CN111902046A - 保护生物活性物和/或其前体 - Google Patents

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M·A·奥古斯丁
L·桑格思瑞
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Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization CSIRO
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Abstract

本发明涉及一种由生物质生产乳液或悬浮液的方法。本发明还涉及生产粉或由其生产的产品。本发明还涉及通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液。本发明还涉及通过如本文所述的方法生产的粉或由其生产的产品。

Description

保护生物活性物和/或其前体
技术领域
本发明涉及一种由生物质生产乳液或悬浮液的方法。本发明还涉及生产粉或由其生产的产品。本发明还涉及通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液。本发明还涉及通过如本文所述的方法生产的粉或由其生产的产品。
背景技术
生物活性物如氧敏感性脂肪酸和油是食品、补充剂和/或化妆品的理想成分。然而，因为许多油和生物活性分子在暴露于各种环境(如氧、热、pH或酶)时易于发生氧化和降解反应，所以这些成分在摄入或使用前可能降解，不能以适于摄入或使用的形式储存，或在摄入后不会到达体内的期望部位。氧敏感性油包括含有多不饱和脂肪酸如ω-3、ω-6或ω-9脂肪酸的那些。不稳定的生物活性成分包括水溶性(例如在高pH下不稳定的多酚)或油溶性(例如对氧敏感的胡萝卜素)或微溶于油或水的组分(例如白藜芦醇、姜黄色素)。58.
包封已用于亲脂性和亲水性生物活性物的保护和递送，但在递送和选择用于递送的最适当的包封系统方面仍存在挑战(Augustin和Sanguansri，2015；McClements，2015)。由于ω-3油的健康促进性质，对这些油的稳定存在显著兴趣，因为它们非常易于氧化(Sanguansri和Augustin，2006；Drusch和Manino，2007)。
包封氧敏感性油和生物活性物的方法是已知的，然而，这些方法需要纯化的或基本上纯化的蛋白质(例如分离的乳清蛋白、分离的大豆蛋白，或酪蛋白和碳水化合物)，其对于许多产品是不经济的。
纯化的蛋白质和纯化的碳水化合物可以单独或组合用作用于递送生物活性物的包封基质(Augustin和Hemar，2009；Aditya等人，2017)。例如，淀粉通常用作包封的壁材料(Hoyos-Leyva等人，2018)，并且发现蛋白质可用于递送，因为其具有许多期望的功能特性，使其自身适于包封(Subirade和Chen，2008；Livney，2010)。
Figure BDA0002700660770000011
微胶囊化技术使用纯化的蛋白质(优选酪蛋白)和纯化的碳水化合物来生产用于油的包封剂。发现加热的蛋白质-碳水化合物共混物(
Figure BDA0002700660770000012
微胶囊化技术)优于相应的蛋白质和碳水化合物的物理共混物(WO 01/74175，Augustin等人，2006)。在这些方法中使用的纯化的蛋白质和纯化的碳水化合物被选择为无色且缺乏风味，并且由于在它们的分离中涉及的纯化步骤而可能是昂贵的。
因此，需要新的制剂和方法来生产在储存、加工期间和在胃肠道中易于降解的包括氧敏感性生物活性物例如脂肪酸和油的产品。
发明内容
本发明人已经开发了生产包括从单一来源获得的蛋白质和碳水化合物的乳液、悬浮液或粉的方法。
在一个方面，本发明提供生产乳液或悬浮液的方法，所述方法包括：
i)从单一物种的生物体的生物质获得包括蛋白质和碳水化合物的水性混合物；
ii)任选地向所述水性混合物中加入油；和
iii)形成包括生物活性物和/或生物活性前体的乳液或悬浮液。
在一个实施方案中，水性混合物是水性悬浮液。
在一个方面，本发明提供了生产包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体的粉的方法，所述方法包括：
i)从单一物种的生物体的生物质获得包括蛋白质和碳水化合物的水性混合物；
ii)向所述水性混合物中加入油；
iii)形成包括所述生物活性物和/或生物活性前体的乳液或悬浮液；和
iv)从所述乳液或悬浮液形成包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体的粉。
在一个实施方案中，本发明提供如本文所述的方法，其中所述生物活性物和/或生物活性前体是以下中的一种或多种：
i)生物质的组分；
ii)步骤ii)中的油或其组分；
iii)在步骤ii)中将油加入到水性混合物中之前加入到油中的组分；
iv)在步骤ii)之前或期间注入油中的组分；
v)所述另外的生物质的组分；和
vi)是在所述方法的步骤i、ii)和iii)中加入的组分。
在一个实施方案中，生物活性物是i)和ii)。
在一个实施方案中，生物活性前体是i)。
在一个实施方案中，在步骤i)中或之后或在步骤ii)中形成生物活性物。
在一个方面，本发明提供了包括来自单一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物的基质。
在一个方面，本发明提供了包埋或包封在基质中的生物活性物和/或生物活性前体，所述基质包括来自单一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物，其中当与包埋或包封之前的生物活性物和/或生物活性前体相比时，所述包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体耐降解。
在一个方面，本发明提供了通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液。
在一个方面，本发明提供了通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液。
在一个方面，本发明提供了一种粉，其包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体并且包括来自单一物种的生物体的蛋白质和碳水化合物。
在一个方面，本发明提供了通过如本文所述的方法生产的粉。
在一个方面，本发明提供了一种产品，所述产品包括通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液、如本文所述的基质、包埋或包封在如本文所述的基质中的生物活性物和/或生物活性前体，或如本文所述的乳液或悬浮液。
在一个方面，本发明提供了包括通过如本文所述的方法生产的粉或本文所述的粉的产品。
本发明人还出人意料地发现，脂质基组合物提高了异硫氰酸酯(例如萝卜硫素)和/或异硫氰酸酯前体(例如芥子油苷)的稳定性。因此，在另一方面，本发明提供了药物或化妆品组合物，其包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体、脂质和药物和/或化妆品赋形剂。
在一个方面，本发明提供了制备包括异硫氰酸酯或异硫氰酸酯前体的乳液的方法，所述方法包括：
提供包括水、脂质和异硫氰酸酯或异硫氰酸酯前体的混合物，从而形成乳液。
在一个方面，本发明提供了包括水、脂质和异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的乳液。
在一个方面，本发明提供了制备包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的粉的方法，所述方法包括：制备本文所述的乳液，和使所述乳液经受干燥条件，从而除去水并形成粉。
在一个方面，本发明提供了制备药物或化妆品组合物的方法，其包括：制备如本文所述的乳液，或制备如本文所述的粉，和将所述乳液或干燥的组合物转化成药物或化妆品组合物。
在一个方面，本发明提供了治疗或预防病症的方法，其包括对有需要的受试者施用有效量的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。
在一个方面，本发明提供了用于治疗或预防病症的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。
在一个方面中，本发明提供了治疗或预防受试者的病症的方法，其包括对受试者施用有效量的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。
在一个方面，本发明提供了如本文所述的乳液或如本文所述的粉在制备用于治疗病症的药物中的用途。
在一个方面，本发明提供了如本文所述的方法或用途，其中所述病症选自：癌症、糖尿病、心血管、孤独症、骨质疏松症、神经保护性疾病、炎症、氧化应激和肠道健康。
除非另外具体说明，否则本文中的任何实施方案应做必要的变更以应用于任何其它实施方案。例如，如本领域技术人员将理解的，用于本发明的上述方法的生物活性物和/或生物活性前体的示例同样适用于本发明的乳液、悬浮液、粉和产品。
本发明不限于这里描述的具体实施方案的范围，这些实施方案仅用于示例的目的。如本文所述，功能等同的产物、组合物和方法显然在本发明的范围内。
在整个说明书中，除非另有特别说明或上下文另有要求，提及单个步骤、物质组成、步骤组或物质组成组应被认为包括一个和多个(即一个或多个)那些步骤、物质组成、步骤组或物质组成组。
以下通过以下非限制性实施例并参考附图描述本发明。
附图说明
图1显示了使用含有蛋白质和碳水化合物的西兰花作为包封剂的水包油乳液在A)乳液形成后0分钟的时间和B)120分钟的时间时与油和水分散液的物理稳定性的比较。该图还显示了使用冻干的西兰花粉制备水相悬浮液，在其用作包封剂之前加入足够量的水直到获得可流动的混合物(7.46％TS)。A)显示14.29％总固体(TS)，B)显示10.64％TS，C)显示8.48％TS和D)显示7.46％TS。
图2显示使用原料西兰花制备水相悬浮液，通过加入所需量的水直到在其用作包封剂之前获得可流动的混合物。A)7.66％TS，B)6.87％TS，C)6.23％TS，和D)4.99％TS。
图3显示了A)制备后，B)过夜储存后和C)冻干后的含有ω-3油的乳液。F1和F2使用西兰花作为包封剂，C1使用加热的酪蛋白-碳水化合物作为包封剂，并且C2使用Tween作为乳化剂。
图4显示在80℃在，在初始5巴氧压下测试的样品[来自图3A的乳液(9.5％TS，4.8％油)]的诱导期(IP)/氧吸收的Oxipres测试结果。测试的样品是83g乳液(样品中4g基质固体和4g油)。当耗氧量有显著变化时，只观察到用Tween作乳化剂和用热酪蛋白-碳水化合物作包封的样品的IP(h)增加。当停止测试时，使用西兰花作为包封剂的样品直到20小时不具有独特的IP。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。纯金枪鱼油的Oxipres为9小时(参见图6)。
图5显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的样品[来自图3C的冻干粉(50％金枪鱼油)]的IP/氧吸收的Oxipres测试结果。测试的样品是8g粉(样品中4g基质固体和4g油)。当停止测试时，使用西兰花作为包封剂的样品直到43小时不具有独特的IP。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。来自Oxipres数据(参见图6)的纯金枪鱼油的IP为9小时。
图6显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的金枪鱼油、低芥酸菜子油和高DHA低芥酸菜子油的IP/氧吸收的Oxipres测试结果。对于每种油观察到清晰的IP。
图7对西兰花基质(无油)的Oxipres测试，显示不同量的植物基质对氧吸收的影响。
图8在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干的ω-3西兰花粉(12.5％金枪鱼油或低芥酸菜子油)的Oxipres测试结果。干燥前乳液的总固体为5.7％。测试样品为20g粉(17.5g基质，2.5g油)。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
图9在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干的ω-3西兰花粉(25％金枪鱼油或DHA低芥酸菜子油)的Oxipres测试结果。干燥前乳液的总固体为6.6％。测试样品为10g粉(7.5g基质，2.5g油)。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。
图10在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干的ω-3西兰花粉(50％金枪鱼油或DHA低芥酸菜子油)的Oxipres测试结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试样品为5g粉(2.5g基质，2.5g油)。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
图11显示了在80℃下，在初始5巴氧压下测试的ω-3西兰花乳液样品的氧吸收的Oxipres测试结果。以4％含水固体(3.8％油和7.7％总固体)和6％含水固体(5.7％油和11.3％总固体)通过两次热处理(75℃-2min和100℃-30min)制备乳液。测试样品含有4g油和4g基质。使用西兰花作为包封剂的乳液直到42小时都不具有独特的IP。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
图12显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3西兰花粉(50％金枪鱼油)的IP的Oxipres测试结果。以5％和6％含水固体(5.7％油和11.3％总固体)通过两次热处理(75℃-30min和100℃-30min)制备样品。测试样品含有4g油和4g基质。
图13显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3西兰花粉(50％金枪鱼油)的IP的Oxipres测试结果。对所述西兰花包封剂进行两次热处理(75℃-20min和100℃-30min)并原样使用(不干燥“新鲜西兰花”)或由“冻干西兰花”粉重构。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。
图14显示了在80℃下，在初始5巴氧压下测试的ω-3西兰花乳液样品的氧吸收的Oxipres测试结果。在不同的加工阶段使用西兰花包封剂并制成5％的含水固体。以9.5％的TS和4.8％的油制备乳液。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。测试样品含有4g油和4g基质。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
图15显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3胡萝卜粉(50％金枪鱼油)的IP的Oxipres测试结果。显示使用了两次热处理(75℃-2min和100℃-30min)的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试样品为8g粉(4g基质，4g油)。没有清晰的IP。显示压力突然增加导致挥发物释放(标记IP)，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。尖峰是导致压力显著增加的相互作用的证据。
图16显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的使用“发酵的”和“未发酵的”胡萝卜作为ω-3油的包封剂的ω-3胡萝卜粉(50％金枪鱼油)的IP的Oxipres测试结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试样品为8g粉(4g基质，4g油)。显示压力突然增加导致挥发物释放(标记IP)，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。尖峰是导致压力显著增加的相互作用的证据。对于作为包封剂的未发酵胡萝卜，没有清晰的IP。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。
图17显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3番茄粉(50％金枪鱼油)的IP的Oxipres测试结果。没有清晰的IP。显示压力突然增加导致挥发物释放(标记IP)，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。尖峰是导致压力显著增加的相互作用的证据。显示使用了两次热处理(75℃-2min和100℃-30min)的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试样品为8g粉(4g基质，4g油)。番茄的升高温度-时间处理显示更长的IP(更好的保护免于ω-3油的氧化)。
图18显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3香菇粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。没有清晰的IP(h)，其中氧吸收有显著增加(氧压急剧下降)。显示对作为包封剂的香菇进行两次热处理(75℃-2min和100℃-30min)以获得50％的油粉的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。与50％的油粉相比，更低的油负载(25％油)显示更长的IP(更好的防止ω-3油的氧化)。
图19显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3花椰菜粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。对于50％的油粉观察到IP，但对于25％的油粉没有明显的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。显示在(75℃-2min)和两种油负载(50％和25％油)下热处理作为包封剂的花椰菜的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。
图20显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3羽衣甘蓝粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。对于25％的油粉观察到IP，但对于50％的油粉没有明显的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。50％油粉的尖峰是导致对50％金枪鱼油粉观察到的压力显著增加的相互作用的证据。显示在(75℃-2min)和两种油负载(50％和25％油)下热处理作为包封剂的羽衣甘蓝的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。
图21显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3孢子甘蓝粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。对于50％的油粉观察到IP，但对于25％的油粉没有明显的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。显示在(75℃-2min)和两种油负载(50％和25％油)下热处理作为包封剂的孢子甘蓝的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。
图22显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3雪豆粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。没有清晰的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。50％油粉的尖峰是导致对50％金枪鱼油粉观察到的压力显著增加的相互作用的证据。显示在(75℃-2min)和两种油负载(50％和25％油)下热处理作为包封剂的雪豆的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。
图23显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3大蒜粉(25％和50％油)的IP的Oxipres测试结果。对于25％的油粉观察到IP，但对于50％的油粉没有明显的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。50％油粉的尖峰是导致对50％金枪鱼油粉观察到的压力显著增加的相互作用的证据。显示在(75℃-2min)和两种油负载(50％和25％油)下热处理作为包封剂的大蒜的结果。干燥前乳液的总固体为9.5％。测试的样品是50％油粉的8g粉(4g基质和4g油)和25％油粉的12g粉(9g基质和3g油)。
图24在80℃下，在初始5巴的氧压下测试的加入有植物蛋白(豌豆蛋白、大豆蛋白(SPI))或乳蛋白、酪蛋白酸钠的ω-3胡萝卜冻干粉(25％金枪鱼油)的Oxipres测试结果。干燥前乳液的总固体为9.5％(2.4％油)。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。测试样品为10g粉(2.5g油，7.5g基质)。显示压力的突然增加导致挥发物的释放，因此不可能获得IP和氧吸收率，除了加入豌豆蛋白作为包封剂的胡萝卜之外。尖峰是导致压力显著增加的相互作用的证据。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。
图25：显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的与纯金枪鱼油比较的具有不同蛋白质：碳水化合物比例的喷雾干燥(25％金枪鱼油)的ω-3抹茶粉的IP的Oxipres测试结果。该抹茶粉由抹茶(绿茶)粉的商业样品重构。仅对金枪鱼油和用1:3和1:4蛋白质与碳水化合物比例包封的粉观察到IP，但对用1:2和8:9蛋白质与碳水化合物比例包封的粉观察不到清晰的IP，因此不可能获得超过IP的氧吸收率。含有8:9蛋白质与碳水化合物比例的包封剂仅为抹茶粉的包封剂。
图26显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的与使用加热的酪蛋白-碳水化合物作为包封剂的50％金枪鱼油粉比较的喷雾干燥的(50％金枪鱼油)ω-3西兰花粉的IP的Oxipres测试结果。所述西兰花包封剂由“冻干西兰花”粉重构。
图27显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的使用西兰花泥和发酵的西兰花泥作为包封剂的冻干(50％金枪鱼油)ω-3油粉的IP的Oxipres测试结果。
图28：在40℃储存4周后，包封在不同植物基质中的冻干粉(50％金枪鱼油)中的次级脂质氧化的定量分析。植物包封剂(从左到右：西兰花、胡萝卜、发酵胡萝卜、番茄、香菇、花椰菜、羽衣甘蓝、孢子甘蓝、雪豆、大蒜)。
图29：显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的挤出的西兰花小吃(10％高DHA金枪鱼油)和压片的ω-3西兰花制剂(25％高DHA金枪鱼油)的诱导期(IP)的Oxipres测试结果。对于压片制剂没有清晰的IP(h)，但是对于挤出制剂显示出清晰的IP。测试的样品为40g挤出物(36g基质和4g油)和16g样品片剂形式(16g赋形剂和4g油)。
图30：显示在80℃下，在初始5巴氧压下测试的冻干ω-3西兰花粉(50％油)的诱导期(IP)的Oxipres测试结果。没有清晰的IP(h)，其中氧吸收有显著增加(氧压急剧下降)。显示对水相的预处理(使用超声或微波)或后乳化处理(使用HPP或微波)的结果。水相的总固体为5％，乳液的总固体为9.5％。测试样品为8g粉(4g基质，4g油)。
具体实施方式
一般技术和定义
除非另外具体定义，否则本文使用的所有技术和科学术语应被认为具有与本领域普通技术人员通常理解的相同的含义。
术语“和/或”，例如“X和/或Y”应理解为“X和Y”或“X或Y”，并应被视为对两种含义或其中一种含义提供明确支持。
在整个说明书中，单词“包括(comprise)”或诸如“包括(comprises或comprising)”将被理解为暗示包括所述元件、整体或步骤，或一组元件、整体或步骤，但不排除任何其他元件、整体或步骤，或一组元件、整体或步骤。
如本文所用，除非另有相反说明，术语“约”是指指定值的+/-10％、更优选+/-5％、甚至更优选+/-1％。
如本文所用，“组分”是指较大整体的一部分或要素。
如本文所用，“蛋白质”或“多肽”是指包括碳、氢、氧、氮和通常硫的大分子，其包括通过肽键连接在一起的氨基酸的聚合物。
如本文所用，“碳水化合物”是指一类具有通式Cx(H2O)y的分子。
如本文所用，术语“抗氧降解”或类似短语是指降低生物活性物如脂肪酸对氧化的敏感性。在一个实施方案中，通过包埋或包封所述物质以减少暴露于氧气来降低所述物质对氧化的敏感性。在一个实施方案中，这包括用具有氧隔离能力的分子包埋或包封物质。抗氧化能力的评估可以通过本领域技术人员已知的任何方法进行。例如，脂肪和油的抗氧化性可以基于油在压力下用氧的氧化。在这种测试中，氧的消耗导致测试过程中的压降，这是由于氧化过程中样品对氧的吸收。当在升高的压力和温度下进行时，氧化速率加速。在一个实施方案中，使用Oxipres(例如Mikrolab Aarhus A/S apparatus
Figure BDA0002700660770000081
Denmark)评估抗氧化能力。在一个实施方案中，将含有脂肪或油(例如多不饱和油)的乳液、悬浮液和/或粉暴露于高温和高氧压。在一个实施方案中，在80℃和5巴初始氧压下评估抗氧化性。在一个实施方案中，确定诱导期(IP，h)，其与样品的氧化稳定性相关。更长的IP(h)表明样品在储存过程中更抗氧化(在氧存在下更稳定)。其它测量脂质氧化的方法包括例如过氧化物值、对氨基苯甲醚值和挥发物(例如醛，如丙醛和EE-2,4-庚二烯醛，其是来自ω-3脂肪酸氧化的次级氧化产物)的顶空分析，以及储存样品中各不饱和脂肪酸(例如EPA和DHA)百分比的变化。在一个实施方案中，氧化不必相对于溶剂可提取的游离脂肪(即游离脂肪水平不是IP或粉中油对氧化的敏感性的指标)。
如本文所用，“温度降解”或类似短语是指生物活性(例如脂肪酸)或生物活性前体由于暴露于低温或高温而降解。在一个实施方案中，在如本文所述的生产乳液、悬浮液或粉的方法期间，通过将生物活性物或生物活性前体结合至蛋白质或碳水化合物来降低对温度降解的敏感性。
如本文所用，“水分降解”或类似短语是指生物活性(例如脂肪酸)或生物活性前体由于暴露于低或高水分而降解。在一个实施方案中，在如本文所述的生产乳液、悬浮液或粉的方法期间，通过将生物活性物或生物活性前体结合至蛋白质或碳水化合物来降低对水分降解的敏感性。
如本文所用，术语“pH降解”或类似短语是指生物活性物(例如脂肪酸)或生物活性前体由于暴露于低或高pH而降解。在一个实施方案中，低pH是pH<7。在一个实施方案中，高pH是pH>7。在一个实施方案中，在如本文所述的生产乳液、悬浮液或粉的方法期间，通过生物活性物或生物活性前体(例如植物营养物)与蛋白质或碳水化合物的结合来降低对pH降解的敏感性。
如本文所用，术语“光降解”或类似短语是指由于暴露于光下，生物活性(例如类胡萝卜素)或生物活性前体的降解。在一个实施方案中，在如本文所述的生产乳液、悬浮液或粉的方法期间，通过将生物活性物或生物活性前体结合至蛋白质或碳水化合物来降低对光降解的敏感性。
如本文所用，“包埋(entrapment)”或“包埋(entrapped)”或“包埋(entrapping)”是指生物活性物或生物活性前体(例如植物营养物)与如本文所述的乳液、悬浮液或包封剂基质的一种或多种组分结合或分配。在一个实施方案中，所述组分是碳水化合物或蛋白质。在一个实施方案中，包埋增加了生物活性物或生物活性前体对氧、温度、pH、水分和光降解中的一种或多种的耐受性。
如本文所用，“包封(encapsulation)”或“包封(encapsulated)”是指在生物活性物或生物活性前体周围形成功能屏障，例如在本发明的乳液、悬浮液或包封基质中的脂质和脂溶性组分，或通过本发明的方法产生的脂质和脂溶性组分。在一个实施方案中，包封增加了生物活性物或生物活性前体对氧、温度、pH、水分和光中的一种或多种的降解的耐受性。
如本文所用，“生物体的物种”是指属的亚类。在一个实施方案中，“生物体的物种”是指由能够在自身之间繁殖的个体组成的一组生物体。
如本文所用，“多酚”是指包括多于一个酚羟基的化合物。在一个实施方案中，多酚选自以下的一种或多种：花青素、二氢查耳酮、黄烷-3-醇、黄烷酮、黄酮、黄酮醇和异黄酮、姜黄色素、白藜芦醇、苯甲酸、苯基乙酸、羟基肉桂酸、香豆素、萘醌、口山酮、茋、查耳酮、单宁、酚酸和儿茶素(例如表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECg)、表儿茶素(EC)及其几何异构体没食子儿茶素没食子酸酯(GCg)、没食子儿茶素(GC)、儿茶素没食子酸酯(Cg)和儿茶素。
如本文所用，“生物活性有机含硫化合物”包括含硫化合物，例如芥子油苷、异硫氰酸酯和蒜属化合物(例如，aliin、大蒜素、阿焦烯、烯丙基丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物、s-烯丙基半胱氨酸、乙烯基二噻烯(vinyldithiines)、S-烯丙基巯基半胱氨酸)。
生物质
本发明至少部分涉及用于从包括来自单一(第一)物种的生物体的蛋白质和碳水化合物的生物质生产乳液、悬浮液、粉的方法或由其生产的产物。因此，蛋白质和碳水化合物在用于本发明的方法之前没有彼此分离。
而在一些实施方案中，可以使用全部生物质，在其它实施方案中，已经处理生物质以除去生物质的一种或多种组分或降低生物质的一种或多种组分的浓度。在一个实施方案中，少于约50％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约40％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约30％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约20％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约10％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约5％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，少于约1％的生物质在用于本发明的方法之前被除去。在一个实施方案中，在用于本发明的方法之前没有除去生物质。
在一个实施方案中，干燥或浓缩生物质以除去水。在一个实施方案中，干燥除去生物质重量的约60％至约90％。在一个实施方案中，干燥除去生物质重量的约70％至约90％。在一个实施方案中，干燥除去生物质重量的约80％至约90％。
在一个实施方案中，生物质仅包括来自单一物种的生物体的蛋白质和碳水化合物(没有来自其他物种的生物体的蛋白质或碳水化合物)。在一个实施方案中，生物质还包括来自一种或多种其他物种的生物体(例如，第二、第三、第四、第五等物种的生物体)的蛋白质和碳水化合物。与来自第一物种的生物体的生物质一样，来自其他物种的蛋白质和碳水化合物在用于本发明的方法之前没有彼此分离。在一个实施方案中，生物质进一步包括来自第二物种的生物体的蛋白质和碳水化合物。在一个实施方案中，生物质进一步包括来自第二和第三物种的生物体的蛋白质和碳水化合物。在一个实施方案中，生物质进一步包括来自第二第三和第四物种的生物体的蛋白质和碳水化合物。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括尚未与生物质和/或另外的生物质的蛋白质和碳水化合物分离的纤维。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括尚未从生物质和/或另外的生物质的蛋白质和碳水化合物中分离的儿茶素。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质具有1：1至1：10.5的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质具有约1：4.5至4：1的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质具有约1：2.5至2：1的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质具有约1：2.4的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质另外包括纤维。在一个实施方案中，生物质或另外的生物质具有如表1中所示的蛋白质与碳水化合物比例。
在一个实施方案中，生物质或另外的生物质是绿茶叶粉(抹茶)。在一个实施方案中，抹茶，(～2％水分)包括基于干重约35.5％的蛋白质、约39.6％的碳水化合物、约5.9％的脂肪和约6.0％的脂肪。在一个实施方案中，抹茶包括约13.1％儿茶素。
在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入蛋白质以形成约1：1至1：10.5的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入蛋白质以形成约1：4.5至4：1的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入蛋白质以形成约1：2.5至2：1的蛋白质与碳水化合物比例。
表1：选择生物质的蛋白质(P)与碳水化合物(CHO)的比例。
Figure BDA0002700660770000111
在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入碳水化合物以形成约1：1至1：10.5的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入碳水化合物以形成约1：4.5至4：1的蛋白质与碳水化合物比例。在一个实施方案中，向生物质和/或另外的生物质中加入碳水化合物以形成约1：2.5至2：1的蛋白质与碳水化合物比例。
在一个实施方案中，生物质可以是整个生物体或其一个或多个部分。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括新鲜/原料或干燥形式的全部生物质(或其片)。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是新鲜/原料。在一个实施方案中，如本文所述预处理生物质和/或另外的生物质。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是如本文所述的适于从生物质和/或另外的生物质除去一种或多种组分的提取或分离方法的产物。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括生物活性物。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括生物活性前体。
在一个实施方案中，将生物活性物和/或生物活性前体加入生物质或另外的生物质中。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是真核生物。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是原核生物(例如藻类)。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质来自植物界或真菌界。
该材料可以是植物或真菌的任何部分，包括相关的(但不限于)叶、茎、花、小花、种子和根中的一种或多种。
在一个实施方案中，植物是十字花科(Brassicaceae)。如本文所用，“十字花科”是指家族十字花科(Family Brassicaceae)的成员，通常称为芥菜(mustard)、十字花科(cruicifer)或卷心菜科(cabbage)。
在一个实施方案中，十字花科选自芸苔属(genus Brassica)或碎米荠属(Cardamine)。在一个实施方案中，芸苔属选自以下中的一种或多种：巴利阿里芸苔(Brassica balearica)、伊索比亚芥(Brassica carinata)、长芥(Brassica elongate)、地中海包心菜(Brassica fruticulosa)、芥菜(Brassica hilarionis)、印度芥菜(Brassicajuncea)、欧洲油菜(Brassica napus)(油菜籽或低芥酸菜籽)、塌棵菜(Brassicanarinosa)、黑芥菜(Brassica nigra)、甘蓝(Brassica oleracea)、小松菜(Brassicaperviridis)、芜菁(Brassica rapa)、褐芥(Brassica rupestris)、芥菜(Brassicasepticeps)和亚洲芥(Brassica tournefortii)。
在一个实施方案中，芸苔属(Brassica)是甘蓝(Brassica oleracea)。
在一个实施方案中，所述芸苔属是欧洲油菜(油菜籽或低芥酸菜籽)。
在一个实施方案中，芸苔属选自以下中的一种或多种：甘蓝变种甘蓝(野生卷心菜)(Brassica oleracea variety oleracea(wild cabbage))、甘蓝变种头状花序(卷心菜)(Brassica oleracea variety capitate(cabbage))、青菜(小白菜)(Brassica rapasubsp.chinensis(bok choy))、白菜(娃娃菜)(Brassica rapa subsp.pekinensis(napacabbage))、芜菁甘兰(洋蔓菁)(Brassica napobrassica(rutabaga))、芜菁(蔓菁)(Brassica rapa var.rapa(turnip))、芥蓝(芥兰)(Brassica oleracea varietyalboglabra(kai-lan))、绿甘蓝(羽衣甘蓝)(Brassica oleracea variety viridis(collard greens))、高茎甘蓝(饲用甘蓝)(Brassica oleracea variety longata(jerseycabbage))、观赏羽衣甘蓝(观赏甘蓝)(Brassica oleracea variety acephala(ornamental kale))、皱叶甘蓝(羽衣甘蓝)(Brassica oleracea variety sabellica(kale))、泽西羽衣甘蓝(恐龙羽衣甘蓝)(Brassica oleracea variety palmifolia(lacinato kale))、甘蓝(永续甘蓝)(Brassica oleracea variety ramose(perpetualkale))、髓茎甘蓝(髓甘蓝)(Brassica oleracea variety medullosa(marrow cabbage))、甘蓝(Brassica oleracea variety costata(tronchuda kale))、抱子甘蓝(孢子甘蓝)(Brassica oleracea variety gemmifera(brussels sprout))、球茎甘蓝(苤蓝)(Brassica oleracea variety gongylodes(kohlrabi))、花茎甘蓝(西兰花)(Brassicaoleracea variety italica(broccoli))、花椰菜(菜花、罗马花椰菜、西兰花)(Brassicaoleracea variety botrytis(cauliflower,Romanesco broccoli,broccoli ditorbole))、甘蓝(球花甘蓝)(Brassica oleracea variety botrytis x italica(broccoflower))，和甘蓝(小西兰花)(Brassica oleracea variety italica×alboglabra(Broccolini))。在一个实施方案中，甘蓝是羽衣甘蓝。
在一个实施方案中，芸苔属是甘蓝，意大利品种(西兰花)。
在一个实施方案中，芸苔属是花椰菜(菜花)(Brassica oleracea varietybotrytis(cauliflower))。
在一个实施方案中，芸苔属是抱子甘蓝(孢子甘蓝)(Brassica oleracea varietygemmifera(brussels sprout))。
在一个实施方案中，十字花科选自以下的一种或多种：碎米荠(野荠菜)(Cardamine hirsuta(bittercress))、白蜀葵(屈曲花)(Iberis sempervirens(candytuft))、新疆野生油菜(田芥菜)(Sinapis arvensis(charlock))、辣根(马萝卜)(Armoracia rusticana(horseradish))、凯尔盖朗甘蓝(凯尔盖朗卷心菜)(Pringleaantiscorbutica(Kerguelen cabbage))、遏蓝菜(菥蓂)(Thlaspi arvense(pennycress))、萝卜(莱菔)(Raphanus raphanistrum subsp.sativus(radish))、芸芥(芝麻菜)(Erucasativa(rocket))、含生草(回生草)(Anastatica hierochuntica(rose of Jericho))、海甘蓝(海芥兰)(Crambe maritima(sea kale))、滨海卡克勒(海芥属)(Cakile maritima(sea rocket))、荠(荠菜)(Capsella bursa-pastoris(shepherd’s purse))、香雪球(sweet alyssum)、阿拉伯芥(拟南芥)(Arabidopsis thaliana(thale cress))、豆瓣菜(水田芥)(Nasturtium officinale(watercress))、白芥(白芥菜)(Sinapis alba(whitemustard))、西鲱花(瘭疽草)(Erophila verna(whitlow grass))、野芥菜(野莱菔)(Raphanus raphanistrum(wild radish))、欧洲菘蓝(菘蓝)(Isatis tinctoria(woad))，和西洋菜(蔊菜)(Nasturtium microphyllum(yellow cress))。
在一个实施方案中，植物是大麻科(Cannabis)。在一个实施方案中，大麻科(Cannabis)是大麻(麻类植物)(Cannabis sativa(hemp))。
在一个实施方案中，植物是水果或蔬菜。在一个实施方案中，果实选自以下中的一种或多种：简单果实、集合果实和多重果实。在一个实施方案中，水果或蔬菜来自伞形科、天冬门科、棕榈科、桃金娘科、蔷薇科、芭蕉科、杜鹃花科、虎耳草科、葫芦科、茄属、山柑科、五福花科、葡萄科、芸香科、猕猴桃科、无患子科、漆树科、桑科、木犀科、仙人掌科、西番莲科、凤梨科、仙人掌科、千屈菜科、蓼科、葫芦科、酢浆草科和苏木科。
在一个实施方案中，伞形科是胡萝卜。
在一个实施方案中，天冬门科是芦笋。
在一个实施方案中，蓼科选自以下中的一种或多种：荞麦、酸模和大黄。
在一个实施方案中，葫芦科选自以下中的一种或多种：黄瓜、南瓜、笋瓜和西葫芦。
在一个实施方案中，所述果实选自以下的一种或多种：苹果、杏、鳄梨、香蕉、越桔、黑莓、黑醋栗、蓝莓、椰子、醋栗、樱桃、番荔枝、小柑橘、云莓、洋李子、榴莲、接骨木果、无花果、费约果、鹅莓、葡萄、葡萄柚、番石榴、越橘、菠萝蜜、蒲桃(jambul)、枣、猕猴桃、金橘、柠檬、酸橙、枇杷、荔枝、柑橘、芒果、甜瓜、哈密瓜、蜜露、西瓜、油桃、橙、西番莲、木瓜、桃、梨、李子、菠萝、石榴、柚子、紫罗汉果类、覆盆子、红毛丹、红醋栗、萨摩蜜橘、杨桃、草莓、橘子、番茄和丑橘。
在一个实施方案中，植物是菊科(Compositae)。在一个实施方案中，菊科选自以下中的一种或多种：洋蓟(artichoke)、甘菊(chamomile)、菊苣(chicory)、蒲公英(dandelion)、苦苣(endive)、菊芋(jerusalem artichoke)、莴苣(lettuce)、长叶莴苣(romaine)、红花婆罗门参(safflower salsify)和向日葵(sunflower)。
在一个实施方案中，植物是苋科/藜科。在一个实施方案中，苋科/藜科植物选自以下中的一种或多种：苋菜、甜菜、牛皮菜、藜、藜麦、菠菜和甜菜。
在一个实施方案中，植物是锦葵科。在一个实施方案中，锦葵科选自以下的一种或多种：可可、棉花和秋葵。
在一个实施方案中，植物来自石蒜科。在一个实施方案中，石蒜科来自葱亚科。在一个实施方案中，葱亚科来自葱属。在一个实施方案中，葱属选自以下中的一种或多种：大蒜(蒜)(Allium sativum(garlic))、洋葱(葱)(Allium cepa(onion))、大头蒜(青蒜)(Allium ampeloprasum(leeks))、北葱(细香葱)(Allium schoenoprasum(chives))和爱莎罗特(葱)(Allium oschaninii(shallot))。
在一个实施方案中，葱属是大蒜(蒜)。
在一个实施方案中，植物来自豆科。在一个实施方案中，豆科是大豆苜蓿、豆子、角豆、鹰嘴豆、青豆、豆薯、扁豆、豌豆、雪豆和花生。
在一个实施方案中，豆科是雪豆。
在一个实施方案中，植物是谷类。在一个实施方案中，谷物是古代粮食。在一个实施方案中，谷物选自以下中的一种或多种：稻、玉米、小麦、黑小麦、大麦、小米、高粱、斯佩尔特小麦、燕麦、青麦、干小麦、蜀黍、法老小麦、单粒小麦、埃塞俄比亚画眉草、二粒小麦和/或荞麦。
在一个实施方案中，植物来自棕榈科。在一个实施方案中，棕榈科是椰树。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是椰子核果。
在一个实施方案中，植物是草。在一个实施方案中，草来自禾本科。在一个实施方案中，草选自以下的一种或多种：竹子、柠檬草、甘蔗、玉米和冰草。
在一个实施方案中，植物来自茶树。在一个实施方案中，茶树是绿茶叶(抹茶)。
在一个实施方案中，真菌是香菇。在一个实施方案中，真菌来自牛肝菌科(Boletaceae)、鸡油菌科(Cantharellaceae)、口蘑科(Tricholomataceae)、丝膜菌科(Cortinariaceae)、鸡油菌科(Cantharellaceae)、薄孔菌科(Meripilaceae)、平盘菌科(Discinaceae)、侧耳科(Pleurotaceae)、口蘑科(Tricholomataceae)和块菌科(Tuberaceae)。
在一个实施方案中，真菌选自以下中的一种或多种：美味牛肝菌(Boletusedulis)、鸡油菌(Cantharellus cibarius)、鸡油菌(Cantharellus tubaeformis)、裸杯伞(Clitocybe nuda)、丝膜菌(Cortinarius caperatus)、灰喇叭菌(Craterelluscornucopioides)、灰树花(Grifola frondosa)、猴头菌(Hericium erinaceus)、美味齿菌(Hydnum repandum)、松乳菇(Lactarius deliciosus)、羊肚菌(Morchella conicavar.deliciosa)、宽圆羊肚菌(Morchella esculenta var.rotunda)、糙皮侧耳(Pleurotusostreatus)、松茸(Tricholoma matsutake)、冬松露(Tuber brumale)、印度松露(Tuberindicum)、大孢松露(Tuber macrosporum)、柴胡松露(Tuber mesentericum)和黑夏松露(Tuber aestivum)。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质不是动物生物质或动物生产的产物。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质不是禽类。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质不是骨头或骨髓。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质不是动物乳。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质不是乳、脱脂乳或纯化乳蛋白和碳水化合物。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质是不符合化妆品零售标准或不再适合于新鲜销售但仍可食用的植物或真菌材料。
生物活性物
如本文所用，“生物活性物”是指具有生物效应的物质。在一个实施方案中，所述生物活性物对由氧(氧化)、温度、pH、水分和光中的一种或多种引起的降解敏感。在一个实施方案中，所述生物活性物是油或油溶性物质。
在一个实施方案中，生物活性物选自以下的一种或多种：脂肪酸、异硫氰酸酯、槲皮素、大蒜素、阿焦烯、维生素A、维生素D、维生素E、生育酚、生育三烯酚、维生素K、β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、玉米黄质、豆甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇、抗氧化剂、辅酶Q10、虾青素、大麻素、大麻二酚和多酚。
在一个实施方案中，所述生物活性物选自以下中的一种或多种：槲皮素、大蒜素和酚酸。在一个实施方案中，所述生物活性物是大蒜素。在一个实施方案中，所述生物活性物是阿焦烯。
在一个实施方案中，所述生物活性物是多酚。在一个实施方案中，所述多酚选自以下中的一种或多种：儿茶素、黄酮醇、黄烷醇、花色素、白藜芦醇和/或姜黄色素。本文进一步描述了多酚。
在一个实施方案中，生物活性物是异硫氰酸酯。如本文所用，“异硫氰酸酯”是指具有通用结构R-N＝C＝S的含硫植物化学品，其为黑芥子酶活性对芥子油苷及其生物活性衍生物的产物。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是萝卜硫素(1-异硫氰基-4-甲基亚硫酰基丁烷)。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是异硫氰酸酯(3-异硫氰基-1-丙烯)。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是异硫氰酸苄酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是异硫氰酸苯乙酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是3-丁烯基异硫氰酸酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是5-乙烯基-1,3-恶唑烷-2-硫酮。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是3-(甲硫基)丙基异硫氰酸酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是3-(甲基亚磺酰基)-丙基异硫氰酸酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是4-(甲硫基)-丁基异硫氰酸酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是1-甲氧基吲哚-3-甲醇异硫氰酸酯。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是异硫氰酸2-苯乙酯(也称为异硫氰酸苯乙酯或PEITC)。在一个实施方案中，异硫氰酸酯是iberin。
在一个实施方案中，当生物活性物是异硫氰酸酯时，生物质和/或另外的生物质还包括一种或多种异硫氰酸酯生物活性衍生物或其低聚物。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是本文所述的任何异硫氰酸酯的衍生物。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是萝卜硫素的衍生物。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是吲哚-3-甲醇。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是甲氧基-吲哚-3-甲醇。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是抗坏血酸原。在一个实施方案中，异硫氰酸酯生物活性衍生物是新抗坏血酸原。
在一个实施方案中，生物活性物是生物质的组分。在一个实施方案中，生物活性物是另外的生物质的组分。在一个实施方案中，生物活性物不存在于生物质或另外的生物质中，并且在制备如本文所述的水性混合物之前、期间或之后加入。在一个实施方案中，生物活性物在如本文所述的方法的步骤ii)之前、期间或之后加入。在一个实施方案中，生物活性物在如本文所述的方法的步骤iii)之前或期间加入。在一个实施方案中，生物活性物是步骤ii)的油或其组分。在一个实施方案中，生物活性物是在步骤ii)中将油加入水性混合物悬浮液之前加入油中的组分。在一个实施方案中，生物活性物是在步骤ii)之前或期间注入油中的组分。在一个实施方案中，在步骤i)中或之后或在步骤ii)中形成生物活性物。
在一个实施方案中，生物活性物是合成产生的生物活性物。在一个实施方案中，生物活性物是合成产生的异硫氰酸酯。在一个实施方案中，生物活性物是合成产生的萝卜硫素。
在一个实施方案中，当生物质和/或另外的生物质包括：i)十字花科，生物活性物是异硫氰酸酯；ii)十字花科，并且生物活性前体是芥子油苷；iii)洋葱，生物活性物是槲皮素、大蒜素和酚酸中的一种或多种；iv)大蒜，生物活性物是大蒜素和阿焦烯中的一种或多种；或v)含有多酚的水果和/或蔬菜。在一个实施方案中，十字花科是西兰花，异硫氰酸酯是萝卜硫素。在一个实施方案中，在如本文所述的方法的步骤ii)或步骤iii)中将来自生物质和/或另外的生物质的生物活性物注入油中。
在一个实施方案中，生物活性物是植物营养物。如本文所用，“植物营养物”是指与积极健康效应相关的植物衍生物质。在一个实施方案中，如本文所述的生物质和/或另外的生物质包括一种或多种植物营养物。在一个实施方案中，植物营养素选自以下的一种或多种：甜菜色素、吲哚、有机硫化物、苯酚、萜烯、三萜、类胡萝卜素、类姜黄素、类黄酮、芥子油苷、异硫氰酸酯、羟基肉桂酸、木脂素、脂质、茋、硫化物、生育酚、叶黄素、玉米黄素、异黄酮、类黄酮、香豆酸、番茄红素、鞣花酸、咖啡酰奎宁酸、羟基苯甲酸、橙皮素、黄酮醇、萜类化合物、苯酞、黄酮醇、蒜素槲皮素、硫化物、花青苷、白藜芦醇和花黄素。
在一个实施方案中，植物营养物是有色的植物营养物。在一个实施方案中，所述有色的植物营养素选自以下的一种或多种：花色素苷、叶黄素、玉米黄质、番茄红素、类胡萝卜素和/或花黄素。
在一个实施方案中，所述生物活性物是脂肪酸。如本文所用，术语“脂肪酸”是指通常具有饱和或不饱和的长脂族尾的羧酸(或有机酸)。通常脂肪酸具有长度为至少4个碳原子(C4)或至少8个碳原子(C8)，更优选长度为至少12个碳原子的碳-碳键合链。本发明优选的脂肪酸具有18-22个碳原子的碳链(C18、C20、C22脂肪酸)，更优选20-22个碳原子(C20、C22)，最优选22个碳原子(C22)。大多数天然存在的脂肪酸具有偶数个碳原子，因为它们的生物合成涉及具有两个碳原子的乙酸酯。脂肪酸可以是游离状态(未酯化)或酯化形式，例如甘油三酯、二酰基甘油酯、单酰基甘油酯、酰基-CoA(硫代酯)结合形式或其它结合形式的部分。脂肪酸可以酯化为磷脂，例如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇或双磷脂酰甘油形式。在一个实施方案中，脂肪酸被酯化为甲基或乙基，例如C20或C22多不饱和脂肪酸的甲酯或乙酯。优选的脂肪酸是二十碳三烯酸、二十二碳五烯酸或二十二碳六烯酸的甲酯或乙酯，或二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的混合物，或二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的混合物，或二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸的混合物。
在一个实施方案中，脂肪酸是多不饱和脂肪酸。如本文所用，“多不饱和脂肪酸”是指在其主链中含有多于一个双键的脂肪酸。在一个实施方案中，多不饱和脂肪酸选自以下中的一种或多种：ω-3、ω-6或ω-9。在一个实施方案中，ω-3选自以下的一种或多种：十六碳三烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十一碳五烯酸、二十二碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十四碳五烯酸和二十四碳六烯酸。在一个实施方案中，生物活性物是二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸中的一种或多种或全部。在一个实施方案中，ω-6选自以下的一种或多种：亚油酸、γ-亚麻酸、二十碳二烯酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳二烯酸、肾上腺酸、二十二碳五烯酸、二十四碳四烯酸和二十四碳五烯酸。在一个实施方案中，ω-9油选自以下中的一种或多种：油酸、二十碳烯酸、二十碳三烯酸、芥酸和神经酸。在一个实施方案中，生物活性物是甘油三酯。
在一个实施方案中，生物活性物是油。
生物活性前体
在一个实施方案中，如本文所述的生物质和/或另外的生物质包括生物活性前体。在一个实施方案中，如本文所述将生物活性前体加入油中。
在一个实施方案中，生物活性前体是芥子油苷。如本文所用，“芥子油苷”是指至少在十字花科家族中发现的次级代谢物，其共享由β-D-吡喃葡萄糖残基组成的化学结构，所述β-D-吡喃葡萄糖残基经由硫原子连接至(Z)-N-羟肟酸硫酸酯，和如Halkier和Gershenzon(2006)所述的衍生自氨基酸的可变R基团。芥子油苷的实例在Halkier和Gershenzon(2006)和Agerbirk和Olsen(2012)中提供。芥子油苷的水解可以产生异硫氰酸酯、腈、环硫腈、硫氰酸盐和恶唑烷-2-硫酮。许多芥子油苷在植物对病虫害的防御机制中起作用。
芥子油苷储存在十字花科的储存部位。如本文所用，“储存位点”是十字花科中存在芥子油苷并且不存在黑芥子酶的位点。
如本文所用，“黑芥子酶(myrosinase)”也称为“硫葡糖苷酶(thioglucosidase)”，“黑芥子甙酶(sinigrase)”或“葡糖硫苷酶(sinigrinase)”是指参与植物防御机制的可裂解硫连接的葡萄糖的酶家族(EC 3.2.1.147)。黑芥子酶催化芥子油苷的水解，导致异硫氰酸酯的产生。黑芥子酶有时作为黑芥子颗粒储存在被称为黑芥子细胞的特定异形细胞的液泡中，但也已经在蛋白质体或液泡中报道，以及作为倾向于与膜结合的细胞质酶储存。
在一个实施方案中，如本文所述的预处理改善了黑芥子酶至产生异硫氰酸酯生物活性物的芥子油苷的接近性。如本文所用，“改善接近性”或“接近性被改善”是指增加芥子油苷对黑芥子酶的可用性以允许产生异硫氰酸酯。在一个实施方案中，通过从芥子油苷储存位点释放芥子油苷来改善接近性。在一个实施方案中，芥子油苷储存位点被机械破裂(即通过浸渍)。在一个实施方案中，通过允许黑芥子酶进入芥子油苷储存位点来改善接近性。在一个实施方案中，通过从黑芥子细胞中释放黑芥子酶来改善接近性。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约10％至约90％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约20％至约80％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约30％至约70％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约40％至约60％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约45％至约55％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约10％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约20％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约30％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约40％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约50％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约60％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约70％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约80％的芥子油苷。在一个实施方案中，从芥子油苷储存位点释放约90％的芥子油苷。
在一个实施方案中，芥子油苷选自以下中的一种或多种：脂族、吲哚或芳族芥子油苷。
在一个实施方案中，该脂肪族芥子油苷选自以下中的一种或多种：萝卜硫苷(glucoraphanin)(4-甲基亚磺酰丁基或4-甲基亚磺酰基丁烯基硫代葡萄糖苷(glucorafanin))、黑芥子甙(sinigrin)(2-丙烯基)、葡萄糖芫蓄芥素(gluconapin)(3-丁烯基)、芸苔葡萄糖苷(glucobrassicanapin)(4-戊烯基)、前告伊春(progoitrin)(2(R)-2-羟基-3-丁烯基)、表原告依春(epiprogoitrin)(2(S)-2-羟基-3-丁烯基)、2-羟基-4-戊烯基硫苷(gluconapoleiferin)(2-羟基-4-戊烯基)、glucoibervirin(3-甲基硫代丙基)、芝麻菜苷(glucoerucin)(4-甲硫基丁基)、4-甲硫基-3-丁烯基硫苷(dehydroerucin)(4-甲硫基-3-丁烯基)、屈曲花苷(glucoiberin)(3-甲基亚磺酰基丙基)、萝卜苷(glucoraphenin)(4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基)、葡萄糖庭荠素(glucoalyssin)(5-甲基亚磺酰基戊烯基)，和葡萄糖糖芥苷(glucoerysolin)(3-甲基磺酰基丁基,4-巯基丁基)。
在一个实施方案中，吲哚芥子油苷选自以下中的一种或多种：芸苔葡糖硫苷(3-吲哚基甲基)、4-羟基芸苔葡糖硫苷(4-羟基-3-吲哚基甲基)、4-甲氧基芸苔葡糖硫苷(4-羟基-3-吲哚基甲基)和新芸苔葡糖硫苷(1-甲氧基-3-吲哚基甲基)。
在一个实施方案中，吲哚芥子油苷选自以下中的一种或多种：金莲葡糖硫苷(苄基)和豆瓣菜苷(2-苯乙基)。
在一个实施方案中，芥子油苷选自以下中的一种或多种：苄基芥子油苷、烯丙基芥子油苷和4-甲基亚硫酰基丁基。在一个实施方案中，芥子油苷是萝卜硫苷(4-甲基亚磺酰丁基)。在一个实施方案中，芥子油苷是芸苔葡糖硫苷(3-吲哚基甲基)。
在一个实施方案中，在如本文所述的生产粉的方法的步骤i)、ii)和或iii)之前或期间将芥子油苷转化成异硫氰酸酯。
在一个实施方案中，生物活性前体是生物质的组分。在一个实施方案中，生物活性前体是另外的生物质的组分。在一个实施方案中，生物活性物前体不存在于生物质或另外的生物质中，并且在制备如本文所述的水性混合物之前、期间或之后加入。在一个实施方案中，生物活性物前体在如本文所述的方法的步骤ii)之前、期间或之后加入。在一个实施方案中，生物活性物前体在如本文所述的方法的步骤iii)之前或期间加入。在一个实施方案中，在随后的步骤ii)中，所述生物活性前体是油或其组分。在一个实施方案中，生物活性前体是在步骤ii)中将油加入到的水性混合物中之前加入到油中的组分。在一个实施方案中，生物活性前体是在步骤ii)之前或期间注入油中的组分。
预处理
在一个实施方案中，如本文所述的生物质和/或另外的生物质被预处理。如本文所用，“预处理”或“预处理的”或“经预处理的”是指加工生物质和/或另外的生物质以将材料破碎成较小的组分，除去组分(例如除去不适于摄入或提取用于不同用途的特定组分(例如油)的特定组分)或修饰生物质和/或另外的生物质的组分。在一个实施方案中，修饰组分包括例如产生生物活性物，或产生寡糖或多糖。在一个实施方案中，预处理不改变生物质或其它生物质中蛋白质与碳水化合物的比例。
在一个实施方案中，预处理包括以下的一种或多种：i)加热；ii)浸渍；iii)微波处理；iv)暴露于低频声波(超声)；v)脉冲电场处理；vi)静态高压；vii)挤出；viii)酶处理；ix)发酵；x)提取或分离方法；xi)干燥。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质在基于燃料的加热系统、基于电的加热系统(即烘箱或欧姆加热)、射频加热、高压热处理、超高温(UHT)处理设备中、在干馏器或基于蒸汽的加热系统(间接或直接应用蒸汽)中加热。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质在烘箱、水浴、生物反应器、炉子、水热烫机或蒸汽热烫机中加热。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质经由高压热加热来加热。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质经由欧姆加热来加热。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质经由射频加热来加热。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质经由高压热处理来加热。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质放置在用于高压热处理的密封包装或容器中。
在一个实施方案中，预处理包括将生物质和/或另外的生物质加热至约50℃至约140℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约55℃至约70℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约60℃至约70℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约65℃至约70℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约70℃至约140℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约80℃至约130℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约90℃至约120℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约100℃至约110℃。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约75℃持续约2分钟。在一个实施方案中，加热包括将生物质和/或另外的生物质加热至约100℃持续约30分钟。在一个实施方案中，预处理包括在上述温度范围的较低端加热较长的一段时间或在上述温度范围的较高端处理较短的一段时间。
在一个实施方案中，加热包括汽蒸生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至约100℃的温度。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少约30秒。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少1分钟。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少2分钟。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少3分钟。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少4分钟。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至少5分钟。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质汽蒸至约100℃的温度持续30分钟。
在一个实施方案中，加热包括生物质和/或另外的生物质的超高温(UHT)处理。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质在约140℃的温度下进行UHT处理。
在一个实施方案中，加热包括干馏生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质在约116℃至约130℃的温度下干馏。
在一个实施方案中，预处理包括浸渍生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，用切碎机、搅拌机、胶体磨、研磨机或粉碎机将生物质和/或另外的生物质浸渍。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有2mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有1mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有0.5mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有0.25mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有0.1mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有0.05mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质浸渍，使得生物质和/或另外的生物质的至少80％具有0.025mm或更小的尺寸。在一个实施方案中，在浸渍期间加热生物质和/或另外的生物质。在一些实施方案中，加热促进生物活性前体转化成生物活性物，例如萝卜硫素和阿焦烯。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约25℃至约80℃的温度。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约40℃至约70℃的温度。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约50℃至约70℃的温度。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约60℃至约70℃的温度。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约70℃的温度持续约2分钟至约5分钟。在一个实施方案中，在浸渍期间将生物质和/或另外的生物质加热至约30℃至约80℃的温度持续约1至约5小时。
在一个实施方案中，预处理包括加热和浸渍生物质和/或另外的生物质。
本领域技术人员将理解，“微波(microwave)”或“微波处理(microwaving)”通过使微波辐射穿过物质来加热物质，如生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，预处理包括微波处理生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质在消费者微波或工业微波中预处理。在一个实施方案中，工业微波是连续微波系统，例如但不限于MIP 11工业微波连续蒸煮(铁氧体微波技术)。在一个实施方案中，预处理包括微波处理生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质在约0.9至约2.45GHz微波处理。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质微波处理至少30秒，或至少1分钟，或至少2分钟，或至少3分钟。在一个实施方案中，微波处理将生物质和/或另外的生物质的温度升高至约70℃至约80℃，优选地约76℃。
在一个实施方案中，预处理包括将生物质和/或另外的生物质暴露于低至中频超声波。在一个实施方案中，预处理包括将生物质和/或另外的生物质暴露于热超声(具有约50℃至约140℃的热的低至中频超声波)。在一个实施方案中，用工业规模的超声处理器产生超声波。在一个实施方案中，超声处理器是连续或分批超声处理器。在一个实施方案中，超声处理器例如但不限于UIP500hd或UIP4000(Hielscher，Ultrasonictechnology)。在一个实施方案中，超声波的频率为约20kHz至约600kHz。在一个实施方案中，将生物质和/或另外的生物质暴露于声波至少30秒，或至少1分钟，或至少2分钟，或至少3分钟，或约5分钟，或约6分钟，或约7分钟，或约7.5分钟，或约8分钟。
在一个实施方案中，预处理包括将生物质和/或另外的生物质暴露于脉冲电场处理。脉冲电场处理是包括施加短的高压脉冲的非热处理技术。脉冲诱导生物质和/或另外的生物质的细胞的电穿孔。在一个实施方案中，脉冲电场处理将生物质和/或另外的生物质加热至约50至约140℃的温度。在一个实施方案中，脉冲电场处理将生物质和/或另外的生物质加热至约70℃至约110℃的温度。在一个实施方案中，脉冲电场处理将生物质和/或另外的生物质加热至约80℃至约100℃的温度。在一个实施方案中，脉冲电场处理包括用约20至约80kV的电压脉冲处理生物质和/或另外的生物质。
在一个实施方案中，预处理包括静水压力。在一个实施方案中，静水压力包括用约100至约600MPa处理生物质和/或另外的生物质。
在一个实施方案中，预处理包括挤出。在一个实施方案中，挤出包括在物质通过孔排出之前，通常在高温和/或高压下通过筒对生物质或产品施加力。在一个实施方案中，在挤出期间施加的高温、高压和机械力改变材料的功能性质。在一个实施方案中，使用同向旋转双螺杆挤出机(MPF 18:25,APV Baker Ltd.,Peterborough,UK)或实验室规模的同向旋转和啮合双螺杆实验室挤出机(KDT30-II,Jinan Kredit Machinery Co.Ltd.,China)进行挤出工艺。在一个实施方案中，挤出工艺产生美拉德反应产物。
在一个实施方案中，预处理包括酶处理以将生物质和/或另外的生物质中的一种或多种组分转化为新的组分。例如，酶将简单糖转化为寡糖或多糖。在一个实施方案中，酶选自以下一种或多种：糖基转移酶，ii)糖苷酶，iii)果胶酶，iv)酯酶，v)，氧化还原酶，vi)蛋白酶，vii)果胶酶，viii)多聚半乳糖醛酸酶，ix)淀粉酶和x)支链淀粉酶。在一个实施方案中，糖基转移酶选自以下中的一种或多种或全部：i)葡聚糖蔗糖酶，ii)交替蔗糖酶，和iii)果糖基转移酶。在一个实施方案中，果糖基转移酶是例如果聚糖蔗糖酶和/或菊粉蔗糖酶。在一个实施方案中，氧化还原酶是甘露醇脱氢酶。
在一个实施方案中，预处理包括发酵生物质和/或另外的生物质。如本文所用，“发酵”是指生物质和/或另外的生物质被细菌(例如乳酸和/或乙酸细菌)生化分解。如本文所用，“乳酸菌(lactic bacteria)”或“乳酸细菌(lactic acid bacteria)”是产生乳酸作为碳水化合物发酵的主要产物的细菌。如本文所用，“乙酸菌(acetic bacteria)”或“乙酸细菌(acetic acid bacteria)”是产生乙酸作为碳水化合物发酵的终产物的细菌。
在一个实施方案中，乳酸和/或乙酸细菌产生催化甘露醇、寡糖和/或多糖产生的酶。
在一个实施方案中，乳酸菌来自以下一种或多种：乳杆菌属、明串珠菌属、片球菌属、乳球菌属、链球菌属、气球菌属、肉食杆菌属、肠球菌属、酒球菌属、芽孢乳杆菌属、四联球菌属、漫游球菌属和/或魏斯氏菌属。在一个实施方案中，乳酸菌选自以下中的一种或多种：肠膜明串珠菌、罗伊氏乳杆菌和/或加氏乳杆菌。
肠膜明串珠菌是革兰氏阳性附生细菌(McCleskey等人，1947)。肠膜明串珠菌还产生抗微生物蛋白细菌素，其在肉类工业中用作天然防腐剂。在一个实施方案中，乳酸菌是肠膜明串珠菌。在一个实施方案中，肠膜明串珠菌选自ATCC 8293(等同于NRRL B-1118)和/或Olvera等人(2007)研究的NRRL B-512F。
在一个实施方案中，乙酸细菌来自醋杆菌(Acetobacteraceae)。在一个实施方案中，醋杆菌是葡糖酸杆菌。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括发酵约8小时至约30小时。在一个实施方案中，发酵进行约8小时。在一个实施方案中，发酵进行约10小时。在一个实施方案中，发酵进行约15小时。在一个实施方案中，发酵进行约20小时。在一个实施方案中，发酵进行约24小时。在一个实施方案中，发酵进行约30小时。在一个实施方案中，发酵在约5至约7的pH下进行。在一个实施方案中，发酵在约5.3的pH下进行。在一个实施方案中，来自步骤i)的材料在发酵结束时处于约4的pH。在一个实施方案中，发酵在约24℃至约36℃的温度下进行。在一个实施方案中，发酵在约28℃至约32℃的温度下进行。在一个实施方案中，发酵在约30℃的温度下进行。
在一个实施方案中，预处理释放或帮助芥子油苷从芥子油苷储存位点释放和/或允许黑芥子酶进入生物质和/或另外的生物质中的芥子油苷储存位点。在一个实施方案中，预处理增加了芥子油苷对黑芥子酶的暴露，从而允许黑芥子酶将芥子油苷转化成异硫氰酸酯。
在一个实施方案中，预处理将约10％至约90％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约20％至约80％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约30％至约70％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约40％至约60％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约10％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约20％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约30％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约40％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约50％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约60％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约70％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约80％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。在一个实施方案中，预处理将约90％的芥子油苷转化成异硫氰酸酯。
在一个实施方案中，预处理包括用提取或分离方法处理生物质和/或另外的生物质以减少生物质和/或另外的生物质中一种或多种组分的量(例如，生物质可以是其中低芥酸菜子油已经除去或部分除去的低芥酸菜子粕)。在一个实施方案中，其它组分适用于生产其它产品或为生物质和/或另外的生物质的不可食用或味道差的组分。
在一个实施方案中，提取或分离方法用于从生物质中除去选自油、生物活性物或生物活性前体、多酚、类胡萝卜素或汁液的组分。在一个实施方案中，提取或分离方法产生可在本文所述的方法中用作生物质的低芥酸菜籽粕、坚果粕、大豆粉、椰子粕、棕榈仁粕、大麻油压饼、奇亚油籽饼或米糠。在一个实施方案中，提取或分离方法产生果渣(例如橄榄或苹果果渣)，其可用作本文所述方法中的生物质。在一个实施方案中，提取或分离方法可以包括从生物质中除去不可食用的组分(例如种子或茎)。在一个实施方案中，提取或分离方法可以包括研磨、切割、研磨、离心和/或过滤。
如本文所用，“降低的”意指用提取方法处理后的生物质或另外的生物质中的组分水平低于用提取方法处理前的生物质或另外的生物质中的组分水平。
在一个实施方案中，所述组分的水平从约5％降低至约90％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约5％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约10％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约15％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约20％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约30％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约40％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约50％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约60％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约70％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约80％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约90％。在一个实施方案中，所述组分的水平降低约100％。
在一个实施方案中，预处理包括干燥或部分干燥生物质。在一个实施方案中，干燥包括盘式干燥、滚筒干燥、辊式干燥、流化床干燥、冲击干燥、喷雾干燥、冻干(冷冻干燥或低温干燥)、薄膜带式干燥器、真空微波干燥、超声辅助干燥、挤出多孔化技术或本领域技术人员已知的任何其他方法。在一个实施方案中，预处理包括冻干生物质。在一个实施方案中，预处理包括加热然后冻干生物质。在一个实施方案中，预处理包括滚筒干燥。在一个实施方案中，预处理包括喷雾干燥。
本领域技术人员将理解预处理不包括单独纯化蛋白质和从生物质纯化碳水化合物。
在一个实施方案中，预处理不改变生物质中蛋白质：碳水化合物的比例。
水性混合物的制备
如本文所述，本发明的方法包括从来自包括蛋白质和碳水化合物的第一物种的生物体的生物质获得水性混合物。如本文所用，“水性混合物”是指包括生物质与水的混合物。在一个实施方案中，水性混合物还包括来自一种生物体(例如，第二、第三、第四、第五等)的至少一种另外的生物质的蛋白质和碳水化合物。在一个实施方案中，水性混合物是均化的。在一个实施方案中，水性混合物是悬浮液。
在一个实施方案中，所述方法还包括形成所述水性混合物。在一个实施方案中，通过在约40℃至约100℃的温度下将水与生物质和任选地另外的生物质合并来形成水性混合物。在一个实施方案中，通过在约40℃至约80℃的温度下将水与生物质和任选地另外的生物质合并来形成水性混合物。在一个实施方案中，通过在约45℃至约70℃的温度下将水与生物质和任选地另外的生物质合并来形成水性混合物。在一个实施方案中，通过在约55℃至约65℃的温度下将水与生物质和任选地另外的生物质合并来形成水性混合物。在一个实施方案中，通过在约60℃的温度下将水与生物质和任选的另外的生物质合并来形成水性混合物。
在一个实施方案中，水性混合物包括生物活性物和/或生物活性前体。在一个实施方案中，存在于生物质和/或另外的生物质中的生物活性物和/或生物活性前体以适于在如本文所述的方法的步骤ii)或iii)中注入油中的形式存在于水性混合物中。
在一个实施方案中，将适合于在该方法的步骤ii)或iii)中注入油中的生物活性物和/或生物活性前体加入该水性混合物中。
在一个实施方案中，在制备水性混合物之前或在如本文所述的方法的步骤i)或ii)中向生物质加入矿物。在一个实施方案中，矿物选自以下中的一种或多种：锌、钙、镁、硒和铬。
脂质
在一个实施方案中，本文所述的方法还包括加入脂质。如本文所用，“脂质”是指不溶于水但可溶于有机溶剂的长直链羧酸的酯。在一个实施方案中，脂质是可皂化的。在一个实施方案中，脂质是如本文所述的油。在一个实施方案中，脂质是如本文所述的蜡。
油
在一个实施方案中，本文所述的方法还包括向水性混合物中加入油。如本文所用，“油”是指疏水性和亲脂性的并且不与水混溶的粘性液体。在一个实施方案中，油易因氧化、温度、pH、水分和光中的一种或多种而劣化。在一个实施方案中，油是生物活性物。
在一个实施方案中，油包括如本文所述的脂肪酸。在一个实施方案中，油包括如本文所述的多不饱和脂肪酸。在一个实施方案中，多不饱和脂肪酸选自以下中的一种或多种：ω-3、ω-6或ω-9脂肪酸。在一个实施方案中，ω-3选自以下的一种或多种：十六碳三烯酸、α-亚麻酸、十八碳四烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十一碳五烯酸、二十二碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十四碳五烯酸和二十四碳六烯酸。在一个实施方案中，ω-6选自以下的一种或多种：亚油酸、γ-亚麻酸、二十碳二烯酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳二烯酸、肾上腺酸、二十二碳五烯酸、二十四碳四烯酸和二十四碳五烯酸。在一个实施方案中，ω-9选自以下中的一种或多种：油酸、二十碳烯酸、二十碳三烯酸、芥酸和神经酸。
在一个实施方案中，油是植物油。在一个实施方案中，油是蔬菜油。在一个实施方案中，油是动物油。在一个实施方案中，动物油是海产油或鱼油。
在一个实施方案中，油选自以下中的一种或多种：鱼油、磷虾油、海产品油、低芥酸菜籽油、向日葵油、鳄梨油、大豆油、琉璃苣油、月见草油、红花油、亚麻籽油、橄榄油、南瓜籽油、大麻籽油、小麦胚芽油、棕榈油、棕榈油精、棕榈仁油、椰子油、中链甘油三酯(MCT)和葡萄籽油。在一个实施方案中，低芥酸菜籽油包括一种或多种长链多不饱和脂肪酸，例如二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，其可以从编码所需的延伸酶和去饱和酶的转基因芸苔中获得(参见，例如WO2015/089587)。
在一个实施方案中，所述鱼油选自以下中的一种或多种：金枪鱼油、鲱鱼油、鲭鱼油、凤尾鱼油、沙丁鱼油、鳕鱼肝油和鲨鱼油。
在一个实施方案中，所述精油选自以下中的一种或多种：牛至油、薄荷油、罗勒油、迷迭香油、茶树油、时间油(time oil)、樟脑油、小豆蔻油、柑橘油、丁香油和/或藏红花油。
在一个实施方案中，油包括乳脂。
在一个实施方案中，油是橄榄油。
在一个实施方案中，油是向日葵油。
在一个实施方案中，油是低芥酸菜籽油。
在一个实施方案中，油包括一种或多种生物活性物和/或生物活性前体。因此，在一些实施方案中，油起生物活性载体的作用。在一个实施方案中，在将油加入到水性混合物中之前，将生物活性物和/或生物活性前体加入到油中。在一个实施方案中，在如本文所述的方法的步骤ii)中将生物活性物和/或生物活性前体注入油中。在一个实施方案中，在如本文所述的方法的步骤iii)中将生物活性物和/或生物活性前体注入油中。在一个实施方案中，生物活性物和/或生物活性前体来自如本文所述的生物质和/或另外的生物质。在一个实施方案中，生物活性物和/或生物活性前体不是来自生物质和/或另外的生物质。
蜡
在一个实施方案中，本文所述的方法还包括加入蜡。如本文所用，“蜡(wax)”或“蜡(waxs)”是长链饱和和不饱和脂肪酸与长链醇的酯。在一个实施方案中，长链饱和脂肪酸为C14至C26。在一个实施方案中，具有长链醇的不饱和脂肪酸为C16至C30。在一个实施方案中，蜡选自以下的一种或多种：小烛树蜡、巴西棕榈蜡、蜂蜡、米糠蜡、甘蔗蜡和向日葵蜡。
乳液或悬浮液的制备
如本文所用，“乳液”是指一种液体的液滴/颗粒在另一种液体中的分散体，其中它不可溶或不混溶。在一个实施方案中，液滴是分散在水性混合物中的油。在一个实施方案中，乳液为湿乳液。在一个实施方案中，将乳液干燥成粉。在一个实施方案中，将乳液挤出。在一个实施方案中，将乳液与粉基质一起挤出。
在一个实施方案中，通过如本文所述的方法产生的油滴为约0.2μm至约10μm。在一个实施方案中，通过如本文所述的方法产生的油滴为约1μm至约10μm。在一个实施方案中，通过如本文所述的方法产生的油滴为约2μm至约8μm。在一个实施方案中，通过如本文所述的方法产生的油滴为约2μm至约4μm。
在一个实施方案中，平均油滴尺寸为约0.2μm至约10μm。在一个实施方案中，平均油滴尺寸为约1μm至约10μm。在一个实施方案中，平均油滴尺寸为约2μm至约8μm。在一个实施方案中，平均油滴尺寸为约2μm至约4μm。
如本文所用，“悬浮液”是指一种物质的液滴/颗粒分散遍及另一种物质的大部分中。在一个实施方案中，液滴是分散在水性混合物中的油。
如本文所用，产生或形成乳液或悬浮液是指将物质包埋或包封在水性混合物中，减少物质暴露于降解。在一个实施方案中，物质是油。在一个实施方案中，物质是生物活性物。在一个实施方案中，生物活性物是脂肪酸。
在一个实施方案中，当油在如本文所述的步骤ii)中加入至水性混合物中时，加热油。在一个实施方案中，将油加热至约30℃至约80℃。在一个实施方案中，将油加热至约40℃至约70℃。在一个实施方案中，将油加热至约45℃至约65℃。在一个实施方案中，将油加热至约50℃至约60℃。
在一个实施方案中，在将油加入到水性混合物中之前，将生物活性物和/或生物活性前体加入到油中。在一个实施方案中，在将油加入到水性混合物中之前、期间或之后，将生物活性物和/或生物活性前体加入到水性混合物中。
在一个实施方案中，如步骤iii)中所述形成乳液或悬浮液包括将该油和水性混合物混合。在一个实施方案中，混合包括在高剪切下搅拌。在一个实施方案中，混合包括均化以获得小油滴尺寸。在一个实施方案中，通过均化产生的油滴的直径为约0.2μm至约10μm。在一个实施方案中，通过均化产生的油滴的直径为约1μm至约10μm。在一个实施方案中，通过均化产生的油滴的直径为约2μm至约8μm。在一个实施方案中，通过均化产生的油滴的直径为约2μm至约4μm。在一个实施方案中，均化形成均化乳液。
在一个实施方案中，在如本文所述的方法的步骤ii)或步骤iii)之前或期间，一种或多种生物活性物和/或生物活性前体存在于注入油中的水溶液中。
在一个实施方案中，通过如本文所述的方法包埋或包封在乳液或悬浮液中的生物活性物和/或生物活性前体比通过
Figure BDA0002700660770000261
包封方法(WO01/74175)包埋或包封的相同生物活性物和/或生物活性前体更不易于氧降解。
在一个实施方案中，乳液或悬浮液的油含量为约1％至约10％w/v。在一个实施方案中，乳液或悬浮液的油含量为约1.2％至约9％w/v。在一个实施方案中，乳液或悬浮液的油含量为约1.3％至约8％w/v。在一个实施方案中，乳液或悬浮液的油含量为约1.4％至约7％w/v。在一个实施方案中，乳液或悬浮液的油含量为约1.5％至约6％w/v。
在一个实施方案中，在乳液或悬浮液干燥后，约5％w/w至约50％的油被包埋或包封在生物质中。在一个实施方案中，在乳液或悬浮液干燥后，约10％w/w至约50％的油被包埋或包封在生物质中。在一个实施方案中，在乳液或悬浮液干燥后，约20％w/w至约40％的油被包埋或包封在生物质中。在一个实施方案中，乳液包括分散的益生菌。
后处理
在一个实施方案中，如本文所述的方法包括后处理乳液或悬浮液以降低微生物活性。
如本文所用，“后处理(post-treatment)”、“后处理的(post-treated)”或“后处理的(post-treating)”是指如本文所述的乳液或悬浮液的处理以减少微生物有机体。
本领域技术人员将理解，后处理是使微生物失活或改变产物特性(例如稳定性以及物理结构)的任何方法，包括例如热处理(包括巴氏灭菌)、微波处理、超声处理、高压处理、超高温处理(UHT)和干馏中的一种或多种。
在一个实施方案中，乳液或悬浮液用热处理进行后处理。在一个实施方案中，乳液或悬浮液用高压处理进行后处理。在一个实施方案中，乳液或悬浮液在后处理期间在密封包装中。在一个实施方案中，乳液或悬浮液在高压处理期间在密封包装中。在一个实施方案中，乳液或悬浮液在热处理期间在密封包装中。在一个实施方案中，高压处理包括用等静压在约100至约600MPa下处理乳液或悬浮液。在一个实施方案中，高压处理包括用等静压在约350至约550MPa下处理乳液或悬浮液。在一个实施方案中，高压处理包括用等静压在约300至约400MPa下处理乳液或悬浮液。在一个实施方案中，高压处理在约25℃下持续约1分钟，或约2分钟，或约3分钟或约4分钟。在一个实施方案中，热处理包括将微粒加热至约60℃至约80℃的温度。在一个实施方案中，热处理包括将乳液或悬浮液加热至约65℃至约75℃的温度。在一个实施方案中，热处理包括在干馏(120℃)下加热乳液或悬浮液。在一个实施方案中，热处理包括在UHT条件下加热乳液或悬浮液(>120-140℃)。
在实施方案中，后处理包括微波处理。在一个实施方案中，微波处理包括用约750W处理约1分钟，或约2分钟，或约2.5分钟，或约3分钟。在一个实施方案中，微波处理将生物质和/或另外的生物质的温度升高至约70℃至约80℃，优选地约76℃。
粉的制备
在一个实施方案中，将本文所述的乳液或悬浮液部分干燥或干燥以降低水含量。在一个实施方案中，如本文所述的方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约1至约14％。在一个实施方案中，如本文所述的方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约1至约13％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约1至约12％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约1至约10％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约2至约8％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约2至约6％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约2至约4％。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水含量降低至约2至约3％。
在一个实施方案中，如本文所述的方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水活度降低至约0.1至约0.7的低水活度。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水活度降低至约0.2至约0.6的低水活度。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水活度降低至约0.2至约0.5的低水活度。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水活度降低至约0.3至约0.4的低水活度。在一个实施方案中，所述方法包括干燥所述乳液或悬浮液以将水活度降低至约0.4的低水活度。
在一个实施方案中，如本文所述的方法包括干燥所述乳液或悬浮液以形成粉。干燥可包括例如喷雾干燥、冻干(冷冻干燥或低温干燥)、盘式干燥、滚筒干燥、辊式干燥、流化床干燥、穿透干燥、折射窗干燥、薄膜带式干燥、真空微波干燥、超声辅助干燥、挤出多孔化技术或本领域技术人员已知的任何其它方法。
在一个实施方案中，将所述乳液或悬浮液干燥以产生约10μM至约4000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，将所述乳液或悬浮液干燥以产生约10μM至约3000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，将所述乳液或悬浮液干燥以产生约20μM至约2000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，将所述乳液或悬浮液干燥以产生约10μM至约1000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，将所述乳液或悬浮液干燥以产生约10μM至约500μM的平均干燥粒度。
在一个实施方案中，通过喷雾干燥(例如Drytec实验室喷雾干燥器)干燥乳液或悬浮液以形成粉。例如，使用具有旋转雾化器、超声喷嘴或双流体喷嘴的Drytec实验室喷雾干燥器在2.0-4.0巴雾化压力下通过在雾化之前将进料加热至60℃来干燥乳液或悬浮液，并且入口和出口空气温度分别为180℃和80℃。在一个实施方案中，喷雾干燥器具有造粒功能。在一个实施方案中，喷雾干燥器安装有造粒干燥器。
在一个实施方案中，喷雾干燥产生单独的颗粒或颗粒聚集体。
在一个实施方案中，喷雾干燥产生约10μM至约3000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，喷雾干燥产生约20μM至约2000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，喷雾干燥产生约10μM至约1000μM的平均干燥粒度。在一个实施方案中，喷雾干燥产生约10μM至约500μM的平均干燥粒度。
在一个实施方案中，乳液或悬浮液通过冻干干燥来干燥以形成粉。在一个实施方案中，在冻干之前将防冻剂加入到乳液或悬浮液中。在一个实施方案中，防冻剂为单糖、二糖或多糖、多元醇或其衍生物。在一个实施方案中，防冻剂选自以下中的一种或多种：海藻糖、蔗糖和甘露醇。
在一个实施方案中，乳液或悬浮液通过滚筒干燥来干燥以形成粉。
在一个实施方案中，粉包括约5％至约50％的油w/w。在一个实施方案中，粉包括约10％至约50％的油w/w。在一个实施方案中，粉包括约20％至约50％的油w/w。在一个实施方案中，粉包括约20％至约50％的油w/w。在一个实施方案中，粉包括约20％至约40％的油w/v。在一个实施方案中，粉包括约20％至约30％的油w/w。
在一个实施方案中，粉包括约20μm至约1200μm的颗粒。在一个实施方案中，粉包括约100μm至约900μm的颗粒。在一个实施方案中，粉包括约400μm至约700μm的颗粒。在一个实施方案中，粉包括约500μm至约600μm的颗粒。在一个实施方案中，粉包括约1000μm的颗粒。在一个实施方案中，研磨粉以进一步减小粒度。在一个实施方案中，研磨可将粒度减小至小于约10μm，或小于约8μm，或小于约6μm，或小于约4μm，或小于约2μm。
在一个实施方案中，通过如本文所述的方法包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比通过
Figure BDA0002700660770000281
包封方法(WO01/74175)包埋或包封的相同生物活性物和/或生物活性前体(例如油)更不易于氧降解。
在一个实施方案中，通过如本文所述的方法包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约500％至约4000％，其时间与IP进行比较(参见表7)。在一个实施方案中，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约500％至约3000％，其时间与IP进行比较。在一个实施方案中，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约500％至约2000％，其时间与IP进行比较。在一个实施方案中，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约800％至约2000％，其时间与IP进行比较。在一个实施方案中，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约800％至约1500％，其时间与IP进行比较。在一个实施方案中，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体比未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体对氧降解的耐受性高约900％至约1300％，其时间与IP进行比较。
在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解达至少6个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解达至少12个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解达至少18个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解达至少24个月。
在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐水分降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐水分降解达至少6个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐水分降解达至少12个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐水分降解达至少18个月。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐水分降解达至少24个月。
在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐处理期间的pH降解。在一个实施方案中，与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，包埋或包封在粉中的生物活性物和/或生物活性前体更耐胃肠转运期间的pH降解。
在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐氧降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐氧降解达至少6个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐氧降解达至少12个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐氧降解达至少18个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐氧降解达至少24个月。
在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐温度降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐温度降解达至少6个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐温度降解达至少12个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐温度降解达至少18个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐温度降解达至少24个月。
在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐水分降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐水分降解达至少6个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐水分降解达至少12个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐水分降解达至少18个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐水分降解达至少24个月。
在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐pH降解达至少3个月。在一个实施方案中，与未包封的油相比，包封在粉中的油更耐pH降解达至少6个月。在一个实施方案中，包封在粉中的油比未包封的油更耐胃肠转运期间的pH降解。
产品
在一个方面，本发明提供了包括来自第一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物的基质。在一个实施方案中，基质包括一种或多种如本文所述的生物活性物或生物活性前体。在一个实施方案中，基质包括萝卜硫素。在一个实施方案中，基质包括芥子油苷。在一个实施方案中，基质包括萝卜硫苷。
在一个方面，本发明提供了包括油滴或生物活性物和/或生物活性前体的基质，其中所述蛋白质和碳水化合物来自来自生物体的其他物种(例如，第二、第三、第四、第五等物种生物体)的一种或多种另外的生物质。
在一个方面，本发明提供了包埋或包封在基质中的生物活性物和/或生物活性前体，所述基质包括来自第一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物，其中当与包埋或包封之前的生物活性物和/或生物活性前体相比时，包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解。
在一个实施方案中，生物活性物和/或生物活性前体不是来自第一物种的生物体。
在一个方面，本发明提供了包埋或包封在包括来自西兰花的蛋白质和碳水化合物的基质中的生物活性物和/或生物活性前体，其中当与包埋或包封之前的生物活性物和/或生物活性前体相比时，包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体更耐氧降解。
在一个实施方案中，包埋或包封在基质中的生物活性物和/或生物活性前体是脂肪酸。在一个实施方案中，生物活性物是油。
在一个实施方案中，基质包括来自第一物种的生物体的至少一种另外的生物质的蛋白质和碳水化合物。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括以下中的一种或多种：i)约1：1至约1：10.5的蛋白质与碳水化合物比例ii)约1：4.5至约4：1的蛋白质与碳水化合物比例；和ii)约1：2.5至约2：1的蛋白质与碳水化合物的比例。
在一个实施方案中，生物质和/或另外的生物质包括生物活性物和/或生物活性前体。
在一个实施方案中，生物质是西兰花。
在一个方面，本发明提供了通过如本文所述的方法生产的乳液或悬浮液。在一个实施方案中，使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量，乳液或悬浮液具有在80℃下约10小时至约300小时的诱导期。在一个实施方案中，使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量，乳液或悬浮液具有在80℃下约100小时至约300小时的诱导期。
在一个方面，本发明提供了通过如本文所述的方法生产的包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体的粉。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下约10至约300小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下约50至约300小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下约80至约300小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下约100至约300小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下至少10小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下至少50小时的诱导期。在一个实施方案中，粉具有使用Oxipres在80℃和初始5巴氧压下测量的在80℃下至少100小时的诱导期。
在一个实施方案中，粉的水分含量为约1至约14％。在一个实施方案中，粉的水分含量为约1至约10％。在一个实施方案中，粉的水分含量为约10％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约8％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约7％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约6％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约5％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约4％或更低。在一个实施方案中，粉的水分含量为约3％或更低。
在一个实施方案中，粉包括油。在一个实施方案中，粉包括ω-3多不饱和脂肪酸。在一个实施方案中，粉包括异硫氰酸酯生物活性物。
在一个实施方案中，粉可以原样使用，或者是加入到其他材料中或与其他材料组合以形成产品(例如，食品或化妆品产品)的材料。
在一个实施方案中，粉可用于形成粉(例如与一种或多种其它粉状成分组合)、片剂、液体、丸剂、胶囊或挤出产品。在一个实施方案中，粉被挤出。在一个实施方案中，将粉压制，例如形成片剂。
在一个实施方案中，粉是食品、食品成分、饮料成分或化妆品成分。
在一个实施方案中，乳液、悬浮液或粉可以与一种或多种其它成分组合以形成产品。
在一个实施方案中，产品为乳膏剂、凝胶、片剂、液体、丸剂、胶囊或挤出产品。
在一个实施方案中，产品是食品、食品成分、饮料成分补充剂、化妆品或化妆品成分。在一个实施方案中，化妆品是皮肤水合产品(例如保湿剂或面膜)。
在一个实施方案中，产品包括ω-3多不饱和脂肪酸。
在一个实施方案中，食物是动物饲料。在一个实施方案中，动物饲料包括ω-3多不饱和脂肪酸。在一个实施方案中，ω-3多不饱和脂肪酸选自以下中的一种或多种：α-亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和二十二碳五烯酸(DPA)。在一个实施方案中，动物饲料包括虾青素和/或α-硫辛酸。
在一个实施方案中，其中该动物饲料是一种水产养殖饲料。
在一个实施方案中，产品是食品成分，例如婴儿配方、儿童配方、成人配方、酸奶、饮料、老年人补充剂、超高温处理(UHT)饮料(例如牛奶)、汤、蘸料、面食产品、面包、小吃和其它烘焙产品加工干酪和/或动物饲料(包括水产养殖饲料)。在一个实施方案中，当加入到产品中时，包封或包埋在食品成分中的生物活性物和/或生物活性前体比未包封或未包埋的生物活性物和/或生物活性前体更稳定。
在一个实施方案中，产品适合用作化妆品或化妆品成分，例如，用作唇膏、乳膏剂、洗剂或软膏剂。
在一个实施方案中，产品是粉状补充剂。在一个实施方案中，将粉状补充剂溶解于水中或加入到食品、饮料或膳食中。
在一个实施方案中，产物是乳液或悬浮液或粉。
药物组合物的制备
在一个方面，本发明提供制备包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的乳液的方法，所述方法包括：提供包括水、脂质和异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的混合物，从而形成乳液。这样的乳液适用于药物组合物。
在一个实施方案中，将包括水和异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的混合物与脂质混合。在一个实施方案中，将包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体并且包括蛋白质和/或碳水化合物的水性悬浮液与脂质混合。在一个实施方案中，将异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体与脂质混合，并将所得组合物与水性介质混合。在一个实施方案中，该水性介质包括蛋白质和/或碳水化合物。在一个实施方案中，将异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体与包括水和脂质的混合物混合。在一个实施方案中，将异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体与包括水和脂质的混合物混合。在一个实施方案中，蛋白质或碳水化合物来自相同的单一物种的生物体。在一个实施方案中，蛋白质、碳水化合物或异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体形成相同的单一物种的生物体。
在一个实施方案中，在约4至约10℃或在约-18℃储存约一个月后，所述乳液中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度是缺少所述脂质的相应组合物中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度的至少两倍。在一个实施方案中，在约4至约10℃或在约-18℃储存约一个月后，所述乳液中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度是缺少所述脂质的相应组合物中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度的至少三倍。在一个实施方案中，在约4至约10℃或在约-18℃储存约两个月后，所述乳液中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度是缺少所述脂质的相应组合物中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度的至少两倍。
在一个方面，本发明提供了制备包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的粉的方法，所述方法包括：制备本文所述的乳液，和使所述乳液经受干燥条件，从而除去水。在一个实施方案中，使乳液经受冻干或喷雾干燥条件，从而形成粉。
在一个实施方案中，在-18℃储存约一个月后，所述异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在所述粉中的浓度是异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在缺乏所述脂质的相应粉中的浓度的至少一倍。
在一个实施方案中，在-18℃储存约一个月后，所述异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在所述粉中的浓度是异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在缺乏所述脂质的相应粉中的浓度的至少两倍。
在一个实施方案中，在-18℃储存约两个月后，所述异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在所述粉中的浓度是异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在缺乏所述脂质的相应粉中的浓度的至少两倍。
在一个方面，本发明提供了制备药物或化妆品组合物的方法，其包括：制备如本文所述的乳液，或制备如本文所述的粉，和将所述乳液或干燥的组合物转化成药物或化妆品组合物。
药物组合物
在一个实施方案中，本发明提供通过所述方法或由本文所述的乳液或粉产生的药物或化妆品组合物，其包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体、脂质和药物和/或化妆品赋形剂。
在一个方面，本发明提供了药物或化妆品组合物，其包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体、脂质和药物和/或化妆品赋形剂。在一个实施方案中，药物或化妆品组合物还包括蛋白质和/或碳水化合物。
在一个方面，本发明提供了包括水、脂质和异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的乳液。这样的乳液适用于药物组合物和化妆品组合物。
在一个实施方案中，所述组合物用于局部、肠内/胃肠外施用或胃肠外施用。在一个实施方案中，包括至皮肤的局部区域的施用，并且还包括经皮施用(经由通过皮肤的吸收施用)。在一个实施方案中，肠内/胃肠包括例如口服、直肠、胃、胃肠道、唇下、含服、舌下。在一个实施方案中，肠外施用包括例如经皮、肌内和静脉内施用。在一个实施方案中，组合物为乳膏剂、软膏剂、凝胶、片剂、液体、丸剂、胶囊、粉或挤出产品。
在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，约10％至约90％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，至少10％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，至少20％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，至少30％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，至少40％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。在一个实施方案中，在储存约一个月的时间段后，至少50％的异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在组合物中。
在一个实施方案中，异硫氰酸酯选自以下中的一种或多种：萝卜硫素、异硫氰酸烯丙酯、异硫氰酸苄酯和异硫氰酸苯乙酯。
在一个实施方案中，异硫氰酸酯前体选自以下中的一种或多种：芥子油苷、萝卜硫苷、黑芥子甙、金莲葡糖硫苷和豆瓣菜苷。
在一个实施方案中，脂质是如本文所述的油。在一个优选的实施方案中，油选自低芥酸菜籽油、橄榄油、向日葵油、鱼油或海藻油。在一个实施方案中，组合物包括约10％至约90％的油。在一个实施方案中，组合物包括约20％至约80％的油。在一个实施方案中，组合物包括约30％至约70％的油。在一个实施方案中，脂质是如本文所述的蜡。
在一个实施方案中，乳液或粉与一种或多种赋形剂、载体或添加剂组合，所述赋形剂、载体或添加剂在与制剂的其它成分相容的意义上应当是药学上或化妆品上可接受的，并且对其接受者不过度有害，所述赋形剂、载体或添加剂可以包括例如聚乙烯吡咯烷酮、衍生纤维素如羟甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素、聚蔗糖(聚合糖)、羟乙基淀粉(HES)、葡萄糖结合剂(例如，环糊精，如2-羟丙基-β-环糊精和磺基丁基醚-β-环糊精)、聚乙二醇和果胶。组合物可进一步包括稀释剂、缓冲剂、粘合剂、崩解剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)、调味剂、掩味剂、无机盐(例如氯化钠)、抗微生物剂(例如苯扎氯铵)、甜味剂、抗静电剂、脱水山梨糖醇酯、脂质(例如磷脂如卵磷脂和其它磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、脂肪酸和脂肪酯、类固醇(例如胆固醇))和螯合剂(例如EDTA、锌和其它这类合适的阳离子)。适用于组合物的其它药物赋形剂、载体和/或添加剂列于以下中：“Remington:TheScience&Practice of Pharmacy”，19.sup.th ed.,Williams&Williams,(1995)，和“Physician's Desk Reference”，52.sup.nd ed.,Medical Economics,Montvale,N.J.(1998)，以及“Handbook of Pharmaceutical Excipients”，Third Ed.,Ed.A.H.Kibbe,Pharmaceutical Press,2000。
在一个方面，本发明提供了治疗或预防病症的方法，其包括对有需要的受试者施用有效量的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。在一个方面，本发明提供了用于治疗或预防病症的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。在一个方面中，本发明提供了治疗或预防受试者的病症的方法，其包括对受试者施用有效量的如本文所述的药物组合物、乳液或粉。本文所述的药物组合物在制备用于治疗或预防病症的药物中的用途。本文所述的乳液或本文所述的粉在制备用于治疗或预防病症的药物中的用途。
在一个方面，本发明提供了如本文所述的治疗或预防的方法、用途或治疗或预防的方法，其中所述病症选自：癌症、糖尿病、心血管疾病、孤独症、骨质疏松症、神经保护性疾病、代谢综合征、炎症、氧化应激和肠道健康状况。在一个实施方案中，肠道健康状况选自溃疡性结肠炎、肠易激综合征、克罗恩病、小肠过度生长、肠道渗漏和乳糖不耐。在一个实施方案中，病症是癌症。
实施例
实施例1-西兰花作为包封剂以制备物理稳定的水包油乳液的乳化和物理功能性 的证明
将原料西兰花与加入的水(1:1比例)混合。向其中加入油，使得西兰花：水：油的比例为1：1：1，并且使用台式混合器混合整个混合物。水包油乳液在整个2h内物理稳定。而没有西兰花的混合的油-水混合物立即如预期分离成2相(图1A-B)。
实施例2-使用冻干的西兰花粉作为包封剂的水相悬浮液的制备
将冻干的西兰花粉放入烧杯中，在使用顶置式混合器混合的同时加入水(60℃)，直到获得可流动的混合物(7.46％总固体(TS))(图1C-F)。将混合物的pH用2N NaOH从6.01调节至7.50。然后将混合物在75℃下热处理2min或在100℃下热处理30min，然后冷却至60℃。
实施例3-使用原料西兰花作为包封剂的水相悬浮液的制备
将原料花椰菜(10％TS)切成小块，最初加入沸水，将混合物混合，得到具有不同总固体的西兰花悬浮液(图2A：7.66％(TS)、(图2B：6.87％TS)、(图2C：6.23％TS)、(图2D：4.99％TS)。从该初始实验中选择4.99％TS混合物用于制备包封剂。将混合物的pH用2NNaOH从6.23调节至7.50。然后将混合物在75℃下热处理2min或在100℃下热处理30min，然后冷却至60℃。
实施例4-用于将ω-3油包封成乳液和粉形式的冻干西兰花粉的证明
将由实施例2中所述的冻干西兰花粉制成的水相悬浮液(5％TS)用作包封剂。将金枪鱼油(1：1西兰花固体：油比例)加入到实施例2中描述的水相悬浮液(60℃)中，并且使用Ultra Turrax在15,000rpm下均化3min以制备在75℃下加热2min的乳液Fl，并且在100℃下加热30min的F2(图3A)。
使用1酪蛋白酸钠(NaCas)-1葡萄糖(Glu)-1干葡萄糖浆(DGS)溶液的水相制剂在60℃水中制备40min(25％TS)，将pH调节至7.50，在100℃下热处理30min，并冷却至60℃(作为对照，C1)，将Tween80(0.5g)搅拌至87g 60℃水中5分钟，作为另一对照，使用低分子量乳化剂(C2)。
通过将油与蛋白质(酪蛋白酸钠)和碳水化合物(葡萄糖和干葡萄糖浆)C1混合来制备ω-3水包油乳液，或者还制备低分子量乳化剂C2用于比较(图3A)。
在20℃下储存过夜后，F1、F2、C1和C2乳液都是物理稳定的(图3B)。还将F1、F2和C1也被冻干以获得含有50％ω-3油的ω-3油粉(图3C)。
实施例5-在加速氧化下测试的ω-3油乳液和粉的氧化稳定性
实施例4中描述的乳液(F1、F2、C1、C2)和冻干粉(F1、F2)在80℃的加速氧化下，在初始5巴氧压下，使用Oxipres装置(Mikrolab Aarhus A/S,
Figure BDA0002700660770000352
Denmark)进行测试。用西兰花基质(F1和F2)制备的鱼油乳液和粉比相应的鱼油乳液(F1和F2)和使用CSIRO’s
Figure BDA0002700660770000353
技术包封的乳液(C1)以及用Tween制备的鱼油乳液(图4和图5和表2)吸收氧慢。
表2：与酪蛋白酸钠干燥葡萄糖浆(DGS)-葡萄糖(Glu)作为包封剂或低分子量乳化剂(Tween 80)相比，ω-3油乳液-西兰花的Oxipres结果。
Figure BDA0002700660770000351
当测试时IP不独特时使用">"；#乳液(9.5％TS，4.8％油)，粉(50％油)；(测试8g粉，4g油)；n/a-不适用
实施例6-使用西兰花粉稳定粉中的ω-3油的证明
在图6中给出了纯油的氧压数据。通过对西兰花基质(不含油)的Oxipres测试，评价了包封剂基质用量对氧吸收的影响。结果在图7中给出。
将西兰花头切成1/4，加水(5％TS)浸渍，加热至79℃，4min，并冻干。将冻干的西兰花粉在水(5％TS)中重构并用于包封。将油(金枪鱼油、DHA低芥酸菜籽油或低芥酸菜籽油)加入到该悬浮液中以获得12.5％、25％和50％的油粉，并且使用Ultraturrax在15,000rpm下均化3min以制备该乳液。将乳液(分别5.7％、6.6％和9.5％总固体)冻干，并在加速氧化条件下使用Oxipres单元在80℃下用5巴初始氧压在室温下测试。
结果示于图8至10。在这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。在12.5％和25％的油粉中直至300h没有观察到清晰的IP。
实施例7-使用原料西兰花制备和稳定ω-3水包油乳液的证明
将由实施例3中所述的原料西兰花制成的水相悬浮液(5％&6％TS)用作包封剂。将ω-3油(1：1西兰花固体：油比例)加入到实施例3中描述的水相悬浮液(60℃)中，并使用Ultraturrax在15,000rpm下均化3分钟以制备在75℃下加热2min的乳液E1和E2，并且在100℃下加热30min的E3和E4。最终乳液相对于总固体分别为7.7％和11.3％。
乳液在加速氧化条件下使用Oxipres单元在80℃下用5巴初始氧压在室温下测试。结果示于图11和表3中。加热的和未加热的西兰花在氧吸收方面以相同的方式进行。
表3：使用西兰花作为包封剂的ω-3油乳液(5-6％油w/w)的氧化稳定性(Oxipres结果)。
Figure BDA0002700660770000361
当测试时IP不独特时使用">"；n/a-不适用
实施例8-对原料西兰花-金枪鱼油冻干粉的Oxipres结果
将原料西兰花(5％和6％TS)与沸水高速混合3min(测量温度68.3℃)。将pH调节至7.5。一半在75℃下巴氏灭菌(pasturised)2min，另一半在100℃下热处理30min。将两者冷却至60℃，加入金枪鱼油，以15,000rpm高速分散(ultra-turraxed)2min。然后将得到的分别含有9.5％和11.3％TS的乳液冻干。还制备了使用冻干西兰花并使用酪蛋白酸钠和碳水化合物作为包封剂的乳液制剂(9.5％总固体)，并冻干并测试用于比较。
使用Oxipres单元在80℃下用5巴初始氧压在室温下测试冻干的乳液。结果示于图12、图13和表4中。
表4：使用原料西兰花作为包封剂的ω-3油粉(50％油w/w)的氧化稳定性(Oxipres结果)。
Figure BDA0002700660770000371
50％油粉(测试8g粉，4g油)
实施例9-使用预处理的西兰花作为包封剂制备的ω-3西兰花乳液样品的氧吸收
通过Oxipres测试在80℃下在初始5巴氧压下评价使用各种预加工的西兰花(新鲜西兰花、汽蒸的、汽蒸的西兰花、汽蒸的切碎的西兰花和汽蒸的泥状的滚筒干燥的西兰花)随后滚筒干燥的西兰花乳液的氧吸收。
结果示于图14中。在不同的加工阶段使用西兰花包封剂并制成5％的含水固体。以9.5％的TS和4.8％的油制备乳液。IP(h)是氧吸收显著增加(氧压急剧下降)的地方。测试样品含有4g油和4g基质。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
实施例10-作为包封剂的生物质
将原料生物质切成小片，最初加入沸水并将混合物混合以获得含有生物质的水性悬浮液(5％TS)。将混合物的pH用2N NaOH调节至7.50。然后将混合物在75℃热处理2min或在100℃热处理30min，然后冷却至60℃。将ω-3油(1:1生物质固体：油比例)加入到水相悬浮液(60℃)中，并使用Ultraturrax在15,000rpm下均化3min以制备乳液，将其冻干以获得粉(50％油)。
结果提供在表5和图15至23中。这些结果表明油的相对氧化稳定性，其中较长的诱导期与在加速条件下由包封剂提供给油的更大保护有关。
表5：ω-3油粉(25％和50％含油量)的氧化稳定性
Figure BDA0002700660770000381
**IP处压力的突然增加导致挥发物的释放，n/a-由于缺乏独特的IP而不可能获得氧吸收率而不适用；50％的油粉(测试8g粉，4g油)，25％的油粉(测试12g粉，3g油)；na-未测试
实施例11-作为包封剂加入的蛋白质对生物质的影响
将原料胡萝卜切成小块，加入沸水中并混合以获得含有生物质的水性悬浮液(5％TS)。将混合物的pH用2N NaOH调节至7.50。然后将混合物在90℃下热处理5min，然后冷却至60℃。将不同的蛋白质分散体(10％TS)(酪蛋白酸钠、大豆蛋白分离物、豌豆蛋白)加入到胡萝卜悬浮液中以获得1：2的蛋白质：CHO比例。将金枪鱼油加入胡萝卜-蛋白质混合物(60℃)，并且使用Ultraturrax在15,000rpm下均化3分钟以制备乳液，将该乳液冻干以获得粉(25％油)。
结果提供在图24中。只有胡萝卜-豌豆蛋白ω-3粉具有清晰的IP(38h)。对于所有其它样品，在Oxipres测试期间压力突然增加。
实施例12-具有和不具有加入的碳水化合物的作为包封剂的抹茶
将抹茶粉(加入或不加入麦芽糖糊精)在水中(45℃，1h)重构。对于加入麦芽糖糊精的制剂，不同制剂中的蛋白质与碳水化合物(CHO)比例(w/w)为8:9(仅抹茶)、1:2、1:3和1:4。加入金枪鱼油，并使用Silverson混合器(Silverson L4R,Silverson Machines Ltd.,Chesham,Buckinghamshire,UK)分散3分钟，并在250/100巴(Avestin Emulsiflex C5,Avestin Inc.,Ottawa,Ontario,Canada)下均化乳液。将该乳液(15％总固体)喷雾干燥以获得含有25％鱼油的粉(干基)。
在80℃和初始5巴氧压下的Oxipres测试示于图25中。在这些具有1：2和8：9蛋白质碳水化合物比例的样品中缓慢的氧吸收部分地归因于基质的氧吸收。仅显示金枪鱼油的清晰IP，样品具有1：4和1：3的蛋白质碳水化合物比例。
实施例13-显示比较“冻干西兰花”粉和“酪蛋白酸钠+碳水化合物”作为包封剂的 的喷雾干燥的ω-3油粉的稳定性的Oxipres结果
将冻干西兰花粉在60℃水中重构至5％TS，并使其水合1小时。加入加热至60℃的金枪鱼油，并使用Silverson乳化器以最大速度匀化5分钟。然后将乳液喷雾干燥。为了比较，使用加热的酪蛋白酸钠-葡萄糖-干燥的葡萄糖糖溶液在100℃加热30分钟的
Figure BDA0002700660770000391
制剂作为包封剂。加入相同的油并在180/80巴压力和60℃下均化。将两种制剂在实验室规模的Drytec喷雾干燥器中使用双流体喷嘴(4巴压力)喷雾干燥。使用Oxipres单元在80℃下用初始氧压5巴在室温下测试喷雾干燥的粉。
Oxipres测试结果(图26)显示了在80℃下和初始5巴氧压下测试的与使用加热的酪蛋白-碳水化合物作为包封剂的50％金枪鱼油粉的诱导期相比的喷雾干燥的(50％金枪鱼油)ω-3西兰花粉的诱导期(IP)。这两个样品都有清晰的IP。结果表明，通过如本文所述的方法包封的油比使用
Figure BDA0002700660770000392
技术包封的油更耐氧降解。
实施例14-使用发酵和未发酵西兰花作为用于生产ω-3油西兰花粉的包封剂之间 的比较。
制备西兰花泥(加热至75℃，2min或100℃30min)或发酵的西兰花泥(±发酵前热处理)(5％TS)。加入高-DHA金枪鱼油并使用Silverson乳化混合器(60℃5分钟)均化以形成乳液。所有制剂均冻干。在80℃下，在Oxiperes中，用5巴初始氧压对粉进行测试，结果示于图27中。使用未发酵的西兰花粉的样品有明显的IP，而使用发酵的西兰花泥的样品没有明显的IP。
实施例15-金枪鱼油粉中的EPA和DHA相对于未包封金枪鱼油的稳定性的比较
将来自实施例5和8的选择的粉和纯金枪鱼油(未包封的)储存在40℃烘箱中的轻盖瓶中。使用气相色谱法测量油和粉样品中的油的脂肪酸分析。表6中给出了初始金枪鱼油和储存样品中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量。1个月40℃后，与纯油中的EPA和DHA相比，贮存粉中更高含量的EPA和DHA清楚地证明了包封剂保护EPA和DHA免受氧化。
表6：初始油和储存的金枪鱼油及粉的EPA和DHA含量(在40℃下1个月)。
包封剂 包封剂的热处理 样品 油中EPA％ 油中DHA％
未包封的金枪鱼油 不适用 初始油 5.8 28.8
储存的油 4.0 17.3
F1西兰花粉 75℃，2min 储存的FD粉 5.3 26.6
F2西兰花粉 100℃，30min 储存的FD粉 5.3 26.4
F3(1NaCas-1DGS-1Glu) 100℃，50min 储存的FD粉 5.0 24.3
P1西兰花(原料) 75℃，2min 储存的FD粉 5.5 27.6
P3西兰花(原料) 100℃，30min 储存的FD粉 5.4 27.4
储存：在40℃储存的密封玻璃小瓶中的1g粉
实施例16-使用所选择的生物质作为包封剂对来自ω-3油粉的次级氧化产物进行 顶空分析
将来自实施例8和10的冻干的ω-3油粉在-18℃下储存14个月，并且将来自这些实施例的所选择的粉取样并储存在40℃烘箱中的轻盖瓶中4周以用于分析。使用GC-MS对顶部空间二次氧化产物进行分析。
结果提供在图28中。丙醛和EE-2,4-庚二烯醛的量越低意味着样品对氧化更稳定。根据这些结果，在这些实施例中对ω-3氧化的最佳保护由西兰花、蘑菇和孢子甘蓝提供。
实施例17-使用50％ω-3油西兰花粉的压片和挤出制剂的氧吸收
使用如实施例4(F1)中制备的冻干的ω-3油西兰花粉(50％高DHA金枪鱼油)。对于挤出的样品，将冻干的ω-3油西兰花粉(20％w/w)和玉米粉(80％w/w)干混，并使用低剪切小吃挤出螺杆轮廓、60℃、100℃、140℃(从粉进料到模具末端)的机筒温度和模具压力通过挤出机Extruder(DSE32-II Twinscrew Lab Extruder)进料：～5巴。将冻干的ω-3油西兰花粉(50％w/w)与脱脂乳粉作为赋形剂(50％w/w)干混，制成片剂
Figure BDA0002700660770000401
通过在80℃下的Oxipres测试在初始5巴氧压下评估样品的氧吸收。
结果示于图29中。测试的样品为40g挤出物(36g基质和4g油)和16g样品片剂形式(16g赋形剂和4g油)。
实施例18-通过预处理西兰花生物质和/或后处理乳液制备的ω-3油西兰花粉的 氧吸收
冷冻干燥的西兰花粉用作包封剂，其由5％含水固体(在50℃水合，60min)组成，并且加入油并均质化以形成稳定的乳液或悬浮液(9.5％TS和4.8％油)。将乳液冻干以制备50％的油粉。测试样品含有4g油和4g基质。在该实施例中，生物质(水相)或者在水浴中使用超声(40Khz/180W)预处理7.5min，或者微波(750W)预处理2.5min至76.3℃；或者在25℃下用高压(6000巴)均化3min或用微波(750W)均化2.5min至76.3℃后，对乳液进行后处理。通过在80℃下用5巴的初始氧压进行Oxipres试验，评价通过预处理生物质(5％TS西兰花悬浮液)或后处理乳液(4.8％油和9.5％TS乳液)制备的冻干的西兰花粉的氧吸收。
结果示于图30中。这些样品中缓慢的氧吸收部分是由于西兰花基质的氧吸收。
实施例19-西兰花水性悬浮液和乳液中的萝卜硫素含量
将新鲜的西兰花小花汽蒸(核心温度60℃/5min)并冷却至室温。制备水性悬浮液(5％w/w西兰花固体)和具有中链甘油三酯的乳液(5％w/w西兰花固体和5％w/w中链甘油三酯)，并在25℃下保持4小时。将水性悬浮液和乳液用乙酸乙酯提取，并使用UPLC测量萝卜硫素含量。
在乳液中的萝卜硫素(表示为mg/g西兰花固体干重)含量比水性悬浮液高13％。这表明萝卜硫素在乳液中更稳定。
实施例20-储存的冻干西兰花水性悬浮液和乳液的萝卜硫素含量
如实施例6中制备的冻干西兰花粉(无油)和冻干ω-3油西兰花粉(50％油粉)。在冷冻储存(-18℃月)后测量粉的萝卜硫素含量。在从样品中提取萝卜硫素(使用乙酸乙酯/己烷混合物)后测定萝卜硫素含量。冻干ω-3油西兰花粉(50％油)中的萝卜硫素含量(表示为mg/g西兰花固体干重)比冻干西兰花粉(无油)高～2倍。这表明在长期储存期间油的存在稳定了萝卜硫素。
实施例21-讨论
代替使用纯化的蛋白质和碳水化合物作为包封剂，这些实验已经证明整个生物质可以用作包封剂，避免了对从生物质来源纯化和分离蛋白质和碳水化合物的需要。使用来自相同生物质来源的蛋白质和碳水化合物可以降低生产乳液和悬浮液、包封剂、粉以及包埋和包封的生物活性物和/或生物活性前体的成本。本文所述的方法提供了利用生物质中固有的所有组分的额外优点，所述所有组分具有有助于稳定的潜力并且充当生物活性物和/或生物活性前体的递送媒介物。许多生物质来源(例如植物、水果和蔬菜、藻类、真菌)还含有许多营养物(蛋白质、碳水化合物、纤维)和植物营养物(例如类胡萝卜素、多酚、含硫化合物、生育酚、芥子油苷等)，其还具有良好的营养和健康促进特性(Hounsome等人，2008)。存在于生物质中的蛋白质、碳水化合物、植物营养物和其他次要组分(例如维生素C)的普遍存在使得使用整个生物质(或这些的部分)代替纯化的单独组分，并且当使用生物质代替来自生物质的纯化组分用于包封和递送敏感的生物活性物和/或生物活性前体时，生物质中的植物营养物呈现一个优点。此外，本文所述的方法提供了对氧化降解具有高保护/耐受性的包封的油。表7示出了纯油和使用本文所述的方法包封的油的IP的比较。
表7：纯油和包封的油的IP比较。
Figure BDA0002700660770000421
Figure BDA0002700660770000431
Figure BDA0002700660770000441
Figure BDA0002700660770000451
本领域技术人员应当理解，在不脱离广泛描述的本发明的精神或范围的情况下，可以对具体实施方案中所示的本发明进行多种变化和/或修改。因此，本实施方案在所有方面都被认为是说明性的而非限制性的。
本申请要求于2018年2月2日提交的题为“生产乳液或悬浮液的方法和由其生产的产品”的澳大利亚临时申请第2018900326号的优先权，其全部内容通过引用并入本文。
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包括在本说明书中的文件、动作、材料、设备、物品等的任何讨论仅仅是为了提供本发明的上下文。不应视为承认这些内容中的任何或全部形成现有技术基础的一部分或者是与本发明相关的领域中的公知常识，因为其存在于本申请的每个权利要求的优先权日之前。
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Claims (76)

1.一种生产包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体的粉的方法，所述方法包括：
i)从单一物种的生物体的生物质获得包括蛋白质和碳水化合物的水性混合物；
ii)向所述水性混合物中加入油；
iii)形成包括所述生物活性物和/或生物活性前体的乳液或悬浮液；和
iv)从所述乳液或悬浮液形成包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体的粉。
2.根据权利要求1所述的方法，其中当在80℃和5巴初始氧压下测量时，所述粉具有约10至约300小时的诱导期。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述粉包括约5％至约50％油w/w的油。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述粉包括约10％至约40％的油w/w的油。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中在形成所述粉之前乳液或悬浮液的油含量是从约1％至约10％w/w。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述水性混合物进一步包括来自单一物种的生物体的至少一种另外的生物质的蛋白质和碳水化合物。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述生物质和/或另外的生物质包括以下中的一种或多种：
i)蛋白质与碳水化合物的比例为约1：1至1：10.5；
ii)蛋白质与碳水化合物的比例为约1：4.5至约4：1；和
iii)蛋白质与碳水化合物的比例为约1：2.5至约2：1。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述生物活性物和/或生物活性前体是以下中的一种或多种：
i)生物质的组分；
ii)步骤ii)中的油或其组分；
iii)在步骤ii)中将油加入到的水性混合物中之前加入到油中的组分；
iv)在步骤ii)之前或期间注入油中的组分；
v)所述另外的生物质的组分；和
vi)是在所述方法的步骤i、ii)和iii)中加入的组分。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述生物活性物是i)和ii)。
10.根据权利要求8所述的方法，其中所述生物活性前体是i)。
11.根据权利要求8所述的方法，其中所述生物活性物在步骤i)、ii)或iii)中或之后形成。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述生物活性物和/或生物活性前体对以下中的一种或多种敏感：通过氧、温度、pH、水分和光的降解。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中当所述生物质和/或另外的生物质包括：
i)十字花科(Brassicaceae)，并且所述生物活性物是异硫氰酸酯；
ii)十字花科，并且所述生物活性前体是芥子油苷(glucosinolate)和/或萝卜硫苷(glucoraphanin)；
iii)洋葱，并且所述生物活性物为槲皮素、大蒜素和酚酸中的一种或多种；
iv)大蒜，并且所述生物活性物是大蒜素和阿焦烯中的一种或多种；或
v)含有多酚的水果和/或蔬菜。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述生物活性物是植物营养物。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述生物活性物选自以下的一种或多种：脂肪酸、异硫氰酸酯、槲皮素、大蒜素、阿焦烯、维生素A、维生素D、维生素E、生育酚、生育三烯酚、维生素K、β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、玉米黄质、豆甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇、抗氧化剂、辅酶Q10、虾青素、大麻素、大麻二酚和多酚。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述脂肪酸是：ω-3、ω-6或ω-9脂肪酸。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述ω-3脂肪酸是α-亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)中的一种或多种。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，进一步包括预处理所述生物质。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述预处理包括以下的一种或多种：
i)加热；
ii)浸渍；
iii)微波处理；
iv)暴露于低频声波(超声)；
v)脉冲电场处理；
vi)静态高压；
vii)挤出；
viii)酶处理；
ix)发酵；
x)提取或分离方法；和
xi)干燥。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述生物质或另外的生物质来自植物界或真菌界。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述植物选自：十字花科(Brassicaceae)、大麻科(Cannabis Asparagaceae)、棕榈科(Arecaceae)、桃金娘科(Myrtaceae)、蔷薇科(Rosaceae)、芭蕉科(Musaceae)、杜鹃花科(Ericaceae)、虎耳草科(Saxifragaceae)、葫芦科(Cucurbitaceae)、茄属(Nightshade)、山柑科(Capparaceae)、五福花科(Adoxaceae)、葡萄科(Vitaceae)、芸香科(Rutaceae)、猕猴桃科(Actinidiaceae)、无患子科(Sapindaceae)、漆树科(Anacardiaceae)、桑科(Moraceae)、木犀科(Oleaceae)、仙人掌科(Cactaceae)、西番莲科(Passifloraceae)、凤梨科(Bromeliaceae)、仙人掌科(Cactaceae)、千屈菜科(Lythraceae)、蓼科(Polygonaceae)、葫芦科(Cucurbitaceae)、酢浆草科(Oxalidaceae)、苏木科(Caesalpinioideae)、菊科(Compositae)、苋科(Amaranthaceae)/藜科(Chenopodiacae)、锦葵科(Malvaceae)、石蒜科(Amarylidaceae)、豆科(Fabaceae)、棕榈科(Arecaceae)和禾本科(Poaceae)。
22.根据权利要求20所述的方法，其中所述植物选自：水果、蔬菜、坚果、豆科植物、谷类和草。
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述植物选自：西兰花、羽衣甘蓝、花椰菜、胡萝卜、洋葱、大蒜、番茄、孢子甘蓝、菠菜、雪豆、芦笋和鳄梨。
24.根据权利要求20所述的方法，其中所述真菌选自：牛肝菌科(Boletaceae)、鸡油菌科(Cantharellaceae)、口蘑科(Tricholomataceae)、丝膜菌科(Cortinariaceae)、鸡油菌科(Cantharellaceae)、薄孔菌科(Meripilaceae)、平盘菌科(Discinaceae)、侧耳科(Pleurotaceae)、口蘑科(Tricholomataceae)和块菌科(Tuberaceae)。
25.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述生物质或另外的生物质是抹茶、低芥酸菜籽粕、坚果粕、大豆粉、椰子粕、棕榈仁粕、大麻油压饼、奇亚油籽饼或米糠。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述油包括一种或多种脂肪酸。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中所述油选自以下中的一种或多种：鱼油、磷虾油、海产品油、低芥酸菜籽油、向日葵油、鳄梨油、大豆油、琉璃苣油、月见草油、红花油、亚麻籽油、橄榄油、南瓜籽油、大麻籽油、小麦胚芽油、棕榈油、棕榈油精、棕榈仁油、椰子油、中链甘油三酯和葡萄籽油。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述鱼油或海产油选自以下的一种或多种：金枪鱼油、鲱鱼油、鲭鱼油、沙丁鱼油、鳕鱼肝油、鲱鱼油、鲨鱼油、海藻油、鱿鱼油和鱿鱼肝油。
29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述方法包括后处理所述乳液或悬浮液以降低微生物活性。
30.根据权利要求29所述的方法，其中所述预处理包括以下的一种或多种：
i)加热；
ii)微波处理；
iii)UV处理；和
iv)高压处理。
31.根据权利要求1至30中任一项所述的方法，其中形成所述粉包括喷雾干燥、冻干、折射窗干燥或滚筒干燥。
32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中当所述包埋的或包封的生物活性物和/或生物活性前体耐降解持续约3个月至约24个月时。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述降解选自氧、温度、pH、水分和光中的一种或多种。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述粉是挤出的。
35.根据权利要求34所述的方法，其中将所述粉挤出或压制成片剂。
36.一种粉，其包括包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体并且包括来自单一物种的生物体的蛋白质和碳水化合物。
37.根据权利要求36所述的粉，其通过权利要求1至35中任一项所述的方法生产。
38.根据权利要求36或37所述的粉，其中与未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体相比，所述包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体抗氧降解。
39.根据权利要求36至38中任一项所述的粉，其中所述生物活性物和/或生物活性前体是脂肪酸。
40.根据权利要求36至39中任一项所述的粉，其中当在80℃和5巴的初始氧压下测量时，所述粉具有约10至约300小时的诱导期。
41.根据权利要求36至40中任一项所述的粉，其中当在80℃和5巴的初始氧压下测量时，所述乳液或悬浮液具有至少100小时的诱导期。
42.根据权利要求36至41中任一项所述的粉，其中所述粉包括约5％至约50％油w/w的油。
43.根据权利要求36至42中任一项所述的粉，其中所述粉包括约10％至约40％油w/w的油。
44.根据权利要求36至43中任一项所述的粉，其中所述生物活性物和/或生物活性前体是以下中的一种或多种：
i)生物质的组分；
ii)步骤ii)中的油或其组分；
iii)在步骤ii)中将油加入到水性混合物中之前加入到油中的组分；
iv)在步骤ii)之前或期间注入油中的组分；
v)所述另外的生物质的组分；和
vi)是在所述方法的步骤i、ii)和iii)中加入的组分。
45.根据权利要求44的所述粉，其中所述生物活性物是i)和ii)。
46.一种产品，其包括通过权利要求1至35中任一项所述的方法生产的粉，或权利要求36至45中任一项所述的粉。
47.根据权利要求46所述的产品，其中与包括未包埋或未包封的生物活性物和/或生物活性前体的相同产品相比，所述产品中包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体更耐降解。
48.根据权利要求46或47所述的产品，其中所述产品是乳膏剂、凝胶片剂、液体、丸剂、胶囊、粉或挤出产品。
49.根据权利要求46至48中任一项所述的产品，其中所述产品是食品、食品成分、补充剂、化妆品或化妆品成分。
50.根据权利要求46至49中任一项所述的产品，其中所述产品包括ω-3多不饱和脂肪酸。
51.根据权利要求46至50中任一项所述的产品，其中所述食品是动物饲料。
52.根据权利要求51所述的产品，其中所述动物饲料是水产养殖饲料。
53.一种生产乳液或悬浮液的方法，所述方法包括：
i)从单一物种的生物体的生物质获得包括蛋白质和碳水化合物的水性悬浮液；
ii)任选地向所述水性悬浮液中加入油；和
iii)形成包括生物活性物和/或生物活性前体的乳液或悬浮液。
54.一种包括来自单一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物的基质。
55.一种包埋或包封在基质中的生物活性物和/或生物活性前体，所述基质包括来自单一物种的生物体的生物质的蛋白质和碳水化合物，其中当与包埋或包封之前的生物活性物和/或生物活性前体相比时，所述包埋或包封的生物活性物和/或生物活性前体耐氧降解。
56.根据权利要求53所述的方法生产的乳液或悬浮液。
57.一种产品，其包括通过权利要求53的方法生产的乳液或悬浮液、权利要求54的基质、包埋或包封在权利要求55的基质中的生物活性物和/或生物活性前体、或权利要求56的乳液或悬浮液。
58.一种药物或化妆品组合物，其包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体、脂质以及药物和/或化妆品赋形剂。
59.根据权利要求58所述的组合物，其中所述组合物用于局部、肠内/胃肠或胃肠外施用。
60.根据权利要求58或权利要求59的组合物，其中所述组合物为乳膏剂、软膏剂、凝胶、片剂、液体、丸剂、胶囊、粉或挤出产品。
61.根据权利要求58至60中任一项所述的组合物，其中在储存约一个月的时间段后，至少50％的所述异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体保留在所述组合物中。
62.一种制备包括异硫氰酸酯或异硫氰酸酯前体的乳液的方法，所述方法包括：
提供包括水、脂质和异硫氰酸酯或异硫氰酸酯前体的混合物，从而形成乳液。
63.根据权利要求62所述的方法，其中在约4至约10℃或在约-18℃储存约一个月后，所述乳液中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度是缺少所述脂质的相应组合物中异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的浓度的至少两倍。
64.一种包括水、脂质和异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的乳液。
65.一种制备包括异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体的粉的方法，包括：
制备根据权利要求62至64中任一项所述的乳液，以及
使所述乳液经受干燥条件，从而除去水并形成粉。
66.根据权利要求65所述的方法，其中将所述乳液进行冻干、喷雾干燥条件或折射窗干燥，从而形成粉。
67.根据权利要求65或权利要求66的方法，其中在-18℃储存约两个月后，所述异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在所述粉中的浓度是异硫氰酸酯和/或异硫氰酸酯前体在缺乏所述脂质的相应粉中的浓度的至少两倍。
68.一种制备药物或化妆品组合物的方法，包括：
制备根据权利要求62至63中任一项所述的乳液，或制备根据权利要求65或权利要求67所述的粉，以及
将所述乳液或干燥组合物转化为药物组合物或化妆品组合物。
69.根据权利要求58至68中任一项所述的组合物、方法或乳液，其中所述异硫氰酸酯选自以下中的一种或多种：萝卜硫素、异硫氰酸烯丙酯、异硫氰酸苄酯和异硫氰酸苯乙酯。
70.根据权利要求58至69中任一项所述的组合物、方法或乳液，其中所述异硫氰酸酯前体选自以下中的一种或多种：芥子油苷、萝卜硫苷、黑芥子甙、金莲葡糖硫苷和豆瓣菜苷。
71.根据权利要求58至70中任一项所述的组合物、方法或乳液，其中所述脂质是油。
72.一种治疗或预防病症的方法，所述方法包括对有需要的受试者施用有效量的根据权利要求58至71中任一项所述的药物组合物、乳液或粉。
73.根据权利要求58至72中任一项所述的药物组合物、乳液或粉，其用于治疗或预防病症。
74.一种治疗或预防受试者病症的方法，所述方法包括给予受试者有效量的根据权利要求58至73中任一项所述的药物组合物、乳液或粉。
75.根据权利要求64所述的乳液或权利要求65或66所述的粉在制备用于治疗病症的药物中的用途。
76.根据权利要求72、73、74或75中任一项所述的方法或用途，其中所述病症选自：癌症、糖尿病、心血管疾病、孤独症、骨质疏松症、神经保护性疾病、代谢综合征、炎症、氧化应激和肠道健康状况。
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