CN111838031A - 一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法 - Google Patents

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田永胜
王林娜
李振通
李子奇
陈帅
黎琳琳
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    • A01K61/10—Culture of aquatic animals of fish
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    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Abstract

本发明公开了一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，选择体重在20kg以上亲鱼，放入工厂化流水池中培育，10月份在亲鱼背部肌肉中按体重植入17α‑甲基睾酮缓释胶条，对植入后的亲鱼进行环境温度调控，通过人为对温度控制实现对石斑鱼性别转化。本发明借助调整环境温度性逆转技术和埋植雄性激素缓释胶条对雌性蓝身大斑石斑鱼进行性别转化操作，解决了因蓝身大斑石斑鱼雄性亲鱼产精量少而阻碍生产进行的问题，极大地提高了生产力，促进了蓝身大斑石斑育种工作的进行。

Description

一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法
技术领域
本发明涉及养殖领域，具体地说，是涉及一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法。
背景技术
蓝身大斑石斑鱼，Epinephelus tukula(Morgans,1959)，是鮨科石斑鱼属的一个物种。蓝身大斑石斑鱼是海中大型鱼之一，通常生活在热带地区，是石斑鱼中的大型品种之一。广泛分布于印度-西太平洋区，西起非洲东岸、红海，北至日本，南至澳洲，我国南部海域、台湾北部及澎湖海域有分布。身体为白色到灰色，全身覆盖着大块的黑斑，在5到150米的深度海水中都有分布，蓝身大斑石斑鱼生长快、肉质鲜美，使它成为人工养殖和育种的优选对象，近年来人们开始对其人工繁育技术等方面进行研究，但相关的研究报道相当有限。
蓝身大斑石斑鱼人工培育亲鱼群体中雄性数量相当有限，在体重达到20kg左右时才开始性成熟，而且雄性精液量少，加之人工繁殖和苗种培育技术还未成熟，因此人工繁殖和育苗受到很大的限制，目前在国际市场上养殖量相当有限。对蓝身大斑石斑鱼的性别转化技术进行研究，可提高成熟个体的雄性转化率和产精量，从而提高该品种的繁育率，石斑鱼属于雌雄同体、雌性先熟的鱼类，为人工诱导促使其性别转化提供了可能性。但至目前对蓝身大斑石斑鱼性别转化技术还未得到有效解决，因此，开发一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法仍然是迫切需要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种转化操作简单、实用方便的蓝身大斑石斑鱼性别转化方法的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明包括以下步骤：
A亲鱼群体培育：选择体重在20kg以上亲鱼，放入工厂化流水池中培育；
B雄性激素缓释胶条埋植：10月份在亲鱼背部肌肉中按体重植入17α-甲基睾酮缓释胶条。
C对植入后的亲鱼进行环境温度调控，通过人为对温度控制实现对石斑鱼性别转化。
进一步地，在工厂化流水池中，培育密度1尾/2-3m3，水流量3-4m3/h，养殖温度18-25℃。
进一步地，采用自然光照，水流交换量4-6m3/h，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重3-5％，并在饵料中加2-3％Vc、1-2％VE。
进一步地，所述17α-甲基睾酮缓释胶条的剂量为5-10mg/kg；
进一步地，所述环境温度调控的方法包括初期培育水温为24℃，平均每5-10天降温0.5-1.0℃,至12月份水温降低到18-20℃；之后逐渐提高温度，平均每10天提高1℃，到来年3月份温度提高到24-25℃。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明借助调整环境温度性逆转技术和埋植雄性激素缓释胶条对雌性蓝身大斑石斑鱼进行性别转化操作，解决了因蓝身大斑石斑鱼雄性亲鱼产精量少而阻碍生产进行的问题，极大地提高了生产力，促进了蓝身大斑石斑育种工作的进行。
(2)本发明能够显著的提高了亲鱼的雄性比例，自然养殖群体雄性为8.75％，诱导转化的雄鱼提高35.94％。性别转化稳定，不易反复。
(3)本发明药品用量低，平均用药量为5mg/kg，对亲鱼的刺激性小，而在点带石斑鱼上用药品达到了35mg/kg左右，与投喂法相比，激素不会污染水体环境，绿色环保，技术操作方便，生产人员易于掌握，对鱼体伤害小、性别转化成功率高。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明，本发明的方式包括但不仅限于以下实施例。
实施例1
亲鱼群体的培育：选择体重在20kg以上亲鱼，在工厂化水泥池中培育，培育密度1尾/2-3m3，水流交换量4m3/h，水中溶氧量7-10mg/L，盐度28-31‰，养殖温度18-25℃，采用自然光照，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重3％左右。
雄性激素缓释胶条埋植：在10月份开始对亲鱼进行激素诱导处理，首先利用10mg/m3MS-222麻醉处理亲鱼，测量个体重，在背部肌肉中植入电子标记，记录标记和体重，按体重在北部肌肉中植入17α-甲基睾酮(MT)缓释胶条，平均剂量为5mg/kg。
亲本培育和环境调控：将处理后的亲鱼按1尾/2-3m3密度放入工厂化流水池中培育，水流交换量4-6m3/h，水中溶氧量7-10mg/L，盐度28-31‰，采用自然光照，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重的3-5％，并在饵料中加2-3％Vc、1-2％VE。初期培育水温为24℃，之后逐渐降低培育水温，平均每5-10天降温0.5-1.0℃,至12月份水温降低到18-20℃；之后逐渐提高温度，平均每10天提高1℃，到来年3月份温度提高到24-25℃。
成熟雄鱼检查：性别诱导处理后，1.5-2月对亲鱼进行一次发育检查，将亲鱼利用10mg/m3MS-222麻醉处理，利用挖卵器从生殖孔插入挖取性腺组织，采用压片法制作载玻片，在显微镜下检测是否出现精子细胞。
精子采集和检测：处理5个月后，选取成熟较好的雄性亲鱼，利用MS-222麻醉，处理剂量为10mg/m3，将麻醉后亲鱼置于产床，用吸水纸揩干生殖孔周围水分，从生殖孔前方15-20cm处向后挤压，精液从生殖孔排出。采集精液注入2mL塑料管，利用显微镜检测精子活力达到85-90％。利用性别转化雄鱼精子与棕点石斑鱼卵杂交培育鱼苗，杂交受精率达74.94％；发育率达55.11％，培育鱼苗达到300万尾。
实施实例2：蓝身大斑石斑鱼性别诱导转化效果
2014-2019年本课题组先后从三亚引进蓝身大斑石斑鱼80多尾，体重在20-41kg，全长在98-124cm，在工厂化条件下，培育在5×5×3m的三个水泥池中，水流交换量4m3/h，利用充气泵和气石供氧，氧气含量7-10mg/L，养殖温度18-25℃，采用自然光照，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重3％左右。在2019年10月3日、10月14日、11月1日前后三次分别对30尾、16尾，27尾雌亲鱼进行激素注射处理，首先在每条鱼的背部肌肉中植入电子标记，记录标记号，测量体重和全长。然后在亲鱼的背前部肌肉中埋植17α-甲基睾酮(MT)缓释胶条，平均剂量为5mg/kg。在之后的培育过程中对水温进行调控，10月份培育水温为24℃，之后逐渐降低培育水温，平均每5-10天降温0.5-1.0℃,至12月份水温降低到18-20℃；之后逐渐提高温度，平均每10天提高1℃，到来年3月份温度提高到24-25℃。在培育过程中每1.5-2个月对亲鱼进行性腺发育检查，挖取性腺组织，采用压片法在显微镜下检查性腺细胞发育情况。至3月20日之后对处理亲鱼进行检查和挤压腹部采精，统计性别转化亲鱼数量和每尾鱼的采精量。
表1蓝身大斑石斑鱼性别诱导转化效果
Figure BDA0002646894720000041
实施实例3：蓝身大斑石斑鱼诱导转化与自然转化比较
2019年在养殖公司对80多尾蓝身大斑石斑鱼亲鱼采用自然培育的方法，培育在5×5×3m的三个水泥池，培养条件为：水流交换量4m3/h，利用充气泵和气石供氧，氧气含量7-10mg/L，养殖温度18-25℃，温度调控方法与实例1相同，采用自然光照，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重3％左右。2019年10月检查亲鱼发育情况，发现其中自然转化雄鱼7尾，自然转化率为8.75％，因此未对7尾雄鱼进行雄性激素诱导处理。对其中73尾雌鱼体内植入17α-甲基睾酮进行诱导，2020年3月20日以后检查发育情况，发现在雌鱼体内埋植17α-甲基睾酮111.11-145.00mg，平均5mg/kg，雄鱼诱导转化率达35.94％。
实施实例4：冷冻保存性别转化鱼类精子与棕点石斑鱼卵受精培育鱼苗
选择性别诱导转化成熟雄鱼，利用MS-222麻醉，处理剂量为10mg/m3，将麻醉后亲鱼置于产床，用吸水纸揩干生殖孔周围水分，从生殖孔前方15-20cm处向后挤压，精液从生殖孔排出。及时利用5mL吸管吸取精液，每条鱼的精液单独保存，分别注入2mL的冷冻管中，每管中注入0.5-1mL精液。先利用牙签醮取新鲜精子涂片、滴加一滴海水激活，置于10倍显微镜下检测精子活力，读取视野中运动精子比率，精子活力在80-90％。然后利用精子冷冻保存液(15％葡萄糖+8.0％NaCl+0.65％KCl+15.0％1,2-丙二醇)以1:1-1:2的比例稀释精液，在液氮中冷冻保存。在棕点石斑鱼产卵季节，将冷冻保存的精子运输到海南某养殖公司，分别于3月24到3.26日采集棕点石斑鱼成熟卵子三批，共计46500g，取冷冻保存精子在37℃水浴中解冻，与采集的卵子受精。平均受精率74.94％；发育到肌节胚期的平均发育率为55.11％。培育1cm以上鱼苗数量约300万尾(表2)。
表2性别转化蓝身大斑石斑鱼冷冻精子与棕点石斑鱼大量受精
Figure BDA0002646894720000051
Figure BDA0002646894720000061
实施实例5：利用性别转化蓝身大斑石斑鱼精子与棕点石斑鱼杂交建立家系
选择成熟良好的棕点石斑鱼亲鱼4尾，分别采集成熟卵子，采集卵量如表3，分别与2749、6474号雄性的冷冻精子受精，同时建立棕点石斑鱼纯系做对照。三个家系平均受精率为65.89％，平均发育率为37.05％，培育1cm以上家系鱼苗15万尾左右。棕点石斑鱼纯系受精率80.00％，发育率81.25％，1cm以上纯系鱼苗约10万。
表3棕点石斑鱼(♀)×蓝身大斑石斑鱼(♂)家系的建立
Figure BDA0002646894720000062
Figure BDA0002646894720000071
最后应当说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换，而未脱离本发明精神和范围的任何修改或者等同替换，其均应涵盖在本发明的权利要求保护范围之内。

Claims (5)

1.一种蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、亲鱼群体培育：选择体重在20kg以上亲鱼，放入工厂化流水池中培育；
B、雄性激素缓释胶条埋植：10月份在亲鱼背部肌肉中按体重植入17α-甲基睾酮缓释胶条；
C、对植入后的亲鱼进行环境温度调控，通过人为对温度控制实现对石斑鱼性别转化。
2.如权利要求1所述蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，其特征在于，在工厂化流水池中，培育密度1尾/2-3m3，水流量3-4m3/h，养殖温度18-25℃。
3.如权利要求1所述蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，其特征在于，采用自然光照，水流交换量4-6m3/h，每天投喂野生小鱼为亲鱼体重3-5％，并在饵料中加2-3％Vc、1-2％VE。
4.如权利要求1所述蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，其特征在于，所述17α-甲基睾酮缓释胶条的剂量为5-10mg/kg。
5.如权利要求1所述蓝身大斑石斑鱼性别转化方法，其特征在于，所述环境温度调控的方法包括初期培育水温为24℃，平均每5-10天降温0.5-1.0℃,至12月份水温降低到18-20℃；之后逐渐提高温度，平均每10天提高1℃，到来年3月份温度提高到24-25℃。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110521641A (zh) * 2019-10-15 2019-12-03 中国水产科学研究院黄海水产研究所 一种生长快石斑鱼的人工杂交育种方法

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