CN112375134A - 一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法和应用，属于蛋白多肽技术领域。该方法是取鲜驴奶先进行离心过滤处理；再进行超高压灭菌技术灭菌；再加醋酸缓冲液调整鲜驴奶的PH值为4.8，再通过离心分离出蛋白沉淀物；再通过加乙醇分离出蛋白沉淀物中的脂肪；再调节pH值至7～8后加入中性蛋白酶酶解3～6小时，得酶解液；再将酶解液灭菌、离心过滤、用膜法浓缩处理，最后用置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。本发明具有收率高、纯度高、成本低和易于工业化生产的优点，该方法工艺流程短、时间短，能耗低、污染少、不使用有毒溶剂、无污染物排放，达到清洁生产目标，可保持鲜驴奶中活性蛋白及小分子多肽蛋白不发生变化。

Description

一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法和应用
技术领域
本发明属于蛋白多肽技术领域，具体为一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法和应用。
背景技术
驴奶是一种低脂肪、低胆固醇、高钙、富硒、美容、抗衰老的天然乳品，驴奶中各营养成分的比例最为接近人乳，被称为最接近母乳的乳中珍品，对人体的心、胃、脾、肺、肝、前列腺等多种器官有保健作用，其营养成分比例接近人乳的99％，其脂肪含量比牛奶略低，胆固醇的含量仅为牛奶的15％，驴奶中乳清蛋白含量极高，占总蛋白量的百分之六十四点三，人奶为百分之七十一，比羊奶和牛奶高二倍以上，维生素C的含量高，为牛奶的4.75倍，驴奶中含氨基酸齐全，其中必须氨基酸含量高，占蛋白质总量的46.7％，远高于牛奶42.2％和人乳38.1％的含量，此外，驴奶中微量元素含量充足，钙含量丰富，尤其是硒的含量较高，为牛奶的5.2倍，与我国目前《富硒食品含硒量标准》相比，属于富硒食品，由于驴奶中的钙以酪蛋白--钙复合体的形式存在，酪蛋白—钙复合体中的钙极易被人体模型吸收，因而驴奶中的钙更易被人体吸收，能有效补钙，改善骨质疏松症，所以驴奶具有强身健体、延年益寿、治疗疾病等众多功效。且驴奶还有阻断癌细胞代谢和抑制癌细胞的分裂和生长的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法和应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明采用的技术方案如下：
一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法，包括以下具体步骤：
(1)取鲜驴奶，采用5000-6000r/min高速离心机进行离心处理，取上清液；
(2)将步骤(1)所得取鲜驴奶装入软包装置于密闭的超高压无菌容器的水中，在400～600MPa的压力下作用10～30min灭菌；
(3)将步骤(2)所得鲜驴奶在2-10℃的环境中倒入灭菌容器中，加醋酸缓冲液将鲜驴奶的PH值调整至4.8，静置5～6分钟，蛋白质沉淀出来；这是根据蛋白质中主要的酪蛋白在其等电点pH溶液中溶解度降低的原理，将驴奶的pH调整至4.8，即酪蛋白的等电点时，酪蛋白即沉淀出来；
(4)将步骤(3)所得鲜驴奶溶液转入离心管中以3500r/min离心5分钟，取掉上清液，得鲜驴奶的蛋白沉淀物；
(5)在步骤(4)所得蛋白沉淀物中加乙醇除去蛋白质中不溶于水的脂肪，得到纯蛋白质；
(6)将步骤(5)纯蛋白质溶解并调节pH值至7～8，调节温度至30～50℃，加入中性蛋白酶酶解3～6小时，得酶解液；
(7)将步骤(6)所得酶解液置于密闭的超高压无菌容器的水中，在400～600MPa的压力下作用10～30min灭菌；
(8)将步骤(7)所得灭菌酶解液搅拌、离心过滤，再用膜法浓缩处理，得到过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液；
(9)将过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。
所述步骤(2)及步骤(7)中，所述超高压无菌容器的处理条件是在450MPa的压力下作用15min。
所述步骤(5)中的乙醇为体积分数95％的乙醇。
所述步骤(3)中的醋酸缓冲液的浓度为0.2mol/L，pH值为4.6。
所述的鲜驴奶蛋白多肽在制备抗肿瘤药物中的应用。
所述的鲜驴奶蛋白多肽在制备保健品中的应用。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明中的使用超高压技术灭菌，使鲜驴奶中的溶菌酶和维生素C不受任何损失，活性蛋白及小分子多肽蛋白不发生变化，具有温度变化小、只作用于非共价键、瞬间压缩、作用均匀等优点，因此能够很好地保持驴奶中天然的色、香、味、质构和营养等品质。
2、本发明中的通过加入醋酸调整鲜驴奶的PH值及加入95％的乙醇分离出鲜驴奶中的蛋白质的方法，具有收率高、纯度高、溶剂消耗少、成本低和易于工业化生产的优点，该方法工艺流程短、时间短，能耗低、污染少、不使用有毒溶剂、无污染物排放，达到清洁生产目标。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下实施例对本发明进行进一步详细说明。
实施例1：
(1)取鲜驴奶，采用5000-6000r/min高速离心机进行离心处理，取上清液；
(2)将步骤(1)所得取鲜驴奶装入软包装置于密闭的超高压无菌容器的水中，在450MPa的压力下作用15min灭菌；
(3)将步骤(2)所得鲜驴奶在2℃的环境中倒入灭菌容器中，加入浓度为0.2mol/L、pH值为4.6的醋酸缓冲液将鲜驴奶的PH值调整至4.8，静置6分钟，蛋白质沉淀出来；
(4)将步骤(3)所得鲜驴奶溶液转入离心管中以3500r/min离心5分钟，取掉上清液，得鲜驴奶的蛋白沉淀物；
(5)在步骤(4)所得蛋白沉淀物中加95％(体积分数)乙醇除去蛋白质中不溶于水的脂肪，得到纯蛋白质；
(6)将步骤(5)纯蛋白质溶解并调节pH值至7，调节温度至45℃，加入中性蛋白酶酶解4.5小时，得酶解液；
(7)将步骤(6)所得酶解液置于密闭的超高压无菌容器的水中，在450MPa的压力下作用15min灭菌；
(8)将步骤(7)所得灭菌酶解液搅拌、离心过滤，再用膜法浓缩处理，得到过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液；
(9)将过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。
实施例2：
(1)取鲜驴奶，采用5000-6000r/min高速离心机进行离心处理，取上清液；
(2)将步骤(1)所得取鲜驴奶装入软包装置于密闭的超高压无菌容器的水中，在400MPa的压力下作用30min灭菌；
(3)将步骤(2)所得鲜驴奶在6℃的环境中倒入灭菌容器中，加入浓度为0.2mol/L、pH值为4.6的醋酸缓冲液将鲜驴奶的PH值调整至4.8，静置5分钟，蛋白质沉淀出来；
(4)将步骤(3)所得鲜驴奶溶液转入离心管中以3500r/min离心5分钟，取掉上清液，得鲜驴奶的蛋白沉淀物；
(5)在步骤(4)所得蛋白沉淀物中加95％(体积分数)乙醇除去蛋白质中不溶于水的脂肪，得到纯蛋白质；
(6)将步骤(5)纯蛋白质溶解并调节pH值至7.5，调节温度至30℃，加入中性蛋白酶酶解6小时，得酶解液；
(7)将步骤(6)所得酶解液置于密闭的超高压无菌容器的水中，在450MPa的压力下作用15min灭菌；
(8)将步骤(7)所得灭菌酶解液搅拌、离心过滤，再用膜法浓缩处理，得到过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液；
(9)将过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。
实施例3：
(1)取鲜驴奶，采用5000-6000r/min高速离心机进行离心处理，取上清液；
(2)将步骤(1)所得取鲜驴奶装入软包装置于密闭的超高压无菌容器的水中，在600MPa的压力下作用10min灭菌；
(3)将步骤(2)所得鲜驴奶在10℃的环境中倒入灭菌容器中，加入浓度为0.2mol/L、pH值为4.6的醋酸缓冲液将鲜驴奶的PH值调整至4.8，静置5分钟，蛋白质沉淀出来；
(4)将步骤(3)所得鲜驴奶溶液转入离心管中以3500r/min离心5分钟，取掉上清液，得鲜驴奶的蛋白沉淀物；
(5)在步骤(4)所得蛋白沉淀物中加95％(体积分数)乙醇除去蛋白质中不溶于水的脂肪，得到纯蛋白质；
(6)将步骤(5)纯蛋白质溶解并调节pH值至8，调节温度至50℃，加入中性蛋白酶酶解3小时，得酶解液；
(7)将步骤(6)所得酶解液置于密闭的超高压无菌容器的水中，在450MPa的压力下作用15min灭菌；
(8)将步骤(7)所得灭菌酶解液搅拌、离心过滤，再用膜法浓缩处理，得到过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液；
(9)将过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法，其特征在于：包括以下具体步骤：
(1)取鲜驴奶，采用5000-6000r/min高速离心机进行离心处理，取上清液；
(2)将步骤(1)所得取鲜驴奶装入软包装置于密闭的超高压无菌容器的水中，在400～600MPa的压力下作用10～30min灭菌；
(3)将步骤(2)所得鲜驴奶在2-10℃的环境中倒入灭菌容器中，加醋酸缓冲液将鲜驴奶的PH值调整至4.8，静置5～6分钟；
(4)将步骤(3)所得鲜驴奶溶液转入离心管中以3500r/min离心5分钟，取掉上清液，得鲜驴奶的蛋白沉淀物；
(5)在步骤(4)所得蛋白沉淀物中加乙醇除去蛋白质中不溶于水的脂肪，得到纯蛋白质；
(6)将步骤(5)纯蛋白质溶解并调节pH值至7～8，调节温度至30～50℃，加入中性蛋白酶酶解3～6小时，得酶解液；
(7)将步骤(6)所得酶解液置于密闭的超高压无菌容器的水中，在400～600MPa的压力下作用10～30min灭菌；
(8)将步骤(7)所得灭菌酶解液搅拌、离心过滤，再用膜法浓缩处理，得到过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液；
(9)将过滤浓缩的鲜驴奶蛋白多肽溶液置于微波低温真空干燥装置干燥，即得鲜驴奶蛋白多肽。
2.根据权利要求1所述的一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)及步骤(7)中，所述超高压无菌容器的处理条件是在450MPa的压力下作用15min。
3.根据权利要求1所述的一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的乙醇为体积分数95％的乙醇。
4.根据权利要求1所述的一种鲜驴奶蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的醋酸缓冲液的浓度为0.2mol/L，pH值为4.6。
5.一种如权利要求1～4任意一项所述的鲜驴奶蛋白多肽在制备抗肿瘤药物中的应用。
6.一种如权利要求1～4任意一项所述的鲜驴奶蛋白多肽在制备保健品中的应用。
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