CN111990258B - 喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，具体步骤是将喜马拉雅紫茉莉种子消毒，无菌萌发、培养至生根并长出真叶；然后将得到的真叶，接种于再生培养基上，诱导愈伤组织，然后诱导出叶芽，生根即可；所述再生培养基为MS+2mg/L 6‑BA+1mg/L IAA+2mg/LZT；该方法简单，可短时间内获得大规模喜马拉雅紫茉莉种苗，对喜马拉雅紫茉莉人工种植具有重要意义。

Description

喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法
技术领域
本发明涉及植物组培领域，具体涉及喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法。
背景技术
藏医药位列我国四大民族医药之首，是西藏优秀的民族文化资源、重要的医疗卫生资源和价值巨大的经济资源，已成为西藏支柱产业之一。藏药材是藏医药事业健康可持续发展的重要物质基础和宝贵资源。
喜马拉雅紫茉莉系紫茉莉科植物，属最常用藏药材之一。具有温肾、生肌、利尿、排石、干“黄水”之功效，同时还具有治疗胃寒、肾寒、下身寒、阳痿、浮肿、结石、腰痛、关节痛等疾病的作用。由于喜马拉雅紫茉莉是以根入药，长期采挖喜马拉雅紫茉莉，已经导致原生环境遭到破坏，喜马拉雅紫茉莉野生资源已经处于极度匮乏状态，供不应求的状态，国家相关部门将喜马拉雅紫茉莉列入了一级濒危藏药材行列。并且，随着藏药材产业发展形势良好，野生资源越来越少。
因此，急需建立人工种植喜马拉雅紫茉莉，而种子种苗规模化繁育方法是人工种植的前提条件。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
1、喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，具体步骤如下：
(1)取喜马拉雅紫茉莉种子消毒，无菌萌发、培养至生根并长出真叶；
(2)取步骤(1)中得到的真叶，接种于再生培养基上，诱导愈伤组织，然后诱导出叶芽，生根即可；所述再生培养基为MS+2mg/L 6-BA+1mg/L IAA+2mg/LZT。
优选的，步骤(1)中，所述消毒为先用体积分数为75％的乙醇消毒1min，灭菌水冲洗后，再用质量分数为2.5％次氯酸钠消毒处理15min.。
优选的，步骤(1)中，消毒之前还包括将种子经流水浸泡1h，然后剥去种皮。
优选的，步骤(1)中，所述无菌萌发是将消毒的种子接种于MS固体培养基上培养。
优选的，步骤(2)中，接种前包括将真叶剪成1cm2大小。
本发明的有益效果在于：本发明公开了喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，通过组织培养建立喜马拉雅紫茉莉无菌苗，然后诱导愈伤，接着诱导出芽，生根培养获得喜马拉雅紫茉莉种苗，该方法简单，30d左右即可从叶片诱导生根的喜马拉雅紫茉莉无菌苗，可用于喜马拉雅紫茉莉的快速繁殖单一遗传背景材料后进行大规模制种，并且适合规模化培养，为喜马拉雅紫茉莉人工种植提供优势种子。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1为喜马拉雅紫茉莉无菌苗的培养结果图(A：种子萌发；B和C：生根培养)。
图2为喜马拉雅紫茉莉再生体系的建立(A：选取叶片作为外植体；B：诱导愈伤组织； C：诱导出叶芽；D：诱导生根)。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
实施例1、喜马拉雅紫茉莉无菌苗的培养
利用种子萌发的方法得到喜马拉雅紫茉莉无菌苗，具体方法如下：选优质饱满种子，经流水浸泡1h后，剥去种皮，先用75％乙醇消毒1min，灭菌水冲洗后，再用2.5％次氯酸钠消毒处理15min，灭菌水冲洗后，吸干水分，将种子接种于MS固体培养基上，5d即可生根，15d即可长出真叶，结果如图1所示。
结果显示，使用本实施例的方法种子萌发率为85％，没有出现病菌感染。
实施例2、喜马拉雅紫茉莉再生体系的建立
为选取适宜的外植体作为再生材料，比较喜马拉雅紫茉莉无菌苗的叶片、叶柄、腋芽、茎段的再生能力，具体方法如下：
分别以叶片、叶柄、腋芽、茎段为材料，然后分别接种至B5、1/2B5、MS、1/2MS、White，然后用不同浓度的6-BA、IAA、ZT激素进行诱导再生，具体条件如表1所示：
表1、喜马拉雅紫茉莉再生体系培养
Figure BDA0002667082080000021
Figure BDA0002667082080000031
结果显示，取无菌苗顶端幼嫩的叶片作为再生材料，剪成1cm2大小，接种于MS+2mg/L 6-BA+1mg/L IAA+2mg/LZT的再生培养基上，10d左右叶片形成愈伤组织，20d左右诱导出叶芽，30d左右即可诱导生根。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

Claims (5)

1.喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)取喜马拉雅紫茉莉种子消毒，无菌萌发、培养至生根并长出真叶；
(2)取步骤(1)中得到的真叶，接种于再生培养基上，诱导愈伤组织，然后诱导出叶芽，生根、炼苗 ；所述再生培养基为MS+2mg/L 6-BA+1mg/L IAA+2mg/L ZT。
2.根据权利要求1所述喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，其特征在于：步骤(1)中，所述消毒为先用体积分数为75％的乙醇消毒1min，灭菌水冲洗后，再用质量分数为2.5％次氯酸钠消毒处理15min。
3.根据权利要求1所述喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，其特征在于：步骤(1)中，消毒之前还包括将种子经流水浸泡1h，然后剥去种皮。
4.根据权利要求1所述喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，其特征在于：步骤(1)中，所述无菌萌发是将消毒的种子接种于MS固体培养基上培养。
5.根据权利要求1所述喜马拉雅紫茉莉种苗规模化繁育方法，其特征在于：步骤(2)中，接种前包括将真叶剪成1cm2大小。
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