CN112107608A - 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 - Google Patents
大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112107608A CN112107608A CN202011208728.5A CN202011208728A CN112107608A CN 112107608 A CN112107608 A CN 112107608A CN 202011208728 A CN202011208728 A CN 202011208728A CN 112107608 A CN112107608 A CN 112107608A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rhodiola crenulata
- group
- extract
- ulcerative colitis
- rhodiola
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 241000997135 Rhodiola crenulata Species 0.000 title claims abstract description 45
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 10
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- ILRCGYURZSFMEG-UHFFFAOYSA-N Salidroside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCCC1=CC=C(O)C=C1 ILRCGYURZSFMEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 5
- ILRCGYURZSFMEG-RQICVUQASA-N salidroside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)OC1OCCC1=CC=C(O)C=C1 ILRCGYURZSFMEG-RQICVUQASA-N 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 238000010025 steaming Methods 0.000 claims description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 claims description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 claims description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 claims description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 abstract description 35
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 19
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 abstract description 11
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 abstract description 11
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 abstract description 11
- 206010057669 Colon injury Diseases 0.000 abstract description 5
- 238000004904 shortening Methods 0.000 abstract description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 21
- 244000042430 Rhodiola rosea Species 0.000 description 18
- 235000003713 Rhodiola rosea Nutrition 0.000 description 18
- 229920003045 dextran sodium sulfate Polymers 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical class NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 9
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 8
- 102000003940 Occludin Human genes 0.000 description 7
- 108090000304 Occludin Proteins 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 5
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 210000002175 goblet cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 3
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 3
- 238000013042 tunel staining Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000004876 tela submucosa Anatomy 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- RINHYCZCUGCZAJ-UHAHJPEESA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(e)-3-phenylprop-2-enoxy]-6-[[(2s,3r,4s,5s)-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxymethyl]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)CO[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC\C=C\C=2C=CC=CC=2)O1 RINHYCZCUGCZAJ-UHAHJPEESA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 208000012876 acute enteritis Diseases 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- -1 compound ion Chemical class 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000001731 descending colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 208000037817 intestinal injury Diseases 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 230000009854 mucosal lesion Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000005173 quadrupole mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- JJYVNURTNGHITH-UHFFFAOYSA-N rosavin Natural products OC1COC(OCC2OC(OC(=O)C=Cc3ccccc3)C(O)C(O)C2O)C(O)C1O JJYVNURTNGHITH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEBFEMIXXHIISM-UHFFFAOYSA-N rozarin Natural products OC1C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OCC=CC=2C=CC=CC=2)O1 IEBFEMIXXHIISM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RINHYCZCUGCZAJ-UHFFFAOYSA-N rozavin Natural products OC1C(O)C(O)COC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OCC=CC=2C=CC=CC=2)O1 RINHYCZCUGCZAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001599 sigmoid colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/41—Crassulaceae (Stonecrop family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用；本发明中通过将大花红景天提取物应用到治疗溃疡性结肠炎的药物中，能够降低溃疡性结肠炎患者血清中IL‑1β、IL‑6以及LPS的含量，并能够防止结肠缩短以及缓解结肠损伤，进而达到治疗溃疡性结肠炎的目的，治疗效果显著，显效快且无毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及治疗溃疡性结肠炎药物技术领域，具体涉及一种大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。
背景技术
溃疡性结肠炎是一种病因尚不十分清楚的结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病，病变局限于大肠黏膜及黏膜下层。病变多位于乙状结肠和直肠，也可延伸至降结肠，甚至整个结肠。病程漫长，常反复发作，在全球范围内得病率逐步提升。
目前应用于治疗溃疡性结肠炎的药物主要是5-氨基水杨酸类、糖皮质激素类和免疫抑制剂类等药物；然而，这几种药物除治疗作用外都具有不同程度的副作用，对于溃疡性结肠炎的治疗尚未达到预期。
发明内容
本发明的目的在于提供一种大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用，该大花红景天提取物能够降低血清中IL-1β、IL-6以及LPS的含量，并能够防止结肠缩短以及缓解结肠损伤，进而达到治疗溃疡性结肠炎的目的，治疗效果显著，显效快且无毒副作用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明第一方面提供一种大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。
大花红景天(学名：Rhodiola crenulata(HK.f.et.Thoms)H.Ohba)产于西藏、云南西北部、四川西部。大花红景天提取物中含有多种对机体有益成分，主要类型有香豆素类、黄酮类、多酚类、生物碱类、多糖类等，本发明中通过将大花红景天提取物应用到治疗溃疡性结肠炎的药物中，能够降低溃疡性结肠炎患者血清中IL-1β、IL-6以及LPS的含量，并能够防止结肠缩短以及缓解结肠损伤，进而达到治疗溃疡性结肠炎的目的，治疗效果显著，显效快且无毒副作用。
优选地，所述大花红景天提取物由如下方法制得：
将大花红景天置于水中进行水煮，再对水煮后的溶液进行旋蒸、冷冻干燥，制得所述大花红景天提取物。
优选地，所述水煮次数为1～3次。
优选地，每次所述水煮中料液比为1∶8～1∶12；水煮时间为0.8～1.2h。
优选地，所述旋蒸温度为45～55℃。
本发明通过上述大花红景天提取物的制备方法，能够有效提取大花红景天中的有效成分，使得制备得到的大花红景天提取物对溃疡性结肠炎具有优异的治疗效果。
优选地，所述大花红景天提取物中红景天苷百分含量不低于1.5％，络塞维百分含量不低于0.03％。通过对大花红景天提取物中红景天苷以及络塞维含量的限定，能够更好的提高大花红景天提取物对溃疡性结肠炎的治疗效果。
本发明第二方面提供一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物，所述药物包括治疗有效量的所述大花红景天提取物和药学上可接受的辅料。
优选地，所述辅料含量为2～80％。
优选地，所述辅料选自糖粉、微晶纤维素、淀粉、糊精、灭菌单蒸水和生理盐水中的任意一种或多种。
优选地，所述药物剂型为丸剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、膏剂、口服液剂、注射剂和糖浆剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：
本发明中通过将大花红景天提取物应用到治疗溃疡性结肠炎的药物中，能够降低溃疡性结肠炎患者血清中IL-1β、IL-6以及LPS的含量，并能够防止结肠缩短以及缓解结肠损伤，进而达到治疗溃疡性结肠炎的目的，治疗效果显著，显效快且无毒副作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中，类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中，各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。
图1为本发明实验例中各组小鼠代表性结肠长度以及统计结果；
图2为本发明实验例中各组结肠病理切片HE染色及评分结果；
图3为本发明实验例中各组小鼠血清中IL-1β炎症因子的检测结果；
图4为本发明实验例中各组小鼠血清中IL-6炎症因子的检测结果；
图5为本发明实验例中各组小鼠血清中LPS的检测结果；
图6为本发明实验例中各组小鼠结肠病理切片TUNEL染色及分析结果；
图7为本发明实验例中各组小鼠结肠病理切片ZO-1的IHC染色及分析结果；
图8为本发明实验例中各组小鼠结肠病理切片Occludin的IHC染色及分析结果。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本发明的保护范围。
需要注意的是，除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。
以下各实施例采用的原料以及设备如下：
硫酸葡聚糖钠盐(Dextran sulfate，DSS；分子量，36-50kDa)：购买于International Laboratory。
5-氨基水杨酸：购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司。
小鼠血清IL-1β以及IL-6酶联免疫试剂盒：购买于美国R&D System公司。
LPS酶联免疫试剂盒：购买于中国CUSABIO公司。
大花红景天：干燥药材，由西藏药业提供。
实施例1
本实施例为大花红景天提取物的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
取400g大花红景天药材，按料液比1:10经水煮提取两次，每次提取时间为1小时，两次提取物合并后于50℃旋蒸后冷冻干燥，制得大花红景天提取物。
利用岛津LC-MS-8045超高效液相串联三重四极杆质谱对实施例1中制备得到的红景天提取物中主要化合物进行定量分析；
液相条件如下：色谱柱选择了Shim-pack XR-ODSII(Shimadzu；2.0ID×100mm，2.2μm)。流动相设置为A相：去离子水(含0.1％formic acid)；B相：乙腈，采用线性梯度洗脱程序。流动相梯度洗脱程序设置如下：0-1min，5％B，1-5min 5-100％B，5-7min 100％B，7.01min 5％B，7.01-10.00min 5％B。流速为0.30mL/min。进样量为10μL。柱温控制为35℃。
ESI质谱条件如下：Spary流量(氮气)为3L/min，Heat Gas流量(F)为10L/min，DryGas流量(G)为10L/min，Interface Temp(I)是300℃，DL Temp(D)为260℃，加热块温度(H)则设置在400℃。
在负离子模式下，化合物离子对条件如下：红景天苷，m/z 299-119；Q1 Pre偏差，14V；Q3 Pre，12V；CE，14V；驻留时间100ms。络赛维，m/z 427-293；Q1 Pre偏差，20V；Q3 Pre，10V；CE，12V；驻留时间100ms。
结果：
红景天苷标曲：y＝10-5x-0.4382，0.24-20μg/mL，LOQ 0.08μg/mL；
络赛维标曲：y＝3*10-6x，0.08-2.22μg/mL，LOQ 0.08μg/mL。
红景天苷，1.81％(g/g)；络赛维，0.034％(g/g)。
实施例2
本实施例为一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物，药物包括实施例1中制得的大花红景天提取物和灭菌单蒸水药学上可接受的辅料。
辅料为灭菌单蒸水；辅料含量为80％。
实验例
本实验例为实施例1制得的大花红景天提取物对溃疡性结肠炎的研究
实验动物：
SPF级C57BL/6J雄鼠60只，18-20g，购买于斯贝福生物技术有限公司[SCXK(京)2019-0010]，饲养于西南医科大学动物实验中心。
实验分组及方法：
所有小鼠在实验前进行一周的环境适应，SPF环境下饲养，每12小时进行黑夜/白昼更替，自由饮水。于实验前1天将小鼠随机分为正常组、模型组、5-氨基水杨酸组(5-ASA，100mg/kg)、红景天低剂量组(125mg/kg)、红景天中剂量组(250mg/kg)、红景天高剂量组(500mg/kg)；每组10只。
除正常组小鼠外，其余各组小鼠于实验第1天开始以3.5％的DSS溶液替代饮用水，进行急性肠炎造模，于第六天更换为灭菌单蒸水，正常小鼠一直饮用灭菌单蒸水。此外，实验第1天起，正常组和模型组每天1次灌胃给予正常灭菌单蒸水；5-氨基水杨酸组每天1次灌胃给予5-氨基水杨酸溶液(100mg/kg；溶于灭菌单蒸水)；红景天低、中、高剂量组分别每天1次灌胃给予红景天提取物(125、250、500mg/kg；溶于灭菌单蒸水)。每只小鼠每次灌胃0.1mL液体。于第16天，麻醉后处死小鼠，取血，分离血清；取结直肠，进行后续实验。
HE染色：
将结肠经冰PBS缓冲液清洗，通过福尔马林固定，石蜡包埋。石蜡切片脱蜡后，进行苏木精和伊红染色。在光学显微镜下观察小鼠结肠病理组织改变。
病理切片评分标准：上皮细胞评分：0，无损伤；1，少于50％面积杯状细胞损失；2，大于50％面积杯状细胞损失；3，隐窝部分损失；4，隐窝大面积缺失。炎性浸润评分：0，正常；1，浸润隐窝基底；2，浸润至黏膜肌层；3，广泛浸润黏膜肌层，黏膜增厚；4，浸润达黏膜下层。粘膜损伤评分：0，正常；1，部分粘膜损伤；2，大面积粘膜损伤；3，粘膜完全脱落。
组织学评分＝上皮细胞评分+炎性浸润情况评分+粘膜损伤评分。
血清IL-1β以及IL-6炎症因子检测：
小鼠全血收集在离心管中，0-4℃静置1-2h进行凝固分层。3000rpm离心5min，取上清转至新离心管中；再次12000rpm，4℃离心10min，再次取上清，液氮速冻15min后-80℃冰箱保存。
血清IL-1β以及IL-6炎症因子水平采用ELISA试剂盒进行检测，严格按厂家说明进行操作。
血清LPS检测：
血清LPS含量采用ELISA试剂盒进行检测，严格按厂家说明进行操作。
统计学分析：
采用Graphpad Prism 8.0进行分析；均采用one-way ANOVA，Tukey法进行后续多组比较分析；P<0.05具有统计学差异。
实验结果：
大花红景天提取物对结肠长度的影响结果：
对各组结肠长度进行测量，其中，各组代表性结肠长度以及统计结果如图1所示；图1中A为各组代表性结肠长度，B为各组结肠长度统计结果；***代表P<0.001，与正常组比较；##代表P<0.01，###代表P<0.001，与模型组比较；
由图1可知：
模型组小鼠结肠明显变短，5-氨基水杨酸组结肠稍有变长，但无统计学差异。而大花红景天提取物低、中、高剂量组的结肠较模型组均有显著变长，有统计学差异(p<0.05)，其中大花红景天提取物高剂量组小鼠结肠长度与正常组相近；可见，本申请大花红景天提取物优于5-氨基水杨酸的治疗效果。
各组结肠病理切片HE染色结果：
各组结肠病理切片HE染色结果如图2所示；图2中，A为各组结肠HE染色结果图；B为各组结肠病理评分结果；***代表P<0.001，与正常组比较；#代表P<0.05，与模型组比较。
由图2可知：模型组出现明显的黏膜变薄，腺体隐窝变短，可见细胞核增大拉长，多位于上皮细胞基底部或中部，伴随杯状细胞减少，炎性细胞浸润增加，证明肠炎造模成功；此外，大花红景天提取物低剂量组较模型组症状稍轻，但也出现隐窝消失，杯状细胞丢失，炎症浸润的现象；5-氨基水杨酸及中、高剂量的大花红景天提取物对DSS所致结肠损伤有不同程度的显著保护作用，与模型组比较，结肠病理改变获得明显缓解，其中高剂量红景天提取物对DSS所致肠道损伤的保护作用有统计学意义(p<0.05)。
各组小鼠血清中炎症因子检测结果：
各组小鼠血清中IL-1β以及IL-6炎症因子的检测结果如图3、4所示；图3、4中，***代表P<0.001，与正常组比较；#代表P<0.05，##代表P<0.01，###代表P<0.001，与模型组比较；
由图3、4可知：
模型组小鼠血清IL-1β以及IL-6水平均显著升高；而5-氨基水杨酸及不同剂量的大花红景天提取物显著的降低了DSS所致血清IL-1β以及IL-6水平的增高，可见，大花红景天提取物具有抗炎作用，能够有效治疗DSS。
各组小鼠血清中LPS的检测结果：
各组小鼠血清中LPS的检测结果如图5所示；图5中，***代表P<0.001，与正常组比较；#代表P<0.05，与模型组比较。
由图5可知：
模型组小鼠血清中的LPS水平显著增高，证明肠道通透性改变；而5-氨基水杨酸及中高剂量的大花红景天提取物可显著减少血清LPS的水平(p<0.05)，可见，大花红景天提取物能够具有肠道保护作用。
TUNEL染色检测细胞凋亡情况
石蜡切片脱蜡至水后，滴加20μg/mL不含DNase的蛋白酶K(碧云天，ST533)孵育30min，PBS洗涤后根据TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(碧云天，C1098)操作；封片后显微镜镜检。
镜检结果如图6所示，图6中，A为各组结肠TUNEL染色结果图；B为各组结肠细胞凋亡分析；Ctrl为正常组，DSS为模型组，RCE-L为红景天低剂量组，RCE-M为红景天中剂量组，RCE-H为红景天高剂量组；***代表P<0.001，与正常组比较；###代表P<0.001，与模型组比较；
由图6可知，与正常组相比，DSS组结肠组织中出现显著增多的TUNEL阳性的凋亡细胞，而低、中、高剂量的红景天提取物有剂量依赖性的减少肠道凋亡细胞，差异均有统计学意义。
IHC染色
石蜡切片脱蜡至水后，于柠檬酸抗原修复缓冲液(PH6.0；Servicebio，G1202)中进行抗原修复；切片在3％过氧化氢溶液(双氧水：纯水＝1:9)中避光孵育25min，阻断内源性过氧化物酶。进而采用3％BSA室温封闭30min，一抗(ZO-1，Servicebio，GB11195；occludin，Servicebio，GB111401)4℃孵育过夜，洗涤后与相应二抗(HRP标记，Servicebio，GB23303)室温孵育50min，再次洗涤后，进行DAB显色液(Servicebio，G1211)显色以及Harris苏木素(Servicebio，G1004)复染细胞核；封片后显微镜镜检。
镜检结果如图7、图8所示，图7中，A为各组结肠ZO-1的IHC染色结果图；B为各组结肠ZO-1蛋白表达分析；Ctrl为正常组，DSS为模型组，RCE-L为红景天低剂量组，RCE-M为红景天中剂量组，RCE-H为红景天高剂量组；*代表P<0.05，与正常组比较；#代表P<0.05，与模型组比较；蓝色为细胞核；棕黄色提示为ZO-1阳性表达；
图8中，A为各组结肠Occludin的IHC染色结果图；B为各组结肠Occludin蛋白表达分析；Ctrl为正常组，DSS为模型组，RCE-L为红景天低剂量组，RCE-M为红景天中剂量组，RCE-H为红景天高剂量组；*代表P<0.05，与正常组比较；#代表P<0.05，与模型组比较；蓝色为细胞核；棕黄色提示为Occludin阳性表达；
由图7可知，DSS破坏肠道粘膜，粘连蛋白ZO-1表达明显减少，而红景天提取物组ZO-1表达明显增高，提示红景天提取物具有肠道保护作用。
由图8可知，DSS破坏肠道粘膜，粘连蛋白Occludin表达明显减少，而红景天提取物组Occludin表达明显增高，提示红景天提取物具有肠道保护作用。
以上仅是申请人大量研究中的部分实验结果，但已经可以说明：
本发明中大花红景天提取物能够降低溃疡性结肠炎患者血清中IL-1β、IL-6以及LPS的含量，并能够防止结肠缩短以及缓解结肠损伤，进而达到治疗溃疡性结肠炎的目的，治疗效果显著。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。
Claims (10)
1.大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大花红景天提取物由如下方法制得：
将大花红景天置于水中进行水煮，再对水煮后的溶液进行旋蒸、冷冻干燥，制得所述大花红景天提取物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述水煮次数为1～3次。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，每次所述水煮中料液比为1∶8～1∶12；水煮时间为0.8～1.2h。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述旋蒸温度为45～55℃。
6.根据权利要求1～5任一所述的应用，其特征在于，所述大花红景天提取物中红景天苷百分含量不低于1.5％，络塞维百分含量不低于0.03％。
7.一种用于治疗溃疡性结肠炎的药物，其特征在于，包括治疗有效量的所述大花红景天提取物和药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于，所述辅料含量为2～80％。
9.根据权利要求7或8所述的药物，其特征在于，所述辅料选自糖粉、微晶纤维素、淀粉、糊精、灭菌单蒸水和生理盐水中的任意一种或多种。
10.根据权利要求7所述的药物，其特征在于，所述药物剂型为丸剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、散剂、膏剂、口服液剂、注射剂和糖浆剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011208728.5A CN112107608B (zh) | 2020-11-03 | 2020-11-03 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011208728.5A CN112107608B (zh) | 2020-11-03 | 2020-11-03 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112107608A true CN112107608A (zh) | 2020-12-22 |
| CN112107608B CN112107608B (zh) | 2022-02-25 |
Family
ID=73794787
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011208728.5A Active CN112107608B (zh) | 2020-11-03 | 2020-11-03 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112107608B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008009151A1 (de) * | 2006-07-20 | 2008-01-24 | Max-Zeller Söhne Ag | Tanninfreier trockenextrakt aus rhodiola rosea l. |
| CN102727504A (zh) * | 2012-07-09 | 2012-10-17 | 大连医科大学 | 红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用 |
| CN103599162A (zh) * | 2013-11-22 | 2014-02-26 | 东北林业大学 | 西藏大花红景天提取物在制备抗肠道炎症药物中的应用 |
| US20150320809A1 (en) * | 2014-05-12 | 2015-11-12 | BiOWiSH Technologies, Inc. | Compositions and methods for improving human health and nutrition |
-
2020
- 2020-11-03 CN CN202011208728.5A patent/CN112107608B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008009151A1 (de) * | 2006-07-20 | 2008-01-24 | Max-Zeller Söhne Ag | Tanninfreier trockenextrakt aus rhodiola rosea l. |
| CN102727504A (zh) * | 2012-07-09 | 2012-10-17 | 大连医科大学 | 红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用 |
| CN103599162A (zh) * | 2013-11-22 | 2014-02-26 | 东北林业大学 | 西藏大花红景天提取物在制备抗肠道炎症药物中的应用 |
| US20150320809A1 (en) * | 2014-05-12 | 2015-11-12 | BiOWiSH Technologies, Inc. | Compositions and methods for improving human health and nutrition |
Non-Patent Citations (9)
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112107608B (zh) | 2022-02-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hu et al. | Qingchang Huashi Formula attenuates DSS-induced colitis in mice by restoring gut microbiota-metabolism homeostasis and goblet cell function | |
| Peng et al. | Salvia miltiorrhiza stems and leaves total phenolic acids combination with tanshinone protect against DSS-induced ulcerative colitis through inhibiting TLR4/PI3K/AKT/mTOR signaling pathway in mice | |
| Yang et al. | Mitochondrial dysfunction in high-fat diet-induced nonalcoholic fatty liver disease: The alleviating effect and its mechanism of Polygonatum kingianum | |
| RU2674757C1 (ru) | Очищенный экстракт (атс2), выделенный из pseudolysimachion rotundum var subintegrum, с высоким содержанием активного ингредиента, его получение и фармацевтическая композиция, содержащая указанный экстракт в качестве активного ингредиента, для предотвращения или лечения воспаления, аллергии и астмы | |
| Liang et al. | In vitro to in vivo evidence of the inhibitor characteristics of Schisandra lignans toward P-glycoprotein | |
| WO2021249420A1 (zh) | 血筒素在制备抗类风湿关节炎药物中的应用 | |
| Wang et al. | Total flavonoids from Anchusa italica Retz. Improve cardiac function and attenuate cardiac remodeling post myocardial infarction in mice | |
| Liu et al. | Protective effects of Shen-Yuan-Dan, a traditional Chinese medicine, against myocardial ischemia/reperfusion injury in vivo and in vitro | |
| Jing et al. | Srolo Bzhtang, a traditional Tibetan medicine formula, inhibits cigarette smoke induced airway inflammation and muc5ac hypersecretion via suppressing IL-13/STAT6 signaling pathway in rats | |
| Ye et al. | Dendrobium huoshanense stem polysaccharide ameliorates alcohol-induced gastric ulcer in rats through Nrf2-mediated strengthening of gastric mucosal barrier | |
| Du et al. | Gastroprotective effect of eupatilin, a polymethoxyflavone from Artemisia argyi H. Lév. & Vaniot, in ethanol-induced gastric mucosal injury via NF-κB signaling pathway | |
| CN112107608B (zh) | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 | |
| Zheng et al. | Benefit Effect of Dendrobium officinale Ultrafine Powder on DSS‐Induced Ulcerative Colitis Rats by Improving Colon Mucosal Barrier | |
| CN113940945A (zh) | 鱼腥草多糖在制备防治炎症性肠病药物中的用途 | |
| Gong et al. | Xiangshao Decoction alleviates gastric mucosal injury through NRF2 signaling pathway and reduces neuroinflammation in gastric ulcer rats | |
| Wu et al. | Protective Effect of the Abelmoschus manihot Flower Extract on DSS‐Induced Ulcerative Colitis in Mice | |
| CN112691114B (zh) | 苦瓜多糖在制备用于治疗溃疡性结肠炎药物中的应用及其药物制剂 | |
| Wu et al. | Therapeutic effect of biejiaxiaozheng pills on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrosis in rats through the NF-κB/Nrf2 pathway | |
| CN114767698A (zh) | 一种薯蓣皂苷在制备呼吸系统疾病的药物中的应用 | |
| CN113413402A (zh) | 梅花草提取物在制备治疗幽门螺杆菌感染疾病药物中的应用 | |
| CN111000908A (zh) | 蓝布正提取物在用于制备防治自身免疫疾病药物中的应用 | |
| CN109731007B (zh) | 菟丝子多糖在制备治疗5-氟尿嘧啶所致肠炎的药物中的应用 | |
| KR0156623B1 (ko) | 상피세포 손상 치료용 조성물 | |
| CN113209270B (zh) | 丙谷二肽在制备防治急性肝衰竭药物中的应用 | |
| CN114452272B (zh) | 拒霉素在制备抗慢性阻塞性肺病药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231023 Address after: B-6, F1, Olympic Sports Center, No. 6, No. 33, Shulu Avenue, Longmatan District, Luzhou, Sichuan Province, 646000 Patentee after: Sichuan Zhengxue Biotechnology Co.,Ltd. Address before: No.1, Section 1, Xianglin Road, Longmatan District, Luzhou City, Sichuan Province Patentee before: SOUTHWEST MEDICAL University |