CN112362864B - 一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，包括如下质量份的组分：催化剂0.05份~0.4份；表面活性剂0.1份~1.5份；螯合剂0.1份~0.2份；磺酸盐类化合物0.1份~1.5份。本发明的处理剂应用于免疫诊断试剂中，能够有效解决背景发光值过高而影响临床低浓度标本测值准确性的问题，大大地提高产品的灵敏度和产品质量，能满足临床要求，以减少误诊现象的发生。本发明还提供一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法。

Description

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及免疫诊断试剂技术领域，尤其涉及一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂及其制备方法。

背景技术

免疫诊断属于体外诊断试剂领域的其中一个细分领域，免疫诊断是应用免疫学的理论、技术和方法诊断各种疾病。免疫诊断试剂在诊断试剂盒中品种最多，广泛应用于医院、血站、体检中心，主要用于肝炎检测、性病检测、肿瘤检测、孕检等项目中。

免疫诊断包括放射免疫、酶联免疫、化学发光等。免疫诊断检测方法是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体的实验方法，其主要原理是通过抗原或抗体特异性捕获标本中的待测物，再通过提前结合好发光物质的抗原或抗体对捕获好的待测物进行标记，从而间接对待测物进行发光物质的标记，通过仪器对待测物上标记的发光物质进行测定其发光值，然后通过拟合曲线计算出待测物的浓度。对于免疫诊断所用的试剂，含有标记了抗原或抗体的发光物质，一些游离的未标记上抗原或抗体的发光物质，在整个实验的反应过程中，因为涉及到清洗的步骤，清洗的目的是将多余的、未结合到待测物的抗原或抗体、以及标本中除捕获好的待测物外的一些其他物质给清洗掉。在这个清洗的过程中，如果仪器对整个反应体系的清洗强度不够，或者试剂本身的一些特性，导致反应体系中未结合到待测物的发光物质未能被洗脱下来，以及临床标本中的一些其他非特异性物质的结合，都会导致背景发光值过高的现象存在，进而影响到临床低浓度标本测值的准确性。

背景发光值过高主要是影响临床低浓度标本的实际测值情况，容易出现假阳性的结果，造成误诊，一般背景发光值越低，对临床标本的影响越小，结果越准确，灵敏度也会相应的提高。基于此，研发一种可降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，成了当务之急。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，其可有效地解决在免疫诊断试剂中背景发光值过高的问题，大大地提高产品的灵敏度和产品质量，能满足临床要求，以减少误诊现象的发生。

本发明目的之二在于提供一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，包括如下质量份的组分：

催化剂0.05份~0.4份；表面活性剂0.1份~1.5份；螯合剂0.1份~0.2份；磺酸盐类化合物0.1份~1.5份。

进一步地，所述催化剂由四甲基氯化铵和2-溴乙基三甲基溴化铵组成。四甲基氯化铵、2-溴乙基三甲基溴化铵均为相转移催化剂，能使离子化合物与不溶于水的有机物质在低极性溶剂中进行反应，或加速这些反应。

进一步地，所述四甲基氯化铵和2-溴乙基三甲基溴化铵的质量比为1:1。

进一步地，所述表面活性剂为Tween-20、Tween-40、NP-40、Triton X-100、十二烷基硫酸钠中的一种或者两种以上的组合物。Tween-20、Tween-40、NP-40和Triton X-100均为非离子表面活性剂，十二烷基硫酸钠为阴离子表面活性剂。非离子表面活性剂能够插入到反胶团的结构中以增大反胶团的尺寸，从而使其能溶解较大相对分子质量的蛋白质。十二烷基硫酸钠能溶解细胞膜上的脂类与蛋白质。

进一步地，所述螯合剂为EDTA、DTPA中的一种或者两种的组合物。DTPA和EDTA都是氨基羧酸类的螯合剂，EDTA能与Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺和Fe²⁺等二价金属离子结合的螯合剂。DTPA是高效鳌合剂，鳌合性强，能迅速与钙、镁、铁、铅、铜、锰等离子生成水溶性络合物。

进一步地，所述磺酸盐类化合物由烷基苯磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基甘油醚磺酸盐组成。烷基苯磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基甘油醚磺酸盐均具有高温清净性好，酸中和能力强和防锈性好，并具有一定的分散和增溶能力等特点，通过三者的配合，能够显著地降低液体表面张力，大大地增强其洗脱能力。

进一步地，所述烷基苯磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基甘油醚磺酸盐的质量比为1:1:1。

进一步地，所述催化剂、表面活性剂、磺酸盐类化合物的质量比为0.1-0.4:0.1:0.3-1.5。

进一步地，所述处理剂还包括如下质量份的组分：缓冲液96.4份~99.65份，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液、PB缓冲液、MOPS缓冲液、巴比妥缓冲液中的一种。使用缓冲液，能够在检测项目的体系中有效区分含有待测物的样本与不含待测物的样本。

本发明的目的之二采用如下技术方案实现：

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，包括如下制备步骤：

在缓冲液中依次加入催化剂、表面活性剂、螯合剂和磺酸盐类化合物，混合均匀，调节pH值为6.3后，即得降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂。

进一步地，通过加入1mol/L盐酸溶液调节pH值为6.3。

相比现有技术，本发明的有益效果在于：

本发明的处理剂应用于免疫诊断试剂中，能够有效解决背景发光值过高而影响临床低浓度标本测值准确性的问题，大大地提高产品的灵敏度和产品质量，能满足临床要求，以减少误诊现象的发生。

本发明的处理剂可作为其中的一个试剂组分，应用于实验反应体系中，直接跟试剂配套使用于仪器中，避免了人工操作所带来的其他影响因素，让测值的准确性更可靠，测值更稳定，而且可以减少实验人员的工作量，提高效率。

本发明的处理剂给免疫诊断试剂提升灵敏度及准确性方面提供了很大的帮助，在提升试剂质量的同时，也能在体外诊断试剂行业中广泛应用，赋予免疫诊断试剂在体外诊断试剂行业市场中占据更大的份额，意义重大。

本发明的制备方法工艺简单、易控制，有利于放大生产。

具体实施方式

下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。

以下是本发明具体的实施例，在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外，均可以通过购买方式获得。以下各组分的含量为质量分数含量。

实施例1

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，包括如下制备步骤：

在1L缓冲液中依次加入0.05%四甲基氯化铵、0.05%2-溴乙基三甲基溴化铵、0.1%Tween-20、0.1%EDTA、0.1%烷基苯磺酸盐、0.1%烷基磺酸盐、0.1%烷基甘油醚磺酸盐，混匀后，调节pH值为6.3，即得。

实施例2

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，包括如下制备步骤：

在1L缓冲液中依次加入0.1%四甲基氯化铵、0.1% 2-溴乙基三甲基溴化铵、0.1%Tween-20、0.1%EDTA、0.25%烷基苯磺酸盐、0.25%烷基磺酸盐、0.25%烷基甘油醚磺酸盐，混匀后，调节pH值为6.3，即得。

实施例3

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，包括如下制备步骤：

在1L缓冲液中依次加入0.2%四甲基氯化铵、0.2%2-溴乙基三甲基溴化铵、0.1%Tween-20、0.1%EDTA、0.5%烷基苯磺酸盐、0.5%烷基磺酸盐、0.5%烷基甘油醚磺酸盐，混匀后，调节pH值为6.3，即得。

实施例4

一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，包括如下制备步骤：

将0.1%四甲基氯化铵、0.1%2-溴乙基三甲基溴化铵、0.2%Tween-20、0.1%EDTA、0.3%烷基苯磺酸盐、0.3%烷基磺酸盐和0.3%烷基甘油醚磺酸盐混合，混匀后，调节pH值为6.3，即得。

性能检测

从免疫诊断试剂项目中挑选癌抗原15-3及癌抗原19-9这两个项目，进行以下实验验证：

1）分别各测试10次不含待测物质的缓冲液，取均值，比较经不同实施例的处理剂处理及未经处理剂处理的发光值大小。实验结果如下表1和表3所示。

2）每个项目各收集20例有进口试剂测值的标本，经不同实施例的处理剂处理与未经处理剂处理的结果，分别与进口试剂结果进行符合率计算，再分别进行比较。实验结果如下表2和表4所示。

表1癌抗原15-3的发光值实验结果（cutoff值：≤35.6U/mL）

表2癌抗原15-3的符合率比对实验结果

表3癌抗原19-9的发光值实验结果（cutoff值：≤34.5U/mL）

表4癌抗原19-9的符合率比对实验结果

从上述表1-4中的实验结果进行分析得出，未经处理剂处理的标本，跟进口试剂所测结果的符合率较差，而经过实施例处理剂处理的标本符合率都＞90%，比对结果较好，通过分析可以看出，实施例2、实施例3配制出来的处理剂效果最好。因此，本发明的处理剂可以将免疫诊断试剂背景发光值有效的降低。

上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (4)

1.一种降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，其特征在于，包括如下质量份的组分：

催化剂0.05份~0.4份；表面活性剂0.1份~1.5份；螯合剂0.1份~0.2份；磺酸盐类化合物0.1份~1.5份；所述催化剂由质量比为1:1的四甲基氯化铵和2-溴乙基三甲基溴化铵组成；所述表面活性剂为Tween-20、Tween-40、NP-40、Triton X-100、十二烷基硫酸钠中的一种或者两种以上；所述螯合剂为EDTA、DTPA中的一种或者两种；所述磺酸盐类化合物由质量比为1:1:1的烷基苯磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基甘油醚磺酸盐组成；该处理剂的pH值为6.3。

2.根据权利要求1所述的降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，其特征在于，所述催化剂、表面活性剂、磺酸盐类化合物的质量比为（0.1-0.4）:0.1:（0.3-1.5）。

3.根据权利要求1所述的降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂，其特征在于，所述处理剂还包括如下质量份的组分：缓冲液96.4份~99.65份，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液、PB缓冲液、MOPS缓冲液、巴比妥缓冲液中的一种。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂的制备方法，其特征在于，包括如下制备步骤：

在缓冲液中依次加入催化剂、表面活性剂、螯合剂和磺酸盐类化合物，混合均匀，调节pH值为6.3后，即得降低免疫诊断试剂背景发光值的处理剂。