CN112210504A - 一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法 - Google Patents

一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于微生物培育技术领域，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法，包括底座、箱体和电动机；所述箱体为圆盘型设计；所述底座固连箱体底部；所述箱体内部开设有培养腔；所述电动机固连于箱体一侧；所述电动机输出轴贯穿箱体，并延伸至培养腔内；所述电动机输出轴位于培养腔内一端固连有转动轮；所述培养腔靠近电动机一侧开设有环形槽；本发明通过流加箱中气压的增大，使液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔中滴落，并在培养腔中滴落的过程中掉落在承接板上的培养皿中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿中，为培养皿中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气。

Description

一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法
技术领域
本发明属于微生物培育技术领域，具体的说是一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法。
背景技术
现有技术中通过控制碳源的分批次添加进而有效的在马克思克鲁维酵母菌菌株的培养过程中实现加速繁育速度，增强菌株活性的效果，但是现有技术中流加法多数为直接向培养皿中添加碳源，然后利用搅拌使碳源在培养皿中均匀分布，在高密度培养过程中通过搅拌的方式并不能很好的使添加的碳源与原有的培养基之间良好到的混合，且搅拌作用还容易影响菌株的正常繁殖，造成菌株生长繁殖速率降低，同时马克思克鲁维酵母菌菌株为好氧菌，在低氧环境下其生长、繁育速率均处于低速状态，高密度培养过程中随着菌株数量的增多培养基中溶解氧持续消耗，当溶解氧含量较低时，对马克思克鲁维酵母菌菌株的培养繁殖存在一定的抑制作用。
中国专利发布的细胞培养装置以及细胞培养方法，申请号：CN2017800520915，细胞培养装置具有：培养槽，其为水平截面积随着趋向上方而增加的形状，用于在培养液中进行细胞的培养；作为供给部的泵以及培养液供给管，它们对培养槽供给所述培养液；控制部，其控制由供给部进行的培养液的供给，通过控制部的控制，从供给部对培养槽断续地供给培养液，在培养液中形成环绕上升流，从而在培养槽内在所述细胞滞留的培养区域形成培养液的塞流，该方案中通过泵给培养液，进而利用培养液的环绕上流使培养液与细胞之间均匀分布，但是由于通过底部泵给的方式无法使培养液与空气接触，进而导致培养液中无法有效地溶解氧气，不适用于好氧菌的培养。
鉴于此，本发明研制一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法，用于解决上述技术问题。
发明内容
为了弥补现有技术的不足，解决现有技术中采用流加法高密度培养马克思克鲁维酵母菌菌株时，需要人工进行添加培养基，不仅较为浪费人力，同时人工流加培养基与原有的培养基之间分布不均的问题，本发明提出的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，该方法包括以下步骤：
S1：将制备完成的马克思克鲁维酵母菌菌株培养基在95℃高温下进行高温灭菌5-6min,灭菌完成后将培养基填充于培养箱中，并在使培养箱内部处于95-98℃下保持20-30min充分完成灭菌工艺；
S2：将灭菌完成后的培养箱冷却至28℃后，将马克思克鲁维酵母菌菌株均匀接种于培养基上，并在28℃下进行发酵培养16H，在培养过程中每间隔4h向培养基表面喷洒液态培养基；
S3：将培养时间达到16H的培养箱中的残余培养基以及菌落用于接种生产发酵剂，并于发酵完成后降温至0-4℃，即可得到含有大量马克思克鲁维酵母菌菌株的液态发酵剂；
其中S1中所述培养箱包括底座、箱体和电动机；所述箱体为圆盘型设计；所述底座固连箱体底部；所述箱体内部开设有培养腔；所述电动机固连于箱体一侧；所述电动机输出轴贯穿箱体，并延伸至培养腔内；所述电动机输出轴位于培养腔内一端固连有转动轮；所述培养腔靠近电动机一侧开设有环形槽；所述环形槽与转动轮偏心设计；所述转动轮“*”形设计；所述转动轮远离电动机输出轴一端均转动连接有传动柄；所述传动柄“Z”形设计；所述传动柄延伸至环形槽内；所述传动柄位于环形槽内转动连接有滑动块；所述滑动块弧形设计且与环形槽滑动连接；所述传动柄远离环形槽一端贯穿转动轮；所述传动柄位于转动轮远离环形槽一侧均固连有承接板；相邻两个所述承接板远离传动柄一侧通过连接杆转动连接；所述承接板横截面为“L”形设计；所述承接板用于装载培养皿；所述箱体顶端固连有流加箱；所述流加箱远离箱体一侧开口设计；所述流加箱开口处安装有密封盖；所述流加箱底部开设有第一通槽；所述第一通槽贯穿箱体并延伸至培养腔中设计；所述第一通槽位于培养箱内开口处固连有雾化板；所述雾化板上开设有均匀分布的微孔；所述箱体靠近电动机一侧开设有动力腔；所述电动机输出轴延伸至动力腔内；所述电动机输出轴位于动力腔内固连有凸轮；所述动力腔靠近流加箱一侧开设有增压腔；所述增压腔横截面为“T”形设计；所述增压腔内滑动密封连接有增压板；所述增压板靠近动力腔一侧固连有传动杆；所述传动杆延伸至动力腔内设计；所述增压腔远离动力腔一侧通过单向导管连通流加箱；所述增压腔靠近电动机一侧开设有第二通槽；所述第二通槽内固连有过滤棉条；所述箱体一侧开设有出料口；所述壳体位于出料口处铰接有密封板；
工作时，现有技术中通过控制碳源的分批次添加进而有效的在马克思克鲁维酵母菌菌株的培养过程中实现加速繁育速度，增强菌株活性的效果，但是现有技术中流加法多数为直接向培养皿中添加碳源，然后利用搅拌使碳源在培养皿中均匀分布，在高密度培养过程中通过搅拌的方式并不能很好的使添加的碳源与原有的培养基之间良好到的混合，且搅拌作用还容易影响菌株的正常繁殖，造成菌株生长繁殖速率降低，同时马克思克鲁维酵母菌菌株为好氧菌，在低氧环境下其生长、繁育速率均处于低速状态，高密度培养过程中随着菌株数量的增多培养基中溶解氧持续消耗，当溶解氧含量较低时，对马克思克鲁维酵母菌菌株的培养繁殖存在一定的抑制作用，在进行马克思克鲁维酵母菌菌株培养过程中，启动电动机，电动机输出轴带动转动轮低速转动，转动轮转动的过程中与转动轮之间转动连接的传动柄受转动轮带动在环形槽内滑动，同时与传动柄之间固连的承接板跟随运动，由于环形槽与转动轮两者偏心设计，且相邻两个承接板之间通过连接杆连接，在转动的过程中受到环形槽与转动轮和连接杆三重限位作用，进而使承接板在随转动轮共同转动过程中其方向不发生变化，进而使承接板上放置的培养皿始终开口朝向上方，随着电动机的持续转动，电动机位于动力腔内套接的凸轮在转动的过程中不断对传动杆形成规律性挤压推动作用，进而使传动杆带动增压板在增压腔中做上下往复运动，在运动的过程中增压板使增压腔远离动力腔一侧呈规律性的形成负压和正压，在增压腔内呈现负压时，增压腔不断抽取外界的空气并经过过滤棉条的过滤后进入增压腔内，并在增压板受凸轮作用对增压腔内进行增压时，使内部的过滤空气在增压的过程中逐渐通过单向导管进入流加箱内，并最终在流加箱内液态培养基中形成气泡向上漂浮，在漂浮的过程中，过滤空气中的氧气逐渐溶解于液态培养基中，进而使液态培养基中溶解氧含量增高，且随着流加箱中气压增大，液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔中滴落，并在培养腔中滴落的过程中掉落在承接板上的培养皿中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿中，为培养皿中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气，进而有效地促进马克思克鲁维酵母菌菌株的生长、增殖，同时液态培养基在向培养皿汇中滴落的过程中具备一定的冲击力，可以有效地通过均匀滴落的液滴对培养皿中的培养基和马克思克鲁维酵母菌菌株形成冲击效果，进而有效地使培养皿中菌落与培养基之间分布的更加均匀，有效地加快马克思克鲁维酵母菌菌株的繁殖速率。
优选的，所述流加箱顶部开始有第三通槽；所述第三通槽延伸至培养腔上方；所述第三通槽位于培养腔上方弧形设计且弧形与培养腔圆周弧度相同；所述第三通槽与培养腔顶部部分导通设计，工作时，由于增压腔中向流加箱中持续增压作用，使流加箱中的液态培养基随着时间的推移在压力和重力的双重作用下向培养腔中滴落的速率不断加快，进而使液态培养基的添加量均匀度不足，通过设置第三通槽，并控制第三通槽的直径，过滤空气向流加箱中不断填充，进而使流加箱中的气压逐渐增大，过滤空气在经过液态培养基的吸氧过滤后向第三通槽内扩散，在源源不断的过滤空气的补充下在第三通槽内形成气流，气流在第三通槽中流动并向培养腔中扩散，进而使流加箱中的气压保持稳定的状态，进而使流加箱中的液态培养基向培养腔中滴落的速率保持恒定，同时气流在培养腔中扩散的过程中，对承接板上培养皿内的液态培养基液面形成推动作用，进而使液态培养基在受气流作用产生波动的过程中与空气的接触面积增大，进而使液态培养基对空气中氧气的吸附效果增强，有效地为液态培养基中的高密度马克思克鲁维酵母菌菌株提供充足的氧气，进而满足马克思克鲁维酵母菌菌株生长、繁殖条件。
优选的，所述增压腔、增压板和传动杆均以动力腔为中心对称分布；位于所述动力腔下方的增压腔远离动力腔一侧通过单向导管与第三通槽远离流加箱一端导通设计；位于下方的所述增压腔通过导槽与第二通槽导通设计；对称设计的两个所述增压腔中气流的流动方向相反；工作时，通过设置第三通槽，在流加箱中多余气流的冲击效果的作用下在第三通槽内形成气流，气流在流动过程中部分向培养腔中冲击，对培养腔中形成定向的气流流向，同时马克思克鲁维酵母菌菌株在培养基中持续生长发育的过程中生成一定含量的酒精，由于酒精具备挥发的特性，在气流的流动过程中部分气流混合挥发的酒精在位于动力腔下方的增压腔的负压作用下被抽取至位于动力腔下方的增压腔内，并在凸轮转动的过程中，在增压环节中通过导槽向第二通槽内喷射，气流通过第二通槽向外扩散，对过滤棉条中的杂质、细菌形成反向作用力，进而对过滤棉条进行反渗透清洗，同时气流中蕴含的酒精在过滤棉条中凝结，还可以增强过滤棉条对空气的除杂、灭菌效果，进而使输送至流加箱中的过滤空气更加纯净。
优选的，所述密封盖靠近流加箱一侧开设有第一凹槽；所述第一凹槽内滑动连接有移动板；所述移动板靠近密封盖一侧固连有辅助杆；所述辅助杆贯穿密封盖；所述辅助杆位于密封盖外侧一端固连有重力盒；所述重力盒内放置有重力球；工作时，由于增压腔向流加箱中进行充气的过程属于间歇性，在充气时流加箱中的气压增大，在停止充气时，流加箱中的气流通过第三通槽逐渐外泄，进而使流加箱中气压逐渐减小，随着电动机的转动，进而在规律性的充气过程中第三通槽内的气流处于规律性强弱变化过程中，进而使气流在培养腔中流动速率不同，通过设置移动板和重力盒，在培养进行的初期，马克思克鲁维酵母菌菌株在培养皿中稳固程度较弱时，减少重力盒内的重力球的数量，进而使流加箱中气压增大时，气压推动移动板向流加箱外侧移动，进而使流加箱内的气压起到缓冲作用，进而使气流向第三通槽内流动的速率趋向于平缓，当培养进行至后期，马克思克鲁维酵母菌菌落形成较为稳固后，通过增加重力球的数量，进而使第三通槽内的气流强弱变化较大，当气流流速较弱时，培养腔中的挥发的酒精便于通过单向导管外泄，同时当气流流速较快时对培养皿中的液态培养基形成较强的冲击效果，进而对高密度的马克思克鲁维酵母菌菌落形成冲击效果，便于菌株分布均匀，进而有利于马克思克鲁维酵母菌菌株的生长繁殖。
优选的，所述承接板内部通过弹簧弹性连接有支撑板；所述培养皿放置于支撑板上；所述承接板底部固连有震动弹簧；所述培养腔底部固连有拨片；所述拨片处于震动弹簧的运动路径上；工作时，承接板在随转动轮转动的过程中逐渐与拨片相互接触，进而利用承接板的移动，使承接板底部的震动弹簧与拨片之间相互接触，进而在相互移动的过程中使震动弹簧震动，进而利用震动弹簧的震动向承接板内的通过弹簧连接端的支撑板形成震动效果，进而有效地增强支撑板上放置的培养皿中的培养基的震荡效果，进而使培养基处于高频小幅度的晃动状态，进而有效地使液态的培养基与空气的接触面增大，使溶解氧含量增多，同时还能对液态培养基中的菌株形成微弱的搅拌效果，进而使菌株在业态的培养基中分布的更加均匀。
优选的，所述培养腔对应第一通槽处开设有第一滑槽；所述拨片均铰接于培养腔底部；所述拨片远离转动轮转动方向一侧固连有挤压囊；所述第一滑槽一侧通过弹簧弹性连接有滑动板、一侧开设有第二滑槽；所述第二滑槽内滑动连接有推杆；所述推杆远离第一滑槽一侧固连有膨胀囊；所述挤压囊与膨胀囊导通设计；初始状态下所述滑动板在弹簧弹性作用下将第一通槽密封；工作时，震动弹簧与拨片产生相互位移时，拨片受力发生弯曲，进而使弯曲的拨片对挤压囊形成挤压效果，进而使挤压囊发生形变，形变的挤压囊将气体输送至膨胀囊中，进而有效地使膨胀囊体积增大，对推杆形成推力，进而使滑动板挤压弹簧，对第一通槽不形成封堵效果，当电动机停止转动时，拨片与振动弹簧之间不存在相对位移，进而使拨片形变程度较弱，导致拨片对挤压囊无法形成有效的挤压，进而在弹簧的复位作用下使滑动板对第一通槽进行堵塞，进而有效地防止流加箱中的液态的培养基持续不断的向培养皿中添加，避免培养皿中培养基营养物质浓度过大，造成渗透压过高，导致菌株大批量死亡。
一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：
马铃薯淀粉1％、脱脂牛奶30％、葡萄糖2％、番茄浓缩汁0.5％、柠檬酸钠0.05％、纯净水66.45％，柠檬酸水0.4％。
本发明的有益效果如下：
1.本发明所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法，通过流加箱中气压的增大，使液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔中滴落，并在培养腔中滴落的过程中掉落在承接板上的培养皿中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿中，为培养皿中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气，进而有效地促进马克思克鲁维酵母菌菌株的生长、增殖，同时液态培养基在向培养皿汇中滴落的过程中具备一定的冲击力，可以有效地通过均匀滴落的液滴对培养皿中的培养基和马克思克鲁维酵母菌菌株形成冲击效果，进而有效地使培养皿中菌落与培养基之间分布的更加均匀，有效地加快马克思克鲁维酵母菌菌株的繁殖速率。
2.本发明所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其菌株培养方法，通过设置第三通槽，在流加箱中多余气流的冲击效果的作用下在第三通槽内形成气流，气流在流动过程中部分向培养腔中冲击，对培养腔中形成定向的气流流向，在气流的流动过程中部分气流混合挥发的酒精在位于动力腔下方的增压腔的负压作用下被抽取至位于动力腔下方的增压腔内，并在凸轮转动的过程中，向第二通槽内喷射对过滤棉条中的杂质、细菌形成反向作用力，进而对过滤棉条进行反渗透清洗，同时气流中蕴含的酒精在过滤棉条中凝结，还可以增强过滤棉条对空气的除杂、灭菌效果，进而使输送至流加箱中的过滤空气更加纯净。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明。
图1是本发明的方法流程图；
图2是培养箱的主视图；
图3是培养箱的内部构造图；
图4是转动轮的主视图；
图5是培养箱的横剖视图；
图6是培养箱的纵剖视图；
图7是图6中A处局部放大图；
图中：底座1、箱体2、电动机21、培养腔3、转动轮31、环形槽32、传动柄33、滑动块34、承接板35、连接杆36、培养皿37、流加箱4、密封盖41、第一通槽42、雾化板43、动力腔5、凸轮51、增压腔52、增压板53、传动杆54、第二通槽56、过滤棉条57、出料口6、密封板61、第三通槽7、第一凹槽8、移动板81、辅助杆82、重力盒83、重力球84、支撑板9、震动弹簧91、拨片92、第一滑槽93、挤压囊94、滑动板95、第二滑槽96、推杆97、膨胀囊98。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
如图1至图7所示，本发明所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，该方法包括以下步骤：
S1：将制备完成的马克思克鲁维酵母菌菌株培养基在95℃高温下进行高温灭菌5-6min,灭菌完成后将培养基填充于培养箱中，并在使培养箱内部处于95-98℃下保持20-30min充分完成灭菌工艺；
S2：将灭菌完成后的培养箱冷却至28℃后，将马克思克鲁维酵母菌菌株均匀接种于培养基上，并在28℃下进行发酵培养16H，在培养过程中每间隔4h向培养基表面喷洒液态培养基；
S3：将培养时间达到16H的培养箱中的残余培养基以及菌落用于接种生产发酵剂，并于发酵完成后降温至0-4℃，即可得到含有大量马克思克鲁维酵母菌菌株的液态发酵剂；
其中S1中所述培养箱包括底座1，箱体2和电动机21；所述箱体2为圆盘型设计；所述底座1固连箱体2底部；所述箱体2内部开设有培养腔3；所述电动机21固连于箱体2一侧；所述电动机21输出轴贯穿箱体2，并延伸至培养腔3内；所述电动机21输出轴位于培养腔3内一端固连有转动轮31；所述培养腔3靠近电动机21一侧开设有环形槽32；所述环形槽32与转动轮31偏心设计；所述转动轮31“*”形设计；所述转动轮31远离电动机21输出轴一端均转动连接有传动柄33；所述传动柄33“Z”形设计；所述传动柄33延伸至环形槽32内；所述传动柄33位于环形槽32内转动连接有滑动块34；所述滑动块34弧形设计且与环形槽32滑动连接；所述传动柄33远离环形槽32一端贯穿转动轮31；所述传动柄33位于转动轮31远离环形槽32一侧均固连有承接板35；相邻两个所述承接板35远离传动柄33一侧通过连接杆36转动连接；所述承接板35横截面为“L”形设计；所述承接板35用于装载培养皿37；所述箱体2顶端固连有流加箱4；所述流加箱4远离箱体2一侧开口设计；所述流加箱4开口处安装有密封盖41；所述流加箱4底部开设有第一通槽42；所述第一通槽42贯穿箱体2并延伸至培养腔3中设计；所述第一通槽42位于培养箱内开口处固连有雾化板43；所述雾化板43上开设有均匀分布的微孔；所述箱体2靠近电动机21一侧开设有动力腔5；所述电动机21输出轴延伸至动力腔5内；所述电动机21输出轴位于动力腔5内固连有凸轮51；所述动力腔5靠近流加箱4一侧开设有增压腔52；所述增压腔52横截面为“T”形设计；所述增压腔52内滑动密封连接有增压板53；所述增压板53靠近动力腔5一侧固连有传动杆54；所述传动杆54延伸至动力腔5内设计；所述增压腔52远离动力腔5一侧通过单向导管连通流加箱4；所述增压腔52靠近电动机21一侧开设有第二通槽56；所述第二通槽56内固连有过滤棉条57；所述箱体2一侧开设有出料口6；所述壳体位于出料口6处铰接有密封板61；
工作时，现有技术中通过控制碳源的分批次添加进而有效的在马克思克鲁维酵母菌菌株的培养过程中实现加速繁育速度，增强菌株活性的效果，但是现有技术中流加法多数为直接向培养皿37中添加碳源，然后利用搅拌使碳源在培养皿37中均匀分布，在高密度培养过程中通过搅拌的方式并不能很好的使添加的碳源与原有的培养基之间良好到的混合，且搅拌作用还容易影响菌株的正常繁殖，造成菌株生长繁殖速率降低，同时马克思克鲁维酵母菌菌株为好氧菌，在低氧环境下其生长、繁育速率均处于低速状态，高密度培养过程中随着菌株数量的增多培养基中溶解氧持续消耗，当溶解氧含量较低时，对马克思克鲁维酵母菌菌株的培养繁殖存在一定的抑制作用，在进行马克思克鲁维酵母菌菌株培养过程中，启动电动机21，电动机21输出轴带动转动轮31低速转动，转动轮31转动的过程中与转动轮31之间转动连接的传动柄33受转动轮31带动在环形槽32内滑动，同时与传动柄33之间固连的承接板35跟随运动，由于环形槽32与转动轮31两者偏心设计，且相邻两个承接板35之间通过连接杆36连接，在转动的过程中受到环形槽32与转动轮31和连接杆36三重限位作用，进而使承接板35在随转动轮31共同转动过程中其方向不发生变化，进而使承接板35上放置的培养皿37始终开口朝向上方，随着电动机21的持续转动，电动机21位于动力腔5内套接的凸轮51在转动的过程中不断对传动杆54形成规律性挤压推动作用，进而使传动杆54带动增压板53在增压腔52中做上下往复运动，在运动的过程中增压板53使增压腔52远离动力腔5一侧呈规律性的形成负压和正压，在增压腔52内呈现负压时，增压腔52不断抽取外界的空气并经过过滤棉条57的过滤后进入增压腔52内，并在增压板53受凸轮51作用对增压腔52内进行增压时，使内部的过滤空气在增压的过程中逐渐通过单向导管进入流加箱4内，并最终在流加箱4内液态培养基中形成气泡向上漂浮，在漂浮的过程中，过滤空气中的氧气逐渐溶解于液态培养基中，进而使液态培养基中溶解氧含量增高，且随着流加箱4中气压增大，液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔3中滴落，并在培养腔3中滴落的过程中掉落在承接板35上的培养皿37中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿37中，为培养皿37中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气，进而有效地促进马克思克鲁维酵母菌菌株的生长、增殖，同时液态培养基在向培养皿37汇中滴落的过程中具备一定的冲击力，可以有效地通过均匀滴落的液滴对培养皿37中的培养基和马克思克鲁维酵母菌菌株形成冲击效果，进而有效地使培养皿37中菌落与培养基之间分布的更加均匀，有效地加快马克思克鲁维酵母菌菌株的繁殖速率。
作为本发明的一种实施方式，所述流加箱4顶部开始有第三通槽7；所述第三通槽7延伸至培养腔3上方；所述第三通槽7位于培养腔3上方弧形设计且弧形与培养腔3圆周弧度相同；所述第三通槽7与培养腔3顶部部分导通设计，工作时，由于增压腔52中向流加箱4中持续增压作用，使流加箱4中的液态培养基随着时间的推移在压力和重力的双重作用下向培养腔3中滴落的速率不断加快，进而使液态培养基的添加量均匀度不足，通过设置第三通槽7，并控制第三通槽7的直径，过滤空气向流加箱4中不断填充，进而使流加箱4中的气压逐渐增大，过滤空气在经过液态培养基的吸氧过滤后向第三通槽7内扩散，在源源不断的过滤空气的补充下在第三通槽7内形成气流，气流在第三通槽7中流动并向培养腔3中扩散，进而使流加箱4中的气压保持稳定的状态，进而使流加箱4中的液态培养基向培养腔3中滴落的速率保持恒定，同时气流在培养腔3中扩散的过程中，对承接板35上培养皿37内的液态培养基液面形成推动作用，进而使液态培养基在受气流作用产生波动的过程中与空气的接触面积增大，进而使液态培养基对空气中氧气的吸附效果增强，有效地为液态培养基中的高密度马克思克鲁维酵母菌菌株提供充足的氧气，进而满足马克思克鲁维酵母菌菌株生长、繁殖条件。
作为本发明的一种实施方式，所述增压腔52、增压板53和传动杆54均以动力腔5为中心对称分布；位于所述动力腔5下方的增压腔52远离动力腔5一侧通过单向导管与第三通槽7远离流加箱4一端导通设计；位于下方的所述增压腔52通过导槽与第二通槽56导通设计；对称设计的两个所述增压腔52中气流的流动方向相反；工作时，通过设置第三通槽7，在流加箱4中多余气流的冲击效果的作用下在第三通槽7内形成气流，气流在流动过程中部分向培养腔3中冲击，对培养腔3中形成定向的气流流向，同时马克思克鲁维酵母菌菌株在培养基中持续生长发育的过程中生成一定含量的酒精，由于酒精具备挥发的特性，在气流的流动过程中部分气流混合挥发的酒精在位于动力腔5下方的增压腔52的负压作用下被抽取至位于动力腔5下方的增压腔52内，并在凸轮51转动的过程中，在增压环节中通过导槽向第二通槽56内喷射，气流通过第二通槽56向外扩散，对过滤棉条57中的杂质、细菌形成反向作用力，进而对过滤棉条57进行反渗透清洗，同时气流中蕴含的酒精在过滤棉条57中凝结，还可以增强过滤棉条57对空气的除杂、灭菌效果，进而使输送至流加箱4中的过滤空气更加纯净。
作为本发明的一种实施方式，所述密封盖41靠近流加箱4一侧开设有第一凹槽8；所述第一凹槽8内滑动连接有移动板81；所述移动板81靠近密封盖41一侧固连有辅助杆82；所述辅助杆82贯穿密封盖41；所述辅助杆82位于密封盖41外侧一端固连有重力盒83；所述重力盒83内放置有重力球84；工作时，由于增压腔52向流加箱4中进行充气的过程属于间歇性，在充气时流加箱4中的气压增大，在停止充气时，流加箱4中的气流通过第三通槽7逐渐外泄，进而使流加箱4中气压逐渐减小，随着电动机21的转动，进而在规律性的充气过程中第三通槽7内的气流处于规律性强弱变化过程中，进而使气流在培养腔3中流动速率不同，通过设置移动板81和重力盒83，在培养进行的初期，马克思克鲁维酵母菌菌株在培养皿37中稳固程度较弱时，减少重力盒83内的重力球84的数量，进而使流加箱4中气压增大时，气压推动移动板81向流加箱4外侧移动，进而使流加箱4内的气压起到缓冲作用，进而使气流向第三通槽7内流动的速率趋向于平缓，当培养进行至后期，马克思克鲁维酵母菌菌落形成较为稳固后，通过增加重力球84的数量，进而使第三通槽7内的气流强弱变化较大，当气流流速较弱时，培养腔3中的挥发的酒精便于通过单向导管外泄，同时当气流流速较快时对培养皿37中的液态培养基形成较强的冲击效果，进而对高密度的马克思克鲁维酵母菌菌落形成冲击效果，便于菌株分布均匀，进而有利于马克思克鲁维酵母菌菌株的生长繁殖。
作为本发明的一种实施方式，所述承接板35内部通过弹簧弹性连接有支撑板9；所述培养皿37放置于支撑板9上；所述承接板35底部固连有震动弹簧91；所述培养腔3底部固连有拨片92；所述拨片92处于震动弹簧91的运动路径上；工作时，承接板35在随转动轮31转动的过程中逐渐与拨片92相互接触，进而利用承接板35的移动，使承接板35底部的震动弹簧91与拨片92之间相互接触，进而在相互移动的过程中使震动弹簧91震动，进而利用震动弹簧91的震动向承接板35内的通过弹簧连接端的支撑板9形成震动效果，进而有效地增强支撑板9上放置的培养皿37中的培养基的震荡效果，进而使培养基处于高频小幅度的晃动状态，进而有效地使液态的培养基与空气的接触面增大，使溶解氧含量增多，同时还能对液态培养基中的菌株形成微弱的搅拌效果，进而使菌株在业态的培养基中分布的更加均匀。
作为本发明的一种实施方式，所述培养腔3对应第一通槽42处开设有第一滑槽93；所述拨片92均铰接于培养腔3底部；所述拨片92远离转动轮31转动方向一侧固连有挤压囊94；所述第一滑槽93一侧通过弹簧弹性连接有滑动板95、一侧开设有第二滑槽96；所述第二滑槽96内滑动连接有推杆97；所述推杆97远离第一滑槽93一侧固连有膨胀囊98；所述挤压囊94与膨胀囊98导通设计；初始状态下所述滑动板95在弹簧弹性作用下将第一通槽42密封；工作时，震动弹簧91与拨片92产生相互位移时，拨片92受力发生弯曲，进而使弯曲的拨片92对挤压囊94形成挤压效果，进而使挤压囊94发生形变，形变的挤压囊94将气体输送至膨胀囊98中，进而有效地使膨胀囊98体积增大，对推杆97形成推力，进而使滑动板95挤压弹簧，对第一通槽42不形成封堵效果，当电动机21停止转动时，拨片92与振动弹簧之间不存在相对位移，进而使拨片92形变程度较弱，导致拨片92对挤压囊94无法形成有效的挤压，进而在弹簧的复位作用下使滑动板95对第一通槽42进行堵塞，进而有效地防止流加箱4中的液态的培养基持续不断的向培养皿37中添加，避免培养皿37中培养基营养物质浓度过大，造成渗透压过高，导致菌株大批量死亡。
一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：
马铃薯淀粉1％、脱脂牛奶30％、葡萄糖2％、番茄浓缩汁0.5％、柠檬酸钠0.05％、纯净水66.45％，柠檬酸水0.4％。
具体工作流程如下：
工作时，启动电动机21，电动机21输出轴带动转动轮31低速转动，转动轮31转动的过程中与转动轮31之间转动连接的传动柄33受转动轮31带动在环形槽32内滑动，同时与传动柄33之间固连的承接板35跟随运动，由于环形槽32与转动轮31两者偏心设计，且相邻两个承接板35之间通过连接杆36连接，在转动的过程中受到环形槽32与转动轮31和连接杆36三重限位作用，进而使承接板35在随转动轮31共同转动过程中其方向不发生变化，进而使承接板35上放置的培养皿37始终开口朝向上方，随着电动机21的持续转动，电动机21位于动力腔5内套接的凸轮51在转动的过程中不断对传动杆54形成规律性挤压推动作用，进而使传动杆54带动增压板53在增压腔52中做上下往复运动，在运动的过程中增压板53使增压腔52远离动力腔5一侧呈规律性的形成负压和正压，在增压腔52内呈现负压时，增压腔52不断抽取外界的空气并经过过滤棉条57的过滤后进入增压腔52内，并在增压板53受凸轮51作用对增压腔52内进行增压时，使内部的过滤空气在增压的过程中逐渐通过单向导管进入流加箱4内，并最终在流加箱4内液态培养基中形成气泡向上漂浮，在漂浮的过程中，过滤空气中的氧气逐渐溶解于液态培养基中，进而使液态培养基中溶解氧含量增高，且随着流加箱4中气压增大，液态培养基在压力和重力的作用下通过微孔向培养腔3中滴落，并在培养腔3中滴落的过程中掉落在承接板35上的培养皿37中，液滴携带溶解氧和营养物质滴落在培养皿37中，为培养皿37中的马克思克鲁维酵母菌菌株提供养分以及氧气，进而有效地促进马克思克鲁维酵母菌菌株的生长、增殖。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (7)

1.一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
S1：将制备完成的马克思克鲁维酵母菌菌株培养基在95℃高温下进行高温灭菌5-6min,灭菌完成后将培养基填充于培养箱中，并在使培养箱内部处于95-98℃下保持20-30min充分完成灭菌工艺；
S2：将灭菌完成后的培养箱冷却至28℃后，将马克思克鲁维酵母菌菌株均匀接种于培养基上，并在28℃下进行发酵培养16H，在培养过程中每间隔4h向培养基表面喷洒液态培养基；
S3：将培养时间达到16H的培养箱中的残余培养基以及菌落用于接种生产发酵剂，并于发酵完成后降温至0-4℃，即可得到含有大量马克思克鲁维酵母菌菌株的液态发酵剂；
其中S1中所述培养箱包括底座(1)、箱体(2)和电动机(21)；所述箱体(2)为圆盘型设计；所述底座(1)固连箱体(2)底部；所述箱体(2)内部开设有培养腔(3)；所述电动机(21)固连于箱体(2)一侧；所述电动机(21)输出轴贯穿箱体(2)，并延伸至培养腔(3)内；所述电动机(21)输出轴位于培养腔(3)内一端固连有转动轮(31)；所述培养腔(3)靠近电动机(21)一侧开设有环形槽(32)；所述环形槽(32)与转动轮(31)偏心设计；所述转动轮(31)“*”形设计；所述转动轮(31)远离电动机(21)输出轴一端均转动连接有传动柄(33)；所述传动柄(33)“Z”形设计；所述传动柄(33)延伸至环形槽(32)内；所述传动柄(33)位于环形槽(32)内转动连接有滑动块(34)；所述滑动块(34)弧形设计且与环形槽(32)滑动连接；所述传动柄(33)远离环形槽(32)一端贯穿转动轮(31)；所述传动柄(33)位于转动轮(31)远离环形槽(32)一侧均固连有承接板(35)；相邻两个所述承接板(35)远离传动柄(33)一侧通过连接杆(36)转动连接；所述承接板(35)横截面为“L”形设计；所述承接板(35)用于装载培养皿(37)；所述箱体(2)顶端固连有流加箱(4)；所述流加箱(4)远离箱体(2)一侧开口设计；所述流加箱(4)开口处安装有密封盖(41)；所述流加箱(4)底部开设有第一通槽(42)；所述第一通槽(42)贯穿箱体(2)并延伸至培养腔(3)中设计；所述第一通槽(42)位于培养箱内开口处固连有雾化板(43)；所述雾化板(43)上开设有均匀分布的微孔；所述箱体(2)靠近电动机(21)一侧开设有动力腔(5)；所述电动机(21)输出轴延伸至动力腔(5)内；所述电动机(21)输出轴位于动力腔(5)内固连有凸轮(51)；所述动力腔(5)靠近流加箱(4)一侧开设有增压腔(52)；所述增压腔(52)横截面为“T”形设计；所述增压腔(52)内滑动密封连接有增压板(53)；所述增压板(53)靠近动力腔(5)一侧固连有传动杆(54)；所述传动杆(54)延伸至动力腔(5)内设计；所述增压腔(52)远离动力腔(5)一侧通过单向导管连通流加箱(4)；所述增压腔(52)靠近电动机(21)一侧开设有第二通槽(56)；所述第二通槽(56)内固连有过滤棉条(57)；所述箱体(2)一侧开设有出料口(6)；所述壳体位于出料口(6)处铰接有密封板(61)。
2.根据权利要求1所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：所述流加箱(4)顶部开始有第三通槽(7)；所述第三通槽(7)延伸至培养腔(3)上方；所述第三通槽(7)位于培养腔(3)上方弧形设计且弧形与培养腔(3)圆周弧度相同；所述第三通槽(7)与培养腔(3)顶部部分导通设计。
3.根据权利要求2所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：所述增压腔(52)、增压板(53)和传动杆(54)均以动力腔(5)为中心对称分布；位于所述动力腔(5)下方的增压腔(52)远离动力腔(5)一侧通过单向导管与第三通槽(7)远离流加箱(4)一端导通设计；位于下方的所述增压腔(52)通过导槽与第二通槽(56)导通设计；对称设计的两个所述增压腔(52)中气流的流动方向相反。
4.根据权利要求3所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：所述密封盖(41)靠近流加箱(4)一侧开设有第一凹槽(8)；所述第一凹槽(8)内滑动连接有移动板(81)；所述移动板(81)靠近密封盖(41)一侧固连有辅助杆(82)；所述辅助杆(82)贯穿密封盖(41)；所述辅助杆(82)位于密封盖(41)外侧一端固连有重力盒(83)；所述重力盒(83)内放置有重力球(84)。
5.根据权利要求1所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：所述承接板(35)内部通过弹簧弹性连接有支撑板(9)；所述培养皿(37)放置于支撑板(9)上；所述承接板(35)底部固连有震动弹簧(91)；所述培养腔(3)底部固连有拨片(92)；所述拨片(92)处于震动弹簧(91)的运动路径上。
6.根据权利要求5所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法，其特征在于：所述培养腔(3)对应第一通槽(42)处开设有第一滑槽(93)；所述拨片(92)均铰接于培养腔(3)底部；所述拨片(92)远离转动轮(31)转动方向一侧固连有挤压囊(94)；所述第一滑槽(93)一侧通过弹簧弹性连接有滑动板(95)、一侧开设有第二滑槽(96)；所述第二滑槽(96)内滑动连接有推杆(97)；所述推杆(97)远离第一滑槽(93)一侧固连有膨胀囊(98)；所述挤压囊(94)与膨胀囊(98)导通设计；初始状态下所述滑动板(95)在弹簧弹性作用下将第一通槽(42)密封。
7.一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基，其特征在于：所述一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基适用于上述权利要求1-6任意一项所述的一种马克思克鲁维酵母菌菌株的培养方法；所述马克思克鲁维酵母菌菌株培养基由以下原料构成：
马铃薯淀粉1％、脱脂牛奶30％、葡萄糖2％、番茄浓缩汁0.5％、柠檬酸钠0.05％、纯净水66.45％，柠檬酸水0.4％。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112625927A (zh) * 2021-01-14 2021-04-09 王雪克 一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法
CN114921327A (zh) * 2022-03-24 2022-08-19 覃拔 一种微生物孢子的培养设备
CN115340929A (zh) * 2022-08-18 2022-11-15 南京林业大学 一种固氮菌的培育装置

Citations (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5942884A (ja) * 1982-09-01 1984-03-09 Ajinomoto Co Inc 通気撹拌培養方法及びそれに用いる装置
JPH02265468A (ja) * 1989-04-06 1990-10-30 Shibata Hario Glass Kk 回転瓶型培養装置
AU2935100A (en) * 1999-03-18 2000-10-04 Emil A. J. Wieser-Linhart Method of obtaining methyl alcohol from raw gas and installation for carrying out said method
US20030143727A1 (en) * 2002-01-31 2003-07-31 King-Ming Chang Cell-cultivating device
JP2004081139A (ja) * 2002-08-28 2004-03-18 Oubiken:Kk 担子菌の培養方法および培養容器
CN2717962Y (zh) * 2004-01-12 2005-08-17 李勇 双联旋流式食用菌液体菌种发酵培养器
KR20080096488A (ko) * 2008-09-25 2008-10-30 이영환 미생물 복합 배양장치
CN102086438A (zh) * 2009-12-07 2011-06-08 韩春茂 用于细胞或组织工程生物培养的装置和方法
CN102296029A (zh) * 2010-06-28 2011-12-28 裴国献 灌注式生物反应器系统
CN202164299U (zh) * 2011-08-12 2012-03-14 山东祥瑞药业有限公司 L-乳酸好氧发酵气升式反应器
CN202369592U (zh) * 2011-12-28 2012-08-08 上海玉华生命科技发展有限公司 一种脆壁克鲁维酵母培养装置
CN103525689A (zh) * 2013-10-23 2014-01-22 南京工业大学 基因工程菌高密度培养用高溶氧生物反应器及培养控制方法
CN204400998U (zh) * 2015-01-09 2015-06-17 漯河市盛粮生物科技有限公司 一种新型的微生物发酵装置
WO2016057512A1 (en) * 2014-10-07 2016-04-14 Life Technologies Corporation Regulated vacuum off-gassing of gas filter for fluid processing system and related methods
WO2017007788A1 (en) * 2015-07-07 2017-01-12 Xyleco, Inc. An apparatus for providing large amounts of gas to a fermentation broth
WO2017070168A1 (en) * 2015-10-20 2017-04-27 Sean Farmer Apparatus, systems and methods for oxygenating liquid media to enhance microorganism growth
CN106635753A (zh) * 2016-12-29 2017-05-10 北京化工大学 一种用于强化高粘性微生物多糖发酵的系统装置及应用
CN107653198A (zh) * 2017-11-08 2018-02-02 新疆天润生物科技股份有限公司 一株用于奶啤生产的马克思克鲁维酵母菌菌株、其专用培养基及其应用
CN108441448A (zh) * 2018-04-02 2018-08-24 郭庆 一种好氧型细菌培养方法
CN109642193A (zh) * 2016-08-26 2019-04-16 株式会社Ihi 细胞培养装置以及细胞培养方法
CN209383784U (zh) * 2018-09-04 2019-09-13 成都市宁升绿康食品有限公司 一种液体菌种培养杀菌换气装置
CN110713897A (zh) * 2019-10-28 2020-01-21 华侨大学 一种微生物隔离培养及培养液供应装置
WO2020076776A1 (en) * 2018-10-10 2020-04-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for membrane gas transfer in high density bioreactor culture
CN111471573A (zh) * 2020-04-20 2020-07-31 林振山 一种微生物培养用发酵罐
CN111518680A (zh) * 2020-04-17 2020-08-11 赵云龙 一种微生物发酵罐
CN111575226A (zh) * 2020-06-17 2020-08-25 中山市浩雅生物科技有限公司 一种荷叶细胞次生代谢物冻干粉的制备方法
CN112094139A (zh) * 2020-09-21 2020-12-18 安斌 一种微生物发酵方法

Patent Citations (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5942884A (ja) * 1982-09-01 1984-03-09 Ajinomoto Co Inc 通気撹拌培養方法及びそれに用いる装置
JPH02265468A (ja) * 1989-04-06 1990-10-30 Shibata Hario Glass Kk 回転瓶型培養装置
AU2935100A (en) * 1999-03-18 2000-10-04 Emil A. J. Wieser-Linhart Method of obtaining methyl alcohol from raw gas and installation for carrying out said method
US20030143727A1 (en) * 2002-01-31 2003-07-31 King-Ming Chang Cell-cultivating device
JP2004081139A (ja) * 2002-08-28 2004-03-18 Oubiken:Kk 担子菌の培養方法および培養容器
CN2717962Y (zh) * 2004-01-12 2005-08-17 李勇 双联旋流式食用菌液体菌种发酵培养器
KR20080096488A (ko) * 2008-09-25 2008-10-30 이영환 미생물 복합 배양장치
CN102086438A (zh) * 2009-12-07 2011-06-08 韩春茂 用于细胞或组织工程生物培养的装置和方法
CN102296029A (zh) * 2010-06-28 2011-12-28 裴国献 灌注式生物反应器系统
CN202164299U (zh) * 2011-08-12 2012-03-14 山东祥瑞药业有限公司 L-乳酸好氧发酵气升式反应器
CN202369592U (zh) * 2011-12-28 2012-08-08 上海玉华生命科技发展有限公司 一种脆壁克鲁维酵母培养装置
CN103525689A (zh) * 2013-10-23 2014-01-22 南京工业大学 基因工程菌高密度培养用高溶氧生物反应器及培养控制方法
WO2016057512A1 (en) * 2014-10-07 2016-04-14 Life Technologies Corporation Regulated vacuum off-gassing of gas filter for fluid processing system and related methods
CN204400998U (zh) * 2015-01-09 2015-06-17 漯河市盛粮生物科技有限公司 一种新型的微生物发酵装置
WO2017007788A1 (en) * 2015-07-07 2017-01-12 Xyleco, Inc. An apparatus for providing large amounts of gas to a fermentation broth
WO2017070168A1 (en) * 2015-10-20 2017-04-27 Sean Farmer Apparatus, systems and methods for oxygenating liquid media to enhance microorganism growth
CN109642193A (zh) * 2016-08-26 2019-04-16 株式会社Ihi 细胞培养装置以及细胞培养方法
CN106635753A (zh) * 2016-12-29 2017-05-10 北京化工大学 一种用于强化高粘性微生物多糖发酵的系统装置及应用
CN107653198A (zh) * 2017-11-08 2018-02-02 新疆天润生物科技股份有限公司 一株用于奶啤生产的马克思克鲁维酵母菌菌株、其专用培养基及其应用
CN108441448A (zh) * 2018-04-02 2018-08-24 郭庆 一种好氧型细菌培养方法
CN209383784U (zh) * 2018-09-04 2019-09-13 成都市宁升绿康食品有限公司 一种液体菌种培养杀菌换气装置
WO2020076776A1 (en) * 2018-10-10 2020-04-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for membrane gas transfer in high density bioreactor culture
CN110713897A (zh) * 2019-10-28 2020-01-21 华侨大学 一种微生物隔离培养及培养液供应装置
CN111518680A (zh) * 2020-04-17 2020-08-11 赵云龙 一种微生物发酵罐
CN111471573A (zh) * 2020-04-20 2020-07-31 林振山 一种微生物培养用发酵罐
CN111575226A (zh) * 2020-06-17 2020-08-25 中山市浩雅生物科技有限公司 一种荷叶细胞次生代谢物冻干粉的制备方法
CN112094139A (zh) * 2020-09-21 2020-12-18 安斌 一种微生物发酵方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHIWEN ZHUANG等: "Effects of dissolved oxygen concentration and iron addition on immediate-early gene expression of Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1", 《FEMS MICROBIOLOGY LETTERS》 *
张智等: "溶氧对氨基酸发酵的影响及其控制", 《科学咨询》 *
王霞等: "好氧发酵过程中影响溶解氧的因素及如何提高溶解氧的浓度", 《黑龙江医药》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112625927A (zh) * 2021-01-14 2021-04-09 王雪克 一种马克思克鲁维酵母菌菌株培养基及其培养方法
CN114921327A (zh) * 2022-03-24 2022-08-19 覃拔 一种微生物孢子的培养设备
CN115340929A (zh) * 2022-08-18 2022-11-15 南京林业大学 一种固氮菌的培育装置
CN115340929B (zh) * 2022-08-18 2023-06-09 南京林业大学 一种固氮菌的培育装置

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