CN112295401B - 一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，包括步骤如下：将富锌酵母菌种经过斜面酵母培养、一级液体酵母培养、二级液体酵母培养、发酵罐培养、发酵罐分解活化、分离后，收集分离液，将得到的分离液进行灌装，即可制得去除农贸市场鱼腥味喷剂；本发明的喷剂不仅能够快速彻底并且有效清除农贸市场产生的鱼腥味，还可净化并保持空气自然清新，适用性广，并且安全无毒，对环境友好。
Description
技术领域
本发明属于空间净化技术领域，具体涉及一种去除农贸市场鱼腥味的制备方法。
背景技术
鱼肉营养丰富，其中的很多不饱和脂肪酸对婴幼儿的大脑发育有一定益处。作为“白肉”的典型的代表，营养学家对鱼肉也是赞赏有加，但是鱼的鱼腥味比较重，虽然越来越多的农贸市场所有者注重环境问题，但是环境问题依然是层出不穷，地面满是污渍、空气充满异味，特别是海鲜市场的鱼腥味更是让人受不了，这些不断被人诟病，解决这些问题迫在眉睫。
目前，国内外除腥去味剂种类繁多，品质及除腥效果也是良莠不齐。产品多数属于“遮盖型消腥”，并未有效消除对人体有害的化学的腥气成分，实际上依然存在；有些产品虽然除腥效果迅速，但不可避免地带来了二次污染；相对环境友好的生物除腥剂，可以通过生物酶对有机物气味进行分解、净化，使空气清新自然，但其缺点是对已存在的腥气几乎不起作用，而且反应时间较长。如何避免对环境造成二次伤害，开发出环境友好型除腥产品，使其既能快速消腥，又能持续、长效除腥，已成为人们的共同关注。
发明内容
针对上述情况在的不足，本发明具体涉及一种高效、低成本、无毒、无害、无副作用、无掩蔽剂、无残留、无二次污染的安全长效去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法。
本发明提供了一种去除农贸市场鱼腥味喷剂及其制备方法，所述去鱼腥味喷剂属于环境友好型产品，既能够彻底降解空气中的异味分子，又能够有效治理空气中的三甲胺、呱啶等有害气体，以达到标本兼治的目的。
本发明采用硫酸锌或葡萄糖酸锌做饲料喂养富锌酵母，通过富锌酵母在生长过程中对锌进行吸收和转化，使锌与酵母蛋白和多糖结合，它们之间的连接既可以是以共价键结合的形式也可以是配位键为主的螯合形式，即制得蛋白锌。将制备好的蛋白锌和蛋白酶一起溶于去离子水，分解活化后的游离的多肽锌螯合物可以和腥味中的氮原子发生键合作用形成强化合键，从而消除腥味。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，具体工艺如下：
将0.1-0.3mL富锌酵母菌种经过斜面酵母培养、一级液体酵母培养、二级液体酵母培养、发酵罐培养、发酵罐分解活化、分离后，收集分离液，将得到的分离液进行灌装，即可制得去除农贸市场鱼腥味喷剂。
（1）斜面酵母培养：将0.1-0.3mL富锌酵母菌种接种到装有含糖量为5-20wt%、锌盐（硫酸锌或葡萄糖酸锌）浓度为80-280μg/mL、pH值为5-6.5的麦芽汁A（麦芽汁A的体积为8-10mL）的固体斜面上，在26-35℃培养24-48小时。
（2）一级液体酵母培养：将经过斜面酵母培养后的富锌酵母菌种接种到装有含糖量为10-30wt%、锌盐（硫酸锌或葡萄糖酸锌）浓度为80-280μg/mL、pH值为5-6.5的麦芽汁B（麦芽汁B的体积为150-600mL）的三角瓶中，在26-35℃培养24-48小时。
（3）二级液体酵母培养：将经过一级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为5-25wt%的糖溶液(糖溶液为麦芽汁或糖蜜或麦芽汁和糖蜜的混合物)、质量浓度为80-280μg/mL的锌盐（锌盐为硫酸锌或葡萄糖酸锌）、pH值为4-6.5的培养液A（培养液A体积为10-40L）的卡氏培养瓶中，在26-35℃培养18-48小时。
（4）发酵罐培养：将经过二级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为5-25wt%的糖溶液(糖溶液为麦芽汁或糖蜜或麦芽汁和糖蜜的混合物)、质量浓度为80-280μg/mL的锌盐（锌盐为硫酸锌或葡萄糖酸锌）、1～5wt%磷酸氢氨、pH值为4.5～6.5的培养液B（培养液B的体积为15-200m3）的发酵罐中，所用的营养源采用流加方式，锌盐分批次加入，在26-35℃培养14-36小时。
（5）发酵罐分解活化：将经过发酵罐培养后的菌种混合液接种到装有含蛋白酶量为80-150wt%、去离子水100-160wt%的培养液C（培养液C的体积为15～200m3）的发酵罐；在26-35℃培养14-36小时；所用的蛋白酶采用流加方式；蛋白酶为胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中任意一种。。
（6）分离：将经过发酵罐分解活化后的菌种混合液采用叠片式分离机分离，再用真空转鼓过滤或者用板框压滤，收集分离液。
（7）灌装：将得到的分离液采用灌装机灌装到按压式的瓶子中，游离的活化锌因子含量达到5000-8000mg／kg，便可以直接使用,即制得所述去除农贸市场鱼腥味喷剂。
本发明用硫酸锌或葡萄糖酸锌做饲料喂养酵母，通过酵母在生长过程中对锌进行吸收和转化，使锌与酵母蛋白和多糖结合，它们之间的连接既可以是以共价键结合的形式也可以是配位键为主的螯合形式，制得蛋白锌，将制备好的蛋白锌和蛋白酶一起溶于去离子水，分解活化后的游离的多肽锌螯合物可以和腥味中的氮原子发生键合作用形成强化合键，从而消除腥味，即制成除鱼腥味喷剂成品。
蛋白锌是蛋白质和锌的结合物，它们之间的连接既可以是以共价键结合的化合物形式，也可以是以配位键为主的螯合物形式，多肽锌螯合物是组成蛋白锌的主要形式，蛋白酶水解蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称，按其降解多肽的方式分成内肽酶和端肽酶两类。内肽酶可把蛋白质中大分子量的多肽链从中间切断，形成分子量较小的朊和胨，形成长短不一的多肽。蛋白锌中肽链被切断成大分子的多肽链，形成长短不一的多肽锌螯合物。多肽锌螯合物中的锌在弱碱性条件（氨，三甲胺）生成离子溶度积很小的氢氧化锌，多肽和腥味中的三甲胺等臭气分子结合生成多肽类大分子化合物，从而达到去除腥味的目的。
由于采用了以上技术，本发明较现有技术相比，具有的有益效果如下：
1、本发明的腥味除腥剂整个生产工艺是生物发酵法来完成的，发酵罐密封性好，操作简单，传动平稳，价格实惠，质量保证。
2、本发明的腥味除腥剂，除腥迅速，农贸市场产生的气味与除腥剂接触后迅速被催化反应，腥味即刻消失，且持久除腥适用条件广，在不同的气候、湿度、温度条件下皆可发挥除腥作用。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐明本发明。
实施例1：
一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法具体工艺如下：
斜面酵母培养→一级液体酵母培养→二级液体酵母培养→发酵罐培养→发酵罐分解活化→分离后，收集分离液→将得到的分离液灌装。
（1）斜面酵母培养：将0.2mL富锌酵母菌种接种到装有含糖量为5wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为100μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁A（麦芽汁A的体积为9mL）固体斜面上，在30℃培养48小时。
（2）一级液体酵母培养：将经过斜面酵母培养后的富锌酵母菌种接种到装有含糖量为10wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为100μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁B（麦芽汁B的体积为150mL）的三角瓶中，在30℃培养48小时。
（3）二级液体酵母培养：将经过一级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖为5wt％的麦芽汁、质量浓度为100μg/mL的葡萄糖酸锌、pH值为6.0的培养液A（培养液A体积为10L）的卡氏培养瓶中，在30℃培养48小时。
（4）发酵罐培养：将经过二级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为5wt％的麦芽汁、质量浓度为100μg/mL的葡萄糖酸锌、1wt％磷酸氢氨、pH值为6.0的培养液B（培养液B的体积为15m3）的发酵罐中，所用的营养源采用流加方式，葡萄糖酸锌分批次加入，在30℃培养36小时。
（5）发酵罐分解活化：将经过发酵罐培养后的菌种混合液接种到装有含蛋白酶量为80wt%、去离子水100wt%的培养液C（培养液C的体积为15m3）的发酵罐；所用的蛋白酶采用流加方式，在30℃培养36小时。其中，蛋白酶为木瓜蛋白酶。
（6）分离：将经过发酵罐分解活化后的菌种混合液采用叠片式分离机分离，再用真空转鼓过滤，收集分离液。
（7）灌装：将得到的分离液采用灌装机灌装到按压式的瓶子中，游离的多肽锌螯合物含量达到5000mg/kg，便可以直接使用,即制得所述去除农贸市场鱼腥味喷剂。
实施例2：
一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法具体工艺如下：
斜面酵母培养→一级液体酵母培养→二级液体酵母培养→发酵罐培养→发酵罐分解活化→分离后，收集分离液→将得到的分离液进行灌装。
(1)斜面酵母培养：将0.2mL富锌酵母菌种接种到装有含糖量为15wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为180μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁A（麦芽汁A的体积为9mL）的固体斜面上，在30℃培养48小时。
(2)一级液体酵母培养：将经过斜面酵母培养后的富锌酵母菌种接种到装有含糖量为20wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为180μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁B（麦芽汁B的体积为300mL）的三角瓶中，在30℃培养48小时。
（3）二级液体酵母培养：将经过一级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为10wt％的麦芽汁、质量浓度为180μg/mL的葡萄糖酸锌、pH值为6.0的培养液A（培养液A体积为20L）的卡氏培养瓶中，在30℃培养48小时。
（4）发酵罐培养：将经过二级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖为20wt％的麦芽汁、质量浓度为180μg/mL的葡萄糖酸锌、2wt％磷酸氢氨、pH值为6.0的培养液B（培养液B的体积为100m3）的发酵罐中，所用的营养源采用流加方式，葡萄糖酸锌分批次加入，在30℃培养36小时。
（5）发酵罐分解活化：将经过发酵罐培养后的菌种混合液接种到装有含蛋白酶量为110wt%、去离子水120wt%的培养液C（培养液C的体积为100m3）的发酵罐；所用的蛋白酶采用流加方式，在30℃培养36小时；其中，蛋白酶为木瓜蛋白酶。
（6）分离：将经过发酵罐分解活化后的菌种混合液采用叠片式分离机分离，再用真空转鼓过滤，收集分离液。
（7）灌装：将得到的分离液采用灌装机灌装到按压式的瓶子中，游离的多肽锌螯合物含量达到7000mg/kg，便可以直接使用,即制得所述去除农贸市场鱼腥味喷剂。
实施例3：
一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法具体工艺如下：
斜面酵母培养→一级液体酵母培养→二级液体酵母培养→发酵罐培养→发酵罐分解活化→分离后，收集分离液→将得到的分离液进行灌装。
(1)斜面酵母培养：将0.2mL富锌酵母菌种接种到装有含糖量为20wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为280μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁A（麦芽汁A的体积为9mL）的固体斜面上，在30℃培养48小时。
(2)一级液体酵母培养：将经过斜面酵母培养后的富锌酵母菌种接种到装有含糖量为30wt%、锌盐（葡萄糖酸锌）浓度为280μg/mL、pH值为6.0的麦芽汁B（麦芽汁B的体积为500mL）的三角瓶中，在30℃培养48小时。
（3）二级液体酵母培养：将经过一级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为25wt％的麦芽汁、质量浓度为280μg/mL的葡萄糖酸锌、pH值为6.0的培养液A（培养液A体积为40L）的卡氏培养瓶中，在30℃培养48小时。
（4）发酵罐培养：将经过二级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有含糖量为25wt％的麦芽汁、质量浓度为280μg/mL的葡萄糖酸锌、4wt％磷酸氢氨、pH值为6.0的培养液B（培养液B的体积为200m3）的发酵罐中，所用的营养源采用流加方式，葡萄糖酸锌分批次加入，在30℃培养36小时。
（5）发酵罐分解活化：将经过发酵罐培养后的菌种混合液接种到装有含蛋白酶量为140wt%、去离子水150wt%的培养液C（培养液C的体积为200m3）的发酵罐，所用的蛋白酶采用流加方式，在30℃培养36小时，其中，蛋白酶为木瓜蛋白酶。
（6）分离：将经过发酵罐分解活化后的菌种混合液采用叠片式分离机分离，再用真空转鼓过滤，收集分离液。
（7）灌装：将得到的分离液采用灌装机灌装到按压式的瓶子中，游离的多肽锌螯合物含量达到8000mg/kg，便可以直接使用,即制得所述去除农贸市场鱼腥味喷剂。
实施例4
对实施例1-3制备得到的去除农贸市场鱼腥味喷剂进行检测，结果如下：
测试例1
采用嗅觉测试评价除臭效果，嗅觉测试方法是根据人的嗅觉来评价气味强度和适与不适的方法，测定恶臭的特征参数（嗅阈值或浓度、感觉强度等）。成立6人嗅觉测试小组（18-45周岁，不吸烟、嗅觉正常人员），垃圾经实施例1-3制得的垃圾除臭剂处理之后效果评价指标分为：显著4分、良好3分、一般2分、较差1分、无效0分五个指标，共七个组，每组统计平均分，即最优为4分，最差为1分，试验组经过测评后，超过4人以上的测评指标才可作为测试结论，否则重新评价，具体结果见下表1。
表1模拟去鱼腥味喷剂试验的结果
由表1数据可知，实施例1-3制得去除鱼腥味喷剂可以有效除腥，经实施例3制得的去除鱼腥味喷剂能更有效地对鱼腥味进行除腥。
测试例2
选取6个可密闭空间，每个空间为1m3，每个空间内放1桶已产生恶臭的死鱼，每桶死鱼重5kg，室内温度控制在30-35℃，选择5个空间作为实施例制得的去鱼腥味喷剂试验用，将去鱼腥味喷剂直接喷淋在生活死鱼上，剩下的一个空间不使用去腥喷剂作为对照；在去腥喷剂喷淋后，每隔7天检测一次房间的三甲胺、呱啶浓度、以空白房间为对照分别计算出三甲胺浓度、呱啶浓度及去除率，监测时间35天，具体结果见下表2。所用的检测方法包括GB/T14678-1993空气质量-三甲胺、呱啶测定-气相色谱法，GB/T14675-199空气质量-恶腥的测定-三点比较式臭袋法。
表2模拟去鱼腥味喷剂试验的结果
由表2数据可知，实施例1-3制得的去鱼腥味喷剂可以有效除腥，实施例3的去鱼腥味喷剂效果最好，35天的臭气平均去除率为96.9%，本发明的去鱼腥味喷剂具备优异的除腥效果，且除腥持续时间可达至少35天。
上述实施例仅为本发明的优选技术方案，而不应视为对于本发明的限制，本发明的保护范围应以权利要求记载的技术方案，包括权利要求记载的技术方案中技术特征的等同替换方案为保护范围，即在此范围内的等同替换改进，也在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：将0.1-0.3mL富锌酵母菌种经过斜面酵母培养、一级液体酵母培养、二级液体酵母培养、发酵罐培养、发酵罐分解活化、分离后，收集分离液；将得到的分离液进行灌装，即可制得去除农贸市场鱼腥味喷剂；
发酵罐培养的步骤如下：将经过二级液体酵母培养后的菌种混合液接种到装有培养液B的发酵罐中进行培养；培养液B包括含糖量为5-25wt％的糖溶液、质量浓度为80-280μg/mL的锌盐以及1-5wt％磷酸氢氨；
发酵罐分解活化的步骤如下：将经过发酵罐培养后的菌种混合液接种到装有培养液C的发酵罐中进行培养；培养液C包括含蛋白酶量80-150wt%以及去离子水100-160wt%；蛋白酶为胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中任意一种；培养液C的体积为15-200m3。
2.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于：发酵罐培养中，培养液B的体积为15-200m3、pH值为4.5-6.5。
3.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于：发酵罐培养中，培养的温度为26-35℃，培养时间为14-36小时。
4.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于：发酵罐培养中，糖溶液为麦芽汁、糖蜜中一种或两种；锌盐为硫酸锌或葡萄糖酸锌。
5.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于：发酵罐分解活化中，培养的温度为26-35℃，培养的时间为14-36小时。
6.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于，分离的步骤如下：将经过发酵罐分解活化后的菌种混合液采用叠片式分离机分离，再用真空转鼓过滤或者用板框压滤，收集分离液。
7.根据权利要求1所述的一种去除农贸市场鱼腥味喷剂的制备方法，其特征在于，灌装的步骤如下：将得到的分离液采用灌装机灌装到按压式的瓶子中，即制得所述去除农贸市场鱼腥味喷剂。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A preparation method of removing fishy smell spray in farmers' market Effective date of registration: 20210926 Granted publication date: 20210406 Pledgee: China Construction Bank Corporation Nanjing Zhongyangmen sub branch Pledgor: NANJING KAICHUANG XIETONG NANO TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2021980009883 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |