CN111902420B

CN111902420B - 做为抗癌剂的环二核苷酸

Info

Publication number: CN111902420B
Application number: CN201980012869.9A
Authority: CN
Inventors: B·E·芬克; D·S·多德; 赵玉芬; L·Y·秦; Z·鲁安; L·S·哈里克里施南; M·G·卡马乌; S·J·沃克; 陈利冰; P·K·帕克
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2018-02-13
Filing date: 2019-02-13
Publication date: 2024-02-02
Anticipated expiration: 2039-02-13
Also published as: DK3752516T3; US20200079815A1; AR114369A1; JP2021513562A; HUE058662T2; HRP20220520T1; JP7296405B2; US11339185B2; WO2019160884A1; TW202003539A; US20190248828A1; SI3752516T1; KR20200120683A; RS63128B1; PL3752516T3; EP3752516B1; ES2909616T3; PT3752516T; LT3752516T; CN111902420A

Abstract

本发明涉及如下所示的式I化合物、式II化合物和式III化合物以及包含本发明化合物的药学上可接受的组合物及使用所述组合物治疗各种病症的方法，式I化合物、式II化合物和式III化合物中所有取代基在本文中定义。

Description

做为抗癌剂的环二核苷酸

相关申请的交叉引用

本申请主张2018年2月13日提交的美国临时申请第62/629956号的权益，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明提供新颖的化合物、包含所述化合物的药物组合物，及使用它们例如治疗或预防某些癌症的方法，及其治疗用途。

背景技术

免疫疗法是快速扩展的医学治疗领域，其中出于积极治疗效果的目的而故意活化、抑制或以其他方式调节患者的免疫系统。免疫疗法剂包括诸如细胞、抗原、抗体、核酸、蛋白质、肽、天然存在的配体和合成制备分子的事物。细胞因子是已知作用为经由复杂信号传导网络引起免疫应答的小糖蛋白分子。已探索细胞因子作为免疫疗法剂，但其直接给药由于许多因素而受阻，包括其在血液中的较短半衰期，其仅可用频繁且通常较高的剂量进行补偿。一种高度有前景的方法为细胞因子诱导，其中用触发患者身体中一或多种治疗上有益细胞因子产生的免疫调节剂来治疗该患者。

一种用于产生细胞因子的药物为衔接蛋白STING(干扰素基因的刺激剂；也称为MPYS、TMEM173、MITA和ERIS)。STING为位于内质网上的细胞内受体。激动剂与STING的结合活化信号传导途径，最终诱导I型IFN，其为分泌型的且保护分泌及邻近细胞。STING可通过两种不同途径活化，各途径涉及不同类型的环二核苷酸(“CDN”)激动剂。在第一途径中，激动剂为由细菌性病原体用作第二信使的外源性CDN(Burdette等人2013)。在第二途径中，酶环状GMP-AMP合成酶(cGAS)检测胞溶质DNA，且作为应答合成充当内源性STING激动剂的CDN(Ablasser等人2013；Gao等人2013；Sun等人2013)。

STING的活化引起IRF3和NF-κB途径的上调，从而引起干扰素-β及其他细胞因子的诱导。STING对于对病原体或宿主来源的胞溶质DNA的应答而言至关重要。

两种外源性细菌STING激动剂CDN为3'3'-cGAMP和c-GMP。由cGAS产生的内源性STING激动剂CDN为2'3'-cGAMP。细菌CDN的特征为两个3'5'磷酸二酯桥键，而cGAS产生的CDN的特征为一个2'5'磷酸二酯桥键和一个3'5'磷酸二酯桥键。作为简写，将前者CDN称为3'3'CDN，且将后者称为2'3'CDN。出于历史原因，3'3'CDN也称为“典型”形式，且2'3'CDN称为“非典型”形式。

除了保护生物体免受病原体感染以外，据报道，STING活化还有益于治疗炎性疾病且在当前尤其关注的领域中有益于治疗癌症。合成性CDN与癌症疫苗STINGVAX的组合的给药在多种治疗性模型中展现出增强的抗肿瘤功效(Fu等人2015)。据报道，单独STING激动剂的给药在小鼠模型中显示强力的抗肿瘤免疫功效(Corrales等人2015a)。STING在感染、炎症和/或癌症中的作用的综述参见Ahn等人2015；Corrales等人2015b和2016；和Barber2015。

因此，本发明提供可用于治疗癌症的新颖环二核苷酸。

发明内容

提供式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物

其中所有取代基在本文中定义。

在另一方面，提供一种药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在另一方面，提供一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的受试者给药治疗有效量的STING活化剂(其具有式I)。

具体实施方式

下文为本发明的方面和实施方案，以及可在那些所展示方面和实施方案的范围内的额外方面和实施方案。本发明的方面不限于下文所描述的那些方面。

在第一方面，公开一种式I化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a为H、卤素、经0至6个R⁵取代的C_1-6烷基、经0至6个R⁵取代的C_3-6环烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R^b为H、经0至6个R⁵取代的C_1-6烷基、经0至6个R⁵取代的C_3-6环烷基、-C(O)R^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R⁵为H、卤素、C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

或两个R⁵基团可一起形成5元至6元碳环或杂环基团；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁶为H、卤素、C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R⁸为H、卤素、C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

本发明的其他方面包括式(I)化合物

其中

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

在本发明的另一方面，提供一种式(I)化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式(I)化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式(I)化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式(I)化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为F；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R³为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^3a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R³和R^3a可一起形成3元至4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

/>

在本发明的另一方面，提供下式化合物的药学上可接受的盐

/>

在本发明的另一方面，提供一种式II化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

或两个R⁵基团可一起形成5元至6元碳环或杂环基团；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

本发明的其他方面包括式(II)化合物

其中

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

在本发明的另一方面，提供一种式II化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式II化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式II化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式II化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

/>

其中

X为O；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；

R^4a为H、CH₃、卤素、-NR^a1R^a1或OR^a1；或

R⁴和R^4a可一起形成3元至4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

/>

在本发明的另一方面，提供下式化合物的药学上可接受的盐

在本发明的另一方面，提供一种式III化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

或两个R⁵基团可一起形成5元至6元碳环或杂环基团；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

本发明的其他方面包括式(III)化合物

其中

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

/>

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

R¹为

且

R²为

在本发明的另一方面，提供一种式III化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供一种式III化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R⁵为H、卤素、C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

n为0或1；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X独立地为O或S；

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

X为O；

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

其中

R¹和R²各自独立地为

其限制条件为R¹和R²中的一个必须为

Z₁为N或CR^a；

Z₂为NR^b；

R^a1为H、C_1-3烷基或C_3-6环烷基；

R^5a为H或C_1-3烷基；

R⁹为H、卤素或甲基；

Y为CR^a或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一方面，提供下式的化合物

在本发明的另一方面，提供下式化合物的药学上可接受的盐

在另一方面，提供选自例示实施例的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{9-羟基-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,18-二羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-羟基-17-{9-氧代-3H,5H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18S)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二羟基-3,12-二氧代-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-12-羟基-3,12-二氧代-3-硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

4-[(1S,7S,8R,10S,16R,17R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4,13-二氧代-4,13-二硫烷基-3,5,12,14-四氧杂-4λ⁵,13λ⁵-二磷杂三环[14.2.0.0^7,10]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氯-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-18-氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺，

4-[(1R,6S,8R,9R,15R,17S,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-羟基-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-17-基]吡啶-2-甲酰胺，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{5-氧代-5H,8H,9H-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘌呤-8-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-(6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{8-氧代-4H,5H,8H-[1,2,3,4]四唑并[1,5-a]嘌呤-5-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮，

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在另一方面，提供选自任何上述方面的范围内的化合物的任何子集清单的化合物。

在另一方面，提供下式化合物

/>

在另一方面，提供下式化合物的药学上可接受的盐

/>

在另一方面，提供下式化合物

/>

在另一方面，提供下式化合物的药学上可接受的盐

/>

本发明的其他实施方案

在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物。

在另一实施方案中，本发明提供一种制备本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物的方法。

在另一个实施方案中，本发明提供一种治疗和/或预防各种类型癌症的方法，包括将治疗向需要此治疗和/或预防的患者单独或任选与另一本发明化合物和/或至少一种其他类型治疗剂组合给药有效量的一或多种本发明化合物。

在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗和/或预防各种类型癌症的方法，所述癌症包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、子宫颈癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、泌尿系统癌、脑肿瘤(诸如神经胶母细胞瘤)、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤、间皮瘤及其他实体肿瘤或其他血液癌症。

在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗和/或预防各种类型癌症的方法，所述癌症包括(但不限于)小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤或膀胱癌。

在另一实施方案中，本发明提供一种用于疗法的本发明化合物。

在另一实施方案中，本发明提供同时、分开或依序用于疗法中的本发明化合物与其他治疗剂的组合制剂。

治疗性应用

本发明的环二核苷酸在人类细胞、动物细胞和人类血液中体外诱导I型干扰素和/或促炎性细胞因子。这些CDN的细胞因子诱导活性需要STING的存在，如通过在人类或动物细胞中的体外实验所证实。

本发明的CDN为受体STING的激动剂。

术语“激动剂”是指在体外或体内活化生物受体以引起生理响应的任何物质。

“STING”为“干扰素基因刺激剂”的缩写，其也称为“内质网干扰素刺激剂(ERIS)”、“IRF3活化介体(MITA)”、“MPYS”或“跨膜蛋白173(TM173)”。STING为在人体内由基因TMEM173编码的跨膜受体蛋白。STING通过环二核苷酸(CDN)的活化引起IRF3和NF-κB途径的活化，且因此分别引起I型干扰素和促炎性细胞因子的诱导。

本发明的另一目标为式(I)的环二核苷酸，其用于人类或动物的治疗性治疗。具体地，本发明的化合物可用于人类或动物健康状况的治疗性或诊断性应用。

术语“治疗剂”是指给予人类或动物以在该人类或动物中达成某种治疗效果(包括预防、治愈或减轻感染或疾病的影响)和/或以其他方式改善该人类或动物的健康状况的一或多种物质。

术语“单药疗法”是指在任何临床或医学情境中使用单种物质和/或策略来治疗人类或动物，其与在相同临床或医学情境中使用多种物质和/或策略来治疗人类或动物相对，而不管该多种物质和/或策略是否按任何次序依序使用或同时使用。

术语“化学治疗剂”在本文中是指给予人类或动物以杀伤肿瘤或使肿瘤生长减缓或停止和/或使癌细胞分裂减缓或停止和/或预防或减缓转移的一或多种化学物质。通常给药化学治疗剂来治疗癌症，但其也可适用于其他疾病。

术语“化学疗法”是指用一或多种化学治疗剂(参见上文定义)对人类或动物进行医学治疗。

术语“化学免疫疗法”是指组合使用(按任何次序依序使用或同时使用)化学疗法物质和/或策略以及免疫疗法物质和/或策略。化学免疫疗法常用于治疗癌症，但也可用于治疗其他疾病。

术语“免疫系统”是指预防身体内感染、在感染期间或在疾病期间保护身体和/或在感染或疾病之后帮助身体恢复所涉及的分子、物质(例如，体液)、解剖结构(例如，细胞、组织和器官)和生理过程的集合或任何一或多个组分。“免疫系统”的完整定义超出了本专利的范围；然而，本领域普通技术人员应理解该术语。

术语“免疫剂”是指可与免疫系统的任何一或多个组分相互作用的任何内源性或外源性物质。术语“免疫剂”包括抗体、抗原、疫苗及其组成性组分、核酸、合成的药物、天然或合成的有机化合物、细胞因子、天然或经修饰的细胞、其合成类似物和/或其片段。

术语“拮抗剂”是指在体外或体内抑制、抵消、下调生物受体和/或使生物受体不敏感以引起生理响应的任何物质。

术语“免疫疗法”是指故意调节人类或动物免疫系统的一或多个组分以直接或间接地达成某种治疗效益(包括全身性和/或局部作用以及预防性和/或治愈性作用)的任何医学治疗。免疫疗法可涉及通过任何途径(例如，口服、静脉内、经皮、经注射、经吸入等)(全身性途径、局部途径或两者)将一或多种免疫剂(参见上文定义)单独或以任何组合给予人类或动物受试者。

“免疫疗法”可涉及引起、增加、降低、停止、阻止、阻断或以其他方式调节细胞因子的产生，和/或使细胞因子或免疫细胞活化或去活化，和/或调节免疫细胞含量，和/或将一或多种治疗性或诊断性物质递送至身体内的特定部位或递送至特定类型的细胞或组织，和/或破坏特定细胞或组织。免疫疗法可用于达成局部作用、全身作用或两者的组合。

术语“经免疫抑制(immunosuppressed)”描述任何人类或动物受试者的免疫系统在功能上减弱、钝化或在其他方面受损或者任何人类或动物受试者中的一或多个免疫组分在功能上减弱、钝化或在其他方面受损的状态。

“免疫抑制(Immunosuppression)”可为疾病、感染、虚脱、营养不良、医学治疗或某一其他生理或临床状态的原因、后果或副产物。

术语“免疫调节性物质(immunomodulating substance)”、“免疫调节物质(immunomodulatory substance)”、“免疫调节剂(immunomodulatory agent)”和“免疫调节剂(immunomodulator)”在本文中为同义词，其是指在给予人类或动物之后直接影响该人类或动物的免疫系统的机能的任何物质。常见免疫调节剂的实例包括(但不限于)抗原、抗体和小分子药物。

术语“疫苗”是指给予人类或动物以诱发或增强针对该人类或动物中的一或多种抗原的特异性免疫系统应答和/或保护的生物制剂。

术语“疫苗接种”是指用疫苗治疗人类或动物或者将疫苗给予人类或动物的动作。

术语“佐剂”是指与主要治疗物质一起给药(按任何次序依序或同时给药)以达成经由单独使用该主要治疗物质无法达成的某种互补、协同或其他有益效应的次要治疗物质。佐剂可与疫苗、化学疗法或某一其他治疗物质一起使用。佐剂可增强主要治疗物质的功效，降低主要治疗物质的毒性或副作用，或对接受主要治疗物质的受试者提供某种保护，诸如(但不限于)改善免疫系统的机能。

在一个实施方案中，式(I)的环二核苷酸可以免疫疗法的形式给予人类或动物，以在体内诱导在治疗上有益于该人类或动物的一或多种细胞因子的产生。该类型的免疫疗法可单独或与其他治疗策略组合使用，按任何次序依序使用或同时使用。其可用于预防、治愈和/或减轻该人类或动物中感染或疾病的影响，和/或调节该人类或动物的免疫系统以达成某一其他治疗效益。

在一个特定实施方案中，本发明的环二核苷酸可用于经免疫抑制个人的细胞因子诱导免疫疗法。

在该实例中，式(I)的环二核苷酸将给予经免疫抑制的人类或动物受试者，以在体内诱导直接或间接地增强该人类或动物的免疫系统的一或多种细胞因子的产生。可得益于此治疗的受试者包括患有自身免疫性疾病、免疫系统缺乏或缺陷、微生物或病毒感染、感染性疾病或癌症的那些受试者。

由此，本发明公开一种用于诱导经免疫抑制个人中的细胞因子的方法，所述方法包括向有需要的患者给药式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

在另一实施方案中，本发明的环二核苷酸可用于与化学疗法组合的细胞因子诱导免疫疗法。在该实例中，式(I)的环二核苷酸将与一或多种化学治疗剂一起按任何次序依序或同时给予癌症患者，以使该患者中的肿瘤停止生长、使肿瘤缩小和/或破坏肿瘤。由细胞因子诱导(其由本发明化合物提供)与细胞毒性(其由化学治疗剂提供)的组合产生的化学免疫疗法与化学治疗剂用作单药疗法时的情形相比，对患者的毒性可更小、在患者中引起更少副作用和/或展现更大抗肿瘤功效。

由此，本发明公开一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者给药：化学治疗剂；和

式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

本发明的另一目标为式(I)的环二核苷酸，其适用于治疗细菌感染、病毒感染或癌症。

如本文所使用，“癌症”是指受试者中以不受调节或调节异常的细胞生长或死亡为特征的生理病况。术语“癌症”包括恶性或良性的实体肿瘤和源于血液的肿瘤。

在一优选的实施方案中，癌症来自以下组：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤或膀胱癌。

由此，本发明公开一种用于治疗细菌感染、病毒感染或癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者给药式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

本发明的另一目标为式(I)的环二核苷酸，其用于治疗可通过经由STING途径诱导免疫应答而缓解的病理。

虽然用于治疗时，式(I)化合物以及其药学上可接受的盐可以化合物本身给药，但其更通常以药物组合物形式呈现。

药物组合物可以每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型呈现。优选的单位剂量组合物为含有日剂量或亚剂量或其适当分率的活性成分的组合物。因此，此类单位剂量可一天给药超过一次。优选的单位剂量组合物为含有如上文所述的日剂量或亚剂量(一天给药超过一次)或其适当分率的活性成分的那些。

可用本发明化合物治疗的癌症类型包括(但不限于)脑癌、皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、血癌、肺癌和骨癌。此类癌症类型的实例包括神经母细胞瘤、肠癌瘤(诸如直肠癌瘤、结肠癌瘤、家族性腺瘤性息肉病性癌瘤和遗传性非息肉病性结肠直肠癌)、食道癌瘤、唇癌瘤、喉癌瘤、鼻咽癌、口腔癌、唾液腺癌瘤、腹膜癌、软组织肉瘤、尿道上皮癌、汗腺癌瘤、胃癌瘤、腺癌瘤、甲状腺髓质癌瘤、甲状腺乳头状癌瘤、肾癌瘤、肾实质癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、子宫体癌瘤、子宫内膜癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、睾丸癌瘤、乳腺癌(包括HER2阴性)、泌尿系统癌瘤、黑色素瘤、脑肿瘤(诸如神经胶母细胞瘤、星形细胞瘤、脊膜瘤、神经管胚细胞瘤和外周神经外胚层瘤)、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、成人T细胞白血病淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、肝细胞癌、多发性骨髓瘤、精原细胞瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肛管癌、肾上腺皮质癌瘤、脊索瘤、输卵管癌、胃肠道间质肿瘤、骨髓增殖性疾病、间皮瘤、胆道癌、尤文肉瘤及其他罕见的肿瘤类型。

本发明化合物适用于以其本身给药或与其他治疗剂或放射疗法组合或共同给药，而治疗某些类型癌症。因此，在一个实施方案中，本发明化合物与放射疗法或具有细胞抑制活性或抗赘生活性的第二治疗剂共同给药。适合的细胞抑制性化学治疗化合物包括(但不限于)(i)抗代谢物；(ii)DNA断裂剂；(iii)DNA交联剂；(iv)嵌入剂；(v)蛋白质合成抑制剂；(vi)拓扑异构酶I毒物，诸如喜树碱或拓扑替康(topotecan)；(vii)拓扑异构酶II毒物；(viii)微管导向剂；(ix)激酶抑制剂；(x)其他研究性药物；(xi)激素；和(xii)激素拮抗剂。预期本发明化合物适用于与属于上述12类的任何已知药物和当前正在开发中的任何未来药物组合使用。具体地，预期本发明化合物可用于与当前标准照护疗法(Standards ofCare)以及在可预见未来开发出的任何疗法组合使用。特定剂型和给药方案将基于医师正在发展的知识和本领域的通用技能。

本文进一步提供治疗方法，其中本发明化合物与一或多种免疫肿瘤学药物一起给药。本文所用的免疫肿瘤学药物(也称为癌症免疫疗法)在受试者中有效增强、刺激和/或上调免疫应答。在一个方面，给药本发明化合物与免疫肿瘤学药物在抑制肿瘤生长方面具有协同作用。

在一个方面，本发明化合物在给药免疫肿瘤学药物之前依序给药。在另一方面，本发明化合物与免疫肿瘤学药物同时给药。在另一方面，本发明化合物在给药免疫肿瘤学药物之后依序给药。

在另一方面，本发明化合物可与免疫肿瘤学药物共调配。

免疫肿瘤学药物包括例如小分子药物、抗体或其他生物分子。生物免疫肿瘤学药物的实例包括(但不限于)癌症疫苗、抗体和细胞因子。在一个方面，抗体为单克隆抗体。在另一方面，单克隆抗体为人源化抗体或人抗体。

在一个方面，免疫肿瘤学药物为(i)刺激(包括共刺激)受体的激动剂，或(ii)抑制(包括共抑制)T细胞上信号的拮抗剂，其两者均导致抗原特异性T细胞应答扩大(常常称为免疫检查点调控剂)。

某些刺激和抑制分子为免疫球蛋白超家族(IgSF)的成员。结合至共刺激或共抑制受体的膜结合配体的一个重要家族为B7家族，其包括B7-1、B7-2、B7-H1(PD-L1)、B7-DC(PD-L2)、B7-H2(ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5(VISTA)和B7-H6。结合至共刺激或共抑制受体的另一膜结合配体家族为结合至同源TNF受体家族成员的分子的TNF家族，其包括CD40和CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、CD137(4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、RANKL、TWEAKR/Fn14、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTβR、LIGHT、DcR3、HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2、TNFR1、淋巴毒素α/TNFβ、TNFR2、TNFα、LTβR、淋巴毒素α1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。

在一个方面，T细胞应答可通过本发明化合物与以下中的一或多者的组合来刺激：(i)抑制T细胞活化的蛋白质的拮抗剂(例如免疫检查点抑制剂)，诸如CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、半乳糖凝集素9、CEACAM-1、BTLA、CD69、半乳糖凝集素-1、TIGIT、CD113、GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1和TIM-4；和(ii)刺激T细胞活化的蛋白质的激动剂，诸如B7-1、B7-2、CD28、4-1BB(CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3和CD28H。

可与本发明化合物组合用于治疗癌症的其他药物包括抑制NK细胞上受体的拮抗剂或活化NK细胞上受体的激动剂。举例而言，本发明化合物可与KIR的拮抗剂，诸如利瑞路单抗(lirilumab)组合。

用于组合疗法的其他药物包括抑制或耗尽巨噬细胞或单核细胞的药物，包括(但不限于)CSF-1R拮抗剂，诸如CSF-1R拮抗剂抗体，包括RG7155(WO11/70024、WO11/107553、WO11/131407、WO13/87699、WO13/119716、WO13/132044)或FPA-008(WO11/140249；WO13169264；WO14/036357)。

在另一方面，本发明化合物可与以下中的一或多者一起使用：连接阳性共刺激受体的激动剂；使经由抑制受体的信号传导衰减的阻断剂；拮抗剂；和全身性地增加抗肿瘤T细胞的频率的一或多种药物；克服肿瘤微环境内的不同免疫抑制途径(例如，阻断抑制受体接合(例如PD-L1/PD-1相互作用)、耗尽或抑制Treg(例如使用抗CD25单克隆抗体(例如达利珠单抗(daclizumab))或通过体外抗CD25珠粒耗尽)、抑制代谢酶(诸如IDO)或逆转/防止T细胞失能或耗竭)的药物；以及触发肿瘤位点处的先天免疫活化和/或炎症的药物。

在一个方面，免疫肿瘤学药物为CTLA-4拮抗剂，诸如拮抗性CTLA-4抗体。适合的CTLA-4抗体包括例如YERVOY(伊匹单抗(ipilimumab))或曲美单抗(tremelimumab)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为PD-1拮抗剂，诸如拮抗性PD-1抗体。PD-1抗体可选自欧狄沃(Opdivo)(纳武利尤单抗(nivolumab))、可瑞达(Keytruda)(帕博利珠单抗(pembrolizumab))、PDR001(Novartis；参见WO2015/112900)、MEDI-0680(AMP-514)(AstraZeneca；参见WO2012/145493)、REGN-2810(Sanofi/Regeneron；参见WO2015/112800)、JS001(Taizhou Junshi)、BGB-A317(Beigene；参见WO2015/35606)、INCSHR1210(SHR-1210)(Incyte/Jiangsu Hengrui Medicine；参见WO2015/085847)、TSR-042(ANB001)(Tesara/AnaptysBio；参见WO2014/179664)、GLS-010(Wuxi/Harbin GloriaPharmaceuticals)、AM-0001(Armo/Ligand)或STI-1110(Sorrento；参见WO2014/194302)。免疫肿瘤学药物还可包括皮立珠单抗(pidilizumab)(CT-011)，尽管已经质疑其对于PD-1结合的特异性。靶向PD-1受体的另一种方法为与IgG1的Fc部分融合的PD-L2(B7-DC)的细胞外结构域构成的重组蛋白质，称作AMP-224。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为PD-L1拮抗剂，诸如拮抗性PD-L1抗体。PD-L1抗体可选自特善奇(Tecentriq)(阿特珠单抗(atezolizumab))、德瓦鲁单抗(durvalumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、STI-1014(Sorrento；参见WO2013/181634)或CX-072(CytomX；参见WO2016/149201)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为LAG-3拮抗剂，诸如拮抗性LAG-3抗体。适合的LAG3抗体包括例如BMS-986016(WO10/19570、WO14/08218)或IMP-731或IMP-321(WO08/132601、WO09/44273)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为CD137(4-1BB)激动剂，诸如激动性CD137抗体。适合的CD137抗体包括例如优瑞路单抗(urelumab)和PF-05082566(WO12/32433)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为GITR激动剂，诸如激动性GITR抗体。适合的GITR抗体包括例如BMS-986153、BMS-986156、TRX-518(WO06/105021、WO09/009116)和MK-4166(WO11/028683)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为IDO拮抗剂。适合的IDO拮抗剂包括例如INCB-024360(WO2006/122150、WO07/75598、WO08/36653、WO08/36642)、因多莫得(indoximod)或NLG-919(WO09/73620、WO09/1156652、WO11/56652、WO12/142237)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为OX40激动剂，诸如激动性OX40抗体。适合的OX40抗体包括例如MEDI-6383或MEDI-6469。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为OX40L拮抗剂，诸如拮抗性OX40抗体。适合的OX40L拮抗剂包括例如RG-7888(WO06/029879)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为CD40激动剂，诸如激动性CD40抗体。在另一实施方案中，免疫肿瘤学药物为CD40拮抗剂，诸如拮抗性CD40抗体。适合的CD40抗体包括例如鲁卡木单抗(lucatumumab)或达西珠单抗(dacetuzumab)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为CD27激动剂，诸如激动性CD27抗体。适合的CD27抗体包括例如瓦里木单抗(varlilumab)。

在另一方面，免疫肿瘤学药物为MGA271(针对B7H3)(WO11/109400)。

组合疗法意欲包涵以依序方式给药这些治疗剂，即其中各治疗剂在不同时间给药，以及这些治疗剂或至少两种治疗剂以基本上同时方式给药。基本上同时给药可例如通过向受试者给药具有固定比率的各治疗剂的单一剂型或多个针对各治疗剂的单一剂型来达成。依序或基本上同时给药各治疗剂可通过任何适当的途径实现，包括(但不限于)口服途径、静脉内途径、肿瘤内途径、肌肉内途径和经由粘膜组织的直接吸收。治疗剂可通过相同途径或通过不同途径给药。举例而言，所选组合中的第一治疗剂可通过静脉内注射给药，而组合中的其他治疗剂可口服给药。或者，例如，所有治疗剂可口服给药或所有治疗剂可通过静脉内注射给药。组合疗法还可包涵如上文所描述的治疗剂进一步与其他生物活性成分和非药物疗法(例如，手术或放射治疗)的组合的给药。在组合疗法进一步包含非药物治疗的情况下，非药物治疗可在任何适合的时间执行，只要治疗剂与非药物治疗的组合的协同作用达成有益的效果。举例而言，在适当情况下，当非药物治疗暂时自治疗剂给药中移除(可能隔数日或甚至数周)时，仍达成有益效果。

本发明可在不背离其精神或基本特质的情况下以其他特定形式来实施。本发明包含本文所提及的优选方面的所有组合。应理解，本发明的任何及所有实施方案可与任何其他实施方案结合以描述额外实施方案。还应理解，实施方案中的各个别要素为其自身的独立实施方案。此外，一实施方案的任何要素意欲与任何实施方案的任何及所有其他要素组合以描述另一实施方案。

药物组合物和给药

本发明还提供药学上可接受的组合物，其包含与一或多种药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂一起调配的治疗有效量的一或多种式I化合物且任选包含一或多种上文所描述的额外治疗剂。如下文详细描述，本发明的药物组合物可经特别调配以用于以固体或液体形式给药，包括适用于以下的那些：(1)口服给药，例如施用于舌头的顿服药(drenches)(水性或非水性溶液或悬浮液)、片剂(例如针对颊内、舌下和全身性吸收的那些片剂)、大丸剂、散剂、颗粒、糊剂；(2)肠胃外给药，例如通过皮下、肌肉内、肿瘤内、静脉内或硬膜外注射，如例如无菌溶液或悬浮液或持续释放型制剂；(3)局部施用，例如以施用至皮肤的乳膏、软膏或控制释放型贴片或喷雾形式；或瘤内。

短语“药学上可接受”在本文中用于指在合理医学判断范畴内，适用于与人类和动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症、与合理益处/风险比相称的化合物、物质、组合物和/或剂型。

如本文所使用，短语“药学上可接受的载体”意指将本发明化合物自一个器官或身体部分载运或运输至另一器官或身体部分所涉及的药学上可接受的物质、组合物或媒介物，诸如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如，润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌或硬脂酸)或溶剂囊封物质。各载体在与制剂的其他成分相容且对患者无害的意义上必须为“可接受的”。

本发明的制剂包括适于口服、瘤内、经鼻、经表皮(包括颊内和舌下)、经直肠、经阴道和/或肠胃外给药的制剂。制剂宜可以单位剂型呈现且可通过药剂学领域中熟知的任何方法制备。可与载体物质组合而制备单一剂型的活性成分的量将取决于所治疗的患者和具体给药模式而变化。可与载体物质组合以制备单一剂型的活性成分的量将通常为产生治疗作用的化合物的量。一般而言，以100％计，该量在约0.1％至约99％活性成分，优选约5％至约70％，最优选约10％至约30％的范围内。

在某些实施方案中，本发明的制剂包含选自由以下组成的群组的赋形剂：环糊精、纤维素、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载体(例如聚酯和聚酸酐)；和本发明化合物。在某些实施方案中，以上提及的制剂使得本发明化合物口服生物可利用。

制备这些制剂或组合物的方法包括使本发明化合物与载体和任选的一或多种附属成分组合的步骤。一般而言，通过将本发明化合物与液体载体或细粉状固体载体或两者均匀且紧密组合且随后必要时使产物成型来制备制剂。

适于口服给药的本发明制剂可呈胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、糖锭(使用调味基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、散剂、颗粒的形式，或水性或非水性液体中的溶液或悬浮液形式，或水包油或油包水型液体乳液形式，或酏剂或糖浆形式，或片剂(使用惰性基质，诸如明胶和丙三醇，或蔗糖和阿拉伯胶)形式，和/或漱口剂形式等，各含有预定量的本发明化合物作为活性成分。本发明化合物还可以大丸剂、舐剂(electuary)或糊剂形式给药。

适用于肠胃外给药的本发明药物组合物包含一或多种本发明化合物与一或多种药学上可接受的无菌等张水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳液或可仅在临用前重构成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末的组合，该组合物可含有糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使得制剂与指定接受者的血液等张的溶质或悬浮剂或增稠剂。

在一些情况下，为延长药物的效果，需要减缓药物自皮下、瘤内或肌肉内注射的吸收。这可通过使用具有不良水溶性的结晶或无定形物质的液体悬浮液来实现。药物吸收速率则取决于其溶解速率，而溶解速率又可取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠胃外给药的药物形式的延迟吸收通过将药物溶解或悬浮于油性媒介物中来实现。

可注射贮库形式通过在诸如聚丙交酯-聚乙交酯的可生物降解聚合物中形成本发明化合物的微囊封基质进行制备。取决于药物与聚合物的比和所用特定聚合物的性质，可控制药物释放的速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。贮库可注射制剂还通过将药物截留于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。

当本发明化合物以药物形式向人类和动物给药时，其可本身给予或以含有例如0.1％至99％(更优选10％至30％)活性成分与药学上可接受的载体的组合的药物组合物形式给予。

不论所选择的给药途径，可以适合水合形式和/或本发明的药物组合物来使用的本发明化合物通过本领域技术人员已知的常规方法调配成药学上可接受的剂型。

本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可变化以获得有效达成特定患者、组合物和给药模式所期望的治疗响应而对患者无毒性的活性成分的量。

所选剂量水平将取决于多种因素，包括所用具体本发明化合物或其酯、盐或酰胺的活性、给药途径、给药时间、所用具体化合物的排泄或代谢速率、吸收速率和程度、治疗持续时间、与所用具体化合物组合使用的其他药物、化合物和/或物质、所治疗的患者的年龄、性别、体重、条件、一般健康状况和先前病史、及医学领域中熟知的类似因素。

具有本领域普通技术的医师或兽医可容易确定和开具所需药物组合物的有效量。举例而言，医师或兽医开始可以低于为达成所期望治疗作用所需的水平给予药物组合物中所用的本发明化合物，且逐渐增加剂量直至达成所期望的作用。

一般而言，本发明化合物的适合日剂量将为有效产生治疗作用的最低剂量的化合物量。此有效剂量通常取决于上述因素。一般而言，本发明化合物用于患者的口服、静脉内、脑室内和皮下剂量在每千克体重每日约0.01mg至约50mg范围内。

虽然本发明化合物可单独给药，但化合物优选以药物制剂(组合物)形式给药。

定义

除非本文中另有具体陈述，否则以单数形式提及还可包括复数形式。举例而言，“一(a/an)”可指一个或一或多个。

除非另外指明，否则具有不饱和价数的任何杂原子假定具有足以使价数饱和的氢原子。

在整个说明书和随附权利要求书中，给定化学式或名称应涵盖其所有立体异构体及其光学异构体和外消旋体(若此类异构体存在)。除非另外指明，否则所有手性(对映异构体和非对映异构体)和外消旋形式均在本发明的范围内。化合物中还可存在C＝C双键、C＝N双键、环系统等的多种几何异构体，且所有此类稳定异构体均涵盖于本发明中。本发明化合物的顺式和反式(或E型和Z型)几何异构体已描述且可以异构体混合物形式或以经分离的异构体形式分离。本发明化合物可以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可通过拆分外消旋形式或通过自光学活性起始物质合成来制备。用于制备本发明化合物的所有方法及其中制备的中间体视为本发明的一部分。制备对映异构或非对映异构产物时，其可通过常规方法分离，例如通过色谱或分步结晶加以分离。取决于工艺条件，本发明的最终产物以游离(中性)形式或盐形式获得。这些最终产物的游离形式与盐都在本发明的范围内。若有此需要，可将化合物的一种形式转化成另一种形式。游离碱或酸可转化成盐；盐可转化成游离化合物或另一种盐；本发明的异构体化合物的混合物可分离成个别异构体。呈游离形式的本发明化合物及其盐可以多种互变异构体形式存在，其中氢原子转置至分子的其他部分且分子中的原子之间的化学键因此重排。应理解，所有互变异构体形式只要可能存在则均包括于本发明内。

出于清楚目的且根据本领域的标准惯例，符号在式和表中用于显示作为该部分或取代基与该结构的核心/核的连接点的键。

另外，出于清楚目的，在取代基具有不位于两个字母或符号之间的短划(-)的情况下，这用于指示取代基的连接点。举例而言，-CONH₂经由碳原子连接。

另外，出于清楚目的，若实线末端处显示不存在取代基，则这表示有甲基(CH₃)连接至该键。

另外，硫代磷酸酯基可画成

术语“抗衡离子”用于表示带负电物质，诸如氯离子、溴离子、氢氧根、乙酸根和硫酸根，或带正电物质，诸如钠(Na⁺)、钾(K⁺)、铵(R_nNH_m ⁺，其中n＝0-4且m＝0-4)，及类似物质。

术语“吸电子基团”(EWG)是指如下取代基，其使一键极化，从而将电子密度拉向自身且远离其他成键原子。EWG的实例包括(但不限于)CF₃、CF₂CF₃、CN、卤素、卤烷基、NO₂、砜、亚砜、酯、磺酰胺、羧酰胺、烷氧基、烷氧基醚、烯基、炔基、OH、C(O)烷基、CO₂H、苯基、杂芳基、-O-苯基和-O-杂芳基。EWG的优选实例包括(但不限于)CF₃、CF₂CF₃、CN、卤素、SO₂(C_1-4烷基)、CONH(C_1-4烷基)、CON(C_1-4烷基)₂和杂芳基。EWG的更优选实例包括(但不限于)CF₃和CN。

如本文所使用，术语“胺保护基”意指有机合成领域中已知的用于保护氨基的任何基团，其对酯还原剂、二取代的肼、R4-M和R7-M、亲核剂、肼还原剂、活化剂、强碱、位阻胺碱和环化剂具有稳定性。符合这些准则的此类胺保护基包括列于Wuts,P.G.M.和Greene,T.W.Protecting Groups in Organic Synthesis,第4版,Wiley(2007)和The Peptides:Analysis,Synthesis,Biology,第3卷,Academic Press,New York(1981)中的胺保护基，这些文献的公开内容以引用的方式并入本文中。胺保护基的实例包括(但不限于)以下：(1)酰基型，诸如甲酰基、三氟乙酰基、酞酰基和对甲苯磺酰基；(2)芳族氨基甲酸酯型，诸如苯甲氧基羰基(Cbz)和经取代的苯甲氧基羰基、1-(对联苯)-1-甲基乙氧基羰基和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)；(3)脂族氨基甲酸酯型，诸如叔丁氧基羰基(Boc)、乙氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基和烯丙氧基羰基；(4)环状烷基氨基甲酸酯型，诸如环戊基氧基羰基和金刚烷氧基羰基；(5)烷基型，诸如三苯甲基和苯甲基；(6)三烷基硅烷，诸如三甲基硅烷；(7)含硫醇型，诸如苯硫基羰基和二硫杂丁二酰基；和(8)烷基型，诸如三苯甲基、甲基和苯甲基；和经取代的烷基型，诸如2,2,2-三氯乙基、2-苯乙基和叔丁基；和三烷基硅烷型，诸如三甲基硅烷。

如本文中所提及，术语“取代”意指至少一个氢原子经非氢基团替换，其限制条件为维持正常价数且取代产生稳定化合物。如本文所使用的环双键为在两个相邻环原子之间形成的双键(例如，C＝C、C＝N或N＝N)。

在本发明化合物上存在氮原子(例如胺)的情况下，这些氮原子可通过用氧化剂(例如mCPBA和/或过氧化氢)处理而转化成N-氧化物，得到本发明其他化合物。因此，所展示和所要求保护的氮原子视为涵盖所展示的氮及其N-氧化物(N→O)衍生物。

当任何变量在化合物的任何组分或式中出现超过一次时，其在每次出现时的定义独立于其在其他每次出现时的定义。因此，举例而言，若显示基团经0至3个R取代，则该基团可任选经至多三个R基团取代，且R在每次出现时独立地选自R的定义。另外，取代基和/或变量的组合仅当此类组合产生稳定化合物时才容许。

当展示连至取代基的键与连接环中的两个原子的键交叉时，则此取代基可键合至该环上的任何原子。若所列取代基未指示此取代基键合至指定式化合物的其余部分的原子，则此取代基可经由此取代基中的任何原子键合。取代基和/或变量的组合仅在此类组合产生稳定化合物时才容许。

本发明意欲包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括原子数相同但质量数不同的那些原子。作为一般实例且非限制性地，氢的同位素包括氘和氚。氢同位素可表示为¹H(氢)、²H(氘)和³H(氚)。其通常还表示为D(对于氘)和T(对于氚)。在本申请中，CD₃表示其中所有氢原子为氘的甲基。碳同位素包括¹³C和¹⁴C。本发明的同位素标记化合物可一般通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文所述的方法，使用适当同位素标记试剂代替另外使用的非标记试剂来制备。

如本文所使用，“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的衍生物，其中母体化合物通过制成其酸盐或碱盐而改质。药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性基团(诸如胺)的无机酸盐或有机酸盐；以及酸性基团(诸如羧酸)的碱金属盐或有机盐。药学上可接受的盐包括母体化合物与例如无毒性无机酸或有机酸形成的常规无毒性盐或季铵盐。举例而言，此类常规无毒性盐包括衍生自无机酸的盐，所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、胺磺酸、磷酸和硝酸；和自有机酸制备的盐，所述有机酸诸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、帕莫酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙基磺酸等。

本发明的药学上可接受的盐可由含有碱性或酸性部分的母体化合物通过常规化学方法合成。一般而言，此类盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；一般而言，优选非水性介质(如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈)。适合盐的清单见于Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy,第22版,Allen,L.V.Jr.编；Pharmaceutical Press,London,UK(2012)中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

另外，式I化合物可具有前药形式。将在体内转化以提供生物活性剂(即，式I化合物)的任何化合物为在本发明的范围和精神内的前药。各种形式的前药为本领域熟知的。关于此类前药衍生物的实例，参见：

a)Bundgaard,H.编,Design of Prodrugs,Elsevier(1985)，和Widder,K.等人编,Methods in Enzymology,112:309-396,Academic Press(1985)；

b)Bundgaard,H.,第5章,“Design and Application of Prodrugs”,A Textbookof Drug Design and Development,第113-191页,Krosgaard-Larsen,P.等人编,HarwoodAcademic Publishers(1991)；

c)Bundgaard,H.,Adv.Drug Deliv.Rev.,8:1-38(1992)；

d)Bundgaard,H.等人,J.Pharm.Sci.,77:285(1988)；

e)Kakeya,N.等人,Chem.Pharm.Bull.,32:692(1984)；和

f)Rautio,J(编辑).Prodrugs and Targeted Delivery(Methods andPrinciples in Medicinal Chemistry),第47卷,Wiley-VCH,2011。

含有羧基的化合物可形成生理上可水解的酯，充当通过在体内水解产生式I化合物本身的前药。此类前药优选口服给药，因为许多情况下水解主要在消化酶的影响下发生。在酯本身具有活性的情况下或在水解发生于血液中的那些情况下，可使用肠胃外给药。式I化合物的生理上可水解的酯的实例包括C_1-6烷基、C_1-6烷基苯甲基、4-甲氧基苯甲基、茚满基、酞酰基、甲氧基甲基、C_1-6烷酰氧基-C_1-6烷基(例如乙酰氧基甲基、特戊酰氧基甲基或丙酰氧基甲基)、C_1-6烷氧基羰氧基-C_1-6烷基(例如甲氧基羰氧基甲基或乙氧基羰氧基甲基、甘氨酰基氧基甲基、苯基甘氨酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)，及用于例如青霉素(penicillin)和头孢菌素(cephalosporin)领域中的其他熟知的生理上可水解的酯。此类酯可通过本领域已知的常规技术来制备。

前药的制备为本领域熟知的，且描述于例如King,F.D.编,Medicinal Chemistry:Principles and Practice,The Royal Society of Chemistry,Cambridge,UK(第2版,复制版,2006)；Testa,B.等人,Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism.Chemistry,Biochemistry and Enzymology,VCHA and Wiley-VCH,Zurich,Switzerland(2003)；Wermuth,C.G.编,The Practice of Medicinal Chemistry,第3版,Academic Press,SanDiego,CA(2008)中。

术语“溶剂合物”意指本发明化合物与一或多个溶剂分子(不论有机或无机)的物理缔合物。该物理缔合包括氢键。在某些情况下，例如一或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时，溶剂合物将能够分离。溶剂合物中的溶剂分子可以有序排列和/或无序排列而存在。溶剂合物可包含化学计量或非化学计量的量的溶剂分子。“溶剂合物”涵盖溶液相和可分离的溶剂合物两者。例示性溶剂合物包括(但不限于)水合物、乙醇化物、甲醇化物和异丙醇化物。溶剂化方法一般是本领域已知的。

如本文所用，术语“患者”是指通过本发明的方法治疗的生物体。此类生物体优选包括(但不限于)哺乳动物(例如鼠科动物、猿猴、马科动物、牛科动物、猪科动物、犬科动物、猫科动物等)，且最优选是指人类。

如本文所用，术语“有效量”意指将引发例如研究人员或临床医师所寻求的组织、系统、动物或人类的生物学或医学响应的药物或药剂(即本发明化合物)的量。此外，术语“治疗有效量”意指任何量，相较于尚未接受此量的对应受试者，此量使得疾病、病症或副作用的治疗、治愈、预防或减缓出现改善，或使得疾病或病症的进展速率降低。有效量可以一或多次给药、施药或投药来给予且不欲限于特定制剂或给药途径。该术语在其范围内还包括有效增强正常生理功能的量。

如本文所使用，术语“治疗”包括引起病状、疾病、病症等改善或其症状减缓的任何作用，例如减轻、减少、调节、减缓或消除。

如本文所用，术语“药物组合物”是指活性剂与惰性或活性载体的组合，该组合使得该组合物特别适合于体内或体外诊断或治疗用途。

碱的实例包括(但不限于)碱金属(例如钠)氢氧化物、碱土金属(例如镁)氢氧化物、氨和式NW₄ ⁺化合物，其中W为C_1-4烷基，及其类似物。

在治疗用途中，预期本发明化合物的盐为药学上可接受的。然而，药学上不可接受的酸和碱的盐也可用于例如药学上可接受的化合物的制备或纯化。

制备方法

本发明化合物可以有机合成领域技术人员熟知的多种方式制备。本发明化合物可使用下述方法以及有机合成化学领域已知的合成方法或如本领域技术人员所了解的其变化形式合成。优选的方法包括(但不限于)以下所描述的方法。本文所述的所有参考文献均以全文引用的方式并入本文中。

本发明化合物可使用此章节中所描述的反应和技术来制备。反应在适于所用试剂和物质且适于实现转化的溶剂中进行。另外，在以下所描述的合成方法的描述中，应理解所提出的所有反应条件(包括溶剂选择、反应氛围、反应温度、实验持续时间和后处理操作)均经选择为本领域技术人员容易识别的该反应的标准条件。有机合成领域技术人员应理解，分子各个部分上所存在的官能团必须与所提出的试剂和反应物相容。本领域技术人员显而易知对与反应条件相容的取代基的此类限制，于是须使用替代方法。有时这将需要作出判断以修改合成步骤次序或选择一种特定方法方案而非另一种，从而获得期望的本发明化合物。还将认识到，在本领域中，任何合成路线的规划中的另一主要考虑因素为审慎选择用于保护本发明所述化合物中存在的反应性官能团的保护基。向经培训的从业者描述许多替代方案的权威性说明为Greene和Wuts(Protective Groups In Organic Synthesis,第四版,Wiley and Sons,2007)。

式(I)化合物可通过参考以下方案中所说明的方法来制备。如其中所示，最终产物为结构式与式(I)相同的化合物。应了解，任何式(I)化合物可通过所述方案、通过在适当取代下适当选择试剂来制备。本领域普通技术人员可容易选择溶剂、温度、压力及其他反应条件。起始物质可市购或容易由本领域普通技术人员制备。化合物的各成分如本文所定义或说明书中别处所定义。

方案1

方案1中描述一种用于制备本发明实施例的方法。该方法自经适当取代的环烷基或核糖核苷(i)开始，其中核碱基(R¹或R²)诸如用苯甲酰基适当保护(PG₂或PG₃)，且5'-羟基诸如用DMTr醚适当保护(PG₁)，且3'位置为氨基磷酸酯官能团。在步骤1中，用适当的试剂处理，诸如用三氟乙酸吡啶处理接着用丁胺处理，得到H-膦酸酯(ii)。随后在步骤2中在酸性条件下移除5'-OH保护基(PG₁＝DMTr)，得到式iii化合物。所得式iii化合物可在步骤3中与完全受保护的氨基磷酸酯(iv)反应，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式v化合物。在步骤4中在适当条件下(例如当PG₄＝TBS时用三氢氟化三乙胺)移除v的保护基，得到式vi化合物。在步骤5中用适当的环化试剂(诸如DMOCP)处理化合物vi，接着在步骤6中用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式vii化合物。可用适当的试剂(例如NH₄OH/MeOH)处理式vii化合物以移除核碱基的其余保护基(PG₂和PG₃＝苯甲酰基)，得到式(I)化合物。

方案2中描述用于制备本发明实施例的另一方法。

方案2

可经由本领域技术人员已知的多种方式，由经适当保护的式viii化合物制备式ix化合物。举例而言，在光延条件(Mitsunobu condition)下用适当的杂环化合物处理viii(其中PG₅＝三苯甲基且PG₄＝Ac)，得到式ix化合物。可在多种条件下(例如用氨或MeMgCl进行处理)，实现一种保护基的选择性移除(例如其中PG₄＝Ac)，得到式x化合物。使式x化合物与经适当保护的氨基磷酸酯(xi)偶联，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式xii化合物。接着在本领域技术人员已知的各种条件下(例如用TFA)移除保护基(例如PG₅＝三苯甲基或TBS，PG₁＝DMTr)，得到式xiii化合物。可以本领域技术人员已知的多种方式实现式xiii化合物的大环化。举例而言，用亚磷酸二苯酯处理，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式xiv化合物。移除所有其余保护基，得到通式xv的化合物。

方案3中描述用于制备本发明实施例的另一方法。

方案3

式x化合物还可与式xvi的氨基磷酸酯反应，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到通式xvii的化合物。接着在本领域技术人员已知的各种条件下(例如用TFA)移除保护基(例如PG₅＝三苯甲基或TBS，PG₁＝DMTr)，得到式xviii化合物。可以本领域技术人员已知的多种方式实现式xviii化合物的大环化。举例而言，用亚磷酸二苯酯处理，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式xix化合物。移除所有其余保护基，得到通式xx的化合物。

替代地，方案4中描述用于制备本发明实施例的另一方法。

方案4

该方法自经适当取代的天然或经修饰核苷(xxv)开始，其中核碱基(R²)诸如用苯甲酰基适当保护(PG＝保护基)。在步骤1中，在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理xxv，得到式xxvi化合物。在步骤2中，在适当溶剂(例如乙腈或二甲基甲酰胺)中在碱(例如DBU)存在下，用经适当保护的醇(例如xxvii)处理，得到式xxviii化合物。在步骤3中，可在本领域技术人员已知的条件下移除一种或两种保护基(PG₁和PG₅)，得到醇(xxix)或二醇(xxx)。可在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理式xxx化合物，得到式xxxiii化合物。替代地，可在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理式xxix化合物，得到式xxxi化合物。在步骤6中，可移除保护基(R＝PG₅)，得到醇xxxii。在步骤7中，用适当的碱(例如DBU)处理xxxii，得到式xxxiii化合物。视需要移除其余保护基，得到式(I)化合物。

方案5中描述用于制备本发明实施例的另一方法。

方案5

该方法自经适当取代的天然或经修饰核苷(xxxiv)开始，其中核碱基(R²)诸如用苯甲酰基适当保护(PG＝保护基)。在步骤1中，在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理xxxiv，得到式xxxv化合物。在步骤2中，在适当溶剂(例如乙腈或二甲基甲酰胺)中在碱(例如DBU)存在下，用经适当保护的醇(例如xlii)处理，得到式xxxvi化合物。在步骤3中，可在本领域技术人员已知的条件下移除一种或两种保护基(PG₁和PG₅)，得到醇(xxxvii)或二醇(xxxviii)。可在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理式xxxviii化合物，得到式xli化合物。替代地，可在适当溶剂(诸如乙腈或二甲基甲酰胺)中，在适当碱(例如DBU)存在下，用适当的有机磷(V)试剂(例如表1中列举的那些试剂中的一个)处理式xxxvii化合物，得到式xxxix化合物。在步骤6中，可移除保护基(R＝PG₅)，得到醇xl。在步骤7中，用适当的碱(例如DBU)处理xl，得到式xli化合物。视需要移除其余保护基，得到式(I)化合物。

方案6中描述用于制备本发明实施例的另一方法。

方案6

该方法自通过本领域技术人员已知的方法制备的经适当保护的氨基磷酸酯(xliii)开始。使式xliii化合物与经适当保护的醇(xliv)偶联，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式xvl化合物。接着在本领域技术人员已知的各种条件下(例如用TFA)移除保护基(例如PG₄＝三苯甲基或TBDPS，PG₂＝DMTr)，得到式xlvi化合物。可以本领域技术人员已知的多种方式实现式xlvi化合物的大环化。举例而言，用亚磷酸二苯酯处理，接着用例如氢过氧化叔丁基氧化(X＝O)或用例如DDTT硫化(X＝S)，得到式xvlii化合物。移除所有其余保护基，得到通式(III)的化合物。

表1.有机磷试剂和对应的-P(V)基团

实施例

本发明在以下实施例中进一步定义。应理解实施例仅为了说明而提供。依据以上论述和实施例，本领域技术人员可判明本发明的基本特征，且在不背离其精神和范围的情况下，可进行各种改变和修改以使本发明适于各种用途和条件。因此，本发明不受下文所述的说明性实施例限制，而是由其随附权利要求书限定。

缩写

以下缩写可用于以下实施例部分及本文其他地方：

磷(V)试剂的制备

用于制备本发明实施例的磷(V)试剂(试剂1至4)根据2018年4月13日提交的USSN62/657551、2018年5月7日提交的USSN 62/6568098、2018年7月13日提交的USSN 62/697896和2018年9月10日提交的USSN 62/729314中所提供的操作制备。

实施例1-1、1-2、1-3和1-4

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{9-羟基-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

1-1(非对映异构体1)

1-2(非对映异构体2)

1-3(非对映异构体3)

1-4(非对映异构体4)

中间体1A的制备：

向于THF(200mL)中含6-氯-9H-嘌呤-2-胺(4.24g，25.0mmol)的浆液中添加DMAP(0.31g，2.50mmol)，接着添加BOC-酸酐(17.41mL，75mmol)。搅拌反应物过夜且随后浓缩至干燥。将粗物质溶解于乙酸乙酯(200mL)中，且用1N HCl及饱和NaCl水溶液洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗物质溶解于MeOH(100mL)及饱和NaHCO₃水溶液中，且在50℃加热1小时。浓缩所得混合物以移除有机物，且用DCM(3×100mL)萃取水层。干燥(Na₂SO₄)经合并的有机层，过滤且浓缩。将残余物再溶解于THF(50mL)中，吸附至少量硅藻土(10g)上，且在ISCO硅胶色谱系统(120g ISCO硅胶柱)上用MeOH/DCM/(0％-10％)经30分钟梯度纯化，得到1A(3g，8.11mmol，32.4％产率)。

中间体1B的制备：

在氮气下，向双((1R,2S,5R)-2-异丙基-5-甲基环己基)富马酸酯(5g，12.7mmol)于甲苯(64mL)中的-78℃溶液中逐滴添加氯化二乙基铝(25mL，25mmoL)。在-78℃搅拌反应物10分钟，随后添加1,1-二甲氧基乙烯(1.3mL，14mmol)，且再搅拌反应物10分钟。通过逐滴添加1mL甲醇和1mL 15％氢氧化钠水溶液而淬灭反应物。添加甲醇(2.5mL)且搅拌混合物10分钟。向混合物中添加1g硫酸镁，且在室温搅拌混合物30分钟。经由硅藻土垫过滤悬浮液且真空浓缩滤液，得到粗产物。通过快速色谱经由120g硅胶(20分钟梯度，0至10％乙酸乙酯/己烷)纯化粗物质，且随后自95:5的甲醇:水重结晶，得到呈白色固体状的1B(5.6g，91％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.85-4.66(m,2H),3.56-3.49(m,1H),3.36-3.28(m,3H),3.16(s,3H),2.61(dd,J＝11.9,10.7Hz,1H),2.22-2.15(m,1H),2.11-1.96(m,2H),1.93-1.80(m,1H),1.75-1.65(m,3H),1.62-1.34(m,8H),1.12-0.84(m,18H),0.80-0.75(m,6H)。

中间体1C的制备：

向1B(17g，35.4mmol)于THF(88mL)中的0℃溶液中添加LAH(2.01g，53.0mmol)。使反应物缓慢升温至室温，随后在55℃加热5小时，接着在室温搅拌16小时。将溶液冷却至0℃，用5mL水、5mL 15％NaOH水溶液淬灭，缓慢升温至室温，且搅拌10分钟。添加水(20mL)，且在室温搅拌混合物10分钟。向该混合物中添加10g MgSO₄，且继续搅拌10分钟。随后经由硅藻土垫过滤混合物，且真空浓缩滤液。将所得物质溶解于200mL己烷中且用水(3×150mL)萃取。用硫酸铵使经合并的水性萃取物饱和。用乙酸乙酯(3×125mL)萃取水相，且经合并的有机层经干燥(硫酸钠)、过滤且真空浓缩，得到呈透明无色油状物的1C(3.74g，60％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.84-3.71(m,3H),3.56(dd,J＝10.4,8.3Hz,1H),3.21(d,J＝2.2Hz,6H),2.49-2.24(m,2H),2.23-1.95(m,2H),1.72(ddd,J＝12.4,7.6,1.0Hz,2H)。

中间体1D的制备：

在室温，向1C(24g，136mmol)于甲苯(1362ml)中的溶液中添加乙酸乙烯酯(129g，1498mmol)。随后，一次添加全量来自猪胰脏的脂肪酶(36g，136mmol)，且将所得轻悬浮液在室温搅拌21.6小时。随后经由硅藻土过滤混合物，且用EtOAc冲洗滤饼。随后真空蒸发经合并的滤液，且通过柱色谱、使用330g ISCO柱、用0至100％乙酸乙酯/己烷洗脱来纯化残余物，得到呈油状物的1D(30g，137mmol，101％产率)，其按原样用于下一反应中。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.27-3.99(m,2H),3.88-3.61(m,2H),3.33-3.05(m,6H),2.46-2.32(m,2H),2.32-2.17(m,1H),2.12-2.00(m,3H),1.88-1.73(m,1H)。

中间体1E的制备：

在室温，向1D(30g，137mmol)于丙酮(500mL)中的溶液中一次添加全量对甲苯磺酸(1.307g，6.87mmol)。在室温搅拌反应物3小时，此时反应完成。添加Et₃N(1.916ml，13.75mmol)，且真空蒸发混合物。随后在ISCO系统上使用己烷/乙酸乙酯梯度纯化残余物，用纯乙酸乙酯洗脱产物。随后合并且蒸发含有产物的级分。在蒸发期间，不进行加热，且获得呈油状物的1E(22g，93％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.44-4.22(m,2H),4.02-3.88(m,1H),3.85-3.69(m,1H),3.41-3.25(m,1H),3.17-3.02(m,1H),2.97-2.85(m,1H),2.85-2.66(m,1H),2.20-2.09(m,3H),1.86-1.72(m,1H)。

中间体1F的制备：

在室温、氮气氛围下，用Et₃N(30.7mL，220mmol)接着用DMAP(1.680g，13.75mmol)处理1E(23.67g，137mmol)于无水DCM(916mL)中的溶液。随后一次添加全量(氯甲烷三基)三苯(49.8g，179mmol)，且在室温、氮气氛围下搅拌所得混合物过夜。通过添加饱和碳酸氢钠溶液(200mL)淬灭反应物。随后用另一部分的DCM(100mL)萃取水层，且随后干燥(MgSO₄)并真空蒸发经合并的有机物。随后在330g ISCO柱上用0-40％乙酸乙酯/己烷洗脱来纯化所得油状物，得到呈白色固体状的1F(31.83g，77mmol，55.9％产率)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.57-7.39(m,6H),7.39-7.18(m,9H),4.41-4.21(m,2H),3.57-3.42(m,1H),3.34-3.24(m,1H),3.24-3.11(m,2H),2.95-2.78(m,2H),2.07-1.93(m,3H)。

中间体1G的制备：

在-78℃、氮气氛围下，经由压力平衡漏斗向1F(12g，29.0mmol)的经搅拌溶液中逐滴添加LS-Selectride(36.2mL，36.2mmol)。总共用时30分钟完成添加。随后，在-78℃搅拌反应物40分钟。通过缓慢添加饱和碳酸氢钠水溶液(85mL)来淬灭反应物，且随后移除冷浴并更换为冰水浴。当内部温度达到0℃时，经由玻璃吸管逐滴添加过氧化氢(59.1mL，579mmol)。在室温搅拌所得混合物约4小时，之后用水稀释且用乙酸乙酯(3×)萃取。经合并的有机层随后用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，干燥(MgSO₄)且真空蒸发。通过柱色谱在ISCO系统上用0至40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱来纯化该粗物质。收集并蒸发级分，得到1G(7.75g，18.61mmol，64.3％产率)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.60-7.42(m,6H),7.42-7.18(m,10H),4.61-4.40(m,1H),4.13-4.02(m,2H),3.47-3.27(m,2H),2.71-2.65(m,1H),2.65-2.44(m,2H),2.20-2.11(m,2H),2.11-2.02(m,3H)。

中间体1H的制备：

将于THF(12mL)/甲苯(6mL)的混合物中含有三苯基膦(732mg，2.79mmol)的溶液在冰浴中冷却，且用DIAD(0.525mL，2.70mmol)逐滴处理，产生奶油色浆液。向该浆液中添加于THF(5mL)中含有1G(750mg，1.801mmol)和1A(999mg，2.70mmol)的溶液。移除冰浴且在35℃搅拌反应物20小时。使反应物冷却至室温且浓缩至干燥。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至80g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-100％EtOAc/DCM经20分钟梯度洗脱，得到1H(900mg，1.171mmol，65.1％产率)。m/z(768,M+H)。

中间体1I的制备：

向1H(900mg，1.171mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(1.871mL，11.71mmol)，接着添加TFA(0.902mL，11.71mmol)。搅拌反应物30分钟。添加另外的TFA(0.45mL)，且再搅拌反应物30分钟。反应物随后用另外的DCM(50mL)稀释并用氢氧化铵(约5mL)淬灭，且在分液漏斗中震荡，并且分离有机层并用另外的DCM(2×10mL)萃取水层。有机萃取物经合并，用pH 7缓冲液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至12g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-10％MeOH/DCM经10分钟梯度洗脱，得到1I(275mg，0.844mmol，72.1％产率)。m/z(326,M+H)。

中间体1J的制备：

向1I(275mg，0.844mmol)于乙醇(5mL)中的悬浮液中添加pH 4.5的乙酸钠/乙酸缓冲液(4.22mL，4.22mmol)，接着添加溴乙醛(3mL，3.75mmol)的乙醇/水溶液。在45℃加热反应物22小时。随后将反应物在冰浴中冷却至0℃，且使用固体碳酸氢铵中和。过滤所得固体，用水洗涤且干燥。将固体再溶解于DCM/MeOH(5mL)中，吸附至少量硅藻土(2g)上，且在使用4g ISCO硅胶柱的ISCO硅胶色谱系统上用MeOH/DCM(0％至10％)经10分钟梯度纯化，得到期望的1J(135mg，0.407mmol，48.3％产率)。m/z(332,M+H)。

中间体1K的制备：

向于DMF(1mL)中含有咪唑(216mg，3.17mmol)的溶液中添加TBS-Cl(199mg，1.320mmol)，且搅拌混合物20分钟。向TBSCl/咪唑的溶液中添加含有1J(175mg，0.528mmol)的溶液，且搅拌20小时。添加另外量的咪唑(50mg)和TBSCl(25mg)，且在50℃加热反应物1小时。随后将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL)稀释，且用水(2×20mL)、10％LiCl水溶液(2×10mL)及饱和NaCl水溶液(10mL)洗涤。将水洗涤液合并且用另外的乙酸乙酯(50mL)反萃取，随后用饱和NaCl水溶液洗涤。有机层经合并，干燥(Na₂SO₄)，过滤且浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至12g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-5％MeOH/DCM经10分钟梯度洗脱，得到1K(220mg，0.494mmol，93％产率)。m/z(446,M+H)。

中间体1L的制备：

向于二噁烷(5mL)中含有1K(210mg，0.471mmol)、2-(4-硝基苯基)乙-1-醇(158mg，0.943mmol)和三苯基膦(253mg，0.966mmol)的0℃溶液中添加DIAD(0.183mL，0.943mmol)。在室温搅拌反应物20小时，且随后浓缩至浓稠油状物。将残余物再溶解于DCM(1mL)中，吸附至少量硅藻土(1g)上，且在使用12g ISCO硅胶柱的ISCO硅胶色谱系统上用MeOH/DCM(0％-10％)经10分钟梯度纯化，得到期望的1L(180mg，0.303mmol，64.2％产率)。m/z(595,M+H)。

中间体1M的制备：

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将中间体1L(265mg，0.446mmol)溶解于氨的甲醇溶液(7N于MeOH中)(5mL，35.0mmol)中，密封于小瓶中，且在35℃加热2小时。随后浓缩反应物，且将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至4g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-5％MeOH/DCM经10分钟梯度洗脱，得到1M(180mg，0.326mmol，73.1％产率)，m/z(553,M+H)。

中间体1N的制备：

将于乙腈(5mL)中含有四唑(25.10mg，0.358mmol)和二异丙基氨基磷酸(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基酯2-氰基乙酯(Sigma-Aldrich，285mg，0.326mmol)的溶液在旋转蒸发仪上浓缩至干燥(2×5mL)，且随后将其再悬浮于乙腈(5mL)中并在氮气氛围下静置。将1M(180mg，0.326mmol)悬浮于另一烧瓶中，且添加无水乙腈(5mL)，并且将其在旋转蒸发仪上浓缩至干燥(2×5mL)。将该物质再悬浮于乙腈(2mL)中，且随后经由注射器将其添加至二异丙基氨基磷酸(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基酯2-氰基乙酯的搅拌溶液中。将反应物抽真空且用氮气净化，且随后密封。在室温搅拌反应物1小时。随后将反应物在50℃加热20小时，冷却至室温，且用(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(100mg，0.489mmol)处理。搅拌反应物1小时且随后浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至40gISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-5％MeOH/DCM经20分钟梯度洗脱。浓缩含有期望化合物的级分，且将粗物质溶解于DCM(5mL)中，并添加三乙基硅烷(550μL)，接着添加TFA(125μL)。将反应物浓缩至干燥，且随后将其再悬浮于ACN(4mL)中，并添加三氢氟化三乙胺(550μL)。在35℃加热反应物30分钟。随后将反应混合物装载至用流动相A：5:95乙腈:水(0.01M乙酸铵)、流动相B：95:5乙腈:水(0.01M乙酸铵)预平衡的ISCO 150g Gold C-18RediSep Rf柱上；使用梯度：0％B保持2个柱体积至100％B经20个柱体积洗脱化合物，得到化合物1N(200mg，0.212mmol，65.1％产率)，m/z(943,M+H)。

中间体1O的制备：

将中间体1N(200mg，0.212mmol)溶解于吡啶(10mL)中，且浓缩至干燥。用吡啶(10mL)重复该操作一次，且在氮气氛围下将所得残余物悬浮于无水吡啶(30mL)中，且每10分钟用小份(约0.2mL)溶解于吡啶(10mL)中的亚磷酸二苯酯(0.081mL，0.424mmol)处理。随后用DDTT(109mg，0.530mmol)处理反应物，且搅拌10小时。将反应物浓缩至干燥，再悬浮于乙腈(5mL)中，且吸附至硅藻土(2g)，并且在用流动相A：5:95乙腈:水+0.01M乙酸铵；流动相B：95:5乙腈:水+0.01M乙酸铵；梯度：0％B保持2个柱体积至100％B经20个柱体积预平衡的反相ISCO C-18Gold柱上纯化，得到呈四种非对映异构体混合物形式的1O(150mg，0.147mmol，69.3％产率)，M+H(1021,M+H)。

实施例1-1、1-2、1-3和1-4

1-1(非对映异构体1)

1-2(非对映异构体2)

1-3(非对映异构体3)

1-4(非对映异构体4)

将中间体1O(185mg，0.181mmol)悬浮于含7N氨的MeOH(5mL，35.0mmol)中，密封于小瓶中，且搅拌过夜。随后，将反应物浓缩至干燥。将粗物质溶解于吡啶(1mL)中并添加DBU(225μL，1.493mmol)，且在35℃加热反应物3小时。随后浓缩反应物，且将残余物悬浮于水(1mL)中并用乙酸铵/乙酸缓冲液(pH 4.5)使其pH达至约8，且在使用流动相A：5:95乙腈:水+0.01M乙酸铵；流动相B：95:5乙腈:水+0.01M乙酸铵；梯度：0％B保持2个柱体积至100％B经20个柱体积平衡的反相ISCO C-18Gold柱上纯化，得到四种非对映异构体的混合物。将经合并的四种异构体溶解于水(2mL)中，且使用具有以下条件的制备型反相HPLC纯化，得到四种非对映异构体：柱：Xselect CSH C18柱，3.5μm，3.0×150mm；流动相A：20mM乙酸三乙铵(pH6.5)；流动相B：80:20的ACN:20mM乙酸三乙铵(pH 6.5)；梯度：10％-12％B经9分钟，随后12-23％B经5分钟，随后23％-95％B经一分钟；流速：20mL/min。将含有期望产物的级分合并且经由离心蒸发干燥。

实施例1-1：5mg。保留时间：0.39分钟。(柱：ACQUITYBEHC18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后98％B至2％B经0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。质量观测值：715.2(M+H)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.98-8.91(m,1H),8.26-8.19(m,1H),8.17-8.09(m,1H),7.67-7.60(m,1H),7.34-7.27(m,1H),6.44-6.36(m,1H),5.56-5.38(m,1H),5.35-5.19(m,1H),4.84-4.72(m,1H),4.56-4.49(m,1H),4.48-4.35(m,2H),4.32-4.16(m,2H),4.13-3.97(m,2H),3.28-3.20(m,1H),2.69-2.56(m,1H),2.56-2.38(m,2H)

实施例1-2：5mg。保留时间：0.41分钟。(柱：ACQUITYBEHC18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA，梯度：2％B至98％B经1分钟，随后98％B至2％B经0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。质量观测值：715.1(M+H)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.94-8.90(m,1H),8.20-8.16(m,1H),8.06-8.01(m,1H),7.56-7.51(m,1H),7.16(br d,J＝1.5Hz,1H),6.40-6.32(m,1H),5.49-5.32(m,1H),5.18-5.06(m,1H),4.74-4.65(m,1H),4.57-4.42(m,3H),4.26-4.18(m,2H),4.15-3.98(m,2H),3.51-3.40(m,1H),2.84-2.73(m,1H),2.58-2.39(m,2H)。

实施例1-3：10mg。保留时间：0.42分钟。(柱：ACQUITYBEHC18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后98％B至2％B经0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。质量观测值：715.0(M+H)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.61-8.59(m,1H),8.23-8.21(m,1H),8.09-8.06(m,1H),7.65-7.61(m,1H),7.32-7.29(m,1H),6.41-6.35(m,1H),5.64-5.48(m,1H),5.35-5.21(m,1H),4.83-4.73(m,1H),4.57-4.49(m,1H),4.47-4.33(m,2H),4.30-4.19(m,2H),4.18-4.05(m,2H),3.25-3.16(m,1H),2.64-2.44(m,3H)。

实施例1-4：10mg。保留时间：0.46分钟。(柱：ACQUITYBEH C18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后98％B至2％B经0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。质量观测值：715.1(M+H)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.61-8.59(m,1H),8.23-8.21(m,1H),8.09-8.06(m,1H),7.65-7.61(m,1H),7.32-7.29(m,1H),6.41-6.35(m,1H),5.64-5.48(m,1H),5.35-5.21(m,1H),4.83-4.73(m,1H),4.57-4.49(m,1H),4.47-4.33(m,2H),4.30-4.19(m,2H),4.18-4.05(m,2H),3.25-3.16(m,1H),2.64-2.44(m,3H)。

实施例2-1、2-2和2-3

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

2-1(非对映异构体1)

2-2(非对映异构体2)

2-3(非对映异构体3)

中间体2A的制备：

向于AcOH/NH₄OAc缓冲液(pH 4.5)(100mL)和EtOH(100mL)中含有(2R,3R,4S,5R)-2-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟甲基)四氢呋喃-3,4-二醇(10g，33.1mmol)的溶液中添加2-溴乙醛(80mL，104mmol)。在37℃加热反应物48小时。随后用固体碳酸氢铵将滤液中和至pH约7，且通过过滤收集所得固体并用乙腈冲洗固体。将滤液在旋转蒸发仪上浓缩至约1/2体积且随后用乙腈(约100mL)处理，并且收集第二批产物并用另外的乙腈冲洗，得到2A(5g，16.27mmol，49.1％产率)，m/z(308,M+H)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.15(m,1H),7.63(m,1H),7.42(d,J＝2.5Hz,1H),5.83(d,J＝5.8Hz,1H),5.42(br d,J＝5.8Hz,1H),5.21-5.07(m,2H),4.50(q,J＝5.3Hz,1H),4.14(br d,J＝3.9Hz,1H),3.92(q,J＝3.8Hz,1H),3.73-3.62(m,1H),3.60-3.49(m,1H)。

中间体2B的制备：

将含有2A(4.5g，14.65mmol)的溶液溶解于吡啶(50mL)中，且使浆液在旋转蒸发仪上共沸至干燥，且随后将其再溶解于吡啶(50mL)中并用乙酸酐(13.82mL，146mmol)逐滴处理。搅拌反应物20小时，且随后用MeOH(10mL)处理并浓缩。将该物质溶解于DCM(100mL)中，且用1.5N K₂HPO₄水溶液(1×50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至40g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用1％-10％DCM(0.1％TEA)/MeOH经15分钟梯度洗脱，得到2B(3.1g，7.15mmol，48.8％产率)，m/z(434,M+H)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.58-12.53(m,1H),8.15(s,1H),7.65(t,J＝2.2Hz,1H),7.47(t,J＝2.5Hz,1H),6.14(d,J＝5.9Hz,1H),5.92(t,J＝6.0Hz,1H),5.54(dd,J＝5.9,4.4Hz,1H),4.46-4.26(m,3H),2.16-2.11(m,3H),2.04(d,J＝2.4Hz,6H)

中间体2C的制备：

向于THF(50mL)中含有2B(2.5g，5.77mmol)、2-(4-硝基苯基)乙-1-醇(1.543g，9.23mmol)和三苯基膦(2.270g，8.65mmol)的溶液中逐滴添加DIAD(1.682mL，8.65mmol)。在室温搅拌反应物20小时且随后真空浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至80g ISCO硅胶柱并使用Teledyne ISCO系统纯化，用5％-100％DCM/EtOAc经30分钟梯度洗脱，得到二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(5-(4-硝基苯乙基)-9-氧代-5,9-二氢-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基)四氢呋喃-3,4-二酯，m/z(583,M+H)。将粗产物二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(5-(4-硝基苯乙基)-9-氧代-5,9-二氢-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基)四氢呋喃-3,4-二酯再溶解于含7N氨的MeOH(50mL)中，并搅拌20小时。随后将反应物浓缩至约1/2体积并用约50mL二乙醚处理。通过过滤收集所得固体，且用二乙醚冲洗并干燥，得到2C(2.5g，5.48mmol，95％产率)，m/z(457,M+H)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.16-8.10(m,3H),7.66-7.63(m,1H),7.53-7.48(m,1H),7.46-7.43(m,1H),5.86-5.82(m,1H),5.44-5.39(m,1H),5.24-5.20(m,1H),5.06-5.01(m,1H),4.63-4.56(m,1H),4.45-4.39(m,2H),4.22-4.17(m,1H),3.98-3.93(m,1H),3.72-3.65(m,1H),3.63-3.55(m,1H),3.33-3.27(m,2H)

中间体2D的制备：

将于吡啶(40mL)中含有2C(2.5g，5.48mmol)的溶液浓缩至浓稠油状物。使油状物与另外的吡啶(40mL)再次共沸。在氮气氛围下将所得粘稠油状物再溶解于吡啶(30mL)中，且分小份添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(2.227g，6.57mmol)。搅拌反应物20小时，且随后在旋转蒸发仪上浓缩。将所得残余物用DCM(100mL)稀释，且用饱和NaHCO₃水溶液(25mL)及饱和NaCl水溶液洗涤，随后干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至40g ISCO硅胶柱并使用Teledyne ISCO系统纯化，用5％-100％EtOAc/DCM(DCM含有0.25％TEA)经20分钟梯度洗脱，得到2D(1.95g，2.57mmol，46.9％产率)，m/z(759,M+H)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.13-8.06(m,3H),7.68-7.62(m,1H),7.45-7.39(m,3H),7.35-7.29(m,2H),7.21-7.12(m,7H),6.72(dd,J＝16.5,8.9Hz,4H),5.92(d,J＝4.3Hz,1H),5.55(d,J＝5.6Hz,1H),5.23(d,J＝6.1Hz,1H),4.68(q,J＝5.2Hz,1H),4.40(q,J＝5.6Hz,1H),4.33-4.14(m,2H),4.10-4.04(m,1H),3.69(s,3H),3.68-3.66(m,3H),3.32-3.26(m,1H),3.22-3.13(m,3H)。

中间体2E的制备：

将中间体2D(3.75g，4.94mmol)和咪唑(0.841g，12.36mmol)溶解于DMF(25mL)中，并添加TBS-Cl(0.782g，5.19mmol)。在氮气氛围下搅拌反应物18小时。随后将反应混合物倾入至含有EtOAc/10％LiCl水溶液(200mL/50mL)的分液漏斗中并震荡。倾析水层，且将有机层用另外的10％LiCl水溶液(50mL)及饱和NaCl水溶液洗涤，随后干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至ISCO 220g硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-50％EtOAc/DCM(0.25％TEA)经30分钟梯度洗脱，得到较慢洗脱的2E(900mg，1.03mmol，21％产率)。保留时间：1.18分钟。(柱：ACQUITYBEH C18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。质量观测值873.5(M+H)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.24-8.09(m,2H),8.00-7.86(m,1H),7.74-7.56(m,1H),7.44(d,J＝7.0Hz,2H),7.36-7.34(m,2H),7.34-7.31(m,3H),7.31-7.29(m,1H),7.27-7.22(m,3H),6.93-6.77(m,4H),6.73-6.64(m,1H),6.09-5.95(m,1H),4.53-4.48(m,1H),4.47-4.42(m,1H),4.38-4.29(m,2H),4.24-4.16(m,1H),3.80(d,J＝0.8Hz,6H),3.56-3.46(m,1H),3.37-3.29(m,1H),3.27-3.19(m,2H),3.18-3.11(m,1H),0.92(s,9H),0.02(s,6H)。

中间体2F的制备：

向于DCM(10mL)中含有2E(900mg，1.031mmol)的溶液中添加1H-咪唑-4,5-二甲腈(146mg，1.237mmol)，接着添加3-((双(二异丙基氨基)磷烷基)氧基)丙腈(0.680mL，2.062mmol)。搅拌混合物20小时，且随后用另外的DCM(50mL)稀释且用10％NaHCO₃水溶液(25mL)淬灭。将有机层分离，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至12g ISCO硅胶柱上并使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-100％EtOAc/DCM(0.25％TEA)经15分钟梯度洗脱，得到2F(1.1g，1.025mmol，99％产率)。保留时间：1.15分钟，(柱：ACQUITYBEH C18 1.7μm；流动相A：水+0.05％TFA；流动相B：乙腈+0.05％TFA；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体2G的制备：

向Ph₃P(1.071g，4.08mmol)于THF(20mL)/甲苯(4mL)中的0℃溶液中添加DIAD(0.700ml，3.60mmol)。在0℃搅拌反应物30分钟。向反应物中添加6-氯-9H-嘌呤(0.557g，3.60mmol)和1G(1.0g，2.4mmol)。在50℃搅拌反应物16小时且随后真空浓缩。在40g硅胶上通过快速色谱(15分钟梯度，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗物质，得到呈白色泡沫状的2G(1.0g，1.8mmol，75％产率)。[M+H]+＝553.2。

中间体2H的制备：

向2G(1.74g，3.15mmol)于THF(16mL)中的0℃溶液中添加甲基氯化镁(3M于THF中)(2.1mL，6.3mmol)。使混合物升温至室温，且搅拌反应物2小时。随后将反应物用饱和氯化铵水溶液淬灭，且在室温搅拌10分钟。随后将混合物分配于EtOAc与水之间，分离有机层，且用EtOAc萃取水相。干燥(硫酸钠)且真空浓缩经合并的有机层。在80g硅胶上通过快速色谱(15分钟梯度，0-100％EtOAc/DCM)纯化粗物质，得到呈白色固体状的2H(1.16g，2.27mmol，72％产率)。LCMS,[M+H]+＝511.3。

中间体2I的制备：

使于MeCN(3mL)中含有1H-四唑(212mg，3.03mmol)和2H(310mg，0.607mmol)的溶液在旋转蒸发仪上共沸(2×3mL)，且随后将其再悬浮于MeCN(3mL)中并添加活性MS(150mg)，并且使混合物在氮气氛围下静置。在另一小瓶中，将2F(846mg，0.789mmol)悬浮于无水乙腈(4mL)中，且使其在旋转蒸发仪上共沸(3×1mL)，并且随后将其再悬浮于乙腈(4mL)中。经由注射器将该混合物添加至醇-四唑的上述搅拌溶液中。在室温搅拌反应物过夜。随后用(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(249mg，1.213mmol)处理反应混合物，且在室温搅拌过夜。随后将反应混合物浓缩，溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO₃洗涤，且随后用盐水洗涤。有机层相经Na₂SO₄干燥，且随后浓缩并真空干燥。随后将粗物质悬浮于DCM(30mL)中，且添加2,2-二氯乙酸(2.444mL，4.25mmol)，接着添加三乙基硅烷(0.678mL，4.25mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时。反应物随后用DCM稀释且用NaHCO₃水溶液中和。有机相用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥且真空浓缩。在C18 120g反相ISCO gold柱上纯化粗混合物，且用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在20％B下保持5分钟，随后20-100％B经20分钟，在70-80％梯度下洗脱产物峰，得到2I(340mg，0.350mmol，57.8％产率)。m/z(970.3,M+H)。

中间体2J的制备：

将中间体2I(0.34g，0.350mmol)溶解于无水吡啶(5mL)中。使溶液在旋转蒸发仪上共沸。重复与吡啶的该共沸(2×3mL)。随后在氮气氛围下将残余物再溶解于无水吡啶(70.1mL)中，且经30分钟用亚磷酸二苯酯(0.136mL，0.701mmol)于1mL吡啶中的溶液逐滴处理。20分钟后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.288g，1.401mmol)，且在室温搅拌反应物过夜。随后将反应混合物浓缩至干燥。将残余物悬浮于EtOAc中且用NaHCO₃水溶液洗涤。收集有机相并用盐水洗涤，且随后经Na₂SO₄干燥，过滤，且浓缩至干燥。随后使粗物质与MeCN共沸若干次，将其悬浮于MeCN中并过滤。浓缩滤液，将其悬浮于MeOH中并再次过滤。随后在C18 150g反相ISCO gold柱上纯化滤液，且用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在10％B下保持3分钟，随后10-65％B经15分钟，接着在65％B下保持2分钟且65％-100％B经12分钟，在55-65％梯度下洗脱三个重叠的产物峰，得到2J(28％，104mg)。m/z(1048.3,M+H)。

中间体2K的制备：

2K-1和2K-2

向含有2J(83mg，0.079mmol)的小瓶中添加30％氢氧化铵(5mL，34.7mmol)，且在30℃搅拌反应混合物过夜。在氮气流下浓缩反应混合物，且随后使其与甲苯(3×3mL)共沸以移除水。随后使残余物与乙腈(3×3mL)共沸，且随后与吡啶(3×3mL)共沸。用吡啶(1.583mL)、DBU(0.119mL，0.792mmol)和硝基甲烷(0.064mL，1.187mmol)的混合物处理粗产物，且在30℃加热过夜。向反应混合物中添加另外200μL的无水吡啶、DBU(0.060mL，0.396mmol)和硝基甲烷(0.021mL，0.396mmol)，且在30℃再搅拌4小时。反应混合物用MeCN稀释且用乙酸(0.091mL，1.583mmol)处理，且随后浓缩。在C18 ISCO 50g反相gold柱上纯化粗物质，且用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，0-40％B经15分钟，随后40-100％B经5分钟，得到呈单一非对映异构体形式的2K-1以及呈两种非对映异构体混合物形式的2K-2。

2K-1：(26mg)。LCMS：m/z 827.2(M+H)，保留时间：0.71分钟(Waters Acquity UPLCBEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

2K-2：(14mg)。LCMS：m/z 827.2(M+H)，保留时间：0.65分钟(Waters Acquity UPLCBEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

实施例2-1、2-2和2-3

2-1(非对映异构体1)

2-2(非对映异构体2)

2-3(非对映异构体3)

向2K-1(25mg，0.030mmol)于吡啶(1mL)中的溶液中添加三氢氟化三乙胺(0.074mL，0.454mmol)，且在37℃搅拌反应混合物过夜。随后在轻缓氮气流下蒸发反应混合物，且随后使其与MeCN共沸。在ISCO 15.5g反相gold柱上纯化粗物质，且用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵：在0％B下保持1.5分钟，0-20％B经6分钟，在20％B下保持1.5分钟，且随后20-100％B经7分钟，得到呈单一非对映异构体形式的实施例2-1(9.5mg)：LCMS：m/z713.0(M+H)，保留时间：0.42分钟(Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

以类似于2K-1的方式处理中间体2K-2，得到两种非对映异构体实施例2-2和实施例2-3的混合物。LCMS：m/z 713.0(M+H)，保留时间：0.41分钟(Waters Acquity UPLC BEHC18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

或者，可如下文所描述制备实施例2-1。

中间体2L的制备：

向中间体2E(1.01g，1.16mmol)和试剂4(1.03g，2.31mmol)于乙腈(15mL)中的溶液中添加DBU(0.35mL，2.31mmol)。20分钟后，反应混合物用乙酸(0.21g，3.47mmol)中和且随后浓缩，且通过硅胶快速柱色谱(40g，用0-100％EtOAc/DCM洗脱)纯化残余物，得到中间体2L(1.20g，1.07mmol，93％产率)。LCMS：m/z 1119.8(M+H)；保留时间：1.32分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体2M的制备：

向钢制反应釜中添加中间体2E(1.94g，3.51mmol)和二噁烷(10mL)。向所得无色溶液中添加30％氢氧化铵水溶液(20mL，154mmol)。在70℃加热所得混浊反应混合物2天。随后将反应混合物浓缩至干燥。将粗产物吸附至硅藻土上并使用80g柱通过硅胶色谱纯化，且用0-20％MeOH/DCM洗脱，得到呈白色固体状的中间体2M(1.59g，3.23mmol)。LCMS：m/z 492.5(M+H)，t_R：0.82分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ8.32(s,1H),7.72(s,1H),7.42-7.33(m,6H),7.31-7.18(m,9H),5.61(br s,2H),4.61(q,J＝8.6Hz,1H),3.81-3.66(m,2H),3.39(dd,J＝9.9,5.5Hz,1H),3.30(dd,J＝10.0,6.5Hz,1H),3.23(br s,1H),3.08-2.98(m,1H),2.63-2.48(m,2H),2.36-2.25(m,1H)。

中间体2N的制备：

使中间体2M(0.791g，1.608mmol)与ACN(5mL)共沸。随后添加中间体2L(1.2g，1.072mmol)，且使混合物与ACN(5mL)再次共沸。将所得残余物溶解于THF(20mL)中，且添加DBU(0.65mL，4.3mmol)。在室温搅拌20分钟之后，添加乙酸(0.248mL，4.29mmol)，且随后浓缩混合物。通过硅胶色谱(80g，在35分钟内用0-10％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，得到中间体2N(0.71g，0.49mmol，46％产率)。LCMS：m/z 1442.5(M+H)；保留时间：1.19分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体2O的制备：

向中间体2N(710mg，0.49mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(0.39mL，2.46mmol)和2,2-二氯乙酸(0.12mL，1.48mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时。随后添加吡啶(311mg，3.94mmol)且浓缩反应混合物。通过硅胶色谱(40g，用0-29％MeOH/DCM洗脱)纯化残余物，得到中间体2O(408mg，0.36mmol，73％产率)。LCMS：m/z 1140.6(M+H)；保留时间：1.03分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体2P的制备

使中间体2O(408mg，0.36mmol)与ACN(5mL)共沸。随后添加试剂3(320mg，0.72mmol)，接着添加无水THF(10mL)和DBU(0.22mL，1.43mmol)。在室温搅拌反应物七分钟。随后用乙酸(130mg，2.15mmol)处理反应物，且随后浓缩。在ISCO硅胶gold柱(24g，用0-20％MeOH/DCM洗脱)上纯化残余物，得到中间体2O(0.5g，0.24mmol，66％产率)。LCMS：m/z1386.4(M+H)；保留时间：1.18分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体2Q的制备：

向中间体2P(500mg，0.24mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(0.45mL，2.8mmol)和2,2-二氯乙酸(0.20mL，2.36mmol)。30分钟后，将反应混合物逐滴添加至含有DBU(1.07mL，7.1mmol)和THF(5mL)的烧瓶中。再搅拌所得混合物10分钟，且随后浓缩。将残余物再溶解于ACN(1mL)中且在室温搅拌过夜。随后在40℃搅拌混合物4小时。随后浓缩反应混合物，且用二乙醚(10mL×5)湿磨残余物。将所得固体溶解于MeOH(10mL)中，与5g硅藻土混合，且随后浓缩至干燥。在C18 100g反相ISCO gold柱(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵；在100％A下保持10分钟，随后0-35％B经15分钟，接着在35％B下保持2分钟且35％-100％B经12分钟)上纯化固体，得到中间体2Q(132mg，67.7％)。LCMS：m/z 827.1(M+H)；保留时间：0.57分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

实施例2-1

将中间体2Q(132mg，0.078mmol)溶解于三氢氟化三乙胺(3mL，18.4mmol)中，且在37℃搅拌3小时。随后使混合物冷却至室温，且添加三乙胺(5.1mL，36.6mmol)，并在室温搅拌混合物10分钟。随后在室温添加异丙氧基三甲基硅烷(8.0g，60.5mmol)。搅拌1小时后，浓缩反应混合物，且经由制备型LC/MS(制备型LC/MS条件：柱：Xselect RP制备型C18 OBD柱5μm，10×250mm；流动相A：水+100mM NH₄OAc；流动相B：MeOH；梯度：5％B至21.5％B经0至14分钟，21.5％B至95％B经0.5分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：20mL/min；分析型LCMS条件：Agilent 1290 HPLC/MS，柱：Xselect CSH C18柱3.5μm，2.1×150mm；流动相A：水+20mM NH₄OAc；流动相B：MeOH；温度：50℃；梯度：5％B至45％B经15分钟，45％B至95％B经2分钟；流速：0.35mL/min；检测：MS和UV(260nm))纯化固体残余物，得到实施例2-1(34mg)。LCMS：m/z 713.2(M+H)，保留时间：6.42分钟。¹H NMR(700MHz,甲醇-d₄)δ8.39(s,1H),8.20(s,1H),8.15(s,1H),7.59(d,J＝2.7Hz,1H),7.17(d,J＝2.5Hz,1H),6.13(d,J＝8.1Hz,1H),5.56(br d,J＝3.9Hz,1H),4.80-4.76(m,2H),4.38-4.32(m,1H),4.32-4.29(m,1H),4.28-4.22(m,1H),4.20(dt,J＝11.0,5.7Hz,2H),4.14-4.08(m,1H),3.94-3.87(m,1H),3.26-3.18(m,1H),2.57-2.51(m,1H),2.46(br d,J＝8.5Hz,1H),2.37(q,J＝9.8Hz,1H)。

实施例3-1、3-2、3-3和3-4

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(3-1)

非对映异构体2(3-2)

非对映异构体3(3-3)

非对映异构体4(3-4)

中间体3A的制备：

将2H(0.35g，0.685mmol)和氢氧化铵(6.7mL，171mmol)于二噁烷(2mL)中的混合物在50℃搅拌16小时。真空移除溶剂。将所得物质分配于DCM与水之间，且分离有机层。用DCM(2×10mL)、2-Me-THF(2×10mL)萃取水相，且干燥(MgSO₄)并真空浓缩经合并的有机层，得到呈固体状的3A(0.337g，0.686mmol，100％产率)。[M+H]+＝492.3

中间体3B的制备：

将3A(0.326g，0.663mmol)和2-溴乙醛(4.9mL，6.6mmol)于pH 4.5AcOH/NaOAc缓冲液(4mL)中的混合物在80℃搅拌2小时，接着在室温搅拌16小时。随后在80℃搅拌反应物2小时，且随后真空移除有机溶剂。缓慢添加固体碳酸铵，直至气体逸出停止。用EtOAc(2×15mL)萃取水层，且干燥(硫酸钠)并真空浓缩经合并的有机层。在24g硅胶上通过快速色谱(15分钟梯度，0-20％MeOH/DCM)纯化粗物质，得到呈白色泡沫状的3B(0.236g，0.46mmol，69％产率)。LCMS,[M+H]+＝516.4>

中间体3C和3D的制备：

使3B(0.236g，0.458mmol)和1H-四唑(0.038g，0.549mmol)的混合物与3mL无水ACN共沸。随后将残余物溶解于3mL无水ACN中。使二异丙基氨基磷酸(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基酯(2-氰基乙酯)(Sigma-Aldrich，0.601g，0.687mmol)的单独混合物与3mL无水ACN共沸。随后将该物质溶解于1.5mL ACN中，且在室温将其逐滴添加至上文3B的搅拌混合物中。在室温搅拌反应物16小时。向反应物中添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.141g，0.687mmol)，且在室温搅拌反应物2小时。随后将混合物分配于DCM与水之间，且分离有机层。用DCM萃取水相，且干燥(硫酸钠)并真空浓缩经合并的有机层。在40g硅胶上通过快速色谱(15分钟梯度，0-20％MeOH/DCM)纯化粗物质，得到呈油状物的3C(0.245g，0.185mmol，40.5％产率)(LCMS：[M+H]+＝1322.6)以及呈固体状的3D(0.150g，0.147mmol，32.1％产率)。

中间体3E的制备：

在室温，向3C(0.245g，0.185mmol)、3D(0.150g，0.147mmol)和三乙基硅烷(0.296ml，1.853mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加TFA(0.043mL，0.56mmol)。在室温搅拌反应混合物3小时。用50％碳酸氢钠水溶液淬灭反应物。分离有机层，且用10mL DCM接着用2×10mL 2-MeTHF萃取水层。干燥(硫酸钠)且真空浓缩经合并的有机层。用二乙醚湿磨物质，且通过真空过滤收集固体，得到呈灰白色固体状的3E(0.245g，0.315mmol，95％产率)。LCMS,[M+H]+＝778.3。

中间体3F的制备：

经1小时的时间段向3E(0.243g，0.312mmol)于吡啶(11mL)中的0℃溶液中逐滴添加膦酸二苯酯(0.121mL，0.625mmol)于吡啶(1mL)中的溶液。在室温搅拌反应物16小时。随后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.160g，0.781mmol)，且在室温搅拌反应物3小时，随后真空浓缩。在50g C18上通过反相ISCO(0-100％，15分钟梯度，(95/5/0.5的ACN/水/乙酸铵)/(95/5/0.5的水/ACN/乙酸铵))纯化粗物质，得到呈固体状的3F的四种非对映异构体混合物(0.267g，0.312mmol，100％产率)。LCMS,[M+H]+＝856.8。

实施例3-1、3-2、3-3和3-4

非对映异构体1(3-1)

非对映异构体2(3-2)

非对映异构体3(3-3)

非对映异构体4(3-4)

将3F(四种非对映异构体)(0.267g，0.312mmol)和氨(7N于MeOH中)(6.69mL，46.8mmol)的混合物在室温搅拌1小时。随后将反应物加热至50℃后保持3小时。真空移除溶剂，且在50g C18上通过反相ISCO色谱(0-100％，15分钟梯度，(95/5/0.5的ACN/水/乙酸铵)/(95/5/0.5的水/ACN/乙酸铵))纯化所得残余物，得到四种非对映异构体的混合物。随后经由具有以下条件的制备型LC/MS纯化粗物质：柱：Agilent Bonus RP 21.2×100mm，5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：乙腈；梯度：0％B保持0至6分钟，0％-25％B经16分钟，随后在100％B下保持4分钟；流速：20mL/min，得到两种个别非对映异构体(3-1和3-2)以及两种非对映异构体(3-3和3-4)的混合物。

实施例3-1.2.4mg。保留时间：2.34分钟。(柱：Agilent Bonus RP，2.1mm×50mm，1.8μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：0％B保持1分钟，随后0％B至100％B经4分钟，接着在100％B下保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。LCMS,[M+H]+＝698.9。

实施例3-2.2mg。保留时间：2.47分钟。(柱：Agilent Bonus RP，2.1mm×50mm，1.8μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：0％B保持1分钟，随后0％B至100％B经4分钟，接着在100％B下保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。LCMS,[M+H]+＝698.9。

实施例4-1和4-2

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,18-二羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(4-1)

非对映异构体2(4-2)

中间体4A的制备：

使于MeCN(3mL)中含有1H-四唑(104mg，1.491mmol)和2H(152mg，0.298mmol)的溶液在旋转蒸发仪上共沸(2×3mL)，且随后将其再悬浮于MeCN(3mL)中并添加活性MS(150mg)，且使反应混合物在氮气氛围下静置。将2F(320mg，0.298mmol)放入另一小瓶中，添加无水乙腈(4mL)，且使其在旋转蒸发仪上共沸(3×1mL)，并且随后将其再悬浮于乙腈(4mL)中。随后经由注射器将该混合物添加至醇-四唑的上述搅拌溶液中。在室温搅拌反应物过夜。向反应混合物逐滴添加氢过氧化叔丁基(0.072mL，0.745mmol)，且再搅拌30分钟。随后将反应混合物浓缩至干燥且随后用EtOAc稀释。所得悬浮液用饱和NaHCO₃洗涤，随后用盐水洗涤，且有机相经Na₂SO₄干燥、过滤并浓缩至干燥。将所得粗物质悬浮于DCM(30mL)中，且添加二氯乙酸(1.201mL，2.087mmol)，接着添加三乙基硅烷(0.476mL，2.98mmol)。在室温搅拌所得混合物1小时。反应物随后用DCM稀释且用NaHCO₃水溶液中和。分离有机相，且用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且真空浓缩。在C18 50g反相ISCO gold柱上，使用制造商推荐的流动速率用以下条件纯化粗物质：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵；梯度：在20％B下保持2分钟，20-60％B经6分钟，在60％B下保持3分钟，60-100％B经2分钟，且在100％B下保持3分钟，得到4A(115mg，0.120mmol，40.4％产率)：LCMS：m/z 954.2(M+H)，保留时间：0.93分钟(Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体4B的制备：

使4A(0.088g，0.092mmol)于无水吡啶(18.44ml)中的溶液在旋转蒸发仪上共沸。重复与吡啶的共沸(2×3mL)。在氮气氛围下将残余物再溶解于无水吡啶(18.44mL)中，且经30分钟用亚磷酸二苯酯(0.036ml，0.184mmol)于1mL吡啶中的溶液逐滴处理。20分钟后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.057g，0.277mmol)，且在室温搅拌反应物过夜。随后将反应混合物浓缩至干燥。将所得残余物悬浮于EtOAc中且用NaHCO₃水溶液洗涤。有机相用盐水洗涤，且随后经Na₂SO₄干燥，且接着浓缩。使粗物质与MeCN共沸若干次，将其悬浮于MeCN中并过滤。浓缩滤液，且随后将其悬浮于MeOH中并再次过滤。浓缩滤液，且在C18 50g反相ISCOGold柱上使用溶剂A(95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵)/溶剂B(95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵)用以下梯度纯化粗产物：在10％B下保持2分钟，10-40％B经8分钟，在40％B下保持6分钟，40-100％B经3分钟，且在100％B下保持3分钟，得到呈非对映异构体混合物形式的4B：m/z 1032.2(M+H)，保留时间：0.90和0.95分钟(WatersAcquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体4C和4D的制备：

非对映异构体1(4C)

非对映异构体2(4D)

在含有非对映异构体混合物4B的小瓶中添加30％氢氧化铵(4mL，34.7mmol)，且在40℃搅拌反应物2小时。在氮气流下移除溶剂，且随后使残余物与甲苯(3×3mL)共沸以移除剩余的水。用吡啶(1.240mL)、DBU(0.140mL，0.930mmol)和硝基甲烷(0.050mL，0.930mmol)的混合物处理该粗物质。将反应混合物在30℃加热过夜，且随后将其浓缩至干燥。随后用乙腈稀释反应混合物，且添加乙酸(0.160mL，2.79mmol)。随后浓缩混合物，且使其与乙腈共沸若干次。在C18 50g反相Gold ISCO柱上纯化粗产物，用溶剂A(95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵)/溶剂B(95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵)使用以下梯度洗脱：在0％B下保持6分钟，0-30％B经8分钟，在30％B下保持6分钟，30-100％B经3分钟，得到两种分离的非对映异构体4C：LCMS：m/z 811.11(M+H)，保留时间：0.62分钟(Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)和4D：LCMS：m/z 811.1(M+H)，保留时间：0.67分钟(Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

实施例4-1和4-2

非对映异构体1(4-1)

非对映异构体2(4-2)

用三氢氟化三乙胺(200μL，1.228mmol)处理中间体4C(11mg，0.014mmol)，且在40℃搅拌2小时。反应混合物随后用NH₄OAc水溶液淬灭，且在ISCO 15.5g反相gold柱上纯化，且用溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵使用0-20％B梯度洗脱。用溶剂前沿(solvent front)洗脱期望产物。浓缩含有期望物质的级分，且通过制备型HPLC(Xselect RP制备型C18 OBD柱，5μm，19×150mm，流动相A：100mM NH₄OAc(pH 6.5)；流动相B：乙腈；梯度：0-7.5％B经15分钟，7.5-95％B经1分钟，随后在95％B下保持1分钟；流速：20mL/min)纯化，得到呈白色固体状的实施例4-1：(3.3mg，33％产率)。LCMS：m/z 697.1(M+H)，保留时间：0.51分钟(Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

用三氢氟化三乙胺(250μl，1.535mmol)处理中间体4D(14mg，0.017mmol)，且在40℃搅拌2小时。将反应混合物用NH₄OAc水溶液淬灭，且在C18Aq 50g反相ISCO Gold高效柱上纯化，并且用溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵/溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵使用以下梯度洗脱：在0％B下保持2分钟，0-10％B经6分钟，得到呈白色固体状的实施例4-2：(7.3mg，9.9μmol，58％产率)。LCMS：m/z 697.1(M+H)，保留时间：0.37分钟(WatersAcquity UPLC BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％水+0.05％TFA；溶剂B＝100％乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

实施例5-1、5-2、5-3和5-4

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-羟基-17-{9-氧代-3H,5H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(5-1)

非对映异构体2(5-2)

非对映异构体3(5-3)

非对映异构体4(5-4)

中间体5A的制备：

向中间体2D(3.75g，4.94mmol)于DMF(25mL)中的溶液中添加咪唑(0.84g，12.4mmol)，接着添加TBS-Cl(0.78g，5.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时，且随后用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(1×50mL)、用10％LiCl水溶液(2×50mL)且最后用饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至用DCM(含0.25％TEA)平衡的220g ISCO硅胶柱。使用Teledyne ISCO系统纯化粗物质，用0％-50％乙酸乙酯/DCM(含0.25％TEA)洗脱，得到中间体5A(950mg，1.0mmol，21％产率)。质量观测值：873.5(M+H)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.36-8.32(m,1H),8.17-8.13(m,2H),8.06(d,J＝1.6Hz,1H),7.67-7.60(m,2H),7.50(d,J＝1.6Hz,1H),7.17-7.05(m,5H),7.05-6.97(m,4H),6.70(br d,J＝8.9Hz,2H),6.69-6.65(m,2H),6.31(d,J＝2.7Hz,1H),5.75-5.74(m,1H),5.30(d,J＝7.0Hz,1H),4.93-4.89(m,1H),4.82-4.69(m,2H),4.35(br d,J＝4.8Hz,1H),4.22-4.17(m,1H),3.70(s,3H),3.69(s,3H),3.32-3.24(m,2H),3.00(dd,J＝10.8,3.8Hz,1H),0.81(s,9H),0.06(s,3H),0.01(s,3H)。

中间体5B的制备：

向中间体5A(950mg，1.0mmol)于DCM(12mL)中的溶液中添加N,N,N',N'-四异丙基二氨基磷酸2-氰基乙酯(0.717mL，2.176mmol)。在室温搅拌20小时之后，将反应物用另外的DCM(20mL)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液(10mL)洗涤，且随后用饱和NaCl水溶液(10mL)洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至用DCM(含0.25％TEA)平衡的40g硅胶柱上，且使用Teledyne ISCO系统纯化，用0％-50％EtOAc/DCM(0.25％TEA)洗脱，得到呈两种非对映异构体混合物形式的中间体5B(950mg，0.89mmol，81％产率)。质量观测值：1073.3；保留时间：1.46分钟，LCMS：(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mMNH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体5C的制备：

将中间体5B(630mg，0.59mmol)与ACN(2mL)共蒸发三次，且随后添加100mg分子筛接着添加ACN(2mL)。将该溶液加盖且搁置一旁。在另一烧瓶中，将中间体2H(250mg，0.50mmol)和1H-四唑(69mg，0.98mmol)与ACN(10mL)共蒸发两次。将所得残余物再次溶解于乙腈(10mL)中，且浓缩至大约4mL的体积。经由套管向中间体2H的混合物中添加中间体5B的制备溶液。将所得混合物用超声波处理并搅拌约16小时，随后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(110mg，0.54mmol)且继续搅拌30分钟。随后浓缩混合物，且随后用MeOH处理。通过过滤移除所得固体，且浓缩滤液并通过硅胶色谱(40g，用0-100％EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到中间体5C(574mg，0.38mmol，77％产率)。质量观测值：1514.7；保留时间：1.41分钟(柱：ACQUITY/>BEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体5D的制备：

用三乙基硅烷(610μl，3.8mmol)和2,2-二氯乙酸(310μl，3.8mmol)处理中间体5C(574mg，0.38mmol)于DCM(20mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌3小时，且随后用20mL DCM稀释，且用NaHCO₃水溶液洗涤。用DCM(20mL×2)萃取水层。经合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩且通过硅胶色谱(12g，0-10％MeOH/DCM)纯化，得到中间体5D(160mg，0.16mmol，43％产率)。质量观测值：970.3；保留时间：0.94分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mMNH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体5E的制备：

使中间体5D(160mg，0.16mmol)与吡啶(2mL)共沸，且随后将其再溶解于吡啶(12mL)中。在氮气氛围下向该吡啶溶液中逐滴添加亚磷酸二苯酯(0.063mL，0.324mmol)于吡啶(1mL)中的溶液。搅拌20分钟后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(100mg，0.49mmol)，且在室温搅拌反应物过夜。随后将反应混合物浓缩至干燥。将残余物悬浮于EtOAc(50mL)中，且用NaHCO₃水溶液(30mL)洗涤。收集有机相，且用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且随后浓缩至干燥。用MeOH(10mL)处理残余物10分钟，且通过过滤移除所得固体。浓缩滤液，且随后在C18 150g反相ISCO gold柱上纯化(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在10％B下保持3分钟，随后10-65％B经15分钟，接着在65％B下保持2分钟，且65％-100％B经12分钟)，得到呈4种非对映异构体混合物形式的5E(99mg，0.094mmol，58％产率)。质量观测值：1048.0；保留时间：0.89至0.96分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体5F的制备

将含中间体5E(99mg，0.094mmol)的2mL 28％氢氧化氨加热至40℃后保持4小时。接着在氮气流下浓缩混合物。将残余物再溶解于3mL吡啶中，且添加DBU(113μl，0.76mmol)。将混合物在40℃搅拌8小时，且随后浓缩。随后用5mL二乙醚湿磨残余物三次，将其溶解于10mL MeOH中，且与2g硅藻土混合并浓缩。将粗硅藻土混合物在C18 100g反相ISCO gold柱上纯化(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在100％A下保持10分钟，随后0-35％B经15分钟，接着在35％B下保持2分钟，且35％-100％B经12分钟)，得到呈4种非对映异构体混合物形式的中间体5F(58mg，0.070mmol，74％产率)。质量观测值：827.0；保留时间：0.51至0.52分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mMNH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

实施例5-1、5-2、5-3和5-4

非对映异构体1(5-1)

非对映异构体2(5-2)

非对映异构体3(5-3)

非对映异构体4(5-4)

将中间体5F(58mg，0.070mmol)溶解于0.5mL三氢氟化三乙胺中，且在37℃搅拌2小时。反应物随后用2mL的2M NH₄OAC淬灭，且经由制备型LC/MS纯化，得到4种个别非对映异构体实施例5-1、5-2、5-3和5-4。制备型LC/MS条件：柱：Xselect RP制备型C18 OBD柱，19×150mm，5μm颗粒；流动相A：水+20mM TEA；流动相B：乙腈:水(80:20)+20mMTEA；梯度：8％B至18％B经0至21分钟，18％-95％经2分钟，随后在95％B下保持2分钟；流速：20mL/min。分析型LCMS条件：Agilent 1290HPLC/MS，柱：Xselect CSH C18柱，3.5μm，3.0×150mm；流动相A：水+20mM TEA；流动相B：乙腈:水(80:20)+20mM TEA；温度：50℃；梯度：5％B至35％B经25分钟，随后35％B至95％B经2分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(220nm)。

实施例5-1.4.2mg。保留时间：8.29分钟。LCMS,[M+H]+＝713.0。

实施例5-2.3.1mg。保留时间：9.43分钟。LCMS,[M+H]+＝713.0。

实施例5-3.6.8mg。保留时间：10.04分钟。LCMS,[M+H]+＝713.0。

实施例5-4.5.6mg。保留时间：12.56分钟。LCMS,[M+H]+＝713.0。

实施例6-1、6-2、6-3和6-4

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(6-1)

非对映异构体2(6-2)

非对映异构体3(6-3)

非对映异构体4(6-4)

中间体6A的制备：

将6-氯-7H-嘌呤-2-胺(Oakwood，3.4g，19.9mmol)溶解于无水乙腈(50mL)中，且添加N-(三甲基硅烷基)乙酰亚胺三甲基硅烷酯(9.72mL，39.8mmol)。将溶液回流2小时且使其冷却至室温。添加苯甲酸((2R,3R,4S)-5-乙酰氧基-4-(苯甲酰氧基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲酯(Bioorg.Med.Chem Lett.,2003,13,817；4.0g，9.94mmol)于无水乙腈(50mL)中的溶液，接着添加三氟甲烷磺酸三甲基硅烷酯(7.20mL，39.8mmol)。将所得混合物再次回流4小时，且随后冷却至室温，用EtOAc(200mL)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且真空浓缩。在硅胶(40g，0-100％的EtOAc/DCM)上色谱纯化粗物质，得到中间体6A(3.99g，7.79mmol，78％产率)。质量观测值：512.2；¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ8.13-8.04(m,4H),7.87(s,1H),7.69-7.58(m,2H),7.56-7.43(m,4H),6.38-6.21(m,2H),5.84-5.61(m,1H),5.06(s,2H),4.91(dd,J＝11.9,4.4Hz,1H),4.87-4.77(m,1H),4.71-4.55(m,1H)。

中间体6B的制备：

向中间体6A(3.2g，6.25mmol)于EtOH(70mL)中的溶液中添加NH₄OAc/AcOH缓冲液(4.5pH，150mL)和2-溴乙醛(14.4mL，18.8mmol)。将混合物在37℃加热6天。随后真空移除大部分溶剂，且用200mL EtOAc稀释反应物以形成乳液。用NaHCO₃水溶液使所得混合物呈碱性。分离有机相，且用水洗涤，随后用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到灰白色固体，将该固体用Et₂O(10mL×2)洗涤，随后真空干燥，得到粗产物6B。质量观测值：518.2；¹HNMR(499MHz,DMSO-d₆)δ8.13(s,1H),8.02(dd,J＝8.3,1.2Hz,2H),7.94(dd,J＝8.4,1.3Hz,2H),7.75-7.69(m,1H),7.66-7.62(m,2H),7.59-7.54(m,3H),7.48-7.42(m,3H),6.43(d,J＝5.0Hz,1H),6.33-6.22(m,1H),6.09-5.90(m,1H),4.85-4.72(m,2H),4.70-4.60(m,1H)。

中间体6C的制备：

在0℃、氮气下，向中间体6B(3.5g，6.76mmol)、2-(4-硝基苯基)乙-1-醇(1.7g，10.15mmol)和三苯基膦(5.32g，20.30mmol)于THF(30mL)中的溶液中逐滴添加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二异丙基酯(1.97ml，10.15mmol)。使反应物缓慢升温至室温且随后搅拌60分钟。真空移除溶剂。将所得浓稠油状物用二乙醚(5mL×4)湿磨，随后通过硅胶色谱(80g，0-60％的EtOAc/己烷)纯化，得到6C(2.4g，3.60mmol，53％产率)。质量观测值：667.4；¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.12-8.03(m,5H),7.87(dd,J＝8.4,1.3Hz,2H),7.70-7.63(m,1H),7.59(d,J＝2.7Hz,1H),7.58-7.53(m,1H),7.52-7.47(m,2H),7.40(d,J＝8.7Hz,2H),7.35(t,J＝7.9Hz,2H),7.27(d,J＝2.6Hz,1H),6.53(dt,J＝14.9,5.2Hz,1H),6.45(d,J＝4.9Hz,1H),5.97-5.78(m,1H),4.96-4.81(m,2H),4.78-4.65(m,1H),4.53-4.38(m,1H),4.33(dt,J＝14.0,6.9Hz,1H),3.31-3.15(m,2H)。

中间体6D的制备

将中间体6C(2.4g，3.60mmol)于20mL的7N NH₃/MeOH中的溶液在室温搅拌5小时。随后浓缩反应混合物，且所得固体用MeOH(1mL×3)洗涤，接着真空干燥。随后使固体与吡啶(5mL)共沸，接着将其溶解于10mL吡啶中，且添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(1.220g，3.60mmol)并在室温搅拌混合物16小时。随后用2mL MeOH处理反应混合物，且在室温搅拌10分钟。随后浓缩混合物，且将残余物溶解于50mL DCM中，用NaHCO₃水溶液洗涤，接着用盐水洗涤，且随后浓缩。粗物质经硅胶纯化(40g，0-100％的EtOAc/DCM(含0.25％TEA))，得到中间体6D(1.9g，2.5mmol，69％产率)。质量观测值：761.5；¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ8.17(d,J＝8.7Hz,2H),7.88(s,1H),7.64(d,J＝2.7Hz,1H),7.37-7.32(m,2H),7.30(br d,J＝8.7Hz,2H),7.28-7.19(m,7H),6.80(d,J＝8.9Hz,4H),6.67(d,J＝2.6Hz,1H),5.99(d,J＝7.4Hz,1H),5.15(m,1H),4.99-4.80(m,1H),4.65(br d,J＝5.1Hz,1H),4.61-4.47(m,1H),4.30(t,J＝7.0Hz,2H),3.79(s,6H),3.49(dd,J＝10.7,3.5Hz,1H),3.39(dd,J＝10.6,3.5Hz,1H),3.22(td,J＝6.9,2.7Hz,2H)。

中间体6E的制备：

向6D(0.5g，0.657mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加1H-咪唑-4,5-二甲腈(0.66ml，0.66mmol)(1M于ACN中)，接着添加3-((双(二异丙基氨基)磷烷基)氧基)丙腈(0.40g，1.31mmol)。将混合物在室温搅拌过夜，且随后用DCM(30mL)稀释且用10％NaHCO₃水溶液洗涤。用另外的DCM(20mL)萃取水层。干燥(Na₂SO₄)经合并的有机层，过滤且浓缩。粗产物经硅胶纯化(40g柱，0-100％的EtOAc/DCM(含0.25％TEA))，得到呈一对非对映异构体形式的6E(0.60g，0.624mmol，95％产率)。质量观测值：961.1；保留时间：1.19分钟和1.25分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mMNH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体6F的制备

使中间体6E(635mg，0.66mmol)与2mL乙腈共沸3次。随后添加100mg分子筛，接着添加2mL ACN。将该溶液加盖且搁置一旁。在另一烧瓶中，将中间体2H(270mg，0.53mmol)和5-(乙硫基)-1H-四唑(138mg，1.057mmol)与ACN(10mL×2)共蒸发。将残余物再次溶解于乙腈(10mL)中，且浓缩至大约4mL。经由套管向中间体2H的混合物中添加中间体6E的制备溶液。将所得混合物用超声波处理并搅拌约16小时，随后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(119mg，0.58mmol)且继续搅拌30分钟。浓缩混合物，且随后用MeOH处理。通过过滤移除固体，且浓缩滤液，随后经硅胶纯化(40g，用0-100％的EtOAc/己烷(含0.5％TEA)洗脱)，得到中间体6F(600mg，0.40mmol，76％产率)。质量观测值：1349.1；保留时间：1.14分钟。(柱：ACQUITY/>BEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mMNH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体6G的制备：

向中间体6F(601mg，0.401mmol)于20mL DCM中的溶液中添加三乙基硅烷(710μl，4.5mmol)和2,2-二氯乙酸(370μl，4.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时，随后用20mLDCM稀释且用NaHCO₃水溶液洗涤。用DCM(20mL×2)萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质经硅胶纯化(12g，0-15％的MeOH/DCM)，得到中间体6G(360mg，0.40mmol，100％产率)。质量观测值：805.2；保留时间：0.80分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mMNH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体6H的制备：

使中间体6G(360mg，0.45mmol)与2mL吡啶共沸，且随后将其再溶解于12mL吡啶中。在氮气氛围下，向该溶液中逐滴添加亚磷酸二苯酯(0.17mL，0.89mmol)于2mL吡啶中的溶液。搅拌20分钟后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(274mg，1.33mmol)，且在室温搅拌反应物过夜。随后用0.1mL水淬灭反应混合物，且浓缩至干燥。随后用4mL MeOH处理残余物10分钟，且通过过滤移除所得固体。浓缩滤液，且随后在C18 150g反相ISCO gold柱上纯化(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在10％B下保持5分钟，随后10-65％B经25分钟，接着在65％B下保持2分钟，且65％-100％B经12分钟)，得到呈4种非对映异构体混合物形式的中间体6H(120mg，0.136mmol，31％产率)。质量观测值883.1；保留时间：0.48至0.54分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mMNH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

实施例6-1、6-2、6-3和6-4

非对映异构体1(6-1)

非对映异构体2(6-2)

非对映异构体3(6-3)

非对映异构体4(6-4)

将含中间体6H(120mg，0.136mmol)的2mL 30％氢氧化氨溶液在50℃加热3小时。随后浓缩反应物，且将残余物溶解于2mL ACN中并添加DBU(164μl，1.087mmol)。将混合物在室温搅拌40小时，且随后浓缩且用二乙醚(5mL×3)湿磨。所得固体在C18 100g反相ISCO gold柱上纯化(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在100％A下保持10分钟，随后0-35％B经15分钟，接着在35％B下保持2分钟，且35％-100％B经12分钟)，得到含有期望物质的两种级分。经由制备型LC/MS进一步纯化两种级分。级分1产生3种个别非对映异构体(6-1、6-2和6-3)，且级分2产生单一非对映异构体(6-4)。制备型LC/MS条件：柱：Xselect RP制备型C18 OBD柱，19×150mm，5μm颗粒；流动相A：水+20mM NH₄OAc；流动相B：MeOH；梯度：10％B至22％B经0至15分钟，22％B至95％B经0.5分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：20mL/min。分析型LCMS条件：Agilent1290HPLC/MS，柱：Xselect CSH C18柱，3.5μm，3.0×150mm；流动相A：水+20mMNH₄OAc；流动相B：MeOH；温度：50℃；梯度：5％B至100％B经15分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(220nm)。

实施例6-1.2.4mg。保留时间：10.26分钟。LCMS,[M+H]+＝715.2

实施例6-2.0.8mg。保留时间：10.94分钟。LCMS,[M+H]+＝715.2

实施例6-3.1.6mg。保留时间：11.88分钟。LCMS,[M+H]+＝715.2

实施例6-4.3.4mg。保留时间：9.10分钟。LCMS,[M+H]+＝715.2

或者，可根据下方给出的操作制备实施例6-2。

实施例6-2

中间体6I的制备：

向中间体6D(500mg，0.66mmol)和试剂4(590mg，1.31mmol)于乙腈(12mL)中的溶液中添加DBU(0.20mL，1.31mmol)。在室温搅拌反应混合物20分钟，且随后用乙酸(120mg，1.97mmol)淬灭反应物，且随后浓缩。通过硅胶色谱(12g，MeOH/DCM＝0-10％)纯化残余物，得到中间体6I(600mg，0.59mmol，90％产率)。LCMS：m/z 1007.8(M+H)；保留时间：1.22分钟，(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体6J的制备：

使中间体2M(270mg，0.55mmol)与ACN(2mL×2)共沸。随后添加中间体6J(553mg，0.55mmol)，且使混合物与ACN(2mL)共沸。随后向混合物中添加THF(10mL)，接着一次添加全量DBU(0.33mL，2.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌30分钟，且随后用乙酸(0.13mL，2.2mmol)淬灭并浓缩。通过硅胶色谱(12g，MeOH/DCM＝0-15％)纯化所得残余物，得到中间体6J(620mg，0.47mmol，85％产率)。LCMS：m/z 1331.1(M+H)；保留时间：1.05分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

中间体6K的制备：

将中间体6J(0.62g，0.466mmol)于10mL DCM中的溶液用三乙基硅烷(0.37mL，2.33mmol)处理，接着用2,2-二氯乙酸(0.12mL，1.4mmol)处理。在25℃搅拌反应物1小时。完成后，添加吡啶(0.18g，2.33mmol)且浓缩反应混合物。所得残余物经硅胶纯化(12g，0-20％的MeOH/DCM)，得到中间体6K(420mg，0.41mmol，88％产率)。LCMS：m/z 1028.5(M+H)；保留时间：0.80分钟。(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。

中间体6L的制备：

在剧烈搅拌下向中间体6K(422mg，0.41mmol)和试剂3(370mg，0.82mmol)于THF(8mL)中的溶液中添加DBU(0.37mL，2.46mmol)。10分钟后，用乙酸(150mg，2.46mmol)淬灭反应物，且随后浓缩。在ISCO gold硅胶柱(12g，用0-15％的MeOH/DCM洗脱)上纯化残余物，得到中间体6L(460mg，0.36mmol，88％产率)。LCMS：m/z 1274.9(M+H)，保留时间：1.03分钟(柱条件：Waters Acquity SDS；柱：BEH C18(2.1×50mm)，1.7微米；溶剂A＝水+0.05％TFA；溶剂B＝乙腈+0.05％TFA；梯度＝2-98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流动速率：0.8mL/min；检测：在220nm的UV)。

实施例6-2

向中间体6L(460mg，0.36mmol)于10mL DCM中的溶液中添加三乙基硅烷(0.69mL，4.3mmol)，接着添加2,2-二氯乙酸(0.30mL，3.6mmol)。在室温搅拌反应混合物40分钟，且随后在剧烈搅拌下将反应混合物逐滴添加至含有THF(10mL)和DBU(1.63mL，10.8mmol)的烧瓶中。再搅拌所得混合物5分钟。随后浓缩反应混合物，且将残余物再溶解于0.5mL ACN中，且在40℃搅拌16小时以完全移除硝基苯乙基。随后浓缩反应混合物，且用二乙醚(10mL×3)洗涤残余物，且随后将其再溶解于10mL MeOH中。向该溶液中添加3g硅藻土，且将所得混合物浓缩至干燥。在C18 100g反相ISCOgold柱上纯化粗混合物(用以下条件洗脱：溶剂A：95％水、5％乙腈、0.01M乙酸铵；溶剂B：95％乙腈、5％水、0.01M乙酸铵，在100％A下保持10分钟，随后0-35％B经15分钟，接着在35％B下保持2分钟，且35％-100％B经12分钟)，得到呈白色固体状的粗产物实施例6-2：LCMS：m/z 715.2(M+H)；保留时间：0.26分钟(柱：ACQUITYBEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B持续1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))；以及17mg粗产物实施例7：LCMS：m/z 699.2(M+H)；保留时间：0.19分钟(柱：ACQUITY/>BEH C18，2.1×50mm，1.7μm；流动相A：H₂O:ACN(95:5)+10mM NH₄OAc；流动相B：H₂O:ACN(5:95)+10mM NH₄OAc；梯度：5％B至95％B持续1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm))。经由制备型LC/MS进一步纯化粗产物实施例6-2(167mg)[制备型LC/MS条件：柱：Agilent infinitylab EclipsePlus C18柱5μm，21.2×250mm；流动相A：水+100mM NH₄OAc；流动相B：ACN；梯度：5％B至17％B经0至11分钟，17％B至100％B经1分钟，随后在100％B下保持1分钟；流速：25mL/min。分析型LCMS条件：Agilent 1200 HPLC/MS，柱：Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm；流动相A：水+20mM NH₄OAc；流动相B：ACN；温度：50℃；梯度：5％B至100％B经15分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(260nm)]，得到最终实施例6-2(45mg)。LCMS,[M+H]+＝715.0；¹HNMR(700MHz,D₂O)δ8.21(s,1H),8.18(s,1H),8.16(s,1H),7.54(d,J＝2.54Hz,1H),6.98(d,J＝2.54Hz,1H),6.23(d,J＝7.78Hz,1H),5.63(m,1H),5.61(m,1H),4.80(m,1H),4.75(m,1H),4.32(m,2H),4.26(t,J＝7.41,7.41Hz,2H),4.06(dt,J＝10.28,3.98,3.98Hz,1H),3.88(dt,J＝10.21,4.99,4.99Hz,1H),3.01(m,1H),2.64(dt,J＝11.33,8.55,8.55Hz,1H),2.50(m,1H),2.31(m,1H)。

实施例7

3-[(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二羟基-12-氧代-3-亚硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-17-基]-3H,5H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-9-酮

经由制备型LC/MS进一步纯化上文的粗产物实施例7(17mg)[制备型LC/MS条件：柱：Agilent infinitylab Eclipse Plus C18柱5μm，21.2×250mm；流动相A：水+100mMNH₄OAc；流动相B：ACN；梯度：0％B至13.5％B经0至13分钟，13.5％％B至100％B经1分钟，随后在100％B下保持1分钟；流速：25mL/min。分析型LCMS条件：Agilent 1200HPLC/MS，柱：Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm；流动相A：水+20mM NH₄OAc；流动相B：ACN；温度：50℃；梯度：5％B至100％B经15分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(265nm)]，得到实施例7(3.4mg)，LCMS,[M+H]+＝699.0；¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.48(s,1H),8.21(s,1H),8.07(s,1H),7.62(d,J＝2.6Hz,1H),7.22(d,J＝2.6Hz,1H),6.12(d,J＝8.0Hz,1H),6.08-5.94(m,1H),5.70-5.40(m,1H),4.82-4.75(m,1H),4.61-4.44(m,2H),4.33-4.25(m,1H),4.16(ddd,J＝10.5,6.7,3.3Hz,1H),4.09-3.95(m,3H),3.70-3.64(m,1H),3.57-3.51(m,1H),3.50-3.44(m,1H),3.26-3.18(m,1H)。

实施例8-1、8-2、8-3和8-4

(1S,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.2.1.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

/>

非对映异构体1(8-1)

非对映异构体2(8-2)

非对映异构体3(8-3)非对映异构体4(8-4)

中间体8A的制备：

向苯甲酸((2R,3R,4S,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-(苯甲酰氧基)-3-氟四氢呋喃-2-基)甲酯[Carbohydrate Research 278,(1995),71-89](2.0g，3.44mmol)于MeOH(4mL)中的溶液中添加氨(7M于MeOH中)(3.72mL，172mmol)。在50℃加热反应混合物16小时，且随后将其冷却至室温并减压浓缩。用Et₂O湿磨所得残余物，通过过滤收集固体并干燥，得到中间体8A(0.8g，86％产率)HPLC：保留时间＝0.39分钟(H₂O/ACN+0.05％TFA，WatersAcquity HPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝270[M+H]⁺。

中间体8B的制备：

将中间体8A(3.5g，13.0mmol)溶解于NaOAc/AcOH缓冲液(pH＝4.5)(100ml)中并添加含50％2-氯乙醛(30mL)的水，且在35℃搅拌混合物过夜。浓缩所得混合物，且将残余物装载至硅藻土上并通过硅胶柱色谱(80g柱，MeOH/DCM＝5-20％)纯化，得到中间体8B(3.21g，84％)。HPLC：保留时间＝0.40分钟(H₂O/ACN+0.05％TFA，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝294[M+H]⁺。

中间体8C的制备：

使中间体8B(3.2g，11.0mmol)与吡啶共沸两次，且将所得残余物溶解于吡啶(100mL)中。向该溶液中添加催化量的DMAP和4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(4.1g，12.0mmol)。在室温搅拌混合物过夜，且随后添加MeOH(5mL)并继续搅拌30分钟。随后将反应混合物浓缩至干燥。将残余物溶解于DCM中，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，且浓缩有机层。通过硅胶柱色谱纯化残余物(80g柱，用以下条件洗脱：0-100％的EtOAc/DCM 25分钟，随后0-10％的MeOH/DCM 25分钟)，得到中间体8C(5.17g，79％产率)。HPLC：保留时间＝0.85分钟(H₂O/ACN+0.05％TFA，Waters Acquity HPLCBEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝596[M+H]⁺。

中间体8D的制备：

向中间体8C(2.0g，3.36mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加含1.0M 1H-咪唑-4,5-二甲腈(2.35mL，2.35mmol)的ACN，接着添加3-((双(二异丙基氨基)磷烷基)氧基)丙腈(1.62g，5.37mmol)，且在室温搅拌反应混合物过夜。反应混合物随后用DCM稀释，用饱和NaHCO₃洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且浓缩。通过硅胶柱色谱(柱用含1％Et₃N的DCM预处理)(40g，EtOAc/己烷＝0-100％)纯化残余物，得到中间体8D(2.13g，80％产率)。HPLC：保留时间＝1.16和1.22分钟(H₂O/ACN+10mM NH₄OAc，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝796[M+H]+。

中间体8E的制备：

使中间体2H(250mg，0.489mmol)和1H-四唑(171mg，2.45mmol)于MeCN(10mL)中的溶液共沸三次，最终共沸物剩下约6mL CH₃CN。通过添加活性(180mg)分子筛干燥溶液，且在N₂氛围下搅拌。在另一烧瓶中，使中间体8D(580mg，0.73mmol)与MeCN共沸三次，最终共沸物剩下约6mL CH₃CN。随后添加活性/>(180mg)分子筛。随后通过套管将该溶液转移至中间体2H的溶液中，且用无水MeCN(2×2mL)冲洗烧瓶。在室温搅拌反应物3小时，且随后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(201mg，0.978mmol)并继续搅拌30分钟。随后将反应混合物搁置过夜。随后过滤所得混合物且浓缩滤液。将残余物溶解于DCM中，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤并浓缩。随后通过快速硅胶色谱(12g，MeOH/DCM＝0-10％)纯化残余物，得到中间体8E。HPLC：保留时间＝1.08和1.10分钟(H₂O/ACN+0.05％TFA，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝1037[M+H]⁺。

中间体8F的制备：

向中间体8E(770mg，0.62mmol)于DCM(6mL)中的溶液中添加MeOH(0.25mL，6.2mmol)和2,2-二氯乙酸(0.77mL，9.3mmol)，且在室温搅拌混合物1.5小时。反应物随后用吡啶(3mL)处理，浓缩且与甲苯共沸两次。将所得残余物装载至硅藻土上，且在反相C18柱(C18 100g GOLD，H₂O/ACN＝0-95％+0.01M NH₄OAc)上纯化，得到8F(170mg，39％产率)。HPLC：保留时间＝0.62分钟(H₂O/ACN+0.05％TFA，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1×50mm，1.7μm颗粒，梯度＝2分钟，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝693.4[M+H]⁺。

实施例8-1、8-2、8-3和8-4

使中间体8F(170mg，0.25mmol)与吡啶(15mL)共沸，随后将其溶解于吡啶(50mL)中且浓缩至约30mL的体积。将溶液冷却至0℃，且经1.5小时的时间，极缓慢地添加膦酸二苯酯(0.093mL，0.49mmol)于吡啶(2mL)中的溶液。在添加完成之后搅拌混合物1小时，且随后一次添加全量(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(150mg，0.74mmol)并在室温搅拌混合物过夜。随后用水(0.2mL)淬灭反应混合物，且浓缩至干燥。将残余物溶解于DCM/MeOH中，干燥装载至硅藻土上，且在C18反相柱上纯化(50G ISCO Gold，H₂O/ACN＝0-70％+0.01M NH₄OAc经20分钟)，得到环化中间体。该中间体随后用氢氧化铵(6mL)处理，且在20mL密封小瓶中在40℃加热2小时，随后浓缩。粗物质经由制备型LC/MS用以下条件纯化：柱：Agilent infinitylab Eclipse Plus C18柱21.2×250mm，5μm颗粒；流动相A：水+100mM乙酸铵；流动相B：MeOH；梯度：16-32％B经20分钟，32％-95％B经0.5分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：20mL/min。将含有期望产物的级分浓缩，得到四种期望异构体。

实施例8-1HPLC：保留时间＝5.93分钟(Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm，3.5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：甲醇。梯度：0％B至50％B经15分钟，随后50％B至95％B经2分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(260nm))MS(ES)：m/z＝699[M+H]⁺。

实施例8-2.HPLC：保留时间＝6.18分钟(Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm，3.5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：甲醇。梯度：0％B至50％B经15分钟，随后50％B至95％B经2分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(260nm))MS(ES)：m/z＝699[M+H]⁺。

实施例8-3HPLC：保留时间＝6.81分钟(Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm，3.5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：甲醇。梯度：0％B至50％B经15分钟，随后50％B至95％B经2分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(260nm))MS(ES)：m/z＝699[M+H]⁺。

实施例8-4.HPLC：保留时间＝7.88分钟(Agilent Eclipse Plus C18柱3.5μm，3×150mm，3.5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：甲醇。梯度：0％B至50％B经15分钟，随后50％B至95％B经2分钟；流速：0.5mL/min；检测：MS和UV(260nm))MS(ES)：m/z＝699[M+H]⁺。

实施例9

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

非对映异构体1

9(非对映异构体1)

中间体9A的制备：

在0℃向中间体1G(4.5g，10.8mmol)和三乙胺(4.53mL，32.5mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加甲磺酰氯(1.09mL，14.1mmol)。搅拌混合物2小时。反应混合物随后用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，接着经无水硫酸钠干燥。随后过滤并浓缩。在ISCO系统(0-100％的EtOAc/己烷，40g柱，30分钟)上纯化粗物质，得到中间体9A(5.42g，10.96mmol，100％产率)。¹HNMR(499MHz,氯仿-d)δ7.42-7.48(m,6H),7.25-7.35(m,9H),5.21(dt,J＝5.30,7.00Hz,1H),4.09-4.12(m,2H),3.41(dd,J＝6.97,9.60Hz,1H),3.32(dd,J＝6.85,9.60Hz,1H),2.85(s,3H),2.71-2.79(m,1H),2.58(td,J＝5.96,10.01Hz,1H),2.41-2.50(m,1H),2.25-2.32(m,1H),2.06-2.07(m,3H)。¹³C NMR(126MHz,氯仿-d)δ171.0,143.9,128.7,127.9,127.1,86.9,74.3,66.2,61.2,43.4,38.1,32.5,31.3,20.9。

中间体9B和9C的制备：

向9A(5.36g，10.8mmol)于丙酮(43mL)中的溶液中添加碘化钠(6.50g，43.0mmol)，且在氩气氛围下将所得混合物加热至回流后保持一周。随后用Et₂O(12mL)稀释反应混合物，且过滤所得固体并浓缩滤液。在ISCO系统(12g柱，0-60％的EtOAc/己烷，在20mL/min下30分钟)上纯化粗物质，得到中间体9B(3.27g，6.21mmol，57％产率)(LCMS,[M+H]⁺＝549.08)和9C(1g，3.52mmol，32.5％产率)。

中间体9D的制备：

向中间体9B(3.4g，6.46mmol)于DCM(30mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(10.32mL，64.6mmol)，且随后添加2,2-二氯乙酸(3.16mL，38.8mmol)。搅拌混合物2小时，且随后移除溶剂。将残余物溶解于MeOH中并过滤。在ISCO系统(80g，0-100％的EtOAc/己烷，40分钟)上纯化粗产物，得到9D(1.28g，4.51mmol，70％产率)。

中间体9E的制备

向中间体9D(1190mg，4.18mmol)于吡啶(1.7mL)中的溶液中添加咪唑(854mg，12.6mmol)，且随后添加TBDPS-Cl(2.3g，8.4mmol)。在室温搅拌混合物2小时。移除吡啶，且随后用DCM(20mL)处理残余物并过滤。将滤液浓缩至干燥，且随后在ISCO系统(24g，0-50％的EtOAc/己烷，30分钟)上纯化，得到9E(2.17g，4.15mmol，99％产率)。¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ7.65-7.71(m,4H),7.40-7.48(m,6H),7.28(s,1H),4.37-4.43(m,1H),4.06(d,J＝5.13Hz,2H),3.68(dd,J＝3.16,11.15Hz,1H),3.55(dd,J＝3.22,11.21Hz,1H),2.66-2.75(m,3H),2.28(br dd,J＝2.15,9.42Hz,1H),2.03-2.04(m,3H),1.29(br s,1H),1.07-1.13(m,9H)。

中间体9F的制备：

将4-溴吡啶甲酸甲酯(1.22g，5.63mmol)、中间体9E(2.10g，4.02mmol)、三(三甲基硅烷基)硅烷(1.86mL，6.03mmol)、Ir(dF(CF₃)ppy)₂(dtbbpy)PF₆(0.090g，0.080mmol)和Na₂CO₃(1.278g，12.06mmol)放入具有搅拌棒的特氟龙(teflon)螺帽小瓶中。添加DME(35mL)，且将悬浮液用氮气脱气5分钟。向另一小瓶中添加氯化镍(II)乙二醇二甲醚络合物(0.088g，0.40mmol)和4,4'-二叔丁基-2,2'联吡啶(0.13g，0.48mmol)，将该小瓶抽真空且用氮气回填，接着添加10mL DME。随后将该溶液用氮气脱气10分钟。将所得溶液添加至第一小瓶中，且随后再用氮气脱气10分钟。将所得悬浮液放置在距34W蓝光LED大约8cm处，LED直接照射在小瓶侧面。随后搅拌反应物15小时。随后过滤反应混合物，且将其倾入至乙酸乙酯和水(100mL)以及DCM(100mL)的混合物中。用DCM萃取水层2次，且随后合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。在ISCO系统(40g柱，0-100％的EtOAc/己烷，30分钟)上纯化粗产物，得到中间体9F(1.53g，2.88mmol，71.6％产率)。m/z532.5(M+H)。

中间体9G的制备：

向中间体9F(1530mg，2.88mmol)中添加三氢氟化三乙胺(3000μl，18.42mmol)，且在37℃、氮气氛围下搅拌混合物2小时。反应混合物随后用CH₃CN(6mL)稀释，且用Et₃N(3850μl，27.6mmol)淬灭，且随后用异丙氧基三甲基硅烷(9810μl，55.2mmol)淬灭。在室温搅拌混合物10分钟，且随后真空浓缩。通过柱色谱使用40g ISCO柱纯化残余物，用0-60％的乙酸乙酯/己烷(20分钟)且随后用10％的MeOH/DCM(10分钟)洗脱，得到中间体9G(700mg，2.39mmol，83％产率)。¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ8.66(d,J＝5.01Hz,1H),8.04(s,1H),7.37(dd,J＝1.73,4.95Hz,1H),7.28(s,1H),4.21(dd,J＝4.71,11.27Hz,1H),4.10(dd,J＝6.02,11.38Hz,1H),4.03(s,3H),3.73-3.83(m,2H),3.27-3.37(m,1H),2.43-2.57(m,3H),2.11(s,3H),1.93(dd,J＝1.49,9.95Hz,1H),1.72(t,J＝5.07Hz,1H)。m/z 294.3(M+H)。

中间体9H的制备：

经由注射器向N-(9-((2R,3R,4R,5R)-5-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-氟-4-羟基四氢呋喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(Astatech，500mg，0.740mmol)和咪唑(151mg，2.20mmol)于DMF(3.7mL)中的冷却(0℃)溶液中逐滴添加叔丁基二苯基氯硅烷(285μl，1.11mmol)。随后移除冰水浴，且在室温、氮气氛围下搅拌反应物。22小时后，向反应物中添加第二部分的咪唑(50.4mg，0.740mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(95μl，0.370mmol)。另外3小时后，向反应物中添加第三部分的咪唑(50.4mg，0.740mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(95μl，0.370mmol)，且搅拌混合物24小时。反应物随后用甲醇(748μL，18.50mmol)淬灭，在室温搅拌30分钟，且随后真空浓缩。在氮气流下移除剩余的挥发物。将残余物分配于EtOAc(20mL)与水(20mL)之间，且分离各层。用EtOAc(1×20mL)萃取水相，且合并的有机层用水(4×10mL)、盐水(10mL)洗涤，并干燥(Na₂SO₄)、过滤且减压浓缩。粗中间体9H不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS,[M+H]⁺＝914。

中间体9I的制备

经由注射器向中间体9H(680mg，0.74mmol)和三乙基硅烷(295μL，1.85mmol)于CH₂Cl₂(3.7mL)中的溶液中逐滴添加三氟乙酸(114μL，1.480mmol)，产生淡红色颜色。在室温、氮气氛围下搅拌反应物。1.5小时后，用MeOH(4mL)处理反应物并搅拌10分钟。随后减压浓缩混合物，且与MeOH(4mL)共沸两次。将粗产物溶解于少量CH₂Cl₂中，吸附至SiO₂塞上，且通过快速色谱纯化(SiO₂，40g柱，0-50％丙酮/己烷，14.4分钟梯度，随后保持14.4分钟，40mL/min)，得到呈白色固体状的中间体9I(384mg，85％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝612。¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.71(s,1H),8.15(s,1H),8.05-7.99(m,2H),7.74-7.66(m,4H),7.65-7.59(m,1H),7.56-7.51(m,2H),7.50-7.37(m,6H),6.27(dd,J＝11.3,6.8Hz,1H),5.62(ddd,J＝51.8,6.7,4.8Hz,1H),4.70-4.62(m,1H),4.13(br s,1H),3.68(d,J＝13.1Hz,1H),3.10(dd,J＝13.1,1.6Hz,1H),1.17(s,9H)。

中间体9J的制备：

将中间体9I(1.0g，1.64mmol)和试剂3(1.1g，2.45mmol)于MeCN(15mL)中的混合物冷却至0℃的内部温度。一次添加全量DBU(0.4mL，2.45mmol)，且在0℃搅拌混合物30分钟。在0℃向反应混合物中添加乙酸(281μL，4.90mmol)，且随后添加硅胶并浓缩混合物。通过ISCO硅胶色谱(80g，0-10％梯度的MeOH/DCM)纯化粗产物。将含有期望产物的级分浓缩至白色泡沫状，将其与庚烷(3×50mL)共蒸发，得到呈白色固体状的中间体9J(1.22g，87％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝858.8：¹H NMR(499MHz,氯仿-d)δ8.95(s,1H),8.69(s,1H),8.07(s,1H),7.99-8.04(m,2H),7.69-7.74(m,4H),7.61-7.66(m,1H),7.38-7.57(m,9H),7.28(s,2H),6.32(d,J＝2.03Hz,1H),6.28-6.38(m,1H),4.95(dd,J＝2.09,4.23Hz,1H),4.85(dd,J＝2.15,4.29Hz,1H),4.81-4.98(m,1H),4.62-4.71(m,2H),4.58-4.61(m,1H),4.43(br s,1H),4.25-4.37(m,2H),4.15(ddd,J＝4.23,9.33,11.59Hz,1H),2.51(br s,1H),2.20-2.26(m,1H),1.99-2.06(m,5H),1.81-1.91(m,3H),1.65-1.75(m,5H),1.23-1.32(m,1H),1.16(s,9H)。

中间体9K的制备：

向中间体9G(200mg，0.682mmol)和中间体9J(1170mg，1.364mmol)于乙腈(14mL)中的溶液中逐滴添加DBU(308μl，2.05mmol)，得到浅黄色溶液。10分钟后，反应混合物用DCM(5mL)稀释且用乙酸(195μL，3.40mmol)处理。将所得混合物与硅胶共蒸发，且随后在40g硅胶上通过快速色谱纯化，用0-15％的MeOH/DCM洗脱，得到呈白色固体状的中间体9K(595mg，81％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝983.08。³¹P NMR(162MHz,氯仿-d)δ57.9(s,1P)。

中间体9L的制备：

向中间体9K(600mg，0.61mmol)中添加含氨的MeOH(8mL，56.0mmol，7N)。将混合物加热至53℃后保持14小时。移除NH₃/MeOH，且随后添加三氢氟化三乙胺(2.5mL，15.4mmol)，并且将混合物加热至37℃后保持5小时。反应混合物用CH₃CN(4mL)稀释，且用Et₃N(1927μl，13.83mmol)和异丙氧基三甲基硅烷(4910μl，27.7mmol)处理。在室温搅拌混合物10分钟，且随后减压浓缩。将粗产物溶解于少量MeOH中，吸附至硅藻土塞上，且随后在ISCO系统上纯化(SiO₂，50g RediSep Rf Gold柱，0-35％水/乙腈+10mM乙酸铵5分钟梯度，(0％)0-35％30分钟，30mL/min)，得到9L(284mg，0.49mmol，80％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝584.5。

实施例9

9(非对映异构体1)

向9L(183mg，0.314mmol)于吡啶(30mL)中的无水溶液中添加DBU(710μl，4.70mmol)。搅拌混合物10分钟，且随后经30分钟逐滴添加含试剂4(210mg，0.470mmol)的2mL MeCN。随后再搅拌混合物30分钟。移除吡啶，且用冷醚洗涤残余物。随后通过制备型HPLC色谱纯化粗产物(仪器：Waters Autopure；柱：Xselect RP制备型C18 OBD柱，5μm，10×250mm；流动速率：25.0mL/min；流动相：A：0.1％FA/水；B：0.1％FA/ACN(％A＝100-％B)：梯度5-35％B经10分钟，35-100％B经1分钟)，得到实施例9(48mg，0.069mmol，21.98％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝662.08。¹H NMR(499MHz,氧化氘)δ8.59(d,J＝5.60Hz,1H),8.49(s,1H),8.34(s,1H),8.18(s,1H),7.84(d,J＝5.64Hz,1H),6.44-6.52(m,1H),5.53-5.66(m,1H),5.06-5.16(m,1H),4.35-4.50(m,2H),4.08-4.22(m,2H),3.87-4.04(m,3H),3.48(q,J＝9.18Hz,1H),2.66-2.73(m,1H),2.56-2.64(m,1H),2.41-2.49(m,1H),1.99-2.09(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,氧化氘)δ55.25(s,1P),55.12(s,1P),55.10(s,1P),55.07(s,1P)。

实施例10

非对映异构体2

10(非对映异构体2)

根据类似于上文实施例9中所概述的操作，在最终步骤中使用试剂3，由9L制备实施例10。LCMS,[M+H]⁺＝662.3。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.61-8.66(m,1H),8.46-8.54(m,1H),8.21(s,1H),,7.99-8.05(m,1H),7.46-7.55(m,1H),6.30-6.42(m,1H),5.48-5.66(m,1H),5.18-5.30(m,1H),4.50-4.59(m,1H),4.39-4.48(m,1H),4.23-4.32(m,2H),3.92-4.10(m,2H),3.52-3.63(m,2H),2.55-2.72(m,2H),2.35-2.53(m,2H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ58.0(s,1P),56.0(s,1P)。

实施例11

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18S)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

11(非对映异构体1)

根据类似于实施例9中所概述的操作，以中间体9G和N-(9-((2R,3S,4R,5R)-5-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-氟-4-羟基四氢呋喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(CAS 226415-08-3，BLDPHARM)为起始物质，针对第一偶联步骤使用试剂3且针对环化步骤使用试剂4，制备上方所展示的实施例11。LCMS,[M+H]⁺＝662.1。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.56(d,J＝4.9Hz,1H),8.43(d,J＝2.6Hz,1H),8.33(s,1H),8.08-8.03(m,1H),7.71(dd,J＝5.0,1.2Hz,1H),6.70-6.55(m,1H),5.70-5.69(m,1H),5.58-5.40(m,1H),5.25-5.05(m,1H),4.50-4.35(m,2H),4.21-4.09(m,3H),4.06-3.95(m,2H),3.37-3.35(m,1H),3.31-3.29(m,1H),2.94-2.85(m,1H),2.62-2.53(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ59.2(s,1P),56.3(s,1P)。¹⁹F NMR(470MHz,甲醇-d₄)δ-197.97(s,1F)。

实施例12

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,12-二羟基-3,12-二氧代-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

中间体12A的制备：

向中间体9I(725mg，1.19mmol)于DCM(12mL)中的溶液中添加1H-咪唑-4,5-二甲腈(0.95mL，0.95mmol，1M)于ACN中的溶液。随后，向反应混合物中逐滴添加3-((双(二异丙基氨基)磷烷基)氧基)丙腈(714mg，2.37mmol)于DCM(1mL)中的溶液。在室温搅拌反应混合物3小时，且随后用MeOH(2mL)淬灭。混合物随后用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释且用DCM(50mL)稀释。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，装填至40gISCO硅胶柱上，且使用Teledyne ISCO系统纯化(经10分钟洗脱，0-50％梯度；溶剂A：DCM+0.25％TEA；溶剂B：EtOAc)，得到呈非对映异构体混合物形式的中间体12A(820mg，1.02mmol，85％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝813.8。

中间体12B的制备：

将中间体9G(200mg，0.68mmol)和1H-四唑(143mg，2.05mmol)于无水ACN(6mL)中的混合物浓缩至干燥(重复两次)。将中间体12A(690mg，0.85mmol)溶解于ACN(5mL)中，且浓缩至干燥(重复两次)。随后，向中间体12A中添加分子筛(0.5g)和乙腈(5mL)，且随后将该溶液添加至含中间体9G的无水ACN(6mL)。在室温搅拌反应混合物90分钟，且随后添加过氧化2-丁酮(0.55mL，2.7mmol)。在室温搅拌反应物2小时。随后经由硅藻土过滤反应物且减压浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，装填至40gISCO硅胶柱上，且使用Teledyne ISCO系统纯化(经35分钟洗脱，0-10％梯度；溶剂A：DCM；溶剂B：EtOAc)，得到中间体12B(612mg，0.6mmol，88％产率)，m/z 1020.8(M+H)。

中间体12C和12D的制备：

向中间体12B(0.610g，0.60mmol)于无水MeOH(12mL)中的溶液中添加碳酸钾(0.250g，1.8mmol)。在0℃、氮气氛围下搅拌所得混合物过夜。随后用乙酸(0.14mL，2.4mmol)将反应混合物中和至pH＝7，且随后蒸发溶剂。向粗物质中添加三氢氟化三乙胺(3mL，18mmol)，且在37℃、氮气氛围下搅拌混合物4小时。反应混合物随后用ACN(4mL)稀释，且用三乙胺(7.70mL，55.3mmol)和异丙氧基三甲基硅烷(4.79mL，27.0mmol)处理。将混合物在室温搅拌10分钟，且随后真空浓缩。将粗产物溶解于少量MeOH中，吸附至硅藻土塞上，通过亲水相互作用液相色谱纯化(SiO₂，50g RediSep Rf Gold柱，0-35％水/乙腈+10mM乙酸铵5分钟梯度，(0％)0-35％30分钟，30mL/mim)，得到两种产物：中间体12C(250mg，30.3％产率)(m/z 687.6(M+H))和中间体12D(175mg，25％产率)(m/z 583.6(M+H))。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.72(br s,2H),8.57(d,J＝5.01Hz,1H),8.45(d,J＝4.77Hz,1H),8.09(br d,J＝6.91Hz,2H),7.97(s,1H),7.63-7.71(m,1H),7.50-7.63(m,3H),6.45(br d,J＝16.09Hz,1H),5.52(br s,1H),5.37-5.57(m,1H),5.41(br s,1H),4.57-4.78(m,1H),4.19-4.32(m,2H),4.10-4.19(m,1H),3.93(s,3H),3.69(d,J＝5.60Hz,1H),3.46-3.63(m,2H),3.34-3.39(m,1H),3.19-3.32(m,1H),2.31-2.53(m,3H),2.04(s,1H),1.83-2.00(m,3H)。

中间体12E的制备：

经20分钟向中间体12C(200mg，0.29mmol)于吡啶(26mL)中的室温溶液中逐滴添加膦酸二苯酯(0.11mL，0.38mmol)于DCM(1mL)中的溶液。向该反应混合物中添加含碘溶液的THF/H₂O(305mg，0.04M)，且在室温搅拌混合物20分钟。随后减压浓缩反应混合物。在反相ISCO Gold 50g C18柱上纯化所得残余物(流动相A：5:95的乙腈:水+0.01M乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+0.01M乙酸铵；梯度：0％7分钟，0-40％B梯度经23分钟)，得到呈白色固体状的中间体12E(70mg，0.094mmol，32％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝749.5。

实施例12

用氨(5mL，35.0mmol，7N)处理中间体12E(70mg，0.094mmol)，且在55℃搅拌反应混合物1.5小时。随后浓缩反应混合物，且通过制备型HPLC纯化粗产物(色谱条件：仪器：Waters Autopure；柱：Luna Omega Polar C18柱，5μm，21.2×250mm；流动速率：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH：6.5)/H₂O；B：MeOH(％A＝100-％B)：梯度0-31％B经10.5分钟，31-95％B经0.5分钟，95％B保持1分钟且95-0％B保持0.5分钟)，得到实施例12(32mg，0.05mmol，49％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝630.5。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.59(s,1H),8.51(d,J＝5.01Hz,1H),8.20(s,1H),7.99(s,1H),7.52(br d,J＝4.77Hz,1H),6.37(d,J＝16.09Hz,1H),5.51(d,J＝3.93Hz,1H),5.41(d,J＝3.93Hz,1H),5.37-5.55(m,1H),4.92-5.03(m,1H),4.49(br d,J＝11.92Hz,1H),4.39(br d,J＝8.46Hz,1H),4.19-4.31(m,1H),4.06-4.17(m,1H),3.87-4.01(m,2H),3.34-3.47(m,1H),2.62-2.75(m,2H),2.38(td,J＝8.23,10.25Hz,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ-0.12(s,1P),-0.78(s,1P)。

实施例13

4-[(1R,6S,8R,9S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-12-羟基-3,12-二氧代-3-硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

13(非对映异构体1)

向中间体12D(88mg，0.15mmol)于吡啶(15mL)中的无水溶液中添加DBU(342μl，2.27mmol)。搅拌混合物10分钟，且随后经30分钟逐滴添加含试剂4(110mg，0.24mmol)的2mLDCM。随后在室温再搅拌混合物30分钟。在减压下移除吡啶，且用冷醚洗涤残余物。随后将粗产物与4mL含7N NH₃的MeOH在55℃一起加热5小时。蒸发溶剂，且通过制备型HPLC纯化粗物质(色谱条件：仪器：Waters Autopure；柱：Zorbax Eclipse C18 plus柱，5μm，21.2×250mm；流动速率：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH：6.5)；B：ACN(％A＝100-％B)：梯度5-40％B经14分钟，40-95％B经0.5分钟)，得到实施例13(47mg，43％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝646.45。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.62(s,1H),8.51(d,J＝5.01Hz,1H),8.21(s,1H),7.97(s,1H),7.53(br d,J＝4.89Hz,1H),6.35-6.41(m,1H),5.37-5.53(m,1H),5.05-5.16(m,1H),4.40-4.49(m,2H),4.14-4.32(m,3H),3.91-4.07(m,2H),3.34-3.50(m,1H),2.69(brs,2H),2.32-2.43(m,1H),1.94-1.98(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ56.95(s,1P),-0.02(s,1P)。

实施例14

14(非对映异构体2)

根据类似于上文实施例13中所概述的操作，针对环化步骤使用试剂3，由中间体12D制备上方所展示的实施例14。LCMS,[M+H]⁺＝646.45。¹HNMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.64(s,1H),8.52(d,J＝5.01Hz,1H),8.23(s,1H),8.00(s,1H),7.52(d,J＝5.02Hz,1H),6.34-6.43(m,1H),5.42-5.59(m,1H),5.25-5.37(m,1H),4.39-4.49(m,1H),4.25-4.37(m,2H),4.05-4.14(m,1H),3.98-4.04(m,1H),3.92(td,J＝3.67,11.03Hz,1H),3.39-3.49(m,1H),3.34-3.38(m,1H),2.67-2.80(m,1H),2.53-2.67(m,1H),2.37(td,J＝8.11,10.01Hz,1H),1.72-1.89(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ58.36(s,1P),-0.09(s,1P)。

实施例15-1和15-2

4-[(1S,7S,8R,10S,16R,17R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4,13-二氧代-4,13-二硫烷基-3,5,12,14-四氧杂-4λ⁵,13λ⁵-二磷杂三环[14.2.0.0^7,10]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

非对映异构体1(15-1)

非对映异构体2(15-2)

中间体15A的制备：

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将中间体2M(250mg，0.51mmol)和试剂3(295mg，0.661mmol)于THF(5mL)中的悬浮液冷却至0℃的内部温度。逐滴添加DBU(0.1mL，0.66mmol)，且在0℃搅拌混合物10分钟。在0℃向反应混合物中添加乙酸(116μL，2.0mmol)，且随后添加硅胶并浓缩混合物。通过ISCO硅胶色谱(24g，0-10％梯度的MeOH/DCM)纯化粗产物。将含有期望产物的级分浓缩至白色泡沫，将其与庚烷(3×50mL)共蒸发，得到15A(320mg，85％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝738.6。

中间体15B的制备：

向中间体9G(103mg，0.351mmol)和中间体15A(402mg，0.544mmol)于乙腈(7mL)中的溶液中逐滴添加DBU(159μl，1.05mmol)，得到浅黄色溶液。10分钟后，反应混合物用DCM(4mL)稀释且用乙酸(100μL，1.76mmol)处理。将所得混合物与硅胶共蒸发，且随后在24g硅胶上通过快速色谱纯化，用0-15％的MeOH/DCM洗脱，得到呈白色固体状的中间体15B(300mg，99％产率)。

中间体15C的制备：

向中间体15B(302mg，0.35mmol)中添加含氨的MeOH(5mL，35.0mmol，7N)。将混合物加热至55℃并持续3小时且随后在室温搅拌14小时。在氮气流下移除NH₃/MeOH。向残余物中添加DCM(5mL)和三乙基硅烷(0.56ml，3.5mmol)，且随后添加2,2-二氯乙酸(0.20mL，2.45mmol)。搅拌反应混合物2小时且随后减压浓缩。将粗产物溶解于少量MeOH中，吸附至硅藻土塞上，通过亲水作用液相色谱纯化(SiO₂，50g RediSep Rf Gold柱，0-40％水/乙腈+10mM乙酸铵5分钟梯度，(0％)0-35％30分钟，30mL/min)，得到中间体15C(72mg，0.13mmol，36％产率)。LCMS,[M+H]⁺＝564.5。¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.48(d,J＝5.40Hz,1H),8.39(s,1H),8.20(s,1H),8.05(s,1H),7.54(d,J＝4.65Hz,1H),4.70-4.77(m,1H),4.00-4.13(m,4H),3.67-3.76(m,2H),3.55-3.65(m,3H),3.39-3.48(m,1H),2.91-3.03(m,1H),2.51-2.63(m,2H),2.34-2.50(m,4H),1.71-1.84(m,1H)。

实施例15-1和15-2

非对映异构体1(15-1)

非对映异构体2(15-2)

向中间体15C(68mg，0.12mmol)于吡啶(12mL)中的无水溶液中添加DBU(270μl，1.8mmol)。搅拌混合物10分钟，且随后经30分钟逐滴添加含试剂4(210mg，0.47mmol)的2mLMeCN。随后在室温再搅拌混合物30分钟。移除吡啶，且用冷醚洗涤残余物。通过制备型HPLC纯化粗产物(色谱条件：仪器：Waters Autopure；柱：Zorbax Eclipse C18 plus柱，5μm，21.2×250mm；流动速率：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH：6.5)；B：ACN(％A＝100-％B)：梯度5-50％B经20分钟，50-95％B经1分钟，95％B保持1分钟)，得到实施例15-1(14mg，0.02mmol，17％产率)和实施例15-2(26mg，0.04mmol，30％产率)。

实施例15-1：t_R：7.53分钟；M+1obs＝642.5(Agilent 1290HPLC/MS；柱：EclipseC18 plus 1.8μm 2.1×150mm柱；流动速率：0.3mL/min；流动相：A：20mM NH₄OAc(pH 6.5)；B：MeOH(％A＝100-％B)；梯度：5-100％B经15分钟)；¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.49(d,J＝5.01Hz,1H),8.40(s,1H),8.17(s,1H),8.00(s,1H),7.55-7.65(m,1H),4.79-4.84(m,1H),4.22(ddd,J＝3.93,6.59,10.46Hz,1H),3.96-4.18(m,7H),3.35-3.26(m,2H),2.45-2.69(m,6H),1.86-1.98(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ56.94(s,2P)。

实施例15-2：t_R：7.98分钟；M+1obs＝642.5；(Agilent 1290HPLC/MS；柱：EclipseC18 plus 1.8μm 2.1×150mm柱；流动速率：0.3mL/min；流动相：A：20mM NH₄OAc(pH 6.5)；B：MeOH(％A＝100-％B)；梯度：5-100％B经15分钟)；¹H NMR(499MHz,甲醇-d₄)δ8.47(d,J＝5.01Hz,1H),8.40(d,J＝4.41Hz,1H),8.17(s,1H),7.99(br s,1H),7.60(br s,1H),4.76-4.82(m,1H),4.15-4.25(m,3H),3.98-4.15(m,4H),3.87(td,J＝5.53,10.76Hz,1H),3.34-3.42(m,1H),3.26-3.31(m,1H),2.74-2.81(m,1H),2.52-2.69(m,2H),2.40-2.52(m,3H),2.00-2.06(m,1H)。³¹P NMR(202MHz,甲醇-d₄)δ57.11(s,2P)。

根据类似于上文所描述实施例中所概述的操作，使用描述为制备或描述为来自市售源的适当核苷单体来制备下表2中所展示的以下实施例。

表2

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实施例21-1和21-2

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{5-氧代-5H,8H,9H-[1,2,4]三唑并[4,3-a]嘌呤-8-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ5,12λ5-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(21-1)

非对映异构体2(21-2)

中间体21A的制备：

经由注射器向中间体1G(479mg，1.15mmol)、2,6-二氯-9H-嘌呤(326mg，1.73mmol)和2,6-二氯-9H-嘌呤(326mg，1.73mmol)于THF(11.5mL)中的溶液中添加DIAD(0.350mL，1.80mmol)。在50℃搅拌所得混合物。18小时后，使反应物冷却至室温且随后真空浓缩。将粗产物溶解于少量CH₂Cl₂中，吸附至SiO₂塞上，且通过快速色谱纯化两次(SiO₂，40g RediSepRf Gold柱，0％至100％的EtOAc/己烷，随后0％至20％的MeOH/DCM)，得到呈白色泡沫状的中间体21A(437mg，0.744mmol，65％产率)。¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.14(s,1H),7.34-7.27(m,9H),7.25-7.20(m,6H),4.77(表观q,J＝8.7Hz,1H),4.16(d,J＝4.8Hz,2H),3.34(dd,J＝10.1,4.4Hz,1H),3.26(dd,J＝10.1,6.4Hz,1H),2.96-2.87(m,1H),2.74-2.64(m,1H),2.48-2.38(m,2H),2.05(s,3H)。LCMS：保留时间＝1.16分钟。[M+H]⁺＝587。柱：WatersBEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在220nm的UV。

中间体21B的制备：

将中间体21A(437mg，0.744mmol)溶解于少量1,4-二噁烷中，且在搅拌下将其逐滴添加至1,4-二噁烷(3mL)和1.0M氢氧化钠水溶液(3.00mL，3mmol)的沸腾溶液中。30分钟后，将反应物冷却至室温，用水(10mL)稀释，随后用乙酸缓慢淬灭至pH约7。用EtOAc(3×10mL)萃取混合物，且合并的有机层经干燥(Na₂SO₄)、过滤且真空浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物，得到中间体21B(179mg，0.340mmol，46％产率)。LCMS：保留时间＝0.91分钟。[M+H]⁺＝527。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体21C的制备：

将中间体21B(179mg，0.340mmol)和水合肼(1mL，31.9mmol)于吡啶(1.5mL)中的混合物回流6小时，且蒸发至干燥。残余物用3％碳酸钾水溶液洗涤，且用DCM萃取。浓缩经合并的有机层，得到白色固体，其不经进一步纯化即用于下一步骤。将粗产物肼中间体(50mg，约0.096mmol)于原甲酸三乙酯(1mL)中的悬浮液在60℃搅拌4小时。使反应混合物冷却至室温，随后浓缩。将粗物质(含有两种区位异构产物)溶解于MeOH中，且通过反相HPLC纯化，得到中间体21C(主要区位异构物)(27mg，0.051mmol，两个步骤产率53％)。¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δ8.89(s,1H),8.50(s,1H),7.30-7.21(m,15H),4.76(表观q,J＝8.6Hz,1H),3.75-3.68(m,4H),2.98-2.88(m,1H),2.65-2.58(m,1H),2.44-2.36(m,1H),2.30-2.21(m,1H)。LCMS：保留时间＝0.85分钟。[M+H]⁺＝533。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体21D的制备：

向中间体21C(125mg，0.235mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加咪唑(80mg，1.17mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(0.181mL，0.704mmol)。在室温搅拌所得混合物16小时。将反应物用甲醇(0.4mL)淬灭，随后在室温搅拌30分钟。在氮气流下移除挥发物。将粗产物溶解于少量CH₂Cl₂中，吸附至SiO₂塞上，且通过快速色谱纯化(SiO₂，40g RediSep Rf Gold柱，0％MeOH/EtOAc至100％MeOH/EtOAc)，得到呈白色固体状的中间体21D(131mg，0.170mmol，72％产率)。LCMS：保留时间＝1.23分钟。[M+H]⁺＝771.7。柱：Waters BEH C182.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体21E的制备：

向中间体21D(107mg，0.139mmol)和三乙基硅烷(0.0746mL，0.467mmol)于CH₂Cl₂(1.4mL)中的溶液中逐滴添加三氟乙酸(0.021mL，0.278mmol)。在室温、氮气氛围下搅拌反应物2小时。用MeOH(0.6mL)稀释反应物并搅拌10分钟。随后真空浓缩混合物，且使其与MeOH(2×3mL)再共沸两次。将粗产物溶解于少量DCM中，吸附至硅石塞上，且通过快速色谱纯化(SiO₂，40g柱，0％MeOH/EtOAc至100％MeOH/EtOAc)，得到中间体21E(45mg，0.085mmol，61％产率)。LCMS：保留时间＝0.98分钟。[M+H]⁺＝529。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体21F的制备：

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经由注射器向于CH₃CN(3mL)中含有中间体21E和中间体9J(73.0mg，0.085mmol)(与CH₃CN一起共沸3次，且高真空干燥1小时)的溶液中逐滴添加DBU(0.0257mL，0.170mmol)。在室温、氮气氛围下搅拌所得混合物。18小时后，真空浓缩反应混合物。将粗产物溶解于少量DCM中，且通过快速色谱纯化(SiO₂，24g RediSep Rf Gold柱，0％至100％的MeOH/DCM)，得到呈白色固体状的中间体21F(77mg，0.063mmol，74％产率)。LCMS：保留时间＝1.23分钟。[M+H]⁺＝1218.5。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体21G的制备：

在室温搅拌中间体21F(77mg，0.063mmol)于纯三氢氟化三乙胺(0.50mL，3.07mmol)中的悬浮液。22小时后，反应混合物用CH₃CN(1mL)稀释，且用三乙胺(0.86mL，6.14mmol)(2当量，相对于Et₃N·3HF)和异丙氧基三甲基硅烷(1.6mL，9.21mmol)(3当量，相对于Et₃N·3HF)淬灭。在室温搅拌混合物30分钟，随后真空浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物(Sunfire C18，5微米，19×150mm，18-90％的乙腈/水+0.1％三氟乙酸，20mL/min，9分钟梯度，在254nm监测)，得到中间体21G(37mg，0.050mmol，79％产率)。LCMS：保留时间＝0.53分钟。[M+H]⁺＝742。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

实施例21-1的制备：

非对映异构体1(21-1)

经10分钟，经由注射器向中间体21G(19mg，0.026mmol)和DBU(0.058mL，0.384mmol)于DMF(3mL)中的溶液中逐滴添加试剂4(17.2mg，0.038mmol)于DMF(1mL)中的溶液。搅拌所得混合物2小时，随后将其用甲醇(3mL)和乙酸(0.044mL)淬灭。随后在氮气流下移除挥发物。通过反相HPLC纯化粗产物，得到环化产物(7.1mg，8.66μmol，33％产率)。LCMS：保留时间＝0.53分钟。[M+H]⁺＝820。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。将部分经保护的大环(7.1mg，8.66μmol)于MeOH(0.5mL)和浓NH₄OH(0.5mL)中的溶液在密封压力容器中在35℃加热过夜。在打开前将反应容器在冰水浴中冷却10分钟。将反应混合物转移至圆底烧瓶中且真空浓缩。经由制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质：柱：Waters Xselect RP制备型C18OBD柱，19mm×150mm，5μm颗粒；流动相A：100mM NH₄OAc/水(pH 6.5)；流动相B：MeOH；梯度：15-24％B经25分钟；流动速率：20mL/min。合并且干燥含有期望产物的级分，得到实施例21-1(2.9mg)。LCMS：保留时间＝15.7分钟。[M+H]⁺＝716。柱：Waters XSelect CSH C18 3.0×150mm 3.5μm颗粒；流动相A：20mM NH₄OAc/水(pH 6.5)+5％MeOH；流动相B：MeOH；梯度：0％B至50％B经15分钟，随后在第17分钟到达95％，且在95％B下保持3分钟；柱温度：45℃；流速：0.5mL/min；检测：在260nm的UV。

实施例21-2的制备：

非对映异构体2(21-2)

经10分钟，经由注射器向21G(19mg，0.026mmol)和DBU(0.058mL，0.384mmol)于DMF(3mL)中的溶液中逐滴添加试剂3(17.2mg，0.038mmol)于DMF(1mL)中的溶液。搅拌所得混合物2小时，随后将其用甲醇(3mL)和乙酸(0.044mL)淬灭。随后在氮气流下移除挥发物。通过反相HPLC纯化粗产物，得到环化产物(7.3mg，8.91μmol，35％产率)。LCMS：保留时间＝0.53分钟。[M+H]⁺＝820。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。将部分经保护的大环(7.3mg，8.91μmol)于MeOH(0.5mL)和浓NH₄OH(0.5mL)中的溶液在密封压力容器中在35℃加热过夜。在打开前将反应容器在冰水浴中冷却10分钟。将反应混合物转移至圆底烧瓶中且真空浓缩。经由制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质：柱：Waters Xselect RP制备型C18 OBD柱，19mm×150mm，5μm颗粒；流动相A：100mM NH₄OAc/水(pH 6.5)；流动相B：MeOH；梯度：15-24％B经25分钟；流动速率：20mL/min。合并且干燥含有期望产物的级分，得到实施例21-2(3.9mg)。LCMS：保留时间＝17.5分钟。[M+H]⁺＝716。柱：Waters XSelect CSH C18 3.0×150mm 3.5μm颗粒；流动相A：20mM NH₄OAc/水(pH 6.5)+5％MeOH；流动相B：MeOH；梯度：0％B至50％B经15分钟，随后在第17分钟到达95％，且在95％B下保持3分钟；柱温度：45℃；流速：0.5mL/min；检测：在260nm的UV。

实施例22-1、22-2、22-3和22-4

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-(6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(22-1)

非对映异构体2(22-2)

非对映异构体3(22-3)

非对映异构体4(22-4)

中间体22A的制备：

向中间体2G(0.6g，1.085mmol)于二噁烷(9mL)中的溶液中添加氢氧化钠(0.121g，3.04mmol)。搅拌反应物16小时。LCMS分析显示大部分起始物质。向反应物中添加LiOH(3.25mL，3.25mmol)的1N水溶液，且在60℃再搅拌混合物16小时。反应物经真空浓缩，且用pH 4.5的磷酸盐缓冲液(约10mL)处理且用EtOAc萃取，并且合并的有机层经干燥(MgSO₄)和真空浓缩。将粗产物溶解于少量DCM中，且装填至40g ISCO硅胶柱，并且使用TeledyneISCO系统纯化，用1％-10％的DCM/MeOH经15分钟梯度洗脱，得到呈固体状的中间体22A(0.5g，1.015mmol，94％产率)，m/z(493，M+H)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.21-8.17(m,1H),8.00-7.96(m,1H),7.41-7.18(m,15H),4.72-4.63(m,1H),3.79-3.69(m,2H),3.40-3.29(m,2H),3.01-2.91(m,1H),2.62-2.53(m,1H),2.48-2.38(m,1H),2.34-2.24(m,1H)。

中间体22B的制备：

将于无水乙腈中含有中间体22A(0.38g，0.771mmol)和1H-四唑(0.065g，0.926mmol)的混合物在旋转蒸发仪上浓缩至干燥(2×5mL)，且随后将其再悬浮于乙腈(5mL)中且在氮气氛围下静置。在另一圆底烧瓶中，将含二异丙基氨基磷酸(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基酯(2-氰基乙酯)(Sigma-Aldrich，0.845g，0.964mmol)的乙腈(5mL)在旋转蒸发仪上浓缩至干燥。与另外的乙腈(5mL)重复共沸操作，且随后再悬浮于乙腈(2.5mL)中，且在室温将该溶液逐滴添加至22A的搅拌混合物中。在室温搅拌反应物16小时。向反应物中添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.190g，0.926mmol)，且在室温搅拌反应物2小时。真空移除溶剂。将残余物溶解于最少量的MeOH中，且装填至反相ISCO50g C18 Redisep Rf高效Gold柱，且在Teledyne ISCO系统上使用梯度0-100％的(95/5/0.5的ACN/水/乙酸铵)/(95/5/0.5的水/ACN/乙酸铵)经15分钟梯度纯化，在通过与3×10mL乙腈共沸而真空浓缩后，得到呈白色泡沫状的中间体22B(0.604g，0.465mmol，100％产率)，m.z(1300，M+H)。

中间体22C的制备：

在室温向中间体22B(1.0g，0.770mmol)和三乙基硅烷(0.615ml，3.85mmol)于二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加TFA(0.178ml，2.309mmol)。在室温搅拌反应混合物1小时。添加水(5mL)，接着添加饱和NaHCO₃水溶液(约5mL)。将混合物转移至分液漏斗，且用DCM(2×10mL)和Me-THF(2×10mL)萃取。萃取物经合并，干燥(MgSO₄)，过滤且浓缩。将浓缩物悬浮于二乙醚(约20mL)中，且搅拌1小时。通过真空过滤收集已形成的精细粉末，且用己烷和二乙醚的混合物(1/1)洗涤。将物质分配于己烷与甲醇之间。分离甲醇层且真空浓缩，得到呈浅黄色固体状的中间体22C(0.49g，0.649mmol，84％产率)，m/z(755，M+H)。

中间体22D的制备：

经1小时的时间段，向中间体22C(0.44g，0.583mmol)于吡啶(21.20ml)中的0℃溶液中逐滴添加膦酸二苯酯(0.135ml，0.700mmol)于吡啶(2.120ml)中的溶液。在室温搅拌反应物16小时。添加固体(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲脒(0.180g，0.875mmol)，且在室温再搅拌反应物3小时。真空浓缩反应物。将残余物溶解于最少量的MeOH中，且装填至反相ISCO 50g C18 Redisep Rf高效Gold柱，且在Teledyne ISCO系统上使用梯度0-100％的(95/5/0.5的ACN/水/乙酸铵)/(95/5/0.5的水/ACN/乙酸铵)经15分钟梯度纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的中间体22D(0.081g，0.097mmol，16.68％产率)，m/z(833，M+H)。

实施例22-1、22-2、22-3和22-4

将中间体22D(0.081g，0.097mmol)和氨(7N于MeOH中)(6.95mL，48.6mmol)的混合物在室温搅拌1小时，且在密封小瓶中在50℃加热3小时。真空移除溶剂。将残余物溶解于最少量的MeOH中，且装填至ISCO 50g C18Redisep Rf高效Gold柱(已用流动相A：5:95的乙腈:水+0.01M乙酸铵；流动相B：95:5的乙腈:水+0.01M乙酸铵平衡)，且使用Teledyne ISCO系统用梯度0％B保持2柱体积至100％B经20柱体积纯化，得到产物的粗混合物。经由制备型LC/MS用以下条件分离个别非对映异构体：柱：Agilent Bonus RP 21.2×100mm，5μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：乙腈；梯度：0％B保持0至6分钟，0％-25％B经16分钟，随后在100％B下保持4分钟；流速：20mL/min。将含有期望产物的级分合并且经由离心蒸发干燥。使用分析型LC/MS确定最终纯度。注射条件：柱：Agilent Bonus RP，2.1mm×50mm，1.8μm颗粒；流动相A：水+20mM乙酸铵；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：0％B保持1分钟，随后0％B至100％B经4分钟，接着在100％B下保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。

实施例22-1：产物的产量为3.5mg，保留时间：2.0分钟；质量观测值：m/z(676.0,M+H)

实施例22-2：产物的产量为3.0mg，保留时间：2.05分钟；质量观测值：m/z(676.0,M+H)

实施例22-3：产物的产量为3.5mg，保留时间：2.14分钟；质量观测值：m/z(676.0,M+H)

实施例22-4：产物的产量为3.1mg，保留时间：2.29分钟；质量观测值：m/z(676.0,M+H)

实施例23

(1R,6S,8R,9R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-8-{8-氧代-4H,5H,8H-[1,2,3,4]四唑并[1,5-a]嘌呤-5-基}-3,12-二硫烷基-2,4,11,13,16-五氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,9]十八烷-3,12-二酮

非对映异构体1(23)

中间体23A的制备：

向中间体21B(31.3mg，0.059mmol)于DMF(0.60mL)中的溶液中添加叠氮化钠(4.63mg，0.071mmol)。在70℃搅拌所得混合物3小时。随后添加咪唑(12.1mg，178μmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(22.9μL，89μmol)，且在室温搅拌反应物。16小时后，添加另外的咪唑(24.2mg，356μmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(46μL，178μmol)。在第23小时，用甲醇(0.11mL)淬灭反应物，随后在室温搅拌30分钟。在氮气流下移除挥发物。将粗产物溶解于少量CH₂Cl₂中，吸附至SiO₂塞上，且通过快速色谱纯化(SiO₂，4g RediSep Rf Gold柱，0％MeOH/EtOAc至10％MeOH/EtOAc，10分钟梯度随后保持5分钟，10％MeOH/EtOAc至100％MeOH/EtOAc，5分钟梯度随后保持5分钟，18mL/min)，得到混杂有咪唑的23A(33.3mg)。¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δ8.08(s,1H),7.65-7.57(m,4H),7.45-7.29(m,6H),7.22-7.10(m,15H),4.78(td,J＝9.3,8.1Hz,1H),3.78-3.69(m,2H),3.43(dd,J＝9.6,4.7Hz,1H),3.16(t,J＝8.9Hz,1H),2.99-2.91(m,1H),2.55-2.46(m,1H),2.20(q,J＝10.0Hz,1H),2.16-2.05(m,1H),0.99(s,9H)。LCMS：RT＝1.24分钟。[M+H]⁺＝772。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在254nm的UV。

中间体23B的制备：

向部分纯化的23A(33.3mg)和三乙基硅烷(29μL，178μmol)于CH₂Cl₂(0.6mL)中的溶液中添加三氟乙酸(9μL，119μmol)。在室温、氮气氛围下搅拌反应物。3小时后，添加另外的三乙基硅烷(57μL，356μmol)和三氟乙酸(18μL，238μmol)。在第5小时，用MeOH(0.6mL)稀释反应物并搅拌10分钟。随后真空浓缩混合物，且使其与MeOH(2×1mL)共沸两次。将残余物溶解于甲醇(800μL)中，随后经由注射器逐滴添加甲醇钠(0.5M于MeOH中)(200μL，100μmol)(以使在去除保护基期间形成的TFA酯裂解)。将所得混合物在室温搅拌30分钟，随后用乙酸(12μL，200μmol)淬灭且真空浓缩。将粗产物溶解于少量EtOAc(+MeOH)中，吸附至硅胶塞上，且通过快速色谱纯化(SiO₂，4g柱，0％MeOH/EtOAc至100％MeOH/EtOAc，20分钟梯度，18mL/min)，得到混杂有来自前一步骤的咪唑的23B(35.1mg)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.02(s,1H),7.73-7.66(m,4H),7.50-7.37(m,6H),4.67(q,J＝8.6Hz,1H),3.87-3.77(m,2H),3.77-3.66(m,2H),2.94-2.83(m,1H),2.65-2.53(m,1H),2.46-2.35(m,1H),2.35-2.23(m,1H),1.08(s,9H)。LCMS：RT＝0.98分钟。[M+H]⁺＝530。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在220nm的UV。

中间体23C的制备：

经由注射器向于CH₃CN(0.6mL)中含有部分经纯化的23B(35.1mg)和中间体9J(54.4mg，63.4μmol)(与CH₃CN一起共沸3次且高真空干燥30分钟)的溶液中逐滴添加DBU(10μL，63.4μmol)。在室温、氮气氛围下搅拌所得混合物。反应并未进行，直至添加过量的DBU(40μL，254μmol)和中间体9J(109mg，127μmol)。通过LCMS观测到产物形成后，通过添加MeOH(2mL)淬灭反应物。随后真空浓缩混合物。将粗产物溶解于少量MeOH中，吸附至硅藻土塞上，且通过反相MPLC纯化(C18，15.5g RediSep Rf Gold柱，5-95％的乙腈/水+10mM乙酸铵，8.6分钟梯度，30mL/min)，得到混杂有腺苷单硫代磷酸酯的23C(10mg)。LCMS：RT＝1.06分钟。[M+H]⁺＝1219。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:水+10mM乙酸铵；流动相B：95:5乙腈:水+10mM乙酸铵；温度：50℃；梯度：5％B至95％B经1分钟，随后在95％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在220nm的UV。

中间体23D的制备：

在室温搅拌部分经纯化的23C(10mg)于纯三氢氟化三乙胺(0.50mL，3.07mmol)中的悬浮液。22小时后，反应混合物用CH₃CN(0.86mL)稀释，且用三乙胺(0.86mL，6.14mmol)(2当量，相对于Et₃N·3HF)和异丙氧基三甲基硅烷(1.6mL，9.21mmol)(3当量，相对于Et₃N·3HF)淬灭。在室温搅拌混合物30分钟，随后真空浓缩。将粗产物溶解于少量10％乙腈/水+10mM乙酸铵中，吸附至硅藻土塞上，且通过反相MPLC纯化(C18，15.5g RediSep Rf Gold柱，14％乙腈/水+10mM乙酸铵，等度，30mL/min)，得到混杂有来自前一步骤的腺苷单硫代磷酸酯的23D(5.6mg)。LCMS：RT＝0.50分钟。[M+H]⁺＝743。柱：Waters BEH C18 2.1×50mm 1.7μm颗粒；流动相A：水+0.05％三氟乙酸；流动相B：乙腈+0.05％三氟乙酸；温度：50℃；梯度：2％B至98％B经1分钟，随后在98％B下保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：在220nm的UV。

实施例23的制备：

非对映异构体1(23)

经15分钟，经由注射器向部分经纯化的23D(2.4mg)(与CH₃CN共沸3次)和DBU(7μL，0.048mmol)于DMF(0.24mL)中的略微混浊溶液中逐滴添加试剂3(2.2mg，4.85μmol)于DMF(80μL)中的溶液。在室温搅拌所得混合物。30分钟后，经由注射器逐滴添加第二部分含试剂3(2.2mg，4.85μmol)的DMF(80μl)。在第60分钟，用甲醇(0.40mL)和乙酸(6μL)淬灭反应物。随后在氮气流下移除挥发物，得到呈85:15非对映异构体混合物形式的粗环化产物。该物质不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS：RT＝13.7分钟(主要异构体)，14.2分钟(次要异构体)。[M+H]⁺＝821。柱：Waters XSelect CSH C18 3.0×150mm 3.5μm颗粒；流动相A：10mMTEAA/水(pH 6.5)；流动相B：80:20的乙腈/10mM TEAA/水(pH 6.5)；梯度：5％B至50％B经15分钟；柱温度：25℃；流速：0.5mL/min；检测：在285nm的UV。在室温搅拌含粗制大环的氨(7N)于MeOH(1.0mL，7.0mmol)中的悬浮液。24小时后，真空浓缩反应物。通过反相HPLC纯化粗产物(XSelect CSH C18 OBD，5微米，19×150mm，溶剂A：100mM乙酸铵(pH 6.5)，溶剂B：纯乙腈，15-24％B，20mL/min，25分钟梯度，在260nm监测)。分离产物(主要异构体，保留时间＝10.7分钟)且冻干至干燥，得到呈白色固体状的实施例23(1.6mg)。LCMS：RT＝14.6分钟。[M+H]⁺＝717。柱：Waters XSelect CSH C18 3.0×150mm 3.5μm颗粒；流动相A：20mM NH₄OAc/水(pH 6.5)；流动相B：20mM NH₄OAc/乙腈；梯度：0％B至13％B经25分钟；柱温度：55℃；流速：0.5mL/min；检测：在260nm的UV。

生物活性的评价

STING THP1报告体测定方案

THP1-Dual^TM细胞通过稳定整合两个诱导性报告体构建体而衍生自人类THP-1单核细胞细胞系。因此，THP1-Dual^TM细胞允许通过监测SEAP的活性研究NF-κB途径且同时通过评估经分泌荧光素酶(Lucia)的活性研究IRF途径。当使用QUANTI-Blue^TM(SEAP检测试剂)和QUANTI-Luc^TM(荧光素酶检测试剂)时，可容易地在细胞培养物上清液中测量两种报告体蛋白。

THP1-Dual^TM细胞响应于STING激动剂而诱导NF-κB的活化。这些细胞在受STING激动剂(诸如cGAMP)刺激后还触发IRF途径。此处，使用THP-1-Dual细胞来评估STING结合剂对细胞水平的作用。

使用ECHO声学分配器(Labcyte，型号550)将化合物于DMSO中的连续稀释液以100nl/孔添加至较小体积的384孔培养板中，以在细胞悬浮液中实现100μM的最终起始浓度。于含有10％人类血浆的RPMI培养基(Gibco，目录号11875)中，将THP-1Dual^TMSTING报告体细胞(Invivogen，Dual细胞目录号THPD-nfis)以每孔10μL 15,000个细胞添加至具有化合物的培养板中，在小体积384孔黑色壁、透明底组织培养板(Corning，目录号3542)中用于SEAP测定，且在小体积固体白色培养板(Corning，目录号3826)中用于荧光素酶测定。培养板中的一行用100μM的cGAMP处理以用于100％活化计算，且一行不处理(仅DMSO)以用于基线活化。随后在37℃培育箱中在5％CO₂下将培养板培育20小时。

在SEAP测定中，将5μl的2x QuantiBlue(Invivogen，目录号Rep-qb2)添加至接种有THP1细胞且在37℃培育2小时的384孔黑色培养板中。在620nm波长(OD620)下在Envision(Perkin Elmer)上对培养板进行读数。在荧光素酶测定中，将5μl的Quantiluc(Invivogen，Rep-qlc2)添加至接种有THP1细胞的白色384孔培养板中，且在第5分钟使用发光方案(RLU)在Envision(Perkin Elmer)上进行读数。对于两种细胞系，通过用100μM cGAMP(Invivogen，目录号TLRL-NACGA23-5)刺激的THP-1Dual STING细胞的值(RLU)来测定100％活化。

STING结合测定

使用基于时间分辨FRET的竞争结合分析来评估测试物品与STING WT和STING AQ的结合。将浓度为20nM的带His标签的STING细胞质结构域(WT或AQ)与2.5nM Tb标记的抗His抗体、测试化合物以及浓度为200nM(STING WT)或40nM(STING AQ)的荧光素标记cGAMP模拟探针(BioLog目录号C195)，在含有0.005％Tween-20和0.1％BSA的PBS中一起培育一小时。使用EnVision微板读数器来测量495nm和520nm的荧光以量化Tb标记的His抗体与荧光素标记的探针之间的FRET。背景(background)定义为不存在STING蛋白的情况下获得的信号，且扣除背景的FRET比率以不存在测试化合物的情况下获得的最大信号标准化。将这些值转换为抑制百分比。确定测试化合物在11种浓度下的抑制百分比。使用拟合数据的4参数逻辑斯蒂方程计算IC₅₀，其定义为将探针的特异性结合降低50％所需的竞争性测试化合物的浓度

STING WT：His-TVMV-S-hSTING(155-341)-H232R

STING AQ：His-TVMV-S-hSTING(155-341)-G230A-R293Q

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Claims

1.一种化合物或其非对映异构体，所述化合物具有下式

2.一种化合物的药学上可接受的盐，所述化合物具有下式

3.一种化合物或其非对映异构体，所述化合物具有下式

4.一种化合物的药学上可接受的盐，所述化合物具有下式

5.一种化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物具有下式

6.一种药物组合物，其包含根据权利要求1所述的化合物或其非对映异构体和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

7.一种药物组合物，其包含根据权利要求2所述的化合物的药学上可接受的盐和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

8.一种药物组合物，其包含根据权利要求3所述的化合物或其非对映异构体和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

9.一种药物组合物，其包含根据权利要求4所述的化合物的药学上可接受的盐和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

10.一种药物组合物，其包含根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐和一或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

11.根据权利要求1所述的化合物或其非对映异构体或根据权利要求6所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为实体肿瘤或血液癌症。

12.根据权利要求2所述的化合物的药学上可接受的盐或根据权利要求7所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为实体肿瘤或血液癌症。

13.根据权利要求3所述的化合物或其非对映异构体或根据权利要求8所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为实体肿瘤或血液癌症。

14.根据权利要求4所述的化合物的药学上可接受的盐或根据权利要求9所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为实体肿瘤或血液癌症。

15.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为实体肿瘤或血液癌症。

16.根据权利要求1所述的化合物或其非对映异构体或根据权利要求6所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病选自小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌瘤、胃癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、乳腺癌、泌尿系统癌瘤、脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌瘤、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤和间皮瘤。

17.根据权利要求2所述的化合物的药学上可接受的盐或根据权利要求7所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病选自小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌瘤、胃癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、乳腺癌、泌尿系统癌瘤、脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌瘤、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤和间皮瘤。

18.根据权利要求3所述的化合物或其非对映异构体或根据权利要求8所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病选自小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌瘤、胃癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、乳腺癌、泌尿系统癌瘤、脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌瘤、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤和间皮瘤。

19.根据权利要求4所述的化合物的药学上可接受的盐或根据权利要求9所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病选自小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌瘤、胃癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、乳腺癌、泌尿系统癌瘤、脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌瘤、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤和间皮瘤。

20.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗其中需要调节STING的疾病的药物中的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病选自小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌瘤、胃癌瘤、卵巢癌瘤、子宫颈癌瘤、胰腺癌瘤、前列腺癌瘤、乳腺癌、泌尿系统癌瘤、脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性骨髓白血病(CML)、肝细胞癌瘤、多发性骨髓瘤、胃肠道间质肿瘤和间皮瘤。

21.根据权利要求16-20中任一项所述的用途，其中所述其中需要调节STING的疾病为神经胶母细胞瘤。