AB-8大孔树脂的纯化，采用梯度洗脱的方式进行，乙醇：水溶剂系 统按体积比10:90、30:70、50:50、70:30、90:10洗脱，其中，乙醇的 体积分数大于30的洗脱液中的成分均具血抗光老化活性，且乙醇与水 的体积比为50:50的效果最好。
根据一些优选的实施例，为进一步得到抗光老化活性更优的成分， 将步骤4)所得马尾松树皮提取物中乙醇的体积分数40～60％的洗脱液 用聚酰胺树脂进行分离纯化，纯化的过程中用乙醇溶液作为洗脱液进 行洗脱，收集乙醇的体积分数为50～70％的洗脱液，再次得提取物。
根据一些优选的实施例，纯化的过程中利用中压制备色谱设备对 再次得到的提取物进行分离纯化，采用C18 Flash色谱柱，粒径为15 μm，洗脱剂为不同浓度甲醇的水溶液。采用上述方法进行纯化，一 方面可以有效分离活性成分，另一方面得到的活性成分具有较强的抗 光老化作用。
洗脱过程中洗脱剂梯度为：2CV、甲醇体积分数20-40％；3CV、 甲醇体积分数40-80％；1CV、甲醇体积分数80％；1CV、甲醇体积 分数80-100％；2CV、甲醇体积分数100-100％。
根据一些优选的实施例，纯化过程中的具体操作为：
本发明的另一目的是保护本发明所述方法制备得到的马尾松树 皮提取物。
分：
优选的，所述有效成分 
的质量百分数为8～12％；
有效成分
的质量百分数为25～35％；
有效成分
的质量百分数为 40～50％。
优选的，上述有效成分由本发明所述的方法制备得到。
本发明还保护本发明所述的马尾松树皮提取物在制备具有抗光 氧化作用的产品中的应用。
优选的，具有抗光氧化作用的产品为化妆品或食品。
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例中涉及的纤维素酶为CAS:9012-54-8；为灰白色无定形粉 末。
实施例1
本实施例涉及一种马尾松树皮提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)精选马尾松树皮，洗净，50℃烘干，粉碎过80目筛；向上 述马尾松树皮粉末中加入3％纤维素酶(CAS:9012-54-8；灰白色无定 形粉末)，按料液比1:7加入蒸馏水，稀盐酸调pH至5.0，50℃孵育100 min；
(2)向上述体系中加入无水乙醇和蒸馏水，使乙醇浓度为60％， 超声处理50min，超声功率为300W，对混合物料进行抽滤，收集提 取液；
(3)将残渣按照步骤2重复操作1次；并合并2次提取液；45℃减 压浓缩至原体积的1/10，制得浓缩液；
(4)将浓缩液采用等体积乙酸乙酯萃取3次，直至萃取液无明显 颜色；再采用等体积水饱和正丁醇对剩余水相萃取5次，直至萃取液 无明显颜色，并减压浓缩、冻干，获得水饱和正丁醇萃取物；
(5)称取水饱和正丁醇萃取物，加入少量无水乙醇溶解，并加 入蒸馏水制成悬浊液；将所述悬浊液采用AB-8大孔吸附树脂进行分 离纯化，AB-8大孔吸附树脂层析柱的径高比为1:15，洗脱体积为2BV， 乙醇：水溶剂系统按体积比10:90、30:70、50:50、70:30、90:10洗脱， 按乙醇：水溶剂系统、30:70、50:50、70:30、90:10，分别得到Fr.1～Fr.4 共4个组分和乙醇：水溶剂比10:90的洗脱组分分别45℃减压浓缩、冻 干，获得固体粉末；
(6)取步骤(5)所得5种组分的固体粉末，利用UVB诱导的L929 细胞光老化模型进行评价，以细胞活性、ROS水平和β-半乳糖苷酶染 色实验为指标，评价抗光老化能力，发现上述Fr.1～Fr.4组分均具有抗 光老化能力，其中抗光老能力最强的组分为Fr.2，即乙醇：水的体积 比为50:50的体系提取得到的组分，而乙醇：水溶剂比10:90的洗脱组 分没有抗光老化能力。
实施例2
本实施例与实施例1相比区别在于通过对组分Fr.2的分离纯化得 到一种抗光老化能力更强的提取物。
取步骤组分Fr.2，加入少量无水乙醇溶解，并加入蒸馏水制成悬 浊液；采用聚酰胺树脂进行纯化，聚酰胺粒径为200目；聚酰胺层析 柱的径高比为1:6；洗脱体积为2.5BV；
乙醇：水溶剂系统按体积比20:80、60:40、100:0洗脱，细胞结果 表明，60:40的洗脱组分的抗光老化效果较好，收集体积比60:40的洗 脱组分，将其去除水分后干燥得粉末。
实施例3
本实施例与实施例2相比区别在于，通过对实施例2所述的组分进 行纯化得到一种抗光老化能力更强的提取物(其提取的流程图如图1)。
将实施例2所得组分用少量甲醇溶解，配制成浓度为10mg/mL的 溶液，过0.45μm滤膜，利用中压制备色谱设备进行分离纯化，采用 C18 Flash色谱柱，粒径为15μm，上样量为柱体积的2％，采用不同浓 度的甲醇溶液进行洗脱，其中洗脱剂梯度为：2CV、20-40％；3CV、40-80％；1CV、80％；1CV、80-100％；2CV、100-100％，仪器自 动收集出峰的组分。HPLC检测合并相似组分，得到Fr.2.1～Fr.2.4共4 个组分，分别45℃减压浓缩、冻干，获得固体粉末；经验证发现，上 述4中组分均具有抗光老化能力，其中Fr.2.3的抗光老化能力最强。
进一步分析发现，组分Fr.2.3的组成及比例如下：
对比例1
与实施例1相比，其区别在于，所述步骤(2)提取的过程中调整 乙醇溶液的浓度为80％。
对比例2
与实施例1相比，其区别在于，所述步骤(4)中不采用乙酸乙酯 对物料进行萃取，直接用水饱和的正丁醇对物料进行处理。
实验例
将实施例1～3和对比例1～2所得的提取物进行活性实验。
利用UVB诱导的L929细胞光老化模型进行评价，以细胞活性、 ROS水平和β-半乳糖苷酶染色实验为指标，评价抗光老化能力。
其具体方法为：
实验对象：L929成纤维细胞(购买于中国协和细胞库，来源于雄 性C3H/An小鼠的正常皮下疏松结缔组织)
实验步骤
(1)细胞模型建立
细胞融合达到80％-90％时，弃旧培养液，胰酶消化细胞制备细 胞悬液，细胞浓度为5×104个/mL，细胞密度为5×103/孔(每孔接种 100μL)，接种于96孔板内。继续培养24h后，弃旧培养液，PBS冲 洗细胞2次，每孔加100μLPBS覆盖，使用铝箔纸将空白对照组覆 盖。将UVB照射剂量分为30mJ/cm2,150mJ/cm2,300mJ/cm2， 450mJ/cm2，600mJ/cm2，每组剂量设置6个复孔。
照射剂量(mJ/cm2)＝照射强度(mW/cm2)×照射时间(s)
照射完后，弃去PBS，每孔再加入100uL培养液放培养箱继续培 养。培养24h后，CCK-8法检测细胞活力。未照射组细胞用锡纸包 裹不接受UVB照射。照射过程中为防止UVB的热刺激，需要将孔板 置于冰上进行照射操作。
(2)细胞相对活性测定
将生长密度达到80％-90％的细胞以细胞密度为5×103/孔(每孔 接种100μL)，接种于96孔板内。随机分为空白对照组、UV组、不 同浓度样品+UV组，培养液培养细胞24h，次日，弃掉旧液，PBS 冲洗细胞2次，每孔加100μLPBS覆盖，使用铝箔纸将空白对照组 覆盖，用UV照射UV组、样品+UV组，根据公式计算出照射时间。 照射完毕，弃去PBS加入培养液，放置于37℃5％CO2的培养箱中 培养24h后测定细胞增殖率。
测定前，弃掉旧液，PBS冲洗细胞2次，每孔加入100μL完全 培养基，再加入10μLCCK-8溶液，37℃孵育3h后，酶标仪检测450 nm处的A殖，计算细胞相对活性：
(3)β-半乳糖苷酶染色
细胞密度为2.5×105个/mL，接种至6孔板，每孔2mL(或细胞 密度为1×105个/mL，接种至24孔板，每孔1mL)，37℃培养24h 后，UVB照射造模，继续培养8h。之后，采用β-半乳糖苷酶染色试 剂盒进行染色，严格按照试剂盒说明书操作。倒置显微镜下观察染 色结果，计数被染为蓝绿色的衰老细胞比例。即染色衰老细胞数/总 细胞数×100％，每组均设3个复孔。
(4)细胞ROS水平检测
将生长密度达到80％-90％的L929细胞以细胞密度为5×104/孔 (每孔接种0.5mL)，接种于24孔板内，培养24h后，随机分为空 白对照组、UVB模型组、UVB+不同浓度样品组。弃掉旧液，PBS 冲洗细胞1次，每孔加1mL PBS覆盖，使用铝箔纸将空白对照组覆 盖，UVB辐射剂量为300mJ/cm2，然后弃去PBS，再加入培养基， 放置于37℃5％CO2的培养箱中培养24h。
蛋白质含量测定：培养24h后，弃去培养基，PBS冲洗细胞2 次，每孔加入50μL裂解液(含1mM的PMSF)，用枪吹打数下，使 裂解液和细胞充分接触，再加入1mL PBS，吹打后移入2mL离心管 中，12000rpm/min离心5min。取上清液备用，按照BCA检测试剂 盒方法检测蛋白质含量，结果以mg Protein表示。
荧光强度测定：培养24h后，弃去培养基，PBS冲洗细胞2次， 每孔加入1mL稀释好的2′,7′二氯荧光黄双乙酸盐(2， 7-dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFH-DA)(按照1:1000用无 血清培养液稀释DCFH-DA，使终浓度为10μmol/L)，37℃避光孵育 30min后，用PBS缓冲液洗涤细胞3次，用荧光酶标仪(激发波长 485nm，发射波长525nm)测其荧光强度。
根据所测蛋白质含量和荧光强度表示细胞内的ROS水平，单位： 荧光强度/mgProtein。
结果发现，
实施例1中所得Fr.1～Fr.4四种组分的抗光老化活性的结果如图2 所示，与UVB模型组相比，组分Fr.2在20、10μg/mL时，可显著增强 光老化细胞活性(P<0.01)。
实施例2所得的20:80、60:40、100:0的洗脱组分中抗光老化活性 的结果为如图3所示，与UVB模型组相比，60％乙醇组分在10、5μg/mL 时，可显著增强光老化细胞活性(P<0.01)。
实施例3所得的Fr.2.1～Fr.2.4抗光老化活性的结果如图4所示，由 图4可知组分Fr.2.3在5、2.5μg/mL时，可显著增强光老化细胞活性 (P<0.01)；其余组分仅Fr.2.2在5μg/mL时具有一定活性(P<0.05)，。
研究组分Fr.2.3对光老化细胞β-半乳糖苷酶染色结果的影响，由图 5可知，组分Fr.2.3在5μg/mL时，可显著降低UVB引起的细胞衰老数量； 研究Fr.2.3对光老化细胞ROS水平的影响，由图6可知，组分Fr.2.3在 10μg/mL时，可显著降低UVB引起的光老化细胞ROS水平(P<0.05)。
图9为组分Fr.2.3的总离子流图，图10为化合物1～3的质谱图。
对比例1所得的组分的相关活性如图7所示，与UVB模型组相比， 60％乙醇提取物在40μg/mL时，即可显著增强光老化细胞活性 (P<0.01)；而80％乙醇提取物在80μg/mL时才可显著增加活性。因此， 60％乙醇提取效果优于80％乙醇提取。
对比例2所得的组分的相关活性如图8所示，A表示先用乙酸乙酯 萃取后，再用水饱和正丁醇萃取，得到的萃取物；B表示直接采用水 饱和正丁醇萃取，得到的萃取物。结果表明，与UVB模型组相比，萃 取物A在20μg/mL时，即可显著增强光老化细胞活性(P<0.01)；而萃 取物B在60μg/mL时才可显著增加活性。因此，先用乙酸乙酯萃取后， 再用水饱和正丁醇萃取，得到的萃取物具有较强活性。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发 明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进， 这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神 的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将马尾松树皮粉碎后加入纤维素酶进行酶解，得预处理物料；
2)向所述预处理物料中添加甲醇或乙醇溶液，并对混合体系进行超声处理，以提取所述预处理物料中有效成分，收集提取液；
3)用乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次对所述提取液进行萃取，收集水饱和正丁醇的萃取液；
4)用弱极性的大孔吸附树脂对所述水饱和正丁醇萃取液中的有效成分进行分离纯化，纯化的过程中采用乙醇溶液作为洗脱液进行洗脱，收集乙醇的体积分数大于30％的洗脱液，浓缩干燥后得所述马尾松树皮提取物。
2.根据权利要求1所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中加入乙醇溶液后，混合体系中乙醇的浓度为55～65％。
3.根据权利要求1所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，用所述乙酸乙酯对所述提取液进行萃取前，对所述提取液进行浓缩以挥干提取液中的甲醇或乙醇。
4.根据权利要求1所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，所述弱极性大孔树脂为AB-8、H-60、XDA-1B或D101B大孔吸附树脂。
5.根据权利要求4所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤4)洗脱的过程中收集乙醇的体积分数40～60％的洗脱液。
6.根据权利要求5所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，将步骤4)所得马尾松树皮提取物用聚酰胺树脂进行分离纯化，纯化的过程中用乙醇溶液作为洗脱液进行洗脱，收集乙醇的体积分数为50～70％的洗脱液，再次得提取物。
7.根据权利要求6所述的一种马尾松树皮提取物的制备方法，其特征在于，采用中压制备色谱对再次得到的提取物进行分离纯化，采用C18 Flash色谱柱，粒径为15μm，洗脱剂为甲醇的水溶液，得到高活性的提取物。
8.权利要求1～7任一项方法制备得到的马尾松树皮提取物。
9.一种马尾巴松树皮提取物，其特征在于，其中含有如下3种有效成分：
优选的，所述有效成分
有效成分
的质量百分数为25～35％；
有效成分
的质量百分数为40～50％。
10.权利要求8或9所述的马尾松树皮提取物在制备具有抗光氧化作用的产品中的应用，优选的，具有抗光氧化作用的产品为化妆品或食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011332468.2A CN112494375B (zh) | 2020-11-24 | 2020-11-24 | 一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011332468.2A CN112494375B (zh) | 2020-11-24 | 2020-11-24 | 一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112494375A true CN112494375A (zh) | 2021-03-16 |
| CN112494375B CN112494375B (zh) | 2022-07-19 |
Family
ID=74958307
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011332468.2A Active CN112494375B (zh) | 2020-11-24 | 2020-11-24 | 一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112494375B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114392287A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-26 | 国珍健康科技（北京）有限公司 | 一种抑制5α还原酶活性的松针提取物及其制备方法和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5777696A (en) * | 1980-10-31 | 1982-05-15 | Zenyaku Kogyo Kk | Preparation of condurango extract |
| CN105456308A (zh) * | 2014-09-30 | 2016-04-06 | 中山未标生物新技术有限公司 | 一种治疗肺鳞癌的马尾松树皮提取物及其制备方法与其组合物 |
| CN108653395A (zh) * | 2018-06-21 | 2018-10-16 | 南京林业大学 | 一种人工林树皮活性成分耦合提取方法 |
| CN108704002A (zh) * | 2018-06-21 | 2018-10-26 | 南京林业大学 | 一种人工林树皮活性成分酶处理与超声波辅助耦合提取方法 |
| CN109601734A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-12 | 北京中农弘科生物技术有限公司 | 含原花青素和膳食纤维的饲料添加剂及其制备方法和无抗仔猪饲料制品 |
-
2020
- 2020-11-24 CN CN202011332468.2A patent/CN112494375B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5777696A (en) * | 1980-10-31 | 1982-05-15 | Zenyaku Kogyo Kk | Preparation of condurango extract |
| CN105456308A (zh) * | 2014-09-30 | 2016-04-06 | 中山未标生物新技术有限公司 | 一种治疗肺鳞癌的马尾松树皮提取物及其制备方法与其组合物 |
| CN108653395A (zh) * | 2018-06-21 | 2018-10-16 | 南京林业大学 | 一种人工林树皮活性成分耦合提取方法 |
| CN108704002A (zh) * | 2018-06-21 | 2018-10-26 | 南京林业大学 | 一种人工林树皮活性成分酶处理与超声波辅助耦合提取方法 |
| CN109601734A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-12 | 北京中农弘科生物技术有限公司 | 含原花青素和膳食纤维的饲料添加剂及其制备方法和无抗仔猪饲料制品 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| YOSHIAKI AMAKURA等: "Screening of the Inhibitory Effect of Vegetable Constituents on the Aryl Hydrocarbon Receptor-Mediated Activity Induced by 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin", 《BIOL. PHARM. BULL.》 * |
| 于立梅等: "基于响应面法的马尾松树皮原花青素提取及抗氧化性研究", 《食品与机械》 * |
| 康婕等: "马尾松松针的化学成分及生物活性研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（硕士） 医药卫生科技辑》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114392287A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-26 | 国珍健康科技（北京）有限公司 | 一种抑制5α还原酶活性的松针提取物及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112494375B (zh) | 2022-07-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Seong et al. | Antioxidative and antiaging activities and component analysis of Lespedeza cuneata G. Don extracts fermented with Lactobacillus pentosus | |
| Gupta et al. | Wound healing activity of an aqueous extract of the Lingzhi or Reishi medicinal mushroom Ganoderma lucidum (higher Basidiomycetes) | |
| CN112494375B (zh) | 一种马尾松树皮提取物及其制备方法和应用 | |
| Loo et al. | Development on potential skin anti-aging agents of Cosmos caudatus Kunth via inhibition of collagenase, MMP-1 and MMP-3 activities | |
| CN110693030A (zh) | 一种澳洲坚果青皮提取物的制备方法及其应用 | |
| KR102342409B1 (ko) | 수국 전초의 가수분해물 및 그 용도 | |
| JP2009084169A (ja) | コラーゲン産生作用を呈するキサントン誘導体及びその製造方法 | |
| CN114989248B (zh) | 一种具有抗炎抗氧化活性的忧遁草多肽及其制备方法和应用 | |
| CN114588184B (zh) | 瓶尔小草提取物及其制备方法和应用 | |
| KR101512064B1 (ko) | 알러지 성분이 제거된 분리정제봉독을 이용한 기능성 봉독 화장품 조성물의 제조방법 | |
| Sugihartini et al. | The Amount of βCarotene, Total Phenolic and Total Flavonoid of Ethanol Extract of Leaf Moringa Oleifera with Variation Concentration of Solvent | |
| JP6273614B2 (ja) | 遺伝子修復の活性化作用を呈するヘスペレチン誘導体及びその製造方法 | |
| KR102041511B1 (ko) | 흑진주 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지 흡착용 화장료 조성물 | |
| JP4362524B2 (ja) | Ｂｃｌ−２蛋白発現剤、アポトーシス抑制剤および表皮細胞の紫外線ｄｎａ障害防止剤 | |
| JP2010065007A (ja) | クローディン−１産生促進剤及び皮膚バリア機能改善剤 | |
| CN115715750B (zh) | 一种桂花提取物及其制备方法和护肤应用 | |
| CN113893214B (zh) | 喙尾琵甲提取物在化妆品中的应用 | |
| KR102386995B1 (ko) | 천연 공융용매로 추출한 사철쑥 추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
| KR102325161B1 (ko) | 반려동물의 모낭충 제거 및 냄새 제거를 위한 조성물 및 그 제조방법 | |
| CN114848566B (zh) | 一种抗皮肤光老化的铁皮石斛提取物的制备方法及其应用 | |
| JP5189754B2 (ja) | Ｓ１００ａ８発現促進剤 | |
| WO2013046813A1 (ja) | 生体防御機能因子の発現亢進剤 | |
| Adou et al. | Evaluation of the antioxidant potential and aglycone coumarins contents of ethereal extracts of 4 medicinal plants from Côte d’Ivoire | |
| JP6471974B2 (ja) | ＮＦ−κＢクラスＩＩ抑制作用を呈するインドール誘導体及びその製造方法 | |
| CN118146305A (zh) | 一种甘草寡肽-a、提取方法及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |