CN112014500A - 一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 - Google Patents
一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112014500A CN112014500A CN202010857646.7A CN202010857646A CN112014500A CN 112014500 A CN112014500 A CN 112014500A CN 202010857646 A CN202010857646 A CN 202010857646A CN 112014500 A CN112014500 A CN 112014500A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- formanilinofluorane
- solution
- measuring
- content
- fluorane
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 40
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims abstract description 33
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 22
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 5
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 31
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 31
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 31
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 22
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 13
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 27
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 125000002490 anilino group Chemical group [H]N(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003014 ion exchange membrane Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- MSNBQCMNPBSSEQ-UHFFFAOYSA-N n-fluoro-n-phenylformamide Chemical class O=CN(F)C1=CC=CC=C1 MSNBQCMNPBSSEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012421 spiking Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
- G01N2030/047—Standards external
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
一种N‑甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，包括如下步骤：分别配制不同浓度的N‑甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和N‑甲酰苯胺基荧烷样品溶液；标准曲线的建立：利用液相色谱测定不同浓度的N‑甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的色谱峰，以N‑甲酰苯胺基荧烷浓度为横坐标，HPLC色谱峰为纵坐标，建立标准曲线；样品溶液中N‑甲酰苯胺基荧烷含量的测定：利用HPLC检测不同浓度的N‑甲酰苯胺基荧烷样品溶液，并记录色谱峰，根据标准曲线计算N‑甲酰苯胺基荧烷的含量。本发明采用高效液相色谱法检测样品中的N‑甲酰苯胺基荧烷，并定性、定量的计算N‑甲酰苯胺基荧烷的含量，测定结果准确度高，测定误差小。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用高效液相色谱测定N-甲酰苯胺基荧烷含量的方法，属于化学分析技术领域。
背景技术
荧烷类功能色素是热敏成色剂的主流功能染料，具有结构稳定和成色画面保存稳定性好的特点，常见的色谱系列是在荧烷的氨基上引入不同的取代基团分别得到颜色各异的荧烷，化学结构通式如下式1所示，在苯胺基上引入甲酰基，得到一种灵敏度高、配伍性好的新型的荧烷类成色剂N-甲酰苯胺基荧烷，化学结构通式如下式2所示。
N-甲酰苯胺基荧烷应用效果优良，需求量较大，但是在成色添加剂配方中，其加入量影响成色添加剂的光亮性和稳定性等性能，因此N-甲酰苯胺基荧烷的含量对产品的质量控制有重要的影响，其也是对产品质量控制的一个重要指标，准确测定N-甲酰苯胺基荧烷含量很有必要。然而，现有技术中对N-甲酰苯胺基荧烷的含量检测方法鲜有报道，也没有相关的标准发布。因此，提出一种准确、简单的N-甲酰苯胺基荧烷的检测方法，对于测定N-甲酰苯胺基荧烷的含量至关重要。
发明内容
本发明为克服现有技术弊端，提供一种N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，本发明采用高效液相色谱法检测样品中的N-甲酰苯胺基荧烷，并定性、定量的计算N-甲酰苯胺基荧烷的含量，测定结果准确度高，测定误差小。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，利用液相色谱法分离样品中N-甲酰苯胺基荧烷和杂质，根据N-甲酰苯胺基荧烷标准曲线计算N-甲酰苯胺基荧烷的含量，包括如下步骤：
a、分别配制不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液；
b、标准曲线的建立：利用液相色谱测定不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的色谱峰，以N-甲酰苯胺基荧烷浓度为横坐标，HPLC色谱峰为纵坐标，建立标准曲线；
c、样品溶液中N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定：利用HPLC检测不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，并记录色谱峰，根据标准曲线计算N-甲酰苯胺基荧烷的含量。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述步骤b和c中，所述高效液相色谱检测条件的选定：
色谱柱：选用以硅胶为基质健合的十八烷基硅烷为填料柱；
流动相：所述流动相由乙腈和醋酸铵缓冲溶液混合而成，醋酸铵缓冲溶液为醋酸铵水溶液，其pH值为6～7，醋酸铵的浓度为1.54～6.16g/L；
紫外检测器的检测波长为200～256nm；
流速：0.5～2mL/min；
柱温：25～60℃；
进样量：10uL。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述流动相中乙腈和醋酸铵缓冲溶液的体积比为(95～70)：(5～30)，两者体积之和为一百份。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述醋酸铵缓冲溶液的pH值为6.8，其浓度为3.85g/L
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的配制过程为：将纯度≥99.50％的N-甲酰苯胺基荧烷固体用所述流动相溶解，配制成浓度为10mg/mL的溶液，经过过滤后，制得N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液；用流动相将所述N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液稀释成0.01～5mg/mL之间不同浓度梯度的标准溶液。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液的配制：将N-甲酰苯胺基荧烷样品采用所述流动相溶解后，在25～40℃下超声30～60min，得到N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，其浓度为1.0mg/mL。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，HPLC检测前，所述醋酸铵缓冲溶液经过0.45μm水系过滤膜过滤；所述乙腈经过0.45μm的有机滤膜过滤；将所述N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和所述N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液分别为经过0.2μm的有机过滤膜过滤。溶液采用过滤膜过滤以减少在检测过程中溶液中的杂质，提高检测结果的准确性。
上述N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，所述色谱柱为C18色谱柱或者ODS色谱柱。
本发明的有益效果是：
本发明通过高效液相色谱法(HPLC)测定样品中N-甲酰苯胺基荧烷的含量，控制色谱检测条件，且选定乙腈和醋酸铵缓冲溶液作为流动相，将N-甲酰苯胺基荧烷色谱峰与样品中的杂质峰很好的分离，并根据标准曲线，准确测定样品中N-甲酰苯胺基荧烷的含量，测定结果准确度高，精密度小于1.00％，灵敏度高，保证了生产中产品的质量。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明。
图1为本发明实施例1N-甲酰苯胺基荧烷标准品的高效液相色谱图；
图2为实施例1N-甲酰苯胺基荧烷样品的高效液相色谱图；
图3为实施例2N-甲酰苯胺基荧烷标准品的高效液相色谱图；
图4为对比例N-甲酰苯胺基荧烷样品的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
N-甲酰苯胺基荧烷为R1为C4烷烃，R2为C4烷烃的化合物。
本发明中，流动相由乙腈和醋酸铵缓冲溶液混合而成，醋酸铵水溶液采用超纯水配制，如选择三重纯水蒸馏器或带有离子交换膜的纯水机制造的超纯水。N-甲酰苯胺基荧烷极性较强，在C18柱上容易形成次级吸收，流动相中添加醋酸铵作为改良剂，抑制N-甲酰苯胺基荧烷样品的离子化，降低次级吸收，改善峰型，提高分离度，防止被分离的各物质峰型异常影响定量。
N-甲酰苯胺基荧烷在乙腈中的溶解性较好，水中几乎不溶，因此，配制流动相时要控制乙腈与醋酸铵缓冲溶液的体积比为(95～70)：(5～30)，保证N-甲酰苯胺基荧烷样品在流动相中溶解良好，能够完全在硅胶柱上进行分离和通过检测器检出。高效液相色谱操作时，进样体积采用自动进样器定量进样，通过优化色谱条件，以获得N-甲酰苯胺基荧烷较佳的出峰时间和良好的分离效果。
实施例1
(一)HPLC检测条件：
色谱柱：Inertsil ODS-3，5μm，250mm×4.6mm；
流动相：乙腈与醋酸铵缓冲溶液的体积比为90:10，醋酸铵的浓度为3.85g/L，缓冲溶液的pH值为6.8；
紫外检测器的检测波长为254nm；
流速：1.0mL/min；
柱温：40℃；
进样量：10μL。
(二)流动相的配制：精准量取3.85g的醋酸铵固体颗粒于烧杯中，加入100mL水，待完全溶解后转移至1L容量瓶中，用纯水定容后，经过0.45μm水系膜过滤，制得醋酸铵缓冲溶液备用；将乙腈经过0.45μm有机膜过滤后，将乙腈和醋酸铵缓冲溶液按照体积比为90:10的比例混合均匀，用超声清洗器脱气半小时后制得流动相。
(三)N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和样品溶液的配制：
精准称取500mg含量为99.5％的N-甲酰苯胺基荧烷固体用流动相溶解，盛于50mL容量瓶中，用流动相定容，配制成浓度为10mg/mL的溶液，经过0.2μm的有机膜过滤后，制得N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液；精准称取50mg的N-甲酰苯胺基荧烷样品用流动相溶解，并盛于50mL的容量瓶中，用流动相定容，在25℃下超声20min后，配制成浓度为1.0mg/mL的溶液，经过0.2μm的有机滤膜过滤后，制得N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液。
(四)标准曲线测定
测定N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的高效液相色谱图，见图1，确定N-甲酰苯胺基荧烷的保留时间为9.758min；再精密量取N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，置于容量瓶中，用流动相稀释定容，分别配制成质量浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.25mg/mL、1.5mg/mL、1.75mg/mL、2.0mg/mL、3.0mg/mL的标准溶液，按上述色谱条件测定，每份标准溶液测定3次，取峰面积的平均值，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程，得到线性回归方程为：y＝1.0e+07x+18762，R2＝1。
(五)N-甲酰苯胺基荧烷样品浓度测定
按上述色谱条件测定N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，参看图2得到样品色谱峰，可以看到N-甲酰苯胺基荧烷与杂质峰完全分离，记录N-甲酰苯胺基荧烷峰面积，通过标准曲线计算得出：N-甲酰苯胺基荧烷的质量浓度为1.0007mg/mL，即N-甲酰苯胺基荧烷样品质量分数为99.57％。
(六)精密度试验
取质量溶度为1.0mg/mL N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，摇匀，取该标准溶液重复进样6次，所得平均值为0.9950mg/mL，精密度RSD 0.55％，符合要求。
(七)回收率试验
分别精确量取5份质量浓度为0.5mg/mL的N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液2mL，每份中分别加入2mL浓度分别为0mg/mL、0.2mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，分别按上述色谱条件测定5份溶液中N-甲酰苯胺基荧烷的含量，计算回收率，回收率均在99％以上，符合要求，结果见表1。
表1 加标回收率计算结果
| 加标前量(μg) | 标准加入量(μg) | 加标后量(μg) | 测得总量(μg) | 回收率(％) |
| 4.975 | 0.9957 | 5.9725 | 5.9617 | 99.1 |
| 4.975 | 2.4893 | 7.4343 | 7.4593 | 99.8 |
| 4.975 | 4.9785 | 9.9535 | 9.9620 | 100.2 |
| 4.975 | 7.4678 | 12.4428 | 12.3905 | 99.3 |
表中：加标前量＝空白加标溶液质量浓度的测定值×进样量；标准加入量＝标准溶液质量浓度×进样量÷2；加标后量＝加标前量+标准加入量；回收量＝加标溶液质量浓度的测定值×进样量；回收率＝(测得总量-加标前量)÷标准加入量×100％。
实施例2
(一)HPLC检测条件：
色谱柱：Inertsil ODS-3，5μm，250mm×4.6mm；
流动相：乙腈与醋酸铵缓冲溶液的体积比为95:5，醋酸铵的浓度为3.85g/L，缓冲溶液的pH值为6.8；
紫外检测器的检测波长为254nm；
流速：1.0mL/min；
柱温：25℃；
进样量：10μL。
(二)流动相的配制：醋酸铵缓冲溶液和乙腈溶液处理方法同实施例1，区别在于，将乙腈和醋酸铵缓冲溶液按照体积比为95:5的比例混合均匀，用超声清洗器脱气半小时后制得流动相。
(三)N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和样品溶液的配制：制备过程同实施例1。
(四)标准曲线测定
测定N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的高效液相色谱图，见图3，确定N-甲酰苯胺基荧烷的保留时间为10.076min；再精密量取N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，置于容量瓶中，用流动相稀释定容，分别配制成质量浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.25mg/mL、1.5mg/mL、1.75mg/mL、2.0mg/mL、3.0mg/mL的标准溶液，按上述色谱条件测定，每份标准溶液测定3次，取峰面积的平均值，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程，得到线性回归方程为：y＝1.0e+07x+88449，R2＝1。
(五)N-甲酰苯胺基荧烷样品浓度测定
按上述色谱条件测定N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，记录其峰面积，通过标准曲线计算得出：N-甲酰苯胺基荧烷的质量浓度为0.9995mg/mL，即N-甲酰苯胺基荧烷样品质量分数为99.45％。
(六)精密度试验
取质量溶度为1.0mg/mL N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，摇匀，取该标准溶液重复进样6次，所得平均值为0.9953mg/mL，精密度RSD 0.85％，符合要求。
(七)回收率试验
分别精确量取5份质量浓度为0.5mg/mL的N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液2mL，每份中分别加入2mL浓度分别为0mg/mL、0.2mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液，分别按上述色谱条件测定5份溶液中N-甲酰苯胺基荧烷的含量，计算回收率，回收率均在99％以上，符合要求，结果见表2，表2中各项计算方法同表1。
表2 加标回收率计算
| 加标前量(μg) | 标准加入量(μg) | 加标后量(μg) | 测得总量(μg) | 回收率(％) |
| 4.973 | 0.9957 | 5.9687 | 5.9637 | 99.5 |
| 4.973 | 2.4893 | 7.4623 | 7.4673 | 100.2 |
| 4.973 | 4.9785 | 9.9515 | 9.9665 | 100.3 |
| 4.973 | 7.4678 | 12.4408 | 12.3885 | 99.3 |
对比例1
(一)HPLC检测条件：
色谱柱：Inertsil ODS-3，5μm，250mm×4.6mm；
流动相：乙腈与纯水的体积比为70:30；
紫外检测器的检测波长为254nm；
流速：1.5mL/min；
柱温：25℃；
进样量：10μL。
(二)将乙腈和纯水按照体积比为70:30的比例混合均匀，经过0.45μm有机膜过滤后，用超声清洗器脱气半小时后制得流动相。
(三)N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和样品溶液的配制：
精准称取50mg的N-甲酰苯胺基荧烷样品用流动相溶解，并盛于50mL的容量瓶中，用流动相定容，在25℃下超声20min后，配制成浓度为1.0mg/mL的溶液，经过0.2μm的有机滤膜过滤后，制得N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液。
(四)N-甲酰苯胺基荧烷样品浓度测定
按上述色谱条件测定N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，参看图4得到样品色谱峰，可以看到N-甲酰苯胺基荧烷峰型不对称且有拖尾，杂质峰型有鼓包和包夹现象，无法准确定量。
由于N-甲酰苯胺基荧烷类化合物是在荧烷的氨基上引入甲酰基，其分子的极性增加，pH值降低，溶解度降低，此时，若采用常规的高压液相色谱检测条件对N-甲酰苯胺基荧烷类化合物进行检测，即利用不同配比的乙腈和水的混合物作为流动相，收集的液相图谱峰型不对称，且对临近杂质峰有包夹现象，得到的检测结果偏差会较大。
利用此方法可以检测N-甲酰苯氨基荧烷类化合物的含量。
Claims (8)
1.一种N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：利用液相色谱法分离样品中N-甲酰苯胺基荧烷和杂质，根据N-甲酰苯胺基荧烷标准曲线计算N-甲酰苯胺基荧烷的含量，包括如下步骤：
a、分别配制不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液；
b、标准曲线的建立：利用液相色谱测定不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的色谱峰，以N-甲酰苯胺基荧烷浓度为横坐标，HPLC色谱峰为纵坐标，建立标准曲线；
c、样品溶液中N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定：利用HPLC检测不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，并记录色谱峰，根据标准曲线计算N-甲酰苯胺基荧烷的含量。
2.根据权利要求1所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述步骤b和c中，所述高效液相色谱检测条件的选定：
色谱柱：选用以硅胶为基质健合的十八烷基硅烷为填料柱；
流动相：所述流动相由乙腈和醋酸铵缓冲溶液混合而成，醋酸铵缓冲溶液为醋酸铵水溶液，其pH值为6～7，醋酸铵的浓度为1.54～6.16g/L；
紫外检测器的检测波长为200～256nm；
流速：0.5～2mL/min；
柱温：25～60℃；
进样量：10uL。
3.根据权利要求2所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述流动相中乙腈和醋酸铵缓冲溶液的体积比为(95～70)：(5～30)，两者体积之和为一百份。
4.根据权利要求3所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述醋酸铵缓冲溶液的pH值为6.8，其浓度为3.85g/L 。
5.根据权利要求4所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述不同浓度的N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液的配制过程为：将纯度≥99.50％的N-甲酰苯胺基荧烷固体用所述流动相溶解，配制成浓度为10mg/mL的溶液，经过过滤后，制得N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液；用流动相将所述N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液稀释成0.01～5mg/mL之间不同浓度梯度的标准溶液。
6.根据权利要求5所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液的配制：将N-甲酰苯胺基荧烷样品采用所述流动相溶解后，在25～40℃下超声30～60min，得到N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液，其浓度为1.0mg/mL。
7.根据权利要求6所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：HPLC检测前，所述醋酸铵缓冲溶液经过0.45μm水系过滤膜过滤；所述乙腈经过0.45μm的有机滤膜过滤；将所述N-甲酰苯胺基荧烷标准品溶液和所述N-甲酰苯胺基荧烷样品溶液分别为经过0.2μm的有机过滤膜过滤。
8.根据权利要求7所述的N-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法，其特征在于：所述色谱柱为C18色谱柱或者ODS色谱柱。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010857646.7A CN112014500A (zh) | 2020-08-24 | 2020-08-24 | 一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010857646.7A CN112014500A (zh) | 2020-08-24 | 2020-08-24 | 一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112014500A true CN112014500A (zh) | 2020-12-01 |
Family
ID=73505703
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010857646.7A Pending CN112014500A (zh) | 2020-08-24 | 2020-08-24 | 一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112014500A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5338866A (en) * | 1991-12-12 | 1994-08-16 | Yamamoto Chemicals, Inc. | Crystal modification of 2-(3-methylanilino)-3-methyl-6-diethylaminofluoran, process for the preparation thereof, and recording materials containing said crystal modification |
| CN102775810A (zh) * | 2012-07-23 | 2012-11-14 | 烟台大学 | 一种荧烷类成色剂及其制备方法 |
| US20170190199A1 (en) * | 2014-05-28 | 2017-07-06 | Papierfabrik August Köhler Se | Heat-sensitive recording material |
-
2020
- 2020-08-24 CN CN202010857646.7A patent/CN112014500A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5338866A (en) * | 1991-12-12 | 1994-08-16 | Yamamoto Chemicals, Inc. | Crystal modification of 2-(3-methylanilino)-3-methyl-6-diethylaminofluoran, process for the preparation thereof, and recording materials containing said crystal modification |
| CN102775810A (zh) * | 2012-07-23 | 2012-11-14 | 烟台大学 | 一种荧烷类成色剂及其制备方法 |
| US20170190199A1 (en) * | 2014-05-28 | 2017-07-06 | Papierfabrik August Köhler Se | Heat-sensitive recording material |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 王永安: "荧烷功能染料的合成及性能研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（硕士）工程科技I辑》 * |
| 王永安等: "3-二乙氨基-7-氯荧烷的合成研究", 《浙江化工》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20080206883A1 (en) | Hplc method for separation and detection of hydromorphone and related opioid pharmacophores | |
| CN109870528B (zh) | 一种高效液相色谱法测定阿奇霉素胶囊有关物质的方法 | |
| CN109444282B (zh) | 液相色谱测定大庆油田石油磺酸盐样品中活性物含量的方法 | |
| CN111721845B (zh) | 一种吸入用复方异丙托溴铵溶液五种有关物质同步检测法 | |
| CN111579704A (zh) | 检测复方氨基酸注射液中n,n’-二乙酰-l-胱氨酸含量的方法 | |
| CN113804792B (zh) | 一种检测5-对硝基苯基糠醛有关物质的方法 | |
| CN113533578A (zh) | 一种盐酸溴己新片中有关物质的质量控制方法 | |
| CN114646701B (zh) | 一种l-脯氨酰胺中有关物质的hplc测试方法 | |
| CN112014500A (zh) | 一种n-甲酰苯胺基荧烷含量的测定方法 | |
| CN110954629A (zh) | 一种呋塞米中糠胺含量测定的控制方法 | |
| CN116297978A (zh) | Hplc法分离测定泊沙康唑z3及其杂质与溶剂的方法 | |
| CN115616133A (zh) | 一种复方氨基酸注射液中半胱氨酸的检测方法及其应用 | |
| CN110988200B (zh) | 注射用重组人特立帕肽中咪唑残留的分析方法 | |
| CN112285248A (zh) | 一种亚硝酸盐的检测方法 | |
| CN111337620A (zh) | 一种检测复方氨基酸注射液中3-氨基-2-哌啶酮含量的方法 | |
| CN111089906B (zh) | 一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法 | |
| CN117310022B (zh) | 一种分离和检测乌美溴铵中间体奎宁环二苯甲醇有关物质的方法 | |
| RU2621645C1 (ru) | Способ одновременного определения примесей этилендиаминтетрауксусной кислоты, диметилсульфоксида и n-этилмалеимида в фармацевтических субстанциях методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии | |
| WO2024109016A1 (zh) | 高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法 | |
| CN114200067B (zh) | 一种6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法 | |
| CN114441682B (zh) | 一种水果蔬菜中对苯基苯酚高效液相色谱法快速测定方法 | |
| CN112858524B (zh) | 一种依匹哌唑有关物质的检测方法和应用 | |
| CN117310021B (zh) | 一种高效液相色谱法分离和检测乌美溴铵有关物质的方法 | |
| CN116930368B (zh) | 一种司替戊醇异构体的检测方法 | |
| CN116879428B (zh) | 一种L-α-甘磷酸胆碱中磷酸胆碱残留含量的高效液相分析方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20201201 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |