CN112391433A - 一种人源细胞多肽提取及应用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种人源细胞多肽提取及应用方法，涉及生物技术领域。该人源细胞多肽提取及应用方法，包括以下步骤：S1、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用，S2、初步酶解：取S1中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用。该人源细胞多肽提取及应用方法，采用本发明的方法，能够高效进行人源细胞中多肽的提取，进而有效提高实际多肽产量，有效减少多肽衍生物生产成本，提高实际多肽衍生物的经济收益，同时制取的化妆品能够同时具备多种护肤效果，减少使用者实际化妆品购买数量，减少使用者实际购买成本。

Description

一种人源细胞多肽提取及应用方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，特别的为一种人源细胞多肽提取及应用方法。
背景技术
肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物，人体很多活性物质都是以肽的形式存在的，多肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域，其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能，激活体内有关酶系，促进中间代谢膜的通透性，或通过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成，最终产生特定的生理效应，但是现有技术中，由于人源细胞中多肽的提取较为困难，无法有效从人源细胞中完全进行多肽的提取，造成多肽实际提取效率较低，使多肽实际提取量较少，提高了多肽衍生物的生产成本，同时传统多肽提取物制取的化妆品实际使用效果单一，无法满足使用者的多种需求，为达到自身需求使用者需选购较多化妆品，进而提高了使用者实际购买成本。
发明内容
本发明提供的发明目的在于提供一种人源细胞多肽提取及应用方法，能够高效进行人源细胞中多肽的提取，进而有效减少多肽衍生物生产成本，提高实际多肽衍生物的经济收益，同时制取的化妆品能够同时具备多种护肤效果，减少使用者实际化妆品购买数量，减少使用者实际购买成本。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种人源细胞多肽提取方法，包括有以下步骤：
S1、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用。
S2、初步酶解：取S1中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用。
S3、二次提取环境调节：向S2中备用溶液中加入氢氧化钠溶液，振荡摇匀后备用。
S4、二次酶解：取S3中备用溶液加入胰蛋白酶，振荡摇匀后置入恒温设备中进行二次酶解备用。
S5、过滤提纯：将S4中备用溶液加热至沸腾，待沸腾溶液冷却至3-7℃后，使用微滤膜进行沸腾溶液的加压过滤，并将过滤后溶液置于离心机中进行离心处理，取离心后中间澄清也备用。
S6、储存环境调节：向S5中间澄清液中加入浓度为2mol/L的氯化氢溶液至中间澄清液PH值为7，并经过真空低温浓缩和真空冷冻干燥后制得多肽提取物。
作为本发明进一步的方案：所述氯化氢溶液浓度为1.5mol/L，所述氯化氢溶液PH值为2-3。
作为本发明进一步的方案：所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为10-12h，所述胃蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的1％-3％。
作为本发明进一步的方案：所述氢氧化钠溶液浓度为1mol/L，所述氢氧化钠PH值为7-10。
作为本发明进一步的方案：所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为3-4h，所述胰蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的3％-4％。
作为本发明进一步的方案：所述加热沸腾时间为15-25min，所述加压条件为0.1-0.3MPa，所述离心机转速为3000-3500r/min。
一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠6-18份、透明质酸钠6-18份、神经酰胺2-14份、天然香精3-15份、角鲨烷7-19份、肉豆蔻醇4-16份、红景天提取液5-17份、助乳化剂2-14份、多肽提取物1-13份。
作为本发明进一步的方案：包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠8-16份、透明质酸钠8-16份、神经酰胺4-12份、天然香精5-13份、角鲨烷9-17份、肉豆蔻醇6-14份、红景天提取液7-15份、助乳化剂4-12份、多肽提取物3-11份。
作为本发明进一步的方案：包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠10-14份、透明质酸钠10-14份、神经酰胺6-10份、天然香精7-11份、角鲨烷11-15份、肉豆蔻醇8-12份、红景天提取液9-13份、助乳化剂6-10份、多肽提取物5-9份。
作为本发明进一步的方案：包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠12份、透明质酸钠12份、神经酰胺8份、天然香精9份、角鲨烷13份、肉豆蔻醇10份、红景天提取液11份、助乳化剂8份、多肽提取物7份。
本发明提供了一种人源细胞多肽提取及应用方法。具备以下有益效果：
该人源细胞多肽提取及应用方法，采用本发明的方法，能够高效进行人源细胞中多肽的提取，进而有效提高实际多肽产量，有效减少多肽衍生物生产成本，提高实际多肽衍生物的经济收益，同时制取的化妆品能够同时具备多种护肤效果，减少使用者实际化妆品购买数量，减少使用者实际购买成本。
附图说明
图1为本法发明的多肽提取流程图。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。
实施例1、一种人源细胞多肽提取方法，包括以下步骤：步骤一、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用，所述氯化氢溶液浓度为1.5mol/L，所述氯化氢溶液PH值为2-3，使人员细胞内部物质能够有效释放，步骤二、初步酶解：取步骤一中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为10-12h，所述胃蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的1％-3％，有效进行蛋白质的初次水解，步骤三、二次提取环境调节：向步骤二中备用溶液中加入氢氧化钠溶液，振荡摇匀后备用，所述氢氧化钠溶液浓度为1mol/L，所述氢氧化钠PH值为7-10，提供二次酶解的有效制备环境，步骤四、二次酶解：取步骤三中备用溶液加入胰蛋白酶，振荡摇匀后置入恒温设备中进行二次酶解备用，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为3-4h，所述胰蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的3％-4％，有效制备出多肽混合物，步骤五、过滤提纯：将步骤四中备用溶液加热至沸腾，待沸腾溶液冷却至3-7℃后，使用微滤膜进行沸腾溶液的加压过滤，并将过滤后溶液置于离心机中进行离心处理，取离心后中间澄清也备用，所述加热沸腾时间为15-25min，所述加压条件为0.1-0.3MPa，所述离心机转速为3000-3500r/min，有效将纯净的多肽提取物提取出，步骤六、储存环境调节：向步骤五中间澄清液中加入浓度为2mol/L的氯化氢溶液至中间澄清液PH值为7，并经过真空低温浓缩和真空冷冻干燥后制得多肽提取物，便于进行多肽提取物的储存使用。
实施例2、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠6份、透明质酸钠6份、神经酰胺2份、天然香精3份、角鲨烷7份、肉豆蔻醇4份、红景天提取液5份、助乳化剂2份、多肽提取物1份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例3、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠8份、透明质酸钠8份、神经酰胺4份、天然香精5份、角鲨烷9份、肉豆蔻醇6份、红景天提取液7份、助乳化剂4份、多肽提取物3份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例4、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠10份、透明质酸钠10份、神经酰胺6份、天然香精7份、角鲨烷11份、肉豆蔻醇8份、红景天提取液9份、助乳化剂6份、多肽提取物5份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例5、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠12份、透明质酸钠12份、神经酰胺8份、天然香精9份、角鲨烷13份、肉豆蔻醇10份、红景天提取液11份、助乳化剂8份、多肽提取物7份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例6、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠14份、透明质酸钠14份、神经酰胺10份、天然香精11份、角鲨烷15份、肉豆蔻醇12份、红景天提取液13份、助乳化剂10份、多肽提取物9份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例7、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠16份、透明质酸钠16份、神经酰胺12份、天然香精13份、角鲨烷17份、肉豆蔻醇14份、红景天提取液15份、助乳化剂12份、多肽提取物11份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
实施例8、一种人源细胞多肽提取方法的应用，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠18份、透明质酸钠18份、神经酰胺14份、天然香精15份、角鲨烷19份、肉豆蔻醇16份、红景天提取液17份、助乳化剂14份、多肽提取物13份，通过吡咯烷酮氰酸钠和透明质酸钠能够有效对使用者皮肤起到较好的保湿效果，同时实际保湿效果不会受到外界环境的较大干扰，通过神经酰胺和红景天提取液能够有效起到对皮肤保湿作用的同时能够有效去除皮肤多余角质，有效提对皮肤的保湿效果，通过天然香精能够有效丰富化妆品的使用效果，通过角鲨烷能够有效减少外界环境对使用者皮肤的影响，对使用者皮肤起到一定程度的保护作用，同时能够有效维护肌肤与皮脂间的平衡，通过肉豆蔻醇能够有效进行化妆品的乳化，通过助乳化剂能够有效提高乳化的效果，提高化妆品的实际使用效果。
使用时，能够高效进行人源细胞中多肽的提取，进而有效提高实际多肽产量，有效减少多肽衍生物生产成本，提高实际多肽衍生物的经济收益，同时制取的化妆品能够同时具备多种护肤效果，减少使用者实际化妆品购买数量，减少使用者实际购买成本。
以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、预提取环境调节：将预备的人源细胞加入氯化氢溶液中振荡摇匀，并对混合物煎煮至糊化后冷却备用；
S2、初步酶解：取S1中备用混合物加入胃蛋白酶和纯净水，振荡摇匀后置入恒温设备中进行初次酶解备用；
S3、二次提取环境调节：向S2中备用溶液中加入氢氧化钠溶液，振荡摇匀后备用；
S4、二次酶解：取S3中备用溶液加入胰蛋白酶，振荡摇匀后置入恒温设备中进行二次酶解备用；
S5、过滤提纯：将S4中备用溶液加热至沸腾，待沸腾溶液冷却至3-7℃后，使用微滤膜进行沸腾溶液的加压过滤，并将过滤后溶液置于离心机中进行离心处理，取离心后中间澄清也备用；
S6、储存环境调节：向S5中间澄清液中加入浓度为2mol/L的氯化氢溶液至中间澄清液PH值为7，并经过真空低温浓缩和真空冷冻干燥后制得多肽提取物。
2.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S1中操作步骤，所述氯化氢溶液浓度为1.5mol/L，所述氯化氢溶液PH值为2-3。
3.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S2中操作步骤，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为10-12h，所述胃蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的1％-3％。
4.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S3中操作步骤，所述氢氧化钠溶液浓度为1mol/L，所述氢氧化钠PH值为7-10。
5.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S4中操作步骤，所述恒温设备温度为40-60℃，所述恒温设备运行时间为3-4h，所述胰蛋白酶含量为氯化氢溶液总质量的3％-4％。
6.根据权利要求1所述的一种人源细胞多肽提取方法，其特征在于，根据S5中操作步骤，所述加热沸腾时间为15-25min，所述加压条件为0.1-0.3MPa，所述离心机转速为3000-3500r/min。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的一种人源细胞多肽提取方法的应用，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠6-18份、透明质酸钠6-18份、神经酰胺2-14份、天然香精3-15份、角鲨烷7-19份、肉豆蔻醇4-16份、红景天提取液5-17份、助乳化剂2-14份、多肽提取物1-13份。
8.根据权利要求7所述的一种人源细胞多肽提取及应用方法，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠8-16份、透明质酸钠8-16份、神经酰胺4-12份、天然香精5-13份、角鲨烷9-17份、肉豆蔻醇6-14份、红景天提取液7-15份、助乳化剂4-12份、多肽提取物3-11份。
9.根据权利要求7所述的一种人源细胞多肽提取及应用方法，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠10-14份、透明质酸钠10-14份、神经酰胺6-10份、天然香精7-11份、角鲨烷11-15份、肉豆蔻醇8-12份、红景天提取液9-13份、助乳化剂6-10份、多肽提取物5-9份。
10.根据权利要求7所述的一种人源细胞多肽提取及应用方法，其特征在于，包括如下重量份的原料：吡咯烷酮羟酸钠12份、透明质酸钠12份、神经酰胺8份、天然香精9份、角鲨烷13份、肉豆蔻醇10份、红景天提取液11份、助乳化剂8份、多肽提取物7份。
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郭建维等: "药妆品胜肽的合成及作用机制研究进展", 《广东工业大学学报》 *

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