CN112040953A - 用于心血管疾病的组合治疗 - Google Patents

Abstract

本文中提供了使用降脂质剂(例如，他汀类和/或PCSK9抑制剂)和抗炎剂(例如，促炎细胞因子抑制剂)来治疗心血管疾病或降低其风险的方法。本文中还提供了基于对象中C反应蛋白(CRP)的水平来预测对象之复发率的方法，所述对象接受过或正在经受使用降脂质剂的对心血管疾病的治疗。在一些实施方案中，使用抗炎剂可降低复发率。

Description

用于心血管疾病的组合治疗

相关申请

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2018年3月9日提交且标题为“COMBINATIONTHERAPY FOR CARDIOVASCULAR DISEASES”的美国临时专利申请No.62/640918的权益，以及根据35U.S.C.§119(e)要求于2018年9月20日提交且标题为“COMBINATION THERAPY FORCARDIOVASCULAR DISEASES”的美国临时专利申请No.62/733960的权益，其各自的全部内容通过引用并入本文。

背景技术

脂质降低是治疗动脉粥样硬化性心血管疾病的中流砥柱。一些患者尽管在接受降脂质治疗，但仍患有心血管疾病。存在开发新的治疗的需要。

发明内容

本公开内容在一些方面基于出乎意料的发现，即正在经受积极的降脂质治疗的患者中存在残留的炎性风险，并且在这些患者中高敏感性C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein，hsCRP)水平(炎症的标志物之一)与心血管疾病复发的可能性和/或死亡率相关。本文中提供了使用降脂质剂和抗炎剂治疗心血管疾病的方法。

本公开内容的一些方面提供了治疗心血管疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的降脂质剂和抗炎剂。

在一些实施方案中，抗炎剂是促炎细胞因子抑制剂。在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-1抑制剂、IL-1受体(IL-1R)抑制剂、IL-6抑制剂、IL-6受体(IL-6R)抑制剂、NLRP3抑制剂、TNF抑制剂、IL-8抑制剂、IL-18抑制剂、自然杀伤细胞抑制剂、或其组合。在一些实施方案中，抗炎剂是核酸、适配体、抗体或抗体片段、抑制性肽、或者小分子。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-1抑制剂。在一些实施方案中，IL-1抑制剂是IL-1α抑制剂。在一些实施方案中，IL-1α抑制剂是针对IL-1α、MABp1或sIL-1RI的反义寡核苷酸。在一些实施方案中，IL-1抑制剂是IL-1β抑制剂。在一些实施方案中，IL-1β抑制剂是针对IL-1β、卡那单抗(canakinumab)、双醋瑞因(diacerein)、格弗珠单抗(gevokizumab)、LY2189102、CYT013、sIL-1RII、VX-740或VX-765的反义寡核苷酸。在一些实施方案中，IL-1抑制剂是舒拉明钠(suramin sodium)、甲氨蝶呤-甲基-d3、甲氨蝶呤-甲基-d3二甲基酯或双醋瑞因。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-1R抑制剂。在一些实施方案中，IL-1R抑制剂是IL-1R拮抗剂。在一些实施方案中，IL-1R抑制剂是针对IL-1R、阿那白滞素(anakinra)、利纳西普(Rilonacept)、MEDI-8968、sIL-1RI、EBI-005、白介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)或AMG108的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-6抑制剂。在一些实施方案中，IL-6抑制剂是针对IL-6、司妥昔单抗(siltuximab)、西鲁库单抗(sirukumab)、克拉扎珠单抗(clazakizumab)、奥洛珠单抗(olokizumab)、艾西莫单抗(elsilimomab)、IG61、BE-8、CNTO328 PGE1及其衍生物、PGI2及其衍生物或环磷酰胺的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-6R抑制剂。在一些实施方案中，IL-6R抑制剂是IL-6R拮抗剂。在一些实施方案中，IL-6R抑制剂是针对IL-6R、托珠单抗(tocilizumab)、沙利鲁单抗(sarilumab)、PM1、AUK12-20、AUK64-7、AUK146-15、MRA或AB-227-NA的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含NLRP3抑制剂。在一些实施方案中，NLPR3抑制剂是针对NLPR3、秋水仙碱、MCC950、CY-09、酮体代谢物β-羟基丁酸(ketone metabolite beta-hydroxubutyrate，BHB)、I型干扰素、白藜芦醇、阿格拉宾(arglabin)、CB2R、格列本脲(Glybenclamide)、异甘草素(Isoliquiritigenin)、Z-VAD-FMK或微RNA-223的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含TNF抑制剂。在一些实施方案中，TNF抑制剂是针对TNF、英夫利昔单抗(infliximab)、阿达木单抗(adalimumab)、赛妥珠单抗(certolizumabpegol)、戈利木单抗(golimumab)、依那西普(etanercept)(Enbrel)、沙利度胺(thalidomide)、来那度胺(lenalidomide)、泊马度胺(pomalidomide)、黄嘌呤衍生物、安非他酮(bupropion)、5-HT2A激动剂或致幻剂的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-8抑制剂。在一些实施方案中，IL-8抑制剂是针对IL8、HuMab-10F8、瑞帕利辛(Reparixin)、姜黄素(Curcumin)、安瘤克(Antileukinate)、大环内酯类(Macrolide)或三氟乙酸盐的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-18抑制剂。在一些实施方案中，IL-18抑制剂选自：针对IL-18、IL-18结合蛋白、IL-18抗体、NSC201631、NSC61610或NSC80734的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，抗炎剂包含自然杀伤细胞抑制剂。在一些实施方案中，自然杀伤细胞抑制剂是靶向自然杀伤细胞的抗体。

在一些实施方案中，抗炎剂包含甲氨蝶呤。在一些实施方案中，抗炎剂包含阿卤芬酯(arhalofenate)。

在一些实施方案中，降脂质剂包含蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9)抑制剂。在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是天然PCSK9抑制剂、抗PCSK9抗体、反义核酸、肽抑制剂、PCSK9疫苗或小分子抑制剂。在一些实施方案中，天然PCSK9抑制剂是小檗碱(berberine)、膜联蛋白A2或阿德奈汀(adnectin)。在一些实施方案中，小分子抑制剂是PF-06446846、安塞曲匹(anacetrapib)或K-312。在一些实施方案中，PCSK9抗体是阿利西尤单抗(alirocumab)、依洛尤单抗(evolocumab)、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗(bococizumab)。在一些实施方案中，反义核酸是RNAi分子。在一些实施方案中，RNAi分子是英利西朗(inclisiran)或ALN-PCS。在一些实施方案中，肽抑制剂是模拟低密度脂蛋白受体(LDL-R)的EGFa结构域的肽。在一些实施方案中，PCSK9疫苗包括抗原性PCSK9肽。

在一些实施方案中，降脂质剂包含HMG-CoA还原酶抑制剂。在一些实施方案中，HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类(statin)。在一些实施方案中，他汀类是辛伐他汀(simvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitivastatin)。

在一些实施方案中，降脂质剂是纤维酸衍生物(贝特类)、胆汁酸螯合剂或树脂、烟酸剂(nicotinic acid agent)、胆固醇吸收抑制剂、脂酰辅酶A：胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂、胆固醇酯转移蛋白(cholesteryl ester transfer protein，CETP)抑制剂、LDL受体拮抗剂、类法尼醇X受体(farnesoid X receptor，FXR)拮抗剂、固醇调节性结合蛋白切割激活蛋白(sterol regulatory binding protein cleavage activating protein，SCAP)激活剂、微粒体甘油三酯转移蛋白(microsomal triglyceride transfer protein，MTP)抑制剂、鲨烯合酶抑制剂或过氧化物酶体增殖激活受体(peroxisome proliferationactivated receptor，PPAR)激动剂。

在一些实施方案中，降脂质剂和抗炎剂是一起施用的。在一些实施方案中，降脂质剂和抗炎剂是分开施用的。在一些实施方案中，降脂质剂和/或抗炎剂静脉内、肌内、皮下或经口施用。

在一些实施方案中，在对象中促炎细胞因子的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中非高密度脂蛋白(high-density lipoprotein，HDL)-胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中LDL-胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中总胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中载脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中甘油三酯的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中总胆固醇与HDL-胆固醇之比降低。在一些实施方案中，非致命性心肌梗死的发生降低。在一些实施方案中，非致命性卒中的发生降低。在一些实施方案中，心血管死亡率降低。

在一些实施方案中，心血管疾病是心肌梗死、卒中、急性冠脉综合征、心肌缺血、慢性稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心血管死亡、冠状动脉再狭窄、冠状动脉支架再狭窄、冠状动脉支架血栓再形成、血运重建、血管成形术、短暂性脑缺血发作、肺栓塞、血管阻塞或静脉血栓形成。

本公开内容的另一些方面提供了在接受过或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中降低心血管疾病复发率的方法，该方法包括向对象施用有效量的抗炎剂。

本公开内容的另一些方面提供了在接受过或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中预测心血管疾病复发率的方法，该方法包括在对象中测量C反应蛋白(CRP)的水平。并且如果CRP水平高于预定值，则确定该对象可能复发所述心血管疾病。在一些实施方案中，预定值为3mg/L。在一些实施方案中，预定值为2mg/L。在一些实施方案中，预定值为1mg/L。

本文中还提供了治疗心血管疾病的方法，该方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含结合促炎细胞因子的第一抗原结合结构域和结合蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型(PCSK9)的第二抗原结合结构域。在一些实施方案中，促炎细胞因子选自：IL-1、IL-1受体(IL-1R)、IL-6、IL-6受体(IL-6R)、NLRP3、TNF、IL-8或IL-18。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1α结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于MABp1。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1β结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于卡那单抗、双醋瑞因、格弗珠单抗或LY2189102。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1R结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于MEDI-8968或AMG108。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-6结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于司妥昔单抗、西鲁库单抗、克拉扎珠单抗、奥洛珠单抗或艾西莫单抗。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-6R结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于托珠单抗、沙利鲁单抗、PM1、AUK12-20、AUK64-7、AUK146-15或AB-227-NA。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与NLRP3结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于NLRP3抗体。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与TNF结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、戈利木单抗或依那西普(Enbrel)。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-8结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于HuMab-10F8。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-18结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-18抗体。

在一些实施方案中，第二抗原结合结构域来源于阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗。

在一些实施方案中，双特异性抗体包含共同的Fc区。在一些实施方案中，双特异性抗体是单克隆双特异性抗体。

在一些实施方案中，该方法还包括向对象施用治疗有效量的HMG-CoA还原酶抑制剂。在一些实施方案中，HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类。在一些实施方案中，他汀类是辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀或匹伐他汀。

在一些实施方案中，双特异性抗体静脉内、肌内、皮下或经口施用。在一些实施方案中，在对象中促炎细胞因子的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中C反应蛋白(CRP)的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中非高密度脂蛋白(HDL)-胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中LDL-胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中总胆固醇的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中载脂蛋白B(ApoB)的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中甘油三酯的水平或活性降低。在一些实施方案中，在对象中总胆固醇与HDL-胆固醇之比降低。在一些实施方案中，非致命性心肌梗死的发生降低。在一些实施方案中，非致命性卒中的发生降低。在一些实施方案中，心血管死亡率降低。

本文中还提供了治疗心血管疾病的方法，该方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含结合IL-1的第一抗原结合结构域和结合蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)的第二抗原结合结构域。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1α结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于MABp1。第一抗原结合结构域与IL-1β结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于卡那单抗、双醋瑞因、格弗珠单抗或LY2189102。在一些实施方案中，第二抗原结合结构域来源于阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗。

本公开内容的每个限制可涵盖本公开内容的多个实施方案。因此，预期的是，涉及任一要素或要素组合的本公开内容的每个限制可被包括在本公开内容的每个方面内。本公开内容在其应用中不限于在以下描述中阐述或在附图中举例说明的构造细节和组分的排列。本公开内容能够进行其他实施方案并且能够以多种方式被实践或执行。同样，本文中使用的措词和术语是出于描述的目的，并且不应被视为限制。本文中“包括”、“包含”或者“具有”、“含有”、“涉及”及其变体的使用意指涵盖其后列出的条目及其等同形式以及另外的条目。

附图说明

图1A至1D示出了根据hsCRP_OT从基线到14周脂质水平百分比变化的均值。在每个图的右边示出了每个hsCRP_OT组中的在治疗(on-treatment)脂质值的中位数(图1A，总胆固醇；图1B，LDL胆固醇；图1C，HDL胆固醇；图1D，TC：HDL-C比例)。HDL-C表明高密度脂蛋白胆固醇；hsCRP_OT，高敏感性C反应蛋白的在治疗水平；LDL-C，低密度脂蛋白胆固醇；以及TC，总胆固醇。

图2示出了连续尺度的hsCRP_OT与试验主要终点(心肌梗死、卒中、需紧急冠脉血运重建的不稳定型心绞痛和心血管死亡)的经调整事件率(adjusted event rate)之间的关系。针对年龄、性别、当前吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、登记时他汀类强度(中等或高)以及低密度脂蛋白胆固醇的在治疗水平来调整模型。点代表各个hsCRP_OT值。hsCRP_OT表示高敏感性C反应蛋白的在治疗水平。

图3A至3B示出了根据每种生物标志物类别的hsCRP_OT和LDL-C_OT与伴随的心血管事件之间的风险关联。针对年龄、性别、当前吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、登记时他汀类强度(中等或高)来调整，以及适当根据hsCRP_OT和LDL-C_OT调整。图3A示出了hsCRP_OT的模型。图3B示出了LDL-C_OT的模型。CI表示置信区间；hsCRP_OT，高敏感性C反应蛋白的在治疗水平；LDL-C_OT，低密度脂蛋白胆固醇的在治疗水平；以及Ref，参考。

具体实施方式

尽管采取了积极的降脂质治疗，但患者仍然患有心血管疾病。我们发现，在已经使用他汀类和PCSK9抑制剂二者的积极降LDL-C治疗的初级以及二级预防患者中，仍存在基于在治疗hsCRP水平的残留炎性风险的明显证据。在本公开内容之前，仍不确定是否在特别积极地降低LDL-C之后仍存在残留的炎性风险。

本公开内容的一些方面至少部分基于以下出乎意料的发现：在使用降脂质剂进行积极治疗(例如，同时使用他汀类和PSCK9抑制进行治疗)的9,738名高风险患者群体中，占很大百分比的患者尽管特别积极地降低脂质，但仍处于未来患心血管疾病的风险的连续梯度中。这样的患者表现出比一般人更高的在治疗hsCRP水平。与没有亚临床炎症证据的患者相比，在治疗hsCRP＞3mg/L的患者的未来血管事件的风险增加了62％。升高的hsCRP与心肌梗死、心血管死亡和/或全因死亡率的增加显著相关。我们认为，尽管积极地最大地进行降LDL-C，炎性风险仍然存在，并且炎症降低为心血管疾病降低提供了另外的益处。

因此，本公开内容的一些方面提供了治疗心血管疾病的方法，该方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的降脂质剂和抗炎剂。

“抗炎剂”是指降低炎症或炎性反应的药剂。在一些实施方案中，抗炎剂是促炎细胞因子抑制剂。“促炎细胞因子抑制剂”是指抑制由促炎细胞因子诱导的炎性信号传导途径的药剂。促炎细胞因子抑制剂可抑制参与炎性信号传导途径的任何蛋白质或核酸的水平或活性。例如，在某些实施方案中，促炎细胞因子抑制剂抑制促炎细胞因子(例如，IL-1(例如IL-1α和II-1β)、IL-6、IL-8和IL-18)的水平。在一些实施方案中，促炎细胞因子抑制剂抑制促炎细胞因子的活性，例如，通过抑制细胞因子受体(例如，IL-1R和IL-6R)的水平或活性。

在一些实施方案中，促炎细胞因子抑制剂抑制炎性小体。炎性小体是在髓样细胞中表达的一种多蛋白寡聚体，并且是先天性免疫系统的组分之一。炎性小体的确切组成取决于起始炎性小体组装的激活物，例如，dsRNA将触发一种炎症小体组成，而石棉将组装不同的变体。炎性小体促进炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)和白介素18(IL-18)的成熟。在一些实施方案中，炎性小体由胱天蛋白酶1、PYCARD或ASC、NALP和有时胱天蛋白酶5(也称为胱天蛋白酶11或ICH-3)组成。在一些实施方案中，炎性小体含有nod样受体蛋白3(nod-likereceptor protein 3，NLRP3)。

在一些实施方案中，抗炎剂是核酸、适配体、抗体或抗体片段、抑制性肽或者小分子。在一些实施方案中，抗炎剂是抑制性核酸，例如设计成靶向促炎细胞因子基因的反义核酸。

本文中使用的术语“反义核酸”描述了这样的核酸，其是在生理条件下与包含特定基因的DNA或该基因的mRNA转录物杂交并从而抑制该基因的转录和/或该mRNA的翻译的寡核糖核苷酸、寡脱氧核糖核苷酸、经修饰的寡核糖核苷酸或者经修饰的寡脱氧核糖核苷酸。设计反义分子，以便在与靶基因或转录物杂交后干扰靶基因的转录或翻译。本领域技术人员将认识到，反义寡核苷酸的确切长度及其与其靶标的互补程度将取决于所选择的特异性靶标，包括靶标的序列以及包含该序列的特异性碱基。反义核酸通过沃森-克里克碱基配对与靶RNA结合，并通过空间阻断或激活RNase H酶来阻止所结合序列的核糖体翻译，从而阻断基因表达。反义分子也可通过干扰RNA的加工或干扰RNA从细胞核转运到胞质中来改变蛋白质合成(Mukhopadhyay&Roth，1996，Crit.Rev.in Oncogenesis 7，151-190)。

在一些实施方案中，反义核酸是RNAi分子。RNAi分子是抑制促炎细胞因子信号传导组分的表达的反义分子。促炎细胞因子的核酸序列是本领域已知的。抑制性核酸可使用本领域常规方法设计。

针对促炎细胞因子基因的抑制性核酸(例如，反义寡核苷酸)通常引起特异性基因敲低，同时避免脱靶效应。可使用本领域已知的多种基因敲低策略来抑制基因表达。例如，可使用利用RNA干扰(RNAi)和/或微RNA(miRNA)途径(包括小干扰RNA(siRNA)、短发夹RNA(shRNA)、双链RNA(dsRNA)、miRNA以及本领域已知的其他基于小干扰核酸的分子)的基因敲低策略。在一些实施方案中，使用基于载体的RNAi形式(例如，shRNA或shRNA-mir表达构建体)来降低细胞中基因(例如，靶核酸，例如促炎细胞因子核酸)的表达。在一些实施方案中，抑制性核酸包括表达例如shRNA的小干扰核酸的单独的质粒载体(例如，本领域已知或本文中公开的任何单独的质粒载体)。单独的质粒可包括与编码小干扰核酸的基因可操作地连接的特异性启动子。在一些实施方案中，单独的质粒载体包装在能够感染个体的病毒之中。示例性病毒包括腺病毒(adenovirus)、逆转录病毒(retrovirus)、慢病毒(lentivirus)、腺相关病毒(adeno-associated virus)以及本领域已知和本文中公开的其他病毒。

可采用广泛的基于RNAi的分子来抑制细胞中基因(例如促炎细胞因子基因)的表达，例如基于siRNA的寡核苷酸和/或改变的基于siRNA的寡核苷酸。改变的基于siRNA的寡核苷酸是这样的核苷酸，其经修饰以改变效价、靶亲和力、安全性谱和/或稳定性，例如，以使其对胞内降解具有抗性或部分抗性。修饰，例如硫代磷酸酯，可对例如寡核苷酸进行，以增加对核酸酶降解、结合亲和力和/或摄入的抗性。另外，疏水化和生物缀合增强siRNA的递送和靶向(De Paula et al.，RNA.13(4)：431-56，2007)，并且具有核糖二氟甲苯酰基核苷酸的siRNA保持基因沉默活性(Xia et al.，ASC Chem.Biol.1(3)：176-83，(2006))。已经产生了具有酰胺连接的寡核糖核苷的siRNA，其对S1核酸酶降解具有与未经修饰的siRNA相比更强的抗性(Iwase R et al.2006 Nucleic Acids Symp Ser 50：175-176)。另外，siRNA在2’-糖位置和磷酸二酯键联的修饰赋予了提高的血清稳定性，而不会丧失效力(Choung etal.，Biochem.Biophys.Res.Commun.342(3)：919-26，2006)。可用于抑制基因(例如，CSC相关基因)表达的其他分子包括正义核酸和反义核酸(单链或双链)；核酶；肽；DNA酶；肽核酸(peptide nucleic acid；PNA)；三股螺旋形成寡核苷酸；抗体；和适配体；及其针对基因、RNA转录物或蛋白质中序列的经修饰形式。

反义和核酶抑制策略通过降低基因产物的表达或通过在突变位点切割突变体转录物而导致肿瘤表型的逆转(Carter and Lemoine Br.J.Cancer.67(5)：869-76，1993；Lange et al.，Leukemia.6(11)：1786-94，1993；Valera et al.，J.Biol.Chem.269(46)：28543-6，1994；Dosaka-Akita et al.，Am.J.Clin.Pathol.102(5)：660-4，1994；Feng etal.，Cancer Res.55(10)：2024-8，1995；Quattrone et al.，Cancer Res.55(1)：90-5，1995；Lewin et al.，Nat Med.4(8)：967-71，1998)。还已提出核酶作为抑制突变体基因的基因表达和通过靶向反式剪接来校正突变体二者的手段(Sullenger and Cech Nature371(6498)：619-22，1994；Jones et al.，Nat.Med.2(6)：643-8，1996)。核酶活性可通过使用例如非特异性核酸结合蛋白或易化物(facilitator)寡核苷酸来增强(Herschlag etal.，Embo J.13(12)：2913-24，1994；Jankowsky and Schwenzer Nucleic Acids Res.24(3)：423-9，1996)。已表明多靶核酶(连接的或用鸟枪法处理的(shotgun))作为提高核酶对基因抑制的效率的手段之一(Ohkawa et al.，Nucleic Acids Symp Ser.(29)：121-2，1993)。

在一些实施方案中，抑制性核酸包括经修饰的或未经修饰的RNA、DNA或混合的聚合物核酸，并且主要通过与匹配序列特异性结合而导致肽合成的调节来发挥作用(Wu-Pong，November 1994，BioPharm，20-33)。

在一些实施方案中，本公开内容的抑制性核酸与核酸靶标具有100％的同一性。在另一些实施方案中，其与核酸靶标具有至少99％、95％、90％、85％、80％、75％、70％或50％的同一性。术语“百分比同一性”是指两个核苷酸序列之间的序列同一性。百分比同一性可通过比较每个序列中的位置来确定，所述位置可出于比较的目的进行比对。以同一性的百分比的表述是指由被比较的序列所共有的位置处的相同氨基酸或核酸数目的函数。可使用多种比对算法和/或程序，包括FASTA、BLAST或ENTREZ-FASTA，并且BLAST可作为GCG序列分析包的一部分(University of Wisconsin，Madison，Wis.)获得，并且可按例如默认设置来使用。ENTREZ可通过马里兰州贝塞斯达市国立卫生研究院国家医学图书馆的国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information，National Library ofMedicine，National Institutes of Health，Bethesda，Md.)获得。在一个实施方案中，两个序列之间的百分比同一性可通过以空位权重为1的GCG程序确定(例如，对每个氨基酸空位进行加权，就像两个序列之间存在单个氨基酸或核苷酸的错配一样)。

其他比对技术在Methods in Enzymology，vol.266：Computer Methods forMacromolecular Sequence Analysis(1996)，ed.Doolittle，Academic Press，Inc.，adivision of Harcourt Brace&Co.，San Diego，Calif.，USA中进行了描述。优选地，允许序列中存在空位的比对程序可用于比对序列。Smith-Waterman是一种允许序列比对中存在空位的算法的类型，参见Meth.Mol.Biol.70：173-187(1997).。同样，使用Needleman和Wunsch比对方法的GAP程序可用于比对序列。作为替选的搜索策略使用了在MASPAR计算机上运行的MPSRCH软件。MPSRCH在大规模并行计算机上使用Smith-Waterman算法对序列进行评分。该方法提高了获取远相关的匹配的能力，并且对小空位和核苷酸序列错误特别容忍。编码核酸的氨基酸序列可用于搜索蛋白质和DNA数据库二者。

可用于本公开内容的抑制性核酸通常将被设计为与一个或更多个靶基因具有部分或完全互补性(即，与促炎细胞因子基因的一个或更多个转录物具有互补性)。靶基因可以是来源于细胞的基因、内源性基因、转基因或在其感染之后存在于细胞中的病原体的基因。取决于特定的靶基因、抑制性核酸的性质和抑制性核酸的表达水平(例如，取决于拷贝数、启动子强度)，该程序可为靶基因提供部分或完全的功能丧失。细胞中基因表达的定量可在靶mRNA的积累水平或在靶蛋白的翻译水平上显示出类似的抑制的量。

“基因表达的抑制”是指来自靶基因的蛋白质和/或mRNA产物水平的不存在或可观察到的降低。可通过对细胞或生物的外在特性的检查或者通过生物化学技术(例如RNA溶液杂交、核酸酶保护、Northern杂交、逆转录、使用微阵列的基因表达监测、抗体结合、酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)、Western印迹、放射免疫测定(radioimmunoassay，RIA)、其他免疫测定和荧光激活细胞分析(fluorescence activatedcell analysis，FACS))来确认抑制的结果。对于在细胞系或整个生物中的RNA介导的抑制，可通过使用易于测定蛋白质产物的报道分子或耐药性基因来方便地测定基因表达。这样的报告基因包括乙酰羟基酸合酶(acetohydroxyacid synthase，AHAS)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AP)、β半乳糖苷酶(LacZ)、β葡萄糖醛酸苷酶(GUS)、氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase，CAT)、绿色荧光蛋白(green fluorescentprotein，GFP)、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)、萤光素酶(Luc)、胭脂碱合酶(nopaline synthase，NOS)、章鱼碱合酶(octopine synthase，OCS)、及其衍生物。可获得多种可选择的标志物，其赋予了对氨苄西林、博来霉素、氯霉素、庆大霉素、潮霉素、卡那霉素、林可霉素、甲氨蝶呤、膦丝菌素、嘌呤霉素和四环素的抗性。

取决于测定，基因表达量的定量允许人们确定抑制程度，与未根据本公开内容处理的细胞相比，该抑制程度可大于10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％。例如，可通过评估细胞中基因产物的量来确定抑制效率：可使用具有用于抑制性核酸的区域之外的核苷酸序列的杂交探针来检测mRNA，或者可使用针对该区域的多肽序列培育的抗体来检测经翻译的多肽。

“抗体”和“抗体片段”包括完整抗体及其任意抗原结合片段(即，“抗原结合部分”)或单链。“抗体”是指包含通过二硫键相互连接的至少两条重(H)链和两条轻(L)链的糖蛋白，或其抗原结合部分。每条重链由重链可变区(本文中缩写为VH)和重链恒定区构成。重链恒定区由三个结构域CH1、CH2和CH3构成。每条轻链由轻链可变区(本文中缩写为VL)和轻链恒定区构成。轻链恒定区由一个结构域CL构成。VH和VL区可进一步再分为高变区，称为互补决定区(complementarity determining region，CDR)，其间散布着更保守的区域，称为框架区(framework region，FR)。每个VH和VL由三个CDR和四个FR构成，从氨基端到羧基端按以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，所述宿主组织或因子包括免疫系统的多种细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q)。抗体可以是多克隆抗体或单克隆抗体。抗体可以是嵌合抗体或人源化抗体。

根据本公开内容使用的“抗体片段”包含抗体的抗原结合部分。抗体的抗原结合部分是指抗体的保留与抗原特异性结合能力的一个或更多个片段。已表明抗体的抗原结合功能可通过全长抗体的片段进行。在术语抗体的“抗原结合部分”中涵盖的结合片段的一些实例包括：(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab′)2片段，包含在铰链区通过二硫键连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体单个臂上的VL和VH结构域组成的Fv片段；(v)dAb片段(例如，如Ward et al.，(1989)Nature 341：544-546中所述，其通过引用并入本文)，其由VH域组成；以及(vi)单独的互补决定区(CDR)。此外，尽管Fv片段的两个结构域VL和VH由不同的基因编码，但是它们可以使用重组方法通过合成的接头连接起来，从而使它们被制成单个蛋白链，其中VL和VH区配对以形成单价分子(称为单链Fv(scFv)；参见例如Bird et al.(1988)Science 242：423-426；和Huston et al.(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：5879-5883，其通过引用并入本文)。也旨在将这样的单链抗体涵盖在术语抗体的“抗原结合部分”中。使用本领域技术人员已知的常规技术来获得这些抗体片段，并且以与完整抗体相同的方式筛选用于效用的片段。

“抑制性肽”是指与靶分子特异性结合的肽。在一些实施方案中，抑制性肽与靶分子的结合抑制靶分子的生物学活性。例如，如果靶分子在信号传导途径中发挥作用，则与抑制性肽的结合可抑制信号传导途径。本领域技术人员熟悉抑制性肽或针对其选择的(ofchoice)靶分子而开发抑制性肽的方法。例如，来源于促炎细胞因子的受体结合部分的肽可竞争性地与受体结合，从而阻止与细胞因子的结合并且抑制下游信号传导。抑制性肽也可以是合成的(即合成肽)。本领域技术人员熟悉设计和合成抑制性肽的方法。

“适配体”是指与特定靶分子结合的寡核苷酸或肽分子。适配体通常通过从大型随机序列库中选择其来创建。

本文中使用的“小分子”是指可在调节生物学过程中发挥作用的具有低分子量(例如，＜900道尔顿)的有机或无机化合物的分子。不管是天然存在或人工创造(例如，通过化学合成)，其具有相对低的分子量。通常，有机化合物包含碳。有机化合物可包含多个碳-碳键、立构中心和其他官能团(例如，胺、羟基、羰基或杂环环)。在一些实施方案中，小分子是分子量小于约1500g/mol的单体有机化合物。在某些实施方案中，小分子的分子量小于约1000g/mol或小于约500g/mol。在某些实施方案中，小分子是药物，例如，已经由适当的政府机构或监管部门视为用于人或动物中是安全且有效的药物。在某些实施方案中，已知有机分子结合和/或切割核酸。在一些实施方案中，有机化合物是烯二炔。小分子的一些非限制性实例包括脂质、单糖、第二信使、其他天然产物和代谢物、以及药物和其他异生物质。

“脂质”是指一组天然存在的分子，其包括脂肪、蜡、固醇、脂溶性维生素(例如维生素A、D、E和K)、单甘油酯、二甘油酯、甘油三酯、磷脂等。“单糖”是指不能被水解以得到更简单糖的一类糖(例如，葡萄糖)。单糖的一些非限制性实例包括葡萄糖(右旋糖)、果糖(左旋糖)和半乳糖。“第二信使”是将细胞表面上受体接收到的信号(例如，来自蛋白激素、生长因子等)转送至胞质和/或细胞核中的靶分子的分子。第二信使分子的一些非限制性实例包括环AMP、环GMP、肌醇三磷酸、二酰甘油和钙。“代谢物”是作为代谢的中间产物形成的分子。代谢物的一些非限制性实例包括乙醇、谷氨酸、天冬氨酸、5’鸟苷酸、异抗坏血酸、乙酸、乳酸、甘油和维生素B2。“异生物质”是在生物内发现的通常不是自然产生或不预期存在于其中的外来化学物质。异生物质的一些非限制性实例包括药物、抗生素、致癌物、环境污染物、食品添加剂、碳氢化合物和农药。

在一些实施方案中，抗炎剂选自：IL-1抑制剂、IL-1受体(IL-1R)抑制剂、IL-6抑制剂、IL-6受体(IL-6R)抑制剂、NLRP3抑制剂、TNF抑制剂、IL-8抑制剂、IL-18抑制剂或自然杀伤细胞抑制剂。考虑了本文中描述的不同抗炎剂的组合。在一些实施方案中，抗炎剂包含针对一种或更多种(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多种)促炎细胞因子的抑制剂。针对一种促炎细胞因子的每种抑制剂可以是不同类型抑制剂(例如抑制性核酸、抑制性肽、抗体或小分子)的组合。

在一些实施方案中，抗炎剂可以是：IL-1抑制剂与IL-1R抑制剂的组合；IL-1抑制剂与IL-6抑制剂的组合；IL-1抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-1抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与IL-6抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-6抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-6抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-6R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；NLRP3抑制剂与IL-8抑制剂的组合；NLRP3抑制剂与IL-18抑制剂的组合；NLRP3抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-8抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与IL-6抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-1R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-6R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；II-1抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂、NLRP3抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、TNF抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1抑制剂、TNF抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、TNF抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；IL-1抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与IL-6R抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-6R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、NLRP3抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、TNF抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、TNF抑制剂与Il-18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、TNF抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；IL-1R抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-6R抑制剂与NLRP3抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-6R抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-6R抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-6R抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、TNF抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6抑制剂、TNF抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6抑制剂、TNF抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、IL-18抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、NLRP3抑制剂与TNF抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、NLRP3抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、NLRP3抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、TNF抑制剂与IL-8抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、TNF抑制剂与IL-18抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；IL-6R抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；NLRP3抑制剂、TNF抑制剂与IL-18抑制剂的组合；NLRP3抑制剂、TNF抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；NLRP3抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；NLRP3抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；TNF抑制剂、IL-8抑制剂与IL18抑制剂的组合；TNF抑制剂、IL-8抑制剂与自然杀伤细胞抑制剂的组合；IL-8抑制剂、以及IL18抑制剂和自然杀伤细胞抑制剂的组合；或以上组合的其任意合适的组合。可使用任意组合。本领域技术人员可使用常规方法确定合适的组合。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-1抑制剂。在一些实施方案中，IL-1抑制剂可以是任何能够特异性阻止细胞受体对IL-1的激活的蛋白质或分子，所述激活可由多种机制引起。示例性机制包括但不限于下调IL-1的产生、结合游离IL-1、干扰IL-1与其受体的结合、干扰IL-1受体复合物的形成(即IL-1受体与IL-1受体辅助蛋白的缔合)、以及与其受体结合之后干扰IL-1信号传导的调节。

某些白介素-1抑制剂包含但不限于IL-1结合蛋白，包括但不限于可溶性IL-1受体(参见，例如，美国专利No.5,492,888、美国专利No.5,488,032和美国专利No.5,464,937、美国专利No.5,319,071和美国专利No.5,180,812，其通过引用并入本文)；抗IL-1单克隆抗体(参见，例如，WO 9501997、WO 9402627、WO 9006371、美国专利No.4,935,343、EP 364778、EP267611和EP 220063，其通过引用并入本文)；IL-1受体辅助蛋白及其抗体(参见，例如，WO96/23067和WO 99/37773，其通过引用并入本文)；可用于抑制IL-1β产生和分泌的白介素-1β转换酶(ICE)或胱天蛋白酶1的抑制剂(参见，例如，WO 99/46248、WO 99/47545和WO 99/47154，其通过引用并入本文)、白介素-1β蛋白酶抑制剂、以及其他阻断IL-1的体内合成或胞外释放的化合物和蛋白质。

示例性的IL-1抑制剂公开于，例如美国专利No.5,747,444、5,359,032、5,608,035、5,843,905、5,359,032、5,866,576、5,869,660、5,869,315、5,872,095、5,955,480、5,965,564；国际(WO)专利申请98/21957、96/09323、91/17184、96/40907、98/32733、98/42325、98/44940、98/47892、98/56377、99/03837、99/06426、99/06042、91/17249、98/32733、98/17661、97/08174、95/34326、99/36426、99/36415；欧洲(EP)专利申请534978和894795；以及法国专利申请FR 2762514。所有上述参考文献的公开内容出于任何目的通过引用并入本文。

在一些实施方案中，IL-1抑制剂是IL-1α抑制剂。在一些实施方案中，IL-1α抑制剂是针对IL-1α的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。在一些实施方案中，IL-1抑制剂是IL-1β抑制剂。在一些实施方案中，IL-1β抑制剂是针对IL-1α的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-1A和IL-1B基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，IL-1α抑制剂是针对IL-1α的抗体，例如MABp1(例如，如Honget al.，Lancet Oncol.2014 May；15(6)：656-66中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，IL-1α抑制剂是与IL-1α结合的蛋白质。在一些实施方案中，与IL-1α结合的蛋白质是血清可溶性白介素-1受体I型(sIL-1RI，如Okamoto et al.，J Clin Lab Anal.2009；23(3)：175-8中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，IL-1β抑制剂是针对IL-1β的抗体，例如卡那单抗(例如，如Ridker et al.，N Engl J Med 2017；377：1119-1131中所述，其通过引用并入本文)、格弗珠单抗(例如，如Knickelbein et al.，Am J Ophthalmol.2016 Dec；172：104-110中所述，其通过引用并入本文)、LY2189102(例如，如Sloan-Lancaster et al.，Diabetes Care2013 Mar；DC_121835中所述，其通过引用并入本文)、CYT013(例如，如Dinarello et al.，Nature Reviews Drug Discovery 11，633-652，2012中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，IL-1β抑制剂是与IL-1β结合的蛋白质。在一些实施方案中，与IL-1β结合的蛋白质是血清可溶性白介素-1受体II型(sIL-1RII，例如，如Jouvenne et al.，ArthritisRheum.1998 Jun；41(6)：1083-9中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，IL-1β抑制剂抑制胱天蛋白酶I，胱天蛋白酶I对IL-1β的产生是必需的。在一些实施方案中，胱天蛋白酶I抑制剂是VX-70或者VX-765或belnacasan(例如，如Boxer et al.，ChemMedChem.2010 May 3；5(5)：730-738.中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，IL-1抑制剂是选自以下的小分子抑制剂：舒拉明钠、甲氨蝶呤-甲基-d3、甲氨蝶呤-甲基-d3二甲基酯和双醋瑞因。所有这些都可从例如Santa CruzBiotechnology，Inc.，Texas，USA商购得到。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-1R抑制剂，例如IL-1R拮抗剂。“拮抗剂”是一类受体配体或药物，其通过与受体结合但不是像激动剂那样激发反应来阻断或减弱生物学反应。它们有时被称为阻滞剂。一些实例包括α阻滞剂、β阻滞剂和钙通道阻滞剂。药理学上，拮抗剂对其同源受体具有亲和力但没有效力，并且结合将破坏相互作用并抑制受体上激动剂或反向激动剂的功能。拮抗剂通过与受体上活性正构位点(＝正确位置)或变构位点(＝其他位置)结合来介导其作用，或者它们可在通常不参与受体活性的生物学调节的独特结合位点上相互作用。拮抗剂的活性可以是可逆的或不可逆的，这取决于拮抗剂-受体复合物的寿命，其寿命转而取决于拮抗剂-受体的结合的性质。大多数药物拮抗剂通过与内源性配体或底物在受体上结构限定的结合位点竞争来实现其效价。

天然地，IL-1R拮抗剂包含IL-1RA、IL-1RA变体和IL-1RA衍生物，这些统称为“IL-1ra蛋白”。白介素-1受体拮抗剂(Interleukin-1 receptor antagonist，IL-1ra)是人蛋白质，其作为白介素-1的天然抑制剂发挥作用，并且是IL-1家族(其包括IL-1α和IL-1β)的成员。某些受体拮抗剂，包括IL-1ra及其变体和衍生物，以及制备和使用它们的方法，在美国专利No.5,075,222、WO 91/08285、WO 91/17184、AU 9173636、WO 92/16221、WO 93/21946、WO 94/06457、WO 94/21275、FR 2706772、WO 94/21235、DE 4219626、WO 94/20517、WO 96/22793、WO 97/28828和WO 99/36541中描述，其通过引用并入本文。在某些实施方案中，IL-1受体拮抗剂可以是糖基化的。在某些实施方案中，IL-1受体拮抗剂可以是非糖基化的。

IL-1ra的三种形式及其变体在美国专利No.5,075,222中描述，其通过引用并入本文。用于分离编码抑制剂的基因、将这些基因克隆到合适的载体中、将这些基因转化和转染到某些细胞类型中、以及表达这些基因以产生抑制剂的方法是本领域技术人员已知的。

在一些实施方案中，IL-1R抑制剂是针对IL-1R的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-1R基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，IL-1R抑制剂是针对IL-1R的抗体(例如，单克隆抗体)。可根据本公开内容使用的一些示例性IL-1抗体，包括但不限于：阿那白滞素(例如，如Mertens etal.，Cochrane Database Syst Rev.2009 Jan 21；(1)：CD005121中所述，其通过引用并入本文)、MEDI-8968(例如，如Dinarello et al，Nature Reviews Drug Discovery 11，633-652，2012中所述，其通过引用并入本文)和AMG108(例如，如Cohen et al.，Arthritis ResTher.2011 Jul 29；13(4)：R125中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，IL-1R抑制剂是抑制性蛋白质或肽。这样的抑制性蛋白质或肽包括但不限于：利纳西普、sIL-1RI(例如，如Okamoto et al.，J Clin Lab Anal.2009；23(3)：175-8和欧洲专利EP 623674中所述，其通过引用并入本文)，和EBI-005(例如，如Kovalchin et al.，Eye Contact Lens.2017 Jul 18.doi：10.1097/ICL.0000000000000414中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-6抑制剂。在一些实施方案中，IL-6抑制剂是针对IL-6的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-6基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，IL-6抑制剂是针对IL-6的抗体。针对IL-6的抗体是本领域已知的并且包括BE-8和CNTO328(参见，例如，Trikha et al.，Clin Cancer Res 2003，9：4653或US20090022726)。至于IL-6中和抗体，可采用多克隆抗体和单克隆抗体二者，优选单克隆抗体。具有中和IL-6能力的抗IL-6抗体的一个实例是在日本特许专利申请(Kokai)No.3-139292和在欧洲专利公开0 399 429 A1中描述的IG61，尽管IL-6-中和抗体不限于该抗体。IG61于1990年4月27日保藏在日本茨城县筑波市东一町目1-3号工业科学技术厅国家生物科学与人类技术研究所(National Institute of Bioscience and Human-Technology，Agency of Industrial Science and Technology at 1-3，Higashi 1-chome，Tsukuba-shi，Ibaraki-ken，Japan)，登录号为FERM BP-2878。IL-6抗体的另一些非限制性实例包括司妥昔单抗、西鲁库单抗、克拉扎珠单抗、奥洛珠单抗和艾西莫单抗。本领域技术人员熟悉这些IL-6抗体。

在一些实施方案中，IL-6抑制剂是小分子。非限制性的示例性小分子IL-6抑制剂包含：PGE1及其衍生物、PGI2及其衍生物和环磷酰胺。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-6R抑制剂(例如，IL-6R拮抗剂)。在一些实施方案中，IL-6R抑制剂是针对IL-6R的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-6R基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，IL-6R抑制剂是IL-6R抗体。抗IL-6R的抗体是本领域已知的并且包括PM1(Hirata et al.，J Immunol 143，2900，1986，其通过引用并入本文)、AUK12-20、AUK64-7、AUKl46-15(WO92/19759)、MRA(US 5,888,510)、AB-227-NA和托珠单抗(参见例如，Hashizume，Rheumat Int 2009，Jul 29，epub，其通过引用并入本文)。这些抗体能够通过与IL-6或其受体结合而中和IL-6信号传导。这样的抗体也可通过常规技术制备。在一些实施方案中，IL-6R抗体是沙利鲁单抗(例如，如Raimondo et al.，Drug Des Devel Ther.2017May 24；11：1593-1603中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，抗炎剂包含NLRP3抑制剂。在一些实施方案中，NLRP3抑制剂是针对NLRP3的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。NLRP3基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

其他NLRP3抑制剂在本领域中描述于，例如Shao et al.，Front Pharmacol.2015；6：262中，其通过引用并入本文。NLRP3抑制剂的一些非限制性实例包括：秋水仙碱、MCC950、CY-09、酮体代谢物β-羟基丁酸(BHB)、I型干扰素、白藜芦醇、阿格拉宾、CB2R、格列本脲、异甘草素、Z-VAD-FMK和微RNA-223。本文中描述的数种NLRP3抑制剂，例如，格列本脲、异甘草素、以及Z-VAD-FMK是可商购的，例如，购自Invivogen Inc.(California，USA)。

在一些实施方案中，抗炎剂包含TNF抑制剂，例如TNFα。在一些实施方案中，TNFα抑制剂是针对TNFα的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。TNFα基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，TNF抑制剂可通过下调或抑制TNF产生、结合游离TNF、干扰TNF与其受体结合以及与其受体结合后干扰TNF信号传导的调节中的至少一种来发挥作用。TNF抑制剂的一些实例包括但不限于可溶性TNF受体，包括但不限于可溶性肿瘤坏死因子受体I型(sTNF-RI；也称为p55受体)、可溶性肿瘤坏死因子受体II型(也称为p75受体)和Enbrel^TM；针对TNF的抗体，包括但不限于类克(Remicade)^TM和D2E7(参见，例如，美国专利NO.6,090,382和NO.6,258,562)；针对TNF受体的抗体；sTNF-RI(参见，例如，WO 98/24463)、依那西普(Enbrel^TM)、Avakine^TM；TNF-α转换酶(TNF-α converting enzyme，TACE)的抑制剂；以及影响TNF活性的其他分子。

示例性TNF-α抑制剂在本领域中描述于，例如，欧洲专利申请EP 308 378、EP 422339、EP 393 438、EP 398 327、EP 412 486、EP 418 014、EP 417 563、EP 433 900、EP 464533、EP 512 528、EP 526 905、EP 568 928、EP 607 776(其描述了来氟米特用于TNF-α的抑制的用途)、EP 663 210、EP 542 795、EP 818 439、EP 664 128、EP 542 795、EP 741 707、EP 874 819、EP 882 714、EP 880 970、EP 648 783、EP 731 791、EP 895 988、EP 550 376、EP 882 714、EP 853 083、EP 550 376、EP 943 616、EP 939 121、EP 614 984、EP 853 083；美国专利No.5,136,021、5,929,117、5,948,638、5,807,862、5,695,953、5,834,435、5,817,822、5,830,742、5,834,435、5,851,556、5,853,977、5,359,037、5,512,544、5,695,953、5,811,261、5,633,145、5,863,926、5,866,616、5,641,673、5,869,677、5,869,511、5,872,146、5,854,003、5,856,161、5,877,222、5,877,200、5,877,151、5,886,010、5,869,660、5,859,207、5,891,883、5,877,180、5,955,480、5,955,476、5,955,435、5,994,351、5,990,119、5,952,320、5,962,481；国际专利申请WO 90/13575、WO 91/03553、WO 92/01002、WO92/13095、WO 92/16221、WO 93/07863、WO 93/21946、WO 93M19777、WO 95/34326、WO 96/28546、WO 98/27298、WO 98/30541、WO 96/38150、WO 96/38150、WO 97/18207、WO 97/15561、WO 97/12902、WO 96/25861、WO 96/12735、WO 96/11209、WO98/39326、WO 98/39316、WO98/38859、WO 98/39315、WO 98/42659、WO 98/39329、WO 98/43959、WO 98/45268、WO 98/47863、WO 96/33172、WO 96/20926、WO 97/37974、WO 97/37973、WO 97/47599、WO 96/35711、WO 98/51665、WO 98/43946、WO 95/04045、WO 98/56377、WO 97/12244、WO 99/00364、WO 99/00363、WO 98/57936、WO 99/01449、WO 99/01139、WO 98/56788、WO 98/56756、WO 98/53842、WO 98/52948、WO 98/52937、WO 99/02510、WO 97/43250、WO 99/06410、WO 99/06042、WO 99/09022、WO 99/08688、WO 99/07679、WO 99/09965、WO 99/07704、WO 99/06041、WO 99/37818、WO 99/37625、WO 97/11668、WO 99/50238、WO 99/47672、WO 99/48491；日本专利申请10147531、10231285、10259140、以及10130149、10316570、11001481、以及127,800/1991；德国申请no.19731521；以及英国申请No.2218101、2326881、2246569中。所有上述参考文献的公开内容出于任何目的通过引用在此并入。

在一些实施方案中，TNF抑制剂是TNF抗体，例如但不限于英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗和戈利木单抗。在一些实施方案中，TNF抑制剂是依那西普(Enbrel)。小分子TNF抑制剂的一些非限制性实例包括：沙利度胺、来那度胺、泊马度胺、黄嘌呤衍生物、安非他酮、5-HT2A激动剂致幻剂(例如(R)-DOI、TCB-2、LSD和LA-SS-Az)。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-8抑制剂。在一些实施方案中，IL-8抑制剂是针对IL-8的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-8基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

在一些实施方案中，IL-8抑制剂是针对IL-8的抗体，例如但不限于，HuMab-10F8，如Skov et al.，J Immunol.2008 Jul 1；181(1)：669-79中所述，其通过引用并入本文。在一些实施方案中，IL-8抑制剂是瑞帕利辛，例如如Leitner et al.，Int J ImmunopatholPharmacol.2007 Jan-Mar；20(1)：25-36中所述，其通过引用并入本文。小分子IL-8抑制剂的一些非限制性实例包括：姜黄素、安瘤克、大环内酯类(例如，如Kohyama et al.，Antimicrob.Agents Chemother.April 1999 vol.43 no.4907-911中所述，其通过引用并入本文)、以及三氟乙酸盐。

在一些实施方案中，抗炎剂包含IL-18抑制剂。在一些实施方案中，IL-18抑制剂是针对IL-18的反义寡核苷酸，例如RNAi分子，例如miRNA、siRNA或shRNA。IL-18基因的核酸序列是已知的。本领域技术人员能够使用常规方法设计这样的反义寡核苷酸。

示例性IL-18抑制剂包含但不限于与IL-18结合的抗体；与IL-18R结合的抗体；与IL-18RAcP结合的抗体；IL-18bp；IL-18R片段(例如，IL-18受体的可溶性胞外结构域)；与IL-18结合并降低或阻止其与IL-18R相互作用的肽；与IL-18R结合并降低或阻止其与IL-18或与IL-18RAcP相互作用的肽；与IL-18RAcP结合并降低或阻止其与IL-18R相互作用的肽；以及降低或阻止IL-18产生或IL-18、IL-18R和IL-18RAcP中的任一种问相互作用的小分子。

某些IL-18抑制剂描述于，例如在于1994年7月14日发布的美国专利No.5,912,324、于1999年12月8日公开的EP 0 962 531、于1994年11月15日发布的EP 712 931、于1994年7月14日发布的美国专利No.5,914,253、于1997年7月10日公开的WO 97/24441、于2000年5月9日发布的美国专利No.6,060,283、于1996年12月26日公开的EP 850 952、于1998年9月16日公开的EP 864585、于1998年9月24日公开的WO 98/41232、于2000年4月25日发布的美国专利No.6,054,487、于1997年8月14日公开的WO 99/09063、于1997年11月3日公开的WO99/22760、于1998年1月23日公开的WO 99/37772、于1998年3月20日公开的WO 99/37773、于2000年1月26日公开的EP 0 974 600、于2000年3月9日公开的WO 00/12555、于1997年10月31日公开的日本专利申请JP 111,399/94、于1998年2月8日公开的以色列专利申请IL121554 A0中，其通过引用并入本文。

在一些实施方案中，IL-18抑制剂是IL-18结合蛋白，例如，如Dinarello et al.，Front Immunol.2013；4：289中所述，其通过引用并入本文。在一些实施方案中，IL-18抑制剂是小分子，例如NSC201631、NSC61610和NSC80734，这在Krumm et al.，ScientificReports 7，Article number：483，2017中描述，其通过引用并入本文。

在一些实施方案中，抗炎剂包含自然杀伤细胞抑制剂。在一些实施方案中，自然杀伤细胞抑制剂是抗体(例如，MKp46抗体，这在Yossef et al.，The Journal ofImmunology，Vol.192，Issue 1Supplement 1 May 2014中描述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，自然杀伤细胞抑制剂是病毒主要组织相容性复合体(majorhistocompatibility complex，MHC)I类同源物(例如，如Farrell et al.，Nature volume386，pages 510-514，1997中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，自然杀伤细胞抑制剂是膳食脂质(例如，如Yaqoob et al.，Immunology Letters，Volume 41，Issues2-3，July 1994，Pages 241-247中所述，其通过引用并入本文)。本领域技术人员能够选择合适的自然杀伤细胞抑制剂。

在一些实施方案中，抗炎剂包含本领域中描述的任何其他细胞因子抑制剂，例如，在PCT申请公开WO2007075896、WO2008021388、WO2007056016、以及WO2007056016、以及美国专利申请公开US20040033535中，其通过引用并入本文。在一些实施方案中，抗炎剂包含甲氨蝶呤。在一些实施方案中，抗炎剂包含阿卤芬酯，例如，如Poiley et al.，Arthritis&Rheumatology，Vol.68，No.8，August 2016，pp 2027-2034中所述，其通过引用并入本文。

本文中描述的方法是联合治疗方法。向对象施用抗炎剂和降脂质剂。“降脂质剂”是指在对象(例如，患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象)中降低一种或更多种脂质的水平(例如，降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或更多)的药剂。可通过本文中描述的降脂质剂降低其水平的脂质的一些实例包括但不限于：胆固醇(例如，总胆固醇)、LDL-C、极低密度脂蛋白胆固醇(very lowdensity lipoprotein cholesterol，VLDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(非HDL-C)和甘油三酯。在一些重要的实施方案中，脂质是LDL-C。在一些实施方案中，降脂质剂在对象中提高了高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平(例如，提高例如提高至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、2倍、5倍、10倍或更多)。

降脂质剂的一些非限制性实例包括但不限于：HMG-CoA还原酶抑制剂(例如他汀类)、蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)抑制剂、其他降脂质剂、和/或其组合。在一些实施方案中，本公开内容的降脂质剂包含HMG-CoA还原酶抑制剂。通过抑制HMG-CoA还原酶基因而降低由细胞合成的胆固醇的量，引发一系列事件，最终导致肝细胞对LDL-C的摄入提高。随着LDL-C摄入的提高，血液中总胆固醇和LDL-C水平降低。

在一些实施方案中，HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类。他汀类的一些非限制性实例包括：辛伐他汀(舒降之)、洛伐他汀(美降脂)、普伐他汀(普拉固)、氟伐他汀(来适可)、阿托伐他汀(立普妥)、西立伐他汀(拜斯亭)、瑞舒伐他汀(可定)、匹伐他汀以及许多在以下中描述的其他：美国专利No.4,444,784、美国专利No.4,231,938、美国专利No.4,346,227、美国专利No.4,739,073、美国专利No.5,273,995、美国专利No.5,622,985、美国专利No.5,135,935、美国专利No.5,356,896、美国专利No.4,920,109、美国专利No.5,286,895、美国专利No.5,262,435、美国专利No.5,260,332、美国专利No.5,317,031、美国专利No.5,283,256、美国专利No.5,256,689、美国专利No.5,182,298、美国专利No.5,369,125、美国专利No.5,302,604、美国专利No.5,166,171、美国专利No.5,202,327、美国专利No.5,276,021、美国专利No.5,196,440、美国专利No.5,091,386、美国专利No.5,091,378、美国专利No.4,904,646、美国专利No.5,385,932、美国专利No.5,250,435、美国专利No.5,132,312、美国专利No.5,130,306、美国专利No.5,116,870、美国专利No.5,112,857、美国专利No.5,102,911、美国专利No.5,098,931、美国专利No.5,081,136、美国专利No.5,025,000、美国专利No.5,021,453、美国专利No.5,017,716、美国专利No.5,001,144、美国专利No.5,001,128、美国专利No.4,997,837、美国专利No.4,996,234、美国专利No.4,994,494、美国专利No.4,992,429、美国专利No.4,970,231、美国专利No.4,968,693、美国专利No.4,963,538、美国专利No.4,957,940、美国专利No.4,950,675、美国专利No.4,946,864、美国专利No.4,946,860、美国专利No.4,940,800、美国专利No.4,940,727、美国专利No.4,939,143、美国专利No.4,929,620、美国专利No.4,923,861、美国专利No.4,906,657、美国专利No.4,906,624和美国专利No.4,897,402。

已经批准用于人的他汀类的一些非限制性实例包括阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀和瑞舒伐他汀。HMG-CoA还原酶抑制剂还在Drugs and TherapyPerspectives(5月12日，1997)，9：1-6；Chong(1997)Pharmacotherapy 17：1 157-1177、Kellick(1997)Formulary 32：352；Kathawala(1991)Medicinal Research Reviews，11：121-146、Jahng(1995)Drugs of the Future 20：387-404和Current Opinion inLipidology，(1997)，8，362-368中描述，其各自通过引用并入本文。另一个值得注意的他汀类药物是化合物3a(S-4522)，这在Watanabe(1997)Bioorganic and Medicinal Chemistry5：437-444中描述，其通过引用并入本文。

在一些实施方案中，降脂质剂包含蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)抑制剂。“蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)”是在人中由PCSK9基因编码的酶。PCSK9与低密度脂蛋白(LDL)颗粒的受体结合。在肝中，LDL受体通过胞吞途径从血液中去除LDL颗粒。当PCSK9与LDL受体结合时，该受体被引导向溶酶体途径并被蛋白水解酶分解，从而限制了给定的LDL受体能够从血液中摄入LDL颗粒的次数。抑制PCSK9的水平或活性可导致更多的LDL受体被回收并呈现在肝细胞表面，并且将从血液中去除更多的LDL胆固醇，继而降低血液中的胆固醇水平。

已提出了多种抑制PSCK9的治疗性方法，包括：通过基因沉默剂(例如RNAi)对PSCK9合成的抑制；通过单克隆抗体、小肽或阿德奈汀对PCSK9与LDL-R结合的抑制；以及通过小分子抑制剂对PCSK9自催化过程的抑制。这些策略已在Hedrick et al.，Curr OpinInvestig Drugs 2009；10：938-46、Hooper et al.，Expert Opin Biol Ther，2013；13：429-35、Rhainds et al.，Clin Lipid，2012；7∶621-40、Seidah et al；，Expert Opin TherTargets 2009；13：19-28和Seidah et al.，Nat Rev Drug Discov 2012；11：367-83中描述，其各自通过引用并入本文。

“PCSK9抑制剂”是指降低PCSK9水平或活性的药剂(例如在对象中)。在一些实施方案中，PCSK9抑制剂降低PCSK9的表达(例如，降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或100％)。在一些实施方案中、PCSK9抑制剂降低PSCK9的活性(例如，降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或100％)。在一些实施方案中，PCSK9抑制剂选自：天然PCSK9抑制剂、PCSK9抗体、反义核酸、肽抑制剂、PCSK9疫苗和小分子抑制剂。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是天然PCSK9抑制剂。“天然PCSK9抑制剂”是指针对PCSK9具有抑制性活性的天然存在的分子(例如，在植物中或在哺乳动物中)。例如，植物生物碱小檗碱在体外在永生化人肝细胞中抑制PCSK9基因的转录(例如，如Li et al.，TheJournal of Biological Chemistry.284(42)：28885-95，2009中所述，其通过引用并入本文)并且在体内降低小鼠和仓鼠的血清PCSK9(例如，如Dong et al.，The Journal ofBiological Chemistry.290(7)：4047-58，2015中所述，其通过引用并入本文)。在另一个实施例中，膜联蛋白A2(其是内源性蛋白)抑制PCSK9活性(例如，如Seidah et al.，PLoSONE.7(7)：e41865，2012中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是阿德奈汀(BMS-962476，如Mitchell et al.，J Pharmacol Exp Ther.2014 Aug；350(2)：412-24中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是PCSK9抗体。PCSK9抗体的一些非限制性实例包括：阿利西尤单抗(

如Robinson et al.，N Engl J Med 2015；372：1489-1499，2015中所述，其通过引用并入本文)、依洛尤单抗(瑞百安

例如，如Sabatine et al.，N Engl J Med 2017；376：1713-1722，2017中所述，其通过引用并入本文)、1D05-IgG2(例如，如Ni et al.，J Lipid Res.2011Jan；52(1)：78-86m中所述，其通过引用并入本文)、RG-7652(例如，如Baruch et al.，Am J Cardiol.2017 May 15；119(10)：1576-1583中所述，其通过引用并入本文)、LY3015014(例如，如Eur Heart J.2016 May 1；37(17)：1360-9中所述，其通过引用并入本文)和博科昔单抗(例如，如Ridker et al.，NEngl J Med 2017；376：1527-1539中所述，其通过引用并入本文)。本文中举例说明的实施例不旨在限制。根据本公开内容，可使用抑制其活性的任何PCSK9抗体。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是反义核酸。在一些实施方案中，反义核酸是RNAi分子(微RNA、siRNA、shRNA、dsRNA和本领域已知的其他基于小干扰核酸的分子)。PCSK9的核酸序列是本领域已知的(例如，人PCSK9，NCBI基因ID：255738)。本领域技术人员熟悉如何制备和使用靶向PCSK9基因的反义核酸。在一些实施方案中，抑制PCSK9表达的RNAi分子是英利西朗(例如，如Ray et al.，N Engl J Med 2017；376：1430-1440中所述，其通过引用并入本文)或ALN-PCS(例如，如Fitzgerald et al.，N Engl J Med.2017 Jan 5；376(1)：41-51中所述，其通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是肽抑制剂。在一些实施方案中，肽抑制剂是模拟低密度脂蛋白受体(LDL-R)的EGFa结构域的肽(例如，如Kwon et al.，PNAS 2008February，105(6)1820-1825和Schroeder et al.，Chemistry&Biology，Volume 21，Issue2，20 February 2014，Pages 284-294中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，肽抑制剂是Pep2-8，这在Zhang et al.，The Journal of Biological Chemistry 289，942-955中描述，其通过引用并入本文。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是小分子。在一些实施方案中，小分子PCSK9抑制剂是PF-06446846(例如，如Lintner et al.，PLoS Biol 15(3)：e2001882中所述，其通过引用并入本文)。在一些实施方案中，小分子PCSK9抑制剂是胆固醇酯转移蛋白(CETP)的抑制剂，例如安塞曲匹(例如，如Barter et al.，J Lipid Res.2015 Nov；56(11)：2045-2047中所述，其通过引用并入本文)或K-312(例如，如Miyosawa et al.，Am J PhysiolEndocrinol Metab.2015 Jul 15；309(2)：E177-90中所述，其通过引用并入本文)。小分子PCSK9抑制剂的另一些实例在Petersen et al.，Cell Chemical Biology，Volume 23，Issue 11，p1362-1371，2016和Halford et al.，Chemical&Engineering News，Volume 94Issue 44|p.12，2016中描述，其通过引用并入本文。

在一些实施方案中，PCSK9抑制剂是PCSK9疫苗。在一些实施方案中，PCSK9疫苗包含来自PCSK9的抗原肽。例如，PCSK9疫苗可以是AT04A疫苗，这在Landlinger et al(European Heart Journal，Volume 38，Issue 32,21 August 2017，Pages 2499-2507，其通过引用并入本文)中描述。在一些实施方案中，PSCK9疫苗可以是病毒样颗粒肽疫苗(例如PCSK9Qβ-003疫苗，这在Pan et al.，Scientific Reportsvolume 7，Article number：12534(2017)中描述，其通过引用并入本文)。

根据本公开内容可使用任何其他已知的PCSK9抑制性策略。例如，可对PCSK9基因进行修饰导致在对象中的非功能性的PCSK9变体，从而抑制其活性。许多PCSK9变体在例如PCT公开No.WO2001031007、WO2001057081、WO2002014358、WO2001098468、WO2002102993、WO2002102994、WO2002046383、WO2002090526、WO2001077137和WO2001034768；美国公开No.US 2004/0009553和US 2003/0119038；以及欧洲公开No.EP 1 440 981、EP 1 067 182和EP 1 471 152中描述，其各自通过引用并入本文。

PCSK9的数种突变形式已充分表征，包括S127R、N157K、F216L、R218S和D374Y，其中S127R、F216L和D374Y与常染色体显性高胆固醇血症(autosomal dominanthypercholesterolemia，ADH)相关。参见Benjannet et al.(J.Biol.Chem.，279(47)：48865-48875(2004))；Rashid et al.，PNAS，102(15)：5374-5379(2005)；Abifadel etal.，2003Nature Genetics 34：154-156；Timms et al.，2004 Hum.Genet.114：349-353；Leren，2004 Clin.Genet.65：419-422；Cohen et al.，2006 N.Engl.J.Med.354：1264-1272；Lalanne et al.(J.Lipid Research，46：1312-1319(2005)，其各自通过引用并入本文。

在一些实施方案中，降脂质剂包含一种或更多种(例如1、2、3或更多种)HMG-CoA还原酶抑制剂(例如，他汀类)和一种或更多种(例如1、2、3或更多种)本领域已知或本文中描述的PSCK9抑制剂。例如，降脂质剂可包括辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀和匹伐他汀中的一种或更多种(例如1、2、3或更多种)，以及小檗碱、膜联蛋白A2、阿德奈汀、PF-06446846、安塞曲匹、K-312、阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014、博科昔单抗、英利西朗、ALN-PCS和PCSK9疫苗中的一种或更多种(例如1、2、3或更多种)。本文中考虑了所有可能的组合。

在一些实施方案中，本文中描述的降脂质剂还包括具有降脂作用的一种或更多种其他药剂，例如但不限于：纤维酸衍生物(贝特类)、胆汁酸螯合剂或树脂、烟酸剂、胆固醇吸收抑制剂、脂酰辅酶A：胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂、胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂、LDL受体拮抗剂、类法尼醇X受体(FXR)拮抗剂、固醇调节性结合蛋白切割激活蛋白(SCAP)激活剂、微粒体甘油三酯转移蛋白(MTP)抑制剂、鲨烯合酶抑制剂或过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR)激动剂。

纤维酸衍生物的一些非限制性实例包括：吉非罗齐(Lopid)、非诺贝特(Tricor)、氯贝特(Atromid)和苯扎贝特(bezafibrate)。胆汁酸螯合剂或树脂的一些非限制性实例包括：考来维仑(WelChol)、考来烯胺(Questran或Prevalite)和考来替泊(Colestid)、DMD-504、GT-102279、HBS-107和S-8921。烟酸剂的一些非限制性实例包括：烟酸和普罗布考。胆固醇吸收抑制剂的一些实例包括但不限于依折麦布(Zetia)。ACAT抑制剂的一些非限制性实例包括：阿伐麦布、CI-976(Parke Davis)、CP-113818(Pfizer)、PD-138142-15(ParkeDavis)、F1394、以及许多在美国专利No.6,204,278、6,165,984、6,127,403、6,063,806、6,040,339、5,880,147、5,621,010、5,597,835、5,576,335、5,321,031、5,238,935、5,180,717、5,149,709和5,124,337中描述的其他。CETP抑制剂的一些非限制性实例包括：托彻普(Torcetrapib)、CP-529414、CETi-I、JTT-705、以及许多在美国专利No.6,727,277、6,723,753、6,723,752、6,710,089、6,699,898、6,696,472、6,696,435、6,683,099、6,677,382、6,677,380、6,677,379、6,677,375、6,677,353、6,677,341、6,605,624、6,586,448、6,521,607、6,482,862、6,479,552、6,476,075、6,476,057、6,462,092、6,458,852、6,458,851、6,458,850、6,458,849、6,458,803、6,455,519、6,451,830、6,451,823、6,448,295、5,512,548中描述的其他。FXR拮抗剂的一个非限制性实例是没药甾酮(Guggulsterone)。SCAP激活剂的一个非限制性实例是GW532(GlaxoSmithKline)。MTP抑制剂的一些非限制性实例包括：英普他派(Implitapide)和R-103757。鲨烯合酶抑制剂的非限制性实例包括：萨拉哥酸(zaragozic acid)。PPAR激动剂的一些非限制性实例包括：GW-409544、GW-501516和LY-510929。

在一些实施方案中，将治疗心血管疾病的方法进一步与其他治疗组合以降低未来心血管事件的风险，例如但不限于：饮食和/或运动和/或使用以下的治疗：抗高血脂剂、抗炎剂、抗血栓剂、纤维蛋白溶解剂(fibrinolytic agent)、抗血小板剂、直接凝血酶抑制剂(direct thrombin inhibitor)、糖蛋白Ilb/IIIa受体抑制剂、与细胞黏附分子结合并抑制白细胞附着于这样的分子的能力的药剂(例如，抗细胞黏附分子抗体)、α-肾上腺素能阻滞剂、β-肾上腺素能阻滞剂、环氧合酶-2抑制剂、血管紧张素系统抑制剂、抗心律失常药、钙通道阻滞剂、利尿剂、变力剂(inotropic agent)、血管扩张药、血管加压药(vasopressor)、噻唑烷二酮类、大麻素-1受体阻滞剂、和/或其任意组合。

在一些方面中，本公开内容提供了通过使用靶向促炎细胞因子和PCSK9二者的双特异性抗体来同时降低炎症和降低脂质水平从而治疗心血管疾病的策略。在一些实施方案中，方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含结合促炎细胞因子的第一抗原结合结构域和结合PCSK9的第二抗原结合结构域。

“双特异性抗体”是具有双重抗原结合特异性的抗体。双特异性抗体可通过将具有不同结合特异性的两个抗原结合结构域连接来形成。如此，双特异性抗体包含结合第一抗原的第一抗原结合结构域和结合不同于第一抗原的第二抗原的第二抗原结合结构域。

“抗原结合结构域”在本文中也称为“抗原结合片段”或“抗原结合部分”，并且是指对抗原表位具有特异性结合亲和力的多肽。在一些实施方案中，这样的多肽由免疫球蛋白基因编码。免疫球蛋白基因的一些非限制性实例包括κ、λ、α、γ、δ、ε和μ恒定区基因，以及大量的免疫球蛋白可变区基因。免疫球蛋白还可以以除抗体外的多种形式存在；包括例如Fv、Fab和F(ab)2、以及单链(例如，如Huston，et al.，Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.，85：5879-5883(1988)和Bird，et al.，Science，242：423-426(1988)中所述，其通过引用并入本文)。抗原结合结构域的另一些实例包括T细胞抗原受体以及与MHC蛋白上的表位结合的CD4蛋白。除了免疫球蛋白链的天然存在的形式之外，可使用本领域技术人员公知的多种重组DNA技术来设计和制造抗原结合结构域。

双特异性抗体可以为多种形式。在一些实施方案中，双特异性抗体是Ig-G样分子。即，双特异性抗体包含第一抗原结合结构域、第二抗原结合结构域和共同的片段可结晶区(Fc区)。在一些实施方案中，双特异性抗体是单克隆双特异性抗体。单克隆双特异性抗体保留了两个抗原结合结构域和一个Fc区的传统单克隆抗体(mAb)结构，除了两个抗原结合结构域结合不同的抗原之外。单克隆双特异性抗体最常见的类型称为三功能抗体，因为其在抗体上具有三个独特的结合位点：两个Fab区以及Fc区。单克隆双特异性抗体的每个抗原结合结构域(例如，重链和轻链对)来源于独特的单克隆抗体。由两条重链组成的Fc区形成与细胞表面Fc受体结合的第三结合位点。这些双特异性单克隆抗体通常是用四源杂交瘤(quadroma)或杂交的杂交瘤方法制备的。

在一些实施方案中，双特异性抗体是非IgG样的。存在其他的双特异性抗体，其完全不含Fc区。非IgG样双特异性抗体包含仅由Fab区组成的化学连接的Fab、多种类型的二价和三价单链可变片段(scFv)、以及模拟两种抗体可变结构域的融合蛋白。非IgG样双特异性抗体的一个实例是双特异性T细胞接合子(bispecific T-cell engager，BiTE，例如，如Yang et al，International Journal of Molecular Sciences.18(1)：48，2016、Baeuerleet al.，Cancer Res.69(12)：4941-4944，2009和Wozniak-Knopp et al.，ProteinEngineering Design and Selection.23(4)：289-297，2010中所述，其通过引用并入本文)。

双特异性抗体可通过本领域技术人员已知的多种方法产生。双特异性抗体的两个抗原结合结构域可来源于针对促炎细胞因子的抗体和针对PCSK9的抗体。“来源于”意指使用针对本文中描述的促炎细胞因子的抗体的抗原结合结构域作为双特异性抗体的第一抗原结合结构域，以及使用PCSK9抗体的抗原结合结构域作为双特异性抗体的第二抗原结合结构域。可通过化学交联、通过凭借彼此进行相互作用的一对表位的连接(例如，亮氨酸拉链)、通过杂交-杂交瘤(Milstein和Cuello，(1984)Immunol.Today 5：299)或转染瘤、或者通过铰链区的二硫键交换，来使两个抗原结合结构域彼此连接。本领域技术人员熟悉产生双特异性抗体的方法。

在一些实施方案中，由第一抗原结合结构域靶向的促炎细胞因子可以是本文中描述的任何促炎细胞因子，例如但不限于IL-1、IL-1受体(IL-1R)、IL-6、IL-6受体(IL-6R)、NLRP3、TNF、IL-8或IL-18。

在一些实施方案中，双特异性抗体包含结合IL-1(例如，IL-1α或IL-1β)的第一抗原结合结构域和结合PCSK9的第二抗原结合结构域。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1α结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-1α抗体(例如但不限于，MABp1)。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1β结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-1β抗体(例如但不限于，卡那单抗、格弗珠单抗、双醋瑞因或LY2189102)。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-1R结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-1R抗体(例如但不限于，MEDI-8968或AMG108)。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-6结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-6抗体(例如但不限于，司妥昔单抗、西鲁库单抗、克拉扎珠单抗、奥洛珠单抗或艾西莫单抗)。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-6R结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-6R抗体(例如但不限于，托珠单抗、沙利鲁单抗、PM1、AUK12-20、AUK64-7、AUK146-15或AB-227-NA)。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与NLRP3结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于NLRP3抗体。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与TNF结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于TNF抗体(例如但不限于，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、戈利木单抗或依那西普(Enbrel))。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-8结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-8抗体(例如但不限于HuMab-10F8)。

在一些实施方案中，第一抗原结合结构域与IL-18结合。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域来源于IL-18抗体。

在一些实施方案中，第二抗原结合结构域来源于PCSK9抗体，(例如但不限于，阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗)。

在一些实施方案中，还可向对象施用除本文中描述的双特异性抗体之外的治疗有效量的HMG-CoA还原酶抑制剂。在一些实施方案中，HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类(例如但不限于辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀或匹伐他汀)。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，促炎细胞因子的水平或活性相对于接受治疗之前是降低的。“降低促炎细胞因子的水平或活性”意指当组合物向对象施用时，细胞因子(例如，IL-1、IL-6、TNF、IL-8或IL-18)的水平或活性相较于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，细胞因子(例如，IL-1、IL-6、TNF、IL-8或IL-18)的水平或活性相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，细胞因子(例如，IL-1、IL-6、TNF、IL-8或IL-18)的水平或活性相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。促炎细胞因子的活性可以以信号传导途径的量级(magnitude)来反映。本领域技术人员可使用常规方法评估促炎细胞因子的活性。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，C反应蛋白的水平或活性相对于接受治疗之前是降低的。“C反应蛋白(CRP)”是由肝产生的在体内存在炎症的情况下提高的物质。用血液测试可鉴定升高的C反应蛋白水平，并且这被认为是疾病的非特异性“标志物”。

在一些实施方案中，患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象具有比对照对象高至少20％的CRP水平。例如，患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象可具有比对照对象高至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少100倍或至少1000倍的CRP水平。在一些实施方案中，患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象具有比对照对象高20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、5倍、10倍、100倍或1000倍的CRP水平。在一些实施方案中，对照对象是健康对象。

“降低CRP的水平或活性”意指在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，CRP的水平或活性相对于接受治疗之前降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，CRP的水平或活性相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，CRP的水平或活性相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，一种或更多种脂质(例如，非HDL-C、LDL-C、VLDL-C、总胆固醇和甘油三酯中的一种或更多种)的水平或活性相对于接受治疗之前是降低的。“降低一种或更多种脂质的水平或活性”意指当组合物向对象施用时，一种或更多种脂质(例如，非HDL-C、LDL-C、VLDL-C、总胆固醇和甘油三酯中的一种或更多种)的水平或活性相对于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，一种或更多种脂质(例如，非HDL-C、LDL-C、VLDL-C、总胆固醇和甘油三酯中的一种或更多种)的水平或活性相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，一种或更多种脂质(例如，非HDL-C、LDL-C、VLDL-C、总胆固醇和甘油三酯中的一种或更多种)的水平或活性相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。本领域技术人员可使用常规方法评估脂质的活性。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，载脂蛋白B(ApoB)的水平或活性相对于接受治疗之前是降低的。“降低载脂蛋白B(ApoB)的水平或活性”意指当组合物向对象施用时，ApoB的水平或活性相较于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，ApoB的水平或活性相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，ApoB的水平或活性相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。本领域技术人员可使用常规方法(例如免疫染色或western印迹)来评估ApoB的活性。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，总胆固醇与HDL-C之比相对于接受治疗之前是降低的。“降低总胆固醇与HDL-C之比”意指当组合物向对象施用时，总胆固醇与HDL-C之比相对于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，总胆固醇与HDL-C之比相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，总胆固醇与HDL-C之比相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性心肌梗死的发生和/或心血管死亡率相对于接受治疗之前是降低的。“降低非致命性心肌梗死的发生和/或心血管死亡率”意指当组合物向对象施用时，非致命性心肌梗死的发生和/或心血管死亡率相较于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性心肌梗死的发生和/或心血管死亡率相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性心肌梗死的发生和/或心血管死亡率相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。

在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性卒中的发生相对于接受治疗之前是降低的。“降低非致命性卒中的发生”意指当组合物向对象施用时，非致命性卒中的发生相较于不施用该组合物降低了至少20％。例如，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性卒中的发生相对于接受治疗之前可降低至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或100％。在一些实施方案中，在接受使用本文中描述的降脂质剂和抗炎剂的治疗的对象中，非致命性卒中的发生相对于接受治疗之前降低了20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。

在一些实施方案中，降脂质剂和抗炎剂是一起施用的(例如，在同一组合物中)。在一些实施方案中，降脂质剂和抗炎剂是分开施用的(例如，顺序地)。例如，在一些实施方案中，首先施用降脂质剂，并且第二施用抗炎剂。在一些实施方案中，首先施用抗炎剂，并且第二施用降脂质剂。

在一些实施方案中，将降脂质剂和/或抗炎剂配制在一种或更多种组合物中以施用于对象。在一些实施方案中，该组合物是药用组合物。在一些实施方案中，该组合物还包含可药用载体。所述药用组合物还可包含其他药剂(例如，用于特定递送、提高半衰期或其他的治疗剂)。本文中使用的术语“可药用载体”意指可药用的材料、组合物或载剂，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(manufacturing aid)(例如，润滑剂、滑石镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌、或者硬脂酸)、或溶剂包封材料，其涉及将包含抗炎剂的组合物从身体的一个部位(例如，递送部位)携带或运输至另一部位(例如，器官、组织或身体的一部分)。可药用载体在与制剂的其他成分相容并且对对象的组织不是有害的意义上(例如，生理学相容的、无菌、生理pH等)是“可用的”。可用作可药用载体的材料的一些实例包括：(1)糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素和乙酸纤维素；(4)黄蓍粉；(5)麦芽；(6)明胶；(7)润滑剂，例如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石；(8)赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇类，例如丙二醇；(11)多元醇类，例如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇(PEG)；(12)酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)藻酸；(16)无热原水；(17)等张盐水；(18)林格液；(19)乙醇；(20)pH缓冲液；(21)聚酯类，聚碳酸酯和/或聚酐；(22)填充剂，例如多肽和氨基酸；(23)血清组分，例如血清白蛋白、HDL和LDL；(22)C2至C12醇，例如乙醇；以及(23)药物制剂中采用的其他无毒相容性物质。制剂中还可存在润湿剂、着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂、加香剂(perfumingagent)、防腐剂和抗氧化剂。例如“赋形剂”、“载体”、“可药用载体”等的术语在本文中可互换使用。

在一些实施方案中，在组合物中包含本公开内容的抗炎剂的组合物通过注射、通过导管、通过栓剂或通过植入物来施用，所述植入物是多孔的、非多孔的或胶质材料，包括膜，例如硅橡胶膜或纤维。通常来说，当施用该组合物时，使用包含本公开内容的抗炎剂的组合物不吸收的材料。

在其他实施方案中，包含降脂质剂和/或抗炎剂的组合物在控释系统中递送。在一个实施方案中，可使用泵(参见，例如，Langer，1990，Science 249：1527-1533；Sefton，1989，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：201；Buchwald et al.，1980，Surgery 88：507；Saudek et al.，1989，N.Engl.J.Med.321：574)。在另一个实施方案中，可使用聚合物材料。(参见，例如，Medical Applications of Controlled Release(Langer and Wise eds.，CRC Press，Boca Raton，Fla.，1974)；Controlled Drug Bioavailability，Drug ProductDesign and Performance(Smolen and Ball eds.，Wiley，New York，1984)；Ranger andPeppas，1983，Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23：61。还参见Levy et al.，1985，Science 228：190；During et al.，1989，Ann.Neurol.25：351；Howard et al.，1989，J.Neurosurg.71：105。)其他控释系统例如在上文的Langer中讨论。

在一些实施方案中，根据常规程序将药物组合物配制成适用于向对象(例如，人)静脉内或皮下施用的药物组合物。通常来说，用于通过注射施用的组合物是在无菌等张水缓冲液中的溶液。必要时，药物还可包含增溶剂和用于减轻注射部位疼痛的局部麻醉剂，例如利多卡因。通常，成分以单位剂型分开提供或混合在一起提供，例如，作为在指示活性剂的量的密封容器(例如安瓿或药袋(sachette))中的干燥的冻干粉末或无水浓缩物提供。在通过输注施用药物的情况下，可用含有无菌药物级水或盐水的输注瓶分配药物。在通过注射施用药物的情况下，可提供注射用无菌水或盐水的安瓿，以便在施用之前可将成分混合。

用于全身性施用的药物组合物可以是液体，例如无菌盐水，乳酸盐林格液或汉克氏液。此外，药物组合物可以是固体形式，并且在使用前立即重新溶解或悬浮。还考虑了冻干形式。

药物组合物可包含在脂质颗粒或囊泡(vesicle)中，例如脂质体或微晶，其也适用于肠胃外施用。颗粒可具有任何合适的结构，例如单层或多层，只要其中包含组合物即可。可将包含降脂质剂和/或抗炎剂的组合物包埋在包含融合脂质二油酰基磷脂酰乙醇胺(dioleoylphosphatidylethanolamine，DOPE)、低水平(5至10mol％)阳离子脂质的“稳定质粒-脂质颗粒”(stabilized plasmid-lipid particle，SPLP)中，并通过聚乙二醇(PEG)包衣来稳定(Zhang Y.P.et al.，Gene Ther.1999，6：1438-47)。带正电荷的脂质，例如N-[1-(2，3-二油酰基氧基)丙基]-N，N，N-三甲基-铵甲基硫酸盐或“DOTAP”对于这样的颗粒和囊泡是特别优选的。这样的脂质颗粒的制备是公知的。参见，例如，美国专利No.4,880,635、4,906,477、4,911,928、4,917,951、4,920,016和4,921,757。

例如，本公开内容的药物组合物可作为单位剂量施用或包装。当参照本公开内容的药物组合物使用时，术语“单位剂量”是指对对象来说适合作为单一剂量的物理上离散的单位，每个单位包含经计算产生与所需稀释剂(即，载体或载剂)相关联的期望治疗效果的预定量的活性物质。

在一些实施方案中，药物组合物可作为药物试剂盒提供，其包含(a)容器，该容器包含含有冻干形式的本公开内容的抗炎剂的组合物，和(b)第二容器，其包含用于注射的可药用稀释剂(例如，无菌水)。可药用稀释剂可用于重构或稀释冻干的本公开内容组合物。与这样的容器任选地相关联的可以是以管理药物或生物制品的制造、使用或销售的政府机构规定的形式的通知，该通知反映了该制造、使用或销售机构对人施用的认可。

在一些实施方案中，包括了包含可用于治疗上述疾病的材料的制造品。在一些实施方案中，该制造品包含容器和标签。合适的容器包括例如瓶、小瓶(vial)、注射器和试管。容器可由多种材料(例如玻璃或塑料)形成。在一些实施方案中，容器装有对于治疗本文中描述的疾病有效的组合物，并且可具有无菌接入口。例如，容器可以是静脉溶液袋或具有可被皮下注射针刺穿的塞子的小瓶。组合物中的活性剂是降脂质剂和/或抗炎剂。在一些实施方案中，容器上或与容器相关联的标签表明该组合物可用于治疗选择的疾病。该制造品还可包含第二容器，其包含可药用缓冲液，例如磷酸盐缓冲盐水、林格液或右旋糖溶液。其还可包括从商业和使用者的立场而言理想的其他材料，包括其他缓冲液、稀释剂、滤器、针头、注射器和具有使用说明的包装插页。

本公开内容的另一些方面提供了在接受过或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中预测心血管疾病复发率的方法，该方法包括在对象中测量C反应蛋白(CRP)的术平，并且如果CRP水平高于预定值，则确定对象可能复发心血管疾病。

在一些实施方案中，对象(例如，人对象)已经具有原发性(第一)心血管事件，例如如心肌梗死，或者已经进行了血管成形术。已经具有原发性心血管事件的对象(例如，人对象)处于继发性(第二)心血管事件的升高的风险中。在一些实施方案中，对象(例如，人对象)未曾具有原发性心血管事件，但是由于该对象(例如，人对象)具有一种或更多种具有心血管事件的风险因素而处在具有心血管事件的风险中。原发性心血管事件的风险因素的一些实例包括：高脂血症、肥胖症、糖尿病、高血压、高血压前期、全身性炎症标志物水平升高、年龄、心血管事件的家族史和吸烟。心血管事件的风险程度取决于对象(例如，人对象)具有的风险因素的集(multitude)和严重性或量值。基于风险因素的存在和严重性，风险图和预测算法可用于评估对象(例如，人对象)中心血管事件的风险。一个这样的实例是弗雷明汉心脏研究(Framingham Heart Study)风险预测得分。如果对象(例如，人对象)的10年经计算的弗雷明汉心脏研究风险得分大于5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％或20％，则该对象处于具有心血管事件的升高的风险中。在一些实施方案中，与健康对象相比，患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象具有升高的CRP水平。在对象(例如，人对象)中评估心血管事件的风险的另一些方法包括冠状钙扫描、心脏磁共振成像和/或磁共振血管造影术。

“心血管疾病的复发率”是指对象在接受使用降脂质剂(例如，他汀类和/或PCSK9抑制剂)的治疗之后经历未来的心血管疾病的可能性。在一些实施方案中，对象已经被诊断出患有心血管疾病并且已经接受使用降脂质剂的治疗或正在经受使用降脂质剂的治疗。在一些实施方案中，对象已经被诊断出处于发生心血管疾病的风险中并且已经接受使用降脂质剂的治疗或正在经受使用降脂质剂的治疗。在一些实施方案中，对象还接受其他治疗剂以治疗或降低心血管事件的风险(例如，本文中描述的任何治疗性方法)。在一些实施方案中，治疗也可以是非药物治疗，例如饮食和/或运动。

在一些实施方案中，对象接受使用降脂质剂的治疗持续至少2周、至少3周、至少4周、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月或更久。

“预定值”可采用多种形式。其可以是单个截止值，例如中位数或均值。其可基于比较组来建立，例如，一个限定组中的风险是另一个限定组中的风险的两倍。其可以是一个范围，例如，在该范围中受测群体被均等(或不均等)地分成组，例如低风险组、中风险组和高风险组；或分成四分位组，最低四分位组是具有最低风险的个体，而最高四分位组是具有最高风险的个体；或分成三分位组(tertile)，最低三分位组是具有最低风险的个体，而最高三分位组是具有最高风险的个体。

预定值可取决于所选择的对象(例如，人对象)的特定群体。例如，与已经具有先前心血管事件的对象(例如，人对象)的群体相比，显然健康的群体具有不同的全身性炎症标志物的“正常”范围。因此，选择的预定值可考虑对象(例如，人对象)所落入的类别。本领域普通技术人员仅通过常规实验就可选择适当的范围和类别。

在一些实施方案中，该方法还包括测量脂质的水平，例如如胆固醇的水平或胆固醇级分(例如LDLC)的水平，以表征对象(例如，人对象)发生未来心血管事件的风险。获得了对象(例如，人对象)中全身性炎症标志物的水平。将标志物的水平与预定值进行比较以建立第一风险值。还获得了对象(例如，人对象)中脂质的水平。将对象(例如，人对象)中脂质的水平与第二预定值进行比较以建立第二风险值。然后基于第一风险值与第二风险值的组合来表征对象(例如，人对象)发生心血管事件的风险谱，其中第一风险值与第二风险值的组合建立了不同于第一和第二风险值的第三风险值。在一些实施方案中，第三风险值大于第一风险值和第二风险值中的任一个。心血管事件可以是例如以上所述的任何心血管事件。

如本领域已知的，胆固醇是重要的正常体内成分，用于细胞膜的结构、胆汁酸的合成和类固醇激素的合成。由于胆固醇是水不溶性的，因此多数血清胆固醇由脂蛋白(乳糜微粒、VLDL-C、LDL-C和HDL-C)携带。血液中过量的胆固醇已与心血管事件相关。LDL有时被称为“坏”胆固醇，因为LDL升高的水平与心血管事件(例如冠心病)最直接相关。HDL有时被称为“好”胆固醇，因为HDL的高水平与心血管事件(例如冠心病)降低的风险相关。术语胆固醇意指“总”胆固醇，即VLDL-C+LDL-C+HDL-C胆固醇。

在一些实施方案中，在患者接受使用降脂质剂的治疗之后测量胆固醇水平。胆固醇测量值通常以毫克每分升(mg/dL)来报告。通常来说，总胆固醇越高，对象(例如，人对象)处于心血管事件的风险越高。总胆固醇的值小于200mg/dL是“期望的”水平，并且将对象(例如，人对象)置于心血管事件较低风险的组中。例如，超过240mg/dL的水平可使对象(例如，人对象)处于与具有低于200mg/dL水平的某些对象相比几乎两倍的心血管事件(例如冠心病)的风险中。

在一些实施方案中，LDL-C水平是心血管事件风险的预测因素之一。通常来说，LDLC越高，对象(例如，人对象)处于心血管事件的风险越高。超过160mg/dL的LDLC水平可使对象(例如，人对象)处于与具有低于160mg/dL水平的某些对象相比更高的心血管事件的风险中。在具有一种或更多种对于未来心血管事件的风险因素的对象(例如，人对象)中超过130mg/dL的LDLC水平可使对象(例如，人对象)处于与具有低于130mg/dL水平的某些对象相比更高的心血管事件的风险中。LDLC水平低于100mg/dL在已经具有先前心血管事件以及正在接受治疗以降低未来心血管事件的风险的对象(例如，人对象)中是理想的，并且将对象(例如，人对象)置于心血管事件较低风险的组中。在这样的对象(例如，人对象)中，LDL-C水平低于70mg/dL是甚至更理想的用于降低未来心血管事件的风险。

在一些实施方案中，已经接受或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象具有健康的脂质(例如，LDL-C或总胆固醇)水平。在一些实施方案中，已经接受或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象具有健康的脂质(例如，LDL-C或总胆固醇)水平。如本文中所述，如果对象具有高于预定值的CRP水平，则已经接受或正在经受使用降脂质剂的治疗并且具有健康的脂质水平的对象仍可处于再次经历心血管事件的风险中(即，具有心血管疾病的高复发率)。如果脂质水平和CRP水平二者均低于预定的健康水平，则可确定该对象具有心血管疾病的低复发率。

对象中的CRP水平可通过CRP血液测试来确定。现今，在临床实践中广泛使用用于测量血液(尤其是血清样品)中CRP水平以及解释这样的测试结果的测试和方法。由于CRP是在炎症期间在肝中合成并释放到血流中的一种急性期蛋白，因此在没有严重炎症(例如，感染引起的炎症)的对象中，其水平可能较低。因此，在一些实施方案中，为了评估心血管疾病的风险，通过能够检测低水平的CRP(例如，健康对象中的CRP)的高敏感性方法(hsCRP)来测量CRP水平。

在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约3mg/L血液(即，来自对象(例如，人对象)的血液样品)。在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约2mg/L血液。在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约1.75mg/L血液。在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约1.50mg/L血液。在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约1.25mg/L血液。在一些实施方案中，CRP水平的预定值是约1mg/L血液。当采用范围时，在一些实施方案中，CRP水平的预定值低于约1至3mg/L(例如1至3、2至3、1至3mg/L)血液，并且另一个范围是高于约3mg/L血液。

如果已经接受或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象具有高于预定水平的CRP水平，则确定该对象具有心血管疾病的高复发率。本公开内容的另一些方面提供了在已经接受或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中降低心血管疾病的复发率的方法，该方法包括向对象施用有效量的抗炎剂。

术语“治疗”是指治疗性和预防性治疗二者。如果对象需要治疗心血管疾病，则“治疗病症”是指改善、降低或消除与心血管疾病相关的一种或更多种症状，或者改善、降低或消除心血管疾病的严重性，或者阻止心血管疾病的任何进一步进展。如果需要治疗的对象是处于患有心血管疾病的风险中的对象，则治疗对象是指降低该对象患有心血管疾病的风险或预防该对象发生心血管疾病。

“对象”将意指人或脊椎动物或哺乳动物，包括但不限于啮齿动物(例如，大鼠或小鼠)、狗、猫、马、牛、猪、绵羊、山羊、火鸡、鸡和灵长类(例如，猴)。本公开内容的方法可用于治疗有此需要的对象。有此需要的对象可以是患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中的对象。

本文中所述的药剂(例如，抗炎剂、降脂质剂和/或双特异性抗体)可以以药物组合物配制用于向对象施用。可根据本公开内容使用的药物组合物可直接施用于对象或可以以治疗有效量施用于有此需要的对象。术语“治疗有效量”是指必需或足够实现期望的生物学作用的量。例如，包含与本公开内容相关的降脂质剂和/或抗炎剂的组合物的治疗有效量可以是足以改善疾病或病症的一种或更多种症状的该量。与本文中提供的教导结合，通过在多种活性化合物中选择和对因素(例如效价、相对生物利用度、患者体重、不良副作用的严重性和优选的施用方式)进行加权，可规划出有效的预防性或治疗性治疗方案，其不引起显著的毒性并且还对治疗特定的对象是完全有效的。用于任何特定应用的有效量可根据例如以下因素而变化：所治疗的疾病或病症、所施用的特定药物组合物、对象的尺寸、或者疾病或病症的严重性。本领域普通技术人员可凭经验确定与本公开内容相关的特定治疗性化合物的有效量，而无需进行过度的实验。

用于递送的包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂的组合物的对象剂量通常为每次施用约0.1μg至10mg，这取决于应用可按天、按周或按月以及在其间的任何其他时间量进行给予。在一些实施方案中，在关键的巩固或再巩固期间施用单一剂量。用于这些目的的剂量范围可以是每次施用约10μg至5mg，并且最通常是约100μg至1mg，伴有2至4次施用间隔例如几天或几周或更长时间。然而，在一些实施方案中，用于这些目的的肠胃外剂量可以以比上述典型剂量高5至10，000倍的范围使用。

在一些实施方案中，将包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂或者双特异性抗体的组合物以约1至10mg/kg哺乳动物体重的剂量施用。在另一些实施方案中，将包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂或者双特异性抗体的组合物以约0.001至1mg/kg哺乳动物体重的剂量施用。在另一些实施方案中，将包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂或者双特异性抗体的组合物以约10至100ng/kg、100至500ng/kg、500ng/kg至1mg/kg、或1至5mg/kg哺乳动物体重，或其中的任何单个剂量的剂量施用。

本公开内容的制剂以可药用溶液施用，其可常规地包含可药用浓度的盐、缓冲剂、防腐剂、相容性载体和任选的其他治疗成分。

对于治疗的用途，可通过将包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂或者双特异性抗体的组合物递送至期望位置的任何方式(例如，黏膜、注射、全身性)向对象施用有效量的该组合物。施用本公开内容的药物组合物可通过技术人员已知的任何方式来完成。在一些实施方案中，包含本文中所述的降脂质剂和/或抗炎剂或者双特异性抗体的组合物皮下、皮内、静脉内、肌内、关节内、动脉内、滑膜内(intrasynovially)、胸骨内(intrasternally)、鞘内、病变内或颅内施用。

对于经口施用，可通过将一种或更多种活性化合物与本领域公知的可药用载体组合来容易地配制组合物。这样的载体能够使本公开内容的化合物被配制成片剂、丸剂、糖衣丸剂、胶囊剂、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂等，以供待治疗的对象经口摄入。用于经口使用的药物制剂可以以固体赋形剂的形式获得，如果期望的话，在添加合适的辅料(auxiliary)之后，任选地研磨所得混合物并加工颗粒混合物以获得片剂或糖衣丸芯。合适的赋形剂特别是填充剂，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纤维素制剂，例如如玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone，PVP)。如果期望的话，可添加崩解剂，例如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或者藻酸或其盐(例如藻酸钠)。任选地，经口制剂也可在盐水或缓冲液(即，用于中和内部酸条件的EDTA)中配制，或者可在没有任何载体的情况下施用。

还具体考虑了上述一种或更多种组分的经口剂型。可对一种或更多种组分进行化学修饰，使得该衍生物的经口递送是有效力的。通常，考虑的化学修饰是组分分子本身的至少一个部分的连接，其中所述部分允许(a)抑制蛋白酶解；和(b)从胃或肠摄入到血流中。还期望增加一种或更多种组分的整体稳定性并增加体内循环时间。这样的部分的一些实例包括：聚乙二醇、乙二醇和丙二醇的共聚物、羧甲基纤维素、右旋糖酐、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、以及聚脯氨酸(Abuchowski and Davis，1981，″Soluble Polymer-Enzyme Adducts″In：Enzymes as Drugs，Hocenberg and Roberts，eds.，Wiley-Interscience，New York，NY，pp.367-383、Newmark，et al.，1982，J.Appl.Biochem.4：185-189)。可使用的另一些聚合物是聚-1，3-二氧戊环和聚1，3，6-tioxocane。如上表明，优选用于药物用途的是聚乙二醇部分。

释放的位置可以是胃、小肠(十二指肠、空肠或回肠)或大肠。本领域的技术人员可获得不会在胃中溶解但会在十二指肠或肠中的其他地方释放材料的制剂。优选地，释放将通过治疗剂的保护或通过在胃环境外(例如在肠中)释放生物学活性物质来避免胃环境的有害影响。

为了确保完全的胃抗性，优选至少在pH 5.0下不可渗透的包衣。用作肠溶包衣的较常见惰性成分的一些实例是乙酸纤维素偏苯三酸酯(cellulose acetatetrimellitate，CAT)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(hydroxypropylmethylcellulosephthalate，HPMCP)、HPMCP 50、HPMCP 55、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯(polyvinyl acetatephthalate，PVAP)、Eudragit L30D、Aquateric、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯(celluloseacetate phthalate，CAP)、Eudragit L、Eudragit S和紫胶(Shellac)。这些包衣可用作混合膜。

也可在片剂上使用包衣或包衣混合物，其并非旨在针对胃提供保护。这可包括糖包衣或使片剂更容易吞咽的包衣。胶囊剂可由用于递送干的治疗剂(即粉末)的硬壳(例如明胶)组成；对于液体形式，可使用软明胶壳。扁囊剂(cachet)的壳材料可以是厚的淀粉纸或其他可食用的纸。对于丸剂、锭剂、模制片剂或片剂研磨物(tablet triturate)，可使用湿聚集(moist massing)技术。

在一些实施方案中，组合物可作为细碎多颗粒以约1mm粒度的颗粒剂或丸剂(pellet)的形式包含在制剂中。用于胶囊剂施用的材料的制剂也可以是粉末剂、轻微压缩的可咀嚼物(lightly compressed plug)或甚至是片剂。治疗剂可通过压缩来制备。

着色剂和矫味剂可均包含在内。例如，降脂质剂和/或抗炎剂可被配制(例如通过脂质体或微球包封)并随后进一步包含在可食用产品中，例如含有着色剂和矫味剂的冷藏饮料中。

可用惰性材料稀释治疗剂或提高治疗剂的体积。这些稀释剂可包括碳水化合物，尤其是甘露醇、乳糖、无水乳糖、纤维素、蔗糖、改性右旋糖酐和淀粉。某些无机盐也可用作填充剂，包括三磷酸钙、碳酸镁和氯化钠。一些市售稀释剂是Fast-Flo、Emdex、STA-Rx1500、Emcompress和Avicell。

崩解剂可包含在将治疗剂配制成固体剂型中。用作崩解剂的材料包括但不限于淀粉，包括基于淀粉的商业崩解剂Explotab。羟基乙酸淀粉钠、安伯来特(Amberlite)、羧甲基纤维素钠、超支链淀粉(ultramylopectin)、藻酸钠、明胶、橘皮、酸性羧甲基纤维素、天然海绵和膨润土均可被使用。崩解剂的另一种形式是不溶性阳离子交换树脂。粉末胶(powderedgum)可用作崩解剂和黏合剂，并且这些可包括粉末胶，例如琼脂、刺梧桐胶或西黄蓍胶。藻酸及其钠盐也可用作崩解剂。

黏合剂可用于将治疗剂保持在一起以形成硬片剂，并且包括来自天然产物的材料，例如阿拉伯胶、西黄蓍胶、淀粉和明胶。另一些包括甲基纤维素(methyl cellulose，MC)、乙基纤维素(ethyl cellulose，EC)和羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose，CMC)。聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和羟丙基甲基纤维素(hydroxypropylmethyl cellulose，HPMC)二者均可在醇溶液中用于使治疗剂粒化。

抗摩擦剂可包含在治疗剂的制剂中，以阻止在制剂过程中黏冲。润滑剂可用作治疗剂和模圈壁之间的层，并且这些可包括但不限于：硬脂酸(包括其镁盐和钙盐)、聚四氟乙烯(polytetrafluoroethylene，PTFE)、液体石蜡、植物油和蜡。也可使用可溶性润滑剂，例如十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁、多种分子量的聚乙二醇、Carbowax 4000和6000。

可添加在配制期间可改善药物流动性质并在压缩期间帮助重排的助流剂。助流剂可包括淀粉、滑石、致热二氧化硅和水合硅铝酸盐。

为了帮助降脂质剂和/或抗炎剂溶解到水性环境中，可添加表面活性剂作为润湿剂。表面活性剂可包含阴离子洗涤剂，例如十二烷基硫酸钠、二辛基钠磺基琥珀酸盐和二辛基钠磺酸盐。可使用阳离子洗涤剂，并且其可包含苯扎氯铵或苄索氯铵。可包含在制剂中作为表面活性剂的潜在非离子型洗涤剂的列表为：聚桂醇400；聚氧乙烯40硬脂酸酯(polyoxyl 40 stearate)；聚氧乙烯氢化蓖麻油(polyoxyethylene hydrogenated castoroil)10、50和60；单硬脂酸甘油酯；聚山梨酸酯40、60、65和80；蔗糖脂肪酸酯；甲基纤维素和羧甲基纤维素。这些表面活性剂可单独或作为混合物以不同比例存在于治疗剂制剂中。

可经口使用的药物制剂包含由明胶制成的推入配合胶囊(push fit capsule)，以及由明胶和增塑剂(例如甘油或山梨糖醇)制成的软密封胶囊。推入配合胶囊可包含活性成分与填充剂(例如乳糖)、黏合剂(例如淀粉)和/或润滑剂(例如滑石或硬脂酸镁)以及任选的稳定剂的混合。在软胶囊中，可将活性化合物溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可添加稳定剂。也可使用配制用于经口施用的微球。这样的微球在本领域中已被很好地定义。所有用于经口施用的制剂应是以适合于这样的施用的剂量。

对于经颊施用，组合物可采用以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。

对于通过吸入施用，根据本公开内容使用的化合物可伴有使用合适的抛射剂(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体)从加压包装或喷雾器以气雾剂喷射呈现的形式方便的递送。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可通过提供阀门以递送计量的量来确定。用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(cartridge)(例如，明胶的)可配制为包含化合物与合适的粉末基质(例如乳糖或淀粉)的粉末混合物。

当期望全身性地递送本公开内容的药物组合物时，可将其配制成用于通过注射(例如，通过推注注射或持续输注)进行肠胃外施用。用于注射的制剂可以在添加防腐剂的情况下以单位剂型的形式存在(例如在安瓿中或在多剂量容器中)。组合物可采取例如在油性或水性载剂中的混悬剂、溶液剂或乳剂的形式，并且可包含配制剂，例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。

用于肠胃外施用的药物制剂包含水溶性形式的活性化合物的水性溶液。此外，可将活性化合物的混悬剂制备为合适的油性注射混悬剂。合适的亲脂性溶剂或载剂包含脂肪油(例如芝麻油)、或合成脂肪酸酯(例如油酸乙酯或甘油三酯)、或脂质体。水性注射混悬剂可包含提高混悬剂黏度的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或右旋糖酐。任选地，混悬剂还可包含合适的稳定剂或提高化合物的溶解性以允许制剂的高浓缩溶液的药剂。

除前述制剂之外，还可将组合物配制成储存制剂(depot preparation)。这样的长效制剂可使用合适的聚合物或疏水性材料(例如作为可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂来配制，或配制为微溶性衍生物(例如略溶性盐)。

药物组合物还可包含合适的固相或凝胶相载体或赋形剂。这样的载体或赋形剂的一些实例包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、多种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物(例如聚乙二醇)。

合适的液体或固体药物制剂形式为，例如，用于吸入的水性或盐溶液；微囊化、encochleated、包衣于微观金颗粒(microscopic gold particle)上的、包含在脂质体中的、雾化的(nebulized)气雾剂；用于植入到皮肤中的、或干燥至尖锐物体上以被划进皮肤中的丸剂。药物组合物还包括颗粒剂、散剂、片剂、包衣片剂、(微)胶囊剂、栓剂、糖浆剂、乳剂、混悬剂、乳膏剂、滴剂或具有活性化合物延长性释放的制剂，在其制剂中，习惯上使用上述赋形剂和添加剂和/或助剂，例如崩解剂、黏合剂、包衣剂、溶胀剂、润滑剂、矫味剂、甜味剂或增溶剂。药物组合物适用于多种药物递送系统。对于药物递送方法的简要综述，参见Langer，Science 249：1527-1533，1990，其通过引用并入本文。

本公开内容的药物组合物和任选地其他治疗剂可以本身(纯的(neat))或以可药用的盐的形式施用。当在药物中使用时，盐应是可药用的，但可方便地使用非可药用的盐以制备其可药用盐。这样的盐包括但不限于由以下酸制备的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、马来酸、乙酸、水杨酸、对甲苯磺酸、酒石酸、柠檬酸、甲烷磺酸、甲酸、丙二酸、琥珀酸、萘-2-磺酸和苯磺酸。同样，这样的盐可制备为碱金属盐或碱土金属盐，例如羧酸基团的钠盐、钾盐或钙盐。

合适的缓冲剂包含：乙酸和盐(1％至2％w/v)；柠檬酸和盐(1％至3％w/v)；硼酸和盐(0.5％至2.5％w/v)；以及磷酸和盐(0.8％至2％w/v)。合适的防腐剂包含苯扎氯铵(0.003％至0.03％w/v)；氯丁醇(0.3％至0.9％w/v)；对羟基苯甲酸酯(0.01％至0.25％w/v)和硫柳汞(0.004％至0.02％w/v)。

本公开内容的对象患有心血管疾病或处于发生心血管疾病的风险中。“心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)”是涉及心脏或血管的一类疾病。心血管疾病的一些非限制性实例包括：冠状动脉疾病(coronary artery disease，CAD)，例如心绞痛和心肌梗死(通常称为心脏病发作)、卒中、心力衰竭、高血压心脏病、风湿性心脏病、心肌病、心律不齐、先天性心脏病、瓣膜性心脏病、心脏炎(carditis)、主动脉瘤、外周动脉病(peripheralartery disease)、血栓栓塞病、静脉血栓形成、急性冠脉综合征、心肌缺血、慢性稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、冠状动脉再狭窄、冠状动脉支架再狭窄、冠状动脉支架血栓再形成、血运重建、血管成形术、短暂性脑缺血发作、肺栓塞、血管阻塞和心血管死亡。

冠状动脉疾病(CAD)，也称为缺血性心脏病(ischemic heart disease，IHD)，是一组包括以下的疾病：稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死和心脏性猝死。CAD的风险因素包括：高血压、吸烟、糖尿病、缺乏运动、肥胖、高血胆固醇、不良饮食、以及过量饮酒、和/或抑郁。潜在的机制涉及由于心脏动脉的动脉粥样硬化导致的血流和氧气降低。

心肌梗死(myocardial infarction，MI)，通常称为心脏病发作，发生在当向心脏的一部分的血流降低或停止时，导致对心肌的损害。MI的风险因素包括高血压、吸烟、糖尿病、缺乏运动、肥胖、高血胆固醇、不良饮食和过量饮酒。

心肌缺血发生在当向您心脏的血流降低时，从而阻止其接受足够的氧气。降低的血流通常是您心脏动脉(冠状动脉)的部分或完全堵塞的结果。

心绞痛是针对由冠心病引起的胸痛或不适的医学术语。其发生在当心肌没有得到所需的血液时。这通常是由于一条或更多条心脏动脉变窄或受阻(也称为缺血)而发生的。不稳定型心绞痛(unstable angina，UA)是一类不规律的(irregular)心绞痛。

卒中是一种医学疾病，其中流向大脑的血液不足导致了细胞死亡。卒中有两种主要类型：缺血型(由血流的缺乏引起)和出血型(由出血引起)。卒中的风险因素包括高血压、吸烟、肥胖、高血胆固醇、糖尿病、先前的TIA和心房颤动。急性冠脉综合征是用于描述与进入心脏的突然降低的血流相关的一系列病症的术语。短暂性脑缺血发作(transientischemic attack，TIA)像卒中一样产生类似的症状，但通常仅持续几分钟，不造成永久性损害。

心力衰竭(heart failure，HF)通常称为充血性心力衰竭，发生在心脏不能充分泵送以维持血流来满足身体需要的情况下。心力衰竭的常见原因包括冠状动脉疾病，包括先前的心肌梗死(心脏病发作)、高血压、心房颤动、瓣膜性心脏病、过量饮酒、感染和未知原因的心肌病。

风湿性心脏病是风湿热的并发症，其中心脏瓣膜受损。风湿热(rheumatic fever，RF)是可涉及心脏、关节、皮肤和脑的炎性疾病。

心肌病是一组影响心肌的疾病。心肌病的类型包括肥厚型心肌病、扩张型心肌病、限制型心肌病、心律失常性右心室发育不全和心碎综合征。扩张型心肌病可由酒精、重金属、冠心病、可卡因的使用和病毒感染造成。限制性心肌病可由淀粉样变(amyloidosis)、血色素沉着病和一些癌症治疗引起。

外周动脉病(peripheral artery disease，PAD)是除供应心脏或脑的动脉以外的动脉狭窄。PAD的风险因素包括吸烟、糖尿病、高血压和高血胆固醇。潜在的机制通常是动脉粥样硬化。

先天性心脏缺损(congenital heart defect，CHD)，也称为先天性心脏异常或先天性心脏病，是出生时就存在的心脏结构问题。瓣膜性心脏病是涉及心脏四个瓣膜(左侧的主动脉瓣和二尖瓣以及右侧的肺动脉瓣和三尖瓣)中的一个或更多个的任何疾病过程。心脏炎是心脏或其周围环境的炎症。主动脉瘤是主动脉扩大(扩张)至正常尺寸的1.5倍以上。

血栓形成是血管内血块的形成，阻碍了血液通过循环系统的流动。静脉血栓是在静脉内形成的血块(血栓)。肺栓塞是肺中通常由血块引起的主要血管(动脉)的突然堵塞。血管阻塞是通常具有血块的血管的堵塞。其与血栓形成的不同之处在于，血管阻塞可用于描述任何形式的堵塞，而不仅是由血块(clot)形成的堵塞。当血管阻塞发生在主静脉中时，在一些情况下其会引起深静脉血栓形成。

冠状动脉再狭窄是狭窄(血管的狭窄)的复发，导致血流受限。冠状动脉支架再狭窄发生在当植入支架并在支架内部发生再狭窄时。冠状动脉支架血栓再形成发生在当植入支架并在支架内部发生血栓形成时。

血运重建是对遭受缺血的身体部位或器官的灌注恢复。其通常通过外科手术手段来完成。血管旁路术和血管成形术是血运重建的两种主要手段。

通过参考以下实施例来举例说明但不限制本公开内容。

实施例

尽管积极使用他汀类治疗，但有残留炎性风险的患者由于持续升高的高敏感性C反应蛋白(hsCRP)水平而具有高的心血管事件复发率。^1-7这样的患者通常被限定为采用他汀类治疗的具有hsCRP≥2mg/L且LDL胆固醇＜70mg/dl的患者，⁸其占同时期实践中患者的近30％，并且就常见程度而言是那些有残留胆固醇风险(限定为LDL水平≥70mg/dL且hsCRP＜2mg/L)的患者的两倍。⁹最近，卡那单抗抗炎性血栓形成结果研究(Canakinumab Anti-inflammatory Thrombosis Outcomes Study，CANTOS)表明，使用卡那单抗的IL-1β抑制显著降低hsCRP和心血管事件二者，¹⁰数据提供了对于具有残留胆固醇风险的患者的首个特异性治疗。确实，尽管LDL胆固醇没有变化，但CANTOS中风险降低的量值实际上与FOURIER和SPIRE蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶-kexin 9型(PCSK9)试验中所达到的相同。^11，12重要的是，FOURIER中1年和2年随访的绝对事件率为5.3％和9.1％，这告诉我们达到非常低LDL-C水平的许多患者将继续经历血管事件。在另外接受PCSK9抑制的他汀类治疗的患者中，残留炎性风险是否仍然是重要的临床问题是未知的。该问题在本文所述的最近完成的SPIRE-1和SPIRE2试验中得到了解决。

方法

研究群体和程序

SPIRE博科昔单抗开发计划由两个部分组成：六项SPIRE降脂质研究以及SPIRE-1和SPIRE-2事件驱动的心血管试验。先前已发表了SPIRE-1和SPIRE-2的设计和主要发现。^12，13两项试验实际上相同的设计使其根据一个综合的统计分析计划进行组合。简而言之，如果患者有先前心血管事件(二级预防群组)或者有糖尿病、慢性肾脏病、或具有另外的心血管风险状况的外周血管疾病的病史，或者有家族性高胆固醇血症(高风险一级预防群组)的病史，则符合登记的条件。要求所有患者均接受至少4周的稳定的他汀类治疗(阿托伐他汀≥40mg/天、瑞舒伐他汀≥20mg/天或辛伐他汀≥40mg/天)，除非他们不能在没有副作用的情况下采用这些剂量并且因此在更低强度的他汀类治疗，或者具有完全的他汀类不耐受(仅适用于SPIRE-2)。要求患者在SPIRE-1中直接测量的LDL-C水平为至少70mg/dL，以及在SPIRE-2中为＞100mg/dL。根据加入时非HDL胆固醇水平(对于SPIRE-1，≥100mg/dL以及对于SPIRE-2，≥130mg/dL)，患者也符合条件。以双盲方式，将患者按1∶1的比例进行随机化，用每2周经皮下140mg博科昔单抗的处理或用匹配的安慰剂处理。SPIRE计划由辉瑞(Pfizer)赞助。

当前分析的研究群体包括接受他汀类治疗的患者的亚组，其被分配有活性博科昔单抗并具有可获得的基线和可获得的14周hsCRP以供分析(n＝9,738)。所有患者均提供书面知情同意书。各个中心的伦理委员会均批准了该协议。

终点

两项试验的预先规定的主要终点是已判决和确诊的非致命性心肌梗死、非致命性卒中、需紧急血运重建的不稳定型心绞痛的住院、或心血管死亡的综合。作为这些终点的成分的所有伴随的事件均由委员会裁决，该委员会的成员不了解治疗任务。

统计分析

在随机分配至积极治疗部门(active treatment arm)的13,675例患者中，12,711例(93.0％)接受他汀类治疗，并且9,738例(71.2％)在14周的时间点还具有可获得的hsCRP_OT水平。随机分配至安慰剂的接受他汀类治疗并具有随访生物标志物水平的相应的患者部分为9,785名(71.6％)。

然后将研究群体限制在分配至博科昔单抗的个体中，并根据hsCRP_OT水平＜1、1至3和＞3mg/dL分为三组，其分别占患者的30.4％、34.8％和34.9％。当使用＜2和≥2mg/dl的切点(cut point)时，这些百分比为52.8％和47.2％。使用对于分类值的百分比和对于连续变量的中位数(四分位距)汇总了根据三个主要hsCRP_OT组的基线特征。对于比例差异使用Cochran-Armitage趋势检验，并且对于中位数差异使用Jonckheere-Terpstra检验来评估在有序hsCRP_OT类别中这些特征的趋势。

为了评价博科昔单抗在脂质水平和hsCRP上的治疗效果，在基线和治疗14周时确定了在治疗水平的中位数。用目的生物标志物作为独立值，使用认为适用于非正态分布的对数变换来构建以基线值为条件的线性混合模型重复测量分析。通过拟合与研究药物分配相应的项来估计平均百分比变化和博科昔单抗治疗效果。然后像之前一样，以基线值为条件，并拟合与hsCRP_OT组相应的项，使用混合模型估计在分配至博科昔单抗的患者中每个hsCRP_OT组中脂质水平的百分比变化。

根据hsCRP_OT组，使用Cox比例风险模型估计风险比(hazard ratio，HR)。呈现了三种经调整的模型，其针对以下进行调整：1)年龄和性别；2)年龄、性别、传统的心血管风险因素(包括当前的吸烟、糖尿病、高血压和体重指数)加登记时他汀类强度(中等强度或高强度)；以及3)模型2变量并加上在治疗LDL-C(LDL_OT)。对于每个模型，在将中位数值分配至每个组之后，进行了对在hsCRP_OT类别中趋势的测试。通过研究(SPIRE-1或SPIRE-2)、区域和筛选LDL-C阈值(＜70或＜100mg/dL)对所有分析进行分层。另外的测试通过使用相互作用项(博科昔单抗×hsCRP_OT组)，根据hsCRP_OT组对博科昔单抗与安慰剂治疗效果的异质性进行了评估。

为了与在第14周测量的在治疗LDL-C的关联进行比较，使用＜30、30至50和＞50mg/dL的类别另外将研究群体分为LDL_OT组(大约的三分位组)，并且使用可比较的Cox模型来估计这些组中每组的经调整的HR。也使用hsCRP的＜或≥2mg/L，和LDL-C的＜或≥40mg/dl的切点。最后，为了检查整个hsCRP_OT范围内的风险关联，使用平滑函数将hsCRP_OT与心血管事件率之间的关系绘制为基于经调整的Cox模型的每个hsCRP_OT水平上的估计事件率的平均数。

结果

通过在治疗hsCRP水平的研究群体

研究群体包含hsCRP_OT＜1mg/L的2958例(30.4％)、hsCRP_OT 1至3mg/L的3385例(34.8％)和hsCRP_OT＞3mg/L的3395例(34.9％)。根据hsCRP_OT的基线特征示于表1中。在较高的hsCRP_OT组的情况下的患者更有可能是女性、肥胖、患有糖尿病或诊断出高血压，并且可能是当前吸烟者，但不太可能患有先前的心血管疾病。在提高的hsCRP组中，数个基线脂质参数也显著不同，包括较高水平的LDL-C、总胆固醇(TC)、非HDL胆固醇(非-HDL-C)、甘油三酯、总：HDL-C比例和载脂蛋白B(apoB)和较低水平的HDL-C。

由于凑整，百分比相加可能不到100％。

博科昔单抗对脂质水平、hsCRP和心血管事件的治疗效果

当与安慰剂相比，博科昔单抗与LDL-C(-60.5％)、TC(-37.6％)、非HDL-C(-54.9％)、TC：HDL-C比例(-41.1％)、apoB(-56.0％)和甘油三酯(-19.9％)的统计学显著性降低以及与HDL-C(+6.4％)的升高相关(表2；所有p＜0.001)。相比之下，对hsCRP没有显著性影响：14周时的平均百分比变化+6.6％(95％CI：-1.0至14.1；p＝0.09；中位数变化0.0％)和52周时的平均百分比变化+6.7％(-9.3至16.9％；p＝0.57；中位数变化0.0％)(n＝3267)。在较高的hsCRP_OT组中，脂质级分的百分比变化在量值上略低(图1)。尽管如此，即使在hsCRP＞3mg/L的那些中，14周时的中位LDL-C_OT为41.7(IQR 25.9，67.0)mg/L。博科昔单抗对hsCRP_OT的治疗效果在量值上相似，并且在hsCRP_OT组之间没有异质性的证据(p相互作用＝0.87)。

与安慰剂组相比，博科昔单抗组从基线到14周时的变化百分比。

根据在治疗hsCRP和在治疗LDL的事件率

总体上，观察到随着在治疗hsCRP水平的提高，主要CVD终点的经调整事件概率单调递增(图2)。hsCRP_OT组的事件率对于hsCRP＜1、1至2和＞3mg/L分别为1.96、2.50和3.59每100人-年(表3)。在针对年龄和性别调整的多变量模型中，CVD的相应HR为1.0(ref)、1.23(95％CI 0.86至1.75)和1.79(95％CI 1.28至2.50)；p趋势＜0.001。在针对传统心血管风险因素和他汀类治疗的基线强度另外调整的模型中，比较最高与最低hsCRP_OT类别(＞3与＜1mg/dL)的HR为1.67(95％CI 1.18至2.37；p＝0.02)。对LDL_OT的进一步调整最小化地减弱这种风险(模型3，表1和图3A)。在针对在治疗TC：HDL-C比例另外调整的模型中，经调整的HR为1.0(ref)、1.13和1.58(p趋势＝0.002)。当检查复合终点的单个成分时，hsCRP_OT类别与非致命性心肌梗死(经调整HR为1.0、0.91、1.46，p趋势＝0.017)、心血管死亡率(经调整HR为1.0、1.60、3.76，p趋势＝0.002)和总死亡率(经调整HR为1.0、1.58、3.45，p趋势＜0.001)显著相关。对于卒中和需紧急冠脉血运重建的不稳定型心绞痛，发现了类似但不显著的趋势。

在根据LDL-C_OT(＜30、30至50、＞50mg/dl)对患者进行分类的平行分析中，在针对模型3协变量和hsCRP_OT而不是LDL-C_OT调整的分析中，主要CVD终点的HR为1.0(ref)、0.87(95％CI0.62至1.22)和1.21(0.87至1.68)，其p趋势＝0.16(图3B和表4)。当使用hsCRP_OT≥2mg/L和LDL-C_OT≥40mg/dl的替代切点时，观察到类似的发现(表5和表6)。

*主要终点为非致命性心肌梗死、非致命性卒中、不稳定型心绞痛的住院

模型1：按年龄和性别调整

模型2：针对基线吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、基线他汀类(中等强度或高强度)另外调整

模型3：针对14周在治疗LDL-C另外调整

所有模型均通过研究(SPIRE-1或SPIRE-2)、区域和筛选LDLc进行分层。

*主要终点为非致命性心肌梗死、非致命性卒中、需紧急血运重建的不稳定型心绞痛的住院、或心血管死亡。

*由于缺失LDL-C_OT排除了76个对象

模型1：按年龄和性别调整

模型2：针对基线吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、基线他汀类(中等强度或高强度)另外调整

模型3：针对在治疗hsCRP_OT另外调整

所有模型均通过研究(SPIRE-1或SPIRE-2)、区域和筛选LDL-c进行分层。

*主要终点为非致命性心肌梗死、非致命性卒中、需紧急血运重建的不稳定型心绞痛的住院、或心血管死亡。

模型1：按年龄和性别调整

模型2：针对基线吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、基线他汀类(中等强度或高强度)另外调整

模型3：针对在治疗LDL-C_OT另外调整(缺失数＝76)

所有模型均通过研究(SPIRE-1或SPIRE-2)、区域和筛选LDL-c进行分层。

*主要终点为非致命性心肌梗死、非致命性卒中、需紧急血运重建的不稳定型心绞痛的住院、或心血管死亡。

*由于缺失LDL-C_OT排除了76个对象

模型1：按年龄和性别调整

模型2：针对基线吸烟、糖尿病、高血压、体重指数、基线他汀类(中等强度或高强度)另外调整

模型3：针对在治疗hsCRP_OT另外调整

所有模型均通过研究(SPIRE-1或SPIRE-2)、区域和筛选LDL-c进行分层。

讨论

在9738名同时用他汀类和LDL-PSCK9抑制治疗的高风险患者的这一群体中，47.2％具有由在治疗hsCRP水平≥2mg/L限定的残留的炎性风险，其中34.9％具有＞3mg/L的值。CRP持续升高的个体往往是那些具有多种风险因素的个体，所述风险因素包括糖尿病、肥胖、高血压和混合性血脂异常，已知与促炎性状态相关(如果不是由促炎性状态驱动的话)的病症。使用博科昔单抗的PCSK9抑制随着时间推移对hsCRP没有影响。尽管特别积极地降低LDL-C，但根据在治疗hsCRP，存在着处于未来血管事件的持续梯度的风险。与没有亚临床炎症证据的那些相比，具有在治疗hsCRP＞3mg/L的那些的未来血管事件的风险提高62％。升高的hsCRP与心肌梗死、以及心血管死亡和全因死亡率的提高率显著相关。

存在广泛的共识，即动脉粥样硬化是脂质聚集和炎症二者的病症。从临床角度看，大量的先前工作发现hsCRP是一级预防和高风险二级预防二者中心血管事件的独立预测因子。此外，在具有残留炎性风险的患者中，随机临床试验已证明他汀类治疗在一级预防中的效力¹⁴以及抗炎性治疗在二级预防中的效力。¹⁰然而，在可用他汀类治疗和PCSK9抑制的组合实现LDL-C的极显著降低后，残余炎症风险是否仍然存在尚不确定。重要的是，在一个心血管医学的越来越多的专业治疗不断涌现的时代，对告知临床医师有关风险分级、药物选择和剂量、治疗响应以及最终的个性化干预的生物标志物的呼吁只会被放大。

在这种背景下，这些数据具有若干重要含义。首先，这些数据表明，尽管PCSK9抑制对导致动脉粥样硬化的脂质有很大影响，但其对hsCRP的血浆衡量没有影响。其次，当前数据表明，尽管LDL氧化与炎症之间存在相互关系，但高强度他汀类治疗与PCSK9抑制的组合不能完全解决动脉粥样硬化的炎症机制。孤立地，事后发现是相关的，并且仍可通过促进亚临床炎症的潜在条件来解释。因此，我们认为用PCSK9抑制与抗炎治疗的组合治疗将提供最佳方法来解决残留的心血管风险。虽然卡那单抗是目前被证明降低心血管事件的唯一抗炎剂，但目前正在进行使用秋水仙碱和低剂量甲氨蝶呤的临床试验。^16，17我们认为抑制上游NLRP3炎性小体和下游IL-6激活的药剂也可用于解决残留心血管风险，目前正在考虑中。

由于中和抗药物抗体的高速率发展，先前停止了SPIRE心血管结局试验。¹⁸虽然博科昔单抗的免疫原性与较不持久的LDL降低相关，但在较长时期的SPIRE-2结局试验中，使用博科昔单抗的治疗与总体上主要心血管事件中21％的相对风险降低相关(95％CI 3％至35％；p＝0.02)，并且与每1mmol/l LDL-C的14％的相对风险降低相关(95％CI 2至25％)。这些数据与在FOURIER试验中观察到的益处完全一致。^12，19因此，认为在上文中呈现的发现不太可能通过降低的博科昔单抗降LDL-C效力来解释，并且可能更广泛地应用于该药物类别。像任何事后分析一样，在上文中呈现的发现可容易造成残余混杂。尤其是，具有持续性炎性风险中的对象更有可能具有心血管风险因素和较高的中位在治疗LDL-C。然而，针对达到的LDL-C水平调整的多变量分析显示出最小的(如果有的话)风险衰减。此外，如基于升高的hsCRP登记的CANTOS所示，该风险组可能从抗炎治疗中受益。

总之，这些同时期随机试验数据表明，在使用他汀类和PCSK9抑制伴随治疗的动脉粥样硬化患者中，升高水平的在治疗hsCRP仍是未来血管风险的重要的预测因子之一。尽管最大程度地降低LDL-C，但残留炎性风险的该证据表明，炎症抑制剂加上降脂质剂的组合可为所有胆固醇水平的心血管风险降低提供另外的机会。

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10.Ridker PM，Everett BM，Thuren T，MacFadyen JG，Chang WH，Ballantyne C，Fonseca F，Nicolau J，Koenig W，Anker SD，Kastelein JJP.Cornel JH，Pais P，Pella D，Genest J，Cifkova R，Lorenzatti A，Forster T，Kobalava Z，Vida-Sirniti L，FlatherM，Shimokawa H，Ogawa H，DellborgM，Rossi PRF，Troquay RPT，Libby P，Glynn RJ andGroup CT.Antiinflammatory Therapy with Canakinumab for AtheroscleroticDisease.N Engl J Med.2017；377：1119-1131.

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12.Ridker PM，Revkin J，Amarenco P，Brunell R，Curto M，Civeira F，FlatherM，Glynn RJ，Gregoire J，Jukema JW，Karpov Y，Kastelein JJP，Koenig W，Lorenzatti A，Manga P，Masiukiewicz U，Miller M，Mosterd A，Murin J，Nicolau JC，Nissen S，Ponikowski P，Santos RD，Schwartz PF，Soran H，White H，Wright RS，Vrablik M，YunisC，Shear CL，Tardif JC and Investigators SCO.Cardiovascular Efficacy and Safetyof Bococizumab in High-Risk Patients.N Engl J Med.2017；376：1527-1539.

13.Ridker PM，Amarenco P，Brunell R，Glynn RJ，Jukema JW，Kastelein JJ，Koenig W，Nissen S，Revkin J，Santos RD，Schwartz PF，Yunis C，Tardif JC，Studies ofPI and the Reduction of vascular Events I.Evaluating bococizumab，a monoclonalantibody to PCSK9，on lipid levels and clinical events in broad patient groupswith and without pror cardiovascular events：Rationale and design of theStudies of PCSK9 Inhibition and the Reduction of vascular Events(SPIRE)LipidLowering and SPIRE Cardiovascular Outcomes Trials.Am Heart J，2016；178：135-44.

14.Ridker PM，Danielson E，Fonseca FA，Genest J，Gotto AM，Jr.，KasteleinJJ，Koenig W，Libby P，Lorenzatti AJ，MacFadyen JG，Nordestgaard BG，Shepherd J，Willerson JT，Glynn RJ and Group JS.Rosuvastatin to prevent vascular events inmen and women with elevated C-reactive protein.N Engl J Med.2008；359：2195-207.

15.Tardif JC and LAllier P.Colchicine Cardiovascular Outcomes Trial(COLCOT).www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02551094?term＝colcat&ran＝1.Accessed on February 9，2017.

16.Everett BM，Pradhan AD，Solomon DH，Paynter N，Macfadyen J，Zaharris E，Gupta M，Clearfield M，Libby P，Hasan AA，Glynn RJ and Ridker PM.Rationale anddesign of the Cardiovascular Inflammation Reduction Trial：a test of theinflammatory hypothesis of atherothrombosis.Am Heart J.2013；166：199-207 e15.

17.Ridker PM，Tardif JC，Amarenco P，Duggan W，Glynn RJ，Jukema JW，Kastelein JJP，Kim AM，Koenig W，Nissen S，Revkin J，Rose LM，Santos RD，SchwartzPF，Shear CL，Yunis C and Investigators S.Lipid-Reduction Variability andAntidrug-Antibody Formation with Bococizumab.N Engl J Med.2017；376：1517-1526.

18.Ference BA，Cannon CP.Landmesser U，Luscher TF.Catapano AL and RayKK.Reduction of low density lipoprotein-cholesterol and cardiovascular eventswith proprotein convertase subtilisin-kexin type 9(PCSK9)inhibitors andstatins：an analysis of FOURIER，SPIRE，and the Cholesterol Treatment TrialistsCollaboration.Eur Heart J.2017.

Claims (108)

1.治疗心血管疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的降脂质剂和抗炎剂。

2.权利要求1所述的方法，其中所述抗炎剂是促炎细胞因子抑制剂。

3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-1抑制剂、IL-1受体(IL-1R)抑制剂、IL-6抑制剂、IL-6受体(IL-6R)抑制剂、NLRP3抑制剂、TNF抑制剂、IL-8抑制剂、IL-18抑制剂、自然杀伤细胞抑制剂、或其组合。

4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂是核酸、适配体、抗体或抗体片段、抑制性肽、或者小分子。

5.权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-1抑制剂。

6.权利要求5所述的方法，其中所述IL-1抑制剂是IL-1α抑制剂。

7.权利要求6所述的方法，其中所述IL-1α抑制剂是针对IL-1α、MABp1或sIL-1RI的反义寡核苷酸。

8.权利要求5所述的方法，其中所述IL-l抑制剂是IL-1β抑制剂。

9.权利要求8所述的方法，其中所述IL-1β抑制剂是针对IL-1β、卡那单抗、格弗珠单抗、双醋瑞因、LY2189102、CYT013、sIL-1RII、VX-740或VX-765的反义寡核苷酸。

10.权利要求5所述的方法，其中所述IL-1抑制剂是舒拉明钠、甲氨蝶呤-甲基-d3、甲氨蝶呤-甲基-d3二甲基酯或双醋瑞因。

11.权利要求3至10中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-1R抑制剂。

12.权利要求11所述的方法，其中所述IL-1R抑制剂是IL-1R拮抗剂。

13.权利要求A11或权利要求A12所述的方法，其中所述IL-1R抑制剂是针对IL-1R、阿那白滞素、利纳西普、MEDI-8968、sIL-1RI、EBI-005、白介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)或AMG108的反义寡核苷酸。

14.权利要求3至13中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-6抑制剂。

15.权利要求14所述的方法，其中所述IL-6抑制剂是针对IL-6、司妥昔单抗、西鲁库单抗、克拉扎珠单抗、奥洛珠单抗、艾西莫单抗、IG61、BE-8、CNTO328 PGE1及其衍生物、PGI2及其衍生物或环磷酰胺的反义寡核苷酸。

16.权利要求3至15中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-6R抑制剂。

17.权利要求16所述的方法，其中所述IL-6R抑制剂是IL-6R拮抗剂。

18.权利要求16或权利要求17所述的方法，其中所述IL-6R抑制剂是针对IL-6R、托珠单抗、沙利鲁单抗、PM1、AUK12-20、AUK64-7、AUK146-15、MRA或AB-227-NA的反义寡核苷酸。

19.权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含NLRP3抑制剂。

20.权利要求19所述的方法，其中所述NLPR3抑制剂是针对NLPR3、秋水仙碱、MCC950、CY-09、酮体代谢物β-羟基丁酸(BHB)、I型干扰素、白藜芦醇、阿格拉宾、CB2R、格列本脲、异甘草素、Z-VAD-FMK或微RNA-223的反义寡核昔酸。

21.权利要求3至20中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含TNF抑制剂。

22.权利要求21所述的方法，其中所述TNF抑制剂是针对TNF、英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、戈利木单抗、依那西普(Enbrel)、沙利度胺、来那度胺、泊马度胺、黄嘌呤衍生物、安非他酮、5-HT2A激动剂或致幻剂的反义寡核苷酸。

23.权利要求3至22中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-8抑制剂。

24.权利要求23所述的方法，其中所述IL-8抑制剂是针对IL8、HuMab-10F8、瑞帕利辛、姜黄素、安瘤克、大环内酯类或三氟乙酸盐的反义寡核苷酸。

25.权利要求3至24中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含IL-18抑制剂。

26.权利要求25所述的方法，其中所述IL-18抑制剂是针对IL-18、IL-18结合蛋白、IL-18抗体、NSC201631、NSC61610或NSC80734的反义寡核苷酸。

27.权利要求3至26中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含自然杀伤细胞抑制剂。

28.权利要求27所述的方法，其中所述自然杀伤细胞抑制剂是靶向自然杀伤细胞的抗体。

29.权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含甲氨蝶呤。

30.权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述抗炎剂包含阿卤芬酯。

31.权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂包含蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)抑制剂。

32.权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述PCSK9抑制剂是天然PCSK9抑制剂、PCSK9抗体、反义核酸、肽抑制剂、PCSK9疫苗或小分子抑制剂。

33.权利要求32所述的方法，其中所述天然PCSK9抑制剂是小檗碱、膜联蛋白A2或阿德奈汀。

34.权利要求32所述的方法，其中所述小分子抑制剂是PF-06446846、安塞曲匹或K-312。

35.权利要求32所述的方法，其中所述PCSK9抗体是阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗。

36.权利要求32所述的方法，其中所述反义核酸是RNAi分子。

37.权利要求36所述的方法，其中所述RNAi分子是英利西朗或ALN-PCS。

38.权利要求32所述的方法，其中所述肽抑制剂是模拟低密度脂蛋白受体(LDL-R)的EGFa结构域的肽。

39.权利要求32所述的方法，其中所述PCSK9疫苗包含抗原性PCSK9肽。

40.权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂包含HMG-CoA还原酶抑制剂。

41.权利要求40所述的方法，其中所述HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类。

42.权利要求41所述的方法，其中所述他汀类是辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀或匹伐他汀。

43.权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂是纤维酸衍生物(贝特类)、胆汁酸螯合剂、树脂、烟酸剂、胆固醇吸收抑制剂、脂酰辅酶A：胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂、胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂、LDL受体拮抗剂、类法尼醇X受体(FXR)拮抗剂、固醇调节性结合蛋白切割激活蛋白(SCAP)激活剂、微粒体甘油三酯转移蛋白(MTP)抑制剂、鲨烯合酶抑制剂或过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR)激动剂。

44.权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂和所述抗炎剂一起施用。

45.权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂和所述抗炎剂分开施用。

46.权利要求1至45中任一项所述的方法，其中所述降脂质剂和/或所述抗炎剂鼻内、静脉内、肌内、皮下或经口施用。

47.权利要求1至46中任一项所述的方法，其中在所述对象中促炎细胞因子的水平或活性降低。

48.权利要求1至47中任一项所述的方法，其中在所述对象中C反应蛋白(CRP)的水平或活性降低。

49.权利要求1至48中任一项所述的方法，其中在所述对象中非高密度脂蛋白(HDL)-胆固醇的水平或活性降低。

50.权利要求1至49中任一项所述的方法，其中在所述对象中LDL-胆固醇的水平或活性降低。

51.权利要求1至50中任一项所述的方法，其中在所述对象中总胆固醇的水平或活性降低。

52.权利要求1至51中任一项所述的方法，其中在所述对象中载脂蛋白B(ApoB)的水平或活性降低。

53.权利要求1至52中任一项所述的方法，其中在所述对象中甘油三酯的水平或活性降低。

54.权利要求1至53中任一项所述的方法，其中在所述对象中总胆固醇与HDL-胆固醇之比降低。

55.权利要求1至54中任一项所述的方法，其中非致命性心肌梗死的发生降低。

56.权利要求1至54中任一项所述的方法，其中非致命性卒中的发生降低。

57.权利要求1至54中任一项所述的方法，其中心血管死亡率降低。

58.权利要求1至57中任一项所述的方法，其中所述心血管疾病是心肌梗死、卒中、急性冠脉综合征、心肌缺血、慢性稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心血管死亡、冠状动脉再狭窄、冠状动脉支架再狭窄、冠状动脉支架血栓再形成、复发性心血管事件、血运重建、血管成形术、短暂性脑缺血发作、肺栓塞、血管阻塞或静脉血栓形成。

59.在接受过或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中降低心血管疾病复发率的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的抗炎剂。

60.在接受过或正在经受使用降脂质剂的治疗的对象中预测心血管疾病复发率的方法，所述方法包括在所述对象中测量C反应蛋白(CRP)的水平，并且如果所述CRP水平高于预定值，则确定所述对象可能复发所述心血管疾病。

61.权利要求60所述的方法，其中所述预定值为3mg/L。

62.权利要求60所述的方法，其中所述预定值为2mg/L。

63.权利要求60所述的方法，其中所述预定值为1mg/L。

64.治疗心血管疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含结合促炎细胞因子的第一抗原结合结构域和结合蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)的第二抗原结合结构域。

65.权利要求64所述的方法，其中所述促炎细胞因子是IL-1、IL-1受体(IL-1R)、IL-6、IL-6受体(IL-6R)、NLRP3、TNF、IL-8或IL-18。

66.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1结合。

67.权利要求66所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1α结合。

68.权利要求66所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于MABp1。

69.权利要求66所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1β结合。

70.权利要求69所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于卡那单抗、双醋瑞因、格弗珠单抗或LY2189102。

71.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1R结合。

72.权利要求71所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于MEDI-8968或AMG108。

73.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-6结合。

74.权利要求73所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于司妥昔单抗、西鲁库单抗、克拉扎珠单抗、奥洛珠单抗或艾西莫单抗。

75.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-6R结合。

76.权利要求75所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于托珠单抗、沙利鲁单抗、PM1、AUKl2-20、AUK64-7、AUKl46-15或AB-227-NA。

77.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与NLRP3结合。

78.权利要求77所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于抗NLRP3抗体。

79.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与TNF结合。

80.权利要求79所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、戈利木单抗或依那西普(Enbrel)。

81.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-8结合。

82.权利要求81所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于HuMab-10F8。

83.权利要求65所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-18结合。

84.权利要求83所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于IL-18抗体。

85.权利要求64至84中任一项所述的方法，其中所述第二抗原结合结构域来源于阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗。

86.权利要求64至85中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含共同的Fc区。

87.权利要求64至86中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体是单克隆双特异性抗体。

88.权利要求64至87中任一项所述的方法，还包括向所述对象施用治疗有效量的HMG-CoA还原酶抑制剂。

89.权利要求88所述的方法，其中所述HMG-CoA还原酶抑制剂是他汀类。

90.权利要求89所述的方法，其中所述他汀类是辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀或匹伐他汀。

91.权利要求64至89中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体静脉内、肌内、皮下或经口施用。

92.权利要求64至91中任一项所述的方法，其中在所述对象中促炎细胞因子的水平或活性降低。

93.权利要求64至92中任一项所述的方法，其中在所述对象中C反应蛋白(CRP)的水平或活性降低。

94.权利要求64至93中任一项所述的方法，其中在所述对象中非高密度脂蛋白(HDL)-胆固醇的水平或活性降低。

95.权利要求64至94中任一项所述的方法，其中在所述对象中LDL-胆固醇的水平或活性降低。

96.权利要求64至95中任一项所述的方法，其中在所述对象中总胆固醇的水平或活性降低。

97.权利要求64至96中任一项所述的方法，其中在所述对象中载脂蛋白B(ApoB)的水平或活性降低。

98.权利要求64至97中任一项所述的方法，其中在所述对象中甘油三酯的水平或活性降低。

99.权利要求64至98中任一项所述的方法，其中在所述对象中总胆固醇与HDL-胆固醇之比降低。

100.权利要求64至99中任一项所述的方法，其中非致命性心肌梗死的发生降低。

101.权利要求64至99中任一项所述的方法，其中非致命性卒中的发生降低。

102.权利要求64至101中任一项所述的方法，其中心血管死亡率降低。

103.治疗心血管疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用治疗有效量的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含结合IL-1的第一抗原结合结构域和结合蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)的第二抗原结合结构域。

104.权利要求103所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1α结合。

105.权利要求104所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于MABp1。

106.权利要求103所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域与IL-1β结合。

107.权利要求106所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域来源于卡那单抗、双醋瑞因、格弗珠单抗或LY2189102。

108.权利要求103至107中任一项所述的方法，其中所述第二抗原结合结构域来源于阿利西尤单抗、依洛尤单抗、1D05-IgG2、RG-7652、LY3015014或博科昔单抗。

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