CN111939260B

CN111939260B - 嗅觉受体or12d3作为糖尿病防治靶点的应用

Info

Publication number: CN111939260B
Application number: CN201911267130.0A
Authority: CN
Inventors: 于晓; 孙金鹏; 程杰; 杨照; 葛晓燕
Original assignee: Shandong University
Current assignee: Zhuhai Starcraft Biopharmaceutical Co ltd
Priority date: 2019-12-11
Filing date: 2019-12-11
Publication date: 2021-12-14
Anticipated expiration: 2039-12-11
Also published as: CN111939260A

Abstract

本公开属于糖尿病治疗靶点技术领域，具体涉及嗅觉受体OR12D3基因作为糖尿病防治靶点的应用。I型糖尿病通常表现为高血糖、胰岛素分泌含量不足，目前的降糖药物尚无法遏制I型糖尿病的蔓延。本公开针对嗅觉受体OR12D3与糖尿病之间的关系进行了研究，通过RT‑qPCR检测确认胰岛组织中也具有OR12D3的分布，通过糖尿病造模实验证实了OR12D3的含量变化与糖尿病具有相关性，启示OR12D3有望作为糖尿病的防治靶点。进一步的机制研究表明，OR12D3活性增强抑制胰岛素分泌，OR12D3活性下降促进胰岛素分泌，维持血糖平稳的功效，可相应的开发药物用于I型糖尿病及先天性高胰岛素血症治疗药物。

Description

嗅觉受体OR12D3作为糖尿病防治靶点的应用

技术领域

本公开属于糖尿病治疗靶点技术领域，具体涉及嗅觉受体OR12D3作为糖尿病预防/治疗/诊断靶点的应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

糖尿病是以血糖升高为特征的代谢性疾病，根据胰岛素分泌的绝对不足或相对不足，糖尿病可以区分为I型和II型两种不同类型。目前，全世界约有3.6亿患者受糖尿病困扰，而这一数字预计至2030年可达到5.5亿(Rydén,et,al.,2013)。我国糖尿病发病率近年来显著上升，糖尿病患者已经超过1亿人，造成巨大的健康和经济负担。虽然临床有多种降糖药物，如双胍类、噻唑烷二酮类和磺脲类药物等，但仍然无法有效遏制糖尿病蔓延的趋势。因此，新型有效的糖尿病治疗方法亟待建立。

G蛋白偶联受体(GPCR)是人类基因组编码的最大膜蛋白家族，参与人体内目前已知的几乎所有生理活动，是重要的药物靶点,目前约有33％的临床药物直接作用于GPCR。胰岛中表达大量的GPCR，其中很多受体如胰高血糖素样肽-1受体和胆囊收缩素受体等以其对胰岛素分泌的调控作用，已经被确定为糖尿病治疗的新型靶点。嗅觉受体基因作为人体最大的基因超家族，其编码的嗅觉受体也属于GPCR。人类具有约350种功能性嗅觉受体，主要分布在鼻腔内的嗅觉上皮细胞，调控机体嗅觉(Zhang and Firestein,2002；Young,etal.,2002)。最新的研究证明表明，嗅觉受体也分布于其他器官和组织，在机体的能量稳态维持过程中起到关键作用。例如在嗅觉受体OLFR734在肝脏中表达，其被白脂素(asprosin)激活后，可以通过cAMP信号通路促进肝脏葡萄糖生成，对于血糖稳态具有重要的调控作用(Li,et al.,2019)。公开专利CN103415626B中提供了与代谢性疾病相关的嗅觉受体基因，上述专利在小鼠的脂肪及肌肉组织部位观察到嗅觉受体的表达，发现天然物质中的香气成分能够与存在于脂肪等组织中的嗅觉受体结合，经由嗅觉受体相关的酶干涉末梢组织中的脂肪堆积、游离脂肪酸氧化、产热、胰岛素抵抗型调节，提供了嗅觉受体与代谢性异常引起的肥胖等疾病的关系。

发明内容

针对上述研究现状，发明人认为，嗅觉受体具备成为糖尿病治疗新型靶点的潜质，目前对于嗅觉受体在胰岛中的表达特征和生理功能鲜有报道。本公开针对嗅觉受体与胰岛素分泌调节及糖尿病的作用展开了研究，提供了嗅觉受体基因OR12D3在调节胰岛素分泌、维持血糖稳态及在糖尿病治疗中的应用。

基于上述研究结果，本公开提供以下技术方案：

本公开第一方面，提供OR12D3/Olfr109作为糖尿病诊断/预防/治疗标志物的应用。

所述OR12D3为人体内的OR12D3基因。

所述Olfr109为OR12D3在小鼠体内的同源基因Olfr109。

经本公开研究表明，OR12D3在小鼠体内的同源基因Olfr109在小鼠鼻粘膜及胰岛组织中均有分布，通过制备多种小鼠糖尿病模型均可以验证，Olfr109在糖尿病模型中含量表达升高，具有统计学意义。该研究结果启示OR12D3的含量检测结果有望作为糖尿病诊断和治疗的靶点，或开发相应的靶向治疗药物。

本公开第二方面，提供一种糖尿病诊断试剂盒，所述试剂盒中包括对OR12D3含量进行检测的试剂。

优选的，所述对OR12D3含量进行检测的试剂包括基于免疫印迹方法、PCR方法进行检测的试剂。

本公开第三方面，提供OR12D3抑制剂作为胰岛素激动剂的应用，或OR12D3激动剂作为胰岛素抑制剂的应用。

本公开研究表明，敲低表达Olfr109的小鼠胰岛在高糖刺激条件下相比正常小鼠胰岛素分泌量更高，而过表达Olfr109的小鼠胰岛在相同高糖刺激条件下，相比正常小鼠胰岛组织分泌的胰岛素含量更少，证明Olfr109具有减少胰岛素的分泌的效果。

相比背景技术中所述专利公开了将嗅觉受体用于胰岛素抵抗综合征不同，胰岛素抵抗是指一种机体对内源分泌或外源注射的胰岛素均反应下降的异常生理状态即胰岛素敏感性降低，胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降，机体代偿性的分泌过多胰岛素以维持血糖的稳定，是Ⅱ型糖尿病典型的发病机理之一。在此过程中胰岛素的分泌非但不会减少，反而可能因为机体内需要降低血糖而产生更多的胰岛素。而本公开证实过表达受体olfr109后直接抑制胰岛素的分泌，对于胰岛上表达的olfr109受体组成性激活或者被潜在的配体激活后通过激活Gi信号通路，降低胰岛中cAMP水平从而直接抑制胰岛素的分泌。

本公开第四方面，提供一种胰岛素激动剂，所述胰岛素激动剂为OR12D3抑制剂。

本公开第五方面，提供一种糖尿病治疗药物，所述治疗药物包括第四方面所述胰岛素激动剂。

本领域公知，糖尿病是一种由于胰岛素分泌不足/胰岛素抵抗造成的一种以高血糖为主要表现的疾病。本公开提供了OR12D3在减少胰岛素分泌方面的作用，提供了可通过抑制OR12D3的表达实现促进胰岛素分泌从而治疗糖尿病的方案。

优选的，所述糖尿病为Ⅰ型糖尿病。

本领域公知，Ⅰ型糖尿病的主要发病原因是患者胰岛β细胞被破坏引起的胰岛素绝对缺乏，患者需要注射胰岛素来维持生命。Ⅱ型糖尿病则主要表现为胰岛素抵抗。基于本公开的研究结果，抑制机体内OR12D3的表达能够直接增加胰岛素的分泌，该研究结果表明，OR12D3有望作为一种Ⅰ型糖尿病的治疗药物。

先天性高胰岛素血症又称婴儿持续性高胰岛素血症性低血糖，是一种复杂多样的罕见性疾病，是婴儿持续性低血糖的最常见原因。基于本公开的研究结果，当OR12D3过表达时可以减少体内胰岛素分泌，本领域技术人员可以考虑通过过表达OR12D3或使用激动剂激活OR12D3直接降低患者体内胰岛素的含量，缓解、治疗先天性高胰岛素血症。

本公开第六方面，提供一种先天性高胰岛素血症治疗药物，所述治疗药物以OR12D3激动剂为活性成分。

与现有技术相比，本公开的有益效果是：

本公开提供了嗅觉受体OR12D3作为糖尿病诊断/预防/治疗标志物的应用，并通过具体机制研究证实了OR12D3具有减少胰岛素分泌，维持血糖稳态的效果，为相应的糖尿病药物、先天性高胰岛素血症治疗药物的开发提供了研究依据。

附图说明

构成本公开的一部分的说明书附图用来提供对本公开的进一步理解，本公开的示意性实施例及其说明用于解释本公开，并不构成对本公开的不当限定。

图1为本公开实施例1的小鼠胰岛中Olfr109表达水平检测结果图。

图2为本公开实施例2的人和小鼠胰岛中OR12D3和Olfr109在不同生理和病理条件下表达水平检测结果图；

其中，图2A为高糖条件下人胰岛中OR12D3的表达含量；

图2B为高糖条件下小鼠胰岛中Olfr109的表达含量；

图2C为STZ模型的小鼠胰岛中Olfr109的表达含量；

图2D为L-Arg模型的小鼠胰岛中Olfr109的表达含量。

图3为本公开实施例3的小鼠胰岛中Olfr109表达水平对高糖和GLP1引发的胰岛素分泌的调控检测结果图；

其中，图3A为Olfr109敲低的小鼠胰岛中胰岛素分泌量结果；

图3B为Olfr109过表达的小鼠胰岛中胰岛素分泌量结果。

图4为本公开实施例4的小鼠胰岛β细胞中Olfr109沉默引起的信号通路关键蛋白表达水平检测结果图。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

正如背景技术所介绍的，针对现有技术中存在的不足，本公开提供了OR12D3作为糖尿病预防/治疗/诊断靶点的应用。例示性人OR12D3氨基酸序列提供如下(NP_112221.1；GI:13624335)，如SEQ ID NO:1所示；所述人OR12D3核酸序列提供如下(NM_030959.3GI:1653961702)，如SEQ ID NO:2所示。例示性鼠olfr109氨基酸序列提供如下(NP_667046.1；GI:22129189)，如SEQ ID NO:3所示：例示性鼠olfr109核酸序列提供如下(NM_146835.1；GI:22129188)，如SEQ ID NO:4所示。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本公开的技术方案。

实施例1嗅觉受体olfr109基因在鼻粘膜以及胰岛的基础表达情况

实验步骤：

采用qRT-PCR检测野生型C57BL/6J小鼠的表达水平，每组取三只独立的小鼠，基因表达量以β-actin为参照归一化后，表达量以平均值表示。qRT-PCR的检测方法如下：

1、RNA提取：

1.1取需要提取RNA的组织，用液氮研碎至无明显颗粒，研磨过程保持有液氮存在以防RNA降解。

1.2取50-100mg样品加入1ml Trizol(Reagent，Life Technologies，Cat.no.15596-026)，用1ml移液枪充分吹打裂解充分。

1.3室温静置5min。加入0.2ml氯仿用力混匀30秒，室温静置5min。4℃下12000g离心15min使各液相分离。

1.4取水相(即最上层液体)加入到0.5ml异丙醇中，颠倒混匀后室温孵育10min，使RNA析出。4℃下12000g离心15min，弃上清。

1.5沉淀加入1ml 75％的乙醇(用DEPC水配置)清洗，并4℃下12000g离心5min弃上清。重复用75％的乙醇清洗一次，并充分除去上清。42℃烘干后加适量DEPC水溶解。提取的RNA马上用于后续实验或保存在-80℃冰箱中，需要时直接取出使用。

(2)RNA纯化：由于Trizol法抽提的总RNA可能会含有基因组DNA的污染，因此，用于荧光定量PCR的RNA样品先用DNA酶消化除去可能的存在的DNA。这里用试剂盒(TURBO DNA-free^TMKit货号：AM1907)进行处理。

(3)RNA逆转录：纯化后的RNA经上述步骤逆转录为cDNA，RNA通过逆转录试剂盒(ReverTra Ace Code：FSQ-101Lot：836000TOYOBO)合成cDNA。

(4)荧光定量PCR：以得到的cDNA为模板进行荧光定量PCR。荧光定量反应根据产品说明书使用Roche SYBR Green Master(ROX)04913914001试剂盒。每个反应以25μl体系进行，其中含cDNA模板2μl，SYBR 12.5μl，10μM正反向引物0.75μl，双蒸水9μl。荧光信号的定量通过CFX96TM Real-Time System(Bio-Rad C1000TM Thermal Cycler)进行。

本实施例中检测分别检测小鼠鼻粘膜和胰岛部位的olfr109含量，检测结果如图1所示，如图所示，胰岛部分也具有olfr109基因分布。

实施例2人和小鼠胰岛中OR12D3和Olfr109在不同生理和病理条件下表达水平检测结果图(高糖刺激、STZ、L-Arg造模，只显示Olfr109)。

1、造模方法：

1.1高糖刺激方法：将获取的胰岛低糖培养过夜恢复状态，高糖刺激前用Hanks饥饿2h，然后给予25mM DMEM高糖培养基刺激48h。结果如图2A和B所示，人的胰岛细胞在高糖刺激后，OR12D3表达显著升高。小鼠胰岛细胞中的Olfr109也具有相同的变化特征。

1.2 STZ造模：小鼠禁食14-16h腹腔注射40mg/kg，STZ溶解于pH4.5的柠檬酸盐缓冲液中，每天在9:00至10:00之间注射连续5天。STZ-溶液在注射前立即制备并在15分钟内使用，见光易分解。

1.3 L-Arg造模：通过使用以1小时的间隔注射的2×2g/kg L-Arg(8％，pH＝7.0-7.2)，可以在小鼠中诱导急性胰腺炎模型。

2、qRT-PCR检测嗅觉受体olfr109在胰岛上的表达情况，步骤见实施例1。

经STZ造模及L-Arg造模结果可以看出，糖尿病小鼠模型胰岛组织中Olfr109的表达与对照组差异显著，具有统计学意义。

实施例3小鼠胰岛中Olfr109表达水平对高糖和GLP1引发的胰岛素分泌的调控检测结果图。

胰高血糖素样肽-1(glucagon-likepeptide1，GLP-1)是由人胰高血糖素基因编码的一种肠源性激素，可促进胰岛素的分泌。

分别利用过表达嗅觉受体Olfr109以及敲低嗅觉受体olfr109的腺病毒去感染胰岛，对照为对应的control病毒感染胰岛。病毒1:100加入培养基中，感染胰岛48h后荧光显微镜下观察看是否病毒感染成功，敲低病毒带有红色荧光蛋白/过表达病毒带有绿色荧光蛋白，qRT-PCR检测过表达或者敲低嗅觉受体Olfr109是否成功。

分别向对照组及实验组中加入GLP1，在胰岛上过表达或者敲低嗅觉受体Olfr109后，检测胰岛细胞的胰岛素表达含量。过表达或者敲低olfr109后对于胰岛胰岛素的分泌有明显的调控作用。

通过图3A的结果可以看出，经腺病毒在胰岛上过表达Olfr109，不改变高糖刺激胰岛素分泌的本底值，但是抑制GLP-1引起的胰岛素分泌；从图3B可以看出，经腺病毒在胰岛上敲低Olfr109后，促进高糖刺激胰岛素分泌和GLP-1引起的胰岛素分泌。由上述结果可以推知，Olfr109具有调节胰岛素分泌、维持胰岛素平衡的作用，并且该作用效果与Olfr109的表达含量呈正相关作用。当胰岛中Olfr109表达含量高时，胰岛对于外界高糖刺激的反应越不敏感。

实施例4小鼠胰岛β细胞中Olfr109沉默引起的信号通路关键基因表达水平检测结果图。

实施例1-3中实验结果表明嗅觉受体基因OR12D3在胰岛上有表达且在造模小鼠中表达有明显差异；用病毒在胰岛上对嗅觉受体过表达或者敲低以及在胰岛β细胞系沉默嗅觉受体olfr109均可得到重要结果，证明嗅觉受体OR12D3对胰岛素的分泌以及在细胞增殖、氧化应激及内质网应激过程中发挥重要的作用。

以上所述仅为本公开的优选实施例而已，并不用于限制本公开，对于本领域的技术人员来说，本公开可以有各种更改和变化。凡在本公开的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。

SEQUENCE LISTING

<110> 山东大学

<120> 嗅觉受体OR12D3作为糖尿病防治靶点的应用

<130> 2010

<160> 4

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 316

<212> PRT

<213> 人源OR12D3

<400> 1

Met Glu Asn Val Thr Thr Met Asn Glu Phe Leu Leu Leu Gly Leu Thr

1 5 10 15

Gly Val Gln Glu Leu Gln Pro Phe Phe Phe Gly Ile Phe Leu Ile Ile

20 25 30

Tyr Leu Ile Asn Leu Ile Gly Asn Gly Ser Ile Leu Val Met Val Val

35 40 45

Leu Glu Pro Gln Leu His Ser Pro Met Tyr Phe Phe Leu Gly Asn Leu

50 55 60

Ser Cys Leu Asp Ile Ser Tyr Ser Ser Val Thr Leu Pro Lys Leu Leu

65 70 75 80

Val Asn Leu Val Cys Ser Arg Arg Ala Ile Ser Phe Leu Gly Cys Ile

85 90 95

Thr Gln Leu His Phe Phe His Phe Leu Gly Ser Thr Glu Ala Ile Leu

100 105 110

Leu Ala Ile Met Ala Phe Asp Arg Phe Val Ala Ile Cys Asn Pro Leu

115 120 125

Arg Tyr Thr Val Ile Met Asn Pro Gln Val Cys Ile Leu Leu Ala Ala

130 135 140

Ala Ala Trp Leu Ile Ser Phe Phe Tyr Ala Leu Met His Ser Val Met

145 150 155 160

Thr Ala His Leu Ser Phe Cys Gly Ser Gln Lys Leu Asn His Phe Phe

165 170 175

Tyr Asp Val Lys Pro Leu Leu Glu Leu Ala Cys Ser Asp Thr Leu Leu

180 185 190

Asn Gln Trp Leu Leu Ser Ile Val Thr Gly Ser Ile Ser Met Gly Ala

195 200 205

Phe Phe Leu Thr Leu Leu Ser Cys Phe Tyr Val Ile Gly Phe Leu Leu

210 215 220

Phe Lys Asn Arg Ser Cys Arg Ile Leu His Lys Ala Leu Ser Thr Cys

225 230 235 240

Ala Ser His Phe Met Val Val Cys Leu Phe Tyr Gly Pro Val Gly Phe

245 250 255

Thr Tyr Ile Arg Pro Ala Ser Ala Thr Ser Met Ile Gln Asp Arg Ile

260 265 270

Met Ala Ile Met Tyr Ser Ala Val Thr Pro Val Leu Asn Pro Leu Ile

275 280 285

Tyr Thr Leu Arg Asn Lys Glu Val Met Met Ala Leu Lys Lys Ile Phe

290 295 300

Gly Arg Lys Leu Phe Lys Asp Trp Gln Gln His His

305 310 315

<210> 2

<211> 1869

<212> DNA

<213> 人源OR12D3

<400> 2

agcaatggag aatgtcacta caatgaatga gtttcttcta cttggcctga ctggtgttca 60

ggagctgcag cctttcttct ttgggatttt cttaatcatt tacctgataa acttgattgg 120

aaatggatct atattggtga tggttgtttt ggaaccacaa ctccactccc ctatgtattt 180

ttttctggga aacctttctt gtctggatat ttcttattct tcagtgacac tgcccaagct 240

gctcgtaaac ctcgtgtgca gtcgcagggc tatatctttt ctaggctgta tcacccagct 300

acacttcttc cactttttgg gaagcacaga ggccatttta ctggctatca tggcctttga 360

ccgttttgtt gccatctgca atcctcttcg ctacactgtc atcatgaacc cccaggtgtg 420

tattctgttg gcagctgcgg cctggctcat cagcttcttt tacgctctga tgcattctgt 480

catgactgca cacctgagtt tttgtggctc tcagaaactc aatcacttct tctacgatgt 540

caagccgctc ttagaattgg cctgtagtga cacattactc aatcaatggc ttctttccat 600

tgtcacaggc agcatatcca tgggagcttt ctttctgact cttctctcct gcttctatgt 660

aattggcttc cttctgttta agaacaggtc ctgcagaata ctccacaagg ctctgtccac 720

ttgtgcctcc cattttatgg tggtatgtct tttctatgga cctgtgggct tcacatatat 780

tcgtcctgct tcagccacct ccatgattca ggaccggata atggccatca tgtatagcgc 840

cgtcacccct gtactgaatc cactaatcta cacccttagg aacaaagaag tgatgatggc 900

tctgaagaaa atctttggta ggaagttgtt taaagactgg cagcaacacc actaggacta 960

atgagggata tctgatttct attaagactg atttccatca cttcactgta agaaatgatt 1020

tgtttacctg gtttatattt ttctttcaaa aattttgagc acatattata ttaggcagtg 1080

tagtaggttc aagaaacaca ggagcaagca aaacaaattc cataatgtca tcaaacataa 1140

agtttaatgt gatggaggcc ccaaataacc aaacgcgtaa gtacatatgt caggataatt 1200

cggtggcaag gagaactaag gaggtaggaa gtatggggag ggttagagta ggaatctgct 1260

gtgtaaaaaa gaatgtggca tttctcctag gacaaaaacc tttggaattt tccaagtaat 1320

agaagtatct tactgaaatt ccatatgaga taatctttat ttttgcctat tttttttcct 1380

tttgtgtttc cttcagcagg aaagtactga tgataatttt tctcacaaca gtttttatct 1440

agaatatcat ttttgttaat cttaattctt gaagagaatt tttaatgggt atttaatttt 1500

agggagagat ttttctagcc attgaaaata tcttgttttt ccccagctta ttgaagtata 1560

attaacaaat aaaaattgca tatatttagg cttcacaaca tgatgcttta gtatatgtat 1620

acattgtgaa gagactacca caatcaagct aaacctacat tactgtccct gcattagttt 1680

actgttgaat actagaagtt cttcattcta tctaactgca ttttcatacc cattaagcca 1740

atgtgacaag ctctttgttt cagttggagt gtttgcacaa tttaaatttg ataaattttt 1800

gatagaatta aatttaaatt tatcctccaa ctaaattttt gatagaatta aatttaaatt 1860

tgtcctcca 1869

<210> 3

<211> 314

<212> PRT

<213> 鼠源olfr109

<400> 3

Met Glu Asn Ser Thr Ser Val Asp Glu Phe Leu Leu Leu Gly Leu Thr

1 5 10 15

Ser Val Gln Lys Leu Gln Pro Ile Ile Phe Val Met Phe Leu Thr Ile

20 25 30

Tyr Leu Leu Asn Leu Val Gly Asn Gly Val Ile Leu Met Ile Val Thr

35 40 45

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Ile Asn Leu Leu Ser Arg Arg Arg Ala Ile Ser Phe Leu Gly Cys Ile

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Thr Gln Leu Tyr Phe Phe His Phe Leu Gly Ser Thr Glu Ala Ile Leu

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130 135 140

Thr Ala Trp Phe Thr Ser Phe Phe Tyr Ala Leu Leu His Ser Val Met

145 150 155 160

Thr Ala His Leu Asn Phe Cys His Ser His Lys Leu Ser His Phe Phe

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Cys Asp Val Lys Pro Leu Leu Glu Val Ala Cys Gly Asn Thr Val Leu

180 185 190

Asn Gln Trp Leu Leu Ser Val Val Thr Gly Ser Ile Ser Met Gly Ala

195 200 205

Phe Leu Leu Ile Leu Leu Ser Tyr Phe Tyr Ile Ile Ala Phe Leu Leu

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Phe Lys Asn Arg Ser Cys Arg Met Leu Lys Lys Ala Leu Ser Thr Cys

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Thr Ser His Phe Met Val Val Cys Leu Phe Tyr Gly Pro Val Gly Phe

245 250 255

Thr Tyr Ile Arg Pro Ala Thr Ala Ser Ala Ser Ser Met Ser Glu Asp

260 265 270

Arg Val Val Ala Ile Ile Tyr Ser Ala Val Thr Pro Val Leu Asn Pro

275 280 285

Leu Ile Tyr Thr Leu Arg Asn Lys Glu Val Met Leu Ala Leu Lys Lys

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305 310

<210> 4

<211> 945

<212> DNA

<213> 鼠源olfr109

<400> 4

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ctgcagccca tcatttttgt gatgttttta accatttact tactgaattt ggttggaaat 120

ggagttatat taatgatcgt cactctggaa agaagactcc actcccctat gtacttcttc 180

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cctgccacag catcagcctc ctccatgagt gaggatcggg tggtggccat catctacagt 840

gcagtcaccc cagtgctgaa cccactgata tatactctaa ggaacaaaga ggtgatgttg 900

gctctgaaaa agaactttgg gaagaagttg tttaaaggca actag 945

Claims

1.降低olfr109表达的物质在制备治疗糖尿病药物中的应用，所述物质为敲低嗅觉受体olfr109的腺病毒。