CN112385759A - 紫薯蓝莓复合饮料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及复合饮料技术领域,特别是关于一种紫薯蓝莓复合饮料的制备方法,首先挑选成熟度7成以上的蓝莓,洗净消毒杀菌后打浆制得蓝莓果浆;破碎后的紫薯、黑米和水蒸煮熟化,加入复合酶糖化处理;蓝莓果浆与混合溶液混合,然后再加入凝结抑制剂得发酵原液,接种复合乳酸菌活化菌液并发酵得发酵液;β‑环糊精澄清处理后超滤,加入柠檬酸、苹果酸、甘草醇多糖,混合均匀,冻融法灭菌灌装即得。紫薯蓝莓复合饮料中富含花青素、维生素等有效成分,发酵产生乳酸进一步丰富了口感,有效抑制蛋白析出、反复冻融可能发生的凝结和/或凝聚和/或沉淀现象,显著提升复合饮料品相与贮藏周期,饮料还具有一定的碳酸增强效果。
Description
技术领域
本发明涉及复合饮料技术领域,特别是关于一种紫薯蓝莓复合饮料的制备方法。
背景技术
紫薯(Ipomoea batatas(L.)Lam),属旋花科番薯属草本植物,薯肉呈紫色至深紫色,故又称黑薯、紫心甘薯或紫肉甘薯。紫薯是甘薯的一个特殊品种类型,兼有粮食物、经济作物和药用作物的特点,除了具有普通甘薯的成分和功能外,还具有多种生理作用,是食品、医药、化工、轻工、纺织等工业的重要原料。紫薯含Se、Zn、Fe、P等10多种矿物元素,含有18种氨基酸,富含维生素C、B、 A等8种维生素,特别是含有大量药用价值的花青素。
蓝莓,又名笃斯、黑豆树、都柿、甸果、地果、龙果、蛤塘果、讷日苏、吉厄特、吾格特等,为杜鹃花科越橘属多年生低灌木。蓝莓果实中含有丰富的营养成分,尤其富含花青素,它不仅具有良好的营养保健作用,还具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人体免疫等功能。蓝莓栽培最早的国家是美国,但至今也不到百年的栽培史。因为其具有较高的保健价值所以风靡世界,是世界粮食及农业组织推荐的五大健康水果之一。
紫薯和蓝莓中富含的花青素对多种疾病具有预防和治疗作用,目前科学界发现花青素是防治疾病、维护人类健康最直接、最有效、最安全的自由基清除剂。现有技术如授权公告号为CN101669561B的中国发明专利,公开了以紫薯叶和蓝莓叶为主要原料的茶饮料及其制备方法,该饮料由紫薯叶10~50、蓝莓叶10~ 50重量份,以及紫薯花、紫薯茎、蓝莓花和纯天然原料北冬虫夏草子实体等原料,经过杀青、揉捻、烘干等工艺步骤精制而成。该饮料营养十分丰富,口感舒适,易被人体吸收,饮用方便,然而该饮料风味不理想,不易于被广大消费者接受。
另有现有技术如授权公告号为CN104856153B的中国发明专利,公开了一种蓝莓紫薯黑米复合乳酸饮料及其制备方法,该饮料是以蓝莓、紫薯、黑米为原料,将紫薯和黑米糖化处理后与蓝莓浆混合,以保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌的混合菌进行乳酸发酵,发酵液澄清、超滤后添加白砂糖、蜂蜜、柠檬酸、苹果酸,即得蓝莓紫薯黑米复合乳酸饮料。该发明通过将蓝莓与紫薯、黑米复配,利用蓝莓中的有机酸弥补了紫薯、黑米单一成分提取花青素不稳定的问题,并且通过发酵所产乳酸,对花青素进一步起到稳定和维持的作用,所得复合乳酸饮料中乳酸产量达7.0g/L以上、花青素含量达到60mg/L以上,饮料酸甜适口,具有乳酸菌发酵特有的香味及蓝莓的香气、爽口滑润,是一种健康、营养的新型复合发酵乳酸饮料。然而其原材料黑米蛋白含量较高,在酸性条件下发酵时会发生蛋白成分凝结的问题,虽然后续超滤步骤可降低固含量,然而亦会损失饮料的营养含量;此外,乳酸菌发酵饮料长期贮存条件下依然有沉淀析出,严重影响其贮存稳定性,累及风味及口感。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案,其并不必然属于本专利申请的现有技术,在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下,上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
发明内容
(一)要解决的技术问题
本发明要解决的技术问题至少包括:优化紫薯蓝莓复合饮料的风味及口感,保持复合饮料的营养物质的含量,抑制复合饮料出现凝结的发生。
(二)技术方案
为解决上述技术问题或未实现上述技术目的,本发明提供如下技术方案。
方案一,提供异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖作为凝结抑制剂在乳酸菌发酵蛋白复合饮料中的应用。
一些优选实施方案中,异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖作为凝结抑制剂具有 1:5~50、优选1:10~30、更优选1:20~30、最优选1:24的重量比。
一些优选实施方案中,硒化玉米须多糖具体是硒与不低于85%乙醇沉淀的玉米须多糖复合得到。
一些优选实施方案中,硒化玉米须多糖具体经由下述步骤制备得到:
1)玉米须粉末煮沸至少1h,高速离心分离并取上清液,经截留分子量为10kDa 超滤膜超滤,收集超滤液浓缩后烘干得粗多糖;
2)步骤1)粗多糖研磨后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到50%,低温静置沉淀至少24h,超高速离心取上清液,继续加入无水乙醇至醇浓度不低于85%,低温静置沉淀至少24h,高速离心取沉淀即得玉米须多糖;
3)以0.1~0.3%的稀硝酸溶液溶解步骤2)所得玉米须多糖至浓度不高于8g/L,室温搅拌至少1h,加入玉米须多糖重量1~1.2倍的亚硒酸钠和1.4~1.5倍的氯化钙,升温至55~60℃搅拌反应至少6h;
4)步骤3)混合物冷却至室温后滴加碱液调节溶液呈弱碱性,加入氯化钙物质的量1.1~1.2倍的硫酸钠,高速离心,取上清液以流水透析至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析至少12h,浓缩、冻干即得。
另一些优选实施方案中,
步骤1)的高速离心转速是3000~6000r/min,高速离心至少15min;
步骤1)的滤渣可用以饲料、肥料等;
步骤1)的烘干意指在45~60℃温度下烘干至恒重;
步骤2)的研磨至过100目筛;
步骤2)的低温静置的温度是1~2℃;
步骤2)的超高速离心转速是6000~18000r/min,高速离心至少5min;
步骤2)中,醇浓度达到50%时超高速离心所得沉淀是玉米须多糖,可回收利用;
步骤2)的高速离心转速是3000~6000r/min,高速离心至少15min;
步骤2)中,醇浓度不低于85%时高速离心所得溶液是玉米须多糖溶液,可回收利用;
步骤3)的室温搅拌的速率是240~600r/min;
步骤3)的升温速率是3~5℃/min;
步骤4)的碱液是饱和碳酸钠溶液;
步骤4)的高速离心转速是3000~6000r/min,高速离心至少45min。
首先将玉米须煮沸后滤去低分子物获得粗多糖,粗多糖先分离出醇浓度50%的多糖组分,然后再获得醇浓度不低于85%的目标玉米须多糖组分,最后采用硝酸-亚硒酸钠法制备得到硒化玉米须多糖,经原子荧光光谱法测定硒化玉米须多糖中的硒含量不低于0.2mg/g,将其作为凝结抑制剂成分添加至乳酸菌发酵蛋白复合饮料中,不仅可显著提升饮料的硒含量,而且还可有效抑制复合饮料可能的凝结和/或凝聚和/或沉淀的发生,显著提升饮料品相与贮藏周期,降低因固体析出而导致的诸如风味、口感下降及苦涩味增强等品质波动。
方案二,提供一种紫薯蓝莓复合饮料的制备方法,包括:
S1:挑选成熟度7成以上的蓝莓,水洗干净过后以乙醇对蓝莓表面进行消毒杀菌,打浆并灭菌制得蓝莓果浆;
S2:破碎后的紫薯、黑米和水按照质量比1:1.0~1.5:12~15混合均匀,蒸煮熟化后加入固含量3~5%的复合酶,糖化处理至混合溶液甜度至少15;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:8~12混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.01~0.5%的凝结抑制剂得发酵原液,接种发酵原液体积5~8%的复合乳酸菌活化菌液,35~40℃发酵至少48h得发酵液;
S4:发酵液用β-环糊精澄清处理后超滤,滤液中加入其质量0.01~0.02%柠檬酸、0.01~0.02%苹果酸,混合均匀灭菌灌装即得。
一些优选实施方案中,
步骤S1的灭菌可以选用紫外线灭菌或冻融灭菌;
步骤S2的复合酶的中温淀粉酶、纤维素酶与果胶酶按照重量比1:1~1.5:1~ 1.5复配的混合酶;
步骤S2的糖化处理的温度是45~60℃;
步骤S3的凝结抑制剂是方案一所述凝结抑制剂,具体是重量比1:5~50、优选1:10~30、更优选1:20~30、最优选1:24的异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖。
步骤S3的复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1~2:1~2在30~35℃扩大培养至菌悬液浓度至少 1×107cells/mL;
步骤S4的β-环糊精澄清处理具体是按照0.1~0.2g/L的量将β-环糊精投入至发酵液,静置至少5h后超滤至滤液透光率不低于99.5%;
步骤S4的灭菌采用冻融法灭菌;
步骤S4的冻融法灭菌具体是复合饮料在-20℃条件下冷冻处理为冻结状态,然后微波解冻并升温至50℃,重复交替冻融3~5次。
本发明首先将蓝莓未加水进行打浆,然后将其与糖化后的紫薯、黑米混合水溶液在凝结抑制剂存在的情况下进行复合乳酸菌发酵,最后经澄清处理、超滤后制备得到紫薯蓝莓复合饮料,所述饮料中富含花青素、硒等有效成分,不仅能有效减少和降低辐射危害,还具有强化人体免疫力、抗衰老、抗病毒、改善肠道菌群等保健功效,混合乳酸菌发酵有利于改善谷类或薯类单独发酵时的蒸煮味,发酵产生乳酸进一步丰富了口感;此外,添加由异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖组成的凝结抑制剂成分可有效抑制紫薯蓝莓复合饮料可能发生的凝结和/或凝聚和/或沉淀现象,显著提升复合饮料品相与贮藏周期,降低因固体析出而导致的诸如风味、口感下降及苦涩味增强等品质波动,还能为复合饮料提供一定量的糖份,在不影响饮料口感的基础上节省了另加糖份的成本,硒化玉米须多糖也可提高复合饮料的硒含量,高含量的硒亦有助于提升饮料的抗辐射作用及增强人体免疫力。
一些优选实施方案中,步骤S4的滤液中还添加有其质量0.05~0.06%的甘草醇多糖。
另一些优选实施方案中,步骤S4的甘草醇多糖经由下述方法制备获得:甘草烘干后粉碎,过80目筛,加入足量蒸馏水后升温至70~90℃浸提1~2h, 6000~9000r/min离心30min后取滤液浓缩,加入无水乙醇至乙醇含量不低于95%,在1~2℃温度静置下醇沉至少24h,6000~9000r/min离心30min后取沉淀冻干得粗多糖,然后经Sevag-酶法脱蛋白及DEAE-52纤维素柱分级精制即得。
另一些优选实施方案中,Sevag-酶法脱蛋白的方法具体是:粗多糖溶解于 15~20倍的蒸馏水中,加入粗多糖1~2%的木瓜蛋白酶,在pH6.0、50℃条件下酶解至少2h灭酶,加入酶解液体积1/3~1/4的氯仿-正丁醇混合溶液(氯仿:正丁醇=4~5:1),600r/min搅拌至少2h,12000r/min超高速离心至少30min取上清液。
另一些优选实施方案中,DEAE-52纤维素柱分级精制的方法具体是:Sevag- 酶法脱蛋白后的上清液置于1kDa透析袋中透析72h,浓缩至1/10体积后上样 DEAE-52纤维素柱,用蒸馏水、0.1~1.0mol/L氯化钠的Tris-HCl溶液依次洗脱,流速是1mL/min,每5min收集一管,收集30~50号管洗脱液,冻干即得。
发明人在对紫薯蓝莓复合饮料进一步研究后发现,将高醇提精制甘草多糖添加至复合饮料后可赋予饮料一定的发泡感、爽快感和刺激性,即可作为碳酸感增强剂使用,其还作为糖份且仅提升饮料的甜度而不会影响复合饮料的原有口感,使复合饮料在酸性区域依然保持碳酸增强效果稳定,而不依托香辛料提升饮料的碳酸感,不仅降低复合饮料成分的复杂度,节省了原料成本,而且开拓了紫薯蓝莓复合饮料的新风味,更加受年轻人欢迎。
在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可以相互组合,得到具体实施方式。
本发明涉及到的原料或试剂均为普通市售产品,涉及到的操作如无特殊说明均为本领域常规操作。
(三)有益效果
本发明的上述技术方案具有如下优点:
1)玉米须煮沸后滤去低分子物获得粗多糖,粗多糖先分离出醇浓度50%的多糖组分,再获得醇浓度不低于85%的目标玉米须多糖组分,最后采用硝酸-亚硒酸钠法制备得到硒化玉米须多糖,经原子荧光光谱法测定硒化玉米须多糖中的硒含量不低于0.2mg/g,可为饮料补充硒,还可与异麦芽酮糖复配成凝结抑制剂;
2)异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖组成的凝结抑制剂成分可有效抑制紫薯蓝莓复合饮料可能发生的凝结和/或凝聚和/或沉淀现象,显著提升复合饮料品相与贮藏周期,降低因固体析出而导致的诸如风味、口感下降及苦涩味增强等品质波动;
3)紫薯蓝莓复合饮料中富含花青素、硒等有效成分,能有效减少和降低辐射危害,强化人体免疫力、抗衰老、抗病毒、改善肠道菌群等保健功效,混合乳酸菌发酵有利于单一原来发酵时的蒸煮味,发酵产生乳酸进一步丰富了口感;
4)将高醇提甘草多糖添加至复合饮料后可赋予饮料一定的发泡感、爽快感和刺激性,使复合饮料在酸性区域依然保持碳酸增强效果稳定,而不依托香辛料提升饮料的碳酸感,不仅降低复合饮料成分的复杂度,节省了原料成本。
本发明为实现上述目的而采用了上述技术方案,弥补了现有技术的不足,设计合理,操作方便。
附图说明
为让本发明的上述和/或其他目的、特征、优点与实例能更明显易懂,所附附图的说明如下:
图1为本发明部分实施例的硒化玉米须多糖中的硒含量示意图;
图2为本发明甘草醇多糖的洗脱曲线示意图;
图3为本发明紫薯蓝莓复合饮料贮存后表观性状示意图;
图4为本发明的紫薯蓝莓复合饮料贮存后透光率示意图。
具体实施方式
本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当替换和/或改动工艺参数实现,然而特别需要指出的是,所有类似的替换和/或改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明所述产品和制备方法已经通过较佳实例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品和制备方法进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
除非另有定义,本文所使用的技术和科学术语,具有本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本发明使用本文中所描述的方法和材料;但本领域中已知的其他合适的方法和材料也可以被使用。本文中所描述的材料、方法和实例仅是说明性的,并不是用来作为限制。所有出版物、专利申请案、专利案、临时申请案、数据库条目及本文中提及的其它参考文献等,其整体被并入本文中作为参考。若有冲突,以本说明书包括定义为准。
除非另外说明,所有的百分数、份数、比例等都以重量计;另有说明包括但不限于“wt%”意指重量百分比、“mol%”意指摩尔百分比、“vol%”意指体积百分比。
当以范围、优选范围或一系列上限优选值和下限优选值给出数量、浓度或者其它数值或参数时,应理解其具体公开了由任何较大的范围限值或优选值和任何较小的范围限值或优选值的任何一对数值所形成的所有范围,而无论范围是否分别被公开。例如,当描述“1至5(1~5)”的范围时,所描述的范围应理解为包括“1 至4(1~4)”、“1至3(1~3)”、“1至2(1~2)”、“1至2(1~2)和4至5(4~5)”、“1 至3(1~3)和5”等的范围。除非另外说明,在本文描述数值范围之处,所述范围意图包括范围端值以及该范围内的所有整数和分数。
当术语“约”用于描述数值或范围的端点值时,所公开的内容应理解为包括所指的具体值或端值。
此外,除非明确表示相反含义,“或者(或)”是指包容性的“或者(或)”,而非排它性的“或者(或)”。例如,以下任一条件都适用条件A“或”B:A是真(或存在)并且B是假(或不存在),A是假(或不存在)并且B是真(或存在),以及A和B均为真(或存在)。
此外,在本发明的要素或组分之前的不定冠词“一”和“一种”意图表示所述要素或组分的出现(即发生)次数没有限制性。因此“一”或“一种”应理解为包括一种或至少一种,除非明确表示数量为单数,否则单数形式的所述要素或组分也包括复数的情况。
需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。
除非具体说明,本文所描述的材料、方法和实例仅是示例性的,而非限制性的。尽管与本文所述的那些方法和材料类似或等同的方法和材料可用于本发明的实施或测试,但本文仍描述了合适的方法和材料。
以下详细描述本发明。
实施例1:
本实施例提供一种硒化玉米须多糖:
玉米须粉碎至过100目筛,加入30倍的水煮沸1h,4500r/min离心30min取上清液,以10kDa超滤膜超滤,收集超滤浓缩液后于60℃烘干至恒重得粗多糖,研磨至过100目筛后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到50%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取上清液,继续加入无水乙醇至醇浓度85%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取沉淀即得玉米须多糖,溶解至0.2%稀硝酸溶液至玉米须多糖含量是6g/L,室温300r/min搅拌1h,加入玉米须多糖重量1.1倍的亚硒酸钠和1.5倍的氯化钙,5℃/min升温至60℃搅拌反应6h;混合物冷却至室温后滴加饱和碳酸钠溶液调节溶液至pH7.5,加入氯化钙物质的量1.1倍的硫酸钠,3000r/min高速离心1h,取上清液以流水透析(3.5kDa)至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析12h,浓缩、冻干即得。
实施例2:
本实施例提供另一种硒化玉米须多糖:
玉米须粉碎至过100目筛,加入30倍的水煮沸1h,4500r/min离心30min取上清液,以10kDa超滤膜超滤,收集超滤浓缩液后于60℃烘干至恒重得粗多糖,溶解至0.2%稀硝酸溶液至玉米须多糖含量是6g/L,室温300r/min搅拌1h,加入玉米须多糖重量1.1倍的亚硒酸钠和1.5倍的氯化钙,5℃/min升温至60℃搅拌反应6h;混合物冷却至室温后滴加饱和碳酸钠溶液调节溶液至pH7.5,加入氯化钙物质的量1.1倍的硫酸钠,3000r/min高速离心1h,取上清液以流水透析(3.5kDa) 至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析12h,浓缩、冻干即得。
实施例3:
本实施例提供另一种硒化玉米须多糖:
玉米须粉碎至过100目筛,加入30倍的水煮沸1h,4500r/min离心30min取上清液,以10kDa超滤膜超滤,收集超滤浓缩液后于60℃烘干至恒重得粗多糖,研磨至过100目筛后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到50%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取沉淀即得玉米须多糖,溶解至0.2%稀硝酸溶液至玉米须多糖含量是6g/L,室温300r/min搅拌1h,加入玉米须多糖重量1.1倍的亚硒酸钠和1.5倍的氯化钙,5℃/min升温至60℃搅拌反应6h;混合物冷却至室温后滴加饱和碳酸钠溶液调节溶液至pH7.5,加入氯化钙物质的量1.1倍的硫酸钠,3000r/min高速离心1h,取上清液以流水透析(3.5kDa)至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析12h,浓缩、冻干即得。
实施例4:
本实施例提供另一种硒化玉米须多糖:
玉米须粉碎至过100目筛,加入30倍的水煮沸1h,4500r/min离心30min取上清液,以10kDa超滤膜超滤,收集超滤浓缩液后于60℃烘干至恒重得粗多糖,研磨至过100目筛后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到50%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取上清液,继续加入无水乙醇至醇浓度75%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取沉淀即得玉米须多糖,溶解至0.2%稀硝酸溶液至玉米须多糖含量是6g/L,室温300r/min搅拌1h,加入玉米须多糖重量1.1倍的亚硒酸钠和1.5倍的氯化钙,5℃/min升温至60℃搅拌反应6h;混合物冷却至室温后滴加饱和碳酸钠溶液调节溶液至pH7.5,加入氯化钙物质的量1.1倍的硫酸钠,3000r/min高速离心1h,取上清液以流水透析(3.5kDa)至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析12h,浓缩、冻干即得。
实施例5:
本实施例提供另一种硒化玉米须多糖:
玉米须粉碎至过100目筛,加入30倍的水煮沸1h,4500r/min离心30min取上清液,以10kDa超滤膜超滤,收集超滤浓缩液后于60℃烘干至恒重得粗多糖,研磨至过100目筛后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到90%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取上清液,继续加入无水乙醇至醇浓度85%,1℃静置沉淀24h,9000r/min离心取沉淀即得玉米须多糖,溶解至0.2%稀硝酸溶液至玉米须多糖含量是6g/L,室温300r/min搅拌1h,加入玉米须多糖重量1.1倍的亚硒酸钠和1.5倍的氯化钙,5℃/min升温至60℃搅拌反应6h;混合物冷却至室温后滴加饱和碳酸钠溶液调节溶液至pH7.5,加入氯化钙物质的量1.1倍的硫酸钠,3000r/min高速离心1h,取上清液以流水透析(3.5kDa)至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析12h,浓缩、冻干即得。
实验例1:
依据现有技术的原子荧光法测定硒化玉米须多糖中的硒含量,检测统计结果如图1所示,可知优选实施方案实施例1和实施例5中的硒化玉米须多糖中的硒含量较高,均超过了200μg/g,而且还发现应用较高浓度的乙醇提取所得多糖的量也较多,同时还可看到纯水提取所得多糖所复合的硒量超过了低浓度(50%)醇提所得多糖,可能是因为低浓度醇提所得多糖量太少的缘故,而应用75%乙醇提取所得多糖的复合硒含量也超过了200μg/g。
实施例6:
本实施例提供一种甘草醇多糖:
1)制备粗多糖:甘草烘干后粉碎,过80目筛,加入15倍蒸馏水后升温至85℃浸提2h,6000r/min离心30min后取滤液浓缩,加入无水乙醇至乙醇含量95%, 1℃下静置醇沉24h,9000r/min离心30min后取沉淀冻干得粗多糖;
2)脱蛋白:步骤1)粗多糖溶解于15倍蒸馏水中,加入粗多糖2%的木瓜蛋白酶,在pH6.0、50℃条件下酶解2h,升温至95℃保持15min灭酶,加入酶解液 1/3体积的氯仿-正丁醇混合溶液(V氯仿:V正丁醇=4:1),600r/min搅拌2h,12000r/min 离心30min取上清液;
3)分级精制:步骤2)上清液于1kDa透析袋中透析72h,浓缩至1/10体积后上样DEAE-52纤维素柱,用蒸馏水、0.1~1.0mol/L氯化钠的Tris-HCl溶液依次洗脱,流速1mL/min,每5min收集一管,洗脱曲线如图2所示,收集30~50号管洗脱液,冻干即得。
实施例7:
本实施例提供一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:挑选成熟度7成以上的蓝莓,水洗干净过后以乙醇对蓝莓表面进行消毒杀菌,打浆并紫外线灭菌制得蓝莓果浆;
S2:破碎后的紫薯、黑米和水按照质量比1:1:15混合均匀,蒸煮熟化后加入固含量4%的由1:1.5:1.5重量比的中温淀粉酶、纤维素酶与果胶酶混合的复合酶, 50℃温度下糖化处理至混合溶液甜度15;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例1所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:按照0.2g/L的量将β-环糊精投入至发酵液,静置5h后超滤至滤液透光率不低于99.5%,滤液中加入其质量0.01%柠檬酸、0.01%苹果酸、0.05%的实施例6所述甘草醇多糖,混合均匀,冻融灭菌,具体是复合饮料在-20℃条件下冷冻处理为冻结状态-微波解冻并升温至50℃,重复交替冻融4次,灌装即得。
实施例8:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例9:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的异麦芽酮糖,接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至 1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例10:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的实施例1所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例11:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例2所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例12:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例3所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例13:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例4所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例14:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例5所述硒化玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例15:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:10混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.2%的凝结抑制剂得发酵原液,凝结抑制剂是重量比1:24的异麦芽酮糖和实施例1所述玉米须多糖;接种发酵原液体积5%的复合乳酸菌活化菌液,所述复合乳酸菌活化菌液是将活化后的保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌与嗜热链球菌按照体积比1:1.5:1.5在30℃扩大培养至菌悬液浓度至 1×107cells/mL;37℃发酵48h得发酵液;
S4:同实施例7。
实施例16:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:同实施例7;
S4:按照0.2g/L的量将β-环糊精投入至发酵液,静置5h后超滤至滤液透光率不低于99.5%,滤液中加入其质量0.01%柠檬酸、0.01%苹果酸、0.05%的实施例6步骤1)所述甘草醇粗多糖,混合均匀,冻融灭菌,具体是复合饮料在-20℃条件下冷冻处理为冻结状态-微波解冻并升温至50℃,重复交替冻融4次,灌装即得。
实施例17:
本实施例提供另一种紫薯蓝莓复合饮料:
S1:同实施例7;
S2:同实施例7;
S3:同实施例7;
S4:按照0.2g/L的量将β-环糊精投入至发酵液,静置5h后超滤至滤液透光率不低于99.5%,滤液中加入其质量0.01%柠檬酸、0.01%苹果酸,混合均匀,冻融灭菌,具体是复合饮料在-20℃条件下冷冻处理为冻结状态-微波解冻并升温至 50℃,重复交替冻融4次,灌装即得。
实验例2:
分别以实施例7~17中各紫薯蓝莓复合饮料为样品,检测其感官性状、乳酸含量、花青素含量、硒含量等理化性质,统计结果如表1所示。
表1、紫薯蓝莓复合饮料理化性质
实施例 | 感官性状 | 乳酸g/L | 花青素mg/L | 硒μg/L |
7 | 宝石浅红色、清澈透亮、酸甜适口 | 8.54 | 168.8 | 35.4 |
8 | 宝石红色、略浑浊、酸甜适口 | 8.36 | 169.3 | 32.4 |
9 | 宝石红色、略浑浊、酸甜适口 | 8.41 | 172.2 | 32.1 |
10 | 宝石红色、略浑浊、酸甜适口 | 8.45 | 170.5 | 36.4 |
11 | 宝石红色、微浑浊、酸甜适口 | 8.37 | 175.3 | 33.2 |
12 | 宝石浅红色、微浑浊、酸甜适口 | 8.46 | 169.4 | 30.9 |
13 | 宝石浅红色、清澈透亮、酸甜适口 | 8.39 | 168.8 | 36.0 |
14 | 宝石浅红色、清澈透亮、酸甜适口 | 8.45 | 171.2 | 36.6 |
15 | 宝石红色、微浑浊、酸甜适口 | 8.33 | 162.4 | 32.0 |
16 | 宝石浅红色、清澈透亮、酸甜适口 | 8.42 | 165.7 | 36.7 |
17 | 宝石浅红色、清澈透亮、酸甜适口 | 8.40 | 166.5 | 37.1 |
由表1可知,本申请优选实施方案实施例5和实施例14方案所得复合饮料酸甜适口,乳酸含量高,具有乳酸菌发酵特有的香甜味以及蓝莓的香味,同时可看到复合饮料的花青素含量及硒含量较高,能很好的减少和降低辐射危害,具有增强机体免疫力、抗衰老、抗病毒、改善肠道菌群等保健功效;实施例8因未添加凝结抑制剂,实施例9仅添加异麦芽酮糖,实施例10仅添加硒化玉米须多糖,实施例11应用的是复合有较低量硒的玉米须粗多糖,以及实施例12应用了硒化50%醇提多糖组分,实施例15的玉米须多糖未硒化,上述实施例8~12、15中的凝结抑制剂均非较优方案,因此导致感官性状出现浑浊,影响复合饮料的外观评价,此外,实施例8、9、11、12、15因未添加硒化玉米须多糖或所添加玉米须多糖复合的硒含量较低,导致复合饮料的硒含量显著降低。
实验例3:
分别以实施例7~17中各紫薯蓝莓复合饮料为样品,检测其微生物指标,检测按照《GB19297-2003果、蔬汁饮料卫生标准》进行,统计结果如表2所示,可知本申请各实施例所得紫薯蓝莓复合饮料的微生物含量均符合国家标准,可知通过反复冻融而非高温蒸煮即可达到灭菌的效果,有利于较大程度地保持复合饮料的固有风味,其风味、口感不变,贮存稳定性好。
表2、紫薯蓝莓复合饮料微生物指标
实施例 | 细菌总数cfu/mL | 大肠杆菌MPN/100mL | 霉菌cfu/mL | 致病菌cfu/mL |
7 | 34 | 0.6 | 5.3 | 未检出 |
8 | 28 | 0.9 | 5.0 | 未检出 |
9 | 39 | 0.7 | 4.6 | 未检出 |
10 | 42 | 1.2 | 3.9 | 未检出 |
11 | 26 | 1.6 | 5.0 | 未检出 |
12 | 38 | 0.5 | 6.5 | 未检出 |
13 | 35 | 0.8 | 7.1 | 未检出 |
14 | 40 | 0.9 | 2.5 | 未检出 |
15 | 26 | 1.2 | 7.1 | 未检出 |
16 | 30 | 1.3 | 5.5 | 未检出 |
17 | 36 | 1.6 | 3.9 | 未检出 |
限值 | ≤100 | ≤3 | ≤20 | 不得检出 |
实验例4:
分别取实施例7~17中各紫薯蓝莓复合饮料,常温密封保存6个月,观察可知各实施例饮料性质稳定,部分实施例所述复合饮料如图3所示(图3左1-实施例7,图3左2-实施例8,图3右2-实施例9,图3右1-实施例10),而且发现实施例8~13和15中的复合饮料出现不等的浑浊甚至沉淀,其中实施例8~10中的复合饮料出现了较明显的风味改变、涩味增强;取适量样品置于透明玻璃容器中,在充足的自然光下检测其透光率,统计结果如图4所示。由图4可知,实施例8中的复合饮料出现了较大程度的浑浊,其6个月贮存后的透光率由不低于99.5%降低至不高于85%,其原因可能是乳酸菌发酵饮料长期贮存条件下析出沉淀及因反复因冻融而导致的沉淀和/或凝聚,而对比发现实施例7中因添加了由异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖组成的凝结抑制剂其透光率未发现显著的降低,此外,实施例9中仅添加了异麦芽酮糖、实施例10中仅添加了硒化玉米须多糖、实施例10~13以硒化水提或低浓度醇提玉米须多糖为凝结抑制剂组分、实施例 15中的玉米须多糖未硒化,上述实施例中的紫薯蓝莓复合饮料均发现了不同程度的浑浊加深,表明凝结抑制剂可有效抑制复合饮料可能的凝结和/或凝聚和/或沉淀的发生,显著提升饮料品相与贮藏周期,降低因固体析出而导致的诸如风味、口感下降及苦涩味增强等品质波动。
实验例5:
以配制碳酸水(成分:水、二氧化碳,二氧化钛含量约4g/L)为标样,其发泡感、爽快感、刺激感强度均设为3,强度共分1~5五级评判(1最弱,5最强),分别对照评比实施例7、实施例16及实施例17中的紫薯蓝莓复合饮料的发泡感、爽快感、刺激感强度,官能评价在10名经过训练的专门小组成员中进行。并将发泡感、爽快感、刺激感强度的加和作为碳酸感增强度,合计9以下为无效,合计9~12为有效,合计12~14为较有效,合计不低于14为极有效,感官评价结果如表3所示。
表3、紫薯蓝莓复合饮料碳酸感感官评价
实施例 | 发泡感 | 爽快感 | 刺激感 | 碳酸感 |
7 | 4.8 | 4.6 | 4.8 | 极有效 |
16 | 4.2 | 4.0 | 3.9 | 有效 |
17 | 2.6 | 2.4 | 2.5 | 无效 |
由表3可知,相比于实施例16添加甘草醇粗多糖和实施例17未添加任何甘草醇多糖,实施例7中添加了实施例6中经95%醇沉、且经Sevag-酶法脱蛋白、并经DEAE-52纤维素柱分级精制制得的甘草醇多糖的复合饮料具有一定的发泡感、爽快感和刺激性,表明本申请所述甘草醇多糖可作为碳酸感增强剂使用,使复合饮料在酸性区域依然保持碳酸增强效果稳定,而不依托香辛料提升饮料的碳酸感,不仅降低复合饮料成分的复杂度,节省了原料成本。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术,故在此不再详细赘述。
鉴于本发明方案实施例众多,各实施例实验数据庞大众多,不适合于此处逐一列举说明,但是各实施例所需要验证的内容和得到的最终结论均接近。故而此处不对各个实施例的验证内容进行逐一说明,仅以实施例1~17和实验例1~5 作为代表说明本发明申请优异之处。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种修改或补充或采用类似的方式替代,但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施例,但是对本领域熟练技术人员来说,只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。
虽然上述具体实施方式已经显示、描述并指出应用于各种实施方案的新颖特征,但应理解,在不脱离本公开内容的精神的前提下,可对所说明的装置或方法的形式和细节进行各种省略、替换和改变。另外,上述各种特征和方法可彼此独立地使用,或可以各种方式组合。所有可能的组合和子组合均旨在落在本公开内容的范围内。上述许多实施方案包括类似的组分,并且因此,这些类似的组分在不同的实施方案中可互换。虽然已经在某些实施方案和实施例的上下文中公开了本发明,但本领域技术人员应理解,本发明可超出具体公开的实施方案延伸至其它的替代实施方案和/或应用以及其明显的修改和等同物。因此,本发明不旨在受本文优选实施方案的具体公开内容限制。
Claims (10)
1.异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖作为凝结抑制剂在乳酸菌发酵蛋白复合饮料中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:异麦芽酮糖和硒化玉米须多糖作为凝结抑制剂具有1:5~50、优选1:10~30、更优选1:20~30、最优选1:24的重量比。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:硒化玉米须多糖具体是硒与不低于85%乙醇沉淀的玉米须多糖复合得到。
4.根据权利要求1~3任一项所述的应用,其特征在于:硒化玉米须多糖具体经由下述步骤制备得到:
1)玉米须粉末煮沸至少1h,高速离心分离并取上清液,经截留分子量为10kDa超滤膜超滤,收集超滤液浓缩后烘干得粗多糖;
2)步骤1)粗多糖研磨后配成1%多糖溶液,加入无水乙醇至醇浓度达到50%,低温静置沉淀至少24h,超高速离心取上清液,继续加入无水乙醇至醇浓度不低于85%,低温静置沉淀至少24h,高速离心取沉淀即得玉米须多糖;
3)以0.1~0.3%的稀硝酸溶液溶解步骤2)所得玉米须多糖至浓度不高于8g/L,室温搅拌至少1h,加入玉米须多糖重量1~1.2倍的亚硒酸钠和1.4~1.5倍的氯化钙,升温至55~60℃搅拌反应至少6h;
4)步骤3)混合物冷却至室温后滴加碱液调节溶液呈弱碱性,加入氯化钙物质的量1.1~1.2倍的硫酸钠,高速离心,取上清液以流水透析至加入抗坏血酸至不呈红色,去离子水透析至少12h,浓缩、冻干即得。
5.一种紫薯蓝莓复合饮料的制备方法,其特征在于包括:
S1:挑选成熟度7成以上的蓝莓,水洗干净过后以乙醇对蓝莓表面进行消毒杀菌,打浆并灭菌制得蓝莓果浆;
S2:破碎后的紫薯、黑米和水按照质量比1:1.0~1.5:12~15混合均匀,蒸煮熟化后加入固含量3~5%的复合酶,糖化处理至混合溶液甜度至少15;
S3:步骤1)蓝莓果浆与步骤2)所述混合溶液按照体积比1:8~12混匀,然后再加入蓝莓果浆、紫薯和黑米总质量0.01~0.5%的凝结抑制剂得发酵原液,接种发酵原液体积5~8%的复合乳酸菌活化菌液,35~40℃发酵至少48h得发酵液;
S4:发酵液用β-环糊精澄清处理后超滤,滤液中加入其质量0.01~0.02%柠檬酸、0.01~0.02%苹果酸,混合均匀,冻融法灭菌灌装即得;其中
凝结抑制剂具体是重量比1:5~50、优选1:10~30、更优选1:20~30、最优选1:24的异麦芽酮糖和权利要求3或4所述之硒化玉米须多糖。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:冻融法灭菌具体是复合饮料在-20℃条件下冷冻处理为冻结状态,然后微波解冻并升温至50℃,重复交替冻融3~5次。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:步骤S4的滤液中还添加有其质量0.05~0.06%的甘草醇多糖。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:甘草醇多糖经由下述方法制备获得:甘草烘干后粉碎,过80目筛,加入足量蒸馏水后升温至70~90℃浸提1~2h,6000~9000r/min离心30min后取滤液浓缩,加入无水乙醇至乙醇含量不低于95%,在1~2℃温度静置下醇沉至少24h,6000~9000r/min离心30min后取沉淀冻干得粗多糖,然后经Sevag-酶法脱蛋白及DEAE-52纤维素柱分级精制即得。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:Sevag-酶法脱蛋白的方法具体是:粗多糖溶解于15~20倍的蒸馏水中,加入粗多糖1~2%的木瓜蛋白酶,在pH6.0、50℃条件下酶解至少2h灭酶,加入酶解液体积1/3~1/4的氯仿-正丁醇混合溶液(氯仿:正丁醇=4~5:1),600r/min搅拌至少2h,12000r/min超高速离心至少30min取上清液。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于:DEAE-52纤维素柱分级精制的方法具体是:Sevag-酶法脱蛋白后的上清液置于1kDa透析袋中透析72h,浓缩至1/10体积后上样DEAE-52纤维素柱,用蒸馏水、0.1~1.0mol/L氯化钠的Tris-HCl溶液依次洗脱,流速是1mL/min,每5min收集一管,收集30~50号管洗脱液,冻干即得。
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