CN111978156B - 一种制备大麻二酚的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种制备大麻二酚的方法。所述方法为：采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离，得到高纯度大麻二酚；所述超临界流体色谱中的流动相为添加有改性剂的超临界二氧化碳。该方法能够高效简单地分离出高纯度的大麻二酚，可显著降低其主要杂质次大麻二酚的含量，大麻二酚的纯度高达97.59％‑99.89％，上样量大，分离周期短，显著地提高了综合收率，有机溶剂残留低，同时，该方法适用于各类含有大麻二酚的样品的分离纯化，也适用于工业放大生产，适用范围很广。

Description

一种制备大麻二酚的方法
技术领域
本发明属于工业提取技术领域，具体涉及一种制备大麻二酚的方法，尤其涉及一种利用超临界流体色谱法制备高纯度大麻二酚的方法。
背景技术
大麻酚类化合物是大麻植株中含有的一类活性物质，主要有四氢大麻酚(THC)、四氢大麻素(THCV)、大麻二酚(CBD)、大麻萜酚(CBG)、次大麻二酚(CBDV)等成分，这五者占大麻酚类化合物的90％以上。大麻二酚(CBD)为植株中最重要的非成瘾性成分之一，具有抗痉挛、抗风湿性关节炎、抗焦虑等药理活性，且能阻碍四氢大麻酚(THC)对人体神经系统的不良影响，成为药物开发的热点。然而，这几种大麻酚本身性质极为相近，需要昂贵的特殊介质或者其他特殊手段譬如衍生化或结晶才能达到彻底分离。但现有CBD纯化工艺大多需要消耗大量的有机溶剂，且后续处理耗时耗力，综合收率并不理想。
CN109053388A公开了一种提取大麻二酚的方法，该方法的操作步骤包括：将大麻植株的花叶干燥处理，再研磨粉碎，粉碎的粗粉和溶剂在逆流浸取装置中二者以相对的方向进行逆流浸取，使溶剂将粗粉中的有效成分浸取出提取液；将提取液减压加热，挥发掉提取液中多余的乙醇，得到大麻二酚的浓缩液；在大麻二酚的浓缩液中加入纯水稀释后，采用层析柱进行梯度洗脱，收集目标洗脱液；合并目标洗脱液，于50-70℃减压浓缩，得到大麻二酚的二次浓缩液；在大麻二酚的二次浓缩液中加入90％w/w的乙醇过饱和溶液，获得结晶物后用纯水洗涤干燥后即得大麻二酚产品。
CN109796311A公开了一种从废弃试剂中提纯大麻二酚的方法，1)将制备大麻二酚CBD过程中的提取废液经有机溶剂浸提，浸提液经微滤膜过滤；2)将滤液与体积分数为88.00％-99.95％的乙醇溶液混合，混合液经超滤膜过滤，获得含有四氢大麻酚的截留液与含有大麻二酚的滤液，截留液经浓缩后获得四氢大麻酚浸膏；3)将含有大麻二酚的滤液与体积分数为65.00％-85.00％的乙醇溶液混合，经纳滤膜过滤，获得含有大麻二酚的截留液，经浓缩后获得大麻二酚浸膏。
CN108640820A公开了一种工业制备生产大麻二酚的制备方法，包括如下步骤：步骤1，以工业大麻为原料，乙醇和水为溶剂，经萃取及水提取，得到含有原料成分的滤液；步骤2，所得滤液经薄膜蒸发器进行溶剂回收，得到浸膏，对浸膏进行蒸馏得到大麻二酚富集物；步骤3，利用柱层析方式将大麻二酚富集物中的大麻二酚分离纯化出来。
但现有CBD纯化工艺大多需要消耗大量的有机溶剂，且后续处理耗时耗力，综合收率并不理想。因此，开发出一种能够高效简单地制备高纯度大麻二酚的方法是非常有意义的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种制备大麻二酚的方法，尤其提供一种利用超临界流体色谱法(SFC)制备高纯度大麻二酚的方法。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种制备大麻二酚的方法，所述方法为：采用超临界流体色谱法(SFC)对含有大麻二酚的样品溶液进行分离，得到高纯度大麻二酚；所述超临界流体色谱中的流动相为添加有改性剂的超临界二氧化碳。
本发明所涉及的方法能够高效简单地分离出高纯度的大麻二酚，显著降低其主要杂质次大麻二酚的含量，大麻二酚的纯度高达97.59％-99.89％，上样量大，分离周期短，，显著地提高了综合收率，有机溶剂残留低，同时，该方法适用于各类含有大麻二酚的样品的分离纯化，也适用于工业放大生产，适用范围很广。
优选地，所述改性剂包括烷烃、卤代烷烃或酯类化合物中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如烷烃和卤代烷烃的组合、卤代烷烃和酯类化合物的组合、烷烃或酯类化合物的组合等。
所述烷烃例如石油醚、正己烷、正庚烷等。
所述卤代烷烃例如二氯乙烷、三氯乙烷等。
所述酯类化合物例如乙酸乙酯等。
优选地，所述改性剂包括水和/或醇类化合物。
大麻二酚分子中同时含有键合与未键合的羟基，即可以形成分子内和分子间的氢键，当流动相中添加有含有羟基的水和/或醇类化合物，可以进一步增加样品溶液中溶质之间在色谱柱中迁移能力的差异，不仅能进一步增加分离时的上样量，还能显著提升分离纯度。
大麻二酚分子中存在羟基同时具有非极性的戊基，使其在非极性溶剂或极性溶剂中均是可溶的。
优选地，所述醇类化合物包括甲醇和/或乙醇。
优选地，所述改性剂在流动相中的质量百分比为5-95％，例如5％、10％、20％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％或95％等。
优选地，所述水和/或醇类化合物在在流动相中的质量百分比为0.5-15％，例如0.5％、1％、2％、4％、5％、6％、8％、10％、12％、14％或15％等。
所述水和/或醇类化合物在在流动相中的质量百分比特定选择为0.5-15％范围，若低于0.5％则分离效果基本无改善，若超过15％则会导致分离的失败，使得各组分快速被洗脱下来，达不到预期分离目的。
在本发明中，所述超临界流体色谱中使用的固定相包括纯硅胶和/或基团键合的硅胶。
优选地，所述基团键合的硅胶包括啉醚基键合硅胶或糖基键合硅胶。
优选地，所述样品进行分离时的柱温为20-50℃，例如20℃、22℃、24℃、25℃、28℃、30℃、35℃、38℃、40℃、45℃或50℃等，优选30-45℃。
所述柱温的取值范围特定选择在20-50℃内，超过此温度范围或小于此温度范围均会使大麻二酚的分离效果大大降低。
优选地，所述样品进行分离时的背压为10-25MPa，例如10MPa、12MPa、13MPa、14MPa、15MPa、16MPa、18MPa、20MPa或25MPa等，优选12-18MPa。
优选地，所述样品进行分离时流动相的流速为1-40mL/min，例如1mL/min、2mL/min、5mL/min、10mL/min、20mL/min、35mL/min或40mL/min等，优选2-35mL/min。
在本发明中，所述含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将样品直接溶解得到。
优选地，含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将含有大麻二酚的样品进行至少1次转溶，得到样品转溶液。所述转溶是指将目标成分从固体或半固体中以适宜的溶剂浸渍溶出的过程。
优选地，含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将含有大麻二酚的样品进行至少1次萃取，得到样品萃取液。
所述转溶或萃取的次数可以为1次、2次、3次、4次、5次、6次等。
优选地，所述采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离之前，对含有大麻二酚的样品溶液进行预处理，所述预处理的方法为：将样品溶液进行微孔过滤，得到滤液。
所述微孔的孔径范围为0.22-10μm。
优选地，所述采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离之前，对含有大麻二酚的样品溶液进行预处理，所述预处理的方法为：将样品溶液使用萃取柱进行洗脱，得到脱色液。
所述萃取柱可以采用径高比1:(1-3)的硅胶固相萃取柱，以有机溶媒洗脱得脱色液，所述有机溶媒可以选自石油醚、正己烷、正庚烷、二氯甲烷、乙酸乙酯等。上述步骤中，当转溶液或萃取液比较浑浊，且色素、油脂、蜡质较重时，则采用硅胶固相萃取法进行，可除去大部分杂质。
优选地，所述得到高纯度大麻二酚后对其进行后处理操作，所述后处理操作包括：将大麻二酚先减压浓缩，然后真空干燥。
所述减压浓缩的温度为30-70℃；所述减压浓缩的终点为冷凝器已无水滴馏分蒸出；所述真空干燥的温度为35-55℃；所述真空干燥的时间为6-24h。
本发明所涉及的含有大麻二酚的样品可以是不同来源不同纯度的大麻二酚粗品形式，例如大麻二酚浸膏、大麻二酚油浸膏、大麻二酚发酵液等等。其中大麻二酚浸膏是对新鲜或烘干的工业大麻植株，进行的浸提、渗漉或超声辅助等提取，浓缩至无水状态的物料；大麻二酚油浸膏来自于火麻油、橄榄油等食用油在室温至100℃浸渍提取所得的物料；大麻二酚发酵液来自于经基因工程改良后的大麻同科属植物的组织培养或悬浮细胞，产生的次生代谢产物大麻二酚的培养液，直接浓缩或萃取富集得到的物料。
本发明所涉及的分离纯化方法适用于等度洗脱或梯度洗脱。在接收大麻二酚组分时，其目标峰的定位是以大麻二酚标准品在相同条件下的预实验出峰时间来确定的，接取目标组分时按纯度高中低分段收集，合并后用液相检测其纯度。
作为本发明的优选技术方案，所述方法具体包括如下步骤：制备含有大麻二酚的样品溶液，将其进行微孔过滤处理或萃取柱洗脱处理后，采用超临界流体色谱法对样品进行分离，再进行减压浓缩和真空干燥，得到高纯度大麻二酚；所述超临界流体色谱中的流动相为添加有5-95％的改性剂的超临界二氧化碳；所述样品进行分离时的柱温为20-50℃；所述样品进行分离时的背压为10-25MPa；所述样品进行分离时流动相的流速为1-40mL/min。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明所涉及的方法能够高效便捷地分离出高纯度的大麻二酚，可显著降低其主要杂质次大麻二酚(CBDV)的含量，大麻二酚的纯度高达97.59％-99.89％，上样量大，可显著地缩短分离周期，并且显著地提高了综合收率，有机溶剂残留低，同时，该方法适用于各类含有大麻二酚的样品的分离纯化，也适用于工业放大生产，适用范围很广。
附图说明
图1是实施例1中SFC进样谱图；
图2是实施例1中大麻二酚标准品的HPLC检测谱图；
图3是实施例1中SFC分离制得成品的HPLC检测谱图；
图4是实施例2中SFC分离制得成品的HPLC检测谱图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶50g，以500mL正己烷25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量4.17g，折算后大麻二酚为0.92g)，用正庚烷在30℃下溶解，通过1.1g硅胶装填的硅胶短柱，再以5mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度分离。设备参数为：设备型号：CS-SFC50，色谱柱：高纯硅胶(Hedera Si)9μm 15×250mm，柱温：30℃，背压：12MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序为：
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷 C：甲醇
0 2 95％ 5％ 0
5 2 65％ 30％ 0
52 2 45％ 51.5％ 3.5％
60 2 95％ 0 5％
超临界流体色谱图如图1所示，收集19.2-20.6min的目标峰段产物，并回收溶剂；收集0-4min，回收溶剂后进行销毁；收集其他峰段回收溶剂后制成油状稠膏备用。
对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其进行纯度的检测，具体内容包括：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按A(％):B(％)＝70:30进行等度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按大麻二酚峰计算应不低于2500。
(2)对照品溶液的制备：精密称取大麻二酚对照品，加甲醇制成每mL含0.1mg的对照品溶液，即得。
(3)供试品溶液的制备：取上述制得的高纯度大麻二酚成品，加乙腈-水(1:1)制成每mL含0.1mg的供试品溶液，超声处理10min，摇勾，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
(4)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，以峰面积计算大麻二酚的含量，对照品的色谱图如图2所示，目标峰的保留时间在7.34min左右，供试品的色谱图如图3所示，计算公式为：
Figure BDA0002149598620000081
其中，Asam为供试品中大麻二酚的峰面积；Vsam为供试品溶液的体积mL；Astd为对照品大麻二酚的峰面积；Wstd为对照品的称样量mg；Wsam为供试品的称样量mg；Vstd为对照品溶液的体积mL。
经测定，大麻二酚纯度为99.73％，上样量为3.72％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)，收率为89.67％。
实施例2
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法与实施例1的差别仅在于流动相洗脱程序，流动相洗脱程序为：
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷
0 2 95％ 5％
5 2 65％ 30％
52 2 45％ 55％
60 2 95％ 5％
收集18.5-21.4min的目标峰段产物，并回收溶剂；收集0-4min，回收溶剂后进行销毁；收集其他峰段回收溶剂后制成油状稠膏备用。
对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致，其液相色谱图如图4所示，与实施例1结果相比，表明改性剂中若不含醇类化合物其分离效果会减弱。
经测定，大麻二酚纯度为98.37％，上样量为0.83％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)。
实施例3
本实施例对稍大批量的大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶5Kg，以50L 95％乙醇25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量514g，折算后大麻二酚为93.22g)，用正庚烷:乙酸乙酯(V/V＝8:1)在30℃下溶解，通过260g硅胶装填的硅胶短柱，再以100mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续等度洗脱。设备参数为：设备型号：CS-SFC100，色谱柱：啉醚基键合硅胶25μm80×400mm，柱温：40℃，背压：15MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序为：
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：乙醇 C：水
0 13.5 90％ 7％ 3％
120 13.5 90％ 7％ 3％
收集18.2-24.6min的目标峰段产物，并回收溶剂；收集0-4min，回收溶剂后进行销毁；收集其他峰段回收溶剂后制成油状稠膏备用。
对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，大麻二酚纯度为99.77％，上样量为8.28％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)，收率为82.55％。
实施例4
本实施例对更大批量的大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶20Kg，以200L 95％乙醇25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量2.39Kg，折算后大麻二酚为0.42Kg)，用正庚烷:乙酸乙酯(V/V＝6:1)在60℃下溶解，通过2.4Kg硅胶装填的硅胶短柱，再以300mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度洗脱。设备参数为：设备型号：CS-SFC200，色谱柱：糖基键合硅胶45μm 200×400mm，柱温：45℃，背压：18MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序为：
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：正己烷 C：乙醇
0 35 6％ 89％ 5％
120 35 5％ 87.5％ 7.5％
收集28.1-43.3min的目标峰段产物，并回收溶剂；收集0-4min，回收溶剂后进行销毁；收集其他峰段回收溶剂后制成油状稠膏备用。
对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，大麻二酚纯度为99.69％，上样量为5.57％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)，收率为81.98％。
由实施例1-4的数据结果可知，本发明所涉及的方法能够快速简单地制备得到高纯度的大麻二酚，且这种方法适用于放大生产，满足工业化生产的需求。
实施例5
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶50g，以500mL正己烷25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量4.17g，折算后大麻二酚为0.92g)，用正庚烷在30℃下溶解，通过1.1g硅胶装填的硅胶短柱，再以5mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度分离。设备参数为：设备型号：CS-SFC50，色谱柱：高纯硅胶(Hedera Si)9μm 15×250mm，柱温：30℃，背压：12MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序分别采用以下四种方式(如表1、表2、表3和表4所示)：
表1
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：正己烷 C：无
0 2 18％ 82％ 0
60 2 18％ 82％ 0
表2
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：正己烷 C：甲醇
0 2 18％ 76％ 6％
60 2 18％ 76％ 6％
表3
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：正己烷 C：乙醇
0 2 18％ 73％ 9％
60 2 18％ 73％ 9％
表4
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：正己烷 C：水
0 2 18％ 80.8％ 1.2％
60 2 18％ 80.8％ 1.2％
分别收集目标峰段产物，对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其分别进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，四种方式制得的大麻二酚纯度依次为98.25％、99.78％、99.65％、99.45％，上样量依次为0.23％、7.5％、5.54％、0.31％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)。
由表1-表4数据结果可知：以超临界二氧化碳和正己烷为流动相时，流动相中的添加改性剂含有醇类化合物或水时能显著提高制备得到的大麻二酚的纯度和制备时的上样量；而添加醇类化合物的效果更好。
实施例6
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶50g，以500mL正己烷25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量4.17g，折算后大麻二酚为0.92g)，用正庚烷在30℃下溶解，通过1.1g硅胶装填的硅胶短柱，再以5mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度分离。设备参数为：设备型号：CS-SFC50，色谱柱：高纯硅胶(Hedera Si)9μm 15×250mm，柱温：30℃，背压：12MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序分别采用以下四种方式(如表5、表6、表7和表8所示)：
表5
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：庚烷 C：无
0 2 65％ 35％ 0
60 2 65％ 35％ 0
表6
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：庚烷 C：甲醇
0 2 65％ 27.5％ 7.5％
60 2 65％ 27.5％ 7.5％
表7
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：庚烷 C：乙醇
0 2 65％ 27.5％ 7.5％
60 2 65％ 27.5％ 7.5％
表8
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：庚烷 C：水
0 2 65％ 34.2％ 0.8％
60 2 65％ 34.2％ 0.8％
分别收集目标峰段产物，对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其分别进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，四种方式制得的大麻二酚纯度依次为97.59％、99.68％、99.70％、99.25％，上样量依次为0.15％、5.8％、4.55％、0.26％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)。
由表5-表8数据结果可知：以超临界二氧化碳和庚烷为流动相时，流动相中的添加改性剂含有醇类化合物或水时能显著提高制备得到的大麻二酚的纯度和制备时的上样量；而添加醇类化合物的效果更好。
实施例7
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶50g，以500mL正己烷25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量4.17g，折算后大麻二酚为0.92g)，用正庚烷在30℃下溶解，通过1.1g硅胶装填的硅胶短柱，再以5mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度分离。设备参数为：设备型号：CS-SFC50，色谱柱：高纯硅胶(Hedera Si)9μm 15×250mm，柱温：30℃，背压：12MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序分别采用以下四种方式(如表9、表10、表11和表12所示)：
表9
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷 C：无
0 2 45％ 55％ 0
60 2 45％ 55％ 0
表10
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷 C：甲醇
0 2 45％ 51.5％ 3.5％
60 2 45％ 51.5％ 3.5％
表11
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷 C：乙醇
0 2 45％ 51.5％ 3.5％
60 2 45％ 51.5％ 3.5％
表12
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：二氯甲烷 C：水
0 2 45％ 53.5％ 1.5％
60 2 45％ 53.5％ 1.5％
分别收集目标峰段产物，对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其分别进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，四种方式制得的大麻二酚纯度依次为98.65％、99.73％、99.68％、99.39％，上样量依次为0.75％、3.72％、3.02％、1.05％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)。
由表9-表12数据结果可知：以超临界二氧化碳和二氯甲烷为流动相时，流动相中的添加改性剂含有醇类化合物或水时能显著提高制备得到的大麻二酚的纯度和制备时的上样量；而添加醇类化合物的效果更好。
实施例8
本实施例对大麻花叶利用超临界流体色谱法制备大麻二酚，其操作方法为：
称取干燥的大麻花叶50g，以500mL正己烷25℃下浸提两次，合并提取液，浓缩至无水稠膏(重量4.17g，折算后大麻二酚为0.92g)，用正庚烷在30℃下溶解，通过1.1g硅胶装填的硅胶短柱，再以5mL正庚烷淋洗，合并，注入超临界流体色谱进样阀，进行连续梯度分离。设备参数为：设备型号：CS-SFC50，色谱柱：高纯硅胶(Hedera Si)9μm 15×250mm，柱温：30℃，背压：12MPA，检测波长：220nm。流动相洗脱程序分别采用以下四种方式(如表13、表14、表15和表16所示)：
表13
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：乙酸乙酯 C：无
0 2 75％ 25％ 0
60 2 75％ 25％ 0
表14
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：乙酸乙酯 C：甲醇
0 2 75％ 19％ 6％
60 2 75％ 19％ 6％
表15
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：乙酸乙酯 C：乙醇
0 2 75％ 19％ 6％
60 2 75％ 19％ 6％
表16
时间(min) 流速(mL/min) <![CDATA[A：CO<sub>2</sub>]]> B：乙酸乙酯 C：水
0 2 75％ 22.5％ 2.5％
60 2 75％ 22.5％ 2.5％
分别收集目标峰段产物，对目标峰段产物进行减压浓缩和真空干燥，粉碎至100目以下，即得所述高纯度大麻二酚成品。使用高效液相色谱对其分别进行纯度的检测，具体内容与实施例1一致。
经测定，四种方式制得的大麻二酚纯度依次为98.80％、99.88％、99.89％、99.57％，上样量依次为1.78％、7.84％、7.57％、1.98％(折算后大麻二酚的质量/色谱柱填料总质量)。
由表13-表16数据结果可知：以超临界二氧化碳和乙酸乙酯为流动相时，流动相中的添加改性剂含有醇类化合物或水时能显著提高制备得到的大麻二酚的纯度和制备时的上样量；而添加醇类化合物的效果更好。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的制备高纯度大麻二酚的方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (15)

1.一种制备大麻二酚的方法，其特征在于，所述方法为：采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离，得到高纯度大麻二酚；所述超临界流体色谱中的流动相为添加有改性剂的超临界二氧化碳；
所述改性剂在流动相中的质量百分比为5-95％；所述改性剂由两部分组成；
第一部分改性剂为烷烃、卤代烷烃或酯类化合物中的任意一种或至少两种的组合；所述烷烃选自石油醚、正己烷或正庚烷；所述卤代烷烃选自二氯乙烷或三氯乙烷；所述酯类化合物选自乙酸乙酯；
第二部分改性剂为水和/或醇类化合物，且所述水和/或醇类化合物在流动相中的质量百分比为0.5-15％；所述醇类化合物为甲醇和/或乙醇。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超临界流体色谱中使用的固定相包括纯硅胶和/或基团键合的硅胶。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述基团键合的硅胶包括啉醚基键合硅胶或糖基键合硅胶。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时的柱温为20-50℃。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时的柱温为30-45℃。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时的柱温为所述样品进行分离时的背压为10-25MPa。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时的柱温为所述样品进行分离时的背压为12-18MPa。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时流动相的流速为1-40mL/min。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品进行分离时流动相的流速为2-35mL/min。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将样品直接溶解得到。
11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将含有大麻二酚的样品进行至少1次转溶，得到样品转溶液。
12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，含有大麻二酚的样品溶液的制备方法为：将含有大麻二酚的样品进行至少1次萃取，得到样品萃取液。
13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离之前，对含有大麻二酚的样品溶液进行预处理，所述预处理的方法为：将样品溶液进行微孔过滤，得到滤液。
14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用超临界流体色谱法对含有大麻二酚的样品溶液进行分离之前，对含有大麻二酚的样品溶液进行预处理，所述预处理的方法为：将样品溶液使用萃取柱进行洗脱，得到脱色液。
15.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述得到高纯度大麻二酚后对其进行后处理操作，所述后处理操作包括：将大麻二酚先减压浓缩，然后真空干燥。
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CN107382672A (zh) * 2017-07-28 2017-11-24 云南汉木森生物科技有限责任公司 利用超临界二氧化碳萃取大麻二酚的方法及其大麻二酚产品
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