CN112273655A - 一种具有抗衰老功效的小分子人参膏及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明创造提供了一种具有抗衰老功效的小分子人参膏及其制备方法，所述小分子人参膏70％以上摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，20％以上摩尔比例的皂苷分子量分布于440‑477Da，平均分子量低于720Da，人参膏中固形物含量50Brix以上。本发明创造所述的小分子人参膏及其制备方法，方法易于操作、适合大工业生产；加工过程符合食品、保健食品及药品的相关法规，可用于实际生产；产品中有效成分群动态可控、组分明确、含量确切、抗衰老效果突出。
Description
技术领域
本发明创造属于人参深加工及天然催化剂领域，尤其是涉及一种具有抗衰老功效的小分子人参膏及其制备方法。
背景技术
人参是世界公认的名贵中药，在中药中具有极高的位置，可用于治疗及预防疾病，保健护体。我国多部古代经典医学名著都有着人参的使用记载，例如《神农本草经》、《伤寒杂病论》、《金匮要略》等。古今中外对人参功效的全面性均做出肯定。《神农本草经》记载：―人参，主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智。久服，情深延年。”而人参的学名为Panax ginseng C.A.Meyer，其中Panax的意思为―万能药”之意，说明对其卓越功效的肯定。
鲜人参水分含量高，难以保存，因此，人参从地里采挖后，通常被加工成生晒参或红参保存。常见的服用剂型有丸剂、散剂、膏剂、片剂等。其中，丸剂散剂片剂等对人参仅是简单的切片或磨粉，并不属于深加工，人参的成分也不会发生改变。而膏剂需要对参进行提取熬制，在加工过程中，部分成分会发生改变，但是传统的加工方法仅能使很少的成分改变。而成分的改变意味着功效的改变。
人参的多种功效主要得益于其人参皂苷成分，人参中主要的皂苷类成分是四环三萜达玛烷型皂苷，包括原人参二醇类和原人参三醇类。皂苷是由糖基与非糖基部分通过糖苷键连接而成，非糖基部分称为苷元，即二醇苷元(protopanaxdiol)和三醇苷元(protopanaxtriol)两类。糖基有葡萄糖基、吡喃阿拉伯糖基、呋喃阿拉伯糖基、鼠李糖基，不同数量、不同种类的糖基通过连接在苷元的不同位置上构成不同的皂苷，苷元上连接的糖基越多，分子量越大，人体吸收率越低，活性也就越低。市面上常见的种植参的天然皂苷分子量为801.01～1079.27Da，平均分子量为898～992Da，这些皂苷的苷元连有3～4个糖基，如果将分子量降到800Da以下，人体的生物利用度及皂苷活性都会大幅度提高。
小分子低糖基成分的抗衰老功效不断被证实。分述如下：
1.抗氧化、清除自由基：ROS的产生是不可避免的，需氧器官、尤其是线粒体都会产生ROS。ROS会产生一系列氧化应激反应导致器官受损，例如脂质化导致的细胞损伤或动脉硬化，DNA损伤引起的突变、致癌；因机体抗氧化功能退化而促进衰老及相关疾病的发生。研究显示，小分子活性皂苷具有抗氧化功效。对缺血导致的神经元受损，心脑灌注受损，肝损伤等有保护作用。JI报道了活性成分在体内清除ROS的研究结果，给药四个月后，骨骼肌匀浆中氧化物含量显著下降，心脏组织中氧化物下降了38％。
2.促进脏器细胞分裂：进入老年，全身脏器出现退化、萎缩，根本原因是细胞分裂能力降低。小分子活性成分能够促进骨髓细胞有丝分裂，促进造血功能，显著提高骨髓基质细胞群落数，也能促进红系、粒系、巨系混合集落形成。活性成分促进细胞分裂、促进蛋白质合成、促进神经再生，对老年人十分有用。
3.减少感冒症状：感冒是万病之源，老年人经常患感冒有很大危险性，由感冒引发肺炎更是致命的，肺炎是导致老年人死亡的主要原因。日本学者久保道德的研究显示，人参活性小分子成分通过提高携氧增加白细胞和巨噬细胞能力以及增加肝脏的解毒能力、抗体的形成等，来对抗病毒的入侵和改善体质。
因此，开发小分子活性人参膏，是人参制品的核心科技。
近些年对人参皂苷的结构改造技术已经有不少报道，有化学法、酶法等。例如，Kim[Preparation of 20(R)-and 20(S)-ginsenoside Rh1 from ginsenoside Re.KoryoInsam Hakhoechi,1991,15(3):188-91]等人研究发现，如果用50％的醋酸溶液对人参皂苷Rg2(包括R和S两种构型)进行处理，可以使皂苷乙酰化，接下来利用碱的醇溶液对产物进一步处理，可以得到了Rh1(包括R和S两种构型)皂苷。Lee等[Intramolecular formation ofcyclic ether by dehydration of 20(S)-ginsenoside Rg3.Food Chemistry,2010,122:1218–1221]用浓度为20mM的柠檬酸在100℃温度下对Rg3处理3h，可以得到两种新成分，即12β-O-20(S)-ginsenoside Rg3和12β-O-20(R)-ginsenoside Rg3。化学法能降低皂苷的分子量，
然而这些技术几乎都是将皂苷提取出来，再进行改造，这些技术不适合加工人参或者人参膏剂，提取出来再被改造的皂苷并不能转化成产品在市面上售卖，因为既不属于食品、保健品原料，也不是中药。如果走新药申报途径，投资巨大且周期长，风险高，很难成功。因此，在现有的人参服用剂型中将皂苷类成分的分子量降至高活性范围，更具有现实意义。而常见剂型中，膏剂是经过炮制的，因此，可以通过改进工艺，制备出含低分子量高活性皂苷的参膏。参膏一直被人们关注，围绕参膏的研究也很多，但是主要集中在人参和其他药膏的配伍，关于成分改变的还未见报道。例如，中国发明专利《一种高丽红参膏的制备方法》(公告号：103609992B)公开了一种方法，将高丽红参5年根、山药粉、大枣、山楂、龙眼用水煎煮过滤，滤液浓缩后加入蜂蜜，再加入肉桂挥发油。具有一定的保健功能，但是加工过程并未考虑到人参中皂苷成分的改变。
皂苷发明专利《一种人参膏及其制备方法》(公布号：CN102266055A)公布了一组人参膏的制备方法，是由人参产品、药食同源植物、冰糖和琼脂组成，混合后用文火加热，过滤浓缩，与冰糖混合。此方法制备了人参膏滋补品，但是整个过程未涉及成分的改变。
中国发明专利《一种红参膏的制备方法》(公告号：CN105535053B)公开了一种红参膏的制备方法，采用鲜人参或生晒参直接制备红参膏，避免了制备红参的步骤。该方法是用醇提人参后，提取液高温蒸制，然后用30被水溶解，过滤。醇提的药渣用水提取，合并滤液浓缩。该方法制备的人参膏中含有Rh1、Rg3、Rh2、Rg5四种活性较高的成分，约占总皂苷的10％左右，因此并未明显降低皂苷的平均分子量。
由于皂苷的平均分子量与其活性有着密切的关系，如果采用先进的加工技术，将人参膏中的皂苷类成分分子量大比例、大幅度降低，对提高人参膏功效具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明创造旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种具有抗衰老功效的小分子人参膏及其制备方法。在不添加任何外来成分的前提下，仅利用人参植物中自身含有的成分，通过正压提取不同的催化组分，在负压和常压条件下反应，不同条件激活不同的催化物质，来大比例、大幅度降低人参膏中的皂苷类成分的分子量，提高了生物利用度及活性，特别是抗衰老功效，反应机理如图1所示。
为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：
一种具有抗衰老功效的小分子人参膏，所述小分子人参膏70％以上摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，20％以上摩尔比例的皂苷分子量分布于440-477Da，平均分子量低于720Da，人参膏中固形物含量50Brix以上。
本发明还提供一种上述具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，包括如下步骤：
S1：人参提取液制备：采用醇提的方式对原料参进行回流提取，过滤收集提取液；
S2：催化剂A的制备：将步骤S1过滤后的药渣加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂A；
S3：催化剂B的制备：将步骤S2过滤后的药渣再次加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂B；
S4：催化剂C的制备：将步骤S3过滤后的药渣再次加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂C；
S5：除杂：合并提取液及催化剂A、B、C，8000～24000rpm离心除掉不溶物，然后浓缩除去乙醇；
S6：催化反应：
S61：催化反应A：在40～50℃、-0.001～-0.1Mp的负压条件下，激活催化剂A催化反应2～8h；利用其对二醇类皂苷20-O-上糖苷键的催化活性以及3-O-上外部葡萄糖基的催化活性使分子量为963.17～1079.27Da的皂苷成分转化为622.87～785.02Da的皂苷；利用其对三醇类皂苷20-O-上糖苷键的催化活性以及6-O-上鼠李糖基的催化活性使分子量为801.01～947.14Da的皂苷成分转化为638.87～785.01Da的皂苷。
S62：催化反应B：在常压下，80～90℃的温度下，激活催化剂B，保持4～6h；催化上步反应的产物在20-C-位置上的脱水反应，转化成20-21烯或20-22烯皂苷，使部分二醇类的皂苷转化成分子量604.88～767.01Da的皂苷，使部分三醇类皂苷转化成620.87～767.01Da的皂苷；
S63：催化反应C：在55～80℃，-0.001～-0.1Mpa的负压条件下，激活催化剂C，保持4～8h；催化B步骤中未反应部分的3-O-和6-O-上的糖基的水解，生成产物的分子量440～477Da；
S7：制膏：调整固形物含量至50Brix以上，即得到小分子人参膏。可以直接包装成产品，也可以加入其他辅料制成产品。
优选地，所述步骤S1的乙醇溶液加入量为原料参的3～8倍，乙醇溶液中乙醇含量为80～95％，提取温度为75～80℃，提取时间为30min～12h。
优选地，所述步骤S2的乙醇溶液加入量为原料参的5～6倍，乙醇溶液中乙醇含量为71～75％，提取温度为86～98℃，提取压力为0.60～4.0Kgf/cm2，提取时间为6～8h。
优选地，所述步骤S3的乙醇溶液加入量为原料参的4～6倍，乙醇溶液中乙醇含量为8～10％，提取温度为83～87℃，提取压力为0.30～3.0Kgf/cm2，提取时间为5～8h。
优选地，所述步骤S4的乙醇溶液加入量为原料参的4～5倍，乙醇溶液中乙醇含量为36～41％，提取温度为80～86℃，提取压力为0.20～2.82Kgf/cm2，提取时间为5～8h。
进一步的，所述步骤S1中原料参为人参、三七参、西洋参、竹节参、珠子参中一种或几种。
进一步的，所述制备方法中的步骤中通过加入酸、碱或盐来调节溶液pH。
本发明还提供一种上述小分子人参膏在功能食品、保健品、化妆品、药品中的应用。
相对于现有技术，本发明创造具有以下优势：
本发明创造所述的小分子人参膏及其制备方法，方法易于操作、适合大工业生产；加工过程符合食品、保健食品及药品的相关法规，可用于实际生产；产品中有效成分群动态可控、组分明确、含量确切、抗衰老效果突出。
附图说明
图1和图2为本发明制备方法的反应机理；
图3为天然人参根的HPLC检测；
图4为小分子人参膏HPLC检测图谱；
图5为小分子西洋参膏HPLC检测图谱；
图6为小分子人参膏HPLC检测图谱；
图7为清除ROS的作用；(图中：##，与未辐照相比p<0.01，*与辐照未加红参提取物相比p<0.05,**与辐照未加红参提取物相比p<0.01)
图8为小分子人参膏的解热作用对比图。
具体实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下面结合实施例来详细说明本发明创造。
实验例1高效液相色谱(HPLC)法分析皂苷分子量
色谱仪，Waters e2696高效液相色谱分析仪，Waters2998光电二极管阵列(PDA)检测器及Empower3色谱工作站；色谱柱：XBridge C18柱(5μm，
)；流动相：乙腈(A)-水(B)。进样量：10μL；柱温：35℃；体积比流速：0.6mL/min；检测波长：203nm。
精确称取待测皂苷样品，溶于1mL的色谱甲醇中并用0.22μ滤头过滤；检测程序为：乙腈(A)-水(B)：0-5min，20％A-40％A等度；5-10min，40％A-60％A线性梯度，10-70min，60％A-100％A线性梯度，70-75min，100％A等度梯度。
天然人参的检测图谱如图1所示，天然的不同种人参的皂苷分子量及百分含量如表1所示。可知，天然人参的皂苷分子量居于883.45～991.69。
表1.天然人参的皂苷分子量及百分含量
实施例1.
称取100kg人参，先用500kg浓度为80％的食用乙醇溶液浸泡2h，在80℃提取5h，过滤收集提取液，重复提取2次，合并提取液。将滤渣用500kg的72％的乙醇溶液中86℃、2.0Kgf/cm2的条件下提取8h，过滤得催化组分A。然后再用500kg 38％的食用乙醇溶液在83℃0.6Kgf/cm2的条件下提取6h，过滤得催化组分B，滤渣继续用浓度为10％的食用乙醇500kg提取，在80℃0.5Kgf/cm2的条件下提取6h，过滤的催化组分C，合并三组催化组分及提取液，在15000rpm的转速下离心除去杂质，然后浓缩除去乙醇。在45℃，-0.05Mp的负压条件下，激活催化剂A催化反应3h，利用其对二醇类皂苷20-O-上糖苷键的催化活性以及3-O-上外部葡萄糖基的催化活性使分子量为963.17～1079.27Da的皂苷成分转化为622.87～785.02Da的皂苷；利用其对三醇类皂苷20-O-上糖苷键的催化活性以及6-O-上鼠李糖基的催化活性使分子量为801.01～947.14Da的皂苷成分转化为638.87～785.01Da的皂苷。然后将负压条件改为常压条件，温度提升至85℃，使催化剂B得到激活，将上步反应的产物的20-C-位置上的羟基脱水除掉，转化成20-21烯或20-22烯皂苷，使部分二醇类的皂苷转化成分子量604.88～767.01Da的皂苷，使部分三醇类皂苷转化成620.87～767.01Da的皂苷。反应结束后再次改成负压条件，在-0.03Mpa、60℃的条件下激活催化剂C，保持5h，催化上步中未反应部分的3-O-和6-O-上的糖基的水解，生成440～477Da的苷元。浓缩至固形物含量55Brix，即为小分子人参膏。
称取2g待测样品，与18mL水混合溶解，再用20mL石油醚脱脂2次，然后用水饱和正丁醇萃取皂苷成分3次，每次10mL，合并正丁醇层，减压浓缩除去溶剂，皂苷用10mL乙醇溶解，与90mL混合以后上预先处理好的大孔吸附树脂柱，水洗除去不被树脂柱吸附的非皂苷类成分，再用95％的乙醇洗脱完全，蒸干后溶于甲醇用于检测。检测结果如图2所示，86.54％摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，25.38％摩尔比例的皂苷分子量分布于440～477Da，平均分子量为699.53Da。
实施例2
称取100kg西洋参，用水清洗干净后，沥干水，先用600kg浓度为82％的食用乙醇溶液浸泡3h，在78℃提取6h，过滤收集提取液，重复提取2次，合并提取液。然后用500kg的74％的乙醇将滤渣提取，提取温度90℃、1.6Kgf/cm2的条件下提取7h，过滤得催化剂A。然后再用450kg 40％的食用乙醇溶液在83℃1.5Kgf/cm2的条件下提取8h，过滤得催化组分B，滤渣继续用浓度为9％的食用乙醇500kg提取，在85℃1.5Kgf/cm2的条件下提取6h，过滤的催化组分C，合并三组催化组分及提取液，在18000rpm的转速下离心除去杂质，然后浓缩除去乙醇。然后进行转化反应，首先在48℃，-0.03Mp的负压条件下，使催化剂A被激活，进行催化反应5h，水解掉对二醇类皂苷20-O-上糖苷键的和3-O-上外部葡萄糖基，使皂苷的分子量从963.17～1079.27Da转化为622.87～785.02Da，同时水解掉三醇类皂苷20-O-上糖苷键的催化活性以及6-O-上鼠李糖基的催化活性使分子量从801.01～947.14Da转化为638.87～785.01Da范围。然后将负压条件改为常压条件，温度提升至90℃，激活催化剂B，将参膏中皂苷的20-C-位置上的羟基脱水除掉，转化成20-21烯或20-22烯皂苷，使部分二醇类的皂苷转化成分子量604.88～767.01Da的皂苷，使部分三醇类皂苷转化成620.87～767.01Da的皂苷。反应结束后将条件设为在-0.05Mpa、65℃以激活催化剂C，保持6h，催化上步中未反应部分的3-O-和6-O-上的糖基的水解，使部分皂苷生成440～477Da的苷元。浓缩至固形物含量60Brix，即为小分子人参膏。按实施例1中的方法处理样品，用实验例1中的方法检测，检测结果见图3，94.24％摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，33.5％摩尔比例的皂苷分子量分布于440～477Da，平均分子量为669.35Da。
实施例3.取500kg人参，用水清洗后沥干，首先用4t浓度为95％的食用乙醇浸泡3h，然后加热到75℃，回流提取10h，过滤分离药渣和提取液，重复提取2遍后合并提取液备用。药渣继续用80％的乙醇提取，提取条件为95℃、2.0Kgf/cm2的压力，提取8h后过滤得催化剂A。药渣继续用2t浓度为40％的食用酒精提取，提取温度87℃，提取压力位2.5Kgf/cm2，提取时间8h，过滤收集滤液为催化剂B。药渣继续用3t浓度为10％的食用酒精提取，提取温度为86℃，压力位2.5Kgf/cm2，提取时间8h，过滤收集滤液为催化剂C。将提取液与催化剂A、B、C合并，离心除去杂质，浓缩除去乙醇后进行反应。首先激活催化剂A，激活条件是50℃、-0.08Mpa，可以水解掉人参皂苷上部分葡萄糖基和鼠李糖基，使皂苷的分子量范围从963.17～1079.27Da转化为622.87～785.02Da、使分子量范围从为801.01～947.14Da转化为638.87～785.01Da。然后改成常压，在90℃下激活催化剂B，可以催化脱水反应，使分子量进一步减小且结构稳定。最后激活催化剂C，反应条件为75℃，-0.08Mpa，保持6h后，部分单糖皂苷成分的3-O-或6-O-上的糖基被水解掉，生成的产物分子量范围为440～477Da。用实施例1中处理样品的方法处理样品，然后用实验例1中的方法进行检测，检测结果见图4，87.98％摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，32.44％摩尔比例的皂苷分子量分布于440～477Da，平均分子量为695.32Da。
实验例2：人参膏的抗光老化作用
ROS是与皮肤光老化相关的重要因素。紫外线辐射会诱导产生的活性氧，一般来说，会被细胞清除。但是如果有过多的ROS超过细胞的清除能力，就会发生氧化应激。ROS和UVB辐射积累会损伤DNA。而DNA损伤对细胞危害很大。人类细胞已发展出一系列修复受损基因的机制，如重建修复、切除修复、SOS修复等。如果这些修复失败，就会发生细胞凋亡。大量研究表明，紫外线辐射可以通过激活死亡受体和刺激ROS的形成来促进细胞凋亡。
以实施例1的方法，提取小分子人参膏中的总皂苷，并用同样方法提取普通人参膏(传统方法制作，普通熬制的人参膏)的总皂苷作为对照，检验此发明的小分子人参膏的抗光老化作用，考察其清除活性氧(ROS)的能力。
细胞培养：采用正常人真皮成纤维细胞(normal human dermal fibroblasts,NHDFs)对活性红参的抗光老化作用进行检测。NHDF细胞在37℃的DMEM培养基中培养，加入10％热灭活FBS和1％青霉素链霉素，在含5％CO2的气体中培养。细胞在100毫米培养皿中培养，当达到80％以上的浓度时在35毫米培养皿中制成种子。
UVB处理：当NHDFs达到80％以上时，在35mm培养皿(1.0×105个细胞)中传代培养的细胞用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗两次。然后用UVB辐射机(125mJ/cm2)照射细胞。UVB照射后，用PBS洗涤细胞三次，在无血清培养基中加入或不加入样品处理24小时。UVB未照射细胞在相同的培养条件下保持不变，无UVB照射。
ROS的检测及定量：用氧化敏感荧光探针5-(和6)-羧基-2’，7’二氯二氢荧光素-乙酸乙酯(DCFH-DA；Sigma Aldrich)测定细胞内ROS的产生。简而言之，在UVB照射(144mJ/cm2)和C-Mc处理24小时后，在37℃下用羧基-H2DCFDA染色30min，然后在485/525nm的激光激发/发射波长下用荧光微板阅读器分析NHDFs。
采用0用M、1μ用、10μ0、20DF、30DF的样品处理NHDFs细胞后，检测ROS，重复三次实验，结果如图5所示。结果表明，此小分子人参膏与普通人参膏相比具有更强的清除ROS的作用，说明本申请中的小分子人参膏具有一定的抗衰老的作用。
实验例2
以小鼠和家兔两种动物模型考察本申请中的参膏的抗感冒作用。以二甲苯所致外耳廓炎性肿胀小鼠检验其抗炎作用。
取32只4-5周龄昆明小鼠，体重20-22g，雌雄各半。将小鼠随机分为3组,包括模型组、阿司匹林组、普通人参膏组、小分子人参膏组，每组8只。每天给模型组灌0.1mL生理盐水1次，给阿司匹林组灌服0.5g/kg1次，给两组人参膏组灌胃对应的人参膏1次，每次0.1mL，连续7d。于末次给药30min后，用棉签醮适量二甲苯给模型组和人参膏组受试小鼠右耳前后两面以致炎。在致炎4h后,脱椎处死小鼠,然后剪下左右两只耳朵。用7mm直径的打孔器,分别在两耳的同一部位打下耳片。用万分电子天秤分别称取并记录被打下两片的重量。计算肿胀度和肿胀抑制率。本申请中的小分子人参膏对二甲苯所致外耳廓炎性肿胀有明显的改善作用。结果如表2。小分子人参膏能显著改善小鼠外耳廓炎性肿胀，具备较强的抗炎作用，此作用将可能改善感冒的症状。
表2小分子人参膏对小鼠二甲苯所致外耳廓炎性肿胀的影响
与对照组比较，*，p<0.01
以内毒素致家兔发热模型考察本发明中的小分子人参膏的其解热作用。选取16只体温稳定的家兔用于试验，随机分为2组，对照组和人参膏组，每组8只。受试动物经灌胃给药,对照组服用生理盐水2mL，人参膏组服用小分子人参膏2mL，连续给药3d。末次给药后0.5h，将家兔置于固定架中,稳定0.5h后，耳缘静脉注射内毒素5EU/kg，然后每0.5h后测量1次体温，连续观测6h，结果如图6所示，表明人参膏对内毒素导致的家兔的体温升高有着明显的抑制作用。
实验例3
以环磷酰胺所致白细胞减少的小鼠模型、以小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬功能为指标来检测人参膏对免疫功能的影响。
选取小昆明鼠16只，体重22-25g，雌雄各半，将小鼠先在实验室饲养3天，适应实验室的饲养环境。然后随机的将小鼠分为两组，对照组与人参膏组。人参膏组小鼠每天用小分子人参膏灌胃0.1mL，每日一次，对照组小鼠用等量蒸馏水进行灌胃，喂养10d以后，给两组小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg。再喂养7d后，给每只小鼠腹腔注射1mL的6％淀粉溶液，24h后，再注射一次，过2h，给每只小鼠腹腔注射0.5ml的5％鸡红细胞悬液，2h后处死小鼠，快速取出腹腔液进行瑞氏染色，然后用显微镜观察并计数每只小鼠的腹腔吞噬细胞吞噬鸡红细胞的情况。处死小鼠,测两组小白鼠腹腔吞噬细胞的吞噬功能。吞噬率＝吞噬了鸡红细胞的吞噬细胞数量/吞噬细胞总数×100％，吞噬指数＝吞噬细胞吞噬鸡红细胞数量/吞噬细胞总数。结果如表3所示：
表3人参膏对吞噬细胞的作用
与对照组比较，*，p<0.01
结果表明，小分子人参膏可显著提高以环磷酰胺所致白细胞减少的小鼠模型的吞噬细胞的吞噬功能，说明本申请中的小分子人参膏可提高模型小鼠的非特异性免疫功能。
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种具有抗衰老功效的小分子人参膏，其特征在于：所述小分子人参膏70％以上摩尔比例的皂苷分子量分布低于802Da，20％以上摩尔比例的皂苷分子量分布于440-477Da，平均分子量低于720Da，人参膏中固形物含量50Brix以上。
2.权利要求1所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1：人参提取液制备：采用醇提的方式对原料参进行回流提取，过滤收集提取液；
S2：催化剂A的制备：将步骤S1过滤后的药渣加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂A；
S3：催化剂B的制备：将步骤S2过滤后的药渣再次加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂B；
S4：催化剂C的制备：将步骤S3过滤后的药渣再次加入乙醇提取，过滤收集得到催化剂C；
S5：除杂：合并提取液及催化剂A、B、C，8000～24000rpm离心除掉不溶物，然后浓缩除去乙醇；
S6：催化反应：
S61：催化反应A：在40～50℃、-0.001～-0.1Mp的负压条件下，激活催化剂A催化反应2～8h；
S62：催化反应B：在常压下，80～90℃的温度下，激活催化剂B，保持4～6h；
S63：催化反应C：在55～80℃，-0.001～-0.1Mpa的负压条件下，激活催化剂C，保持4～8h；
S7：制膏：调整固形物含量至50Brix以上，即得到小分子人参膏。
3.根据权利要求2所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：所述步骤S1的乙醇溶液加入量为原料参的3～8倍，乙醇溶液中乙醇含量为80～95％，提取温度为75～80℃，提取时间为30min～12h。
4.根据权利要求2所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：所述步骤S2的乙醇溶液加入量为原料参的5～6倍，乙醇溶液中乙醇含量为71～75％，提取温度为86～98℃，提取压力为0.60～4.0Kgf/cm2，提取时间为6～8h。
5.权利要求2所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：所述步骤S3的乙醇溶液加入量为原料参的4～6倍，乙醇溶液中乙醇含量为8～10％，提取温度为83～87℃，提取压力为0.30～3.0Kgf/cm2，提取时间为5～8h。
6.根据权利要求2所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：所述步骤S4的乙醇溶液加入量为原料参的4～5倍，乙醇溶液中乙醇含量为36～41％，提取温度为80～86℃，提取压力为0.20～2.82Kgf/cm2，提取时间为5～8h。
7.根据权利要求2所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏的制备方法，其特征在于：步骤中通过加入酸、碱或盐来调节溶液pH。
8.权利要求1-7任一所述所述的具有抗衰老功效的小分子人参膏在功能食品、保健品、化妆品、药品中的应用。
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Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1229086A (zh) * | 1999-03-17 | 1999-09-22 | 金凤燮 | 酶法改变人参皂甙糖基制备稀有人参皂甙的方法 |
| CN1479787A (zh) * | 2000-12-29 | 2004-03-03 | 水解人参皂甙糖基的人参皂甙糖苷酶及其应用 | |
| CN1846720A (zh) * | 2005-12-28 | 2006-10-18 | 金凤燮 | 高活性红参的制作方法 |
| WO2011115341A1 (ko) * | 2010-03-18 | 2011-09-22 | 동국대학교 산학협력단 | 발효홍삼의 제조방법 |
| CN102302420A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-01-04 | 金凤燮 | 红参皂苷Rg2组和Rh1组、制备方法及在制备抗皮肤老化化妆品中的应用 |
| CN102352402A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-02-15 | 金凤燮 | 红参皂苷Rg3组和Rh2组混合皂苷的制备方法 |
| CN107260784A (zh) * | 2017-06-21 | 2017-10-20 | 李学龙 | 一种全成分活性人参提取液及冻干制品的制备方法 |
| CN107338280A (zh) * | 2017-06-30 | 2017-11-10 | 肖永坤 | 一种高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法 |
| CN108836969A (zh) * | 2018-06-01 | 2018-11-20 | 肖永坤 | 一种抗癌红参及其制备方法和用途 |
| CN111035666A (zh) * | 2020-01-22 | 2020-04-21 | 金凤燮 | 稀有皂苷含量高的人参提取物、人参酒及人参口服液 |
-
2020
- 2020-10-29 CN CN202011179686.7A patent/CN112273655A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1229086A (zh) * | 1999-03-17 | 1999-09-22 | 金凤燮 | 酶法改变人参皂甙糖基制备稀有人参皂甙的方法 |
| CN1479787A (zh) * | 2000-12-29 | 2004-03-03 | 水解人参皂甙糖基的人参皂甙糖苷酶及其应用 | |
| CN1846720A (zh) * | 2005-12-28 | 2006-10-18 | 金凤燮 | 高活性红参的制作方法 |
| WO2011115341A1 (ko) * | 2010-03-18 | 2011-09-22 | 동국대학교 산학협력단 | 발효홍삼의 제조방법 |
| CN102302420A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-01-04 | 金凤燮 | 红参皂苷Rg2组和Rh1组、制备方法及在制备抗皮肤老化化妆品中的应用 |
| CN102352402A (zh) * | 2011-07-29 | 2012-02-15 | 金凤燮 | 红参皂苷Rg3组和Rh2组混合皂苷的制备方法 |
| CN107260784A (zh) * | 2017-06-21 | 2017-10-20 | 李学龙 | 一种全成分活性人参提取液及冻干制品的制备方法 |
| CN107338280A (zh) * | 2017-06-30 | 2017-11-10 | 肖永坤 | 一种高活性低糖基人参次苷群及其苷元的制备方法 |
| CN108836969A (zh) * | 2018-06-01 | 2018-11-20 | 肖永坤 | 一种抗癌红参及其制备方法和用途 |
| CN111035666A (zh) * | 2020-01-22 | 2020-04-21 | 金凤燮 | 稀有皂苷含量高的人参提取物、人参酒及人参口服液 |
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Legal Events
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| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 510700 unit 3, Room 401, No.36 Huanyu 3rd road, Guangzhou International Biological Island, Huangpu District, Guangzhou City, Guangdong Province (self compiled unit 416) Applicant after: Guangzhou Guangya New Hanfang Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 510700 unit 3, Room 401, No.36 Huanyu 3rd road, Guangzhou International Biological Island, Huangpu District, Guangzhou City, Guangdong Province (self compiled unit 416) Applicant before: Guangya Biotechnology (Guangzhou) Co.,Ltd. |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210129 |