CN112370494A - 一种联合发酵制备枸杞提取物的方法 - Google Patents

一种联合发酵制备枸杞提取物的方法 Download PDF

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Abstract

一种联合发酵制备枸杞提取物的方法,包括以下步骤:(1)提取:原料浸泡、打浆;(2)发酵:加入乳酸菌和酵母菌混合菌粉联合发酵;(3)除渣:发酵液过滤、离心、精滤;(4)超滤除杂:超滤除不溶性大分子杂质;(5)纳滤除杂:经纳滤脱除小分子杂质;(6)低温浓缩;(7)灭菌、干燥。本发明将提取浆液通过乳酸菌、酵母菌联合发酵,结合超滤、纳滤,去除枸杞提取物中的大分子及小分子杂质,制得的枸杞提取物不添加任何辅料,富含枸杞酸、枸杞多糖,工艺绿色环保,适合大规模化生产。

Description

一种联合发酵制备枸杞提取物的方法
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域,具体涉及一种联合发酵制备枸杞提取物的方法。
背景技术
枸杞子为茄科植物枸杞的干燥成熟果实,其味甘、性平,具有补肝益肾之功效,《本草纲目》记载:“久服坚筋骨,轻身不老,耐寒暑”。枸杞子中具有多种活性成分,营养丰富,其中的枸杞多糖具有调节免疫能力、抗氧化、降血糖和血脂、抗肿瘤等多种作用;枸杞酸(AA-2βG)作为一种新型抗氧化剂,能够被肠道直接吸收,较L-抗坏血酸(L-AA)抗氧化能力持久温和,对机体刺激性小,可长时间在体内发挥抗氧化活性,受到越来越多的关注。
由于枸杞子提取物中含有大量的低熔点成分,常规的枸杞提取物在生产过程中会添加大量麦芽糊精等辅料,严重影响枸杞多糖含量检测的准确性;同时,AA-2βG在加热提取、浓缩等过程中不稳定,使得枸杞提取物的质量和应用受到了一定的影响。
CN108186797A公开了一种脱除低熔点杂质的枸杞提取物及其制备方法,该方法通过拌和上柱的方式脱除低熔点杂质,工艺复杂,收率低,不适合大规模工业化生产。
CN109432228A公开了一种枸杞提取物及其制备方法,通过复合微生物发酵,复合酶解等方式提取,虽然提高了提取回收率,但提取温度过高,没有关注AA-2βG的含量,且提取物中添加了大量的辅料,影响枸杞提取物的品质。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,克服上述现有技术的不足之处,提供一种能够有效地去除枸杞子提取液中的葡萄糖、果糖和寡糖等糖分,生产的枸杞提取物不需添加辅料,产品中枸杞酸、多糖含量高的联合发酵制备枸杞提取物的方法。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是,一种联合发酵制备枸杞提取物的方法,包括以下步骤:
(1)提取:取原料枸杞干果,加入纯化水浸泡,打浆,打浆物料经保温后得到浆液;
(2)发酵:在步骤(1)所得浆液中加入乳酸菌与酵母菌的混合菌粉,进行联合发酵,得发酵液;
(3)除渣:将步骤(2)所得发酵液依次进行过滤、离心、精滤,得精滤液;
(4)超滤除杂:将步骤(3)所得精滤液进行超滤,去除不溶性大分子杂质,得超滤液;
(5)纳滤除杂:将步骤(4)所得超滤液进行纳滤,脱除小分子杂质,得纳滤液;
(6)浓缩:将步骤(5)所得纳滤液进行低温浓缩,得浓缩液;
(7)灭菌、干燥:将步骤(6)所得浓缩液进行灭菌,然后干燥,即成。
进一步,步骤(1)中,所述枸杞干果为宁夏枸杞,枸杞酸含量为0.8wt%~1.5wt%。
进一步,步骤(1)中,所述浸泡的温度为30~60℃,优选为45~55℃,更优选50℃;浸泡用纯化水的质量为原料枸杞干果质量的6~14倍,优选为8~12倍,更优选10倍;浸泡的时间为10~40min,优选为20~30 min,更优选25min。
进一步,步骤(1)中,所述保温的温度为30~60℃,优选45~55℃,更优选50℃;保温的时间为30~90min,优选50~70min,更优选60min。
进一步,步骤(2)中,所述混合菌粉,为乳酸菌与酵母菌的混合菌粉;所述乳酸菌与酵母菌的混合菌粉中,乳酸菌与酵母菌的比例优选为1~4:6,优选2~3:6;混合菌粉的加入量为枸杞干果质量的0.1%~0.5%,优选0.2%~0.4%,更优选0.3%;发酵温度为25~35℃,优选28~32℃,更优选30℃,发酵时间为8~16h,优选10~14h,更优选12h。
进一步,步骤(3)中,所述过滤使用的滤网目数为40~80目,优选50~70目,更优选60目;离心的方式为沉降离心,离心机转速为1500~2000r/min,物料流速为500~1000L/h,优选700~900L/h,更优选800L/h;精滤所使用的精滤膜的孔径为2~10μm。
进一步,步骤(4)中,所述超滤使用的超滤膜的截留分子量为80000~100000Da,过滤的压力为0.1~0.3Mpa,温度控制≤30℃。
进一步,步骤(5)中,所述纳滤使用的纳滤膜的截留分子量为150~300Da,过滤的压力为0.2~0.6Mpa,纳滤过程中补室温纯化水3~5次,温度控制≤30℃,纳滤至糖度为8~15 Brix。
进一步,步骤(6)中,所述浓缩为真空加热浓缩,浓缩的温度为30~50℃,优选35~45℃更优选40℃;真空度为-0.07~-0.09Mpa,浓缩至糖度为35~55 Brix。
进一步,步骤(7)中,所述灭菌的温度为113~117℃,时间为10~12s;灭菌后,冷却至≤35℃;所述干燥的方式为喷雾干燥、减压干燥、冷冻干燥。
本发明基于乳酸菌、酵母菌等益生菌在发酵过程中消耗单糖、寡糖,而对低聚糖和枸杞多糖有较低的或无发酵力的生物学特性,采用乳酸菌、酵母菌联合发酵,能够有效地去除枸杞子提取液中的葡萄糖、果糖和寡糖等糖分;生产的枸杞提取物不需要添加辅料,相对地提高枸杞酸、多糖的含量,拓宽了枸杞提取物的应用范围。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
各实施例使用的宁夏枸杞干果原料均向宁夏早康枸杞股份有限公司采购,枸杞多糖含量:3.12%,枸杞酸含量为1.03%。使用的乳酸菌粉(商品名“植物乳杆菌”)购自上海交大昂立股份有限公司,酵母菌粉(商品名“耐糖酵母菌”)购自安琪酵母股份有限公司。
实施例得到的枸杞子提取物,枸杞多糖测定方法:保健食品检验与评价技术规范2003版中《分光光度法测定枸杞子多糖含量》;枸杞酸测定方法:《HPLC 测定枸杞提取物中枸杞酸的含量》杨延超, 董慧燕, 殷梦龙. HPLC 测定枸杞提取物中枸杞酸的含量[J]. 食品工业, 2014(10):255-257。
实施例1
本实施例包括以下步骤:
(1)提取:取原料枸杞干果100kg,加入纯化水800kg,50℃浸泡15min,打浆,打浆物料50℃保温50min后搅拌冷却至30℃;
(2)发酵:在步骤(1)所得提取浆液中加入乳酸菌与酵母菌的混合菌粉;所述乳酸菌与酵母菌的混合菌粉中,乳酸菌粉与酵母菌粉的比例为1:3,混合菌粉的加入量为300g,进行联合发酵,发酵的温度为30℃,时间为8h,得发酵液;
(3)除渣:将步骤(2)所得发酵液先过60目滤网,然后沉降离心,转速为2000r/min,物料流速为800L/h,离心物料使用10μm,2μm精滤膜过滤,得精滤液;
(4)超滤:将步骤(3)所得精滤液,使用截留分子量为100000Da的超滤膜进行超滤,超滤的压力为0.1~0.3Mpa,温度≤30℃,去除不溶性大分子杂质,得超滤液;
(5)纳滤:将步骤(4)所得超滤液,使用截留分子量为300Da的纳滤膜进行纳滤,纳滤的压力为0.2~0.6Mpa,温度≤30℃,纳滤过程中补室温纯化水3次,脱除小分子杂质,得纳滤液;
(6)浓缩:将步骤(5)所得纳滤液使用1000L真空浓缩器进行浓缩,浓缩的温度≤40℃,真空度为-0.08~-0.09Mpa,浓缩至糖度为55 Brix;
(7)灭菌、干燥:将步骤(6)所得浓缩液进行灭菌,灭菌的温度为113~117℃,时间为10~12s;灭菌后,冷却至30℃,然后喷雾干燥,即成;得枸杞提取物产品21.87kg。
经检测,所得枸杞提取物产品中,枸杞酸、枸杞多糖的含量分别为3.24%、7.64%。
实施例2
本实施例包括以下步骤:
(1)提取:取原料枸杞干果100kg,加入纯化水1000kg,50℃浸泡15min,打浆,打浆物料50℃保温60min后搅拌冷却至30℃;
(2)发酵:在步骤(1)所得提取浆液中加入乳酸菌与酵母菌的混合菌粉;所述乳酸菌与酵母菌的混合菌粉中,乳酸菌粉与酵母菌粉的比例为1:2,混合菌粉的加入量为300g,进行联合发酵,发酵的温度为30℃,时间为10h,得发酵液;
(3)除渣:将步骤(2)所得发酵液先过60目滤网,然后沉降离心,转速为2000r/min,物料流速为850L/h,离心物料使用10μm,2μm精滤膜过滤,得精滤液;
(4)超滤:将步骤(3)所得精滤液,使用截留分子量为100000Da的超滤膜进行超滤,超滤的压力为0.1~0.3Mpa,温度≤30℃,去除不溶性大分子杂质,得超滤液;
(5)纳滤:将步骤(4)所得超滤液,使用截留分子量为300Da的纳滤膜进行纳滤,纳滤过程中补室温纯化水3次,温度≤30℃,脱除小分子杂质,得纳滤液;
(6)浓缩:将步骤(5)所得纳滤液使用1000L真空浓缩器进行浓缩,浓缩的温度≤40℃,真空度为-0.08~-0.09Mpa,浓缩至糖度为50 Brix;
(7)灭菌、干燥:将步骤(6)所得浓缩液进行灭菌,灭菌的温度为113~117℃,时间为10~12s;灭菌后,冷却至30℃,然后喷雾干燥,即成;得枸杞提取物产品19.68kg。
经检测,所得枸杞提取物产品中,枸杞酸、枸杞多糖的含量分别为3.76%、8.35%。
实施例3
本实施例包括以下步骤:
(1)提取:取原料枸杞干果100kg,加入纯化水1200kg,50℃浸泡30min,打浆,打浆物料50℃保温70min后搅拌冷却至30℃;
(2)发酵:在步骤(1)所得提取浆液中加入乳酸菌与酵母菌的混合菌粉;所述乳酸菌与酵母菌的混合菌粉中,乳酸菌粉与酵母菌粉的比例为2:3,混合菌粉的加入量为300g,进行联合发酵,发酵的温度为30℃,时间为14h,得发酵液;
(3)除渣:将步骤(2)所得发酵液先过60目滤网,然后沉降离心,转速为2000r/min,物料流速为800L/h,离心物料使用10μm,2μm精滤膜过滤,得精滤液;
(4)超滤:将步骤(3)所得精滤液,使用截留分子量为100000Da的超滤膜进行超滤,超滤的压力为0.1~0.3Mpa,温度≤30℃,去除不溶性大分子杂质,得超滤液;
(5)纳滤:将步骤(4)所得超滤液,使用截留分子量为300Da的纳滤膜进行纳滤,纳滤过程中补室温纯化水5次,温度≤30℃,脱除小分子杂质,得纳滤液;
(6)浓缩:将步骤(5)所得纳滤液使用1000L真空浓缩器进行浓缩,浓缩的温度≤40℃,真空度为-0.08~-0.09Mpa,浓缩至糖度为52 Brix;
(7)灭菌、干燥:将步骤(6)所得浓缩液进行灭菌,灭菌的温度为113~117℃,时间为10~12s;灭菌后,冷却至30℃,然后喷雾干燥,即成;得枸杞提取物产品18.75kg。
经检测,所得枸杞提取物产品中,枸杞酸、枸杞多糖的含量分别为2.85%、8.65%。

Claims (10)

1.一种联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取:取原料枸杞干果,加入纯化水浸泡,打浆,打浆物料经保温后得到浆液;
(2)发酵:在步骤(1)所得浆液中加入乳酸菌与酵母菌的混合菌粉,进行联合发酵,得发酵液;
(3)除渣:将步骤(2)所得发酵液依次进行过滤、离心、精滤,得精滤液;
(4)超滤除杂:将步骤(3)所得精滤液进行超滤,去除不溶性大分子杂质,得超滤液;
(5)纳滤除杂:将步骤(4)所得超滤液进行纳滤,脱除小分子杂质,得纳滤液;
(6)浓缩:将步骤(5)所得纳滤液进行低温浓缩,得浓缩液;
(7)灭菌、干燥:将步骤(6)所得浓缩液进行灭菌,然后干燥,即成。
2.根据权利要求1所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述枸杞干果为宁夏枸杞,枸杞酸含量为0.8wt%~1.5wt%。
3.根据权利要求1或2所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述浸泡的温度为30~60℃,优选为45~55℃;浸泡用纯化水的质量为原料枸杞干果质量的6~14倍,优选为8~12倍;浸泡的时间为10~40min,优选为20~30 min。
4.根据权利要求1-3之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述保温的温度为30~60℃,优选45~55℃;保温的时间为30~90min,优选50~70min。
5.根据权利要求1-4之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述乳酸菌与酵母菌的混合菌粉中,乳酸菌与酵母菌的比例为1~4:6,优选2~3:6;混合菌粉的加入量为枸杞干果质量的0.1%~0.5%,优选0.2%~0.4%;发酵温度为25~35℃,优选28~32℃,发酵时间为8~16h,优选10~14h。
6.根据权利要求1-5之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述过滤使用的滤网目数为40~80目,优选50~70目;离心的方式为沉降离心,离心机转速为1500~2000r/min,物料流速为500~1000L/h,优选700~900L/h,更优选800L/h;精滤所使用的精滤膜的孔径为2~10μm。
7.根据权利要求1-6之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述超滤使用的超滤膜的截留分子量为80000~100000Da,过滤的压力为0.1~0.3Mpa,温度控制≤30℃。
8.根据权利要求1-7之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述纳滤使用的纳滤膜的截留分子量为150~300Da,过滤的压力为0.2~0.6Mpa,纳滤过程中补充室温纯化水3~5次,温度≤30℃,纳滤至糖度为8~15 Brix。
9.根据权利要求1-8之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(6)中,所述浓缩为真空加热浓缩,浓缩的温度为30~50℃,优选35~45℃;真空度为-0.07~-0.09Mpa,浓缩至糖度为35~55 Brix。
10.根据权利要求1-9之一所述联合发酵制备枸杞提取物的方法,其特征在于,步骤(7)中,所述灭菌的温度为113~117℃,时间为10~12s;灭菌后,冷却至≤35℃;所述干燥的方式为喷雾干燥、减压干燥或冷冻干燥。
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