CN111955485A - 一种提高果园木霉施用效果的方法 - Google Patents

一种提高果园木霉施用效果的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种提高果园木霉施用效果的方法,属于果树维护技术领域。本发明包括以下步骤:(1)将木霉菌剂与清水充分混匀,加入γ‑聚谷氨酸和甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液,得到悬浊液;(2)将步骤(1)制得的悬浊液均匀喷涂于果树枝干上;(3)在悬浊液还未干时,立即喷涂壳聚糖硼酸盐溶液,使壳聚糖硼酸盐与γ‑聚谷氨酸聚合,在外层形成抑菌膜,即可。本发明的方法能够提高菌剂在树体枝干表皮的附着定殖能力,提高菌剂的产孢子和拮抗能力,进而提升菌剂在果园中增殖的能力,提高改善微生物生态状况的效果;提高菌剂对于葡萄树体老皮的分解能力进而促进老皮脱落,减少病虫害的藏匿空间。

Description

一种提高果园木霉施用效果的方法
技术领域
本发明属于果树维护技术领域,具体涉及一种提高果园木霉施用效果的方法。
背景技术
随着社会的发展,人们越来越意识到使用化学农药是以牺牲生态环境和人类健康为代价的,而以农业可持续发展为宗旨的生物防治在农业生产中起着越来越重要的作用。生物防治是利用有益的生物或其代谢产物防治有害生物的方法,其优点是对人畜安全,没有残毒,对环境和果品没有污染,对有害生物不产生抗性,不破坏生态平衡,经济有效。
据报道,木霉菌是目前最常用的生物防治菌剂之一。多年来,人们对木霉菌的生防应用、生物药剂的开发以及生防机制做了许多尝试和深入的研究。木霉对植物病原真菌的拮抗作用包含如下机制:一是竞争作用,木霉通过快速繁殖和生长争夺养分、占有生存空间及消耗养分等,削弱甚至消灭同一环境的病原菌,以此达到拮抗病原菌的目的。二是产生抗菌类物质,许多木霉菌株产生挥发性或非挥发性的抗菌素类物质,在木霉代谢过程中产生的抗菌素类物质有木霉素、胶霉素、绿木霉素、抗菌肽等,这些次生代谢物显示出对某些病原真菌的积极的控制作用。三是重寄生作用,木霉菌丝沿寄主菌丝平行生长和螺旋状缠绕生长,并产生附着胞状分枝吸附于寄主菌丝上,通过分泌胞外酶如几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶和蛋白酶等,进一步溶解细胞壁,穿透寄主菌丝,吸取营养,使病原真菌菌丝细胞解体。同时,木霉菌的不同细胞壁降解酶之间以及不同的拮抗方式之间具协同作用。可以说,木霉这种具有多种生防武器的拮抗菌是一种较为理想的生防益菌。
目前,现有果园如葡萄园生防木霉菌剂的施用方法多为简单的全园喷施,因受植物表面附生环境寡营养、温度湿度条件不稳定、紫外线强度大等不利因素影响,难以让生防菌剂获得能够稳定定殖增殖的环境条件,从而使得生防菌剂使用时出现药效期短、使用量大、使用频次高、改善果园微生物生态状况的效果不佳等问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术存在的上述问题,提供一种新的生防木霉菌剂的施用方法,本发明的方法能够提高菌剂在树体枝干表皮的附着定殖能力,提高菌剂的产孢子和拮抗能力,进而提升菌剂在果园中增殖的能力,提高改善微生物生态状况的效果;本发明的方法能够延长生防菌剂的使用药效,降低生防菌剂的使用量和使用频次;本发明能提高菌剂对果树树体老皮的分解能力进而促进老皮脱落,减少病虫害的藏匿空间。
为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
一种提高果园木霉施用效果的方法,包括以下步骤:
(1)按木霉菌剂的使用浓度要求将木霉菌剂与清水充分混匀,加入γ-聚谷氨酸和甘蔗废糖蜜,或加入γ-聚谷氨酸和糖蜜酒精发酵液,混匀后得到悬浊液;
(2)将步骤(1)制得的悬浊液均匀喷涂于果树枝干上;
(3)在悬浊液还未干时,立即喷涂壳聚糖硼酸盐溶液,使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成抑菌膜,即可。
进一步的,所述木霉为绿色木霉、哈茨木霉、长枝木霉的任一种。
进一步的,所述果园为葡萄园,所述果树枝干为葡萄枝干。
进一步的,步骤(1)中,所述加入的γ-聚谷氨酸的终浓度为300-1000mg/L;所述加入的甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液的最终波美度值为0.5-5°Be。
进一步的,步骤(3)中,所述壳聚糖硼酸溶液中,壳聚糖的浓度为1-10g/L。
进一步的,所述壳聚糖硼酸溶液的制备方法如下:将1g脱乙酰度75%以上的壳聚糖溶解于100mL浓度为5-10g/L的硼酸水溶液中,按实际要求进行二次稀释,即可得到壳聚糖硼酸溶液。
有益效果:
本发明先将木霉菌剂与γ-聚谷氨酸、糖蜜酒精发酵液或甘蔗废糖蜜混合得到悬浊液,喷涂于果树枝干后,再喷涂壳聚糖硼酸盐溶液,使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成选择性抑菌膜,在该抑菌膜内侧形成湿度相对稳定、营养相对充足、木霉菌剂生物量处于绝对优势的微环境,木霉在甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液诱导下持续生成大量分生孢子、拮抗物质和纤维素酶,分生孢子在果园环境中飘散、重新萌发生长,形成微生物生态优势,抑制有害微生物生长;拮抗物质抑制葡萄植株表面附生的有害微生物,并诱导植株的免疫应答,提高抗病性;纤维素酶分解老皮组织,促进其分解脱落,有效减少病虫害的藏匿空间。
本发明的γ-聚谷氨酸与甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液复配能够达到吸收空气中水分,促使菌剂悬液膜保持湿度,改善生防菌剂生长增殖的环境;同时壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成选择性抑菌膜,防止无法利用壳聚糖的有害微生物形成生长优势。本发明的方法所形成的选择性抑菌膜结构能提高菌剂悬液的附着效果。
本发明的方法能够提高生防菌剂的功效,延长其作用时间。
附图说明
图1为糖蜜酒精发酵液诱导木霉产抑菌物质试验对比图;图中的A为正常生长的病原菌(灰葡萄孢),C为未添加糖蜜酒精发酵液时木霉对于病原菌的抑制效果,B和D为添加糖蜜酒精发酵液时木霉对病原菌的抑制效果。
具体实施方式
下面结合附图及具体的实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种提高果园木霉施用效果的方法,所述果园具体为葡萄园,包括以下步骤:
(1)将市售的山东长泰生物科技有限公司生产的“盈彩美地”牌绿色木霉菌剂按商品使用说明的浓度用量与清水充分混匀后,加入γ-聚谷氨酸(终浓度为300mg/L)和糖蜜酒精发酵液(最终波美度值为2°Be),混匀后得到悬浊液;
(2)将步骤(1)制得的悬浊液均匀喷涂于葡萄枝干上,特别是被老皮覆盖的部位;
(3)在悬浊液还未干时,立即喷涂壳聚糖硼酸盐溶液(所述壳聚糖硼酸盐溶液是将1g脱乙酰度85%的壳聚糖溶解于100mL浓度为5g/L的硼酸水溶液中制得);使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成选择性抑菌膜,防止无法利用壳聚糖的有害微生物形成生长优势。在抑菌膜内侧形成湿度相对稳定、营养相对充足、木霉菌剂生物量处于绝对优势的微环境,木霉在甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液诱导下持续生成大量分生孢子、拮抗物质和纤维素酶,持续发挥菌剂生防功效。
实施例2
一种提高果园木霉施用效果的方法,所述果园具体为葡萄园,包括以下步骤:
(1)将市售拜沃公司的哈茨木霉菌剂按商品使用说明的浓度用量与清水充分混匀,加入γ-聚谷氨酸(终浓度1000mg/L)和甘蔗废糖蜜(最终波美度值为0.5°Be).
(2)将上述悬浊液均匀喷涂于葡萄枝干上,特别是被老皮覆盖的部位。
(3)在上述悬浊液还未干时,立即喷涂的壳聚糖硼酸盐溶液[将1g脱乙酰度80%的壳聚糖溶解于100mL浓度为8g/L的硼酸水溶液中,用水稀释至2倍体积制得],使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成选择性抑菌膜。
实施例3
一种提高果园木霉施用效果的方法,所述果园具体为葡萄园,包括以下步骤:
(1)将购自中国农业微生物菌种保藏中心的长枝木霉菌剂按商品使用说明的浓度用量与清水充分混匀,加入γ-聚谷氨酸(终浓度500mg/L)和糖蜜酒精发酵液(最终波美度值为5°Be).
(2)将上述悬浊液均匀喷涂于葡萄枝干上,特别是被老皮覆盖的部位。
(3)在上述悬浊液还未干时,立即喷涂浓度为壳聚糖硼酸盐溶液[将1g脱乙酰度75%以上的壳聚糖溶解于100mL浓度为10g/L的硼酸水溶液中,用水稀释至10倍体积制得],使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成选择性抑菌膜。
现有研究中,糖蜜酒精发酵液或甘蔗废糖蜜大多作为培养微生物的碳源使用,主要作用是为微生物生物提供营养,使其细胞大量分裂生长;目前尚未有将糖蜜酒精发酵液或甘蔗废糖蜜应用于促进木霉分生孢子的生长形成的研究;本发明通过研究发现糖蜜酒精发酵液和甘蔗废糖蜜均能够很好的促进木霉分生孢子的生长形成,具体试验结果如表1和表2所示。
表1糖蜜酒精发酵液浓度对于木霉产孢子的影响
Figure BDA0002684526570000041
表2甘蔗废糖蜜浓度对于木霉产孢子的影响
Figure BDA0002684526570000051
由表1和表2的数据可知,糖蜜酒精发酵液和甘蔗废糖蜜均能够很好的促进木霉分生孢子的生长,且当浓度为0.5-5.0°Be时效果最好。
在本发明的方法中,各组分的混合复配以及施用顺序十分重要,会直接影响木霉的最终施用效果,为了验证上述效果,本发明做了如下对比试验I:将市售的单糖单元聚合度为2-20的生物农药级壳寡糖产品配置成10g/L的水溶液,喷施于葡萄枝干上;再将市售的绿色木霉菌剂(同实施例1)按商品使用说明的浓度用量与清水充分混匀,加入糖蜜酒精发酵液(最终波美度值为2°Be),再加入壳聚糖硼酸盐溶液(同实施例1),混合后得到悬浊液,将悬浊液喷涂在葡萄枝干上。
按照以上对比试验I的方法,其能够在葡萄枝干上短时间形成液膜层,但每次喷施后24小时之内液膜即出现风干硬化的现象,无法如本发明实现较长时间(达7d以上)保持液膜湿润的效果。因此,以上对比试验的方法无法达到木霉在枝干表面的液膜中较长时间正常生长产分生孢子的效果。
在本发明的方法中,壳聚糖硼酸盐溶液发挥着重要的作用,为了验证壳聚糖硼酸盐溶液的效果,本发明还做了如下对比试验II:与实施例1(表3中的实验号3)基本相同,不同之处在于:将硼酸水溶液更换成相同体积及浓度的盐酸水溶液(表3中的实验号1)、冰乙酸水溶液(表3中的实验号2);具体的对比结果见表3。
表3
Figure BDA0002684526570000052
Figure BDA0002684526570000061
由表3的结果对比可知,更换不同的酸后壳聚糖酸盐与γ-聚谷氨酸聚合能力差,表面抑制杂菌效果及木霉生长均不理想,因此并不是所有的壳聚糖酸盐均能达到本发明的技术效果。
在本发明的方法中,γ-聚谷氨酸发挥着重要的作用,为了验证γ-聚谷氨酸的效果,本发明还做了如下对比试验III:与实施例1基本相同,不同之处在于:步骤(1)中不添加γ-聚谷氨酸。经试验发现,不添加γ-聚谷氨酸,则无法在葡萄枝干上形成均匀的保护膜层结构,喷施的药液呈挂壁状下流形态,并在24h内既被风干,木霉无法在枝干表面生长,更无法形成分生孢子。
本发明还做了糖蜜酒精发酵液诱导木霉产抑菌物质试验,结果如图1所示。图1中的A为正常生长的病原菌(灰葡萄孢),C为未添加糖蜜酒精发酵液时木霉对于病原菌的抑制效果,B和D为添加糖蜜酒精发酵液时木霉对病原菌的抑制效果。由图中各组对比分析可知,添加糖蜜酒精发酵液试验组的病原菌菌落显著小于未添加的对照组,说明糖蜜酒精发酵液能够促使木霉加快生长并产生抑制病原菌的抑菌化合物,从而提高木霉菌剂的生防效果。
本发明还做了γ-聚谷氨酸与糖蜜酒精发酵液通过不同配比复配后,喷施于葡萄树干,然后分析葡萄树干的表面保湿效果。在试验过程中,葡萄园的空气湿度为85%以上,具体结果如表4所示。
表4
Figure BDA0002684526570000062
由表4可知,当葡萄园田间空气湿度达到85%以上时,3、4号实验组表现出较强的吸湿性能,能够有效保护表面湿润达7d以上,而在南方地区葡萄园区中,空气湿度在较长时期内达到85%为大概率事件。以上实验证明将聚谷氨酸与糖蜜酒精发酵液联合复配使用后,保湿效果显著增强,保湿性能增强后使得涂层在较长时间内一直保持湿润状态,从而使木霉菌处于生理活跃状态,持续生成分生孢子(而如果涂层干了,会直接导致木霉菌的死亡)。
虽然本发明已以较佳实施例揭示如上,然其并非用以限制本发明,任何本领域技术人员,在不脱离本发明的精神和范围内,当可做些许的修改和完善,因此本发明的保护范围当以权利要求书所界定的为准。

Claims (6)

1.一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将木霉菌剂与清水充分混匀,加入γ-聚谷氨酸和甘蔗废糖蜜,或加入γ-聚谷氨酸和糖蜜酒精发酵液,混匀后得到悬浊液;
(2)将步骤(1)制得的悬浊液均匀喷涂于果树枝干上;
(3)在悬浊液还未干时,立即喷涂壳聚糖硼酸盐溶液,使壳聚糖硼酸盐与γ-聚谷氨酸聚合,在外层形成抑菌膜,即可。
2.根据权利要求1所述的一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于:所述木霉为绿色木霉、哈茨木霉、长枝木霉的任一种。
3.根据权利要求1所述的一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于:所述果园为葡萄园,所述果树枝干为葡萄枝干。
4.根据权利要求1所述的一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述加入的γ-聚谷氨酸的终浓度为300-1000mg/L;所述加入的甘蔗废糖蜜或糖蜜酒精发酵液的最终波美度值为0.5-5°Be。
5.根据权利要求1所述的一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述壳聚糖硼酸溶液中,壳聚糖的浓度为1-10g/L。
6.根据权利要求5所述的一种提高果园木霉施用效果的方法,其特征在于:所述壳聚糖硼酸溶液的制备方法如下:将1g脱乙酰度75%以上的壳聚糖溶解于100mL浓度为5-10g/L的硼酸水溶液中,按要求进行二次稀释,即可得到壳聚糖硼酸溶液。
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Application publication date: 20201120

Assignee: GUANGXI WANJIA GRAPE TECHNOLOGY Co.,Ltd.

Assignor: GUANGXI ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES

Contract record no.: X2023980046563

Denomination of invention: A Method for Improving the Application Effect of Trichoderma in Orchards

Granted publication date: 20211012

License type: Common License

Record date: 20231108