CN112353934A - 一种芋螺毒素药物组合物及其冻干制剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药领域，涉及一种芋螺毒素药物组合物及其冻干制剂。具体地，本发明涉及一种芋螺毒素药物组合物，包括如下成分：芋螺毒素1‑3重量份，海藻糖10‑40重量份，以及甘露醇10‑40重量份。本发明还涉及所述冻干制剂的制备方法，以及所述芋螺毒素药物组合物和所述冻干制剂的用途。本发明的冻干制剂具有良好的外观形态，并且主药含量稳定，具有良好的应用前景。

Description

一种芋螺毒素药物组合物及其冻干制剂

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种芋螺毒素药物组合物及其冻干制剂。本发明还涉及所述冻干制剂的制备方法，以及所述芋螺毒素药物组合物和所述冻干制剂的用途。

背景技术

芋螺毒素(CTX)，由海洋腹足纲软体动物芋螺的毒液管和毒囊内壁的毒腺所分泌，由许多单一毒肽组成的鸡尾酒样的混合毒素，主要成分是一些对不同离子通道及神经受体高专一性的活性多肽化合物。芋螺毒素多数由10-40个氨基酸残基组成，富含两对或三对二硫键，是发现的最小核酸编码的动物神经毒素肽，也是二硫键密度最高的小肽，可作用于各种离子通道和受体的类型及亚型。

与其他天然肽类毒素相比，芋螺毒素具有相对分子质量小、高活性、高选择性及易于合成等突出优点。它们能特异性地作用于乙酰胆碱受体及其他神经递质的各种受体亚型，以及钙、钠、钾等多种离子通道，不仅可直接作为药物，还可作为理想的分子模板用于发展新药先导化合物，对研究神经生物学也具有重要意义。研究中的疾病治疗范围包括慢性疼痛、癫痫、心血管疾病、精神障碍、运动障碍、痉挛、癌症以及中风等。多种具有强神经肌肉阻断作用的芋螺毒素应用于临床麻醉手术的辅助药物也在进行研究，喉部肌肉的快速麻痹有助于气管内插管等手术。

芋螺毒素GeXIVA由海南将军芋螺中发现并提取，由28个氨基酸残基组成，选择性作用于α9α10烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)，其半阻断剂量(IC50)仅为3.8nmoL。α9α10nAChRs已被认为是治疗慢性痛的药物作用靶点，且芋螺毒素GeXIVA对人类α9α10nAChR显示出很高的阻断活性，这有利于用于人类神经痛的治疗。GeXIVA在坐骨神经慢性挤压性损伤(CCI)神经病理性疼痛模型上的镇痛活性强，且无成瘾性，停药后其镇痛活性依然能维持较长的时间。GeXIVA作为新型的镇痛候选新药，具有强效性、无耐受性、对运动功能无影响等优点，有望为广大神经痛患者带来福音。

目前，芋螺毒素GeXIVA的人工合成技术已经日益成熟，尤其使用固态合成技术可以有效解决芋螺毒素合成产率低的问题。然而，芋螺毒素的稳定性问题在很大程度上限制了其向临床使用推进的进程。

冻干制剂是将活性成分制备成制剂的重要手段。但是，本发明人在前的研究中发现，将芋螺毒素GeXIVA制备冻干制剂时，出现冻干粉饼的萎缩或者塌陷的情况。粉饼的萎缩或者塌陷可能导致外观不符合国家对于药品的质量要求，无法被批准上市；甚至可能会导致药品的关键质量产生不好的变化(如含量严重降低、杂质严重增加等)，进而导致药品存在严重的安全性问题。

目前，尚需要开发芋螺毒素GeXIVA的有效制剂。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种芋螺毒素药物组合物，并制得冻干制剂。本发明人惊奇地发现，该冻干制剂能够显著地改善制剂的外观，并提高芋螺毒素的稳定性。由此提供了下述发明：

本发明的一个方面涉及一种芋螺毒素药物组合物，包括如下成分：

芋螺毒素 1-3重量份

海藻糖 10-40重量份

甘露醇 10-40重量份。

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其由上述成分组成。

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其特征在于如下的(1)-(3)项中的任意1项、任意2项或者全部3项：

(1)所述芋螺毒素为1.5-2.5重量份，优选为1.8-2.2重量份或1.9-2.1重量份，更优选为2重量份；

(2)所述海藻糖为15-40重量份、10-25重量份、15-25重量份或者15重量份；

(3)所述甘露醇为15-40重量份、10-25重量份、15-25重量份或者15重量份。

上述任意2项可以是上述的第(1)项和第(2)项、上述的第(1)项和第(3)项或者上述的第(2)项和第(3)项。

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述芋螺毒素为序列如SEQ ID NO:1所示的多肽或其可药用盐例如醋酸盐；

优选地，所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第二个半胱氨酸形成二硫键，并且第三个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；或所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第三个半胱氨酸形成二硫键，并且第二个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；或所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键，并且第二个半胱氨酸与第三个半胱氨酸形成二硫键；

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述芋螺毒素的羧基末端是酰胺化的。

TCRSSGRYCRSPYDRRRRYCRRITDACV(SEQ ID NO:1)

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述海藻糖与甘露醇的重量比为(0.8-1.2)：1、(0.9-1.1)：1或者1：1。

在本发明的一些实施方式中，所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述芋螺毒素药物组合物为冻干制剂或水溶液；

优选地，所述药物组合物的单位剂量以芋螺毒素计为1.5-2.5mg，优选为1.8-2.2mg或1.9-2.1mg，更优选为2mg；

优选地，所述水溶液中芋罗毒素的含量为1.5-2.5mg/mL，优选为1.8-2.2mg/mL或1.9-2.1mg/mL，更优选为2mg/mL。

本发明的另一方面涉及一种芋螺毒素药物冻干制剂，其由本发明中任一项所述的芋螺毒素药物组合物制得。

本发明的再一方面涉及一种制备本发明的芋螺毒素冻干制剂的方法，包括如下步骤：

(1)制备芋螺毒素、海藻糖与甘露醇的水溶液；

(2)将得到的水溶液进行冻干；

优选地，所述水溶液为本发明任一项所述的芋螺毒素药物组合物的水溶液。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，步骤(1)中的水溶液的制备包括但不限于：

将芋螺毒素水溶液、海藻糖水溶液和甘露醇水溶液混合；

将芋螺毒素、海藻糖与甘露醇混合后溶于水；

将芋螺毒素、海藻糖与甘露醇中的任意一种与其余两种的水溶液混合；或者

将芋螺毒素、海藻糖与甘露醇中的任意两种与其余一种的水溶液混合。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，步骤(2)中的冻干工艺如下：

A.预冻：西林瓶放入冻干机后，压缩机打开，使冻干机内温度降低，冷冻室温度降至-30℃至-40℃时，维持3-4小时，对样品进行预冻；

B.一次升华：升温至-5℃至0℃并维持10-12小时；

C.二次升华：升温至15℃维持6-8小时；

优选地，冻干过程的真空度维持在10-30Pa。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，步骤(2)中的冻干工艺如下：

a.预冻：西林瓶放入冻干机后，压缩机打开，使冻干机内温度降低，冷冻室温度降至-40℃时，维持3小时，对样品进行预冻；

b.一次升华：升温至-30℃并维持2小时、升温至-20℃并维持3小时、升温至-10℃并维持2小时、升温至0℃维持1小时；

c.二次升华：升温至10℃维持1小时，最后升温至15℃维持并3小时；

优选地，冻干过程的真空度维持在10-30Pa。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，步骤(1)中所述的水溶液，包括如下成分：

芋螺毒素 1-3mg/mL

海藻糖 10-40mg/mL

甘露醇 10-40mg/mL。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中步骤(1)中所述的水溶液，其特征在于如下的1)-3)项中的任意1项、任意2项或者全部3项：

1)所述芋螺毒素为1.5-2.5mg/mL，优选为1.8-2.2mg/mL或1.9-2.1mg/mL，更优选为2mg/mL；

2)所述海藻糖为15-40mg/mL、10-25mg/mL、15-25mg/mL或者15mg/mL；

3)所述甘露醇为15-40mg/mL、10-25mg/mL、15-25mg/mL或者15mg/mL。

上述任意2项可以是上述的第1)项和第2)项、上述的第1)项和第3)项或者上述的第2)项和第3)项。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，所述芋螺毒素为序列如SEQID NO:1所示的多肽或其可药用盐例如醋酸盐；

优选地，所述芋螺毒素的N末端的第一个半胱氨酸与第二个半胱氨酸形成二硫键，并且第三个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；

优选地，所述芋螺毒素的羧基末端是酰胺化的。

在本发明的一些实施方式中，所述的制备方法，其中，所述海藻糖与甘露醇的重量比为(0.8-1.2)：1、(0.9-1.1)：1或者1：1。

本发明还涉及上述制备方法制得的芋螺毒素冻干制剂。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的芋螺毒素药物组合物或者本发明的芋螺毒素冻干制剂在制备镇痛药物中的用途。

在本发明的一些实施方式中，所述的用途，其中，所述镇痛药物为治疗、预防或缓解神经痛的药物；

优选地，所述神经痛为选自如下的至少一种：坐骨神经痛、三叉神经痛、淋巴神经痛、多点运动神经痛、急性剧烈自发性神经痛、挤压神经痛以及复合神经痛；

优选地，所述神经痛由如下因素中的至少一种导致：癌症、癌症化疗、酒精中毒、糖尿病、硬化症、带状疱疹、机械伤、手术伤、艾滋病、头部神经瘫痪、药物中毒、工业污染中毒、骨髓瘤、慢性先天性感觉神经病、脉管炎、血管炎、局部缺血、尿毒症、儿童胆汁肝脏疾病、慢性呼吸障碍、多器官衰竭、脓毒病/脓血症、肝炎、卟啉症、维生素缺乏、慢性肝脏病、原生胆汁硬化、高血脂症、麻疯病、莱姆关节炎、感觉神经束膜炎或过敏症。

本发明的目的是提供一种提高芋螺毒素稳定性的方法，主要解决现存的芋螺毒素稳定性差的问题。通过在芋螺毒素溶液中添加冻干保护剂然后冷冻干燥的方法，将其制备为疏松干燥的粉末，可以提高芋螺毒素的稳定性。本方法确定了最佳的冻干保护剂种类和用量以及冷冻干燥方法，得到的芋螺毒素样品稳定性好，有效地维持了芋螺毒素的活性。

冻干粉针在临床使用时需要复溶，具体使用方法为：加1mL注射用水或者生理盐水使冻干粉针复溶，复溶后得到的芋螺毒素GeXIVA浓度应为1.5-2.5mg/mL，优选为1.8-2.2mg/mL或1.9-2.1mg/mL，更优选为2mg/mL。

本发明中，术语“粉饼”是药液经过冷冻干燥，因水分升华而得到的干燥疏松饼状物。冻干产品理想的外观是一个完整的饼状结构，有相同的大小和形状，有均匀的形状和质地，不存在明显的批间和批内差异。

本发明中，如果没有特别说明，术语“主药”或者“活性成分”均指芋螺毒素GeXIVA。

发明的有益效果

本发明取得了如下的技术效果(1)-(2)项中的任意一项或者多项：

(1)冻干制剂具有良好的外观；

(2)冻干制剂中芋螺毒素的稳定性良好。

附图说明

图1：冷冻干燥过程温度控制程序。

图2A-图2O：分别是冻干制剂样品1-15在加速30天后的冻干粉针形态；其中，HZT表示海藻糖，PTT表示葡萄糖，GLC表示甘露醇，SLC山梨醇，GAS表示甘氨酸。

图3A-图3D：分别是冻干制剂样品16-19在加速30天后的冻干粉针形态。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例中用到的部分试剂和来源如下：

芋螺毒素GeXIVA由吉尔生化(上海)有限公司合成，其氨基酸序列按照SEQ ID NO:1，并且N末端起的第一个半胱氨酸与第二个半胱氨酸形成二硫键，N末端起的第三个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；羧基末端酰胺化。

海藻糖购自罗辅医药科技(上海)有限公司。

葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸购自北京凤礼精求医药股份有限公司。

芋螺毒素GeXIVA溶液的配制：用纯化水将芋螺毒素GeXIVA配制成4mg/mL的溶液，用于下面的制备例1-19。

冻干保护剂溶液的配制：将冻干保护剂海藻糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸分别用纯水配制成60mg/mL的溶液；用于下面的制备例1-15。在制备例16—19中，海藻糖和甘露醇分别配制成不同浓度的冻干保护剂溶液，分别是：60mg/mL、100mg/mL、160mg/mL、200mg/mL。

本发明涉及的部分试剂的缩写如下：

海藻糖：HZT

葡萄糖：PTT

甘露醇：GLC

山梨醇：SLC

甘氨酸：GAS

制备例1-15：冻干制剂样品1-15的制备

制备步骤如下：

(1)分别取上述4mg/mL的芋螺毒素GeXIVA溶液适量(例如0.5mL)；

(2)分别加入一种或两种上述的冻干保护剂溶液并摇匀；冻干保护剂溶液的总体积与芋螺毒素GeXIVA溶液的体积相同；

(3)将摇匀后的溶液分装至西林瓶中，每瓶1mL；

(4)将西林瓶放入冷冻干燥机，按照图1所示的温度控制程序进行冷冻干燥。

其中，前面步骤(2)中用的冻干保护剂如下面的表1所示。

表1：冻干制剂样品1-15所使用的冻干保护剂

按照上述制得冻干制剂样品1-15。

制备例16-19：冻干制剂样品16-19的制备

制备步骤如下：

(1)分别取上述4mg/mL的芋螺毒素GeXIVA溶液适量；

(2)按照每0.5mL芋螺毒素GeXIVA溶液，分别加入0.25mL海藻糖溶液与0.25mL甘露醇溶液并摇匀；

(3)将摇匀后的溶液分装至西林瓶中；

(4)将西林瓶放入冷冻干燥机，按照图1所示的温度控制程序进行冷冻干燥。

其中，步骤(2)中用的冻干保护剂如下面的表2所示。

表2：冻干制剂样品16-19所使用的冻干保护剂

按照上述制得冻干制剂样品16-19。

制备例20-25：冻干制剂样品20-25的制备

制备步骤如下：

(1)分别取上述4mg/mL的芋螺毒素GeXIVA溶液适量；

(2)按照每0.5mL芋螺毒素GeXIVA溶液，分别加入0.25mL海藻糖溶液(浓度60mg/mL)与0.25mL甘露醇溶液(浓度60mg/mL)并摇匀；

(3)将摇匀后的溶液分装至西林瓶中；

(4)将西林瓶放入冷冻干燥机，分别按照表3-表8所示的温度控制程序进行冷冻干燥。

表3：制备例20冻干工艺参数

表4：制备例21冻干工艺参数

工艺参数	参数设定
		预冻温度	-30℃
预冻时间	4h
		一次升华温度	0℃
一次升华时间	10—12h
		二次升华温度	15℃
二次升华时间	6—8h
		真空度	10—30Pa

表5：制备例22冻干工艺参数

表6：制备例23冻干工艺参数

工艺参数	参数设定
		预冻温度	-40℃
预冻时间	4h
		一次升华温度	5℃
一次升华时间	10—12h
		二次升华温度	15℃
二次升华时间	6—8h
		真空度	10—30Pa

表7：制备例24冻干工艺参数

表8：制备例25冻干工艺参数

工艺参数	参数设定
		预冻温度	-40℃
预冻时间	4h
		一次升华温度	0℃
一次升华时间	10—12h
		二次升华温度	40℃
二次升华时间	6—8h
		真空度	10—30Pa

按照上述制得冻干制剂样品20-25。

实验例1：冻干制剂样品1-15的稳定性考察

1.实验样品：

前面的制备例1-15制得的冻干制剂样品1-15。

2.实验方法

冷东干燥后样品放置加速条件(40℃、相对湿度75％、自然光)，5天后，以外观(肉眼观察判断外观有无明显变化)和主药(芋螺毒素GeXIVA)含量两个评价指标综合对样品的稳定性进行考察。含量通过高效液相色谱法测定，具体方法、试剂和仪器如下：

色谱条件：C18色谱柱；流动相A：0.05％三乙胺溶液(硫酸调节pH至2.5)；流动相B：乙腈；流动相A:B＝86:14；检测波长：215nm；流速:1.0mL/min；柱温：40℃。等度洗脱。

试剂：三乙胺、硫酸、乙腈、水；仪器：高效液相色谱仪(Thermo U3000)、C18色谱柱。

3.实验结果

如图2A-图2O和表9所示。

表9：样品1-15的加速实验结果

a：表9中的0天含量指的是GeXIVA的含量。考虑到采用的原料药纯度可能并非100％，而且表中数据是绝对含量(绝对含量＝供试样品峰面积/对照品峰面积*100％)，没有进行进一步的换算成相对含量，所以得到的0天含量最高的也不是100％。

另外，表9中的n.a.表示检测不到。原因是主药含量已经特别低，低至目前HPLC的方法检测不到，表明该样品的主药几乎全部降解，说明该处方对于主药GeXIVA没有明显的保护作用。

结果显示：

从含量指标来看，单用海藻糖或者联合使用海藻糖与甘露醇作为优选的冻干保护剂，能够有效提高芋螺毒素的稳定性；

从外观形态来看，单独使用海藻糖的外观形态不佳，满足不了上市药品的要求，而采用海藻糖与甘露醇的组合呈现出极佳的外观形态，符合上市药品的标准。

综上，筛选获得甘露醇与海藻糖作为冻干保护剂以提高芋螺毒素的稳定性，同时也满足将来其可能作为上市药品的外观需求。

另外，HZT+GAS、HZT+PEG和GLC+GAS这三组虽然外观良好，但是稳定性只能保持在加速10天左右，放置时间长之后，主药不稳定，产生降解，不能维持多肽的稳定。

实验例2：冻干制剂样品16-19的稳定性考察

1.实验样品：

前面的制备例16-19制得的冻干制剂样品16-19。

2.实验方法

冷东干燥后样品放置30天后，以外观和主药(芋螺毒素GeXIVA)含量两个评价指标综合对样品的稳定性进行考察。具体地，将16-19四个样品，每个样品取4份，放置4个不同条件，如表10。其中：

高温条件：样品放置于40℃烘箱，室内正常湿度，避光；

高湿条件：样品放置于95％的高湿箱中，温度为室温，避光；

光照条件：样品放置于光照箱中，光照为4500±500Lx，光源为日光灯管，温度、湿度为室温及正常室内湿度；

加速条件：加速30天的实验条件与实验例1相同。

含量＝供试品峰面积/对照品峰面积*100％。

3.实验结果

如图3A-图3D和表10所示。

表10：样品16-19的加速实验结果

注：含量理论值应为100％，但分析方法允许有2％的误差，因而可能会出现超过100％的数值。

结果显示，样品16-18的稳定性都满足要求(主药的含量应维持在95％—105％)，且明显好于样品19，其中样品16和17的稳定性更好一些，样品16的稳定性最佳。另外，因为西林瓶使用胶塞密封，因而高湿对于样品的影响不大。而光照和高温以及加速条件对于样品有一定的影响，会造成主药含量的降低，但仍在标准范围内(含量维持在95％-105％)。

结果表明，在冻干之前，海藻糖和甘露醇联用的冻干保护剂含量为30mg/mL-80mg/mL，样品16-18的稳定性都满足要求；冻干保护剂含量为30mg/mL-50mg/mL的效果更好一些，冻干保护剂含量为30mg/mL的效果最好。

结果还表明，海藻糖和甘露醇联用的冻干保护剂含量高于100mg/mL时，稳定性产生问题；另外，如果冻干保护剂用量明显低于30mg/mL，对于外观的完整性具有一定的风险。

实验例3：冻干制剂样品20-25的稳定性考察

1.实验样品：

前面的制备例20-25制得的冻干制剂样品20-25。

2.实验方法

参照实验例2。

3.实验结果

如表11所示。

表11：样品20-25的加速实验结果

结果显示：

预冻温度对于样品的质量影响不大(样品20预冻温度为-40℃，样品21预冻温度为-30℃)，产品均能满足标准，但是样品20的稳定性稍优于样品21，表明采用-40℃作为预冻温度，样品的稳定性更佳；

一次升华温度对于样品的质量影响较大(样品20、样品22和样品23的一次升华温度分别为0℃、-5℃和5℃)。当一次升华温度低于0℃时，样品20与样品22的质量符合标准，而一次升华温度设定为5℃时，样品23的质量不符合标准，表明一次升华温度需控制在0℃以下；

二次升华温度对于样品的质量影响也很大(样品20、样品24和样品25的二次升华温度分别为15℃、25℃和40℃)，当二次升华温度为15℃时，样品20的质量符合标准，而二次升华温度超过15摄氏度达到25℃(样品24)、40℃(样品25)时，样品不满足要求，而且随着二次升华温度的升高，样品的质量随之降低，表明二次升华的温度设定在15℃以下为宜。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

SEQUENCE LISTING

<110> 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院

<120> 一种芋螺毒素药物组合物及其冻干制剂

<130> IDC200282

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 28

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> 人工序列

<400> 1

Thr Cys Arg Ser Ser Gly Arg Tyr Cys Arg Ser Pro Tyr Asp Arg Arg

1 5 10 15

Arg Arg Tyr Cys Arg Arg Ile Thr Asp Ala Cys Val

20 25

Claims (10)

1.一种芋螺毒素药物组合物，包括如下成分：

芋螺毒素 1-3重量份，

海藻糖 10-40重量份，和

甘露醇 10-40重量份。

2.根据权利要求1所述的芋螺毒素药物组合物，其特征在于如下的(1)-(3)项中的任意1项、任意2项或者全部3项：

(1)所述芋螺毒素为1.5-2.5重量份，优选为1.8-2.2重量份或1.9-2.1重量份，更优选为2重量份；

(2)所述海藻糖为15-40重量份、10-25重量份、15-25重量份或者15重量份；

(3)所述甘露醇为15-40重量份、10-25重量份、15-25重量份或者15重量份。

3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述芋螺毒素为序列如SEQ ID NO:1所示的多肽或其可药用盐例如醋酸盐；

优选地，所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第二个半胱氨酸形成二硫键，并且第三个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；或所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第三个半胱氨酸形成二硫键，并且第二个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键；或所述芋螺毒素的N末端起的第一个半胱氨酸与第四个半胱氨酸形成二硫键，并且第二个半胱氨酸与第三个半胱氨酸形成二硫键；

优选地，所述芋螺毒素的羧基末端是酰胺化的。

4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述海藻糖与甘露醇的重量比为(0.8-1.2)：1、(0.9-1.1)：1或者1：1。

5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的芋螺毒素药物组合物，其中，所述芋螺毒素药物组合物为冻干制剂或水溶液；

优选地，所述药物组合物的单位剂量以芋螺毒素计为1.5-2.5mg，优选为1.8-2.2mg/mL或1.9-2.1mg，更优选为2mg；

优选地，所述水溶液中芋罗毒素的含量为1.5-2.5mg/mL，优选为1.8-2.2mg/mL或1.9-2.1mg/mL，更优选为2mg/mL。

6.一种芋螺毒素药物冻干制剂，其由权利要求1至5中任一权利要求所述的芋螺毒素药物组合物制得。

7.一种制备权利要求6所述的芋螺毒素冻干制剂的方法，包括如下步骤：

(1)制备芋螺毒素、海藻糖与甘露醇的水溶液；

(2)将得到的水溶液进行冻干；

优选地，所述水溶液为权利要求5中所述的水溶液。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，步骤(2)中的冻干工艺选自如下的A-B或者a-c：

A.预冻：西林瓶放入冻干机后，压缩机打开，使冻干机内温度降低，冷冻室温度降至-30℃至-40℃时，维持3-4小时，对样品进行预冻；

B.一次升华：升温至-5℃至0℃并维持10-12小时；

C.二次升华：升温至15℃维持6-8小时；

优选地，冻干过程的真空度维持在10-30Pa；

或者

a.预冻：西林瓶放入冻干机后，压缩机打开，使冻干机内温度降低，冷冻室温度降至-40℃时，维持3小时，对样品进行预冻；

b.一次升华：升温至-30℃并维持2小时、升温至-20℃并维持3小时、升温至-10℃并维持2小时、升温至0℃维持1小时；

c.二次升华：升温至10℃维持1小时，最后升温至15℃维持并3小时；

优选地，冻干过程的真空度维持在10-30Pa。

9.权利要求1至5中任一权利要求所述的芋螺毒素药物组合物或者权利要求6所述的芋螺毒素冻干制剂在制备镇痛药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其中，所述镇痛药物为治疗、预防或缓解神经痛的药物；

优选地，所述神经痛为选自如下的至少一种：坐骨神经痛、三叉神经痛、淋巴神经痛、多点运动神经痛、急性剧烈自发性神经痛、挤压神经痛以及复合神经痛；

优选地，所述神经痛由如下因素中的至少一种导致：癌症、癌症化疗、酒精中毒、糖尿病、硬化症、带状疱疹、机械伤、手术伤、艾滋病、头部神经瘫痪、药物中毒、工业污染中毒、骨髓瘤、慢性先天性感觉神经病、脉管炎、血管炎、局部缺血、尿毒症、儿童胆汁肝脏疾病、慢性呼吸障碍、多器官衰竭、脓毒病/脓血症、肝炎、卟啉症、维生素缺乏、慢性肝脏病、原生胆汁硬化、高血脂症、麻疯病、莱姆关节炎、感觉神经束膜炎或过敏症。

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