CN112022896A - 一种抗肿瘤中药复方软胶囊制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药制剂技术领域，具体为一种抗肿瘤中药复方软胶囊制剂及其制备方法和应用。本发明制剂配伍为灵芝孢子粉5‑20，人参2‑8，黄芪5‑15，刺五加3‑7，红景天5‑18；制备方法包括：灵芝孢子粉超临界萃取，混悬剂、湿润剂的选择研究，使内容物细度达到微米级，增加生物利用度，并使软胶囊制剂达到有效成分充分富集，易被吸收利用。本中药复方软胶囊制剂具有很好的抗肿瘤作用，初步临床试验表明，患者肿瘤疗效（缩小）总有效率75%，“升白作用疗效”总有效率96%，单一状改善如白细胞即降等总有效率均在85%以上，尤其对不能手术治疗的重、危患者，或高龄患者，可以减轻痛苦、提高生活质量，对延长生命有积极作用。

Description

一种抗肿瘤中药复方软胶囊制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种抗肿瘤中药复方软胶囊制剂及其制备方法和应用。

背景技术

全球严重威胁人类健康的疾病已不是急性传染病，而是找不到病原体的非感染性疾病，如癌症、脑血管病，糖尿病等，而这些疾病的前期仅感到身体和精神的不适，即处于亚健康状态。据世界卫生组织调查表明，仅占人口15%的人处于健康状态，患有多种疾病的人也仅占15%，而有60-70%的人处于“亚健康”状态。随着人口密度的增加，生活节奏加快，社会压力的加重，环境污染，生活水平提高，会造成人们负性情绪的积累，加上外界诱因使不少人群由亚健康向不健康发展，特别使人们免疫功能不足或低下，使多种非转染性疾病的发病率与死亡率提高，其中引人注目的有肿瘤和免疫性疾病。如恶性肿瘤现已遍布世界每一角落，据联合国卫生组织报告，1996年全球58亿人中，每年约有590万肿瘤病人，死亡者达430万人，从96年至今，每年新确诊病例达130万，全世界总数至4000万以上，每年死于癌症者达900万以上。

中医药在治疗常见病，疑难杂病，病后康复中发挥了巨大作用，是自然科学领域中最有优势，最具特色的学科，在中药材中有许多中药具有抗癌抑癌作用。特别在如今中医药被广泛用于治疗肿瘤领城中，在西药和放、化疗严重的毒副作用和人们热衷于“回归自然”潮流中，尽量在中医药中寻找出既能杀死或抑制肿瘤细胞，又能尽可不损伤人体正气，提高人体免疫力，达到合理治愈肿瘤的目的，是广大科研工作者的心愿，也是当前迫切要解决的难题。中药中灵芝、人参、黄芪、刺五加、红景天等除了对癌细胞具有杀灭和抑制作用外，它们或与手术治疗结合作用，防止癌症复发转移，尽快恢复机体功能，或与放疗、化疗合用，即可增加疗效又可减轻对人体毒付作用。

基于上述情况需进行了抗肿瘤新药研究，开发了抗肿瘤中药复方软胶囊新药制剂，它不仅对肿瘤细胞有一定杀死作用，而且可提高人体免疫力，增强体质，增加食欲，促进睡眠，有防辐射的功效，还可调节机体功能，改善症状，减少放疗、化疗的毒副作用，达到标本兼治的目的。因此本新药是一味较为理想的中药复方制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种辅助疗效高、毒付作用小的抗肿瘤中药复方软胶囊制剂及其制备方法和应用。

本发明提供的抗肿瘤中药复方软胶囊制剂，充分发挥灵芝孢子粉、人参、黄芪、刺五加、红景天等多种成分、多靶点、多通道协同作用，组成强大的抗肿瘤军团，共同发挥作用。具体配伍按灵芝孢子粉和其余药材饮片重量份计，为：

灵芝孢子粉 5～20；

人参 2～8；

黄芪 5～15；

刺五加 3～7；

红景天 5～18。

上述抗肿瘤中药复方软胶囊制剂的制备方法，具体步骤如下。

（一）中药成分的提取

（1）灵芝孢子精油的超临界流体萃取：

适量的灵芝孢子粉（破壁率98%以上）得细粉，装入SFE萃取罐中，于萃取压力20～35Mpa，萃取温度50～65℃，萃取时间1～3小时，分离得粗油，再分离除去水分得灵芝孢子精油；萃取后灵芝孢子粉残渣备用；

（2）人参、黄芪、刺五加的提取（醇提取）：

取处方量的人参、黄芪、刺五加药材饮片，分别用60～80%乙醇加热回流提取2～3次；每次提取乙醇加入量为药材体积的4～6倍，每次提取90～120分钟，滤过，合并提取液，先真空减压回收溶剂，于60～80℃真空干燥箱干燥，粉碎，过筛，分别得人参、黄芪、刺五加提取物（细粉）；

（3）红景天的提取：

取处方量红景天饮片，用药材4～6倍的70～90%乙醇，加热回流提取2～3小时，滤过，合并滤液，于60～70℃真空回收溶剂，至60～80℃真空干燥箱中干燥，粉碎得红景天提取物细粉；

（4）灵芝孢子多糖的提取（水提）：

灵芝孢子粉萃取后的残渣用PH6的稀HCL水溶液于40～50℃温浸二次，每次1.5～2小时，浸提液合并过滤，滤液常压浓缩，至75～85℃减压干燥箱中干燥，粉碎，得提取物--灵芝孢子多糖（细粉）。

超临界流体萃取技术路线的研究；考察萃取压力、萃取温度、萃取时间的三因素，具体为：萃取压力为25、30、35Mpa，萃取温度为45℃、55℃、65℃，萃取时间为1.5小时、2.0小时、2.5小时，采用正交试验法，使萃取效率从5%，提高到16%左右，使灵芝孢子粉中活性成分十几毫克/克,提高至200毫克/克以上, 再进一步调整使效率稳定在25%左右，大大降低了成本,提高了疗效。本发明得到的最佳提取工艺条件为：萃取压力28～32Mpa,萃取温度50～60℃，时间为100分钟～120分钟。

（二）软胶丸的制备；

（1）将萃取的灵芝孢子精油加热至35～45℃，保温1～3小时，作为胶丸的油相；

（2）将灵芝孢子粉残渣、人参，黄芪、红景天、刺五加的提取物细粉均匀加到油相中，再加入计算量大豆油拌匀；然后加入浓缩磷脂混悬剂和蜂蜡润湿剂，混悬剂和润湿剂的加入量分别为投料量（各成分的总量）2～4% ，充分搅拌均匀，过胶体磨过筛，重复2～4次；

（3）然后在软胶囊设备上制成软胶囊丸，20～30℃放置，整粒，洗涤，吹干，成品包装，

检验；胶囊丸粒重为0.55g/粒。

本发明采用超临界萃取技术和稀醇提取方法，不仅使活性成分充分富集，改变了传统中药黑、大、粗，重金属超标，有机农药残留超限的缺点，提高产品挡次和疗效。

在软胶囊制备中，对混悬剂种类、用量，湿润剂种类和用量进行了充分研究，又采用胶体磨技术，使不同比重固体粉末细度达到微米级，并充分混悬于油相中，使产品质量，胶囊重量差异达到精准要求 提高了溶出速率，使产品容易吸收，提高了生物利用度，增加产品疗效。本发明功效成分总多糖≥40mg/粒，红景天苷≥0.5mg/粒。

本发明提供的抗肿瘤中药复方软胶囊制剂中，灵芝含有多种抗癌的活性成分，如灵芝多糖、总三萜类、蛋白质和锗元素等，可以渗透到癌细胞中，能有效地破坏癌细胞赖以生存疯狂增殖的保护伞（端粒酶的活性），从而使癌细胞无法分裂增殖，直到凋亡，有效率达90%以上。

另外，灵芝孢子粉中多糖、总三萜类等活性成分，可抑制癌细胞DNA 拓朴异构酶（TOPO）的活性，促进DNA断裂，诱导癌细胞凋亡。

人参中也含有许多抗癌活性成分，如人参皂苷、人参多糖等，它们对肿瘤细胞都有 抑制杀灭作用。人参皂苷Rg

具有抑制肿瘤细胞湿润和转移作用：主要作用于细胞增殖的 G2/M期，使肿瘤细胞异常变化而凋亡，人参皂苷Rg3还可抑制肿瘤新生血管形成，而使癌细 胞凋亡。

本发明的抗肿瘤新药中还配伍有中药材黄芪，黄芪中含多糖活性成分，主要为黄芪多糖，三萜皂苷类和多种黄酮类。目前认为，黄芪抗肿瘤作用是多方面的，包括增强抗体免疫功能，直接抑瘤作用，促进肿瘤细胞凋亡，抗肿瘤血管生成等，还可以影响机体氨基酸代谢等。

黄芪多糖能明显提高小鼠脾脑RNA、DNA，和蛋白质含量对瘤性腹水淋巴细胞有激活增强作用，可增强人外周血单个细胞产生肿瘤坏死因子的作用，在体内可增强自然杀伤癌细胞和淋巴因子激活的杀伤细胞毒活性，黄芪中的活性成分多糖等可明显提高机体T细胞，免疫细胞和白细胞介毒的能力，还可增强巨噬细胞，单核巨噬细胞能力，增强对癌细胞杀伤作用。

本发明的抗肿瘤新药中的另一组成分红景天，具有红景天苷等生物活性物质，红景天能明显促进conA对脾细胞的增殖反应，增强脾细胞对1L-2的反应性，增强脾细胞对细胞分泌的淋巴因子1L-2的分泌，从而表现出红景天苷具有明显的免疫功能，提高体液免疫功能发挥抑瘤作用。

本发明的抗瘤新药的另一配伍药材为刺五加，刺五加含活性成分刺五加皂苷，其在体外可抑制肝癌细胞生长，阻碍肝癌细胞DNA合成和有丝分裂，促进肝癌细胞凋亡。刺五加皂苷还能抑制VEGF（血管内皮生长因子）介导的肿瘤新生血管生成，进而抑制肿瘤的生成和转移。

本发明抗癌新药复方制剂不仅君药灵芝，其灵芝孢子粉有明显抗瘤作用，臣药人参的活性成分对肿瘤细胞也有抑制杀死作用，佐药黄芪、红景天，使药刺五加也有抑制杀死肿瘤细胞抗辐射作用。中医药最基本的特色是强调整体观，应用辫证思维遣方用药，发挥诸药间的协同、制约或改性等多种作用，综合发挥多成分、多通道、多靶点协同作战的优势，采用大军团作战策略，围困癌细胞，达到较好的治疗效果，开创中药复方抗肿瘤的新选项。

本发明的抗肿瘤新药可以提高人体免疫力，激活细胞免疫、体液免疫等中的T细胞、B细胞、NK细胞、K细胞、巨噬细胞等，T细胞可杀伤癌细胞，K细胞可产生抗体发挥体液免疫力，NK细胞自然杀伤癌细胞，K细胞对癌细胞有识别和杀伤作用，单核细胞可吞噬癌细胞，巨噬细胞也可吞噬癌细胞，这样可发挥中药复方制剂大兵团协同作用。

动物试验表明，本发明的中药复方软胶囊制剂，既具有增强细胞免疫功能，又具有增强小鼠体液免疫功能，还具有增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能，并有一定抗辐射作用。本品药效显著毒性低微，综合发挥各种成分的协同作用，体现多成分、多通道多靶点协同作战。大大增强人体免疫力，对亚健康人群、年老体弱人群、大病康复人群提高免疫力、增强体质等具有重要作用。

抗肿瘤药效性试验表明，从初步临床观察，本发明的抗肿瘤复方中药制剂不仅可直接抑杀肿瘤细胞，患者“缩小肿块疗效”总有效率达75%。而且可提高免疫功能，毒性小辅助疗效高，使大部分肿瘤患者临床症状减轻，显著增强体质，改善精神面貌，增强食欲，减轻疼痛，白细胞下降等总有效率均在85%以上。

本发明的中药复方软胶囊制剂，用于不能手术治疗的重危晚或高领病人，可以减轻痛苦，提高生活质量，延长寿命。

本发明的中药复方软胶囊制剂，对于手术前癌症病人可直接抑制癌细胞生长，提高机体健康水平，为手术做准备。手术后病人或需放化疗病人，不仅可保护正常细胞，减少毒付作用，而且有增效作用，对康复期病人可以防止残存细胞卷土重来，防止复发，转移。

发明的中药复方软胶囊制剂，按军队医疗机构制剂临床研究要求获南京军区联助部批准临床应用，批准文号为南L2013011,又获解放军总后卫生部批准临床应用，批准文号为总制字（2016）F501010，现正在报送国家医药管理部门，以获国家新药证书。

具体实施方式

实施例1

将破壁率98%以上的灵芝孢子粉，在萃取压力30Mpa，萃取温度55℃，萃取时间为1.5小时下，萃取得到灵芝孢子粉精油，加热至40℃，保温2小时，将用65%乙醇加热回流提取的人参、黄芪、刺五加提取物细粉和用80%乙醇提取红景天提取物加入到油相中搅拌均匀，加入计算量的大豆油，搅拌，再分别加入投料量（各成分的总量）2%的混悬剂浓缩磷脂和湿润剂蜂蜡，充分搅拌均匀，在软胶囊制备设备上制成软胶囊，22℃放置24小时，整粒，洗涤，吹干，成品包装，产品合格率达95%以上。

实施例2

将破壁率98%灵芝孢子粉于萃取压力28Mpa，萃取温度60℃，萃取时间2小时得到的灵芝孢子粉精油加热至40℃，放置3小时，将70%乙醇提取人参，黄芪、刺五加提取物细粉和75%乙醇提取红景天细粉加热油相中，搅拌均匀，加入计算量的大豆油搅匀，再分别加入投料量2.5%的混悬剂浓缩磷脂和润湿剂蜂蜡，充分搅拌，软胶囊设备上制成软胶囊：26℃放置24小时，整粒，洗涤，吹干，成品包装，产品合格率达98%。

本发明制备的中药复方软胶囊制剂，3个优选配伍例子如下（按药材饮片重量份额计）：

1、灵芝孢子粉5，人参2，黄芪5，刺五加3，红景天5；

2、灵芝孢子粉10，人参5，黄芪10，刺五加5，红景天10；

3、灵芝孢子粉20，人参8，黄芪15，刺五加7，红景天18。

按上述方法制得3种中药复方软胶囊制剂，经检测，其质量指标如下。

（一）功效成分指标，见表1；

表1、功效成分指标

。

（二）理化指标，见表2；

表2、理化指标

。

（三）微生物指标，见表3；

表3微生物指标

。

本发明的抗肿瘤复方中药制剂，进行了各种动物试验，具体如下：

1、进行小鼠急性毒性试验，雌雄小鼠经口服，MTD值均大于15000ng/kgb.wf,该新药达到无毒级标准；

进行30天喂养试验；按1833、3667和5500mg/kgb、w/d（相当于推存剂量的50、100、150倍），拌入饲料喂养大鼠30天，对各项受试指标均未检出有害作用。30喂养试验的NOAEL值为5500mg/kg/d；

2、细胞免疫力试验：conAiy诱导小鼠脾淋巴细胞转移试验，中高剂量组具有增强小鼠淋巴细胞增殖能力（P<0.05）.各剂量组DNFB试验，可增强小鼠DNFB引起小鼠迟发性变态（P<0.05.P<0.01）。以上试验证明本发明有增强小鼠细胞免疫功能；

3、抗体性细胞检测和血清溶血素试验：抗体性细胞检测，中、高剂量都具有增强小鼠产生抗体生成细胞的能力（P<0.05、P<0.01）。血清溶血素试验，有增强小鼠产生血清血素能力（P<0.05）。说明本发明可增强小鼠体液免疫功能的作用；

4、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验：中、高剂量吞噬率，吞噬指数均高于对照组（P<0.05,P0.01）,具有增强小鼠单核-具噬细胞吞噬功能的作用。

根据以上动物试验，本发明的抗肿瘤中药复方制剂，既具有增强细胞免疫功能，又具有增强小鼠体液免疫功能，还具有增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能，并有一定抗辐射作用。本品药效显著毒性低微，综合发挥各种成分的协同作用，体现多成分、多通道多靶点协同作战。大大增强人体免疫力，对亚健康人群、年老体弱人群、大病康复人群提高免疫力、增强体质等具有重要作用。

本发明的抗肿瘤复方中药制剂对抗肿瘤药效性进行试验，对S180荷瘤小鼠实体瘤的抑瘤作用和对免疫器官影响的试验结果为：本品低、中、高剂量组抑瘤率分别17.72%（P<0.05）、43.70%(P<0.010)、33.98%（P<0.01）,对照组环磷酰胺88.67%，（P0.001）。而中药对照组结合。环磷酰胺十本品抑瘤率为92.88%。（P<0.001）。

根据我国《新药审批办法》要求，对本发明的抗肿瘤复方中药制剂抗肿制剂进行临床试验（由东部战区总医院肿瘤科进行）；从初步临床观察，本品不仅可直接抑杀肿瘤细胞，患者“缩小肿块疗效”总有效率达75%。而且可提高免疫功能，毒性小辅助疗效高，使大部分肿瘤患者临床症状减轻，显著增强体质，改善精神面貌，增强食欲，减轻疼痛，白细胞下降等总有效率均在85%以上。

本发明的抗肿瘤复方中药制剂，用于不能手术治疗的重危晚或高领病人，可以减轻痛苦，提高生活质量，延长寿命。

本发明的抗肿瘤复方中药制剂，对于手术前癌症病人可直接抑制癌细胞生长，提高机体健康水平，为手术做准备。手术后病人或需放化疗病人，不仅可保护正常细胞，减少毒付作用，而且有增效作用，对康复期病人可以防止残存细胞卷土重来，防止复发，转移。

Claims (5)

1.一种抗肿瘤中药复方软胶囊制剂，其特征在于，充分发挥灵芝、人参、黄芪、刺五加、红景天多种成分、多靶点、多通道协同作用，组成强大的抗肿瘤军团，共同发挥作用；具体配伍按灵芝孢子粉以及其它药材饮片重量份计，为：

灵芝孢子粉 5～20；

人参 2～8；

黄芪 5～15；

刺五加 3～7；

红景天 5～18。

2.根据权利要求1所述抗肿瘤复方软胶囊制剂，其特征在于，优选配伍按按灵芝孢子粉以及其它药材饮片重量份计，为：

（1）灵芝孢子粉5，人参2，黄芪5，刺五加3，红景天5；或

（2）灵芝孢子粉10，人参5，黄芪10，刺五加5，红景天10；或

（3）灵芝孢子粉20，人参8，黄芪15，刺五加7，红景天18。

3. 如权利要求1所述抗肿瘤复方软胶囊制剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为：

（一）中药成分的提取

（1）灵芝孢子精油的超临界流体萃取：

适量的灵芝孢子粉，装入SFE萃取罐中，于萃取压力20～35Mpa，萃取温度50～65℃，萃取时间1～3小时，分离得粗油，再分离除去水分得灵芝孢子精油；萃取后灵芝孢子粉残渣备用；

（2）人参、黄芪、刺五加的提取：

取处方量的人参、黄芪、刺五加药材饮片，分别用60～80%乙醇加热回流提取2～3次；每次提取乙醇加入量为药材体积的4～6倍，每次提取90～120分钟，滤过，合并提取液，先真空减压回收溶剂，于60～80℃真空干燥箱干燥，粉碎，过筛，分别得人参、黄芪、刺五加提取物细粉；

（3）红景天的提取：

取处方量红景天饮片，用药材4～6倍的70～90%乙醇，加热回流提取2～3小时，滤过，合并滤液，于60～70℃真空回收溶剂，至60～80℃真空干燥箱中干燥，粉碎得红景天提取物细粉；

（4）灵芝孢子多糖的提取：

灵芝孢子粉萃取后的残渣用PH6的稀HCL水溶液于40～50℃温浸二次，每次1.5～2小时，浸提液合并过滤，滤液常压浓缩，至75～85℃减压干燥箱中干燥，粉碎，得提取物--灵芝孢子多糖细粉；

（二）软胶丸的制备；

（1）将萃取的灵芝孢子精油加热至35～45℃，保温1～3小时，作为胶丸的油相；

（2）将灵芝孢子粉残渣、人参，黄芪、红景天、刺五加的提取物细粉均匀加到油相中，再加入计算量大豆油拌匀；然后加入浓缩磷脂混悬剂和蜂蜡润湿剂，混悬剂和润湿剂的加入量分别为投料总重量的 2～4% ，充分搅拌均匀，过胶体磨过筛，重复2～4次；

（3）然后在软胶囊设备上制成软胶囊丸，20～30℃放置，整粒，洗涤，吹干，成品包装，胶囊丸粒重为0.55g/粒。

4.根据权利要求3所述抗肿瘤复方软胶囊制剂的制备方法，其特征在于，在灵芝孢子精油超临界流体萃取中，萃取压力为28～32Mpa，温度为50～60℃，时间为100分钟～120分钟。

5.如权利要求1或2所述的抗中药复方软胶囊制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。