CN112285251B - 一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法，将样品甲酯化处理后采用气相色谱法测定，气相色谱的检测条件包括：色谱柱为聚乙二醇毛细管柱，分流比为46:1，升温程序为50℃～100℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，再以4℃/min速率升至230℃保持10.5min。本发明方法采用简便、准确、高效，能够以有效地定性鉴别亚麻籽油的掺假。

Description

一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法及其用途

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法及其用途。

背景技术

亚麻是我国重要的经济作物，主要分布在西北和华北北部干旱、半干旱地区。其中，青海省亚麻种植历史悠久，其特有的高原地理和气候特征使得青海亚麻成为了一种具有栽培价值的油料作物。亚麻籽油是从亚麻籽中提取的油脂，主要含有亚麻酸、油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸五种脂肪酸，其中α-亚麻酸占脂肪酸总含量的50％以上，部分产地亚麻籽油α-亚麻酸含量可达65.84％。研究报道，α-亚麻酸是维持机体正常生理功能和生长发育的必需脂肪酸，具有提高免疫力、降血压、降血脂、预防心脑血管疾病等功能。因此，亚麻籽油在食品、医药领域有很好的应用价值。

脂肪酸作为植物油的主要成分，决定了植物油的营养价值。全面了解植物油中脂肪酸的分布组成，有助于区分植物油种类和监测油脂掺假。现有技术中对于脂肪酸的评价和植物油掺伪鉴别大多是利用气相指纹图谱的方法，但是所检测的成分较单一，且鉴别的油种少，故亟需建立一种采用气相色谱法对亚麻籽油脂肪酸进行检测，从而更全面的鉴别亚麻籽油的质量。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法及其用途，采用该方法建立的指纹图谱适用性广，能够准确鉴别多种掺假油种，提高产品的质量控制水平。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：

提供一种测定亚麻籽油脂肪酸的方法，采用气相色谱法测定，所述气相色谱的检测条件包括：

色谱柱：聚乙二醇毛细管柱；

分流比：45～48:1；

升温程序：50℃～100℃保持11～15min，以8～12℃/min速率升至175℃～185℃保持5～7min，再以1～1.5℃/min速率升至195℃～205℃并保持18～23min，再以3.5℃～4.5℃/min速率升至220℃～235℃保持10～11min。

进一步地，所述脂肪酸选自棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、饱和脂肪酸的一种或几种。

应用本发明的色谱条件，各脂肪酸分离效果较好，色谱峰无拖尾现象，可极大地提高检测效率。

在本发明的具体实施方式中，所述分流比：46:1；

所述升温程序：50℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，再以4℃/min速率升至230℃保持10.5min；

或100℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，再以4℃/min速率升至230℃保持10.5min。

在本发明的具体实施方式中，所述气相色谱的检测条件还包括以下的i～ⅴ中的一项或多项：

i色谱柱型号：Wonda Cap WAX；

ii色谱柱规格：60m×0.25mm×0.25μm；

ⅲ检测器温度：245℃～255℃，优选为250℃；

ⅳ流速：0.5～1.5ml/min，优选为1.0ml/min；

ⅴ进样口温度：245℃～255℃，优选为250℃。

在本发明的具体实施方式中，所述方法包括以下内容：

(1)制备内标溶液；

(2)制备对照品溶液；

(3)制备供试品溶液。

进一步地，制备内标溶液的步骤为：取十一酸甲酯加稀释剂定容至刻度；

制备对照品溶液的步骤为：取样品用稀释剂稀释到指定浓度；

制备供试品溶液的步骤为：将样品、稀释剂、内标溶液混合后，冷凝回流、冷却、分液萃取得到酯层，干燥、过滤收集滤液即得；

更进一步地，所述稀释剂选自正庚烷。

在本发明的具体实施方式中，亚麻籽油进行气相色谱测定前还包括甲酯化处理，所述甲酯化处理的方法为氢氧化钾-甲醇法；

进一步地，所述甲酯化的条件为：

酯化时间：55～65min；

酯化温度：45℃～55℃；

催化剂浓度：0.7～1.2mol/L KOH-甲醇溶液；

催化剂用量：0.5ml～1.5ml。

进一步地，所述甲酯化的条件为：

酯化时间：60min；

酯化温度：50℃；

催化剂浓度：1mol/L KOH-甲醇溶液；

催化剂用量：1.0ml。

本发明的酯化方法简单快速、重现性好。

本发明还提供了一种亚麻籽油指纹图谱，采用上述方法构建得到。

本发明所述指纹图谱在植物油掺伪识别中的用途。

本发明的有益效果是：

(1)本发明测定方法进行了方法学考察，根据该方法测定亚麻籽油多种脂肪酸制定了适用性广的气相色谱指纹图谱，可以更全面的检测亚麻籽油质量，提高产品的质量控制水平。

(2)本发明方法操作简便，效率高，精密度高、稳定性好，能够准确、有效的检测亚麻籽油质量。

(3)本发明方法建立的指纹图谱可以鉴别20％及以上大豆油、葵花籽油掺伪模型，10％及以上玉米油、花生油和菜籽油掺伪模型，30％以上的芝麻油掺伪模型。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所使用的附图做简单介绍：

图1为酯化时间对甲酯化反应的影响。

图2为酯化温度对甲酯化反应的影响。

图3为催化剂用量对甲酯化反应的影响。

图4为气相色谱条件优化图谱。

图5为40种亚麻籽油GC图谱叠加图。

图6为40种亚麻籽油标准指纹色谱图。

图7为不同植物油中主要脂肪酸的组成。

图8为指纹图谱与六种掺伪模型相似度关系；其中A-大豆油掺伪模型；B-玉米油掺伪模型；C-花生油掺伪模型；D-菜籽油掺伪模型；E-葵花籽油掺伪模型；F-芝麻油掺伪模型。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例所有数据平行测定三次，结果取平均值。

实施例1

一、材料与仪器

材料：40种胡麻籽(表1)。

表1 40种亚麻籽样品信息

试剂：十一酸甲酯、棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯对照品(西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司)；色谱正庚烷、色谱甲醇；石油醚、氢氧化钾、无水硫酸钠：分析纯。

仪器：GC-2030气相色谱仪(日本岛津)；SOX406脂肪测定仪(山东海能科学仪器有限公司)；HH-6数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)；FA2004B电子天平(上海佑科仪器仪表有限公司)。

二、试验方法

1.亚麻籽油的制备

亚麻籽清理、分拣、粉碎后得到亚麻籽粉，利用索氏抽提法(料液比0.06g/mL、温度70℃、时间8h)提取亚麻籽油。

2.酯化反应条件的优化

采用氢氧化钾-甲醇法，以总峰面积为指标，对酯化时间、酯化温度和催化剂用量三个因素进行优化。

(1)甲酯化时间的优化

精密称取100±0.1mg油样置于圆底烧瓶中，加入40mL甲醇及1ml KOH-甲醇溶液(1mol/L)，80℃条件下冷凝回流20、40、60、80、100min，回流过程中不间断摇动烧瓶，反应完成后，取出烧瓶冷却至室温，进行分液萃取，用10mL正庚烷洗涤烧瓶，并向分液漏斗中加入10mL蒸馏水，充分振摇后静置分层，此时上层为酯层，下层为水层，下层溶液用10mL正庚烷再萃取一次，萃取后的上层溶液与酯层合并。合并后的酯层用10mL蒸馏水洗涤，分离出酯层并加入适量无水硫酸钠干燥、过滤收集滤液，用正庚烷定容至25mL棕色容量瓶中。结果见图1，目标色谱法总峰面积随着酯化时间的延长呈现先升高后降低的趋势。酯化时间60min时，目标色谱峰总峰面积达到最大值，表明在此条件下甲酯化反应最完全，因此酯化时长最终选择60min。

(2)甲酯化温度的优化

精密称取100±0.1mg油样置于圆底烧瓶中，加入40mL甲醇及1mL KOH-甲醇溶液(1mol/L)，分别在40、50、60、70、80℃条件下冷凝回流60min，后续操作步骤如(1)，将得到的滤液用正庚烷定容至25mL棕色容量瓶中。结果见图2，在酯化温度为50℃条件下，甲酯化效果最佳，温度过高或高低都对甲酯化进程带来不利影响，因此酯化温度最终选择在50℃条件下进行。

(3)甲酯化催化剂用量的选择

精密称取100±0.1mg油样置于圆底烧瓶中，分别加入40mL甲醇及0.5、1、1.5、2、2.5mL KOH-甲醇溶液(1moL/L)，50℃条件下冷凝回流60min，后续操作步骤如(1)，将得到的滤液用正庚烷定容至25mL棕色容量瓶中。结果见图3，KOH-甲醇溶液添加量为1mL时，目标峰总峰面积达到最大值，因此KOH-甲醇溶液添加量最终选择1ml，利于反应进行。

3.气相色谱条件优化

选用WAX色谱柱，主要对升温程序进行考察，根据脂肪酸甲酯的沸点，色谱柱的起始温度选为50、100℃进行比较。图4中a的升温程序为100℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，4℃/min速率升至230℃保持10.5min；b的升温程序为50℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，4℃/min速率升至230℃保持10.5min。在两种温度条件下测试溶液色谱图分离程度和峰形差别不大，仅色谱峰的保留时间因起始温度的不同而不同。为了缩短色谱分析时长，选择起始温度为100℃。在此条件下各脂肪酸分离效果较好，色谱峰无拖尾现象，能够满足实验要求。

最终选取的色谱条件：色谱柱(Wonda Cap WAX，60m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流比46:1；色谱柱流速1mL/min；进样量1μL；升温程序：100℃保持13min，以10℃/min速率升至180℃保持6min，再以1℃/min速率升至200℃并保持20min，再以4℃/min速率升至230℃保持10.5min。

4.内标溶液的配制

取十一酸甲酯500mg，放置于50mL棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度，即得浓度为10mg/mL的十一酸甲酯内标溶液。

5.对照品溶液的配制

取棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯对照品各100mg，分别置于10mL棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度得浓度为10mg/mL的单标对照品溶液。

分别取棕榈酸甲酯对照品3.5mL、硬脂酸甲酯对照品3.5mL、油酸甲酯对照品3.5mL、亚油酸甲酯对照品3.5mL、亚麻酸甲酯对照品8.5mL，置于25mL棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度，即得混标对照溶液。

6.供试品溶液的制备

精密称取100±0.1mg油样置于圆底烧瓶中，加入40mL甲醇及1mL KOH-甲醇溶液(1mol/L)，加入0.5mL内标溶液，50℃条件下冷凝回流60min，回流过程中不间断摇动烧瓶，反应完成后，取出烧瓶冷却至室温，进行分液萃取，用10mL正庚烷洗涤烧瓶，并向分液漏斗中加入10mL蒸馏水，充分振摇后静置分层，此时上层为酯层，下层为水层，下层溶液用10mL正庚烷再萃取一次，萃取后的上层溶液与酯层合并。合并后的酯层用10mL蒸馏水洗涤，分理出酯层并加入适量无水硫酸钠干燥、过滤收集滤液，用正庚烷定容至25mL棕色容量瓶中。内标法定量。

40种油样中五种主要脂肪酸含量信息见表2。

表2 40种油样的脂肪酸含量测定结果

注：P-棕榈酸；S-硬脂酸；O-油酸；L-亚油酸；Ln-亚麻酸；SFA-饱和脂肪酸(棕榈酸+硬脂酸)；UFA-不饱和脂肪酸(油酸+亚油酸+亚麻酸)，n＝3。

由表2得出，亚麻籽油中五种脂肪酸含量最高的是亚麻酸，含量高达42.14～60.39g/100g；其次是油酸、亚油酸、棕榈酸，含量分别为12.45～26.14g/100g、10.30～15.04g/100g、4.13～5.54g/100g；硬脂酸含量最低，为2.62～5.09g/100g。亚麻籽油中脂肪酸以不饱和脂肪酸UFA为主，UFA含量为SFA含量的9.69倍，UFA中亚麻酸、油酸、亚油酸含量比例为3.99：1.38：1.00，可能与气候、海拔、昼夜温差等条件有关。

另外40种亚麻籽油中亚麻酸含量最高的为QH-2(西宁湟源)亚麻籽油，UFA含量最高的为QH-28(海东民和2)亚麻籽油。不同产地、品种的亚麻籽油中脂肪酸含量存在一定的差异。除此之外，相同产地不同品种之间亚麻籽油中的脂肪酸分布也有差异，可能与不同地区气候和光照条件存在差异有关。这为亚麻种植过程中良种选育提供了理论依据。

7.方法学考察

(1)标准曲线及线性范围

精密移取0.2、0.5、1、3、5、7mL混标对照溶液置于10mL棕色容量瓶中，加入1mL内标溶液，正庚烷定容至刻度，既得不同浓度的系列标准溶液，GC进样分析，以对照品与内标物的质量浓度比为横坐标(X)，对照品与内标物的峰面积比为纵坐标(Y)，绘制标曲。结果详见表3，表明各脂肪酸甲酯在各自浓度范围内线性关系良好，能够满足测定要求。

表3 5种脂肪酸甲酯的标准曲线信息

(2)精密度实验

取同一品种的亚麻籽油(QH-27)经过甲酯化处理后，GC连续进样6次，计算油样中各脂肪酸甲酯峰面积与内标峰面积比值的RSD。结果表明棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯的RSD值分别为0.22％、0.27％、0.20％、0.18％、0.17％，表明该方法精密度良好。

(3)重复性实验

取同一品种的亚麻籽油(QH-27)6份，甲酯化处理后，连续进样分析，计算油样中各脂肪酸甲酯含量的RSD。结果表明棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯的RSD值分别为1.81％、1.91％、1.79％、1.64％、1.44％，由此可得该方法重复性良好。

(4)稳定性实验

取同一品种的亚麻籽油(QH-27)，甲酯化处理后，在室温下放置0、2、4、8、12、24h后进样分析，计算各脂肪酸甲酯峰面积与内标峰面积比值的RSD。棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯24h的RSD值分别为0.24％、0.30％、0.13％、1.56％、0.18％、0.20％，表明样品在制备后24h内稳定性良好。

(5)加样回收实验

取同一品种的亚麻籽油(QH-27)9份，分别加入低、中、高三个浓度梯度的混标对照溶液，计算平均回收率及RSD。结果详见表4。

表4加样回收率测定结果(n＝3)

由表4可得，5种脂肪酸的样品加样回收率均在96％以上，且RSD值在5％以内，说明该方法准确度良好，可以满足测定要求。

经过分析方法验证，本发明方法测定亚麻籽油脂肪酸的掺伪的指纹图谱，各脂肪酸之间分离良好，检测限与定量限满足测定要求且各脂肪酸线性关系、精密度、重复性、稳定性、准确度良好，证明该本发明检测方法适合用于亚麻籽油脂肪酸的检测。

实施例2指纹图谱在青海亚麻籽油掺伪识别中的应用

1.亚麻籽油指纹图谱的构建

对40种亚麻籽油样品采用实施例1中的方法进行气相色谱分析，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)确定共有5个峰，对40种亚麻籽油的色谱图进行分析，得到S1-S40共40个原始图谱，见图5。经多点校正、自动匹配，得到对照指纹图谱R，见图6。由图6可知，指纹图谱的相似度表明指纹图谱的整体相关性，计算各油样的相似度可以对油样进行更系统的评定。将亚麻籽油标准指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004B版，对比40种亚麻籽油气相图谱，其与对照指纹图谱相似度均大于0.99，说明构建的指纹图谱符合指纹图谱研究的技术要求，可以在一定程度上代表青海省亚麻籽油样品的整体性。

2.不同植物油脂肪酸组成

将大豆油、玉米油、花生油、菜籽油、葵花籽油、芝麻油按照本发明方法处理，GC进样测定各脂肪酸含量，主要脂肪酸含量对比见图7。由图7可得，不同植物油间各脂肪酸含量差异较大，但六种植物油中亚油酸和油酸含量都相对较高。其中，葵花籽油中亚油酸含量最高，可达65.04g/100g；菜籽油中亚油酸含量最低，为15.82g/00g。但二者在油酸水平上呈现相反趋势，菜籽油为55.35g/100g，葵花籽油为16.02g/100g。另外，玉米油、花生油、葵花籽油、芝麻油基本不含亚麻酸，大豆油、菜籽油中亚麻酸的含量也很少(＜7.65g/100g)。这与亚麻籽油中亚麻酸的含量(51.25g/100g)差异显著(P＜0.05)，这可能是因为不同油料作物的基因型差别较大导致的结果。同时，不同植物油之间特有的脂肪酸分布也为亚麻籽油掺伪鉴定提供了可行性。

3.亚麻籽油的掺伪识别

取质量浓度梯度为10％、20％、30％、40％、50％的大豆油、玉米油、花生油、菜籽油、葵花籽油和芝麻油，与亚麻籽油混合，建立掺伪模型，比较六种植物油掺伪模型GC色谱图与标准指纹图谱的相似度。结果表明掺伪比例越大，对比指纹图谱的相似度越小，六种掺伪模型均呈线性递减关系，见图8，相关线性方程见表5。根据各掺伪模型与指纹图谱的相似度，利用各线性方程式计算掺伪量，对比真实掺伪量，求得相对误差，见表6。

表5各掺伪模型与指纹图谱相似度线性方程

注：y为指纹图谱相似度，％；x为掺伪比例，％。

表6掺假模型与指纹图谱相似度及相对误差

注：Sim-相似度；Re-相对误差。

相对误差在10％以内就可以对掺伪进行较好的检验。大豆油掺伪模型中平均相对误差为6.59％，当掺伪比例为10％时，相对误差值较大(15.46％)，不能达到很好的检验效果；掺伪比例为20％-50％时，相对误差较小，可以准确检验掺假。葵花籽油掺伪模型平均相对误差为5.51％，20％及以上掺假比例时，其结果均小于9％，可以达到检测要求，在30％及以上掺伪比例，其检测效果更好。

玉米油掺伪模型中平均相对误差为2.92％，在10％掺伪量条件下，相对误差为8.91％，结果基本准确；掺伪比例为40％及以上时，相对误差值小于1％，可精确检验。花生油掺伪模型平均相对误差为4.17％。10％及以上掺假条件下，平均相对误差均小于10％；50％掺假比例时，相对误差为0.79％，可以准确定量分析。菜籽油掺伪模型平均相对误差为2.85％，10％及以上掺伪量时，相对误差小于7％，可以达到检测要求；40％及以上掺伪比例时，其结果小于1％，可以准确辨别掺伪量。

为了更好的评价指纹图谱的准确度，本实施例选取了市场价格相对较高，一般不用作掺假的芝麻油。由于芝麻油和亚麻籽油中的脂肪酸分布差异不明显，其结果表明，平均相对误差为11.63％，30％及以上掺假比例时，其结果小于10％，可以达到检测要求。

综上，本发明分析了青海省内40种不同产地、品种的亚麻籽油脂肪酸分布组成。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统构建脂肪酸标准指纹图谱。此外，运用本发明方法建立的指纹图谱识别了六种掺伪模型。其结果表明：对于不同种植物油，检测准确性有一定差异，掺伪比例与指纹图谱相似度呈不同的线性关系。该指纹图谱可适用于10％及以上掺入玉米油、花生油、菜籽油的亚麻籽油识别鉴定；20％及以上掺入大豆油、葵花籽油的亚麻籽油识别鉴定。本发明方法建立的脂肪酸标准指纹图谱能快速识别亚麻籽油掺伪，对青海省亚麻籽油产业具有实际应用价值。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (9)

1.一种亚麻籽油指纹图谱的建立方法，采用气相色谱法测定，其特征在于，

所述方法包括以下内容：

气相色谱的检测条件包括：

色谱柱：聚乙二醇毛细管柱，型号Wonda Cap WAX，规格为 60 m×0.25

mm×0.25 μm；

分流比：45~48:1；

升温程序：

50℃或 100℃保持 13min，以 10℃/min 速率升至 180℃保持 6min，再以 1℃/min速率升至 200℃并保持 20 min，再以 4℃/min 速率升至 230℃保持 10.5 min；

色谱柱规格：60 m×0.25 mm×0.25 μm；

检测器温度：245℃~255℃；

流速：0.5～1.5ml/min；

进样口温度：245 ℃~255℃；

检测器：氢火焰离子检测器；

内标溶液的配制：取十一酸甲酯，放置于棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度，即得浓度为10mg/mL的十一酸甲酯内标溶液；

对照品溶液的配制:取棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯对照品,分别置于棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度得浓度为10mg/mL的单标对照品溶液；分别取棕榈酸甲酯对照品3 .5mL、硬脂酸甲酯对照品3 .5mL、油酸甲酯对照品 3 .5mL、亚油酸甲酯对照品3 .5mL、亚麻酸甲酯对照品8 .5mL，置于25mL棕色容量瓶中，加正庚烷定容至刻度，即得混标对照溶液；

供试品溶液的制备:将油样置于圆底烧瓶中，加入甲醇及KOH-甲醇溶液，加入内标溶液，冷凝回流，回流过程中不间断摇动烧瓶，反应完成后，取出烧瓶冷却至室温，进行分液萃取，用正庚烷洗涤烧瓶，并向分液漏斗中加入蒸馏水，充分振摇后静置分层，此时上层为酯层，下层为水层，下层溶液用正庚烷再萃取一次，萃取后的上层溶液与酯层合并；合并后的酯层用蒸馏水洗涤，分理出酯层并加入无水硫酸钠干燥、过滤收集滤液，用正庚烷稀释；

建立标准曲线方程：

棕榈酸甲酯：Y=1.2275X-0.0153；

硬脂酸甲酯：Y=1.3057X-0.011；

油酸甲酯：Y=1.2746X-0.01；

亚油酸甲酯：Y=1.092X-0.0083；

亚麻酸甲酯：Y=1.1167X-0.0311。

2.根据权利要求 1 所述的方法，其特征在于，脂肪酸选自棕榈酸、硬

脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、饱和脂肪酸的一种或几种。

3.根据权利要求 1 所述的方法，其特征在于，所述分流比：46:1。

4.根据权利要求 1 所述的方法，其特征在于，检测器温度为 250℃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流速为 1.0ml/min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进样口温度为 250 ℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用KOH-甲醇溶液进行甲酯化处理的条件为：

酯化时间：55~65min；

酯化温度：45℃~55℃；

催化剂浓度：0.7~1.2 mol/L KOH-甲醇溶液；

催化剂用量：0.5ml~1.5ml。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述甲酯化处理的条件为：

酯化时间：60 min；

酯化温度：50℃；

催化剂浓度：1mol/L KOH-甲醇溶液；

催化剂用量：1.0 ml。

9.权利要求1-8任一所述方法得到的指纹图谱在植物油掺伪识别中的用途，所述植物油为亚麻籽油，其中掺伪质量浓度20％以上大豆油或葵花籽油，或质量浓度10％以上玉米油、花生油或菜籽油，或质量浓度30％以上的芝麻油。

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