CN112028962A - 一种积雪草总苷的提取工艺 - Google Patents

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陈述耀
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Abstract

本发明公开了一种积雪草总苷的提取工艺，属于中医药领域，其包括以下步骤：步骤一：由积雪草原料获取一次提取液；步骤二：对步骤一中的一次提取液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；所述絮凝处理采用壳聚糖絮凝液进行处理，所述壳聚糖絮凝液包括弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；步骤三：对步骤二中的二次提取液经后序处理后得到积雪草总苷。本发明采用的提取工艺提高了积雪草总苷在水中溶解的澄清度。

Description

一种积雪草总苷的提取工艺
技术领域
本发明涉及中医药领域，具体涉及一种积雪草总苷的提取工艺。
背景技术
积雪草的化学成分复杂，主要有三萜类、黄酮类、挥发油类、多炔烯类等。积雪草总苷是积雪草提取物中主要的成分，主要由积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B等物质组成。其广泛运用于医药、化妆品领域。
工业上提取积雪草总苷，因为工艺不同所得积雪草总苷含量、各成分间比例有所不同。其中，杂质影响了积雪草总苷在水中溶解后的澄清度，使积雪草总苷在应用上受到局限。
发明内容
本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，提供一种积雪草总苷的提取工艺。
本发明的技术解决方案如下：
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：由积雪草原料获取一次提取液；
步骤二：对步骤一中的一次提取液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述絮凝处理采用壳聚糖絮凝液进行处理，所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；
步骤三：对步骤二中的二次提取液经后序处理后得到积雪草总苷。
作为本发明的进一步改进方案，所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的1-3％。
作为本发明的进一步改进方案，所述弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖的质量比为100:1-5:15-20。
作为本发明的进一步改进方案，所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中。
作为本发明的进一步改进方案，所述弱酸溶液为质量分数为1-5％的醋酸溶液或草酸溶液。
作为本发明的进一步改进方案，所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
作为本发明的进一步改进方案，所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：配制蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为3-6条件下进行微波-超声波协同处理，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤二中的絮凝处理在超声环境下进行。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤一中，一次提取液的获取为将积雪草原料粉碎筛分后，用pH在9-11之间且体积浓度为50-95％乙醇溶液进行回流提取。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤三中，二次提取液的后序处理具体为，将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得所述积雪草总苷。
本发明至少具有以下有益效果之一：
(1)本发明的一种积雪总苷提取工艺，壳聚糖溶于弱酸溶液中，同时引入起泡剂，得到大量泡沫，体系中加入壳聚糖以后，起泡剂将提取液进行起泡，泡沫表面吸附有壳聚糖分子，壳聚糖的长链分子具有很强的“架桥”作用，能在同一分子上吸附多个颗粒，使溶液中具有悬浮颗粒发生聚集而沉淀出来，同时，壳聚糖分子中的氨基使得壳聚糖分子带正电荷，即泡沫为带正电荷，从而能带负电荷蛋白类化合物分子相结合，通过以上絮凝机制，壳聚糖溶液可以对分散体系产生非常有效的澄清效果。
(2)本发明的一种积雪草总苷提取工艺，由于一次提取液中本身的蛋白质也具有起泡效果，再结合蛋白质起泡剂，能够有效将一次提取液中内的蛋白质等成分进行起泡，产生大量泡沫，增大了与壳聚糖絮凝液的接触面积，絮凝效果更好。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐明本发明，应理解下述具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：由积雪草原料获取一次提取液；
步骤二：对步骤一中的一次提取液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述絮凝处理采用壳聚糖絮凝液进行处理，所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；通过絮凝介质对提取液中的带电杂质、固相物杂质颗粒等进行进一步的去除，从而在一般过滤操作的基础上进一步地进行除杂，同时通过对合适的絮凝介质进行选择，而便于在后续操作中进一步地分离，从而极大地避免杂质的二次引入，从而最终提升提取液的净度。
步骤三：对步骤二中的二次提取液经后序处理后得到积雪草总苷。
作为本发明的进一步改进方案，所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的1-3％。于或高于该浓度条件下的壳聚糖溶液提取效果均不理想，添加量过低，则体系除杂效果差，添加量过高，则有效组分损失过大，影响目标组分的效果。
作为本发明的进一步改进方案，所述弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖的质量比为100:1-5:15-20。
作为本发明的进一步改进方案，所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中。
作为本发明的进一步改进方案，所述弱酸溶液为质量分数为1-5％的醋酸溶液或草酸溶液。
作为本发明的进一步改进方案，所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
作为本发明的进一步改进方案，所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：配制蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为3-6条件下进行微波-超声波协同处理，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤二中的絮凝处理在超声环境下进行。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤一中，一次提取液的获取为将积雪草原料粉碎筛分后，用pH在9-11之间且体积浓度为50-95％乙醇溶液进行回流提取。
作为本发明的进一步改进方案，所述步骤三中，二次提取液的后序处理具体为，将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得所述积雪草总苷。
实施例1
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：将100kg积雪草原料粉碎筛分后，投入提取罐中，加入用pH在9且体积浓度为50％乙醇溶液进行回流提取，回流时间2h，获得一次提取液。
步骤二：对步骤一中的一次提取液加入壳聚糖絮凝液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括质量比为100:1:15的弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；
所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的1％。
所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中，混合而得。
所述弱酸溶液为质量分数为1％的醋酸溶液。
所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：称取米糠蛋白和卵白蛋白分别溶解于去离子水中，配制成浓度为50mg/mL的蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为3条件下进行微波-超声波协同处理，调节微波功率为500W，超声波功率为300W，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
步骤三：将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得积雪草总苷。
实施例2
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：将100kg积雪草原料粉碎筛分后，投入提取罐中，加入用pH在10且体积浓度为65％乙醇溶液进行回流提取，回流时间2h，获得一次提取液。
步骤二：对步骤一中的一次提取液加入壳聚糖絮凝液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括质量比为100:3:18的弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；
所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的2％。
所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中，混合而得。
所述弱酸溶液为质量分数为3％的醋酸溶液。
所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：称取米糠蛋白和卵白蛋白分别溶解于去离子水中，配制成浓度为50mg/mL的蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为3-6条件下进行微波-超声波协同处理，调节微波功率为500W，超声波功率为300W，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
步骤三：将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得积雪草总苷。
实施例3
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：将100kg积雪草原料粉碎筛分后，投入提取罐中，加入用pH在11之间且体积浓度为95％乙醇溶液进行回流提取，回流时间2h，获得一次提取液。
步骤二：对步骤一中的一次提取液加入壳聚糖絮凝液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括质量比为100:5:20的弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；
所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的3％。
所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中，混合而得。
所述弱酸溶液为质量分数为5％的醋酸溶液或草酸溶液。
所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：称取米糠蛋白和卵白蛋白分别溶解于去离子水中，配制成浓度为50mg/mL的蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为6条件下进行微波-超声波协同处理，调节微波功率为500W，超声波功率为300W，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
步骤三：将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得积雪草总苷。
实施例4
本实施例是在实施例2的基础上作出的进一步改进，具体是所述弱酸溶液为草酸溶液。
实施例5
本实施例是在实施例2的基础上作出的进一步改进，具体是所述步骤二中的絮凝处理在超声环境下进行，超声波功率为350W。
实施例6
对比例1(无壳聚糖絮凝液)
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
将100kg积雪草原料粉碎筛分后，投入提取罐中，加入用pH在10之间且体积浓度为65％乙醇溶液进行回流提取，回流时间2h，获得一次提取液。
将一次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得积雪草总苷。
对比例2(无起泡剂)
一种积雪草总苷的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一：将100kg积雪草原料粉碎筛分后，投入提取罐中，加入用pH在10之间且体积浓度为65％乙醇溶液进行回流提取，回流时间2h，获得一次提取液。
步骤二：对步骤一中的一次提取液加入壳聚糖絮凝液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括质量比为100:18的弱酸溶液和壳聚糖；
所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的2％。
所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中，混合而得。弱酸溶液为质量分数为3％的醋酸溶液。
步骤三：将二次提取液依序进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得积雪草总苷。
测量以上实施例和对比例在最后浓缩干燥后的积雪草总苷产品的质量m，从而计算出收率，收率＝m/M，M为积雪草原料的质量，采用高效液相色谱法(HPLC)测定积雪草总苷纯含量n，从而计算其在最后浓缩干燥后的积雪草总苷产品中的含率，含率＝n/m；同时将试样放入水中溶解，观察其澄清度，澄清度分为无絮凝物，少许絮凝物，较多絮凝物。
表1实施例和对比例的性能测试值
Figure BDA0002649130650000081
Figure BDA0002649130650000091
从上表可以看出，实施例的收率大于对比例，实施例的积雪草总苷含率大于对比例，同时其溶水后无絮凝物出现，说明本发明采用的提取工艺积雪草总苷含量高，另在其应用在需要水溶的产品时，澄清度较高，产品更加纯净；主要原因可能如下：通过对比例1与实施例的对比可知，实施例中添加了壳聚糖絮凝液，通过絮凝介质对提取液中的带电杂质、固相物杂质颗粒等进行进一步的去除，从而在一般过滤操作的基础上进一步地进行除杂，从而极大地避免杂质的二次引入，从而最终提升提取液的净度及其含率。通过对比例2的对比可知，本实施例中采用了在酸性环境下加有起泡剂的壳聚糖混合溶液，起泡剂将一次提取液起泡，泡沫表面吸附有壳聚糖分子，壳聚糖的长链分子具有很强的“架桥”作用，能在同一分子上吸附多个颗粒，使溶液中具有悬浮颗粒发生聚集而沉淀出来，同时，壳聚糖分子中的氨基使得壳聚糖分子带正电荷，即泡沫为带正电荷，从而能带负电荷蛋白类化合物分子相结合，通过以上絮凝机制，壳聚糖溶液可以对分散体系产生非常有效的澄清效果。
在不出现冲突的前提下，本领域技术人员可以将上述附加技术特征自由组合以及叠加使用。
在本发明的实施例的描述中，需要理解的是，“-”和“～”表示的是两个数值之同的范围，并且该范围包括端点。例如：“A-B”表示大于或等于A，且小于或等于B的范围。“A～B″表示大于或等于A，且小于或等于B的范围。
在本发明的实施例的描述中，本文中术语“和/或”，仅仅是一种描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B这三种情况。另外，本文中字符“/”，一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
以上所述仅为本发明的优先实施方式，只要以基本相同手段实现本发明目的的技术方案都属于本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：由积雪草原料获取一次提取液；
步骤二：对步骤一中的一次提取液进行絮凝处理，过滤后，得到二次提取液；
所述絮凝处理采用壳聚糖絮凝液进行处理，所述壳聚糖絮凝液中采用的原料包括弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖；
步骤三：对步骤二中的二次提取液经后序处理后得到积雪草总苷。
2.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述壳聚糖絮凝液的添加量占一次提取液质量的1-3％。
3.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述弱酸溶液、起泡剂和壳聚糖的质量比为100:1-5:15-20。
4.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述壳聚糖絮凝液的制备方法如下：将起泡剂加入弱酸溶液中，制得弱酸性起泡剂溶液，然后将壳聚糖加入所述弱酸性起泡剂溶液中。
5.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述弱酸溶液为质量分数为1-5％的醋酸溶液或草酸溶液。
6.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述起泡剂为蛋白质起泡剂。
7.根据权利要求6所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述蛋白质起泡剂的制备方法如下：配制蛋白质溶液，将蛋白质溶液在pH值为3-6条件下进行微波-超声波协同处理，得到微颗粒化复合蛋白质溶液；将微颗粒化复合蛋白质溶液经过高压微射流后，得到均质复合蛋白质溶液；将均质复合蛋白质溶液经干燥处理后，获得蛋白质起泡剂。
8.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述步骤二中的絮凝处理在超声环境下进行。
9.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述步骤一中，一次提取液的获取为将积雪草原料粉碎筛分后，用pH在9-11之间且体积浓度为50-95％乙醇溶液进行回流提取。
10.根据权利要求1所述的一种积雪草总苷的提取工艺，其特征在于：所述步骤三中，二次提取液的后序处理具体为，将二次提取液进行浓缩，得浸膏，将浸膏用水稀释后，添加活性炭脱色，过滤，收集滤液；将滤液过阴离子交换树脂柱，用纯水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后，得所述积雪草总苷。
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RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201204

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