CN111888481B - 基于多酚复合物的纳米药物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明所述基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，工艺步骤如下：(1)配制多酚复合物溶液和药物溶液；(2)将多酚复合物溶液和药物溶液在室温、常压下混合均匀形成混合液，多酚复合物溶液、药物溶液按所述混合液中多酚复合物与药物的重量比为(10～1):(1～10)计量；(3)在室温、常压下将所述混合液加入组装液中，或者将组装液加入混合液中形成重组体系，然后静置至少5min即完成重组形成纳米药物，之后进行固液分离，再将分离出的固态产物洗涤、干燥。上述方法不仅能简化工艺，降低纳米药物的成本，而且可提供多种纳米药物，且纳米药物中药物的含量最高可以达到90％左右，药物捕获率可达到80％以上。

Description

基于多酚复合物的纳米药物及其制备方法
技术领域
本发明属于纳米药物技术领域，涉及基于多酚复合物的纳米药物及其制备方法。
背景技术
化疗药物难以忍受的严重副作用，使其应用受到了很多的限制。令人鼓舞的是，很多的临床证据表明，纳米药物(
Figure BDA0002606253120000011
和
Figure BDA0002606253120000012
)可以通过减少全身毒性和给药频率显著提高患者的依从性。此外，纳米药物还可以克服传统药物的一些缺陷，如水溶性差、生物利用度低和在体内的非特异性分布等。综上所述，纳米药物在临床治疗上显示出具有广阔的应用前景。
关于纳米药物及其制备方法，虽然已有不少论文公开，但与实验室和临床前试验中研究的纳米药物相比，被批准使用的纳米药物的数量只是“沧海一粟”。造成这种困境的原因很多，包括复杂的制备工艺、有限的使药物纳米化的材料种类、低载药能力(大多<10％)、昂贵的原材料等。因此，如何简化制备方法、以低成本的材料制备纳米药物并提高纳米药物的载药率或包封率是纳米药物技术领域急待解决的问题，也是该领域的研究难点。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种基于多酚复合物的纳米药物制备方法，在使用低成本原料的同时简化制备工艺，提高纳米药物中药物的含量及纳米药物的包封率。
本发明的再一目的是提供基于多酚复合物的纳米药物，以增加纳米药物的种类。
本发明所述基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，工艺步骤如下：
(1)原料液的配制
原料液为多酚复合物溶液和药物溶液，多酚复合物溶液由多酚复合物和有机溶剂配制而成，药物溶液由药物和有机溶剂或去离子水配制而成；
(2)原料液的混合
将步骤(1)配制的多酚复合物溶液和药物溶液在室温、常压下混合均匀形成混合液，多酚复合物溶液、药物溶液按所述混合液中多酚复合物与药物的重量比为(10～1):(1～10)计量；
(3)纳米药物的形成、分离、洗涤与干燥
在室温、常压下将步骤(2)形成的混合液加入组装液中，或者将组装液加入步骤(2)形成的混合液中并使混合液在组装液中分散均匀形成重组体系，然后静置至少5min即完成重组形成纳米药物，之后进行固液分离，再将分离出的固态产物洗涤、干燥即得基于多酚复合物的纳米药物；
所述组装液为去离子水或质量浓度0.5％～5％的氯化钠水溶液，所述混合液与组装液的体积比为1:(0.5～10)。
本发明方法中，配制多酚复合物溶液的有机溶剂及配制药物溶液的有机溶剂或去离子水，其用量原则上能使多酚复合物、药物完全溶解即可，但也可根据整体工艺的需求略增加用量。
本发明所述方法中，所述多酚复合物为茶多酚复合物、间苯三酚复合物、花青素复合物或单宁酸复合物。上述复合物的制备方法在CN201910526442.2专利申请中已公开，技术方案是：将多酚、氨基化合物或巯基化合物、醛基化合物按照重量比10:(0.1～10):(0.1～5)溶于溶剂中形成反应体系，然后将所述反应体系于0～100℃搅拌至呈乳光或乳白色即完成反应，再将所得反应液固液分离，并将分离出的固态产物洗涤、干燥即得到多酚纳米复合物(若得到的多酚纳米复合物不需保存，直接用于制备纳米药物，则可去除干燥工序)。也可以去除氨基化合物或巯基化合物，将多酚、醛基化合物按照重量比10:(0.1～5)溶于溶剂中形成反应体系进行反应形成多酚纳米复合物。
本发明所述方法中，所述药物为水溶性药物或水难溶性药物。现有药物中，水溶性药物包括盐酸阿霉素、盐酸苯达莫司汀、盐酸平阳霉素、硫酸博莱霉素、甲氨蝶呤二钠盐或盐酸伊立替康；水难溶性药物包括紫杉醇、羟基喜树碱、熊果酸、鞣花酸、槲皮素、白藜芦醇、阿加曲班、5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷、雷帕霉素、曲美替尼、索拉非尼、阿瑞匹坦、非若贝特、甲地孕酮、替扎尼定、地塞米松、布地奈德、避蚊胺，吲哚绿染料IR 780或二氢卟吩e 6。上述药物均可与多酚复合物重组形成纳米药物。与上述药物属性相同或相似的新药，也可与多酚复合物重组形成纳米药物。对于水溶性药物，配制药物溶液时，以去离子水为溶剂；对于水难溶性药物，配制药物溶液时，用有机溶剂。
对于茶多酚复合物、间苯三酚复合物、花青素复合物、单宁酸复合物以及水难溶性药物，配制其溶液的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃中的一种。
本发明方法形成纳米药物的机理是：将多酚复合物在有机溶剂中拆卸解组装并与溶解的药物混合，再在去离子水或氯化钠水溶液中重组形成纳米药物。重组时，多酚复合物与药物以非共价键方式结合，并使药物纳米化。即本发明所述方法的多酚复合物并不是药物的载体，而是使药物纳米化的材料。
通过本发明所述方法，制备出了基于多酚复合物的纳米药物，包括基于茶多酚复合物的纳米药物、基于间苯三酚复合物的纳米药物、基于花青素复合物的纳米药物和基于单宁酸复合物的纳米药物。而茶多酚有表儿茶素、没食子酸盐、儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和没食子儿茶素没食子酸酯等多种，花青素也有20多种。因此，本发明提供的基于多酚复合物的纳米药物增加了纳米药物的种类。
本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
1、本发明所述方法以多酚复合物与药物重组形成纳米药物，由于制备多酚复合物的原料茶多酚、花青素、间苯三酚、单宁酸等的获取成本低，因而能降低纳米药物的成本，有利于纳米药物的临床使用。
2、本发明所述方法分别将多酚复合物、药物配制成溶液，在常压、室温下混合后在去离子水或氯化钠水溶液中重组即可形成纳米药物，因而工艺步骤简单，能耗低，适于大规模工业化生产，有助于更好的实现纳米药物的临床转化。
3、实验表明，多酚复合物能与多种药物重组形成纳米药物(见实施例)，因而本发明提供的基于多酚复合物的纳米药物增加了纳米药物的种类。
4、本发明所述方法，混合液中多酚复合物与药物的重量比可以是1:10，因而纳米药物中药物的含量最高可以达到90％左右，有利于提高纳米药物的药效。
5、实验表明，本发明所述方法制备的纳米药物药物捕获率(包封率)可达到80％以上(载药率可达到44％以上)，远高于现有纳米药物的载药率(大多数文献报道的载药率为不高于10％)。
附图说明
图1是实施例1所制备的纳米药物的扫描电镜照片，其中，a图为第一种纳米药物的扫描电镜照片，b图为第二种纳米药物的扫描电镜照片；
图2中的a图是实施例1所制备的第二种纳米药物的紫外吸收光谱图，b图是实施例1所制备的第二种纳米药物的荧光发射光谱图，c图是实施例1所制备的第一、第二、第三、第四种纳米药物的包封率和载药率曲线，d图是实施例1所制备的第一、第二、第三种纳米药物的粒径和分散指数曲线；
图3中的a图是实施例1所制备的第五种纳米药物的紫外吸收光谱图，b图是实施例1所制备的第五种纳米药物的荧光发射光谱图，c图是实施例1所制备的第五、第六、第七纳米药物的包封率和载药率曲线，d图是实施例1所制备的第五、第六、第七种纳米药物的粒径和分散指数曲线；
图4是实施例1所制备的纳米药物的药物释放曲线，其中，a图为实施例1所制备的第二种纳米药物的药物释放曲线，b图为实施例1所制备的第五种纳米药物的药物释放曲线；
图5是实施例1所制备的纳米药物的体外癌细胞抑制效果曲线，其中，a图为实施例1所制备的第一、第二、第三种纳米药物的体外癌细胞抑制效果曲线，b图为实施例1所制备的第五、第六、第七种纳米药物的体外癌细胞抑制效果曲线；
图6是实施例1所制备的第二种纳米药物的体内抗肿瘤实验结果图，其中，a图为肿瘤模型中的小鼠注射不同剂型的药物后肿瘤体积的变化曲线，b图为Dox(盐酸阿霉素)、GCSS/Dox(实施例1所制备的第二种纳米药物相对肿瘤抑制率)的抑制率图，c图为肿瘤模型中的小鼠注射不同剂型的药物后肿瘤变化的照片，d图为肿瘤模型中的小鼠经不同剂型的药物治疗，在治疗结束时肿瘤的实际重量，e图为肿瘤模型中的小鼠经不同剂型的药物治疗，在治疗结束时实验小鼠的脾重量；f图为肿瘤模型中的小鼠经不同剂型的药物治疗，在治疗结束时实验小鼠的脾照片；
图7中的a图是药物紫杉醇的扫描电镜图，图7中的b图是实施例2所制备的第一种纳米药物的扫描电镜图；
图8是实施例2制备的纳米药物与紫杉醇的癌细胞抑制效果图，其中，a图为A549肺癌细胞正常生长的激光共聚焦照片，b图为自由紫杉醇处理的A549肺癌细胞的激光共聚焦照片，c图为实施例2所制备的第一种纳米药物处理A549肺癌细胞激光共聚焦照片，d图为实施例2所制备的第二种纳米药物处理A549肺癌细胞激光共聚焦照片，e图为实施例2所制备的第三种纳米药物处理A549肺癌细胞激光共聚焦照片。
具体实施方式
下面通过实施例并结合附图对本发明所述基于多酚复合物的纳米药物及其制备方法作进一步说明。显然，所描述实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。有必要指出的是下述实施例只是对本发明的进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制。
下述实施例中，所用原料均通过市场购买。
下述实施例中所述冷冻干燥的操作为：先将所得固态产物在-40℃预冻10小时，然后在-40℃～-20℃内每8小时升高5℃进行梯度冷冻干燥，冷冻干燥32小时即得干粉样的纳米药物。
实施例1
本实施例步骤如下：
(1)表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)复合物的制备
原料配比(重量份)及工艺参数见表1，分别将EGCG、甘氨酸和甲醛，EGCG、半胱氨酸和甲醛溶于去离子水中形成两种反应体系，然后将两种反应体系分别在25℃搅拌反应12h，再将所得反应液经离心进行固液分离，并将分离出的固态产物经去离子水洗涤即得到两种纳米复合物EGCG-甘氨酸和EGCG-半胱氨酸；
表1：原料配比(重量份)及工艺参数
Figure BDA0002606253120000051
(2)纳米药物的制备
①将步骤(1)制备的纳米复合物EGCG-甘氨酸和EGCG-半胱氨酸分别用质量浓度30％的乙醇溶解形成浓度为20mg/mL的EGCG-甘氨酸溶液和EGCG-半胱氨酸溶液，将盐酸阿霉素用去离子水溶解形成浓度为10mg/mL盐酸阿霉素溶液；
②按表2所述混合液中纳米复合物与药物的重量比计量步骤①配制的EGCG-甘氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液，以及EGCG-半胱氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成7种混合液；
表2：混合液的组成及混合液中纳米复合物与药物的重量比
混合液编号 混合液组成 混合液中纳米复合物与药物的重量比
第一种 EGCG-甘氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 7.5︰10
第二种 EGCG-甘氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 1.5︰1
第三种 EGCG-甘氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 3︰1
第四种 EGCG-甘氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 6︰1
第五种 EGCG-半胱氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 1.5︰1
第六种 EGCG-半胱氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 3︰1
第七种 EGCG-半胱氨酸溶液和盐酸阿霉素溶液 6︰1
③将氯化钠用去离子水配制成质量浓度0.9％的氯化钠水溶液，以该氯化钠水溶液为组装液，按表3所述混合液与组装液的体积比，在室温、常压下将氯化钠水溶液分别加入步骤②形成的7种混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成7种重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于EGCG复合物的7种纳米药物。
表3：重组体系的组成及混合液与组装液的体积比
重组体系编号 重组体系组成 混合液与组装液的体积比
第一种 表2中的第一种混合液加入氯化钠水溶液 1︰10
第二种 表2中的第二种混合液加入氯化钠水溶液 1︰3
第三种 表2中的第三种混合液加入氯化钠水溶液 1︰2
第四种 表2中的第四种混合液加入氯化钠水溶液 1︰0.5
第五种 表2中的第五种混合液加入氯化钠水溶液 1︰1
第六种 表2中的第六种混合液加入氯化钠水溶液 1︰8
第七种 表2中的第七种混合液加入氯化钠水溶液 1︰6
本实施例所制备的第一种纳米药物(第一种重组体系形成)的扫描电镜照片见图1中的a图，第二种纳米药物(第二种重组体系形成)的扫描电镜照片见图1中的b图。
将本实施例所制备的第二种纳米药物(第二种重组体系形成)用紫外吸收仪检测，其紫外吸收光谱图见图2中的a图，该图表明，纳米药物中含有Dox(盐酸阿霉素)，将本实施例所制备的第二种纳米药物用荧光发射仪检测，其荧光发射光谱图见图2中b图，该图表明，EGCG-甘氨酸复合物和Dox产生了结合。
将本实施例所制备的第一、第二、第三、第四种纳米药物采用标准曲线法用紫外吸收仪检测，它们的包封率和载药率见图2中的c图，从图中可以看出，包封率可达80％，载药率可达44％。
将本实施例所制备的第一、第二、第三种纳米药物采用激光动态光散射仪检测，它们的平均粒径和分散指数见图2中的d图，从图中可以看出，粒径在106-198nm，且具有良好的分散性。
将本实施例所制备的第五种纳米药物(第六种重组体系形成)用紫外吸收仪检测，其紫外吸收光谱图见图3中的a图，该图表明，纳米药物中含有Dox(盐酸阿霉素)，将本实施例所制备的第五种纳米药物用荧光发射仪检测，其荧光发射光谱图见图3中b图，该图表明，EGCG-半胱氨酸复合物和Dox产生了结合。
将本实施例所制备的第五、第六、第七种纳米药物采用采用标准曲线法用紫外吸收仪检测检测，它们的包封率和载药率见图3中的c图，从图中可以看出，包封率可达90％，载药率可达26％。
将本实施例所制备的第五、第六、第七种纳米药物采用激光动态光散射仪检测，它们的平均粒径和分散指数见图3中的d图，从图中可以看出，粒径在152-456nm，且具有良好的分散性。
将本实施例所制备的第二种、第五种纳米药物进行药物释放实验，药物释放介质为含有50％小牛血清的pH值为7.4、5.5的两种PBS缓冲液，将本实施例所制备的第二种、第五种纳米药物分别放入上述两种PBS缓冲液中，在37℃进行药物释放实验，实验结果见图4，从图4可以看出，本实施例所制备的纳米药物可以在模拟血液pH环境有效的释放药物。
将本实施例所制备的第一、第二、第三种纳米药物及第五、第六、第七种纳米药物进行癌细胞抑制实验，所述癌细胞为MCF-7细胞(购于中科院上海细胞库)，在96孔板中，以每孔10000细胞的密度接种MCF-7细胞，贴壁24小时后，用不同浓度的纳米药物处理MCF-7细胞，用cck8试剂盒检测细胞活性，使用Graphpad Prism软件对数据进行统计分析，实验结果见图5，从图5可以看出，本实施例所制备的纳米药物可以有效杀伤肿瘤细胞，载药量越高的药物在体外细胞实验中效果越好。
将本实施例所制备的第二种纳米药物进行抗肿瘤动物实验，以4T1细胞(购自中科院上海细胞库)构建小鼠肿瘤动物模型，将将培养好的4T1细胞悬浮混合在无血清培养基(RPMI 1640)中，然后注射到小鼠右后背部(5×105个细胞/小鼠)形成小鼠肿瘤动物模型，将小鼠肿瘤动物模型分成三组，每组6只。第一组为空白对照组，治疗时注射5％葡萄糖，第二组为第一实验组，治疗时注射Dox(盐酸阿霉素)，第三组为第二实验组，治疗时注射本实施例所制备的第二种纳米药物。当肿瘤体积达到约50mm3左右时，每3天分别给各组小鼠静脉注射不同剂型的药物(Dox相当于每kg小鼠体重5.0mg)。用游标卡尺测量肿瘤的垂直直径，监测肿瘤的生长。计算肿瘤体积(mm3)为V＝(L*W2)/2，其中L、W表示肿瘤的长、宽。每3天测量一次，治疗12天后实验结束，分离小鼠肿瘤组织和脾脏称重，使用Graphpad Prism软件对数据进行统计分析。抗肿瘤动物实验结果见图6，从图6可以看出纳米药物的体内效果优于自由药物盐酸阿霉素。
实施例2
本实施例步骤如下：
(1)将实施例1制备的纳米复合物EGCG-半胱氨酸用质量浓度30％的乙醇溶解形成浓度为10mg/mL的EGCG-半胱氨酸溶液，将紫杉醇用量浓度30％的乙醇溶解形成浓度分别为10mg/mL、20mg/mL和50mg/mL紫杉醇溶液；
(2)按表4所述混合液中纳米复合物与药物的重量比计量步骤(1)配制的EGCG-半胱氨酸溶液和3种不同浓度的紫杉醇溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成3种混合液；
表4：混合液的组成及混合液中纳米复合物与药物的重量比
Figure BDA0002606253120000081
(3)以去离子水为组装液，按混合液与组装液的体积比为1︰5，在室温、常压下将去离子水分别加入步骤(2)形成的3种混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成3种重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于EGCG复合物的3种纳米药物。
本实施例中，药物紫杉醇的扫描电镜图见图7中的a图，从图中可以看出，形态呈针状；所制备的第一种纳米药物的扫描电镜图见图7中的b图，从图中可以看出，呈圆球形纳米粒子，可见EGCG复合物可使紫杉醇纳米化。
将本施例制备的纳米药物与紫杉醇进行癌细胞抑制实验，所述癌细胞为A549肺癌细胞(购于中科院上海细胞库)，将A549肺癌细胞按照每孔50000个细胞接种到24孔玻底板中，贴壁24h后使用DMSO、紫杉醇及本施例制备的第一、第二、第三种纳米药物处理24h。然后使用罗丹明标记的鬼笔环肽对细胞骨架染色，使用Hoechst 33342对细胞核染色，使用激光共聚焦显微镜拍照，实验结果见图8。从图8中的a图可以看出，用DMSO处理的对照中，A549癌细胞正常分裂生长，细胞核是独立单一的。从图8中的b图可以看出，用二甲亚砜(DMSO)溶解的紫杉醇药物(0.5μg/mL)处理后，在同一个细胞中出现了多个核，表明紫杉醇抑制了细胞的正常有丝分裂。从图8中的c、d、e图可以看出，用水分散的本施例制备的第一、第二、第三种纳米药物(0.5μg/mL)处理后，与紫杉醇具有同样的效果。
实施例3
本实施例步骤如下：
(1)间苯三酚复合物的制备
以间苯三酚、半胱氨基酸、甲醛为原料，间苯三酚、半胱氨基酸、甲醛的重量比为10:2:4，将间苯三酚、氨基酸、甲醛溶于去离子水中形成反应体系，然后将反应体系在20℃搅拌反应12h，再将所得反应液经离心进行固液分离，并将分离出的固态产物经去离子水洗涤即得到间苯三酚纳米复合物；
(2)纳米药物的制备
①将步骤(1)制备的间苯三酚纳米复合物用四氢呋喃溶解形成浓度为10mg/mL的间苯三酚复合物溶液，分别将紫杉醇、羟基喜树碱、熊果酸、鞣花酸、槲皮素、曲美替尼、索拉非尼地塞米松、布地奈德、避蚊胺用二甲亚砜配制成浓度为10mg/mL的药物溶液，将盐酸阿霉素用去离子水溶解配制成浓度为10mg/mL盐酸阿霉素溶液；
②按混合液中纳米复合物与药物的重量比为1︰1计量步骤①配制的间苯三酚复合物溶液和各药物溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成10种混合液；
按混合液中纳米复合物与药物的重量比为1︰10计量步骤①配制的间苯三酚复合物溶液和各药物溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成10种混合液；
③以去离子水为组装液，各混合液与组装液的体积比均为1︰5，在室温、常压下将去离子水溶液分别加入步骤②形成的20种混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成20种重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于间苯三酚复合物的20种纳米药物。
实施例4
本实施例步骤如下：
(1)花青素复合物的制备
以原花青素、半胱氨酸、甲醛为原料，原花青素、半胱氨酸、甲醛的重量比为10:4:5，将原花青素、半胱氨酸、甲醛溶于去离子水中形成反应体系，然后将反应体系在20℃搅拌反应12h，再将所得反应液经离心进行固液分离，并将分离出的固态产物经去离子水洗涤即得到原花青素纳米复合物；
(2)纳米药物的制备
①将步骤(1)制备的原花青素纳米复合物用乙腈溶解形成浓度为10mg/mL的原花青素复合物溶液，分别将紫杉醇、地塞米松、布地奈德、避蚊胺用二甲亚砜配制成浓度为10mg/mL的药物溶液；
②按混合液中原花青素纳米复合物与药物的重量比为1︰1计量步骤①配制的原花青素复合物溶液和各药物溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成4种混合液；
③以去离子水为组装液，各混合液与组装液的体积比均为1︰5，在室温、常压下将去离子水溶液分别加入步骤②形成的4种混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成4种重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于原花青素复合物的4种纳米药物。
实施例5
本实施例步骤如下：
(1)单宁酸复合物的制备
以单宁酸、半胱氨酸、甲醛为原料，单宁酸、半胱氨酸、甲醛的重量比为10:5:5，将单宁酸、半胱氨酸、甲醛溶于去离子水中形成反应体系，按反应体系总体积的0.1％添加三乙胺，然后将反应体系在20℃搅拌反应12h，再将所得反应液经离心进行固液分离，并将分离出的固态产物经去离子水洗涤即得到单宁酸纳米复合物；
(2)纳米药物的制备
①将步骤(1)制备的单宁酸纳米复合物用乙腈溶解形成浓度为10mg/mL的单宁酸复合物溶液，分别将紫杉醇、避蚊胺用二甲亚砜配制成浓度为10mg/mL的药物溶液；
②按混合液中单宁酸纳米复合物与药物的重量比为1︰1计量步骤①配制的单宁酸复合物溶液和各药物溶液，并在室温、常压下将它们分别混合均匀，形成2种混合液；
③以去离子水为组装液，各混合液与组装液的体积比均为1︰5，在室温、常压下将去离子水溶液分别加入步骤②形成的2种混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成2种重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于单宁酸复合物的2种纳米药物。
实施例6
本实施例步骤如下：
(1)EGCG复合物的制备
以EGCG、甲醛为原料，EGCG、甲醛的重量比为10:4，将EGCG、甲醛溶于去离子水中形成反应体系，并用盐酸将反应体系调整为pH＝1，然后将反应体系在20℃搅拌反应12h，再将所得反应液经离心进行固液分离，并将分离出的固态产物经去离子水洗涤即得到EGCG纳米复合物；
(2)纳米药物的制备
①将步骤(1)制备的EGCG纳米复合物用乙醇溶解形成浓度为10mg/mL的EGCG复合物溶液，将紫杉醇用二甲亚砜配制成浓度为10mg/mL的紫杉醇溶液；
②按混合液中EGCG纳米复合物与药物的重量比为1︰1计量步骤①配制的EGCG复合物溶液和紫杉醇溶液，并在室温、常压下将它们混合均匀，形成混合液；
③以去离子水为组装液，混合液与组装液的体积比均为1︰5，在室温、常压下将去离子水加入步骤②形成的混合液中并通过搅拌使混合液在组装液中分散均匀形成重组体系，然后静置5min即完成重组形成纳米药物，之后离心分离(10000转/分钟)，再将分离出的固态产物用去离子水洗涤后经冷冻干燥即得基于EGCG复合物的纳米药物。

Claims (5)

1.基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，其特征在于工艺步骤如下：
(1)原料液的配制
原料液为多酚复合物溶液和药物溶液，多酚复合物溶液由多酚复合物和有机溶剂配制而成，药物溶液由药物和有机溶剂或去离子水配制而成；
(2)原料液的混合
将步骤(1)配制的多酚复合物溶液和药物溶液在室温、常压下混合均匀形成混合液，多酚复合物溶液、药物溶液按所述混合液中多酚复合物与药物的重量比为(10～1):(1～10)计量；
(3)纳米药物的形成、分离、洗涤与干燥
在室温、常压下将步骤(2)形成的混合液加入组装液中，或者将组装液加入步骤(2)形成的混合液中并使混合液在组装液中分散均匀形成重组体系，然后静置至少5min即完成重组形成纳米药物，之后进行固液分离，再将分离出的固态产物洗涤、干燥即得基于多酚复合物的纳米药物；
所述组装液为去离子水或质量浓度0.5％～5％的氯化钠水溶液，所述混合液与组装液的体积比为1:(0.5～10)；
所述多酚复合物为EGCG-甘氨酸复合物或EGCG-半胱氨酸复合物。
2.根据权利要求1所述基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，其特征在于所述药物为水溶性药物或水难溶性药物。
3.根据权利要求2所述基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，其特征在于所述水溶性药物包括盐酸阿霉素、盐酸苯达莫司汀、盐酸平阳霉素、硫酸博莱霉素、甲氨蝶呤二钠盐或盐酸伊立替康；
所述水难溶性药物包括紫杉醇、羟基喜树碱、熊果酸、鞣花酸、槲皮素、白藜芦醇、阿加曲班、5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮杂胞嘧啶核苷、雷帕霉素、曲美替尼、索拉非尼、阿瑞匹坦、非若贝特、甲地孕酮、替扎尼定、地塞米松、布地奈德、避蚊胺，吲哚绿染料IR 780碘化物或二氢卟吩e 6。
4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述基于多酚复合物的纳米药物的制备方法，其特征在于配制多酚复合物溶液、药物溶液的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃中的一种。
5.权利要求1至4中任一权利要求所述方法制备的基于多酚复合物的纳米药物。
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