CN112175835B - 植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用 - Google Patents

植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物领域，具体涉及植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用。所述应用包括：去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味，减缓其活菌数的下降。还提供了一种去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法，该方法包括：将植物乳酸菌的发酵液和枯草芽孢杆菌的发酵液混合，得到混合发酵液，并将所述混合发酵液进行储存。将植物乳酸菌应用在枯草芽孢杆菌种子液储存的过程中，能够有效的去除其产生的较浓刺鼻性异味，并使得其活菌数较为稳定。

Description

植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用
技术领域
本发明涉及微生物领域，具体涉及植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用。
背景技术
枯草芽孢杆菌是在自然界广泛存在的一种好氧的产芽孢杆菌。枯草芽孢杆菌在孢子状态下(在成熟期以孢子状态存在)稳定性极好，有耐氧化、耐挤压、耐高温、耐积水、耐酸和耐胆盐等特性并能分泌多种酶类物质和生长未知因子。有资料表明，枯草芽孢杆菌能长期耐60℃高温，在贮存和加工条件下枯草芽孢杆菌也有很高的耐受能力；在pH值2.2-7.0范围内枯草芽孢杆菌有较高的存活率，在酸性胃环境中能保持活性。它具有很强的脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等活性，代谢旺盛，对人畜无害，不污染环境，在畜牧业饲料行业应用广泛。枯草芽孢杆菌是饲用微生态制剂的常用菌种之一。枯草芽孢杆菌通过定植到目标动物肠道中，经生物夺氧作用，颉颃致病微生物，并产生多种消化酶及营养物质，产生有益代谢产物。所以枯草芽孢杆菌不仅可以改善原料风味，更重要的是它可调节消化道健康，增强动物体的免疫功能，最终预防疾病的发生，达到促进目标动物生长和提高饲料转化率的目的，因而枯草芽孢杆菌被越来越多地研制成饲用微生态制剂。
随着发酵饲料行业发展，市场对饲料的需求供不应求，需要大量种子液(发酵液)，而枯草芽孢杆菌种子液(发酵液)储存2天后，有较浓刺鼻性异味，并且活菌数下降较快。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的枯草芽孢杆菌种子液储存过程中容易产生较浓刺鼻性异味、且活菌数下降较快的问题，提供植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用，将植物乳酸菌应用在枯草芽孢杆菌发酵液储存的过程中，能够有效的去除其产生的较浓刺鼻性异味，并使得其活菌数较为稳定。
为了实现上述目的，本发明一方面提供了植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用。
本发明第二方面提供了植物乳酸菌在去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味中的应用。
优选的，所述枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法包括：将枯草芽孢杆菌接种在枯草芽孢杆菌发酵培养基中进行培养，得到所述枯草芽孢杆菌发酵液；其中，所述枯草芽孢杆菌发酵培养基含有豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰。
优选地，所述植物乳酸菌为植物乳酸菌的发酵液，所述植物乳酸菌的发酵液的制备方法包括：将植物乳酸菌接种在植物乳酸菌发酵培养基中进行培养，得到所述植物乳酸菌的发酵液；其中，所述植物乳酸菌发酵培养基含有酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙。
本发明第三方面提供了一种去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法，该方法包括：在枯草芽孢杆菌发酵液中加入植物乳酸菌，得到混合发酵液，并将所述混合发酵液进行储存。
优选的，相对于100体积份的所述枯草芽孢杆菌发酵液，以植物乳酸菌的发酵液计的植物乳酸菌的用量为80-120体积份。
根据本发明的方法，在枯草芽孢杆菌发酵液储存的过程中加入植物乳酸菌，能够有效地去除枯草芽孢杆菌发酵液产生的异味。并且在常温下(30-33℃)储存60天，仍然没有所述异味生成。进一步的，将植物乳酸菌和枯草芽孢杆菌一起储存，枯草芽孢杆菌的活菌数下降较缓慢。由此可见，植物乳酸菌不但能够有效去除枯草芽孢杆菌产生的异味，且两种菌在储存的过程中还能够发挥协同的作用，使得枯草芽孢杆菌活菌数下降缓慢。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
第一方面，本发明提供了植物乳酸菌在枯草芽孢杆菌发酵液储存中的应用。
根据本发明，在枯草芽孢杆菌发酵液储存的过程中加入植物乳酸菌，能够有效地去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味，还能够减缓枯草芽孢杆菌活菌数的下降。
其中，所述异味为刺激性臭味。
第二方面，本发明提供了植物乳酸菌在去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味中的应用。
根据本发明，所述枯草芽孢杆菌可以为本领域常用的各种枯草芽孢杆菌，可以通过商购获得，例如，可以为获自安徽农业大学生命科学学院，编号为951NA4的枯草芽孢杆菌。
根据本发明，所述枯草芽孢杆菌发酵液可以按照本领域常规的方法进行制备，例如，可以将枯草芽孢杆菌接种到常规用于其培养的液体培养基中进行培养后获得。例如，用于发酵所述枯草芽孢杆菌的培养基可以含有0.3-1.0重量％的酵母粉、0.3-0.8重量％的玉米浆、0.3-0.8重量％的糖蜜、1.5-2.5重量％的玉米粉、1-3重量％的豆粕和0.008-0.05重量％的硫酸锰，pH自然。
但本发明的发明人发现，当使用含有豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰的枯草芽孢杆菌发酵培养基对枯草芽孢杆菌进行培养时，植物乳酸菌对其异味能够更为有效地去除，且枯草芽孢杆菌的活菌数下降更为缓慢。这可能是由于培养基中的某些组分或者是枯草芽孢杆菌使用这些组分发酵后的产物能够和植物乳酸菌发生相互作用，从而抑制了枯草芽孢杆菌储存过程中异味的产生或是在储存的过程中植物乳酸菌利用了枯草芽孢杆菌产生的异味，并且，相互作用后的产物能够反作用于枯草芽孢杆菌，从而进一步抑制所述异味的生成且使得枯草芽孢杆菌在保存期间的活菌数下降较为缓慢。
其中，对于所述枯草芽孢杆菌发酵培养基中含有的如上组分的含量可以在较宽的范围内进行选择，优选的，相对于100重量份的所述枯草芽孢杆菌发酵培养基，所述豆粕的含量为1-2.5重量份，所述玉米粉的含量为3-4重量份，所述淀粉酶的含量为0.01-0.03重量份，所述酵母浸粉的含量为0.5-1重量份，所述葡萄糖的含量为0.3-0.7重量份，所述硫酸锰的含量为0.01-0.03重量份。
其中，所述淀粉酶可以为耐高温淀粉酶，例如，可以耐受90℃以上温度的淀粉酶。所述淀粉酶可以在枯草芽孢杆菌发酵的过程中对培养基中含有的豆粕和玉米粉等淀粉类物质进行进一步的酶解，从而保证糖源可以稳定的提供给枯草芽孢杆菌，使得发酵性能进一步提高。
所述枯草芽孢杆菌发酵培养基还含有水，含量可根据需要进行选择，例如，可以为92-96重量％。所述枯草芽孢杆菌发酵培养基含有上述成分(豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰)或由以上成分(豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰)和水组成。其中，豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰均为常规的用来配制微生物的培养基的物质，可以通过商购获得。
对所述枯草芽孢杆菌进行液体培养时，对枯草芽孢杆菌的接种量没有特别的要求，然而，在本发明的优选实施方式中，相对于每100毫升的培养基，所述枯草芽孢杆菌的接种量为0.1-1毫升。
本发明中，对液体培养的条件没有特别的要求，可以为常规的培养枯草芽孢杆菌的条件。例如，在有氧的条件下进行培养，温度可以为35-39℃，可以通过搅拌提供氧气，搅拌速率可以为110-130rpm。
本发明中，在采用如上枯草芽孢杆菌发酵培养基对枯草芽孢杆菌进行液体培养之前，还可以对枯草芽孢杆菌进行活化，活化可以按照常规的活化方式进行。例如，可以采用含蛋白胨、酵母粉、氯化钠和葡萄糖的培养基进行活化，活化可以采用一级活化的方式，也可以采用二级活化的方式。在此不再详述。
根据本发明，所述植物乳酸菌优选为植物乳杆菌，所述植物乳杆菌可以为本领域常用的各种植物乳杆菌，可以通过商购获得，例如，可以为来自于中粮营养健康学院菌种保藏中心的植物乳杆菌(编号为BC00171)。
根据本发明，所述植物乳酸菌的发酵液可以按照本领域常规的方法进行制备，例如，可以将植物乳酸菌接种到常规用于其培养的液体培养基中进行培养后获得。其中，用于发酵所述植物乳酸菌的培养基可以为MRS肉汤培养基。
但本发明的发明人发现，当使用含有酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙的植物乳酸菌发酵培养基对植物乳酸菌进行培养时，植物乳酸菌对其异味能够更为有效地去除，且枯草芽孢杆菌的活菌数下降更为缓慢。这可能是由于培养基中的某些组分或者是植物乳酸菌使用这些组分发酵后的产物能够和枯草芽孢杆菌发生相互作用，从而抑制了枯草芽孢杆菌储存过程中异味的产生或是在这些组分共同作用的情况下，植物乳酸菌能够有效利用枯草芽孢杆菌储存过程中产生的异味，并且培养基中的某些组分或者是植物乳酸菌使用这些组分发酵后的产物能够为枯草芽孢杆菌提供进一步的营养，或者抑制枯草芽孢杆菌的代谢活动，使其能够长时间存活。
其中，对于所述植物乳酸菌发酵培养基中含有的如上组分的含量可以在较宽的范围内进行选择，优选的，相对于100重量份的所述植物乳酸菌发酵培养基，所述酵母浸粉的含量为1-5重量份，所述醋酸钠的含量为0.2-0.7重量份，所述柠檬酸三铵的含量为0.1-0.3重量份，所述磷酸氢二钾的含量为0.1-0.3重量份，所述葡萄糖的含量为0.3-0.8重量份，所述吐温80的含量为0.05-0.15重量份，所述硫酸锰的含量为0.004-0.006重量份，所述硫酸镁的含量为0.01-0.03重量份，所述无水所述葡萄糖的含量为2-6重量份，所述碳酸钙的含量为2-3重量份。
所述植物乳酸菌发酵培养基还含有水，含量可根据需要进行选择，例如，可以为92-96重量％。所述植物乳酸菌发酵培养基含有上述成分(酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙)或由以上成分(酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙)和水组成。其中，酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙均为常规的用来配制微生物的培养基的物质，可以通过商购获得。
对所述植物乳酸菌进行液体培养时，对植物乳酸菌的接种量没有特别的要求，然而，在本发明的优选实施方式中，相对于每100毫升的培养基，所述植物乳酸菌的接种量为0.1-1毫升。
本发明中，对液体培养的条件没有特别的要求，可以为常规的培养植物乳酸菌的条件。例如，在厌氧或兼性厌氧的条件下进行培养，温度可以为33-37℃。
本发明中，在采用如上植物乳酸菌发酵培养基对植物乳酸菌进行液体培养之前，还可以对植物乳酸菌进行活化，活化可以按照常规的活化方式进行。例如，可以在MRS肉汤培养基中进行活化，活化可以采用一级活化的方式，也可以采用二级活化的方式。在此不再详述。
第三方面，本发明还提供了一种去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法，该方法包括：在枯草芽孢杆菌发酵液中加入植物乳酸菌，得到混合发酵液，并将所述混合发酵液进行储存。
其中，对于枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法在如上已经进行了充分的阐述，此处不再重复赘述。
其中，所述植物乳酸菌优选以植物乳酸菌的发酵液的形式加入到所述枯草芽孢杆菌发酵液中，植物乳酸菌的发酵液的制备方法在如上已经进行了充分的阐述，此处不再重复赘述。
根据本发明，在储存的过程中，对于植物乳酸菌的发酵液的用量可以在较宽的范围内进行选择，但为了更大程度的减少枯草芽孢杆菌异味，并且使菌体的活菌数在储存过程中更加稳定，优选的，相对于100体积份的所述枯草芽孢杆菌的发酵液，所述植物乳酸菌的发酵液的用量为80-120体积份，例如，80体积份、90体积份、100体积份、110体积份、120体积份。其中，植物乳酸菌的发酵液和枯草芽孢杆菌的发酵液均指的是发酵后直接得到的发酵液，没有进行后续处理。
根据本发明，在本发明方法下，所述植物乳酸菌和枯草芽孢杆菌的混合发酵液可以在常温下进行静置储存，而不需要低温储存，从而降低了储存成本。
此外，当以本发明的混合发酵液接种进行饲用微生态制剂的制备时，由于植物乳酸菌和枯草芽孢杆菌的培养条件不同(植物乳酸菌为大部分为兼性厌氧菌，而枯草芽孢杆菌为好氧菌)，可以通过培养条件的选择很容易的对混合发酵液中的微生物进行选择性培养。此外，也可以通过培养基的组成进行选择性的培养。此外，可以通过培养条件和培养基的选择使得两种微生物可以共同生长，从而丰富制备的饲用微生态制剂的有益菌群。
以下结合具体实施例对本文进行详细描述。本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
下述实施例中使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂和设备等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
枯草芽孢杆菌获自安徽农业大学生命科学学院，编号为951NA4。
植物乳杆菌来自于中粮营养健康学院菌种保藏中心，编号为BC00171。
市售MRS肉汤：购自北京陆桥技术有限责任公司，牌号CM187。
单独枯草芽孢杆菌发酵液中活菌数的测定方法：在规定的时间内取一定量的发酵液，使用无菌生理盐水稀释至合适的倍数后涂布在NA平板上，37℃左右下倒置培养12小时，对菌落数进行计数(菌落为水滴状)，并计算得到相应发酵液中枯草芽孢杆菌的活菌数。
单独植物乳杆菌发酵液中活菌数的测定方法：在规定的时间内取一定量的发酵液，使用无菌生理盐水稀释至合适的倍数后涂布在MRS平板上，37℃左右下倒置培养24小时，对菌落数进行计数(菌落为乳白色)，并计算得到相应发酵液中植物乳杆菌的活菌数。
混合发酵液中枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌数的测定：在规定的时间内取一定量的混合发酵液，使用无菌生理盐水稀释至合适的倍数，涂布NA平板用于枯草芽孢杆菌的活菌数测定(菌落为水滴状)，涂布MRS平板用于植物乳杆菌的活菌数测定(菌落为乳白色)，37℃左右下倒置培养24小时，对菌落数进行计数(菌落为乳白色)，并计算得到相应发酵液中的枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的活菌数。
制备例1
本制备例用于说明枯草芽孢杆菌种子的活化
将保存在超低温冰箱中枯草芽孢杆菌提前0.5h自然解冻。之后以0.1体积％的接种量接种到含有0.5重量％酵母粉、1重量％蛋白胨、0.5重量％葡萄糖和1重量％氯化钠的灭菌种子培养基中进行种子的活化培养。培养条件为30±2℃培养，转速100rppm，待OD值长至2.6，pH为6.0左右，一级种子摇瓶结束，活菌数109cfu/ml。
制备例2
本制备例用于说明植物乳酸菌种子的活化
将保存在超低温冰箱中植物乳杆菌提前0.5h自然解冻。之后以0.2体积％的接种量接种到灭菌的MRS肉汤培养基中进行种子的活化培养。静置35±2℃培养。待OD值长至6-7，pH为4.0左右，一级种子摇瓶结束，活菌数1010cfu/ml。
实施例1
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
(1)枯草芽孢杆菌的发酵培养
培养基：豆粕1.8重量％，玉米粉3.4重量％，高温淀粉酶0.2重量‰，酵母浸粉0.8重量％，葡萄糖0.5重量％，硫酸锰0.2重量‰，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例1制备的枯草芽孢杆菌的活化种子液以0.1体积％的接种量接种在上述培养基中，37±2℃培养，转速120rppm，待OD值长至9.5左右，pH为7.2左右，发酵摇瓶结束，活菌数4.6*1010cfu/ml。
(2)植物乳杆菌的发酵培养
培养基：酵母浸粉3重量％，醋酸钠0.5重量％，柠檬酸三铵0.2重量％，磷酸氢二钾0.2重量％，葡萄糖0.5重量％，吐温80 0.1体积％，硫酸锰0.05重量‰，硫酸镁0.2重量‰，无水葡萄糖4重量％，碳酸钙2.5重量％，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例2制备的植物乳杆菌的活化种子液以0.2体积％的接种量接种在上述培养基中，静置35±2℃培养。待OD值长至6-7，pH为7.0左右，发酵摇瓶结束，活菌数5.7*1012cfu/ml。
(3)枯草芽孢杆菌的储存
将步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液按照1:1的体积比混合后，于500ml灭菌三角瓶中30-33℃下静置储存，同时以相同体积的单独的步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和单独的步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液作为对照，并于第0天、第2天、第15天、第30天、第45天、第60天对储存液的气味进行评价，以及各发酵液中相应菌种的活菌数，结果如表1所示。
表1
Figure BDA0002120697690000111
实施例2
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
培养基：豆粕1重量％，玉米粉4重量％，高温淀粉酶0.1重量‰，酵母浸粉1重量％，葡萄糖0.3重量％，硫酸锰0.3重量‰，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例1制备的枯草芽孢杆菌的活化种子液以0.1体积％的接种量接种在上述培养基中，37±2℃培养，转速120rppm，待OD值长至9.5左右，pH为7.2左右，发酵摇瓶结束，活菌数4.3*1010cfu/ml。
(2)植物乳杆菌的发酵培养
培养基：酵母浸粉1重量％，醋酸钠0.2重量％，柠檬酸三铵0.3重量％，磷酸氢二钾0.3重量％，葡萄糖0.8重量％，吐温80 0.05体积％，硫酸锰0.04重量‰，硫酸镁0.3重量‰，无水葡萄糖2重量％，碳酸钙2重量％，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例2制备的植物乳杆菌的活化种子液以0.2体积％的接种量接种在上述培养基中，静置35±2℃培养。待OD值长至6-7，pH为7.0左右，发酵摇瓶结束，活菌数5.5*1012cfu/ml。
(3)枯草芽孢杆菌的储存
将步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液按照1:0.8的体积比混合后，于500ml灭菌三角瓶中30-33℃下静置储存，同时以相同体积的单独的步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和单独的步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液作为对照，并于第0天、第2天、第15天、第30天、第45天、第60天对储存液的气味进行评价，以及各发酵液中相应菌种的活菌数，结果如表2所示。
表2
Figure BDA0002120697690000121
实施例3
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
培养基：豆粕2.5重量％，玉米粉3重量％，高温淀粉酶0.3重量‰，酵母浸粉0.5重量％，葡萄糖0.7重量％，硫酸锰0.1重量‰，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例1制备的枯草芽孢杆菌的活化种子液以0.1体积％的接种量接种在上述培养基中，37±2℃培养，转速120rppm，待OD值长至9.5左右，pH为7.2左右，发酵摇瓶结束，活菌数3.9*1012cfu/ml。
(2)植物乳杆菌的发酵培养
培养基：酵母浸粉5重量％，醋酸钠0.7重量％，柠檬酸三铵0.1重量％，磷酸氢二钾0.1重量％，葡萄糖0.3重量％，吐温80 0.15体积％，硫酸锰0.06重量‰，硫酸镁0.1重量‰，无水葡萄糖6重量％，碳酸钙3重量％，pH自然，121℃灭菌30min备用。
将制备例2制备的植物乳杆菌的活化种子液以0.2体积％的接种量接种在上述培养基中，静置35±2℃培养。待OD值长至6-7，pH为7.0左右，发酵摇瓶结束，活菌数4.5*1012cfu/ml。
(3)枯草芽孢杆菌的储存
将步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液按照1:1.2的体积比混合后，于500ml灭菌三角瓶中30-33℃下静置储存，同时以相同体积的单独的步骤(1)的枯草芽孢杆菌发酵液和单独的步骤(2)的植物乳杆菌的发酵液作为对照，并于第0天、第2天、第15天、第30天、第45天、第60天对储存液的气味进行评价，以及各发酵液中相应菌种的活菌数，结果如表3所示。
表3
Figure BDA0002120697690000141
实施例4
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
按照实施例1的方法进行枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的去除，不同的是，枯草芽孢杆菌的发酵培养基含有1.0重量％的酵母粉、0.8重量％的玉米浆、0.8重量％的糖蜜、2.5重量％的玉米粉、2重量％的豆粕和0.03重量％的硫酸锰。
结果如表4所示。
表4
Figure BDA0002120697690000151
实施例5
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
按照实施例1的方法进行枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的去除，不同的是，植物乳杆菌的发酵培养在MRS肉汤培养基中进行。
结果如表5所示。
表5
Figure BDA0002120697690000152
Figure BDA0002120697690000161
实施例6
本实施例用于说明本发明提供的去除枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的方法
按照实施例1的方法进行枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中产生的异味的去除，不同的是，将植物乳杆菌的发酵液进行离心分离后，将菌体使用PBS重悬为相同的体积后与枯草芽孢杆菌的发酵液进行混合。
结果如表6所示。
表6
Figure BDA0002120697690000162
Figure BDA0002120697690000171
对比例1
本对比例用于说明参比的枯草芽孢杆菌储存过程中的气味变化
按照实施例1的方法进行枯草芽孢杆菌的发酵，不同的是，将用于植物乳杆菌的发酵培养基与用于枯草芽孢杆菌的发酵培养基1:1合并后灭菌，然后接种枯草芽孢杆菌进行发酵培养，将培养后的发酵液在与实施例1相同的条件下进行储存，也即，结合植物乳杆菌的培养基和枯草芽孢杆菌的培养基，对枯草芽孢杆菌进行培养，而不再将植物乳杆菌用于枯草芽孢杆菌发酵液的储存中，结果如表7所示。
结果如表7所示。
表7
Figure BDA0002120697690000172
对比例2
本对比例用于说明参比的枯草芽孢杆菌储存过程中的气味变化
按照实施例1的方法进行枯草芽孢杆菌的发酵，不同的是，将植物乳杆菌替换为嗜酸乳酸菌，保藏号为CGMCC1.1854。
结果如表8所示。
表8
Figure BDA0002120697690000181
将实施例和对比例相比可以看出，在枯草芽孢杆菌发酵液储存的过程中加入植物乳酸菌，能够有效地去除枯草芽孢杆菌发酵液产生的异味。并且在常温下(30-33℃)储存60天，仍然没有所述刺鼻性臭味生成。进一步的，将植物乳酸菌和枯草芽孢杆菌一起储存，枯草芽孢杆菌的活菌数下降均较缓慢。
将实施例1与实施例4-5相比可以看出，使用特定的植物乳杆菌发酵培养基和枯草芽孢杆菌的发酵培养基能够进一步延长异味出现的时间以及菌种的保存周期。
将实施例1与实施例6相比可以看出，虽然单独的植物乳杆菌纯菌体也能够在一定程度上消除枯草芽孢杆菌的异味，并减缓活菌数的下降，但结合特定的植物乳杆菌的发酵培养基后，能够进一步改善。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.植物乳杆菌在减缓枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中活菌数下降中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌的发酵液。
3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法包括：将枯草芽孢杆菌接种在枯草芽孢杆菌发酵培养基中进行培养，得到所述枯草芽孢杆菌发酵液；
其中，所述枯草芽孢杆菌发酵培养基含有豆粕、玉米粉、淀粉酶、酵母浸粉、葡萄糖和硫酸锰。
4.根据权利要求3所述的应用，其中，相对于100重量份的所述枯草芽孢杆菌发酵培养基，所述豆粕的含量为1-2.5重量份，所述玉米粉的含量为3-4重量份，所述淀粉酶的含量为0.01-0.03重量份，所述酵母浸粉的含量为0.5-1重量份，所述葡萄糖的含量为0.3-0.7重量份，所述硫酸锰的含量为0.01-0.03重量份。
5.根据权利要求2所述的应用，其中，所述植物乳杆菌的发酵液的制备方法包括：将植物乳杆菌接种在植物乳杆菌发酵培养基中进行培养，得到所述植物乳杆菌的发酵液；
其中，所述植物乳杆菌发酵培养基含有酵母浸粉、醋酸钠、柠檬酸三铵、磷酸氢二钾、葡萄糖、吐温80、硫酸锰、硫酸镁、无水葡萄糖和碳酸钙。
6.根据权利要求5所述的应用，其中，相对于100重量份的所述植物乳杆发酵培养基，所述酵母浸粉的含量为1-5重量份，所述醋酸钠的含量为0.2-0.7重量份，所述柠檬酸三铵的含量为0.1-0.3重量份，所述磷酸氢二钾的含量为0.1-0.3重量份，所述葡萄糖的含量为0.3-0.8重量份，所述吐温80 的含量为0.05-0.15重量份，所述硫酸锰的含量为0.004-0.006重量份，所述硫酸镁的含量为0.01-0.03重量份，所述无水所述葡萄糖的含量为2-6重量份，所述碳酸钙的含量为2-3重量份。
7.一种减缓枯草芽孢杆菌发酵液储存过程中活菌数下降的方法，其特征在于，该方法包括：在枯草芽孢杆菌发酵液中加入植物乳杆菌，得到混合发酵液，并将所述混合发酵液进行储存。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，相对于100体积份的所述枯草芽孢杆菌发酵液，以植物乳杆菌的发酵液计的植物乳杆菌的用量为80-120体积份。
9.根据权利要求7或8所述的方法，所述储存的条件包括：温度为30-33℃，静置储存。
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