CN112516156A - 一种抑制病毒的产品、制备方法及用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抑制病毒的药物,包括魔芋多糖，所述的病毒为冠状病毒，和/或禽流感病毒，进一步的，所述冠状病毒为γ属冠状病毒。魔芋多糖及其组方对γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）和禽流感病毒具有抑制效果。

Description

一种抑制病毒的产品、制备方法及用途
技术领域
本发明涉及一种抑制病毒的产品, 具体涉及抑制冠状病毒，和/或禽流感病毒的产品和制备方法及用途。
背景技术
流感病毒（Influenza Virus）及新型冠状病毒（SARS-CoV-2）在病毒分类学上同属于“冠状病毒”。冠状病毒属的病毒具有囊膜（envelope）、基因组为线性单股正链的RNA及N-蛋白结构。冠状病毒是引起流行性呼吸道传染疾病的主要病原体，并且其初始宿主均与动物蝙蝠密切相关。禽流感病毒（AIV）主要有亚型H5N1、H9N2、H7N7，而感染H5N1的患者病情重，病死率高；SARS-CoV-2病毒引起新冠肺炎（COVID-19）。禽流感病毒与新型冠状病毒引起的呼吸道传染病的传染性极强，尤其是后者，其病死率与非典SARS相当。
冠状病毒科（Coronaviridae）γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）成员。该病毒具有多形性，呈现圆形，大小约为80-120 nm。病毒有囊膜，表面有杆状纤突，形似冠状。与新型冠状病毒（SARS-CoV-2）同属于冠状病毒，二者病毒结构及引起上呼吸道感染的致病机理和感染途径相似。禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）属于正黏病毒科流感病毒属的单股负链RNA 病毒，禽流感病毒在家禽中广泛流行，宿主范围己从禽类扩大到了哺乳动物并能传播到人类，其中，H5N1及H7N9亚型具有对人高致病性。
流感病毒和新型冠状病毒的传播途径也相同; 主要通过打喷嚏和咳嗽等飞沫和气溶胶传播，经口腔、鼻腔、眼睛等黏膜直接或间接接触感染。
本发明通过魔芋提取物样品对上述二种病毒感染试验，主要评价魔芋水溶性多糖对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）和禽流感病毒的抑制效果，并通过魔芋水溶性多糖的对冠状病毒（呼吸道冠状病毒）和禽流感病毒的抑制效果，将魔芋水溶性多糖与现有的鼻腔冲洗剂成分组合，配置成新的具有清洗鼻腔，将鼻腔内的尘埃、过敏原体、细菌、病毒等清洗出去的同时，清洗后留在鼻腔内的清洗液，可以对残留在鼻腔鼻窦的病毒继续保持抑制作用。
最新临床研究重大发现2020/04/09及2020/04/23《自然·医学》，新冠病毒通过呼吸入侵人体上呼吸道的鼻咽部，尤其是鼻腔鼻窦，病毒首先在这个区域进行复制繁殖脱落，病毒然后通过下呼吸道释放到肺部及其它脏器，引起COVID-19疾病。由此可见，流感、禽流感、COVID-19疾病均为由冠状病毒引起的呼吸道传染疾病，在目前尚无特效抗病毒药物及安全有效的疫苗出现之前的情况下，除了戴口罩、勤洗手、隔离、防聚集等常规防护措施外，还可通过使用安全有效的清洗剂进行日常的鼻腔和口咽部的清洗措施，达到更为有效的防护疾病的传播和扩散、迅速控制疫情的效果。
最新的《Nature》（自然）（2020/05/21）杂志的发表文章揭示了在COVID-19疫情期间，由于全球采用隔离措施，流感Influenza疫情大大减少，说明二者病毒对人类的传播和感染途径一致,显示了二者疾病的防护措施一致和有效。
魔芋多糖（KGM）是从魔芋（Amorphophallus konjac C. Koch）的块茎里提取出来的一种高分子量、非离子型水溶性多糖，是魔芋的主要成分。
魔芋多糖是一种水溶性复合性多糖，由D-葡萄糖和D-甘露糖残基按1:1.6 或 2:3的克分子比以β-1，4 糖苷键共聚合而成的葡甘聚糖（KGM）长链分子，平均分子量20万-200万，分子每19个糖残基（C-6位）上连接有一个乙酰基团。KGM 由于其水溶液具有较高的粘度，而在食品工业中广泛用作增稠剂、乳化剂、稳定剂等。
发明内容
本发明旨在通过魔芋水溶性多糖的对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）和禽流感病毒的抑制效果实验，将魔芋水溶性多糖与现有的鼻腔冲洗剂成分组合，配置成新的具有清洗鼻腔，将鼻腔内的尘埃、过敏原体、细菌、病毒等清洗出去的同时，对清洗出来的含病毒液体又有抑制作用，确保其不成为病毒的传染传播源，而且，清洗后留在鼻腔内的清洗液，可以对残留在鼻腔鼻窦的病毒继续保持抑制作用。
为了克服现有技术问题,本发明公开了一种抑制病毒的产品、制备方法及用途。
本发明的技术方案为：
一种抑制病毒的产品 其特征在于包括魔芋多糖。
进一步的，所述的病毒为冠状病毒，和/或禽流感病毒，进一步的，所述冠状病毒为一种γ属冠状病毒。
进一步的，魔芋多糖为魔芋水溶性多糖。
所述的抑制病毒的产品，还包括盐、碳酸氢钠、柠檬酸或苹果酸、柠檬酸钠，进一步的,所述的盐为海盐或食盐。
进一步的，所述的抑制病毒的产品，重量份为食盐4～12份，碳酸氢钠0.1～2份，柠檬酸或苹果酸0.05～0.8份，柠檬酸钠或苹果酸钠0.1～1.2份，魔芋多糖0.1～1.5份。
进一步优选的,所述的抑制病毒的产品，重量份为盐6～9份，碳酸氢钠0.3～1.5份，柠檬酸或苹果酸0.1～0.5份，柠檬酸钠或苹果酸钠0.2～1.0份，魔芋多糖0.4～1.0份。
所述的抑制病毒的产品，制成即用液体，或者制成浓缩液体，或者制成固体混合物，然后临用时加入适量溶剂而配制成即用液；
或加入常规的辅料, 制备成冲洗剂、喷雾剂、漱口水等制剂；进一步的，所述冲洗剂为鼻腔冲洗剂、所述喷雾剂为鼻腔喷雾剂、或/和创伤喷雾剂、漱口水为漱口水制剂。
所述的抑制病毒的产品的制备方法，配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度W/V为0.6%至3.0%的溶液，进一步的，W/V为克/毫升，进一步的，水为洁净水。所述产品与鼻腔冲洗器或鼻腔喷雾器或漱口水制剂组合使用。
所述的抑制病毒的产品在制备防护流感，和/或禽流感,和/或新冠肺炎COVID-19疫情，和/或治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、和/或过敏性鼻炎产品中的用途。
本发明的技术方案具有如下优点：魔芋多糖具有多种生物学功能，其中包括改善血脂，脂蛋白和血糖水平，促进免疫功能，防止细胞脂质过氧化，对抗皮肤炎症因子等多重功效，修复、保护、湿润、隔离创伤面。KGM还可于四价硼酸盐形成稳定的网状络合物，对细菌病毒具有吸附作用。此外，魔芋多糖还富含硒元素，发挥硒元素对人体的健康保健功能。
实验结果表明，魔芋水溶性多糖对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）在5、30分钟的抑制率分别达到92.2及93.4%，对禽流感病毒在5、30分钟的抑制率分别达到95.8及96.8%。
附图说明
图1：测定魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的红外吸收光谱（IR）。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，其所述是对本发明的解释而非限定。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下通过具体实施例进行说明。
本发明的魔芋水溶性多糖从市场购买，也可以依照文献，罗鸿源,彭志良,张以顾等：魔芋葡甘露聚糖精品的提取初报，贵州农业科学，1991（3）：22-23）魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的提取分离纯化工艺和方法制备魔芋多糖；也可以根据如下步骤进行制备，魔芋粉（60目）→50%乙醇洗涤→80%乙醇洗涤→无水乙醇洗涤→烘干→粗品→制成水溶液→离心→上清液→透析→冷冻干燥→魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）成品。
魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的含量测定（依照文献：张展,文键等：魔芋精粉中葡甘露聚糖含量检测与分析[J]. 武汉大学学报(自然科学版), 2001, 47(2):150-152.）：测得魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的含量为98.92%（w/w）。
魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的结构测定：
测定魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的红外吸收光谱（IR,），如图1所示。
其红外吸收光谱（IR）与文献报道（许时婴，杨莉：魔芋葡甘露聚糖的性质与魔芋精粉品质研究. 无锡轻工业学院学报. 1990, 9(3):26-32.）一致，表明本发明制备的魔芋多糖（魔芋葡甘露聚糖）的化学结构与文献提取分离纯化的一致。
实施例1：
一种抑制病毒的产品 其特征在于包括魔芋多糖；
所述的病毒为冠状病毒、禽流感病毒，进一步的，所述冠状病毒为一种γ属冠状病毒。
实施例2：
一种抑制病毒的产品 其特征在于包括魔芋多糖；魔芋多糖为魔芋水溶性葡甘聚糖。
实施例3：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.1份，柠檬酸0.3份，柠檬酸钠0.2份，魔芋多糖0.5份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为3.0%（克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成冲洗剂。
实施例4：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.20份，柠檬酸0.15份，柠檬酸钠0.23份，魔芋多糖0.75份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为0.9%（克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成漱口水。
实施例5：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份，魔芋多糖0.7份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为1.5% (克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成鼻腔喷雾剂；与鼻腔喷雾器或喷雾剂组合使用；用于治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、和/或过敏性鼻炎；用于防治新冠肺炎/流感。
实施例6：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.3份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.2份，魔芋多糖0.8份；制备成鼻腔冲洗剂；与鼻腔冲洗器组合使用；用于治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、和/或过敏性鼻炎；用于防治新冠肺炎/流感。
实施例7：
一种抑制病毒的产品，还包括的原料和重量份为海盐8.5份，碳酸氢钠4.5份，柠檬酸0.18份，柠檬酸钠0.35份，魔芋多糖0.4份；制备成漱口水。
实施例8：
魔芋水溶性多糖对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）和禽流感病毒的抑制效果
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 SPF鸡胚购自SPA-FAS, Inc.，并自行孵化至10日龄。
1.1.2 γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒） DE/903/90株，禽流感病毒H9 亚型WJ57株由Delaware Agricultural Experiment Station, College of AgriculturalSciences, University of Delaware制备，并保存于-80℃冰箱。
1.1.3 稀释液生理盐水（0.9% NaCl）由TWC, Inc.公司制备、高压灭菌，并保存于4℃冰箱。
1.1.4 魔芋水溶性多糖溶液：魔芋水溶性多糖无菌生理盐水溶液，浓度为50毫克/毫升。
1.1.5 配方I溶液：海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升）的溶液。
1.1.6 配方II溶液：海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份，魔芋多糖0.7份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升的溶液。
1.2 方法
1.2.1 魔芋水溶性多糖及其配方对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）抑制效果评价实验
供试品及方法：
魔芋水溶性多糖，用生理盐水配制成初始浓度为50毫克/毫升的魔芋水溶性多糖生理盐水配液，将制备好的γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）DE/903/90株添加至已消毒的生理盐水中，配成冠状病毒原液，按1（病毒原液）：9（魔芋水溶性多糖）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检多糖样品组；按1（病毒原液）：9（海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升的溶液）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检配方I样品组；按1（病毒原液）：9（海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份，魔芋多糖0.7份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升的溶液）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检配方II样品组；同时按1（病毒原液）：9（生理盐水） 比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为对病毒对照组；魔芋水溶性多糖生理盐水配液为样品空白对照组；按照以下方法对待检样品组和病毒对照组样品分别进行病毒含量检测。将上述各样品组分别用无菌生理盐水作10 倍系列稀释，取10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7，各尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚5 枚，每胚0.1ml，置36～37℃继续孵育。24h 以前死亡的鸡胚弃去不计，在24～144h内死亡的鸡胚随时取出，至144h，取出所有活胚。接种后鸡胚在24～144h 死亡鸡胚及存活鸡胚胎儿出现失水、蜷缩、发育小(接种胎儿比对照最轻胎儿重量低2g 以上)等特异性病痕者判为感染，计算EID50，结果见表1，
Figure DEST_PATH_IMAGE001
实施例9：
1.2.2 魔芋水溶性多糖及其配方对禽流感病毒抑制效果评价实验
供试品及方法：
魔芋水溶性多糖，用生理盐水配制成初始浓度为50毫克/毫升的魔芋多糖生理盐水配液，将制备好的禽流感病毒H9 亚型WJ57 株添加至消毒的生理盐水中，配成禽流感病毒原液，按1（病毒原液）：9（魔芋水溶性多糖）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检多糖样品组；按1（病毒原液）：9（海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升的溶液）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检配方I样品组；按1（病毒原液）：9（海盐8份，碳酸氢钠0.4份，柠檬酸0.1份，柠檬酸钠0.5份，魔芋多糖0.7份；配方各成分混合均匀，以无菌生理盐水为溶剂，制备成浓度为50毫克/毫升的溶液）比例，置室温18-26℃分别孵育5min 和30min，作为待检配方II样品组；同时按1（病毒原液）：9（生理盐水） 比例，置室温18-26℃分别孵育5min和30min，作为病毒对照组；魔芋水溶性多糖生理盐水配液为样品空白对照组。按照以下方法对多糖样品组和病毒对照组样品分别进行病毒含量检测。将上述样品组分别用无菌生理盐水作10 倍系列稀释，取10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9 共9个稀释度，各尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚5 枚，每胚0.1ml，置36～37℃继续孵育。24h 以前死亡的鸡胚弃去不计，在24～120h 内死亡的鸡胚随时取出，至120h 将所有的鸡胚置-20℃冰箱中冷却2 小时，收获每枚鸡胚的尿囊液，测定血凝价，计算EID50。
Figure DEST_PATH_IMAGE002
表1、2的结果显示，魔芋水溶性多糖对一种γ属冠状病毒（呼吸道冠状病毒）在5、30分钟的抑制率分别达到92.2及93.4%，对禽流感病毒在5、30分钟的抑制率分别达到95.8及96.8%；更为重要是，当与海盐、碳酸氢钠、柠檬酸、柠檬酸钠配方后，则相应的抑制率分别提高至96.9、
99.2、95.8、99.8%，说明魔芋水溶性多糖与海盐、碳酸氢钠、柠檬酸、柠檬酸钠等配伍，起到相互协同作用，显著提高了对冠状病毒（呼吸道冠状病毒）及禽流感病毒的抑制作用。
实施例10：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.1份，苹果酸0.3份，苹果酸钠0.2份，魔芋多糖0.5份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为3.0%（克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成鼻腔冲洗剂。
实施例11：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.20份，苹果酸0.15份，苹果酸钠0.23份，魔芋多糖0.75份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为0.9%（克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成漱口水制剂。
实施例12
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为食盐8份，碳酸氢钠0.4份，苹果酸0.1份，苹果酸钠0.5份，魔芋多糖0.7份；配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度为1.5% (克/毫升）的溶液，水为洁净水，制备成鼻腔喷雾剂；与鼻腔喷雾器或漱口水制剂组合使用；用于治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、过敏性鼻炎；也可以用于防治新冠肺炎/流感。
实施例13：
一种抑制病毒的产品，原料和重量份为海盐9份，碳酸氢钠0.3份，苹果酸0.1份，苹果酸钠0.2份，魔芋多糖0.8份；制备成鼻腔冲洗剂；与鼻腔冲洗器或漱口水制剂组合使用；用于治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、和/或过敏性鼻炎；也可以用于防治新冠肺炎/流感。
实施例14：
一种抑制病毒的产品，还包括的原料和重量份为海盐8.5份，碳酸氢钠4.5份，苹果酸0.18份，苹果酸钠0.35份，魔芋多糖0.4份；制备成鼻喷剂。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了一定的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种抑制病毒的产品其特征在于包括魔芋多糖。
2.根据权利要求1所述的抑制病毒的产品，其特征在于，所述的病毒为冠状病毒，和/或禽流感病毒，进一步的，所述冠状病毒为γ属冠状病毒。
3.根据权利要求1所述的抑制病毒的产品其特征在于，魔芋多糖为魔芋水溶性多糖。
4.根据权利要求1所述的抑制病毒的产品，其特征在于：还包括盐、碳酸氢钠、柠檬酸或苹果酸、柠檬酸钠或苹果酸钠,进一步的所述的盐为海盐或食盐。
5.根据权利要求4所述的抑制病毒的产品，其特征在于：重量份为盐4～12份，碳酸氢钠0.1～2份，柠檬酸或苹果酸0.05～0.8份，柠檬酸钠或苹果酸钠0.1～1.2份，魔芋多糖0.1～1.5份。
6.根据权利要求6所述的抑制病毒的产品，其特征在于：重量份为盐6～9份，碳酸氢钠0.3～1.5份，柠檬酸或苹果酸0.1～0.5份，柠檬酸钠或苹果酸钠0.2～1.0份，魔芋多糖0.4～1.0份。
7.根据权利要求1至6任一所述的抑制病毒的产品，其特征在于，制成即用液体，或者制成浓缩液体，或者制成固体混合物，然后临用时加入适量溶剂而配制成即用液；或加入常规的辅料, 制备成冲洗剂、喷雾剂、漱口水等制剂；进一步的，所述冲洗剂为鼻腔冲洗剂、所述喷雾剂为鼻腔喷雾剂、或/和创伤喷雾剂、漱口水为漱口水制剂。
8.根据权利要求7所述的抑制病毒的产品的制备方法，其特征在于，配方各成分混合均匀，以水为溶剂，制备成浓度W/V为0.6%至3.0%的溶液，进一步的，W/V为克/毫升，进一步的，水为洁净水。
9.根据权利要求7所述的抑制病毒的产品，其特征在于，所述产品与鼻腔冲洗器或鼻腔喷雾器或口腔喷雾器或漱口水制剂组合使用。
10.根据权利要求1至7任一所述的抑制病毒的产品在制备防护流感，和/或禽流感,和/或新冠肺炎COVID-19疫情，或治疗鼻炎、和/或鼻窦炎、和/或过敏性鼻炎产品中的用途。
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