CN112029008B - 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途 - Google Patents

特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途 Download PDF

Info

Publication number
CN112029008B
CN112029008B CN202010976424.7A CN202010976424A CN112029008B CN 112029008 B CN112029008 B CN 112029008B CN 202010976424 A CN202010976424 A CN 202010976424A CN 112029008 B CN112029008 B CN 112029008B
Authority
CN
China
Prior art keywords
crude polysaccharide
polysaccharide
supernatant
rhizoma ligustici
chuanxiong
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010976424.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112029008A (zh
Inventor
王岩
王书军
庞纪平
游强蓁
何子豪
穆远楠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhongxin Pharmaceutical Factory Of Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co ltd
Original Assignee
Zhongxin Pharmaceutical Factory Of Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhongxin Pharmaceutical Factory Of Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co ltd filed Critical Zhongxin Pharmaceutical Factory Of Tianjin Zhongxin Pharmaceutical Group Co ltd
Priority to CN202010976424.7A priority Critical patent/CN112029008B/zh
Publication of CN112029008A publication Critical patent/CN112029008A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112029008B publication Critical patent/CN112029008B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08BPOLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06Antihyperlipidemics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08BPOLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

本发明公开了一种特殊分子量的川芎粗多糖、及以已被使用过的川芎为原料提取川芎粗多糖的低成本工艺、以及该川芎粗多糖的用途。与药材来源的小分子量川芎多糖不同,本发明的川芎粗多糖是分子量较大的多糖,两者成分差异十分显著,药理实验显示出该多糖具有降糖和降血脂作用。

Description

特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途
发明领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种特殊分子量的川芎粗多糖,及以川芎药渣为原料提取川芎粗多糖的低成本工艺,以及该川芎粗多糖的降糖、降血脂等用途。
发明背景
川芎,为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎,在我国有着长期的用药史,其植物分布于我国各地,主要栽培于四川、云南、湖北、贵州、广西等省份。夏季当茎上的节盘显著突出,并略带紫色时采挖,除去泥沙,晒后烘干,再去须根。川芎活血行气,祛风止痛。用于胸痹心痛,胸胁刺痛,跌扑肿痛,月经不调,经闭痛经,癥瘕腹痛,头痛,风湿痹痛。
现阶段已从川芎中发现近300种化学成分,川芎主要由挥发油、内酯类、有机酸、生物碱以及多糖等成分。有文献记载,川芎根茎含挥发油约1%,其中主成分约为藁本内酯占58%、3-丁酞内酯5%和香桧烯6%,还含阿魏酸、川吲哚、 3-亚丁基苯酞、月桂烯、川芎嗪、棕榈酸、胡萝卜苷、β-谷固醇等成分。2015年版《中华人民共和国药典》,以阿魏酸为成分考察指标,规定川芎按干燥品计算,含阿魏酸不得少于0.10%。
藁本内酯,别名东当归酞内酯,是我国传统中药伞形科植物当归挥发油的主要活性成分。本品采用水蒸气蒸馏法提取,对心脑血管,循环系统及免疫功能均有较强的药理作用。研究表明,藁本内酯有很强的解痉,平喘,镇静作用,能改善微循环,松弛平滑肌,抑菌,提高机体免疫调节功能。因此,藁本内酯也常常被当成川芎的主要有效成分指标之一。
从已有报道看,川芎中的植物多糖并未作为川芎主要成分而得到充分研究,川芎多糖尚未发现产业化应用。因此在中药生产中,有大量川芎药渣,尽管含有川芎多糖,仍然被作为生产废料而直接丢弃,造成资源浪费和环境问题。
发明内容
本发明提供了一种特殊分子量的川芎粗多糖;本发明还提供了以川芎废弃药渣为原料,提取制备该川芎粗多糖的方法。本发明还提供了川芎粗多糖在制备降糖、降脂等药物、功能性食品中的应用。
一种川芎粗多糖,其中总糖含量≥20%;
一种川芎粗多糖,其平均分子量为98kDa±10%,多分散性2.9±10%。一种川芎粗多糖,其中糖醛酸含量≥20%;
一种川芎粗多糖,按总糖中的占比计,其中,阿拉伯糖含量>4%,甘露糖含量>6%,半乳糖>9%。
一种川芎粗多糖,其中,阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔比为:1∶(2.6~3.0)∶(1.2-1.6)∶(9.0~11.0)∶(1.8-2.4)。
一种川芎粗多糖,其红外光谱图在波长1720cm-1处有一明显的特征峰。
一种川芎粗多糖的制备方法:
取川芎药渣,干燥,粉碎;热水浸提1-3次,川芎药渣与水的投料按质量比为1∶(10-20),得提取液,合并各次提取液;提取液浓缩、离心,保留上清液;上清液中加入1-5倍体积比的95%乙醇,密封,置于2-10℃过夜;离心,弃去上清液,取沉淀,即得。
一种特殊分子量的川芎粗多糖,在制备降糖、降脂等药物中的应用。
一种特殊分子量的川芎粗多糖,在制备食品中的应用,例如川芎多糖水胶体在食品的应用。
本发明所述川芎粗多糖,具有如下特点:
(1)成分不同:本发明是以大分子量多糖为主,而药材来源的川芎多糖为小分子量为主,差异非常显著;糖醛酸含量不同,本发明的糖醛酸含量提高了约4 倍;
(2)更显著的降糖降脂功能:因成分不同,带来了多糖药理作用差异,相对于小分子多糖,大分子多糖具有更突出的降糖降脂功能;
(3)低成本、绿色环保:来源于废弃药渣,经济、绿色环保,使药材资源得到充分利用;
(4)适合大生产:从产业化视角设计的提取工艺;
(5)试剂温和,更能满足医药、食品等健康行业用途。
附图说明
图1为不同来源川芎多糖GPC图;
图2为6种标准单糖的气相色谱图:①代表鼠李糖,②代表阿拉伯糖,③代表木糖,④代表甘露糖,⑤代表葡萄糖,⑥代表半乳糖;
图3为川芎粗多糖(川芎药渣中提取)的气相色谱图:①代表鼠李糖,②代表阿拉伯糖,④代表甘露糖,⑤代表葡萄糖,⑥代表半乳糖;
图4川芎粗多糖(药材中提取)的气相色谱图:①代表鼠李糖,②代表阿拉伯糖,④代表甘露糖,⑤代表葡萄糖,⑥代表半乳糖;
图5为川芎粗多糖(川芎药渣中提取)的红外光谱图;
图6为川芎粗多糖(川芎药材中提取)的红外光谱图。
图7为不同浓度川芎粗多糖(药渣中提取)粘度随剪切力变化的曲线图;
图8为不同浓度川芎粗多糖(药材中提取)粘度随剪切力变化的曲线图。
具体实施例
原料:川芎药渣
实施例1川芎粗多糖的制备
取川芎药渣若干,60℃干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过60目筛;热水浸提1次,川芎药渣与水的投料按质量比为1∶16,得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,弃去沉淀;滤液浓缩至原体积的1/3,5000r/min 离心30min,保留上清液;上清液中加入4倍体积比的95%乙醇,密封,置于8℃过夜;2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀,干燥、即得。
实施例2川芎粗多糖的制备
取川芎药渣若干,60℃干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过40目筛;热水浸提2次,川芎药渣与水的投料按质量比为1∶12,得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,丢弃沉淀;滤液浓缩至原体积的1/4,3000r/min离心5min,保留上清液;上清液中加入2倍体积比的95%乙醇,密封,置于3℃冰箱过夜;2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀,干燥,即得。
实施例3川芎粗多糖的制备
取川芎药渣若干,60℃干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过70目筛;热水浸提3次,将水浴锅预热到60℃,投料,川芎药渣与水的投料按质量比为 1∶13,得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,弃去沉淀;滤液浓缩至原体积的1/3,3000r/min离心15min,保留上清液;上清液中加入3倍体积比的95%乙醇,密封,置于5℃冰箱过夜;2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀,干燥,即得。
实施例4川芎粗多糖的制备
取川芎药渣若干,60℃干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过60目筛;热水浸提2次,将水浴锅预热到60℃,投料,川芎药渣与水的投料按质量比为 1∶14,得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,弃去沉淀;滤液浓缩至原体积的1/4,4000r/min离心10min,保留上清液;上清液中加入3倍体积比的95%乙醇,密封,置于4℃冰箱过夜;2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀,干燥,即得。
实施例5川芎粗多糖的制备
取川芎药渣若干,60℃干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过60目筛;热水浸提第1次,将水浴锅预热到60℃,磁力搅拌1.5h,投料,川芎药渣与水的投料按质量比为1∶14,得提取液;热水浸提第2次,条件同第1次浸提的操作,此步川芎药渣与水的投料按质量比为1∶13,得提取液;合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,弃去沉淀;滤液浓缩至原体积的1/4,4000r/min离心10min,保留上清液;上清液中加入3倍体积比的95%乙醇,密封,置于4℃冰箱过夜; 2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀;冷冻干燥:将提取的沉淀放入-80℃冰箱过夜,然后用冷冻干燥机干燥,即得干燥后的样品。
实施例6对比试验1——川芎粗多糖(以川芎药材为原料)的制备
尽管上面的技术内容已经完整,申请人仍为了进一步展示本发明的创新性,特别进行了下面的技术对比。
为了显示以川芎药渣、川芎药材为起始原料而制备的川芎粗多糖的多种差异,申请人特选取川芎药材为起始原料,参照实施例1-5的方法制备了川芎粗多糖(以药材为来源)。具体方法如下:
以川芎的根系为原料,放入烘箱中,在50℃下干燥直至水含量降至15%以下(约8h),并用植物粉碎机磨粉碎通过60目筛,得川芎药粉;取川芎药粉为原料,热水浸提2次,将水浴锅预热到60℃,磁力搅拌1.5h,投料,川芎药渣与水的投料按质量比为1∶14,得提取液;热水浸提第2次,条件同第1次浸提的操作,此步川芎药渣与水的投料按质量比为1∶13,得提取液;合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,弃去沉淀;滤液浓缩至原体积的1/4,4000r/min离心 10min,保留上清液;上清液中加入3倍体积比的95%乙醇,密封,置于4℃冰箱过夜;2500r/min离心10min,弃去上清液,取沉淀;冷冻干燥:将提取的沉淀放入-80℃冰箱过夜,然后用冷冻干燥机干燥,即得干燥后的样品。
实施例7川芎粗多糖的组分测定——总糖(中性糖)测定
(1)称取10mg样品和40μg/mL、80μg/mL、120μg/mL、160μg/mL、200μg/mL 的葡萄糖标准液,分别加入1mL72%H2SO4,室温搅拌30min,直至样品溶解。稀释至10mL,再取1mL稀释至5mL,得0.2mg/mL的样品溶液;(2)取2mL 稀释样品,放入到3个试管(15×120mm)中。一个用于空白样品,另外两个用于样品检测;(3)在每个样品试管中加50μL的80%苯酚溶液,空白对照的试管中加50μL的蒸馏水;(4)在每个试管中加入3.0mL浓硫酸(要在加入苯酚后立即加入浓硫酸);(5)混合均匀后室温冷却;(6)用酶标仪在波长490nm下进行测试。
结果显示,从药材中提取的川芎多糖,其中的总糖含量42.74%;从川芎药渣中提取的川芎多糖,其中的总糖含量仍超过20%,甚至高达26.85%。可以看出,从药渣中提取、利用川芎多糖的方法非常经济、环保。
实施例8川芎粗多糖的组分测定——糖醛酸测定
采用间羟基二苯基测定法测定。
(1)标准曲线的制备。取10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、 60μg/mL的半乳糖醛酸标准溶液1.0mL至20mL带塞试管中,冰水浴,加入6mL 四硼酸钠/硫酸溶液,待全部加完后,用旋涡混合器混匀,于沸水浴中加热5min 后,冰水浴。后用移液枪加样1.5mg/mL间羟基联苯溶液100μL,用旋涡混合器混匀,混匀后振摇5min,超声除去气泡。在(最大吸收波长)525nm波长处测量吸光度。
(2)样品测定。取样品15mg置100mL容量瓶,加水溶解定容至刻度。取溶液1.00mL按标准曲线项方法操作。
Figure BDA0002684983960000061
从表1可以看出,测得药材中提取的川芎粗多糖糖醛酸含量7.70%,药渣中提取的糖醛酸含量超过20%,甚至达到了28.77%,药渣来源的川芎多糖糖醛酸含量远远高于药材中提取的川芎粗多糖糖醛酸含量。
实施例9分子量测定
将样品和葡聚糖系列标准品溶解在的0.1moL/L NaNO3的溶液,浓度是 1.0mg/mL,流速为1.0mL/min,用高效凝胶色谱(HPGPC)法分析样品,过0.22μm 水系滤膜后进样。多糖相对重均分子量(Mw)与洗脱体积(Ve)和分配系数(Kav) 的相互关系如下:
Ve=a-blogMw (2-2)
Kav=k1-k2logMw (2-3)
Kav=(Ve-Vo)/(Vt-Vo)(2-4)
其中,a、b、k1和k2为常数,Vo为T-2000的洗脱体积,Vt时葡萄糖的洗脱体积。本研究通过测定已知分子量的葡聚糖标准品和葡萄糖的保留时间,根据上述关系式,绘制标准曲线。然后,测定多糖的保留时间,从而求得其相对重均分子量。
Figure BDA0002684983960000071
从表2和图1可以看出,川芎多糖中存在两类不同分子量大小的多糖。药渣中提取的多糖主要是分子量较大的多糖组分,药材中提取的多糖主要是分子量较小的多糖组分。
实施例10单糖组分测定
(1)酸水解多糖样品
称量1.5mg样品(实施例5、实施例6),称量1mL2mol/L的三氟乙酸(TFA),放入尖底带盖试管,并用封口膜进行封管,120℃、水解2h。用氮气,将浓缩水解液吹干,倒入甲醇0.5mL,再次进行吹干,重复三次,最终反复将吹干的样品进行衍生化。
(2)进行糖腈乙酸脂衍生物的制备
(3)气质色谱法测定制备好的多糖的糖腈乙酸酯衍生物
使用7890B气相色谱,5%苯甲基硅烷氧烷毛细管色谱柱,火焰离子检测器 (FID)。具体操作条件如下:色谱柱流速1.0mL/min,进样口温度250℃,检测器温度280℃,进样体积1.0μL,氦气、氢气和空气流速分别为25mL/min、 30mL/min、400mL/min。
(4)6种标准单糖:鼠李糖,阿拉伯糖,木糖,甘露糖,半乳糖,葡萄糖。和上述多糖样品一样进行糖腈乙酸酯衍生化,然后以同样的条件进行气质色谱分析。
(5)根据色谱图中各色谱峰的出峰时间可以得出样品的单糖组成,根据各色谱峰的峰面积可以计算出各种单糖的摩尔比。
计算公式:Wx=K(Ax×Wi)/Ai (2-1)
其中,WX为样品中某单糖质量(mg);Wi为样品中加入内标的质量(mg);AX为色谱图中某单糖的峰面积;Ai为色谱图中内标的峰面积;K为校正因子。
Figure BDA0002684983960000081
Figure BDA0002684983960000082
从表3、表4以及图2、图3、图4可以看出,川芎药渣中提取的川芎粗多糖,按总糖中的占比计,葡萄糖含量最高,鼠李糖与半乳糖含量相近;特别地,其中,其中阿拉伯糖的质量比>4%(实施例5高达5.74%),甘露糖的质量比例>6% (实施例5高达8.18%),半乳糖>9%(实施例5高达11.74%)。
药材中提取的川芎粗多糖,按总糖中的占比计,鼠李糖和葡萄糖含量相差不大且远远高于其他糖含量;然而,半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖含量非常低。
实施例11川芎粗多糖的组分测定——脂肪含量的测定
采用国标方法GB/T14772-2008,即索氏抽提法。
Figure BDA0002684983960000091
结果显示,川芎粗多糖(药材中提取)中的脂肪含量为10.34%;川芎粗多糖(药渣中提取)的脂肪含量为8.25%。
实施例12川芎粗多糖的组分测定——蛋白质含量的测定
采用国标方法GB5009.5-2010,即凯氏定氮法。
Figure BDA0002684983960000092
结果显示,川芎粗多糖(从药材中提取)的蛋白质含量为19.97%;川芎粗多糖(从药渣中提取)中的蛋白质含量为6.4%。两种不同来源的川芎粗多糖蛋白质含量相差较大,从药材中提取的川芎粗多糖的蛋白含量是药渣中提取川芎粗多糖蛋白含量3倍还要多。
实施例13水分含量测定
(1)测定川芎多糖的GPC图谱,结果见说明书附图1。
(2)由国标方法GB5009.3-2010“直接干燥法”确定水分含量,具体操作为:称取1.0g左右的样品于已经干燥至恒重的平皿中,在105℃的条件下烘至恒重,通过测定干燥前后样品中质量的变化(也是样品前后水分含量的变化)来计算。
水分含量(%)=(湿基样品质量-干基样品质量)/湿基样品质量×100。
Figure BDA0002684983960000101
从表7可以看出,经直接干燥法测得川芎粗多糖(从药材中提取)中的水分含量为5.71%;而经直接干燥法测得川芎粗多糖(从药渣中提取)中的水分含量为8.00%。
实施例14红外光谱
从图6、图7可以看出,两种提取来源的川芎粗多糖,在红外光谱图的出峰位置基本相同,川芎粗多糖在波长1720cm-1处有一个较为明显的峰,是由于醛酸醛基的C=O键造成;2900cm-1处的条带是由C-H键的拉伸震动导致的。 1720cm-1附近的峰说明有醛基。1320~1210cm-1是C-O键伸缩造成。880~680cm-1是C-H面外弯曲振动造成的。1350~1000cm-1C-N键是由伸缩振动。在900~650cm-1的峰是由N-H面外弯曲振动产生的。在药渣中提取的川芎粗多糖结构中醛基的 C=O键出峰明显一些,含量较高。
实施例15流变学特性测定——川芎多糖水胶体在食品的应用
从图7中可以发现,低浓度的川芎粗多糖(从药渣中提取)水溶液的粘度随着剪切的增加而不断减小,但是受剪切力影响而粘度基本不发生太大变化。随着溶液浓度的提高,粘度受剪切力的影响越来越大。当浓度提高到150mg/mL时,粘度的变化受剪切力的影响会突然增加。
从图8中可以发现,低浓度的川芎粗多糖(从药材中提取)水溶液的粘度随着剪切的增加而逐渐减小,但是受剪切力影响而粘度基本不发生太大变化。随着溶液浓度的提高,粘度受剪切力的影响越来越大。当浓度提高到100mg/mL时,粘度的变化受剪切力的影响会突然增加。
两种提取来源的多糖都是粘度随着剪切力的增加而逐渐减小,在低浓度时粘度不会随剪切力发生大的变化,但在高浓度时粘度随着剪切力的增加而快速减小。
不同的是,从药材中提取的川芎粗多糖在浓度达到100mg/mL时,就会出现粘度受剪切力影响非常大的现象,而从药渣中提取的川芎多糖要浓度提高到 150mg/mL时才会出现粘度受剪切力非常影响大的现象。当多糖水溶液在较低浓度(10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL)时,一直是药渣中提取出的多糖粘度大,这是因为药渣中提取的多糖主要组分是分子量较大的多糖。但是当多糖水溶液浓度在100mg/mL时川芎中提取的多糖最大粘度到达了13842mPa·s,而药渣中提取多糖的最大粘度仅仅大约有1375.7mPa·s,当多糖水溶液浓度在150mg/mL时川芎中提取多糖的最大粘度到了20445mPa·s,而药渣只有8245.2mPa·s。当两种多糖在高浓度时在剪切力的作用下多糖链之间的相互缠绕交联方式不同在剪切过程中形成了不同大小的阻力,表现出来的就是粘度的巨大差异。只有不一样的多糖结构才会出现不一样的交联表现,印证了两类分子量不同糖类结构上也不相同。这些特性可用于开发不同的食品用川芎多糖水胶体。
实施例16降血糖、降血脂药理实验
实验方法:选取5周龄雄性C57小鼠。将小鼠置于可自由进食和饮水的塑料笼中,控制湿度(40%-60%)、光照(12/12h光照/暗周期)、温度(20-25℃)、空气流通性好并且每天更换垫料。经过一周的适应性喂养后,随机分为8组,每组12只。这八组分别为空白组,高脂高糖模型组,高剂量川芎药材粗多糖组(简称:药材高剂量组),中剂量川芎药材粗多糖组(简称:药材中剂量组),低剂量川芎药材粗多糖组(简称:药材低剂量组),高剂量川芎药渣粗多糖组(简称:药渣高剂量组),中剂量川芎药渣粗多糖组(简称:药渣中剂量组),低剂量川芎药渣粗多糖组(简称:药渣低剂量组)。
其中空白组喂养维持饲料,其余各组均喂养高糖高脂饲料。每天定时进行灌胃,空白组喂养生理盐水[10mL/(kg/d)],药材高剂量组、药材中剂量组、药材低剂量组分别灌胃600mg/kg,400mg/kg,200mg/kg川芎药材提取的粗多糖,药渣高剂量组、药渣中剂量组、药渣低剂量组分别灌胃600mg/kg,400mg/kg, 200mg/kg川芎药渣提取的粗多糖,灌胃期为42d。
指标测定:
日常观测指标体重:在实验期间,每周对小鼠称一次体重,并记录。
血糖指标测定。在实验期间需要定期观察小鼠血糖变化情况,在实验每周定时鼠尾采血法对小鼠进行血糖测定,小鼠禁食不禁水12h。
血脂指标测定。灌胃实验结束前禁食12h,然后灌胃1h后眼眶静脉采血,全血样于3000r/min离心15min,分离血清后置-20℃保存,待测定,用甘油三酯 (TG)试剂盒、总胆固醇(TC)试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒测定血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)四项指标。
测定结果表述:
TG、TC、HDL-C、LDL-C分别按下列公式计算:
TG含量(mmol/L)=[(样本OD值-空白OD值)/(校准OD值-空白OD值)] ×校准品浓度(mmol/L)
TC含量(mmol/L)=[(样本OD值-空白OD值)/(校准OD值-空白OD值)] ×校准品浓度(mmol/L)
HDL-C含量(mmol/L)=[(样品A2-样品A1)-(空白A2-空白A1)]/[(校准A2-校准A1)-(空白A2-空白A1)]×校准品浓度(mmol/L)
LDL-C含量(mmol/L)=[(样品A2-样品A1)-(空白A2-空白A1)]/[(校准A2-校准A1)-(空白A2-空白A1)]×校准品浓度(mmol/L)。
(1)小鼠血糖数据——降血糖作用:
血糖数值如表8所示,血糖测定时间为灌胃四周后小鼠体重出现差异后开始测定小鼠血糖,并且每一周测定一次,共三次。
Figure BDA0002684983960000121
Figure BDA0002684983960000131
结果显示,药渣川芎粗多糖在降血糖方面具有显著作用,可以使糖尿病小鼠的血糖降低。相对于药材川芎粗多糖各组,药渣川芎粗多糖各组,其血糖数值和模型组之间存在着显著性差异,药渣川芎粗多糖各组降血糖的能力要明显优于药材粗多糖各组,特别是在小鼠开始灌胃后的第四周(即实验开始的第五周)效果更为明显。同时,两者均可以使小鼠的体重下降。
(2)小鼠血脂数据:
血脂数据如表9所示,在第七周通过眼眶取血测定小鼠的血脂数值,测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C) 四项指标。
Figure BDA0002684983960000132
结果表明,粗多糖能够降低小鼠血清中的的总胆固醇、甘油三酯水平,升高高密度脂蛋白水平同时降低低密度脂蛋白水平。
从总胆固醇指标来看饲喂川芎粗多糖的组别与模型组之间存在着显著性差异,并且数值低于模型组。在高密度脂蛋白来看,灌胃川芎药渣粗多糖的组别差异性比灌胃川芎药材粗多糖组的差异性更加明显,且药渣粗多糖的效果要优于药材粗多糖。
综上所述,川芎药渣比川芎药材中的粗多糖能够更好地降低小鼠的血糖和血脂水平。

Claims (6)

1.一种川芎粗多糖在制备降糖药物、降血脂药物中的用途,其中川芎粗多糖中的总糖含量≥20%,其平均分子量为98kDa±10%,其制备方法包括:
取川芎药渣,干燥,粉碎;热水浸提1-3次,川芎药渣与水的质量比为1:(10-20),得提取液,合并各次提取液;提取液浓缩、离心,保留上清液;上清液中加入3-5倍体积比的95%乙醇,密封,置于2-10°C过夜;离心,倒掉上清液,取沉淀,即得。
2.权利要求1所述的用途,其中川芎粗多糖中的糖醛酸含量≥20%。
3.权利要求2所述的用途,其中川芎粗多糖含有阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖,其中,按在总糖中占的质量比例计,阿拉伯糖>4%,甘露糖>6%,半乳糖>9%。
4.权利要求3所述的用途,其中川芎粗多糖含有阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其中,阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔比为:1:(2.6-3.0):(1.2-1.6):(9.0-11.0):(1.8-2.4)。
5.权利要求4所述的用途,其中川芎粗多糖制备方法包括:
取川芎药渣,40-60°C干燥,直至水含量降至20%以下,粉碎,过40-70目筛;热水浸提1-3次,川芎药渣与水的质量比为 1:(12-16),得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,丢弃沉淀;滤液浓缩至原体积的1/3—1/4、离心,保留上清液;上清液中加入3-4倍体积比的 95%乙醇,密封,置于3-8°C过夜;离心,倒掉上清液,取沉淀,即得。
6.权利要求5所述的用途,其中川芎粗多糖制备方法包括:
取川芎药渣,60°C干燥,直至水含量降至15%以下,粉碎,过60目筛;热水浸提2次,川芎药渣与水的投料按质量比为 1:14,得提取液,合并各次提取液;提取液过滤,保留滤液,丢弃沉淀;滤液浓缩至原体积的1/3、4000r/min离心10min,保留上清液;上清液中加入3倍体积比的 95%乙醇,密封,置于4°C过夜;2500r/min离心10min,倒掉上清液,取沉淀,干燥、即得。
CN202010976424.7A 2020-09-16 2020-09-16 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途 Active CN112029008B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010976424.7A CN112029008B (zh) 2020-09-16 2020-09-16 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010976424.7A CN112029008B (zh) 2020-09-16 2020-09-16 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112029008A CN112029008A (zh) 2020-12-04
CN112029008B true CN112029008B (zh) 2022-11-08

Family

ID=73590108

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010976424.7A Active CN112029008B (zh) 2020-09-16 2020-09-16 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112029008B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113588824A (zh) * 2021-07-30 2021-11-02 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102475830A (zh) * 2010-11-29 2012-05-30 贵州益佰制药股份有限公司 一种治疗冠心病心绞痛的药物组合物与其制备方法及制剂
CN102872175A (zh) * 2012-08-24 2013-01-16 天津中医药大学 一种川芎提取物,其制备方法和用途
CN103372040A (zh) * 2012-04-20 2013-10-30 北京北大维信生物科技有限公司 一种调节血脂的红曲川芎药物组合及其制备方法
CN104138488A (zh) * 2014-07-14 2014-11-12 北京赛德维康医药研究院 一种降血脂的药物组合物及其应用
WO2015172608A1 (zh) * 2014-05-14 2015-11-19 上海春芝堂生物制品有限公司 一种辅助降血脂的胶囊及其制备方法
CN107441124A (zh) * 2017-08-14 2017-12-08 淄博信晟机电技术有限公司 一种降糖口服液及其制备方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101646756B1 (ko) * 2014-08-29 2016-08-09 주식회사 하원제약 고지혈증의 예방 또는 치료용 조성물
CN105273094B (zh) * 2015-05-04 2018-05-29 西华大学 一种川芎多糖快速分离的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102475830A (zh) * 2010-11-29 2012-05-30 贵州益佰制药股份有限公司 一种治疗冠心病心绞痛的药物组合物与其制备方法及制剂
CN103372040A (zh) * 2012-04-20 2013-10-30 北京北大维信生物科技有限公司 一种调节血脂的红曲川芎药物组合及其制备方法
CN102872175A (zh) * 2012-08-24 2013-01-16 天津中医药大学 一种川芎提取物,其制备方法和用途
WO2015172608A1 (zh) * 2014-05-14 2015-11-19 上海春芝堂生物制品有限公司 一种辅助降血脂的胶囊及其制备方法
CN104138488A (zh) * 2014-07-14 2014-11-12 北京赛德维康医药研究院 一种降血脂的药物组合物及其应用
CN107441124A (zh) * 2017-08-14 2017-12-08 淄博信晟机电技术有限公司 一种降糖口服液及其制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Advances in the Chemical Analysis and Biological Activities of Chuanxiong";Weixia Li等;《Molecules》;20120906;第17卷;第10614-10651页 *
"Antioxidant effects and cytotoxicity of three purified polysaccharides from Ligusticum chuanxiong Hort.";Jiang-Feng Yuan等;《Carbohydrate Polymers》;20080504;第74卷;第822-827页 *
"Ligusticum chuanxiong Hort: A review of chemistry and pharmacology";Xia Ran等;《Pharmaceutical Biology》;20111231;第49卷(第11期);第1180-1189页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN112029008A (zh) 2020-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Visht et al. Isolation of natural products
Yalavarthi et al. A review on identification strategy of phyto constituents present in herbal plants
CN1965885B (zh) 鹰嘴豆总黄酮在制备治疗糖尿病药物中的应用
CN104004106A (zh) 一种桦褐孔菌中有效物质提取方法和茶包的制备方法
CN112029008B (zh) 特殊分子量的川芎粗多糖及从药渣提取工艺、用途
CN103690572A (zh) 一种桦褐孔菌茶粉的制备方法
CN102293997A (zh) 一种干姜提取物的制备方法
CN114917272B (zh) 一种马钱子的烘烤炮制工艺
CN103445173A (zh) 一种制备蒲公英叶水溶活性提取物的方法
Li et al. Flavonoids from mulberry leaves by microwave-assisted extract and anti-fatigue activity
CN101843884B (zh) 用于治疗手足口病的抗病毒口服液的质量检测方法
CN103156920B (zh) 一种五味子提取物的干燥方法
Huang et al. Optimized extraction of polysaccharide from Pinus elliottii: Characterization, antioxidant, and moisture-preserving activities
CN111494475A (zh) 一种制备赤芍提取物的方法
CN101912436A (zh) 苜蓿皂苷的超声波提取方法
CN101757050A (zh) 一种测定银杏提取物中总银杏酸的方法
CN109908266A (zh) 一种金线莲配方颗粒的制备方法
CN105106653B (zh) 一种金线莲颗粒的制备方法
CN112029007A (zh) 脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖及其从药渣的制备方法
CN108126000A (zh) 新鲜三七中三七总皂苷提取制备方法
CN110787200B (zh) 一种微波协同萃取川芎有效物的方法
CN107202856A (zh) 一种治疗感冒的中药制剂的检测方法
CN110063973A (zh) 一种网脉橐吾胶囊及其制备工艺
CN104983836A (zh) 一种从复方血脂宁的原料药中提取活性成分的方法
CN100488543C (zh) 大蒜局部外用止痒涂剂

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant