CN102727504A - 红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用，可改善肠内营养，避免胃肠粘膜屏障功能损伤及所引发的各种疾病，可替代现有的肠内营养制剂，具有疗效可靠、作用迅速、资源丰富、价格低廉等优点。
Description
技术领域
本发明涉及红景天在制备药物中的新用途，尤其是红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用。
背景技术
正常情况下，肠腔内细菌不能透过肠壁进入全身脏器和组织，这是因为肠黏膜具有阻止细菌和内毒素的屏障功能。很多研究表明：创伤、烧伤、休克、感染等应激状况均可使胃肠粘膜缺血缺氧、缺血再灌注损伤及营养障碍，引起胃肠粘膜屏障功能损伤，使细菌、内毒素移位，最终导致肠源性全身炎性反应综合征（SIRS）和多器官功能障碍（MODS），所以防治胃肠道粘膜屏障功能障碍就成为预防和治疗MODS的关键。目前临床应用的肠内营养制剂有助于肠道屏障结构和功能的维持，可减少肝功能损害及感染有关并发症的发生，并可直接提供谷氨酰胺等条件必需营养素，提高临床治疗效果。但这些营养制剂均是通过增大营养素供给量来给予营养支持，营养支持效力较弱，而且存在治疗成本高，周期长等缺点。
中药红景天为景天科景天属( Rhodiola L) 多年生草本或亚灌木植物，主要分布在北半球的喜马拉雅山区亚洲西北部和北美洲，具有极强的环境适应能力和生命力。目前从红景天植物中先后分离出多种化学物质，其主要化学成分为红景天苷、苷元酪醇等生物活性物质，此外还含有甾醇酚性化合物黄酮水溶性挥发油等。药用植物红景天苷的结构式如下：
曾有文献报道：红景天苷具有较多的药理活性，如增强免疫力、消除忧郁感、保护心血管等作用。如中国专利申请号为200810061264.2的发明专利申请 “红景天苷的制备及其在医药领域中的应用”，公开了红景天苷具有增强免疫力，保护心脑血管等作用，可治疗多种疾病。但目前未见关于红景天苷具有抗胃肠道屏蔽损伤的相关报道。
发明内容
本发明是发现了红景天中的主要成分—红景天苷具有抗胃肠道屏蔽损伤的功能，发明了红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用。
本发明的技术解决方案是：一种红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用。
本发明是将红景天苷应用于抗胃肠道屏蔽损伤药物，可改善肠内营养，避免胃肠粘膜屏障功能损伤及所引发的各种疾病，可替代现有的肠内营养制剂，具有疗效可靠、作用迅速、资源丰富、价格低廉等优点。
附图说明
图1是本发明实施例正常组体外模拟肠屏障实验后Caco-2单层细胞图。
图2是本发明实施例损伤组体外损伤肠屏障实验后Caco-2单层细胞图。
图3是本发明实施例给药组体外修复受损肠屏障实验后Caco-2单层细胞图。
图4是本发明实施例Caco-2细胞单层电阻率测定示意图。
具体实施方式
可用现有技术方法提取红景天苷。选取Caco-2作为体外模拟肠屏障模型，Caco-2细胞其形态结构，生理功能，刷状缘表面的酶类与正常的肠上皮极其相似，完全可以作为研究肠屏障功能的体外模型。实验细胞损伤模型的建立采用双氧水损伤，模拟肠道缺血再灌注损伤及克罗恩氏病、结肠炎等导致的肠上皮损伤，通过提高细胞内氧自由基水平，造成肠屏障的外源性损伤，模拟肠粘膜营养吸收障碍。
实验数据：
一．红景天苷的体外改善肠屏障功能实验
（一）实验方法
1. 药品与试剂
红景天苷以DMSO溶解，各样本的终浓度均以μmol/L表示。人Caco-2细胞，其具有模拟体外肠屏障的细胞特征，由大连医科大学药学院细胞实验室提供。DMEM培养基为Gibco公司产品，国产胎牛血清由大连医科大学药学院细胞实验室提供，MTT （Sigma），Tritonx100（Solarbio）。LDH试剂盒，SOD试剂盒，GSH试剂盒均购自南京建成生物技术有限公司。Millicell 小室（Millipore, U.S.A.）. 电阻仪 （Millipore, U.S.A.）。
2．Caco-2细胞培养
Caco-2细胞的培养条件：DMEM培养液（DMEM培养基+20％胎牛血清＋5×104U/L青霉素和50g/L链霉素），置于37°C，5％浓度CO2的培养箱中培养，视细胞生长状况换液和传代，将孵箱CO2浓度适当提高以维持细胞外环境pH值稳定。
3.倒置显微镜下观察细胞状态
细胞以上述培养条件培养，给药组是在DMEM培养液中加入红景天苷，所加入红景天苷浓度分别为100，20，4μmol/L，37℃孵育，再加入双氧水，37℃孵育。损伤组是在DMEM培养液中加入双氧水，37℃孵育。Nikon倒置显微镜相机摄片。
4．MTT法检测细胞活力
细胞以上述培养条件接种于96孔板中，将96孔板分成三组：正常组、损伤组、给药组。给药组是在细胞孵育的第二天将红景天苷加入给药组的每个孔板中，所加入红景天苷的浓度分别为100，20，4μmol/L，37℃，孵育24h，再加入双氧水损伤；损伤组是在细胞孵育的第二天将双氧水加入损伤组的每个孔板中。
MTT溶液配制：称取250mgMTT，放入小烧杯中，加50mlPBS（0.01mol/L, pH7.4）在电磁搅拌机上搅拌30min，用0.22μm的微孔滤器除菌，分装，4℃保存。上述细胞培养12小时后，每孔加入MTT溶液（5mg/ml）20μl， 37℃，继续孵育4h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。每孔加入150μl 二甲基亚砜DMSO（分析纯），振荡10min，使结晶物充分溶解。选择570nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。
5．细胞培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）测定
给药组是将细胞按上述培养条件培养，形成单层后向DMEM培养液中加入红景天苷，加入红景天苷的浓度分别为100，20，4μmol/L，继续培养24小时后，药物吸收后加入双氧水损伤；损伤组是将细胞以上述培养条件培养，形成单层后向DMEM培养液中加入双氧水。取上清，按LDH试剂盒说明书检测上清中LDH含量。
6. 细胞中超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽（GSH）含量测定
给药组是将细胞按上述培养条件培养，形成单层后向DMEM培养液中加入红景天苷，加入红景天苷的浓度分别为100，20，4μmol/L，继续培养，药物吸收后加入双氧水损伤，每孔加入细胞裂解液；损伤组是将细胞以上述培养条件培养，形成单层后向DMEM培养液中加入双氧水，每孔加入细胞裂解液。按SOD试剂盒、GSH试剂盒说明书检测细胞裂解液中SOD、GSH含量。
7. Caco-2细胞单层电阻率测定（TER）
Caco-2细胞按上述培养条件接种于Millicel插入式培养皿（PCF膜，0.4μm孔径），并按上述条件分别形成给药组和损伤组，细胞分化成熟，透射电镜下可显示细胞顶部微绒毛和细胞间形成TJ结构。此时，用电阻仪在不同损伤的时间测定TER，可间接反映单层细胞通透性的变化。
（二）实验结果
1. 正常组体外模拟肠屏障实验后Caco-2单层细胞如图1所示。
损伤组体外损伤肠屏障实验后Caco-2单层细胞图如图2所示。
给药组体外修复受损肠屏障实验后Caco-2单层细胞如图3所示。
2. MTT法检测细胞活力
实验结果见表1：*** P<0.001 vs 损伤组 ** P<0.01 vs 损伤组
表1不同浓度的红景天苷对于肠屏障细胞活力的影响
| 组分 | 药物浓度（μmol/L） | MTT(OD) |
| 正常组 | 0.740±0.025 | |
| 损伤组 | 0.430±0.029 | |
| 给药组 | 100 | 0.884±0.011*** |
| 20 | 0.652±0.020** | |
| 4 | 0.492±0.061** |
由表1可以看出，红景天苷的不同浓度可不同程度地修复受损的肠屏障细胞，增强体外肠屏障细胞活力。
3．细胞培养上清中LDH测定
实验结果见表2：*** P<0.001 vs 损伤组 ** P<0.01 vs 损伤组 * P<0.05 vs 损伤组
表2细胞培养上清中LDH测定
| 组分 | 药物浓度（μmol/L） | LDH（U/L） |
| 正常组 | 424.285±12.604 | |
| 损伤组 | 1036.275±56.642 | |
| 给药组 | 100 | 510.744±11.690*** |
| 20 | 784.794±53.062** | |
| 4 | 868.434±32.938* |
由表2可以看出，红景天苷的不同浓度不同程度地减少胞内LDH的释放，保护肠屏障细胞细胞膜完整性。
4．细胞中SOD，GSH含量测定。
实验结果见表3、表4：*** P<0.001 vs 损伤组 ** P<0.01 vs 损伤组 * P<0.05 vs 损伤组
表3红景天苷的不同浓度对胞内SOD的含量影响
| 组分 | 药物浓度（μmol/L） | SOD( U/mL) |
| 正常组 | 186.116±11.232 | |
| 损伤组 | 89.454±2.145 | |
| 给药组 | 100 | 160.783±7.812*** |
| 20 | 129.284±8.978** | |
| 4 | 99.199±3.786* |
由表3可以看出，红景天苷的不同浓度不同程度地增加胞内SOD的含量，增强细胞抗衰老能力，改善细胞营养状况。
表4红景天苷的不同浓度肠屏障细胞细胞内GSH含量的影响
| 组分 | 药物浓度（μmol/L） | GSH(mgGSH/L) |
| 正常组 | 8.659±0.337 | |
| 损伤组 | 3.922±0.577 | |
| 给药组 | 100 | 13.679±0.474*** |
| 20 | 5.255±0.683 | |
| 4 | 4.145±0.113 |
由表4可以看出，红景天中的红景天苷在高浓度情况下能增加肠屏障细胞细胞内GSH含量，提高肠屏障细胞营养水平，增强细胞免疫状态，促进蛋白质合成。
5. Caco-2细胞单层电阻率测定（TER）
实验结果见图4：*** P<0.001 vs 损伤组
由图4可以看出，红景天苷的高中浓度组能明显增加肠屏障细胞单层的电阻值，修复紧密连接，增强肠屏障的紧密连接功能，改善肠屏障功能障碍。
Claims (1)
1.一种红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用。
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| CN2012102342269A CN102727504A (zh) | 2012-07-09 | 2012-07-09 | 红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用 |
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| CN2012102342269A CN102727504A (zh) | 2012-07-09 | 2012-07-09 | 红景天苷在制备抗胃肠道屏蔽损伤药物中的应用 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112107608A (zh) * | 2020-11-03 | 2020-12-22 | 西南医科大学 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
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2012
- 2012-07-09 CN CN2012102342269A patent/CN102727504A/zh active Pending
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| C. GIOVANNINI, ET AL: "Tyrosol, the Major Olive Oil Biophenol, Protects Against Oxidized-LDL-Induced Injury in Caco-2 Cells", 《THE JOURNAL OF NUTRITION》 * |
| 关磐石，等: "红景天苷对手术后疲劳大鼠模型的影响", 《广州医药》 * |
| 曹鑫，等: "紫锥菊多酚植物化学物质对大鼠应激性胃溃疡的影响", 《大连医科大学学报》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112107608A (zh) * | 2020-11-03 | 2020-12-22 | 西南医科大学 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
| CN112107608B (zh) * | 2020-11-03 | 2022-02-25 | 西南医科大学 | 大花红景天提取物在制备溃疡性结肠炎药物中的应用 |
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20121017 |