CN111920945A - 一种新型冠状病毒疫苗及其制备方法和应用 - Google Patents
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本发明涉及一种冠状病毒疫苗及其制备方法和应用，所述冠状病毒疫苗包括纳米载体，以及包覆于所述纳米载体中的冠状病毒；所述纳米载体包括壳聚糖和/或壳聚糖衍生物。其制备方法包括将冠状病毒与载体混合后，再与弱酸混合，形成纳米颗粒，即所述冠状病毒疫苗。本发明创造性地将冠状抗原病毒包覆于壳聚糖和/或壳聚糖衍生物中，完成物理方式的灭菌程序，相较于传统的化学灭菌模式，其提高了疫苗的生产效果，节约了生产成本，减少了其突变返祖引起的其他疾病的风险；另外，因壳聚糖或其衍生物的生物相容和生物降解特性，使得该疫苗具有很好的生物安全性。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种冠状病毒疫苗及其制备方法和应用，具体涉及一种新型冠状病毒疫苗及其制备方法和应用，尤其涉及一种安全性高、疗效显著、制备工艺简单的新型冠状病毒疫苗及其制备方法和应用。
背景技术
冠状病毒属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)，是许多家畜、宠物包括人类疾病的重要病原，引起多种急慢性疾病。冠状病毒科可分为三个属即α、β和γ属。新型冠状病毒属于β冠状病毒的Sarbecovirus亚属。
新型冠状病毒肺炎是一种新发传染病，人群没有免疫力，普遍易感。新型冠状病毒感染的肺炎在免疫功能低下和免疫功能正常人群均可发生，与接触病毒的量有一定关系。对于免疫功能较差的人群，例如老年人、孕产妇或存在肝肾功能异常，有慢性病人群，感染后病情更重。我们迫切地需要找到可以对因治疗的药物来对抗新型冠状病毒；新冠病毒肺炎治疗目前并无特效药，对于疾病的治疗仅限于对症治疗，部分抗病毒药物使用后，临床结果不明确，并且药物使用对病原体无法实现特异性杀灭，副作用大。
疫苗被认为是最有效的群体免疫防控手段。目前尚没有新型冠状病毒疫苗上市，对该病毒的防控最有效的方式即为隔离，这种措施下给人们的生产、生活带来了诸多不便及经济损失。全球也在大力开展疫苗研制，全球范围内已有115个针对COVID-2019的候选疫苗研究项目。疫苗从技术平台可分成传统疫苗和新型疫苗。传统疫苗包括灭活疫苗和减毒活疫苗，新型疫苗主要指使用复杂基因工程技术包括病毒载体、核酸和重组蛋白等疫苗。
传统灭活疫苗的弊端是对抗原微生物培养需要多个月，生产效率低；此外，灭活疫苗其免疫原性低于减毒疫苗，需要多次接种才能激活足够免疫反应。而减毒活疫苗的弊端是存在由突变返祖而引起其他疾病的风险。新型疫苗的优点是具有更低的毒副作用，抗原用量少，生产周期短等。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种冠状病毒疫苗及其制备方法，具体提供一种新型冠状病毒疫苗及其制备方法，尤其提供一种安全性高、疗效显著、制备工艺简单的新型冠状病毒疫苗及其制备方法。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种冠状病毒疫苗，所述冠状病毒疫苗包括纳米载体，以及包覆于所述纳米载体中的冠状病毒；所述纳米载体包括壳聚糖和/或壳聚糖衍生物。
壳聚糖是一种天然的碱性、阳离子多糖聚合物，其是甲壳质脱乙酰化的衍生物，其具有生物相容性、生物可降解性、免疫刺激性、粘附性、无毒性、血液相容性、抗肿瘤性、抗氧化性、抗菌性、促进组织重生等广泛特性，不但可以成为纳米疫苗的载体，并兼顾纳米疫苗佐剂的特性。
本发明创造性地将冠状抗原病毒包覆于壳聚糖和/或壳聚糖衍生物中，能够成功抑制其活性，完成物理方式的灭菌程序，相较于传统的化学灭菌模式，其显著地提高了疫苗的生产效果，极大地节约了生产成本；同时，可以非常有效地减少其突变返祖引起的其他疾病的风险；且因抗原病毒体积约20-100nm的尺寸，壳聚糖或壳聚糖衍生物很容易将其通过简单物理方式包覆成纳米复合物；另外，因壳聚糖或其衍生物的生物相容和生物降解特性，使得该疫苗具有很好的生物安全性。
本发明将壳聚糖或壳聚糖衍生物作为冠状抗原病毒的纳米载体，其在体液中通过酶活性使其可以持久缓释病毒抗原，发挥缓控释效果，使免疫细胞实现更有效的辨认，增强其永久的免疫功效，尤其对年长患者更有利。
本发明将壳聚糖或壳聚糖衍生物作为冠状抗原病毒的纳米载体，由于其带有正电荷，其能与人体气管粘膜上的带负电荷的皮质细胞产生静电相互作用，容易聚集于易受冠状病毒尤其是新冠抗原病毒攻击的人体气管粘膜部位，实现了靶向作用，更有效地发挥其抗病毒功效。
优选地，所述冠状病毒包括新型冠状病毒2019-nCoV。
优选地，所述壳聚糖衍生物包括壳聚糖盐衍生物、壳聚糖酯衍生物或壳聚糖酰胺衍生物中的任意一种或至少两种的组合。
所述至少两种的组合例如壳聚糖盐衍生物和壳聚糖酯衍生物、壳聚糖酯衍生物和壳聚糖酰胺衍生物的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述壳聚糖衍生物包括壳聚糖盐酸盐、壳聚糖乳酸盐或N-(2-羟丙基)-3-三甲基壳聚糖氯化铵(HTCC)中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述新型冠状病毒疫苗的粒径为20-200nm，例如20nm、50nm、80nm、100nm、120nm、150nm、180nm或200nm等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。优选100-200nm。
本发明所涉及的冠状病毒疫苗的粒径特定选择为20-200nm，是因为更能有效地吸附于鼻腔、气管及支气管的粘膜层，并且更容易渗透入粘膜淋巴细胞，通畅激活体液免疫与细胞免疫系统，同时自动启动细胞免疫记忆。
优选地，所述壳聚糖或壳聚糖衍生物的数均分子量范围是20-500kDa，例如20kDa、50kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa或500kDa等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
本发明所涉及的壳聚糖或壳聚糖衍生物的分子量特定选择上述数值范围，是因为若分子量进一步提高会使制得的疫苗纳米粒粒径过大，若分子量进一步降低会使制得的疫苗纳米粒粒径过小，均不利于有效地吸附于鼻腔、气管及支气管的粘膜层，并且不利于渗透入粘膜淋巴细胞，通畅激活体液免疫与细胞免疫系统。
优选地，所述壳聚糖或壳聚糖衍生物的脱乙酰度为85-95％，例如85％、88％、89％、90％、92％、93％、94％或95％等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述冠状病毒为未经减毒和灭活处理的冠状病毒。
相较于传统的灭活疫苗或减毒活疫苗，本发明所涉及的疫苗并不需要对冠状病毒做额外的前处理操作，仅需要对其进行必要的接种、培养和纯化处理后即可被载体包覆制成疫苗。克服了对抗原微生物培养需要多个月、生产效率低、需要多次接种才能激活足够免疫反应的弊端，同时降低了由突变返祖而引起其他疾病的风险。
优选地，所述冠状病毒与纳米载体的质量比为(0.1-1):(1-10)，其中(0.1-1)可以选自0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0等，其中(1-10)可以选自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述冠状病毒疫苗的剂型为喷雾剂，优选鼻喷雾剂。
传统疫苗通过肌肉注射，由血液循环系统传递到身体免疫中心，过程中疫苗稀释于血液内，遇到一些蛋白酶破坏疫苗内的抗原，所以注射分量不可少，另需一定时间范围内，多次服用，才可以完成疗效。因冠状病毒尤其是新冠病毒(2019-nCoV)主要攻击人体呼吸系统，而鼻腔粘膜淋巴系统是最重要、最前线的防御系统，将所述冠状病毒疫苗制成喷雾剂尤其是鼻喷雾剂，即将疫苗的面积对体积比无数倍增大，变成气溶胶纳米粒，使其能够更高效地传递到此靶点，即使激活体液免疫和细胞免疫，通过此特殊的传递方式，大大增强了该疫苗对免疫反应的强度，彻底解决了传统疫苗使用上的最大弊端。
第二方面，本发明提供一种如上所述的冠状病毒疫苗的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
将冠状病毒与载体混合后，再与弱酸混合，形成纳米颗粒，即所述冠状病毒疫苗。
本发明所涉及的冠状病毒疫苗的制备方法简单、快捷、成本更低，更适用于工业化生产。
优选地，所述冠状病毒的存在形式为冠状病毒株液，其浓度为0.1-1.0mg/mL，例如0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL、0.6mg/mL、0.7mg/mL、0.8mg/mL、0.9mg/mL或1.0mg/mL等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述载体的存在形式为载体溶液，其浓度为0.2-2.0mg/mL，例如0.2mg/mL、0.5mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.5mg/mL、1.6mg/mL、1.8mg/mL或2.0mg/mL等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述弱酸包括三聚磷酸盐，例如三聚磷酸钠、三聚磷酸镁、三聚磷酸铝等。
基于天然的壳聚糖是弱碱性，其遇到弱酸如三聚磷酸盐即会即时形成纳米包覆颗粒。
优选地，所述三聚磷酸盐的存在形式为三聚磷酸盐溶液，其浓度为1.0-2.0mg/mL，例如1.0mg/mL、1.2mg/mL、1.3mg/mL、1.4mg/mL、1.5mg/mL、1.6mg/mL、1.7mg/mL、1.8mg/mL、1.9mg/mL或2.0mg/mL等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述冠状病毒与载体混合的温度为15-30℃，例如15℃、17℃、18℃、20℃、22℃、24℃、25℃、28℃或30℃等，时间为5-10min，例如5min、6min、7min、8min、9min或10min等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述与弱酸混合的温度为15-30℃，例如15℃、17℃、18℃、20℃、22℃、24℃、25℃、28℃或30℃等，时间为5-10min，例如5min、6min、7min、8min、9min或10min等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
当满足上述系列混合条件时，制备得到的疫苗具有更好的稳定性。
优选地，所述冠状病毒在与载体混合前进行接种、培养和纯化处理。
所述接种、培养和纯化处理方式可以参考现有技术中公开的方法进行，例如接种可以采取三种方式：1)动物接种：按病毒的类型，按易感动物并接种适当的部位；2)鸡胚培养：一般用孵化9-14天鸡胚，寻找最适合部分位接种；3)组织细胞培养：把病毒接种于离体的组块或单个细胞內培养。
例如培养的方式可以是：在10000升的培养槽，放入适量清水，病毒株，营养颗粒，保持室温稳定，适当性地搅拌均匀，经过2-3个月，收取病毒。
例如纯化的方式可以为：层析法，离心机法，超细过滤膜法等。
优选地，所述形成纳米颗粒后进一步将其制成冠状病毒疫苗鼻喷雾剂，所述冠状病毒疫苗鼻喷雾剂的制备方法包括：将纳米颗粒与药用辅料混合进行喷雾干燥，即得。
优选地，所述纳米颗粒在与药用辅料混合前进行纯化处理。
优选地，所述药用辅料包括赋形剂、稀释剂、调味剂、粘合剂或填充剂中的任意一种或至少两种的组合。
所述至少两种的组合例如赋形剂和稀释剂的组合、调味剂和粘合剂的组合、粘合剂和填充剂的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述喷雾干燥的温度为60-100℃，例如60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃或100℃等，时间为15-30min，例如15min、18min、20min、22min、25min、28min或30min等，上述数值范围内的其他任意具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
所述喷雾干燥的具体工艺如下：纳米颗粒经过清洗和过滤后，湿的纳米颗粒与氮气混合均匀，生成气溶胶体，干燥槽内的温度为60-100℃，主要把水分抽干，然后气溶胶进入分离器，气体向上收，干燥后气溶胶向下进行到存储罐。
作为本发明的优选技术方案，所述冠状病毒疫苗的制备方法如下：
(1)将冠状病毒进行接种、培养和纯化处理；
(2)将纯化后的浓度为0.1-1.0mg/mL的冠状病毒水溶液与浓度为0.2-2.0mg/mL的壳聚糖和/或壳聚糖衍生物水溶液在15-30℃下混合5-10min后，再与浓度为1.0-2.0mg/mL的三聚磷酸钠水溶液在15-30℃下混合5-10min，得到所述冠状病毒疫苗。
第三方面，本发明还提供一种如第一方面所述的冠状病毒疫苗在制备冠状病毒肺炎预防和/或治疗药物中的应用。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明创造性地将冠状抗原病毒包覆于壳聚糖和/或壳聚糖衍生物中，能够成功抑制其活性，完成物理方式的灭菌程序，相较于传统的化学灭菌模式，其显著地提高了疫苗的生产效果，极大地节约了生产成本；同时，可以非常有效地减少其突变返祖引起的其他疾病的风险；且因冠状抗原病毒体积约20-100nm的尺寸，壳聚糖或壳聚糖衍生物很容易将其通过简单物理方式包覆成纳米复合物；另外，因壳聚糖或其衍生物的生物相容和生物降解特性，使得该疫苗具有很好的生物安全性。
本发明将壳聚糖或壳聚糖衍生物作为冠状抗原病毒的纳米载体，其在体液中通过酶活性使其可以持久缓释病毒抗原，发挥缓控释效果，使免疫细胞实现更有效的辨认，增强其永久的免疫功效，尤其对年长患者更有利。
本发明将壳聚糖或壳聚糖衍生物作为冠状抗原病毒的纳米载体，由于其带有正电荷，其能与人体气管粘膜上的带负电荷的皮质细胞产生静电相互作用，容易聚集于易受冠状病毒尤其是新冠抗原病毒(2019-nCoV)攻击的人体气管粘膜部位，实现了靶向作用，更有效地发挥其抗病毒功效。
进一步地，将所述冠状病毒疫苗制成喷雾剂尤其是鼻喷雾剂，即将疫苗的面积对体积比无数倍增大，变成气溶胶纳米粒，使其能够更高效地传递到此靶点，即使激活体液免疫和细胞免疫，通过此特殊的传递方式，大大增强了该疫苗对免疫反应的强度，彻底解决了传统疫苗使用上的最大弊端。
本发明所涉及的冠状病毒疫苗的制备方法简单、快捷、成本更低，更适用于工业化生产。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例提供一种新型冠状病毒2019-nCoV疫苗，其制备方法如下：
(1)将新型冠状病毒进行接种、培养和纯化处理：
(1.1)接种：将新型冠状病毒接种于孵化10天的鸡胚中；
(1.2)培养：在10000升的培养槽中，放入清水和病毒株，营养颗粒，保持室温稳定，搅拌均匀，经过2个月，收取病毒；
(1.3)纯化：采用超细过滤膜进行纯化处理。
(2)将纯化后的新型冠状病毒与水混合，配制成浓度为0.5mg/mL的新型冠状病毒水溶液，然后与浓度为1.0mg/mL的壳聚糖盐酸盐(数均分子量为20kDa，脱乙酰度为87％)水溶液在20℃下混合10min后，再与浓度为1.5mg/mL的三聚磷酸钠水溶液在20℃下混合10min，得到所述新型冠状病毒疫苗。
实施例2
本实施例提供一种新型冠状病毒2019-nCoV疫苗，其制备方法如下：
(1)将新型冠状病毒进行接种、培养和纯化处理：
(1.1)接种：将新型冠状病毒接种于孵化10天的鸡胚中；
(1.2)培养：在10000升的培养槽中，放入清水和病毒株，营养颗粒，保持室温稳定，搅拌均匀，经过2个月，收取病毒；
(1.3)纯化：采用超细过滤膜进行纯化处理。
(2)将纯化后的新型冠状病毒与水混合，配制成浓度为0.1mg/mL的新型冠状病毒水溶液，然后与浓度为0.2mg/mL的壳聚糖乳酸盐(数均分子量为50kDa，脱乙酰度为89％)水溶液在15℃下混合10min后，再与浓度为1.0mg/mL的三聚磷酸钠水溶液在15℃下混合10min，得到所述新型冠状病毒疫苗。
实施例3
本实施例提供一种新型冠状病毒2019-nCoV疫苗，其制备方法如下：
(1)将新型冠状病毒进行接种、培养和纯化处理：
(1.1)接种：将新型冠状病毒接种于孵化10天的鸡胚中；
(1.2)培养：在10000升的培养槽中，放入清水和病毒株，营养颗粒，保持室温稳定，搅拌均匀，经过2个月，收取病毒；
(1.3)纯化：采用超细过滤膜进行纯化处理。
(2)将纯化后的新型冠状病毒与水混合，配制成浓度为1.0mg/mL的新型冠状病毒水溶液，然后与浓度为2.0mg/mL的N-(2-羟丙基)-3-三甲基壳聚糖氯化铵(数均分子量为80kDa，脱乙酰度为92％)水溶液在30℃下混合5min后，再与浓度为2.0mg/mL的三聚磷酸钠水溶液在30℃下混合5min，得到所述新型冠状病毒疫苗。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种新型冠状病毒疫苗及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (10)
1.一种冠状病毒疫苗，其特征在于，所述冠状病毒疫苗包括纳米载体，以及包覆于所述纳米载体中的冠状病毒；所述纳米载体包括壳聚糖和/或壳聚糖衍生物。
2.如权利要求1所述的冠状病毒疫苗，其特征在于，所述冠状病毒包括新型冠状病毒2019-nCoV；
所述壳聚糖衍生物包括壳聚糖盐衍生物、壳聚糖酯衍生物或壳聚糖酰胺衍生物中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述壳聚糖衍生物包括壳聚糖盐酸盐、壳聚糖乳酸盐或N-(2-羟丙基)-3-三甲基壳聚糖氯化铵中的任意一种或至少两种的组合。
3.如权利要求1或2所述的冠状病毒疫苗，其特征在于，所述冠状病毒疫苗的粒径为20-200nm，优选100-200nm；
优选地，所述壳聚糖或壳聚糖衍生物的数均分子量范围是20-500kDa；
优选地，所述壳聚糖或壳聚糖衍生物的脱乙酰度为85-95％。
4.如权利要求1-3中任一项所述的冠状病毒疫苗，其特征在于，所述冠状病毒为未经减毒和灭活处理的冠状病毒；
优选地，所述冠状病毒与纳米载体的质量比为(0.1-1):(1-10)；
优选地，所述冠状病毒疫苗的剂型为喷雾剂，优选鼻喷雾剂。
5.如权利要求1-4中任一项所述的冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
将冠状病毒与载体混合后，再与弱酸混合，形成纳米颗粒，即所述冠状病毒疫苗。
6.如权利要求5所述的冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，所述冠状病毒的存在形式为冠状病毒株液，其浓度为0.1-1.0mg/mL；
优选地，所述载体的存在形式为载体溶液，其浓度为0.2-2.0mg/mL；
优选地，所述弱酸包括三聚磷酸盐；
优选地，所述三聚磷酸盐的存在形式为三聚磷酸盐溶液，其浓度为1.0-2.0mg/mL。
7.如权利要求5或6所述的冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，所述冠状病毒与载体混合的温度为15-30℃，时间为5-10min；
优选地，所述与弱酸混合的温度为15-30℃，时间为5-10min。
8.如权利要求5-7中任一项所述的冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，所述冠状病毒在与载体混合前进行接种、培养和纯化处理。
9.如权利要求5-8中任一项所述的冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，所述形成纳米颗粒后进一步将其制成冠状病毒疫苗鼻喷雾剂，所述冠状病毒疫苗鼻喷雾剂的制备方法包括：将纳米颗粒与药用辅料混合进行喷雾干燥，即得；
优选地，所述纳米颗粒在与药用辅料混合前进行纯化处理；
优选地，所述药用辅料包括赋形剂、稀释剂、调味剂、粘合剂或填充剂中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述喷雾干燥的温度为60-100℃，时间为15-30min。
10.如权利要求1-4中任一项所述的冠状病毒疫苗在制备冠状病毒肺炎预防和/或治疗药物中的应用。
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111920945A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114767707A (zh) * | 2021-01-22 | 2022-07-22 | 艾美科健株式会社 | 包含低分子壳聚糖的用于预防或治疗冠状病毒感染疾病的组合物 |
| KR20220106912A (ko) * | 2021-01-22 | 2022-08-01 | 아미코젠주식회사 | 저분자 키토산을 포함하는 코로나바이러스 감염증 예방 또는 치료용 조성물 |
| WO2023168541A1 (en) * | 2022-03-09 | 2023-09-14 | Shenzhen Genius Biotech Service Co., Ltd. | Chitosan nanoparticles (cnps) and preparation method thereof |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102327228A (zh) * | 2011-09-26 | 2012-01-25 | 黑龙江大学 | 壳聚糖新城疫疫苗纳米粒的制备方法 |
| CN102423304A (zh) * | 2011-11-24 | 2012-04-25 | 黑龙江大学 | N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖/n,o-羧甲基壳聚糖新城疫减毒活疫苗纳米粒的制备方法 |
| CN109172817A (zh) * | 2018-08-16 | 2019-01-11 | 华中农业大学 | 猪流行性腹泻病毒减毒活疫苗壳聚糖微球的制备方法及其应用 |
-
2020
- 2020-09-22 CN CN202011001922.6A patent/CN111920945A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102327228A (zh) * | 2011-09-26 | 2012-01-25 | 黑龙江大学 | 壳聚糖新城疫疫苗纳米粒的制备方法 |
| CN102423304A (zh) * | 2011-11-24 | 2012-04-25 | 黑龙江大学 | N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖/n,o-羧甲基壳聚糖新城疫减毒活疫苗纳米粒的制备方法 |
| CN109172817A (zh) * | 2018-08-16 | 2019-01-11 | 华中农业大学 | 猪流行性腹泻病毒减毒活疫苗壳聚糖微球的制备方法及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| DEHGHAN, S.等: "Rabbit nasal immunization against influenza by dry-powder form of chitosan nanospheres encapsulated with influenza whole virus and adjuvants", INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114767707A (zh) * | 2021-01-22 | 2022-07-22 | 艾美科健株式会社 | 包含低分子壳聚糖的用于预防或治疗冠状病毒感染疾病的组合物 |
| KR20220106912A (ko) * | 2021-01-22 | 2022-08-01 | 아미코젠주식회사 | 저분자 키토산을 포함하는 코로나바이러스 감염증 예방 또는 치료용 조성물 |
| KR102444839B1 (ko) | 2021-01-22 | 2022-09-19 | 아미코젠주식회사 | 저분자 키토산을 포함하는 코로나바이러스 감염증 예방 또는 치료용 조성물 |
| CN114767707B (zh) * | 2021-01-22 | 2024-05-03 | 艾美科健株式会社 | 包含低分子壳聚糖的用于预防或治疗冠状病毒感染疾病的组合物 |
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