CN112305140A - 一种检测体内精神药物及其代谢物的方法和应用 - Google Patents

一种检测体内精神药物及其代谢物的方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种采用超高效液相色谱‑紫外检测法同时检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，S1色谱条件：(1)色谱柱：C18色谱柱；(2)流动相：A相为0.05v/v％甲酸‑水溶液；且B相为0.05v/v％甲酸‑甲醇溶液；(3)检测器为紫外检测器；通过梯度洗脱程序实现了常见精神疾病药物及其代谢物的分离分析，本发明采用的分离分析方法简单，且不使用昂贵质谱，对于指导临床用药以及分析样本具有显著地学术意义和经济价值。

Description

一种检测体内精神药物及其代谢物的方法和应用
技术领域
本发明涉及血药浓度的检测领域，具体涉及一种检测体内精神药物及其代谢物的方法和应用。
背景技术
抗精神病药物(Antipsychotic drugs)又称强安定药或神经阻滞剂(Neuroleptic)。是一组用于治疗精神分裂症及其它精神病性精神障碍的药物。在通常的治疗剂量并不影响患者的智力和意识，却能有效地控制患者的精神运动兴奋、幻觉、妄想、敌对情绪、思维障碍和异常行为等精神症状。抗抑郁药(antidepressive drugs)是指一组主要用来治疗以情绪抑郁为突出症状的精神疾病的精神药物。与兴奋药不同之处为只能使抑郁病人的抑郁症状消除，而不能使正常人的情绪提高。
治疗药物浓度监测是指在临床进行的药物治疗中，在指定的时间间隔测量患者血液中特定药物的浓度。现阶段国内临床血药浓度监测的方法：主要有高效液相色谱法(HPLC)、放射免疫法(RIA)、气相色谱法(GC)和液相串联质谱法(LC-MS)等。由于临床病人常常同时服用多种精神基本疾病类药物，高效液相色谱紫外检测方法检测时如果不能完全实现药物的色谱分离，容易存在干扰，影响定量结果；高效液相色谱串联质谱是以质谱仪为检测手段，集高效液相色谱仪的高分离能力、质谱仪的高灵敏度和高选择性于一体的强有力分析检测工具。质谱检测虽可以避免干扰定量问题，但是由于使用质谱，不仅设备较贵，而超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。如今，超高效液相色谱仪主要应用于：(1)药物分析，如天然产物中复杂组分的分析；(2)生化分析，如血液、血清、毛发等蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品；(3)食品分析，如食品中农药残留的检测；(4)环境分析，如水中微囊藻毒素的检测；(5)其他，如化妆品中违禁品的检测超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的促进。
发明内容
为克服现有技术缺陷，本发明采用了以下技术方案：
一种检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，所述方法为采用超高效液相色谱-紫外检测法(即UPLC-UV法)，包括以下步骤：
S1色谱条件：(1)色谱柱：C18色谱柱；(2)流动相：A相为甲酸-水溶液，B相为甲酸-甲醇溶液；(3)检测器为紫外(UV)检测器；
S2工作溶液的配制：
S21内标溶液的制备包括：精密吸取适量卡马西平标准品，先用少量甲醇溶解，再用甲醇-水溶液定容，配制成卡马西平标准品溶液，再用甲醇-水溶液稀释至一定浓度，即得卡马西平内标溶液；
S22混合标准品溶液的制备包括：精密称定适量各精神疾病类药物及其其代谢物标准品、精密吸取所述S21制备的适量内标溶液混合后加入适量空白血清，再加入甲基叔丁基醚，涡旋后离心，获得上清液，将所述上清液干燥后再加入甲醇-水溶液复溶，即得；
S23供试品溶液的制备包括：精密吸取适量所述S21制备的内标溶液与待测血清或头发样品混合，然后加入氢氧化钠水溶液，加入甲基叔丁基醚，涡旋后离心，获得上清液，将所述上清液干燥后再加入甲醇-水溶液复溶，即得；
S3测定法：将混合标准品溶液和供试品溶液分别注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序，得到色谱图，获得所述精神类药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；
进一步的，所述精神疾病类药物及其代谢物包括奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、喹硫平、氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑以及帕罗西汀；
进一步的，S1所述的色谱条件包括：色谱柱：采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，其规格为：直径2.1mm*长50mm，其填料粒径为1.7μm；
进一步的，S1所述的色谱条件中：流动相：A相为0.05v/v％甲酸-水溶液；B相为0.05v/v％甲酸-甲醇溶液；
进一步的，S1所述的色谱条件中：所述紫外检测器为VWD或DAD检测器，优选DAD检测器；
更进一步的，S1所述的色谱条件中：所述紫外检测器的检测波长λmax为254nm、285nm或全波长；
进一步的，S1所述的色谱条件还包括：(4)流动相流速为0.1～0.3mL/min，优选0.2mL/min；(5)柱温为35～45℃，优选40℃；(6)供试品溶液和标准品溶液进样量均为1.0～20.0μL；优选进样量10.0μL；
进一步的，步骤S21内标溶液的制备具体包括：
精密吸取1～30mg卡马西平标准品，先用1～30mL甲醇溶解，再用40～70％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1～0.5mg/mL的卡马西平储备溶液，再用40～70％v/v甲醇-水溶液稀释至1～5μg/mL，即得内标溶液；优选的，精密称定20mg卡马西平标准品；优选的，用10mL甲醇溶解；优选的，稀释至2.5μg/mL；
S22混合标准品溶液的制备具体包括：
S221：分别精密称定各精神类疾病药物标准品约1～30mg，先用1～30mL溶剂溶解后，再用40～70％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1～0.5mg/mL的混标母液；进一步的，所述各精神类疾病药物标准品分别为：奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、富马酸喹硫平、盐酸氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、盐酸帕罗西汀；进一步的，所述溶剂为甲醇或二甲基亚砜(DMSO)；更进一步的，S221：分别精密称定各精神类疾病药物标准品约20mg，除阿立哌唑、脱氢阿立哌唑以外，其余药物先用1～30mL甲醇溶解(优选10mL甲醇溶解)，且阿立哌唑、脱氢阿立哌唑用1～30mLDMSO溶解(优选10mLDMSO)，待溶解完所有药物，再用40～70％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1～0.5mg/mL的混标母液；优选的，精密称定各精神类疾病药物标准品20mg；优选的，所述甲醇-水溶液浓度50％v/v；优选的，所述混标母液的浓度为0.2mg/mL；
S222：将上述混标母液用40～70％v/v甲醇-水溶液进行稀释，配制成浓度为5-50μg/mL的标准溶液，优选稀释至20μg/mL；优选的，所述甲醇-水溶液浓度50％v/v；
S223：精密吸取上述标准溶液10～30μL至6～10mL离心管中，加入10～40μL步骤S21制备的内标溶液，氮气吹干后加入400～1000μL空白血清，第一次涡旋0.5～2min，然后加入100-400μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液以及甲基叔丁基醚2～7mL，第二次涡旋2～5min，再离心4～10min；优选的，精密吸取上述标准溶液20μL；优选的，所述离心管为7mL；优选的，所加入血清500μL；优选的，所述第一次涡旋1min；优选的，加入2mol/L的氢氧化钠水溶液200μL；所述加入甲基叔丁基醚3mL；优选的，所述第二次涡旋3min，优选的，所述离心5min；
S224：取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 40～70％v/v甲醇-水溶液复溶，涡旋1～5min，即得；优选的，加入80μL 50％v/v甲醇-水溶液复溶；优选的，涡旋时间为1min；
S23供试品溶液的制备：
其中，S231血清供试品的制备包括以下步骤：
S2311：取10～40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与400～1000μL融化后的待测冷冻人血清或血浆样品混合至7～10mL离心管中，第一次涡旋0.5～2min，加入100～400μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液，以及甲基叔丁基醚2～7mL，再进行第二次涡旋2～5min；优选的，加入200μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液；优选的，所述内标溶液为20μL；优选的，取500μL样品至7mL离心管中；优选的，第一次涡旋1min；优选的，加入甲基叔丁基醚3mL；优选的，第二次涡旋3min；
S2312：将涡旋后离心管以速度为2500～5000转/分离心4～10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 40～70％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5～2min，即得；优选的，所述离心转速为3000转/分；优选的，所述离心5min；优选的，加入80μL 50％v/v甲醇水溶液；优选的，涡旋1min；
其中，S232头发供试品的制备包括以下步骤：
S2321：取待测头发用丙酮、水依次清洗，干燥后剪碎，取10～40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与10～50mg待测头发样品混合至7～10mL离心管中，加入100～800μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液，第一次涡旋0.5～5min，超声1～4h，以及甲基叔丁基醚2～7mL，再进行第二次涡旋2～5min；优选的，加入400μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液；优选的，所述内标溶液为20μL；优选的，取20mg头发样品至7mL离心管中；优选的，第一次涡旋1min；优选的，超声2.5h；优选的，加入甲基叔丁基醚3mL；优选的，第二次涡旋3min；
S2322：将涡旋后离心管以速度为2500～5000转/分离心4～10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 40～70％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5～2min，即得；优选的，所述离心转速为3000转/分；优选的，所述离心5min；优选的，加入80μL 50％v/v甲醇水溶液；优选的，涡旋1min；
进一步的，S3测定法中所述的梯度洗脱程序为0min 5％v/v B、3min15％v/v B、10min 20％v/v B、20min 30％v/v B、35min 40％v/v B、40min50％v/v B、45min 70％v/vB、48min 95％v/v B、52min 95％v/v B、52.1min 5％v/v B、70min 5％v/v B；
附图说明
图1标准品溶液色谱图
图2服用药物氯氮平病人的血清色谱图
图3服用药物帕利哌酮病人的血清色谱图
图4服用药物喹硫平病人的血清色谱图
图5服用氯丙嗪、氯氮平、利培酮病人头发色谱图
图6服用喹硫平、阿立哌唑病人头发色谱图
有益效果
本发明采用UPLC-UV法实现了人血或头发中含有的常见精神疾病药物及其代谢物的分离，本发明采用的分离分析方法简单，向供试品溶液中加入内标物质(卡马西平)同时进样，以准确定位样品峰峰位，采用简便方法对色谱峰进行了定位；另外，本发明采用较为经济的紫外检测器而不使用较为昂贵的质谱，实现了在线分离分析，对于指导临床用药以及分析样本具有显著地学术意义和经济价值。
具体实施方式
实施例1：完整检测方法以及标准品溶液进样
一种检测血或头发中精神药物及其代谢物的方法，所述方法为采用超高效液相色谱-紫外检测法(即UPLC-UV法)，包括以下步骤：
S1色谱条件：色谱柱：C18色谱柱，ACQUITY UPLC BEH C18直径2.1mm*长50mm，其填料粒径为1.7μm；流动相：A相为0.05％v/v甲酸-水溶液，B相为0.05％v/v甲酸-甲醇溶液；检测器为紫外(UV)DAD检测器，UVλmax：全波长扫描；柱温：40℃；流动相流速：0.2mL/min；进样量10.0μL；
S2工作溶液的配制包括：
S20：洗针溶液配制：用量筒量取700mL水至液相洗瓶中，再加入300mL甲醇，混合超声20min后，制得甲醇-水洗针溶液；
S21内标溶液的制备：精密吸取卡马西平标准品约20mg于100mL容量瓶中，先用10mL甲醇溶解，再用50％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.2mg/mL的卡马西平储备溶液，然后再用50％v/v甲醇-水溶液稀释为2.5μg/mL的内标溶液，即得；
S22混合标准品溶液制备具体包括：
S221：分别精密称定各精神类疾病药物标准品约20mg于100mL容量瓶中，除阿立哌唑、脱氢阿立哌唑以外，其余药物先用10mL甲醇溶解，且阿立哌唑、脱氢阿立哌唑用10mLDMSO溶解，待溶解完所有药物，再用50％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.2mg/mL的混标母液；S222：将上述混标母液用50％v/v甲醇-水溶液进行稀释，配制成浓度为20μg/mL的标准溶液；
S223：精密吸取上述标准溶液、内标溶液各20μL加入至7mL离心管中，吹干后加入500μL空白血清，第一次涡旋1min，然后加入200μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液，以及甲基叔丁基醚3mL，第二次涡旋3min，再离心5min；S224：取离心后的上清液氮气吹干后加入80μL50％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋1min，即得；
S3测定法：将标准品溶液注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序，得到色谱图，如图1所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；所述的梯度洗脱程序为0min 5％v/v B、3min 15％v/v B、10min 20％v/v B、20min 30％v/v B、35min 40％v/v B、40min 50％v/v B、45min 70％v/v B、48min 95％v/v B、52min 95％v/v B、52.1min 5％v/vB、70min 5％v/v B；所述的精神药物及其代谢物保留时间tR分别为奥氮平4.342min、氨磺必利5.617min、米氮平9.929min、9-OH利培酮14.560min、利培酮16.670min、去甲氯氮平17.720min、氯氮平19.667min、喹硫平23.002min、卡马西平27.359min(内标)、帕罗西汀32.217min、脱氢阿立哌唑35.523min、阿立哌唑36.390min、氯丙嗪38.509min。
实施例2样品血清：服用氯氮平药物的病人血清色谱图
S1色谱条件、S21内标溶液、S22混合标准品溶液的制备方法同实施例1；
S231血清供试品溶液制备：S2311：取20μL上述步骤S21制备的内标溶液氮气吹干后与500μL融化后的待测冷冻血清样品混合至7mL离心管中，第一次涡旋1min，加入200μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液，然后加入甲基叔丁基醚3mL，再进行第二次涡旋3min；S2322：将涡旋后离心管以速度为3000转/分钟离心5min，取离心后的上清液氮气吹干后加入80μL 50％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋1min，即得；
S3测定法：将供试品溶液注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序(同实施例1)，得到色谱图，如图2所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；所述的精神药物及其代谢物保留时间tR分别为：去甲氯氮平17.863min、氯氮平19.817min、卡马西平27.293min。
实施例3样品血清：服帕利哌酮(9-OH利培酮)病人的血清色谱图
S1色谱条件、S21内标溶液、S22混合标准品溶液的制备方法同实施例1；
S231供试品溶液制备、S3测定法同实施例2：如图3所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；帕利哌酮的保留时间tR为14.514min、卡马西平27.341min(内标)。
实施例4样品血清：服用药物喹硫平病人的血清色谱图
S1色谱条件、S21内标溶液、S22混合标准品溶液的制备方法同实施例1；
S231供试品溶液制备、S3测定法同实施例2：如图4所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；喹硫平的保留时间tR为23.037、卡马西平27.392min(内标)。
实施例5样品头发：服用氯丙嗪、氯氮平、利培酮的病人头发色谱图
S1色谱条件、S21内标溶液、S22混合标准品溶液的制备方法同实施例1；
S2321：取待测头发用丙酮、水依次清洗，干燥后剪碎，取20μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与40mg待测头发样品混合至7mL离心管中，加入400μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液，第一次涡旋1min，超声2.5h，以及甲基叔丁基醚3mL，再进行第二次涡旋3min；S2322：将涡旋后离心管以速度为3000转/分离心5min，取离心后的上清液氮气吹干后加入80μL 50％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋1min，即得。
S3测定法：将标准品溶液注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序(梯度洗脱程序为0min 5％v/v B、3min 15％v/v B、10min 20％v/v B、20min 30％v/v B、35min 40％v/v B、40min 50％v/v B、45min 70％v/v B、48min 95％v/v B、52min 95％v/v B、52.1min5％v/vB、70min 5％v/v B)得到色谱图，如图5所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，所述的精神药物及其代谢物保留时间tR分别为利培酮16.862min、去甲氯氮平17.490min、氯氮平19.422min、卡马西平27.393min(内标)、氯丙嗪38.217min，即得；
实施例6样品头发：服用喹硫平、阿立哌唑的病人头发色谱图
S1色谱条件、S21内标溶液、S22混合标准品溶液的制备方法同实施例1；
S2321：取待测头发用丙酮、水依次清洗，干燥后剪碎，取20μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与40mg待测头发样品混合至7mL离心管中，加入400μL浓度为2mol/L的氢氧化钠水溶液，第一次涡旋1min，超声2.5h，以及甲基叔丁基醚3mL，再进行第二次涡旋3min；S2322：将涡旋后离心管以速度为3000转/分离心5min，取离心后的上清液氮气吹干后加入80μL 50％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋1min，即得。
S3测定法：将标准品溶液注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序(梯度洗脱程序：0min 5％v/v B、3min 15％v/v B、10min 20％v/v B、20min 30％v/v B、35min 40％v/vB、40min 50％v/v B、45min 70％v/v B、48min 95％v/v B、52min 95％v/v B、52.1min 5％v/vB、70min 5％v/v B)，得到色谱图，如图1所示，获得所述精神药物及其代谢物保留时间(tR)，即得；所测得的精神药物及其代谢物保留时间tR分别为氨磺必利5.762min、9-OH利培酮14.369min、利培酮16.669min、喹硫平22.960min、卡马西平27.268min(内标)、脱氢阿立哌唑35.479min、阿立哌唑36.363min。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，均在本发明的保护范围内。

Claims (9)

1.一种检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述方法为采用超高效液相色谱-紫外检测法，包括以下步骤：
S1色谱条件：(1)色谱柱：C18色谱柱；(2)流动相：A相为甲酸-水溶液，B相为甲酸-甲醇溶液；(3)检测器为紫外(UV)检测器；
S2工作溶液的配制：
S21内标溶液的制备：精密吸取适量卡马西平标准品，先用少量甲醇溶解，再用甲醇-水溶液定容，配制成卡马西平标准品溶液，再用甲醇-水溶液稀释至一定浓度，即得卡马西平内标溶液；
S22混合标准品溶液的制备：精密称定适量各精神疾病类药物及其其代谢物标准品、精密吸取所述S21制备的适量内标溶液混合后加入适量空白血清，再加入甲基叔丁基醚，涡旋后离心，获得上清液，将所述上清液干燥后再加入甲醇-水溶液复溶，即得；
S23供试品溶液的制备：精密吸取适量所述S21制备的内标溶液与待测血清或头发样品混合，然后加入氢氧化钠水溶液，加入甲基叔丁基醚，涡旋后离心，获得上清液，将所述上清液干燥后再加入甲醇-水溶液复溶，即得；
S3测定法：将混合标准品溶液和供试品溶液分别注入超高效液相色谱仪，采用梯度洗脱程序，得到色谱图，获得所述精神类药物及其代谢物保留时间(tR)，即得。
2.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述精神疾病类药物及其代谢物包括奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、喹硫平、氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑以及帕罗西汀。
3.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，S1所述的色谱条件中：流动相：A相为0.05v/v％甲酸-水溶液；B相为0.05v/v％甲酸-甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，S1所述的色谱条件中：紫外检测器为VWD或DAD检测器；进一步优选的，所述紫外检测器的检测波长为254nm、285nm或全波长。
5.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，S1所述的色谱条件还包括：(4)流动相流速为0.1～0.3mL/min；(5)柱温为35～45℃；(6)供试品溶液和混合标准品溶液进样量均为1.0～20.0μL。
6.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述步骤S21内标溶液的制备具体包括：
精密称定1～30mg卡马西平标准品，先用1～30mL甲醇溶解，再用40～70％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1～0.5mg/mL的卡马西平储备溶液，再用40～70％v/v甲醇-水溶液稀释至1～5μg/mL，即得内标溶液。
7.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述S22混合标准品溶液的制备具体包括：
S221：分别精密称定各精神类疾病药物标准品约1～30mg，先用1～30mL溶剂溶解后，再用40～70％v/v甲醇-水溶液定容，配制成浓度为0.1～0.5mg/mL的混标母液；进一步的，所述各精神类疾病药物标准品分别为：奥氮平、9-OH利培酮、氯氮平、去甲氯氮平、利培酮、富马酸喹硫平、盐酸氯丙嗪、米氮平、氨磺必利、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、盐酸帕罗西汀；
S222：将上述混标母液用40～70％v/v甲醇-水溶液进行稀释，配制成浓度为5～50μg/mL的标准溶液；
S223：精密吸取上述标准溶液10～30μL至6～10mL离心管中，加入10～40μL步骤S21制备的内标溶液，氮气吹干后加入400～1000μL空白血清，第一次涡旋0.5～2min，然后加入100-400μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液以及甲基叔丁基醚2～7mL，第二次涡旋2～5min，再离心4～10min；
S224：取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 50％v/v甲醇-水溶液复溶，涡旋1～5min，即得。
8.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，所述S23供试品溶液的制备包括：S231制备血清供试品溶液或S232头发供试品溶液；
进一步的，所述S231人血供试品的制备包括以下步骤：
S2311：取10～40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与400～1000μL融化后的待测冷冻人血清或血浆样品混合至7～10mL离心管中，第一次涡旋0.5～2min，加入100～400μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液，以及甲基叔丁基醚2～7mL，再进行第二次涡旋2～5min；
S2312：将涡旋后离心管以速度为2500～5000转/分离心4～10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 40～70％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5～2min，即得；
进一步的，所述S232头发供试品的制备包括以下步骤：
S2321：取待测头发用丙酮、水依次清洗，干燥后剪碎，取10～40μL上述S21制备的内标溶液氮气吹干后与10～50mg待测头发样品混合至7～10mL离心管中，加入100-800μL浓度为1～3mol/L的氢氧化钠水溶液，第一次涡旋0.5～5min，超声1～4h，以及甲基叔丁基醚2～7mL，再进行第二次涡旋2～5min；S2322：将涡旋后离心管以速度为2500～5000转/分离心4～10min，取离心后的上清液氮气吹干后加入60～100μL 40～70％v/v甲醇水溶液复溶，涡旋0.5～2min，即得。
9.根据权利要求1所述的检测人血或头发中精神疾病类药物及其代谢物的方法，其特征在于，S3测定法中所述的梯度洗脱程序为：0min 5％v/v B、3min 15％v/v B、10min 20％v/v B、20min 30％v/v B、35min 40％v/v B、40min 50％v/v B、45min 70％v/v B、48min95％v/v B、52min 95％v/v B、52.1min 5％v/v B、70min 5％v/v B。
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