CN112107690A - 一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，它将具有芳香环结构的喜树碱类药物和共聚物溶于有机溶剂中作为油相，纯净水作为水相；低速搅拌下将油相缓慢逐滴滴入水相中，得到蓝色乳光的乳液；然后使用旋转蒸发仪去除有机溶剂，即获得所述喜树碱类药物纳米粒。其中，所述共聚物为芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物，其是以聚乙二醇单甲醚为引发剂，与带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体混合，通过高温开环聚合而制得。本发明制得的喜树碱类药物纳米粒，纳米粒粒径均匀，平均粒径在110‑140nm、包封率高，稳定性好，且制备过程简单可控、易于放大生产。

Description

一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法
技术领域
本发明属于高分子材料合成领域，具体涉及利用芳香环修饰侧链的一种双亲性嵌段共聚物包载喜树碱类抗肿瘤药物，从而制备喜树碱类药物纳米粒的方法。
背景技术
(20S)-喜树碱(CPT)是一种提取自中国喜树的喹啉生物碱。如今，它已成为喜树碱类抗癌药物最重要的先导化合物之一。它的抗癌机理是通过选择性抑制拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)，与DNA形成的复合物结合，稳定此复合物，从而使断裂的DNA链不能重新接合，阻止DNA复制及RNA合成。但是，CPT较强的毒性和极低的溶解性阻碍了其进一步的临床研究。为了消除其不良反应，国内外研究者展开了大量相关研究。有研究者通过化学修饰合成一系列CPT衍生物，其中最典型的上市药物便是伊立替康。但是作为喜树碱类药物中少数通过审批的上市药物，伊立替康依旧存在严重的毒副作用。原因在于缺少靶向性使喜树碱类药物长期处于人体的内循环中，其可逆性的水解开环，形成有毒性的羧酸结构。其次，只有不到10％的伊立替康代谢转换为活性成分SN38。至于其他的喜树碱类药物，也存在毒性强和水溶性差等问题(其中，Boc-苯丙氨酸-SN38、亚麻酸-SN38都是类似伊立替康的SN38修饰后获得的前药。例如，Boc基团保护的苯丙氨酸和SN38以酯键连接的结构，即为Boc-苯丙氨酸-SN38)。
近年来利用高分子聚合物材料作为抗癌药物纳米载体的思路已成为研究人员关注的焦点之一。纳米载体拥有着诸多独特的性质，例如纳米级的尺寸，较高的比表面积，良好的物化性质。因此，研究人员可以借助它的性能调整药物的药代动力学和药效动力学性能，从而提高药物的治疗指数(TI)。通过物理和化学等手段，将小分子药物包封在纳米载体中，可以增加体内稳定性，延长化合物的血液循环时间，提高药物的生物利用率、靶向病灶以及调节药物的控制释放等。此外，纳米药物可以通过高渗透长滞留效应(EPR)在特定部位积累。
喜树碱类纳米药物也存在一些问题，特别是较低的药物包封率和不够理想的药物释放。有学者借鉴超分子化学的概念，将分子间弱相互作用应用于药物递送。和传统的共价键驱动纳米载体搭载药物不同，以氢键、疏水性和π-π堆积作用为代表的非共价键应用于药物递送有许多优点：首先，利用非共价相互作用不会有毒理学上的问题，也没有意料外的修饰前药的毒性隐患；其次，由于药物结构没有化学上的改变，药物分子能够如期表达其应有的药理学性质；第三，利用非共价相互作用可以是相同的药物分子适用于不同给药系统，减少了研究共价键裂解所可能产生的代谢物的负担；最后利用非共价相互作用的纳米药物设计可以减少额外的化学合成步骤，将研究流程流水线化，方便后续的拓展研究。由于喜树碱类药物都含有苯环结构，π-π堆积作用成为了研究者最感兴趣的选择之一。总的来说，目前就π-π堆积作用应用于纳米药物这方面还停留在针对性合成上，步骤复杂缺乏泛用性，也难以实现规模化扩大生产。
发明内容
针对现有技术存在的上述技术问题，本发明的目的在于提供一种简单高效的基于π-π堆积作用的喜树碱类药物纳米粒的制备方法，通过本方法制备的载药纳米粒具有靶向性、可生物降解、包封率高、稳定性好。
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
一种喜树碱类药物纳米粒制剂，制剂中包含喜树碱类药物、共聚物。
其中，所述的喜树碱类药物为Boc-苯丙氨酸-SN38、亚麻酸-SN38或SN38。所述共聚物为芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。所述的共聚物与喜树碱类药物的重量比为10:1～30:1，优选为20:1。
所述的喜树碱类药物纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
1)将具有芳香环结构的喜树碱类药物和共聚物溶于有机溶剂A中作为油相，纯净水作为水相；
2)在低速搅拌下将油相缓慢逐滴滴入水相中，得到蓝色乳光的乳液；
3)使用旋转蒸发仪去除有机溶剂A，即获得所述喜树碱类药物纳米粒；
有机溶剂A为四氢呋喃、丙酮、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺中的一种，优选为四氢呋喃；油相和水相的体积比为1:3～1:10。
采用该共聚物作为纳米载体包裹喜树碱类药物，通过最简单的溶剂蒸发法即可制备粒径均匀，包封率高，稳定且具备靶向性的喜树碱类药物纳米粒，平均粒径为110-140nm，包封率最高可达99％。
本发明提供了上述纳米共聚物的制备方法，以聚乙二醇单甲醚为引发剂，与带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体混合，通过高温开环聚合制得所述的芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。
所述芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物的具体制备方法，包括以下步骤：
S1：在氮气保护下，以聚乙二醇单甲醚为引发剂，与带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体混合，加入有机溶剂B中；持续150-200℃高温条件下，通过分水器分离反应液中水和有机溶剂，直到绝大部分有机溶剂蒸发，原料呈熔融态；
S2：在氮气保护下，加入异辛酸亚锡催化剂，继续以150-200℃高温条件下开环聚合反应，持续1-2天；反应结束后冷却至室温，反应液加稀盐酸酸化，再经二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成浑浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层固状物，倾倒上层清液，下层固状物经真空干燥，即获得所述芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。
其中，所述有机溶剂B为甲苯；
所述带芳香环的脂肪族环状酯类单体为4-苄基戊内酯，所述疏水性嵌段单体为丙交酯或己内酯；
聚乙二醇单甲醚、带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体的质量比为1:0.3～0.65:0.4～0.8。
在本发明的具体实施方式中，所述共聚物为聚乙二醇单甲醚-聚(4-苄基戊内酯-丙交酯)共聚物(mPEG-b-P(BnVL-co-LA))或聚乙二醇单甲醚-聚(4-苄基戊内酯-己内酯)共聚物(mPEG-b-P(BnVL-co-CL))。
mPEG-b-P(BnVL-co-LA)、mPEG-b-P(BnVL-co-CL)各自具体的结构及合成路线如下：
Figure BDA0002728452530000051
本发明取得的有益效果是：
本发明合成了一种新型共聚物，利用π-π堆积作用将喜树碱类药物包裹于共聚物中，包封率高，结构稳定。此外，由于本发明的共聚物模板结构简单，合成方便，具有很强的拓展性，不但可以适用于带芳环的疏水药物，还有利于进一步研究和大规模生产。本发明的纳米粒成本低，稳定性好，具有生物可降解性，符合临床用药要求，符合大规模生产要求，具有良好的市场前景。
附图说明
图1是实施例1步骤1)制得的1a：mPEG2K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:1)纳米材料的1H-NMR图谱。
图2是实施例2步骤1)制得的1b：mPEG2K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:4)纳米材料的1H-NMR图谱。
图3是实施例3步骤1)制得的2a:mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:1)纳米材料的1H-NMR图谱。
图4是实施例4步骤1)制得的2b:mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:4)纳米材料的1H-NMR图谱。
图5是实施例6通过激光粒度仪动态光散射仪Zetasizer(DLS)观测粒径变化和粒径分布系数PDI的变化。
图6是实施例7进行纳米粒药物缓释实验的结果图谱。
图7是实施例8进行载药纳米粒体外细胞毒性实验的结果图谱。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围并不限于此。
实施例1喜树碱类药物纳米粒的制备
1)聚乙二醇单甲醚-聚4-苄基戊内酯-聚乳酸嵌段共聚物(1a)的制备
氮气保护下，在150mL两口圆底烧瓶中，加入2.0g聚乙二醇单甲醚(平均分子量4000)，1.19g 4-苄基戊内酯，0.91g丙交酯，50mL甲苯，温度维持150℃下搅拌溶解，利用分水器收集加热回流的水和甲苯，并持续加热直至溶剂基本回收，原料呈熔融态。在氮气保护下，加入0.25g异辛酸亚锡催化剂，继续以180℃高温条件下开环聚合反应，持续时间约36小时；反应结束后冷却至室温，反应液加入5％浓度的盐酸洗涤，再经体积比为2.5:1的二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成浑浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层黄色膏状物，倾倒上层清液，所得下层黄色膏状物于35℃真空干燥，得到芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物，将其标记为mPEG4K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:1)，其1H-NMR谱图如图1所示。
2)纳米粒的制备
20mg步骤1)制备的mPEG4K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:1)和1.6mg Boc-苯丙氨酸-SN38溶于1mL四氢呋喃溶液作为油相，以3秒/滴的速度滴入低速搅拌(转速100rpm)的5mL纯水中形成淡蓝色纳米乳，滴加完成后，将纳米乳剂转移到旋转蒸发仪真空旋转除去有机溶剂，得到纳米粒。激光动态散射仪测试的平均粒径为112.3±3.4nm，粒径分布系数PDI为0.291±0.027，纳米粒包封率为89％。
实施例2喜树碱类药物纳米粒的制备
1)聚乙二醇单甲醚-聚4-苄基戊内酯-聚乳酸嵌段共聚物(1b)的制备氮气保护下，在150mL两口圆底烧瓶中，加入2.0g聚乙二醇单甲醚(平均分子量4000)，0.57g4-苄基戊内酯，1.42g丙交酯，50mL甲苯，温度维持150℃下搅拌溶解，利用分水器收集加热回流的甲苯，并持续加热直至溶剂基本回收，原料呈熔融态。在氮气保护下，加入0.25g异辛酸亚锡催化剂，继续以180℃高温条件下开环聚合反应，持续时间约36小时；反应结束后冷却至室温，反应液加入5％的盐酸洗涤，再经体积比为2.5:1的二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成浑浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层白色固体，倾倒上层清液，所得下层固体于35℃真空干燥，得到芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物，将其标记为得到mPEG4K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:4)，其1H-NMR谱图如图2所示。
2)纳米粒的制备
20mg步骤1)制备的mPEG4K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:4)和1.6mg Boc-苯丙氨酸-SN38溶于1mL四氢呋喃溶液作为油相，以3秒/滴的速度滴入低速搅拌(转速100rpm)的5mL纯水中形成淡蓝色纳米乳，滴加完成后，将纳米乳剂转移到旋转蒸发仪真空旋转除去有机溶剂，利用亲水性滤膜过滤得到纳米粒。纳米粒包封率为72％。
实施例3喜树碱类药物纳米粒的制备
1)聚乙二醇单甲醚-聚4-苄基戊内酯-聚己内酯嵌段共聚物(2a)的制备：
氮气保护下，在150mL两口圆底烧瓶中，加入2.0g聚乙二醇单甲醚(平均分子量4000)，1.31g 4-苄基戊内酯，0.79g己内酯，50mL甲苯，温度维持150℃下搅拌溶解，利用分水器收集加热回流的甲苯，并持续加热直至溶剂基本回收，原料呈熔融态。在氮气保护下，加入0.25g异辛酸亚锡催化剂，继续以180℃高温条件下开环聚合反应，持续时间约36小时；反应结束后冷却至室温，反应液加入5％的盐酸洗涤，再经体积比为2.5:1的二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成浑浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层黄色膏状物，倾倒上层清液，所得下层膏状物于35℃真空干燥，得到芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物，将其标记为mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:1)，其1H-NMR谱图如图3所示。
3)纳米粒的制备
20mg步骤1)制备的mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:1)和1.6mg Boc-苯丙氨酸-SN38溶于1mL四氢呋喃溶液作为油相，以3秒/滴的速度滴入低速搅拌(转速100rpm)的5mL纯水中形成淡蓝色纳米乳，滴加完成后，将纳米乳剂转移到旋转蒸发仪真空旋转除去有机溶剂，利用亲水性滤膜过滤得到纳米粒，激光动态散射仪测试的平均粒径为136.8±2.29nm，粒径分布系数PDI为0.288±0.02，纳米粒包封率为99％。
实施例4喜树碱类药物纳米粒的制备
1)聚乙二醇单甲醚-聚4-苄基戊内酯-聚己内酯嵌段共聚物(2b)的制备氮气保护下，在150mL两口圆底烧瓶中，加入2.0g聚乙二醇单甲醚(平均分子量4000)，0.59g 4-苄基戊内酯，1.6g己内酯，50mL甲苯，温度维持150℃下搅拌溶解，利用分水器收集加热回流的甲苯，并持续加热直至溶剂基本回收，原料呈熔融态。在氮气保护下，加入0.25g异辛酸亚锡催化剂，继续以180℃高温条件下开环聚合反应，持续时间约36小时；反应结束后冷却至室温，反应液加入5％的盐酸洗涤，再经体积比为2.5:1的二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成混浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层淡黄色膏状物，倾倒上层清液，所得下层膏状物于35℃真空干燥，得到芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物，将其标记为mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:4)，其1H-NMR谱图如图4所示。
2)纳米粒的制备
20mg步骤1)制备的mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:4)和1.6mg Boc-苯丙氨酸-SN38溶于1mL四氢呋喃溶液作为油相，以3秒/滴的速度滴入低速搅拌(转速100rpm)的5mL纯水中形成淡蓝色纳米乳，滴加完成后，将纳米乳剂转移到旋转蒸发仪真空旋转除去有机溶剂，利用亲水性滤膜过滤得到纳米粒。纳米粒包封率为85％。
实施例5纳米粒包封率的测定
采用液相高效色谱检测Boc-苯丙氨酸-SN38的包封率含量：
色谱柱：Welch XB-C18
流动相：乙腈/水(60/40-100/0v:v)；在检测过程时，流动相的组成变化为：开始以体积比为60:40的乙腈/水混合液进样，然后匀速逐渐降低流动相中水的比例，直至在5min内使乙腈/水的体积比达到100:0，最后以乙腈作流动相继续进样15min，即运行完成。
检测波长378nm；流速1.0mL/min：进样量20μL。分别取浓度为0.05-50μg/ml的SN38类前药标准品乙腈溶液，按照色谱条件进行测试，以峰面积对Boc-苯丙氨酸-SN38浓度进行曲线拟合，建立回归方程。
将本申请的纳米粒水溶液先1000rmp低速离心10min，去掉没有包进去的药物结晶，再10000rmp高速离心30min，将上清液洗掉，然后用高纯水复溶再加入同等体积的乙腈溶解，将溶解得到的溶液按照上述色谱条件测定SN-38类前药的含量。同时取未经任何处理的纳米粒溶液加同样体积的乙腈溶解，按照同样的HPLC条件测SN-38类前药的含量。
包封率(％)＝纳米粒包封的药物的量/投入药物总的量*100％；
实施例1-4所得载药纳米粒的平均包封率为72％-99％。
由于Boc-苯丙氨酸-SN38是以伊立替康的SN38为母体，经Boc基团保护的苯丙氨酸修饰后的SN-38类前药。即Boc-苯丙氨酸-SN38中含有修饰前的SN38母体，以下实施例6-8为了统一计量方便，将SN-38类前药都等量的换算成SN-38的含量。
实施例6含喜树碱类药物纳米粒的体外稳定性实验
将实施例3制备好的载药纳米粒溶于适量的PBS缓冲液(pH＝7.4，含0.5％吐温-80)，稀释至SN-38 0.5mg/mL，混匀，获得载药纳米粒分散液。取1mL载药纳米粒分散液与1mL牛血清蛋白混溶，室温放置。每隔0h，3h，9h，24h取样20μL，通过激光粒度仪动态光散射仪Zetasizer(DLS)观测粒径变化和粒径分布系数PDI的变化。粒径变化如图5所示。由图5可知，载药纳米粒具有优秀的稳定性。
实施例7含喜树碱类药物纳米粒的体外药物释放实验
用纳米材料mPEG4K-PLA3K仿照实施例1制备纳米粒，其制备步骤重复实施例1，不同之处在于“在步骤1)制备聚合物的过程中，不添加4-苄基戊内酯”，其余操作同实施例1，最终制得“用纳米材料mPEG4K-PLA3K包载Boc-苯丙氨酸-SN38”的载药纳米粒。
将本实施例7制备的载药纳米粒(即用纳米材料mPEG4K-PLA3K仿照实施例1制备的纳米粒)作为对照组，与实施例1制备好的载药纳米粒应用于体外药物释放实验，实验过程如下：
实验组：将实施例1制备好的载药纳米粒溶于适量的PBS缓冲液(pH＝6.5，含0.5％吐温-80)，稀释至SN-38 0.5mg/mL，混匀，获得稀释后的纳米粒水溶液。准备6个装有1mLPBS缓冲液(pH＝6.5，含0.5％吐温-80)的EP管，各加1mL稀释后的纳米粒水溶液。室温放置，摇床震荡。
同时设立对照组：用纳米材料mPEG4K-PLA3K仿照实施例1制备纳米粒，稀释至SN380.5mg/mL，混匀。同样准备6个装有1mL PBS缓冲液(PH6.5，含0.5％吐温-80)的离心管，各加1mL稀释后的纳米粒水溶液。室温放置，摇床震荡。
不同时间下分别进行取样分析，分析过程为：取一个EP管，10000rmp高速离心5min，小心吸取上层清液，按照实施例5中的HPLC条件检测未释放的SN-38前药含量。
实验组(mPEG4K-P(BnVLx-LAy)3K(x:y＝1:1)包载Boc-苯丙氨酸-SN38的载药纳米粒)与对照组(mPEG4K-PLA3K包载Boc-苯丙氨酸-SN38的载药纳米粒)进行纳米粒药物缓释实验的不同时间下体外释放结果如图6所示。由图6可知，本申请的纳米材料制备的喜树碱类药物纳米粒可以平缓释放。
实施例8含喜树碱类药物纳米粒的体外细胞毒性实验
毒性试验前预先培养人肺癌细胞A549，在细胞生长对数期将细胞以每孔10000细胞的数量接种于96孔板，对实施例3所制备的载药纳米粒、Boc-苯丙氨酸-SN38以及空白纳米粒(空白纳米粒为实施例3步骤1)制备的mPEG4K-P(BnVLx-CLy)3K(x:y＝1:1)纳米粒)进行体外抑瘤实验，保证载药纳米粒和SN38的药物浓度一致。细胞继续培养48小时，以细胞存活率作为评价指标，比较他们之间的抗肿瘤活性。
MTT溶剂的制备：在避光的环境下，称取40mg噻唑蓝(MTT)于10mL离心管中，滴加8mL pH＝7.4的PBS溶液溶解，用0.22gm的滤头过滤，得到黄色MTT溶液。
细胞的培养：培养A549细胞至生长对数期，用细胞计数板计算细胞数量后，以每个96孔板10000细胞数量的密度进行实验。除去细胞培养液，并用PBS溶液重复清洗三遍。加入1.5mL胰酶消化细胞，轻轻震荡30s。加入2mL培养基防止消化过度，再用离心机以1500转离心5min，除去上清部分并加3mL新鲜培养基，将细胞吹打至均匀，获得细胞悬液。
细胞毒性试验：由于在培养过程中，96孔板四周的培养液容易挥发，所以首先在96孔板四周的36个培养孔中分别加入100μL无菌PBS缓冲液，以纯培养基为对照组。将之前得到的细胞悬液用培养基稀释一定倍数，向96孔板的小孔中分别加入100μL细胞悬液保证每孔约10000个细胞，放入含有5％CO2的培养箱中，37℃的条件下培养24h。
等待细胞贴壁后，进行给药。载药纳米粒逐级稀释，将药物浓度控制在0.001-10μg/mL之间。
SN38和空白纳米粒用无菌DMSO溶解后，再用培养基按照以上浓度逐级稀释。每组样品都设置6个平行组分作为对照，且把不给药正常生长的细胞设为阴性对照组，四周的PBS作为调零组。将每个孔中的培养基吸走后，在调零组和阴性对照组的每孔中分别加入100μL新鲜培养基，其余各孔分别加入不同浓度的纳米粒溶液100μL。给药完毕后，放置在5％CO2的培养箱中，37℃的条件下继续培养48h。培养完成后，移除培养基，向各孔中加入200μL MTT的培养基溶液，继续培养4h。之后，用1mL注射器吸走孔中的培养基混合液，加入150μL DMSO，有紫色晶体出现。避光，利用振荡器震荡10min使晶体充分溶解，并用酶标仪在波长570nm下检测吸光值。计算并绘图统计各处理组的细胞存活率，结果见图7。
细胞存活率计算公式：细胞存活率(％)＝(OD样品组-OD空白组)/(OD阴性组-OD空白组)×100％
本说明书所述的内容仅仅是对发明构思实现形式的列举，本发明的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式。

Claims (8)

1.一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将喜树碱类药物和共聚物溶于有机溶剂A中作为油相，纯净水作为水相；
2）在低速搅拌下将油相缓慢逐滴滴入水相中，得到蓝色乳光的乳液；
3）使用旋转蒸发仪去除有机溶剂A，即获得所述喜树碱类药物纳米粒；
其中，所述共聚物为芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。
2.如权利要求1所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述有机溶剂A为四氢呋喃、丙酮、乙腈、N, N-二甲基甲酰胺中的一种，优选为四氢呋喃；油相和水相的体积比为1 : 3~1 : 10，所述的共聚物与喜树碱类药物的质量比例为10 : 1~30 : 1，优选为20 : 1。
3.如权利要求1所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述喜树碱类药物纳米粒的平均粒径为110-140nm，纳米粒的药物平均包封率为72%-99%。
4.如权利要求1所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物的制备方法为：以聚乙二醇单甲醚为引发剂，与带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体混合，通过高温开环聚合制得所述的芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。
5.如权利要求4所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物的具体制备方法，包括以下步骤：
S1：在氮气保护下，以聚乙二醇单甲醚为引发剂，与带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体混合，加入有机溶剂B中；持续150-200℃高温条件下，通过分水器分离反应液中有机溶剂B，直到绝大部分有机溶剂蒸发，原料呈熔融态；
S2：在氮气保护下，加入异辛酸亚锡催化剂，继续以150-200℃高温条件下开环聚合反应，持续1-2天；反应结束后冷却至室温，反应液加稀盐酸酸化，再经二氯甲烷-水混合液萃取、分液，有机相浓缩，浓缩物用二氯甲烷复溶形成澄清溶液，加入正己烷搅拌形成浑浊沉淀后，静置分层为上层清液和下层固状物，倾倒上层清液，下层固状物经真空干燥，即获得所述芳香环侧链修饰的两亲性嵌段共聚物。
6.如权利要求5所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述有机溶剂B为甲苯。
7.如权利要求5所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于所述带芳香环的脂肪族环状酯类单体为4-苄基戊内酯，所述疏水性嵌段单体为丙交酯或己内酯。
8.如权利要求5所述的一种喜树碱类药物纳米粒的制备方法，其特征在于聚乙二醇单甲醚、带芳香环的脂肪族环状酯类单体以及疏水性嵌段单体的质量比为1 : 0.3~0.65 :0.4~0.8。
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