CN112175867B - 一种基于灭活乳酸菌的功能性无纺布 - Google Patents

一种基于灭活乳酸菌的功能性无纺布 Download PDF

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Abstract

本发明具体涉及一种基于灭活乳酸菌的功能性无纺布。无纺布目前在医疗、卫生领域具有广泛的应用，目前市面上的无纺布仅能起到隔离、吸收和防漏的效果，尚且缺乏功能性无纺布。本发明目的在于对传统的无纺布进行改进，提供了一种具有杀菌效果的功能性无纺布，可应用于私处护理卫生用品的制备。基于该目的，本发明筛选得到了一株高产绿原酸及乳酸菌素的植物乳杆菌（Lactobacillus plantaium）HYZQF 1675‑61，并通过培养方式的优化实现了绿原酸及乳酸菌素产量的显著提升。基于该菌株灭活后的代谢物，本发明制备了一种功能性无纺布，经验证，对常见的致病细菌和霉菌都有良好的抑制效果，有望取得巨大的市场价值。

Description

一种基于灭活乳酸菌的功能性无纺布
技术领域
本发明属于功能性纺织品技术领域，具体涉及一种植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HYZQF 1675-61及所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF1675-61的灭活菌及代谢物在制备功能性无纺布中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
无纺布，其确切名称为非织造布，也称不织布，是一种不需要纺纱织布而形成的织物，只是将纺织短纤维或者长丝进行定向或随机排列，形成纤网结构，然后采用机械、热粘等方法加固而成。无纺布突破了传统的纺织原理，并具有工艺流程短、生产速度快，产量高、成本低、用途广、原料来源广泛等特点。目前无纺布的应用领域广泛，主要包括医疗、卫生方面：手术衣、防护服、消毒包布、口罩、尿片、民用抹布、擦拭布、湿面巾、柔巾卷、美容用品、卫生巾、卫生护垫、及一次性卫生用布等。发明人认为，卫生巾、卫生护垫及纸尿裤使用与人体皮肤紧贴，这些产品的主要功能只能起到吸收和防漏的效果，对人体私处起不到养护作用，并且一旦没有及时更换，产生了细菌，就会快速增长，对人体健康造成危害。
人体微生态系统由数量巨大、种类繁多的微生物组成，经过漫长的生物进化过程，正常菌群与人体处于平衡共生状态，并与人体建立密切关系。当人体中的微生物处于平衡时，人则处于健康状态，而如果受环境影响，出现外源性感染或者是内源性感染，从而微生态平衡被打破，会引发人体健康问题。乳酸菌的生长对有害菌起到一定的抑制作用，从而达到微生态平衡。乳酸菌在生长代谢过程中，会产生活性物质，抑制病原菌、防治疾病，同时帮助人体建立和恢复免疫功能、调节睡眠、情绪、改善肠道蠕动等起到非常重要的作用。发明人认为，将灭活的乳酸菌及代谢物应用于卫生制品的添加，有望提高卫生产品的抗菌能力，提高人体皮肤免疫力，降低有害菌滋生导致人体私处产生的疾病。
发明内容
针对上述研究背景，本发明首先通过筛选获得了一株高产绿原酸及乳酸菌素的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-61，本发明针对该菌株的培养方式进行优化，使其代谢物中的绿原酸及乳酸菌素的含量显著提升，并且将发酵时间由常规的24小时缩短至12小时。本发明证实了，将该菌株的灭活产物及代谢物应用于制备功能性无纺布，能够有效的抑制常见致病菌及霉菌，作为卫生制品加以应用具有良好的应用前景。
基于上述技术效果，本发明提供以下技术方案：
本发明第一方面，提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF1675-61，已于2019年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址为：中国，武汉，武汉大学，其生物保藏号为：CCTCC NO：M 2019216。
本发明从新疆骆驼奶中分离得到的所述菌株，结合其核酸信息、形态学特征及生理生化特征认定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，定名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-61。
本发明筛选得到的植物乳酸菌HYZQF 1675-6 1天然具有分泌绿原酸及乳酸菌素的功效。为了满足工业生产需求，本发明尝试通过优化该菌株的培养条件实现有益物质的扩大生产。实验结果表明，通过培养条件的优化，所述植物乳酸菌HYZQF 1675-6 1培养分泌物中的绿原酸及乳酸菌素含量显著提升，并且菌株发酵所需时间显著缩短，对于工业化生产具有重要意义。
基于该技术效果，本发明第二方面，还提供一种菌剂，所述菌剂包括第一方面所述的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1和/或菌的培养物。
优选的，所述菌剂中还包括其他菌株和/或其培养物，所述其他菌株包括但不限于嗜酸乳杆菌(L.brevis)，干酪乳杆菌(L.Bulgaricus)，德氏乳杆菌(L.delbrueckii)，发散乳杆菌(L.divergens)，发酵乳杆菌(L.fermentum)，加氏乳杆菌(L.gasseri)，向日葵乳杆菌(L.helveticus)，Jensenii乳杆菌(L.jonsonii)，Kunkeei乳杆菌(L.lactis)，Otakiensis乳杆菌(L.paracasei)，罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)，鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)，反刍动物乳杆菌(L.ruminis)，沙氏乳杆菌(L.salivarius)，阴道乳球菌(L.vaginalis)，双乙酰乳酸乳球菌(L.lactis)和/或嗜热链球菌(S.thermophilus)。
本发明第三方面，提供第一方面所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1和/或第二方面所述菌剂在制备卫生用品或纺织品域的应用。
本发明研究发现，基于上述培养方式灭活的菌株及代谢物具有良好的吸附性，可以耐受高温、高湿环境，其活性不受抗生素等药物的限制，能够竞争性的抑制多种致病菌，应用于制备私处卫生用品可以有效的阻止致病微生物侵入人体。特别是将其灭菌后的菌粉用于制备无纺布产品，制备工艺简单并且能够满足多种卫生用品的制备。
本发明第四方面，提供一种治疗或预防选自生物机能障碍的病症的方法，其特征在于，所述方法包括采用第二方面所述菌剂进行治疗。
以上一个或多个技术方案的有益效果是：
1、本发明筛选获得一株能够同时分泌绿原酸和乳酸菌素的植物乳杆菌，并通过培养条件的优化实现了上述两种成分的高产，并且灭活后的菌株及代谢物具有良好的稳定性，其抗菌作用不受抗生素药物的限制。基于上述特点，该菌株及代谢物非常适宜工业扩大化生产，是一种前景良好的抗菌产品。
2、本发明发现，上述菌株的代谢产物绿原酸及乳酸菌素对常见的外生殖器致病菌具有良好的抑制作用，联想到将上述抗菌产品应用于制备功能性无纺布，用于制备卫生制品，有望提供一种保护、同时具有抗菌功能的卫生制品。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例1中所述菌株培养及采用常规培养方法进行培养后有益成分的含量直方图。
图2为采用实施例1中培养方法培养得到的植物乳酸菌遗传稳定性。
图3为实施例1中植物乳杆菌培养后代谢产物中绿原酸、乳酸菌素产量与培养时间的关系。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，无纺布作为一种私处卫生用品的应用十分广泛，并目前市面上的卫生用品缺乏具有杀菌效果的功能性产品，为了解决如上的技术问题，本发明提供了一种通过参加菌株代谢制备功能性无纺布的技术方案。
本发明第一方面，提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF1675-61，已于2019年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址为：中国，武汉，武汉大学，其生物保藏号为：CCTCC NO：M 2019216。
优选的，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1的培养基包括扩大培养基、一级种子培养基、种子发酵培养基；
所述扩大培养基中各成分及质量比如下：异麦芽酮糖12～17g：水苏糖8～12g：牛肉浸粉2.8～3.2g：乙酸钠0.4～0.6g：吐温-80 0.5～0.7mL：磷酸氢二钠0.7～0.9g：水1000mL，pH调至7(碱调液)。
所述一级种子培养基中各成分及质量比如下：异麦芽酮糖8～12g、蛋白胨4～6g、牛肉浸粉5～7g，玉米浆1.5～2.5g、乙酸钠0.4～0.6g、蛋氨酸0.3～0.6g、马齿苋提取物0.8～1.2g、水1000mL。
上述培养基中的马齿苋提取物的制备方法如下：将新鲜的马齿苋清洗干净，榨汁制备，得到马齿苋提取物。更为具体的方案中，将100g新鲜马齿苋洗净后投入500ml水中，经过榨汁、浓缩至50ml，加入麦芽糊精50g，95℃烘干7h，得到马齿苋提取物。
所述发酵罐发酵培养基：异麦芽酮糖4～6％，、蛋白胨1.5～2.5％、磷酸氢二钾0.3～0.6％，苏氨酸0.4～0.6％、乙酸钠0.4～0.8％、植物油0.08～0.12％、水90～95％，pH值自然。
本发明第二方面，提供一种菌剂，所述菌剂包括第一方面所述的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1和/或菌的培养物。
优选的，所述菌剂中还包括其他菌株和/或其培养物，所述其他菌株包括但不限于嗜酸乳杆菌(L.brevis)，干酪乳杆菌(L.Bulgaricus)，德氏乳杆菌(L.delbrueckii)，发散乳杆菌(L.divergens)，发酵乳杆菌(L.fermentum)，加氏乳杆菌(L.gasseri)，向日葵乳杆菌(L.helveticus)，Jensenii乳杆菌(L.jonsonii)，Kunkeei乳杆菌(L.lactis)，Otakiensis乳杆菌(L.paracasei)，罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)，鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)，反刍动物乳杆菌(L.ruminis)，沙氏乳杆菌(L.salivarius)，阴道乳球菌(L.vaginalis)，双乙酰乳酸乳球菌(L.lactis)和/或嗜热链球菌(S.thermophilus)。
优选的，所述菌的培养物包括菌株代谢物。
优选的，所述菌剂剂型为液体菌剂、粉剂或颗粒剂；进一步的为水悬浮剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂或水分散颗粒剂。
进一步优选的，所述菌剂剂型为粉剂，具体为一种灭活的冻干粉剂。
作为优选，所述菌剂中还包括辅料，所述辅料选自分散剂、润湿剂、崩解剂、粘结剂、消泡剂、抗冻剂、增稠剂、填料和溶剂中的一种或多种。本发明对所述辅料的来源等没有特殊限制，一般采用市售产品即可。
本发明第三方面，提供第一方面所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1和/或第二方面所述菌剂在制备卫生用品或纺织品域的应用。
优选的，所述卫生用品包括但不限于卫生巾、尿布、内裤衬里、棉塞、失禁防护物和/或卫生纸。
优选的，所述纺织品包括但不限于毛巾、衣物、床品或无纺布等。
进一步优选的，本发明提供上述菌剂在制备功能性无纺布中的应用。所述功能性无纺布可用于制备卫生用品，如卫生纸、卫生巾、纸尿裤、卫生湿巾或口罩等。
本发明一种效果较好的实施方式中，提供一种功能性无纺布，所述功能性无纺布制备方法包括：将聚丙烯与第二方面所述菌剂混合按照100:1～2的质量比进行混合。
本发明第四方面，提供一种治疗或预防选自生物机能障碍的病症的方法，其特征在于，所述方法包括采用第二方面所述菌剂进行治疗。
优选的，所述生物机能障碍的病症包括但不限于阴道病、外阴和/或阴道酵母感染、黄疸炎、阴道炎和/或尿路感染。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-61号保藏于-80℃低温冰箱中，首先对其进行扩大培养。
1.保藏菌种的扩大培养
培养基的配制：异麦芽酮糖15g、水苏糖10g、牛肉浸粉3g、乙酸钠0.5g、吐温-800.6mL、磷酸氢二钠0.8g、水1000mL，pH调至7(碱调液)。
将以上原料不分前后的加入到配方中的1000mL水中，搅拌10分钟使之溶化，然后分装于试管中，每只试管5mL，胶塞牛皮纸封口，放医用消毒器中0.1-0.12Mpa灭菌20分钟，培养基制作完成。
2.接种
在无菌条件下(超净工作台)打开-80℃低温冰箱将保存所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1的冷冻管室温溶化，然后再取以上灭好菌的试管培养基1只，将溶化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-61的菌液取0.5mL加入到试管中，用胶塞牛皮纸封好管口，用手轻轻摇匀，放入恒温培养箱中35℃静置培养10小时即可，得到扩大培养液。
3.一级种子培养配方
异麦芽酮糖10g、蛋白胨5g、牛肉浸粉6g，玉米浆2g、乙酸钠0.5g、蛋氨酸0.4g、马齿苋提取物1g、水1000mL，pH值自然。将上述原料不分前后的加入到1000mL水中，开动搅拌机，搅拌10分钟，使全部溶化，获得一级种子培养液。
将搅拌溶化好的一级种子培养液按用量加入到三角瓶中，然后用6层纱布外加层牛皮纸包扎好瓶口，放入消毒器中灭菌，灭菌前先打开消毒器上的排气阀等有少量蒸汽排出时关闭，当消毒器上的压力达到0.05MPa时，打开消毒器上的排阀排气6-8min，然后关闭排气阀，继续加温，当消毒器达到0.1-0.12MPa时开始计时，灭菌时间为20min，完毕后离开热源，让其自然降温，当消毒器上的压力表归零时，打开消毒器，取出灭好菌的培养基放入超净工作台中自然降温，当温度降至35℃时，将以上培养好的扩大菌种液移接到灭好菌的三角瓶培养液中，接种量均为0.5％，即一级种子培养液100毫升，接入扩大菌液为0.5mL，完毕后用原有纱布及牛皮纸将瓶口封好，用手稍加摇动使接入的菌种与培养液混合均匀，然后放恒温箱中在35℃的条件下培养7h即可，得到一级菌种液。
4.发酵设备、管道及无菌过滤系统的灭菌
首先打开各进出管道及无菌空气管道阀门，通入0.12-0.14Mpa的蒸汽，让蒸汽与管道阀门联通并有少量蒸汽排出，通气40分钟，然后关闭各进出口管道阀门，备用。
5.种子罐及发酵罐的空罐灭菌
关闭各个阀门，打开罐底部的排污阀及罐夹层的排污阀，打开直接蒸汽阀门向管内通入0.12-0.14Mpa的蒸汽，当罐内达到121℃时开始计时，灭菌时间为40min，然后关闭罐底部的排污阀及夹层排污阀，罐中温度自然降至35℃备用。
6.发酵罐培养
发酵罐培养基配方：
异麦芽酮糖5％，、蛋白胨2％、磷酸氢二钾0.4％，苏氨酸0.5％、乙酸钠0.6％、植物油0.1％、水92.4％，pH值自然。
本实施例中，还对比了常规培养方式及采用上述培养方式获得灭活后的菌株代谢物中绿原酸、乳酸菌素的产量及上述培养方式获得菌株的遗传稳定性，结果如附图1和2所示。
在常规方式中，采用MRS培养基作为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-61的种子培养基、扩大培养基及发酵罐培养基，其余操作与上述过程相同。
另外，本实施例中，还考察了植物乳杆菌培养后代谢产物中绿原酸、乳酸菌素产量与培养时间的关系，结果如附图3所示。
结合上述附图可以看出，实施例1中培养方式获得的代谢产物绿原酸与常规菌种及生产方法相比较，由发酵液的97mg/L提高到了2490mg/L；乳酸菌素与常规菌种及生产工艺相比较，由发酵液的2150mg/L提高到了6947mg/L；发酵时间由常规的24小时缩短到了12小时，从而提高了设备利用率，降低了生产成本。
实施例2功能性无纺布的制备及抑菌效果验证
取实施例1中所述功能性灭活菌代谢产物冻干粉(按无纺布用料聚丙烯1.5％的加入量)，即100kg聚丙烯或其他树脂加入灭活乳酸菌冻干粉1.5kg均匀然后按无纺布工艺的要求溶化，制备得到所述功能性无纺布成品。经检测，该功能性无纺布抑菌性能达到GB15979--2002一次性使用卫生用品卫生标准和《消毒技术规范》(第三版)的要求，明确具有抑菌功效，符合法规要求。
本实施例中，针对所述功能性无纺布进行如下检查：
1、产品采集与样品处理
于同一批号的三个运输包装中至少抽取12个最小销售包装样品，1/4样品用于检测，1/4样品用于留样，另1/2样品(可就地封存)必要时用于复检。抽样的最小销售包装不应有破裂，检验前不得启开。在100级净化条件下用无菌方法打开用于检测的至少3个包装，从每个包装中取样，准确称取10g±1g样品，剪碎后加入到200mL灭菌生理盐水中，充分混匀，得到生理盐水样液。液体产品用原液直接做样液。如被检样含有大量吸水树脂材料而导致不能吸出足够样液时，稀释液量可按每次50mL递增，直到能吸出足够测试用样液。在计算细菌菌落总数与真菌菌落总数时应调整稀释度。
2、细菌菌落总数与初始污染菌检测方法
本方法适用于产品初始污染菌与细菌菌落总数(以下统称为细菌菌落总数)检测。
2.1操作步骤
待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。共接种5个平皿，每个平皿中加入1mL样液，然后用冷却至45℃左右的熔化的营养琼脂培养基1520mL倒入每个平皿内混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置35℃±2℃培养48h后，计算平板上的菌落数。
2.2结果报告
菌落呈片状生长的平板不宜采用，计数符合要求的平板上的菌落，按式(B1)计算结果：
Figure GDA0003438552380000081
式中:X1一细菌菌落总数，cfu/g或cfu/mL；
A—5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数；
K—稀释度
表1
Figure GDA0003438552380000091
本发明产品经过恒温恒湿加速，加速周期为37℃下90天，即换算为贮存时间为两年，经检测，抑菌稳定性能达到GB15979-2002一次性使用卫生用品卫生标准和《消毒技术规范》(第三版)的要求，符合法规要求。检测内容如下：
表2
Figure GDA0003438552380000092
Figure GDA0003438552380000101
霉菌对照实验：
准备材料：普通无纺布、添加灭活乳酸菌后的无纺布、已培养好的霉菌液。
实验步骤：在两个样品上滴上已培养好的霉菌液，无菌条件下培养，观察0-1小时样品细菌数和24小时样品细菌数。
实验结果：
表3
名称 0-1小时菌落数 24小时菌落数
普通无纺布 5 20
添加灭活乳酸菌后的无纺布 0 5
由上表得到：添加灭活乳酸菌的无纺布明确具有抑菌功效。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HYZQF 1675-6 1，已于2019年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址为：中国，武汉，武汉大学，其生物保藏号为：CCTCC NO：M 2019216。
2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包括权利要求1所述的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HYZQF 1675-6 1的培养物，所述培养物经扩大培养基、一级种子培养基、发酵罐发酵培养基培养获得；
所述扩大培养基中各成分及质量比如下：异麦芽酮糖12～17g：水苏糖8～12g：牛肉浸粉2.8～3.2g：乙酸钠0.4～0.6g：吐温-80 0.5～0.7mL：磷酸氢二钠0.7～0.9g：水1000mL，pH调至7；
所述一级种子培养基中各成分及质量比如下：异麦芽酮糖8～12g、蛋白胨4～6g、牛肉浸粉5～7g，玉米浆1.5～2.5g、乙酸钠0.4～0.6g、蛋氨酸0.3～0.6g、马齿苋提取物0.8～1.2g、水1000mL；
所述发酵罐发酵培养基为：异麦芽酮糖4～6％、蛋白胨1.5～2.5％、磷酸氢二钾0.3～0.6％，苏氨酸0.4～0.6％,乙酸钠0.4～0.8％、植物油0.08～0.12％、水90～95％，pH值自然。
3.如权利要求2所述菌剂，其特征在于，所述菌的培养物包括菌株代谢物。
4.如权利要求2所述菌剂，其特征在于，所述菌剂剂型为液体菌剂、粉剂或颗粒剂。
5.如权利要求4所述菌剂，其特征在于，所述菌剂剂型为水悬浮剂、可分散油悬浮剂、可湿性粉剂或水分散颗粒剂。
6.如权利要求5所述菌剂，其特征在于，所述菌剂剂型为灭活的冻干粉剂。
7.权利要求2-6任一项所述菌剂用于制备功能性无纺布的应用，所述功能性无纺布的制备方法包括：将聚丙烯与权利要求2-6任一项所述菌剂混合按照100:1～2的质量比进行混合。
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CN109439592A (zh) * 2018-12-06 2019-03-08 青岛东海药业有限公司 植物乳杆菌制剂及其应用
CN110123978A (zh) * 2019-04-12 2019-08-16 广州市私域生物科技有限公司 一种微生态抑菌液及制备方法
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