CN112390858A - 一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用 Download PDF

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CN112390858A CN202011309618.8A CN202011309618A CN112390858A CN 112390858 A CN112390858 A CN 112390858A CN 202011309618 A CN202011309618 A CN 202011309618A CN 112390858 A CN112390858 A CN 112390858A
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孙景志
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童嘉琦
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Abstract

本发明提供了一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用，属于荧光成像技术领域。本发明将TPE或其衍生物标记到多肽链上，增加了疏水AIE分子的溶解性和细胞渗透性，所得肽链修饰的四苯基乙烯衍生物水溶性、生物相容性及细胞质膜的选择透过性好，表现出典型的聚集诱导发光(AIE)行为，能够实现对细胞质区域的染色成像，可以作为荧光探针分子应用于细胞荧光成像领域中。本发明采用多肽链作为修饰基团，具有极好的生物相容性，相比于现有技术中具有生物毒性的聚合物基质或硅基质的无机以及有机纳米粒子，具有极大优势。

Description

一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及荧光成像技术领域，尤其涉及一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
荧光成像技术是一种重要的分子影像技术，具有高灵敏性、快速响应性、操作便捷性和可以实彩成像等优点。荧光成像技术的关键是调控荧光材料的性能使其适用于成像环境。现有的聚集诱导发光(AIE)分子的基本结构多数为芳环等基团构成的疏水性有机小分子，其在生物成像上的应用受到了许多条件的限制。
比如，以四苯基乙烯(TPE)为代表的AIE有机小分子固有的强疏水性使其自身难以分散在水环境中发挥作用。因而在将其应用到细胞成像等需要在水介质中进行的研究中时，对其水溶性的调控就变得十分重要。
此外，AIE有机小分子面临的另一个限制是细胞质膜的选择透过性。由磷脂双分子层构成主要骨架的细胞质膜是细胞内环境和细胞外环境的一道屏障，它保证了细胞的完整性，维持细胞内环境的相对稳定。由于细胞质膜独特的结构和物质转运体系，其不允许大多数极性和水溶性的小分子透过细胞质膜进入到细胞内。这使得很多有机小分子，比如需要在细胞内发挥作用的特定结构药物小分子等不能进入到细胞内部，致使其在生物、医学等领域的应用受到了极大的限制。
同样地，有机荧光小分子，如苝酰亚胺、1-羟基-3,6,8-三磺酸基芘等，在用于对细胞、组织的成像或是在研究细胞与组织的生物学问题中时，也会因为无法进入细胞内而难以起作用。针对这些问题的一种解决方法是通过化学反应将有机荧光小分子键合到水溶性的有机大分子基质上，同时借助细胞对有机大分子的内吞作用将有机荧光小分子运输到细胞内，实现有机荧光小分子检测或成像的效果(Doane,T.L.；Burda,C.,The Unique Roleof Nanoparticles in Nanomedicine:Imaging,Drug Delivery andTherapy.Chem.Soc.Rev.2012,41(7),2885-2911.)。但是该方法中有机大分子基质对有机荧光小分子的发光性能有不良影响，进而影响有机荧光小分子检测或成像效果。
此外，一系列有机、无机或杂化组分的纳米颗粒，如二氧化硅颗粒(Wu,X.；Wu,M.；Zhao,J.L.Xu,J.,Recent Development of Silica Nanoparticles as Delivery Vectorsfor Cancer Imaging and Therapy.Nanomethod-Nanotechnol 2014,10(2),297-312.)、金纳米颗粒、聚合物纳米颗粒等，被用于有机荧光小分子或药物等其它生物应用小分子的运输。不过这些材料在应用上仍存在缺陷。纳米颗粒的制备步骤多，工艺相对较为繁琐，制备纳米颗粒的材料通常是对生物体有害的。而且在实际应用中还需要对纳米颗粒采取进一步的修饰，以便于细胞吞入纳米颗粒，而纳米颗粒的修饰相对不易。
发明内容
本发明的目的在于提供一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物及其制备方法和应用，本发明提供的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物水溶性及细胞质膜的选择透过性好，具有较好的荧光成像效果。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物，具有式I所示结构：
Figure BDA0002789380210000021
式I；
式I中，所述R为以下基团中的任一种：
-H、-CH3、
Figure BDA0002789380210000022
Figure BDA0002789380210000023
所述Peptidyl具有式i或式ii所示结构：
Figure BDA0002789380210000031
式i，
Figure BDA0002789380210000032
式ii。
本发明提供了上述技术方案所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法，
(a)当R为-H时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
将4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
(b)当R为-CH3、
Figure BDA0002789380210000033
或
Figure BDA0002789380210000034
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
(b-1)在保护气氛、液氮冷却条件下，将溴代四苯基乙烯衍生物溶解于四氢呋喃中，得到溴代四苯基乙烯衍生物溶液，向所述溴代四苯基乙烯衍生物溶液中加入正丁基锂溶液和N,N-二甲基甲酰胺，进行取代反应，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物；
(b-2)将所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述溴代四苯基乙烯衍生物为1-(4-甲基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯、1-(4-吡啶基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯或1-(4-三苯胺基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯；
所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000041
(c)当R为
Figure BDA0002789380210000042
或
Figure BDA0002789380210000043
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
(c-1)在保护气氛中，将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠溶解于乙醇中，进行亲核加成-脱水反应，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物；
(c-2)将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述杂环原料为4-甲基吡啶、2-(3-氰基-4,5,5-三甲基呋喃-2(5H)-亚甲基)丙二腈或N-2'-羟基乙基-4-甲基咔唑；
所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000044
所述(a)、(b-2)和(c-2)中含有半胱氨酸残基的多肽的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000045
优选地，所述(a)中，4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
优选地，所述(b-1)中，溴代四苯基乙烯衍生物、正丁基锂溶液中的正丁基锂与N,N-二甲基甲酰胺的用量比为1mmol：(1.5～3)mmol：(1.5～3)mL。
优选地，所述(b-1)中，取代反应的温度为20～30℃，时间为6～24h。
优选地，所述(b-2)中，甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
优选地，所述(c-1)中，4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠的用量比为2mmol：(1.8～2.2)mmol：(4～4.5)mg。
优选地，所述(c-1)中，亲核加成-脱水反应的温度为80～120℃，时间为6～24h。
优选地，所述(c-2)中，单醛基取代的四苯基乙烯衍生物和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
本发明提供了上述技术方案所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物在细胞荧光成像领域中的应用。
本发明提供了一种具有式I所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物，本发明将TPE或其衍生物标记到多肽链上，增加了疏水AIE分子的溶解性和细胞渗透性，所得肽链修饰的四苯基乙烯衍生物水溶性、生物相容性及细胞质膜的选择透过性好，表现出典型的聚集诱导发光(AIE)行为，能够实现对细胞质区域的染色成像，可以作为荧光探针分子应用于细胞荧光成像领域中。本发明采用多肽链作为修饰基团，具有极好的生物相容性，相比于现有技术中具有生物毒性的聚合物基质或硅基质的无机以及有机纳米粒子，具有极大优势。
附图说明
图1为测试例1中不同浓度的化合物I-1-i在磷酸盐缓冲液中的荧光光谱图和荧光强度变化图；
图2为测试例2中不同浓度的化合物I-5-ii在磷酸盐缓冲液中的荧光光谱图和荧光强度变化图；
图3为应用例1中不同浓度的化合物I-1-i培养海拉细胞2h后的共聚焦荧光图像；
图4为应用例1中不同浓度的化合物I-5-ii培养海拉细胞2h后的共聚焦荧光图像；
图5为应用例1中不同浓度的化合物I-1-ii培养海拉细胞2h后的共聚焦荧光图像。
具体实施方式
本发明提供了一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物，具有式I所示结构：
Figure BDA0002789380210000061
式I；
式I中，所述R为以下基团中的任一种：
-H、-CH3、
Figure BDA0002789380210000062
Figure BDA0002789380210000063
所述Peptidyl具有式i或式ii所示结构：
Figure BDA0002789380210000064
式i，
Figure BDA0002789380210000071
式ii。
在本发明中，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物具体可以为以下化合物中的任一种：
Figure BDA0002789380210000072
式I-1-i；
Figure BDA0002789380210000073
式I-4-i；
Figure BDA0002789380210000074
式I-7-i；
Figure BDA0002789380210000075
式I-1-ii；
Figure BDA0002789380210000076
式I-5-ii。本发明提供了上述技术方案所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法，本发明优选根据肽链修饰的四苯基乙烯衍生物中R的种类采用不同的制备方法，下面详细说明。
在本发明中，若无特殊说明，所用原料为本领域技术人员熟知的市售商品；其中，含有半胱氨酸残基的多肽从阿拉丁试剂公司购置。
在本发明中，当R为-H时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
将4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述含有半胱氨酸残基的多肽的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000081
反应路线如下所示：
Figure BDA0002789380210000082
在本发明中，所述4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比优选为1：(1～1.5)，更优选为1：(1～1.2)。在本发明中，所述N,N-二甲基甲酰胺(DMF)作为溶剂，所述N,N-二甲基甲酰胺和含有半胱氨酸残基的多肽的用量比优选为2mL：(0.033～0.038)mmol。本发明对4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合的方式没有特殊限定，将4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛和含有半胱氨酸残基的多肽溶解于N,N-二甲基甲酰胺中即可。
在本发明中，所述亲核加成-环化反应的温度优选为20～30℃，具体可以在室温条件下进行所述亲核加成-环化反应；在本发明的实施例中，具体是在25℃条件下进行所述亲核加成-环化反应。在本发明中，所述亲核加成-环化反应的时间优选为15～30h，更优选为20～24h。
所述亲核加成-环化反应结束后，本发明优选将所得产物体系与无水乙醚混合，之后静置析出沉淀，经过滤收集滤饼，采用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物。
在本发明中，当R为-CH3、
Figure BDA0002789380210000091
或
Figure BDA0002789380210000092
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
在保护气氛、液氮冷却条件下，将溴代四苯基乙烯衍生物溶解于四氢呋喃中，得到溴代四苯基乙烯衍生物溶液，向所述溴代四苯基乙烯衍生物溶液中加入正丁基锂溶液和N,N-二甲基甲酰胺，进行取代反应，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物；
将所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述溴代四苯基乙烯衍生物为1-(4-甲基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯、1-(4-吡啶基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯或1-(4-三苯胺基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯；
所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000093
反应路线如下所示：
Figure BDA0002789380210000094
本发明在保护气氛、液氮冷却条件下，将溴代四苯基乙烯衍生物溶解于四氢呋喃中，得到溴代四苯基乙烯衍生物溶液，向所述溴代四苯基乙烯衍生物溶液中加入正丁基锂溶液和N,N-二甲基甲酰胺，进行取代反应，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物。本发明对提供所述保护气氛的保护气体种类没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的保护气体即可，具体如氮气或氩气。在本发明中，所述液氮冷却条件优选是将体系温度控制在-90～-70℃，更优选为-80～-78℃。
在本发明中，所述四氢呋喃作为溶剂，所述四氢呋喃与溴代四苯基乙烯衍生物的用量比优选为(6～8)mL：1mmol，更优选为7mL：1mmol。在本发明中，所述正丁基锂溶液优选为正丁基锂(n-BuLi)的正己烷溶液，所述正丁基锂溶液的浓度优选为1.5～3mol/L，更优选为2～2.5mol/L。在本发明中，所述N,N-二甲基甲酰胺作为溶剂，所述溴代四苯基乙烯衍生物、正丁基锂与N,N-二甲基甲酰胺的用量比优选为1mmol：(1.5～3)mmol：(1.5～3)mL，更优选为1mmol：2.4mmol：2.4mL。
本发明优选向所述溴代四苯基乙烯衍生物溶液中滴加正丁基锂溶液，滴加完毕后将所得体系混合均匀，之后再向所得体系中滴加N,N-二甲基甲酰胺。在本发明中，以9～10mL正丁基锂溶液计，滴加时间优选控制在1.5h；以2.4mLN,N-二甲基甲酰胺计，滴加时间优选控制在2min内。
在本发明的实施例中，具体是将溴代四苯基乙烯衍生物置于双口烧瓶中，将双口烧瓶内气氛置换为保护气，之后用液氮将反应体系冷却至-90～-70℃(进一步优选为-80～-78℃)，用针头向双口烧瓶中注入四氢呋喃，并在-90～-70℃条件下滴加正丁基锂溶液，滴加完毕后，继续在-90～-70℃条件下混合0.5～3h(进一步优选为0.5～2h)，以保证各组分充分混合均匀；之后向所得体系中滴加N,N-二甲基甲酰胺，进行取代反应，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物。
在本发明中，所述取代反应的温度优选为20～30℃，具体可以在室温条件下进行所述取代反应；所述取代反应的时间优选为6～24h，更优选为12～15h。
取代反应后，本发明优选向所得产物体系中加饱和NH4Cl溶液淬灭反应，之后用有机萃取剂萃取，收集有机相，用无水Na2SO4干燥所述有机相，旋蒸除去溶剂后，残余物通过碱性氧化铝色谱柱进行提纯，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物。在本发明中，所述有机萃取剂优选包括二氯甲烷和/或三氯甲烷，更优选为二氯甲烷。在本发明中，所述提纯采用的洗脱液优选为石油醚和二氯甲烷的混合物，所述洗脱液中石油醚和二氯甲烷的体积比优选为1：1。
得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物后，本发明将所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物。在本发明中，所述亲核加成-环化反应的反应条件以及后处理方式优选与上述技术方案中R为-H时的反应条件以及后处理方式一致，在此不再赘述。
在本发明中，当R为
Figure BDA0002789380210000111
或
Figure BDA0002789380210000112
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
在保护气氛中，将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠溶解于乙醇中，进行亲核加成-脱水反应，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物；
将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述杂环原料为4-甲基吡啶、2-(3-氰基-4,5,5-三甲基呋喃-2(5H)-亚甲基)丙二腈或N-2'-羟基乙基-4-甲基咔唑；
所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure BDA0002789380210000113
反应路线如下所示：
Figure BDA0002789380210000121
本发明在保护气氛中，将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠溶解于乙醇中，进行亲核加成-脱水反应，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物。本发明对提供所述保护气氛的保护气体种类没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的保护气体即可，具体如氮气或氩气。在本发明中，所述4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠的用量比优选为2mmol：(1.8～2.2)mmol：(4～4.5)mg；更优选为2mmol：2mmol：4.2mg。在本发明中，所述氢氧化钠的作用是提供碱性环境。在本发明中，所述乙醇作为溶剂，乙醇与4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛的用量比优选为(23～27)mL：2mmol，更优选为25mL：2mmol。
在本发明的实施例中，具体是将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠置于双口烧瓶中，将双口烧瓶内气氛置换为保护气，之后向所述双口烧瓶中加入乙醇，进行亲核加成-脱水反应。在本发明中，所述亲核加成-脱水反应优选在体系回流条件下进行，所述亲核加成-脱水反应的温度优选为80～120℃，进一步优选为82～100℃；所述亲核加成-脱水反应的时间优选为6～24h，更优选为20～24h。
所述亲核加成-脱水反应结束后，本发明优选去除所得产物体系中的溶剂，将所得粗产物进行硅胶柱层析提纯，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物。本发明对去除产物体系中溶剂的方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的方法即可，具体如旋转蒸发。在本发明中，所述提纯采用的淋洗液优选为石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，所述淋洗液中石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比优选为200：100：1。
得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物后，本发明将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物。在本发明中，所述亲核加成-环化反应的反应条件以及后处理方式优选与上述技术方案中R为-H时的反应条件以及后处理方式一致，在此不再赘述。
本发明提供的方法操作简单，通过高效的醛基与氨基、巯基的成环反应，将TPE或其衍生物标记到多肽链上，增加了疏水AIE分子的溶解性和细胞渗透性，所得肽链修饰的四苯基乙烯衍生物表现出典型的聚集诱导发光(AIE)行为，可以作为荧光探针分子应用于细胞荧光成像领域中。
本发明提供了上述技术方案所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物在细胞荧光成像领域中的应用。本发明提供的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物可以作为荧光探针，为得到覆盖可见光区的实彩荧光图像提供了可能，如具有式I-1-i所示结构的化合物，其细胞成像呈现蓝色，具有式I-5-ii所示结构的化合物，其细胞成像呈现红色。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
制备具有式I-1-i所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(记为化合物I-1-i)，包括以下步骤：
将含有半胱氨酸残基的多肽(Peptidyl具有式i所示结构，0.033mmol)和4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛(0.04mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(DFM，2mL)中，将所得混合物在室温(25℃)条件下搅拌反应24h；反应结束后，将所得产物体系缓慢加入到无水乙醚(200mL)中，并静置12h析出沉淀，之后过滤收集滤饼，并用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到目标产物，为黄色固体。
对所述目标产物进行表征，结果如下：
MALDI-TOF:[M+H]+m/z 1356.7291(实测值)，1356.7285(计算值)。
由以上分子量数据可知，本实施例所得目标产物确实为具有式I-1-i所示结构的化合物。
实施例2
制备具有式I-1-ii所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(记为化合物I-1-ii)，包括以下步骤：
将含有半胱氨酸残基的多肽(Peptidyl具有式ii所示结构，0.036mmol)和4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛(0.04mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，将所得混合物在室温条件下搅拌反应24h；反应结束后，将所得产物体系缓慢加入到无水乙醚(150mL)中，并静置12h析出沉淀，之后过滤收集滤饼，并用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到目标产物，为黄色固体。
对所述目标产物进行表征，结果如下：
MALDI-TOF:[M+H]+m/z 1761.6886(实测值)，1761.6869(计算值)。
由以上分子量数据可知，本实施例所得目标产物确实为具有式I-1-ii所示结构的化合物。
实施例3
制备具有式I-4-i所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(记为化合物I-4-i)，包括以下步骤：
将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛(0.777g，2.0mmol)、甲基吡啶(0.093g，2.0mmol)和氢氧化钠(4.2mg)加入到双口烧瓶中，将双口烧瓶内气氛置换为氮气，之后向所述双口烧瓶中加入乙醇(25mL)，将所得混合物在回流(温度为82℃)条件下反应24h；反应结束后，将所得产物进行旋转蒸发以去除溶剂，将所得粗产物进行硅胶柱层析提纯，所用淋洗液为石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，所述淋洗液中石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为200：100：1，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物，为红色固体产物；
将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物(0.08mmol)和含有半胱氨酸残基的多肽(Peptidyl具有式i所示结构，0.076mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，将所得混合物在室温条件下搅拌反应24h；反应结束后，将所得产物体系缓慢加入到无水乙醚(200mL)中，并静置12h析出沉淀，之后过滤收集滤饼，并用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到目标产物，为红色固体。
对所述目标产物进行表征，结果如下：
MALDI-TOF:[M+H]+m/z 1458.7723(实测值)，1458.7635(计算值)。
由以上分子量数据可知，本实施例所得目标产物确实为具有式I-4-i所示结构的化合物。
实施例4
制备具有式I-5-ii所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(记为化合物I-5-ii)，包括以下步骤：
将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛(0.777g，2.0mmol)、三氰基呋喃(0.398g，2.0mmol)和氢氧化钠(4.2mg)加入到双口烧瓶中，将双口烧瓶内气氛置换为氮气，之后向所述双口烧瓶中加入乙醇(25mL)，将所得混合物在回流(温度为82℃)条件下反应24h；反应结束后，将所得产物进行旋转蒸发以去除溶剂，将所得粗产物进行硅胶柱层析提纯，所用淋洗液为石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，所述淋洗液中石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为200：100：1，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物，为红色固体产物；
将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物(0.08mmol)和含有半胱氨酸残基的多肽(Peptidyl具有式ii所示结构，0.076mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，将所得混合物在室温条件下搅拌反应24h；反应结束后，将所得产物体系缓慢加入到无水乙醚(200mL)中，并静置12h析出沉淀，之后过滤收集滤饼，并用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到目标产物，为红色固体。
对所述目标产物进行表征，结果如下：
MALDI-TOF:[M+H]+m/z 1971.7358(实测值)，1971.7491(计算值)。
由以上分子量数据可知，本实施例所得目标产物确实为具有式I-5-ii所示结构的化合物。
实施例5
制备具有式I-7-i所示结构的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(记为化合物I-7-i)，包括以下步骤：
将1-(4-三苯胺基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯(10mmol)置于双口烧瓶中，将双口烧瓶内气氛置换为氮气，之后用液氮将反应体系冷却至-78℃，用针头向双口烧瓶中注入无水四氢呋喃(70mL)，并在-78℃条件下滴加浓度为2.5M的n-BuLi溶液(溶剂为正己烷，n-BuLi溶液的体积为9.6mL，n-BuLi的物质的量为24mmol)，总共滴加1.5h，之后将所得混合物在-78℃条件下搅拌混合0.5h；然后在2min内将无水N,N-二甲基甲酰胺(2.4mL)滴加到反应体系中，将体系温度升至室温，搅拌反应12h；之后向所得产物体系中加入30mL饱和NH4Cl溶液淬灭反应，用二氯甲烷(DCM)萃取，收集有机相，用无水Na2SO4干燥所述有机相，旋蒸除去溶剂后，所得残余物通过碱性氧化铝色谱柱进行提纯，所用洗脱液为石油醚和二氯甲烷的混合物，所述洗脱液中石油醚和二氯甲烷的体积比为1：1，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物，为黄色固体；
将所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物(0.08mmol)和含有半胱氨酸残基的多肽(Peptidyl具有式i所示结构，0.076mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，将所得混合物在室温条件下搅拌反应20h；反应结束后，将所得产物体系缓慢加入到无水乙醚(200mL)中，并静置12h析出沉淀，之后过滤收集滤饼，并用无水乙醚洗涤所述滤饼，干燥后得到目标产物，为黄色固体。
对所述目标产物进行表征，结果如下：
MALDI-TOF:[M+H]+m/z 1598.7235(实测值)，1598.8261(计算值)。
由以上分子量数据可知，本实施例所得目标产物确实为具有式I-7-i所示结构的化合物。
测试例1
将实施例1制备的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(化合物I-1-i)溶解于磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)中，配制成衍生物浓度为0.2～10μM的溶液；迅速将各溶液转移到荧光光谱仪的样品架上进行荧光光谱测试，依据溶液的紫外可见吸收光谱的最低能量的吸收峰的波长选取激发波长。测试仪器为PerkinElmer LS 55型荧光光谱仪，测得的荧光光谱图归纳在图1中，图1中A为荧光光谱图，B为荧光强度变化图。由图1可知，当衍生物的浓度小于1μM时，衍生物在溶液中发光较弱且随浓度增加没有明显的增强；而当衍生物的浓度达到4μM及以上时，衍生物的荧光强度急剧增加。由此可知，衍生物在低浓度范围时主要以单分子的形式均匀分散在水介质中；而在浓度达到2μM左右时，分子开始发生聚集，形成低聚体或是更大的聚集体，使其中四苯基乙烯(TPE)基团的分子内运动受到抑制而荧光增强，表明该衍生物具有AIE特性。
按照上述方法对实施例2制备的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(化合物I-1-ii)进行测试，结果显示，在浓度范围为0.2～10μM时，其荧光强度随浓度的变化趋势与化合物I-1-i类似。在低浓度条件下，两种分子的荧光强度较弱；而随着浓度增加到一定水平，分子的荧光强度出现明显的增强。化合物I-1-ii的荧光发生显著增强的转折点对应的浓度为2～4μM，浓度低于2μM时，分子在溶液中没有形成较大的聚集体；而超过4μM以后，分子之间发生聚集，形成大的组装体，说明该衍生物具有AIE特性。
测试例2
将实施例4制备的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物(化合物I-5-ii)溶解于磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)中，配制成衍生物浓度为0.2～10μM的溶液；迅速将各溶液转移到荧光光谱仪的样品架上进行荧光光谱测试，依据溶液的紫外可见吸收光谱的最低能量的吸收峰的波长选取激发波长。测试仪器为PerkinElmer LS 55型荧光光谱仪，测得的荧光光谱图归纳在图2中，图2中A为荧光光谱图，B为荧光强度变化图。由图2可知，在测试选择的浓度范围(0.2～10μM)内，荧光强度和衍生物浓度之间具有较好的线性关系，没有观察到荧光强度急剧增强的现象。
应用例1
将实施例1、实施例2和实施例4制备的肽链修饰的四苯基乙烯衍生物作为荧光探针(分别为化合物I-1-i、化合物I-1-ii和化合物I-5-ii)，将三种不同浓度的探针与海拉细胞一起培养，考察其细胞荧光成像效果，具体步骤如下：
将探针溶解于磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)中，配制成浓度分别为1mM、0.1mM和0.01mM的探针溶液，加入到海拉细胞培养基中，使探针的最终浓度分别为100μM、10μM和1μM，然后在探针作用下将海拉细胞于37℃培育2h；培养结束后，取出培养基并用磷酸盐缓冲液冲洗2次，然后用共聚焦显微镜观察细胞图像。
图3为海拉细胞用化合物I-1-i培养后在共聚焦显微镜下观察到的细胞图像，图3中从左到右各图像对应的探针浓度依次为100μM(A与B)、10μM(C与D)和1μM(E与F)，其中，A、C和E为海拉细胞的荧光图样，其激发波长为405nm，检测的发射光范围为450～550nm波段，B、D和F为对应的明场下的细胞图样。由图3可知，当探针的浓度达到100μM时，其能够通过细胞质膜进入到细胞内。探针分散在细胞质中，发出明亮的蓝色荧光，显示细胞质的轮廓。而当探针在培养基中的浓度为10μM或更低时，并没有在细胞内检测到探针荧光发射。这说明在一定浓度条件下，化合物I-1-i能够实现对细胞质区域的染色成像。同时根据图1可知，当探针浓度为100μM时，其已聚集形成了一定尺寸的组装体。这表明以粒子形式存在的探针具有较好的细胞渗透性能和荧光成像效果。
图4为海拉细胞用化合物I-5-ii培养后在共聚焦显微镜下观察到的细胞图像，其中，A为探针浓度为100μM条件下海拉细胞的荧光图样，其激发波长为405nm，检测的发射光范围为600～700nm波段，B)为对应的明场下的细胞图样。由图4可知，化合物I-5-ii在较高浓度下形成的粒子能够有效的被细胞吞噬，并分散在细胞质中；而化合物I-5-ii结构中的TPE发光团通过TCF(2-(3-氰基-4,5,5-三甲基呋喃-2(5H)-亚甲基)丙二腈)的修饰后具有较其它探针来说更长的吸收波长和发射波长(发射光范围为600～700nm)，这可以有效减少细胞自身背景荧光的干扰，得到高质量的荧光图像。
对于化合物I-1-ii，当用不同浓度化合物I-1-ii培养海拉细胞后，在各组海拉细胞中均没有检测的荧光信号，不过当化合物I-1-ii的浓度在培养基中达到100μM时，可以在细胞边缘检测到微弱的荧光。图5为海拉细胞用化合物I-1-ii培养后在共聚焦显微镜下观察到的细胞图像，其中，A为探针浓度为100μM条件下海拉细胞的荧光图样，其激发波长为405nm，检测的发射光范围为450～550nm波段，B为对应的明场下的细胞图样，C为A和B的重叠。由图5可知，化合物I-1-ii在高浓度下形成的粒子吸附在了细胞质膜上。
由以上应用例可知，本发明将TPE或其衍生物标记到多肽链上，增加了疏水AIE分子的溶解性和细胞渗透性，所得肽链修饰的四苯基乙烯衍生物水溶性及细胞质膜的选择透过性好，表现出典型的聚集诱导发光(AIE)行为，可以作为荧光探针应用于细胞荧光成像领域中。此外，虽然多肽链使得探针具有一定的水溶性，但是含芳环结构的TPE单元自身的疏水性质，使得一定浓度的探针在水环境中容易组装形成极小的粒子，组装得到的不同形态组装体其荧光性质和进入细胞的能力有所不同，影响最终细胞成像的效果。
如应用例1的结果显示，当化合物的浓度达到100μM及以上时，化合物I-1-i以及化合物式I-5-ii能够通过细胞质膜进入到细胞内，并分散在细胞质中，分别发出极强的蓝色荧光和红色荧光，显示细胞质的轮廓，实现对细胞质区域的染色成像。尤其是化合物I-5-ii，TCF修饰荧光分子时，强吸电子性的马来二腈基与TPE分子构成推-拉电子结构，表现出分子内电荷转移现象，可以使整个分子发光红移，而红色荧光的成像能更好的减少细胞自体荧光背景对分子发光信号的干扰。化合物I-1-ii在浓度为100μM的条件下，在细胞边缘检测到微弱的荧光，这说明该化合物在高浓度下形成的粒子吸附在细胞膜上，细胞对粒子的内吞效率低于化合物I-1-i以及化合物式I-5-ii。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种肽链修饰的四苯基乙烯衍生物，具有式I所示结构：
Figure FDA0002789380200000011
式I中，所述R为以下基团中的任一种：
-H、-CH3、
Figure FDA0002789380200000012
Figure FDA0002789380200000013
所述Peptidyl具有式i或式ii所示结构：
Figure FDA0002789380200000014
2.权利要求1所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法，
(a)当R为-H时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
将4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
(b)当R为-CH3、
Figure FDA0002789380200000021
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
(b-1)在保护气氛、液氮冷却条件下，将溴代四苯基乙烯衍生物溶解于四氢呋喃中，得到溴代四苯基乙烯衍生物溶液，向所述溴代四苯基乙烯衍生物溶液中加入正丁基锂溶液和N,N-二甲基甲酰胺，进行取代反应，得到甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物；
(b-2)将所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述溴代四苯基乙烯衍生物为1-(4-甲基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯、1-(4-吡啶基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯或1-(4-三苯胺基苯基)-2-(4-溴苯基)-1,2-二苯基乙烯；
所述甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure FDA0002789380200000022
(c)当R为
Figure FDA0002789380200000023
时，所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物的制备方法包括以下步骤：
(c-1)在保护气氛中，将4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠溶解于乙醇中，进行亲核加成-脱水反应，得到单醛基取代的四苯基乙烯衍生物；
(c-2)将所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物、含有半胱氨酸残基的多肽和N,N-二甲基甲酰胺混合，进行亲核加成-环化反应，得到肽链修饰的四苯基乙烯衍生物；
其中，所述杂环原料为4-甲基吡啶、2-(3-氰基-4,5,5-三甲基呋喃-2(5H)-亚甲基)丙二腈或N-2'-羟基乙基-4-甲基咔唑；
所述单醛基取代的四苯基乙烯衍生物的结构式如下：
Figure FDA0002789380200000031
所述(a)、(b-2)和(c-2)中含有半胱氨酸残基的多肽的结构式如下：
Figure FDA0002789380200000032
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述(a)中，4-(1,2,2-三苯基乙烯基)苯甲醛和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述(b-1)中，溴代四苯基乙烯衍生物、正丁基锂溶液中的正丁基锂与N,N-二甲基甲酰胺的用量比为1mmol：(1.5～3)mmol：(1.5～3)mL。
5.根据权利要求2或4所述的制备方法，其特征在于，所述(b-1)中，取代反应的温度为20～30℃，时间为6～24h。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述(b-2)中，甲酰基取代的四苯基乙烯衍生物和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述(c-1)中，4,4'-(1,2-二苯乙烯-1,2-二基)二苯甲醛、杂环原料和氢氧化钠的用量比为2mmol：(1.8～2.2)mmol：(4～4.5)mg。
8.根据权利要求2或7所述的制备方法，其特征在于，所述(c-1)中，亲核加成-脱水反应的温度为80～120℃，时间为6～24h。
9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述(c-2)中，单醛基取代的四苯基乙烯衍生物和含有半胱氨酸残基的多肽的摩尔比为1：(1～1.5)；亲核加成-环化反应的温度为20～30℃，时间为15～30h。
10.权利要求1所述肽链修饰的四苯基乙烯衍生物在细胞荧光成像领域中的应用。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114163502A (zh) * 2021-12-17 2022-03-11 重庆医科大学国际体外诊断研究院 用于3cl蛋白酶检测及抑制剂筛选的锌离子诱导aiee荧光探针、制备方法及其应用
CN115058882A (zh) * 2022-07-18 2022-09-16 南通大学 一种超疏水抗紫外棉织物及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
童嘉琦: "用于蛋白质研究的新型四苯基乙烯衍生物的设计与合成", 《中国博士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114163502A (zh) * 2021-12-17 2022-03-11 重庆医科大学国际体外诊断研究院 用于3cl蛋白酶检测及抑制剂筛选的锌离子诱导aiee荧光探针、制备方法及其应用
CN115058882A (zh) * 2022-07-18 2022-09-16 南通大学 一种超疏水抗紫外棉织物及其制备方法
CN115058882B (zh) * 2022-07-18 2024-02-27 南通大学 一种超疏水抗紫外棉织物及其制备方法

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